JPH0248600A - 新規な降圧利尿性ペプチド - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 イ９発明の目的 産業上の利用分野 本発明は、強い利尿作用、ナトリウム利尿作用、血圧降
下作用などを有する新しいペプチドに関する。

従来技術 ヒトの心房には強力なナトリウム利尿作用、血圧降下作
用を有するポリペプチド［ｈｕｍａｎ　ＡｔｒｉａｌＮ
ａｔｒｉｕｒｅｔｉｃ　Ｐｏ１ｙｐｅｐｔｉｄｅ　＝　
ｈＡＮＰコの存在することが知られており、現在までに
α、β、７の３種類のペプチドが単離きれ、構造決定き
れている。

この中、α型のペプチド［以下、α−ｈＡＮＰというコ
は、ス：用、松尾らにより最初に単離構造決定きれたも
ので、下記のアミノ酸配列を有する［　Ｂｉｏｃｈｅｍ
、　Ｂｉｏｐｈｙｓ、　Ｒｅｓ、　Ｃｏｍｍｕｎ、　１
１８．１３１（１９８４）　］。

（以下余白） コ＝　　　　０ ０　　　ψ α−ｈＡＮＰの利尿作用は、ラットを用いた生物試験で
現在降圧利尿剤として繁用きれているフロセミド（ｆｕ
ｒｏｓｅｍｉｄｅ　）の約１，５００倍にも達するとい
われている。

β型のペプチド［以下、β−ｈＡＮＰというコは、α−
ｈＡＮＰの７位、２３位のシスティンＳ−Ｓ結合が開裂
して、もう−分子のα−ｈＡＮＰと逆並性に結合したα
−ｈＡＮＰの二量体であり、下記のアミノ酸配列で示き
れる［検層、寒川、特開昭６０−１８４０９８　；　Ｎ
ａｔｕｒｅ、　３１３．３９７（１９８５）　コ　。

β−ｈＡＮＰの利ズ作用は、α型あるいは７型と異なり
作用持続性であるとされている。

Ｚ型のペプチド［以下、７−ｈＡＮＰというコはα−ｈ
ＡＮＰの前駆体で、アミノ酸１２６個からなり貯蔵型Ａ
ＮＰとみなされている［検層、寒川、林、特開昭６０−
２６０５９６　：　Ｎａｔｕｒｅ、　３１３．３９７（
１９８５）　］。

その他心房ペプチドに関する特許出願としては特開昭６
０−１９２５９８　（心房ペプチド）、特開昭６０−２
１４７９７、特開昭６２−２８３９９６または特開昭６
３−１１２５９８（新規な心房ペプチド）、特開昭６Ｏ
−２６２５９２（新規ＤＮＡおよびその用途）、特開昭
６１−７２９８　（新規なペプチド及びこれを有効成分
とする医薬）などが公開されている。

発明が解決しようとする問題点 従来高血圧症は原因疾患の明らかな高血圧と原因疾患の
明らかでない高血圧に大別されてきた。

前者は二次性高血圧症として分類し、主に腎障害による
もの、内分泌性疾患、妊娠中毒、大動脈縮重症、中枢神
経障害などに原因があるものを包括Ｃている。他方、後
者の病因が明らかでない高血圧を本態性高血圧症として
分類し、全高血圧症の８０〜９０％がこの分類に入れら
れてきた。

二次性高血圧症の場合は、その原因疾患を治療Ｃること
で高血圧症状を改善することができるが、深田不明の本
態性高血圧症の場合には、対症療法として、例えば降圧
利尿剤、血管拡張剤などを投与することで問題の解決が
なされてきた。しかるに、最近上述の心房ペプチド類が
心疾患あるいは本態性高血圧の病因に関係ある物質とし
て注目を集め、医薬としての適応可能性について広範な
研究が進められている。しかし、これまでに単離あるい
は合成された心房ペプチドまたはその類似体は、作用の
持続性、安定性、投与形態などに問題があり、実用化に
至り得るペプチドは未だ知られていない。

口９発明の構成 問題点を解決するための手段 本発明は、上記の問題を解決するために種々合成きれた
心房ペプチド類似体の中、下記式（１）で示されるペプ
チド及びその塩が強力な降圧利尿作用を示し、且つ作用
の持続性にも優れていることの発見にもとづき完成され
たものである。

弐■で示されるペプチドは、基本的にはα−ｈＡＮＰの
二量体であるが、その架橋が二塩基性カルボン酸によっ
て形成されていること、また、α−ｈＡＮＰの１位ない
しは６位までの配列が欠損していてもよいことに特徴が
ある。

ペプチド（Ｉ）はβ−ｈＡＮＰの特性を備え、しかもそ
の合成は、β−ｈＡＮＰに比へて遥かに容易である。

（以下余白） 式： ％式％ ［式中、Ｘは結合手またはＳｅｒ、　５ｅｒ−５ｅｒ、
Ａｒｇ−５ｅｒ−５ｅｒ、　Ａｒｇ−Ａｒｇ−５ｅｒ−
５ｅｒ、　Ｌａｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−５ｅｔ−５ｅｒも
しくはＳｅｒ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−５ｅｒ−５ｅ
ｒ；ｎは２ないし１０の整数を表わすコペブチド（Ｉ）
における構成アミノ酸はすへてＬ−型であり、その略号
は下記のこと＜ＩＵＰＡＣ（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａ
ｌ　Ｕｎｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｕｒｅ　ａｎｄ　Ａｐｐｌｉ
ｅｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙ）　　　　Ｉ　　Ｕ　　Ｂ　　
（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　　Ｕｎｉｏｎ　　ｏｆ
Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　）の命名規約に従って記載
した。

Ａｌａ　：アラニン Ａｒｇ　：アルギニン Ａｓｎ　：アスパラギン Ａｓｐ　：アスパラギン酸 Ｃｙｓ　ニジスティン Ｇｌｎ　：グルタミン ｃｔｙ　ニゲリシン １１ｅ：イソロイシン Ｌｅｕ　：ロイシン Ｍｅｔ　：メチオニン Ｐｈｅ　：フェニルアラニン Ｓｅｒ　：セリン Ｉｙｒ　：チロシン 式Ｉで表わされる本発明ポリペプチドおよびその塩は、
通常のペプチド合成法に従って、アミン酸を１個ずつ縮
合してペプチド鎖を延伸していく合成法または２個もし
くはそれ以上のアミノ酸から成るフラグメントをカップ
リングさせる方法あるいはこれらの組合わせなどにより
製造することができる。

２個のアミノ酸間の縮合、アミノ酸とペプチド間の縮合
あるいはペプチドとペプチドとの縮合は、通常の縮合法
、例えばアンド法、混合酸無水物法、カルボンイミド（
ジシクロヘキシルカルボンイミド チルアミンプロピル）カルボジイミド（　ＥＤＣ　）な
ど）法、、ＤＣＣ−ＨＯＢｔ（　Ｎ−ヒドロキシベンゾ
トノアゾール）法．　ＥＤＣ−ＨＯＢｔ法、活性エステ
ル法（ｐ−ニトロフェニルエステル法、Ｎ−ヒドロキシ
フハク酸イミド（　ＨＯＳｕ　）エステル法、シアンメ
チルエステル法など）、ウッドワード（　Ｗｏｏｄｗａ
ｒｄ　）試薬に法、カルボニルジイミダゾール法、酸化
還元法などに従って行うことができる。これらの縮合反
応は溶液法あるいは固相合成法のいずれの方法により行
ってもよい。固相法によりペプチド鎖を延伸する場合に
は、Ｃ末端アミノ酸を不溶性担体に結合させて行う。不
溶性担体としては、Ｃ末端アミノ酸のカルボキシ基と反
応して着脱可能な結合を生じるものであればいずれも使
用可能であって、例えばハロメチルベンゼン型樹脂（ク
ロロメチルベンゼン型樹脂、ブロモメチルベンゼン型樹
脂）、ヒドロキシメチルベンゼン型樹脂または４−置換
フェニルアセトアミドメチル（ＰＡＭ）型樹脂などが使
用できる。

ペプチド合成の常法として、アミノ酸のα位およびω位
の側鎖アミノ基およびカルボキシ基は必栗に応じ保護／
脱保護することが必要である。適用可能なアミン基の保
護基としては、例えばベンジルオキシカルボニル（Ｚと
略称）、２．６−ジクーロロペンジルオキシカルポニル
（Ｚ（Ｃ１，））、　４−ニトロベンジルオキシカルボ
ニル（Ｚ（ＮＯ，））、４−メトキシベンジルオキシカ
ルボニル ｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ｔ−アミルオキシ
カルボニル（　Ａｏｃ　）　、インボルニルオキシカル
ボニル、アダマンチルオキシカルボニル、２−（４−ビ
フェニル）−２−プロピルオキシカルボニル ル ル ル、ホルミル、２−ニトロフェニルスルフェニル（　Ｎ
ＦＳ　）　、ジフェニルホスフィノチオイル（Ｐｐｔ）
、ジメチルホスフィノチオイル（Ｍｐｔ）などが例示で
きる。

カルボキシ基の保護基としては、例えばベンジルエステ
ル（　ＯＢｚｌ　）　、４−二トロベンジルエステル（
ＯＢｚｌ（Ｎｏｔ　））、シクロヘキシルエステル（　
ＯｃＨｘ）、ｔ−ブチルエステル（ＯＢｕ’）、４−ピ
リジルメチルエステル（　ＯＰｉｃ　）　、フェナシル
エステル（　ＯＰａｃ　）、２，２．２−トリクロロエ
チルエステル（　ＯＴｃｅ　）、などが例示できる。

本発明ペプチドの合成途上、側鎖にアミン基およびカル
ボキシル基以外の官能基を有する特定アミノ酸、例えば
アルギニン、システィン、セリンなどは必要に応じて適
当な保護基で保護しておくのが望ましい。例えばアルギ
ニンのグアニジノ基はニトロ、ｐ−トルエンスルホニル
（　Ｔｏｓ　）　、ベンジルオキシカルボニル（Ｚ）、
アダマンチルオキシカルボニル、４−メトキシベンゼン
スルホニル、４−メトキシ−２，６−シメチルーベンゼ
ンスルホニル（Ｍｄｓ）、１，３．５−トリメチルフェ
ニルスルホニル（　Ｍｔｓ　）など、システィンのデオ
ール基はベンジル（Ｂｚｌ）、　　４−メトキシベンジ
ル（Ｍｏｂ）、トリフェニルメチル（　Ｔｒｉ　）、ア
セトアミドメチル（　Ａｃｍ　）、エチルカルバモイル
（Ｅｃ）、４−メチルベンジル、２，４．６−トリメチ
ルベンジル（Ｔｍｂ）などで、またセリン、チロシンの
水酸基はベンジル（Ｂｚｌ）、ｔ−ブチル、アセチル、
テトラヒドロピラニル、２．６−ジクロルベンジル（Ｄ
ｃｂ）などで保護するとよい。

以下に本発明ペプチド（Ｉ）製造の一例として下記の反
応工程式に従い、具体的に説明する。

（以下余白） 反応工程式 ％式％（） ［式中、Ｘおよびｎは前記と同義であり、Ｒ，およびＲ
，はアミノ保護基、Ｒ，およびＲ４はチオール保護基、
Ｒ６はヒドロキシ保護基、Ｒｓはカルボキシ保護基をそ
れぞれ表わす。、］ （以下余白） 上記工程において、ＲｏおよびＲ１で示きれるアミノ保
護基の好ましいものとしては、Ｂｏｃ、　Ａｏｃ、Ｂｐ
ｏｃ、　ＺＸＺ（ＯＭｅ）、Ｆｍｏｃ、　Ｍｓｃなどが
ある。Ｒ１およびＲ４で示されるチオール保護基の好ま
しいものとしては、Ｍｏｂ、　Ａｃｍ、　Ｔｒｉなどが
挙げられる。Ｒ。

で示されるヒドロキシ保護基の好ましいものとしては、
Ｄａｂ、　Ｂｚｌなどが好ましい。Ｒ１はＣ末端アミノ
酸の保護基であり、Ｂｚｌ、Ｐａｃ、　Ｔｅａなどが好
ましい。

７位（α−ｈＡＮＰのアミノ酸配列順位で示す）のシス
ティンをＮ末端とするペプチドＶと２３位のシスティン
を例えばＣｙｓ（Ｍｏｂ）として含むペプチド■とを縮
合させてペプチド■を得る。縮合の方法はカルボジイミ
ド／添加剤法、例えばＥＤＣ／　ＨｏＢｔ法に従って行
うことができる。ＥＤＣ／ＨＯＢｔ法による縮合反応は
、一般にペプチド合成に使用する溶媒、例えばジメチル
ホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭ
ＳＯ）、ヘキサメチルリン酸トリアミド（）ＩＭＰＡ　
）などの溶媒、あるいはそれらの混合物中に、Ｃ末端遊
離のペプチドＶ及びＮ末端遊離のペプチド■を溶かし、
これにＨＯＢｔ及びＥＤＣを加えて０℃附近（約−５〜
５℃）で１〜７２時間反応させる、あるいは室温附近（
約１０〜３５℃）で１〜２４時間反応せしめることによ
り行う。

この縮合によって保護α−ｈＡＮＰ（７−２８）を得る
ことができる。

ａ−ｈＡＮＰ（ｍ−２８）（ｍは工ないし６の整数）を
得たい場合には、保護α−ｈＡＮＰ（７−２８）のＮ末
端アミノ保護基を除去し、あらかじめＣ末端カルボキシ
を活性化した保護α−ｈＡＮＰ（ｍ−６）と縮合せしめ
るとよい。この工程での縮合反応はアジド法によって行
うのが好ましく、例えば、少なくともαアミノ基を保護
したα−ｈＡＮＰ（ｍ−６）−ヒドラジドをクルチウス
（Ｃｕｒｔｉｕｓ　）法［酸性溶液中で亜硝酸ナトリウ
ムと反応きせる；　　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｒｅａｃｔｉｏ
ｎｓ、第３巻、ｐ３３７コあるいはルーデインガー（Ｒ
ｕｄｉｎｇｅｒ　）法［無水溶媒中亜硝酸アルキル（例
えば亜硝酸イソアミル）と反応させる；　Ｃｏ１１２ｃ
ｔ、　Ｃｚｅｃｈ、　Ｃｈｅｍ。

Ｃｏｍｍｕｎ、、　　２６　、２３３３　（１９６１）
コによりアジドとした後、上記のＮ末端遊離のα−ｈＡ
ＮＰ（７−２８）と反応せしめる。縮合反応は上記のペ
プチド合成常用の溶媒中、低温（−１０℃ないし＋１０
’Ｃ）で、中和量の塩基の存在下に行う。塩基としては
トリエチルアミン、トリブチルアミン、ジイソプロピル
エチルアミン、ジメチルアニリン、ピリジン、ピコリン
、Ｎ−メチルモルホリンなどの有機塩基を使用するのが
好ましい。

このようにして得た保護ペプチド■を脱保護反応、次い
でシスティン間のジスルフィド結合形成反応に付すこと
により、ペプチド■を得ることができる。

脱保護反応は、アミン保護基が例えばＢｏａなどの場合
は温和な酸処理（ＴＦＡ、　ＨＣＯＯＨ）により、また
ベンジルオキシカルボニル系保護基ＣＺ、Ｚ（Ｃ１）＊
、Ｄａｂ、　Ｚ　（Ｎｏｔ　）、］の場合はパラジウム
触媒による接触還元で、また、Ｆｍｏｃ、　Ｍｓｃなど
の場合はピペリジン、ジエチルアミンなどで処理するこ
とにより脱離することができる。

カルボキシ保護基が、例えばＢｚｌの場合はパラジウム
触媒による接触還元により、Ｐａｃならば亜鉛／酢酸処
理またはパラジウム触媒上接触還元により、またＴｃｅ
ならば亜鉛／酢酸処理によりそれぞれ脱離することがで
きる。

また、保護基は上記のように個々に脱離させてもよいが
、フン化水素処理を行なえば、Ｆｍｏｃ。

Ｍｓｃ、　Ａｃｍなどを除くほとんど全ての保護基を一
挙に除去することができる。

ジスルフィド結合形成反応は、緩和な酸化反応、例えは
、空気酸化またはヨウ素処理などにより容易に達成され
る。

次いで、丘で得られたペプチド■を二塩基性カルボン酸
の活性エステルとカップリングさせて、目的のベブチド
ニ量体■を得る。

本工程に用いる二塩基性カルボン酸としては、フハク酸
、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸、ズベリン酸、
アゼライン酸、セバシン酸、ウンデカンニ酸またはドデ
カンニ酸などを挙げることができる。

二塩基性カルボン酸の活性エステルとしては、例えば、
Ｎ−ヒドロキシフタルイミドエステル、Ｎ−ヒドロキシ
コハク酸イミドエステルなどを挙げることができる。

活性エステルとペプチド■との縮合反応は、ペプチド合
成における活性エステル法の常法に従って行なうことが
できる。

上記各工程における反応生成物および最終目的物は、ペ
プチドの常套的分離手段、例えば抽出、再結晶、クロマ
トグラフィー（ゲル濾過、イオン交換、分配、吸着、逆
相）、電気泳動、交流分配などにより単離精製すること
ができる。

なお、式Ｉで示されるペプチドの塩としては、塩酸塩、
臭化水素酸塩、硝酸塩、硫酸塩、酢酸塩、リンゴ酸塩、
ギ酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩な
どの無機もしくは有機の酸付加塩、あるいはナトリウム
塩、カリウム塩、カルシウム塩などの金属塩、アンモニ
ウム塩、トノエチルアミン塩などのアンモニウム塩もし
くはアミン塩などが例示される。

また、上記工程で使用されるそれぞれの原料ペプチド類
は、特開昭６３−１１２５９８または特開昭６２−２８
３９９６の記載に従って調製することができる。

以下に本発明目的化合物の製造法につき実施例及び参考
例により具体的に説明するが、これらは本発明を限定す
るものではない。

なお以下の実施例および参考例で使用する保護基の略号
はそれぞれ下記の意味を有する。

Ｂｏａｓｔ−ブトキシカルボニル Ｂｚｌ：ベンジル Ｄａｂ：　２　、　６−ジクロロベンジルＭｏｂ：４−
メトキシヘンシル Ｔｏｓニドシル （以下余白） 実施例１ （１）　　スペリン酸Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミドエ
ステル　１ スペリン酸（３．４ｇ，２０ｍｍｏりを酢酸エチル（３
０ｍｌ）−ジオキサン（３０ｍりーＮ，Ｎージメチルホ
ルムアミド（以下ＤＭＦと略す）（１０ｍｌ）に溶かし
、水冷下にＮ−ヒドロキシフハク酸イミド（５．５ｇ、
４８ｍｍｏ２）およびジシクロヘキシルカルボジイミド
（９．９ｇ、４８ｍｍｏｆ）を加える。４℃で４８時間
反応させた後、不溶物を濾去する。濾液を減圧濃縮し、
残渣を酢酸エチル−石油エーテルから再結晶して５．５
ｇを得る。

ｍ．ｐ．１７１〜１７１．５℃。

（　２　）　　Ｂｏｃ−Ｃｙｓ（Ｍｏｂ）−Ｐｈｅ−Ｇ
ｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｍｅｔ−Ａｓｐ（Ｏ
Ｂｚｌ　）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ　）、−Ｉ　１ｅ−Ｇｌｙ
−Ａｌａ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ　（　Ｂｚ　１　）−Ｇ　ｌ
ｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ’−Ｃｙｓ　（Ｍｏｂ　）−Ａｓｎ
−Ｓｅｒ　（Ｂｚ　１　）　−Ｐｈｅ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ
）−Ｔｙｒ（Ｄｃｂ）−０Ｂｚｌ　　２Ｂｏｃ−Ｃｙｓ
（Ｍｏｂ）−Ｐｈａ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ
　）−Ｍｅｔ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）
−１１ｅ−Ｇｌｙ−ＯＨ（　９　１　８　ｍ　ｇ、０、
５３ｍｍｏり）をＤＭＦ（　ｔ　ｔｍｉ！　’）に溶か
し、Ｎ−ヒドロキシフハク酸イミド（７４ｍｇ、０。６
４ｍｍｏ１２）を加えた後、水冷下にジシクロへキシル
カルボジイミド（１３２ｍｇ，０．６４ｍｍｏ＋２）を
加える。７時間攪拌した後、不溶物を濾去して活性エス
テル溶液を得る。一方、Ｂｏａ−Ａｌａ−Ｇｉｎ−Ｓｅ
ｒ（　Ｂｚｌ　）−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ　
（Ｍｏｂ　）−Ａｓｎ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｈｅ−Ａ
ｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｄｃｂ＞−０Ｂｚｌ（　１、
１２ｇ，０．５３ｍｍｏりをトリフルオロ酢酸を水冷下
、３０分間処理し、減圧濃縮後、エチルエーテルを加え
ることにより、Ｈ−Ａｌａ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ　（Ｂｚ　
１　）　−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ　（Ｍｏｂ
　）−Ａｓｎ−Ｓｅｒ（　Ｂｚ　１　）−Ｐｈｅ−Ａｒ
ｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｙｒ（Ｄｃｂ）−０Ｂｚｌ・トリフル
オロ酢酸塩の沈殿を得る。これをＤＭＦ（３０ｍｌ）に
溶解し、上に得た活性エステル溶液を合わせる。ｎ−ブ
チルアミン（０．１３ｍｆｆｉ、０．５３ｍｍ。

ｊりを加えて、水冷下に７２時間反応させる。反応液に
水を加えて得られる沈殿を含水酢酸で温浸し、さらにメ
タノールで洗浄して、表記化合物（１、３２ｇ、収率６
７％）を得る。

元素分析（Ｃ＋　ｙ　ｙｅｔ　ｓ　８Ｎ１　ｓｏａ　ｂ
ｓａｃｌｔ　・３Ｈ＊Ｏ）　’実測値（％）：　Ｃ５６
，２０，ｌ（６，０６，Ｎ　１２．２５．　Ｓ　４．９
５゜Ｃ１１，８６゜ 計算値（χ＞：　Ｃ５６，３６，Ｈ６，１７，Ｎ　１２
．２５．　Ｓ　５．１０゜Ｃ１１８８゜ （３）　　α−ｈＡＮＰ（７−２８）　　３先に得た保
護ペプチド２（１，５７ｇ、０．４２ｍｍｏりをフッ化
水素（２５ｍり一アニソール（４，６ｍりにより一５℃
で６０分間処理する。フッ化水素を減圧留去後、残渣を
酢酸エチルで洗浄し、次いで１Ｍ酢酸（３００ｍｊ２）
に溶解する。この溶液に水を加えて３ｆに希釈し、１Ｍ
アンモニア水でｐＨ７，８に調ｌｉする。２３℃で２０
時間攪拌の後、水を減圧留去、さらに酢酸アンモニウム
を昇華により除く。残渣を１０％トノフルオロ酢酸に溶
解し、中圧逆相カラムＲＱ−２（富士ゲル）に付す。０
８１％トリフルオロ酢酸を含みアセトニトリルに関して
５％〜４５％の濃度勾配を有するアセトニトリル−水系
で溶出し、主溶出画分を集め減圧濃縮後、凍結乾燥して
、表記化合物３を得る（３８１ｍｇ）。

アミノ酸分析値（５％チオグリコール酸を含む６Ｍ塩酸
、１１０℃、２４時間）： Ａｓｐ　１．９４（２）、　Ｓｅｒ　１．８３（２）、
　Ｇｌｕ　１．０４（１）。

Ｇｌｙ　４．３４（５）、　Ａｌａ　１．０７（１）、
　Ｍｅｔ　Ｏ，８１（Ｌ）。

ＩＩｓ　　Ｏ，８８（１）、　　Ｌｅｕ　　Ｌ、００（
１）、　　Ｔｙｒ　　Ｏ，９８＜１）。

Ｐｈｅ　１．７９（２）、　Ａｒｇ　２．８８（３）、
　Ｃｙｓ　ｎ、ｄ、　（括弧内は理論値を示す） （４）　　Ｃｏ−α−ｈＡＮＰ（７−２８）α−ｈＡＮ
Ｐ（７−２８）３（４０ｍｇ、１７１１ｍｏ　ｌをＤＭ
Ｆ（０，５ｍｊ’）に溶かし、ｎ−ブチルアミン（１１
，９μＰ、５０ｔ１．ｍｍｏ１２）の存在下にスペリン
酸Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミドエステル１（３，１ｍ
ｇ、２２μｍｏｆ２）を４℃で８日間反応させる。ＲＱ
−２カラムに付し、０．１％トリフルオロ酢酸を含み、
アセトニトリルに関して１０〜５０％の濃度勾配を有す
る含水アセトニトリルで溶出する。主溶出画分を集めて
減圧濃縮後、凍結乾燥して、表記化合物１ａを得る（１
６．２ｍｇ）。

アミノ酸分析値（５％チオグリコール酸を含む６Ｍ塩酸
、１１０℃、２４時間）： Ａｓｐ　　２．１９（２）、　　　Ｓｅｒ　　１．６４
（２）、　　　Ｇｌｕ　　１．０６（１）。

Ｇｌｙ　５．０９（５）、　Ａｌａ　１．０９（１）、
　Ｍａｔ　Ｏ，９ｇ（１）。

Ｌｉｅ　　Ｏ，９９（１）、　　　Ｌｅｕ　　１．００
（１）、　　　Ｔｙｒ　　Ｏ，９８（１）。

Ｐｈｅ　２．００（２）、　Ａｒｇ　２．８９（３）、
　Ｃｙｓ　ｎ、ｄ、　（括弧内は理論値を示す） （以下余白） ハ６発明の効果 ＣＯ−α−ｈＡＮＰ（７−２８） （以下ペプチド（Ｉａ）という）は、以下の実施例に示
すごとく、実験動物に対して利床作用を示し、利床降圧
剤として有用であること表示した。

試験例 排泄ナトリウムイオン量の経時変化 ［方法コ ５ｌｃ−５Ｄ雄ラツト（体重的３５０ｇ）をナトリウム
ベンドパルビタール３０ｍｇ／ｋｇの腹腔内投与により
麻酔し、大腿部および膀胱にカニユーレを留置し、静脈
より生理食塩水を０．２ｍｌ／分の速度で注入した。膀
胱カニユーレはドロップ計測器（Ｄｒｏｐ−ｃｏｕｎｔ
ａｒ　）に導いて尿を集め、単位時間当りの尿量および
尿中のナトリウム量を炎光分析計を用いて測定した。な
お、検体は生理食塩水に溶解し、静脈カニユーレにより
０．１ｍｌ／匹の割合で注入した。

［結果コ α−ｈＡＮＰ３．２　ｎｍｏ　＋／匹投与では、ナトリ
ウム排泄量は投与直後に急激に増加して１〜２分で最高
値に達し、以後は急速に減少して約１０分後には平常値
となった。一方、ペプチド（１）の３．２ｎｍｏ　１７
匹投与では、ナトリウム排泄量はα−ｈＡＮＰと同様に
急激に増加し、かつα−ｈＡＮＰと同程度の最高値を示
したが、減少は暖やかて、投与後３０〜４０分持続した
。

結果を第１図（Ｎａ″″排泄量の経時変化）に示す。

本発明ペプチド（１）は降圧利床剤として有用であり、
例えば本態性高血圧症、心性浮腫（うつ血性心不全）、
悪性高血圧症の予防もしくは治療に使用することができ
る。ペプチド（１）は通常非経口的、例えば静脈内、皮
内、皮下、筋肉、鼻腔、直腸内に投与することが可能で
あり、投与形態としては、例えば注射用溶液、懸濁液、
点滴などが利用できる。投与量は患者の年令、体重、症
状などによって定められるが、通常的５００ｎｇ／ｋｇ
　〜５０００　ｎｇ／　ｋｇ、好ましくは約７５０ｎｇ
／ｋｇ〜２０００　ｎｇ／ｋｇを一日量として単回もし
くは数回に分割して投与する。

【図面の簡単な説明】

第１図：ペプチド（Ｉａ）および対照としてのα−ｈＡ
ＮＰをラットに投与した時のナトリウム排泄量の経時変
化を示すグラフである。実線はペプチド（１ａ）、破線
はα−ｈＡＮＰをそれぞれ示す。 縦軸はラット１匹当りのナトリウム排泄量（μＥｑ）を
、横軸は経過時間をそれぞれ示す。 特許出願人　塩野義製薬株式会社 代　理　人　弁理士　潮１）雄− ―−７

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）下記一般式で示されるペプチドまたはその塩。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｘは結合手またはＳｅｒ、Ｓｅｒ−Ｓｅｒ、Ａ
   ｒｇ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ、Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｓｅ
   ｒ、Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒもしくは
   Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ；ｎ
   は２ないし１０の整数を表わす］（２）Ｘが結合手；ｎ
   が６である請求項１記載のペプチドまたはその塩。