JPH0248533A - ノブドウ根抽出物よりなる肝疾患治療剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明はノブトウ根のメタノール冷浸エキスを酢酸エチ
ル−水混合溶媒で分配し、酢酸エチル層を濃縮して得ら
れるノブトウ根抽出物よりなる肝疾患治療剤に関するも
のである。

従来の技術 ノブトウ〔学名：アンペロプシス　ブレビペデュンクラ
タ（マキシム）トラウトブ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓｂｒ
ｅｖｉｐｅｄｕｎｃｕｌａｔａ　（Ｍａｘｉｍ、）　Ｔ
ｒａｕｔｖ、　：）はブドウ科（ＶＩＴＡＣＥ！ＡＥ）
、ノブトウ属（＾ＭＰＢＬＯＰＳＩＳ　Ｍｉｃｈｘ）に
属する植物で、中国、台湾などの東洋医学においてその
葉及び茎または根を煎じたものが利尿、消炎、止血剤等
として用いられている（中葉大辞典、小学館出版、１９
８５年）。

また、勝田らはノブトウの果実のアルコール浸出液が肝
硬変の予防及び治療薬として有用であることを見出して
おり、その活性成分は、スペクトルデータより、糖質、
ペプチド及び有機酸を含有する物質であることを明らか
にしている（特公昭６０−７９７４号公報）。

さらに尾端らはノブトウのコラーゲン繊維形成阻害及び
抗脂肝活性成分について、果実のアルコール抽出液及び
葉、茎の加熱水抽出液を用いて検討を行い、ゲルろ過の
データにより活性成分は糖を含む高分子と推定している
〔プログレス　インメディシン（Ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｉ
ｎ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）　　６巻、５号、１０３５〜１
０４０ページ、１９８６年〕。

本発明のノブトウ根抽出物に含まれる活性成分は式 ０Ｈ で表されるレスベラトロール（Ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ
）及びこの化合物と糖が結合した配糖体、あるいはこの
レスベラトロールが２〜４分子縮合した二量体、三量体
、四量体と考えられるポリフェノリックベンゾフラン誘
導体などであるが、これらの活性成分のいくつかはすで
に他の植物から単離され、報告されている。

例えば、グネチンＧ　（Ｇｎｅｔｉｎ　Ｇ）　、グネチ
ンＨ（Ｇｎｅｔｉｎ　Ｈ）、パラノカルポール（Ｂａｌ
ａｎｏｃａｒｐｏｌ）などの化合物がヴエルヴイチア　
ミラビリス（Ｗｅｌｗｉｔｓｃｈｉａ　ｍ１ｒａｂｉｌ
ｉｓ）、バラノカルブス　ジラニクス（Ｂａｌａｎｏｃ
ａｒｐｕｓ　ｚｅｙｌａｎｉｃｕｓ）、ホペアジニクン
ダ（Ｈｏｐｅａ　ｊｕｃｕｎｄａ）などの植物から単離
され、それぞれの推定構造式が明らかにされている〔ブ
レチン　デス　ソシエテス　ヒミケス　ベルゲｘ　（Ｂ
ｕｌｌ、　Ｓｏｃ、　Ｃｈｉｍ、Ｂｅ１ｇ、）　９５巻
、９〜１０号、７３７〜７４８ページ、１９８６年、ジ
ャーナル　オブ　ケミカル　ソサイアティー　パーキン
　トランスアクションＩ　（Ｊ、Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、Ｐ
ｅｒｋｉｎ　Ｔｒａｎｓ。

１）　１８０７〜１８０９ページ、１９８５年〕。

しかしながら、これまでこのようなポリフェノリックベ
ンゾフラン誘導体がノブトウ根に含まれることは知られ
ておらず、またこれまでポリフェノリックベンゾフラン
誘導体の薬理活性としては抗菌、抗真菌作用などが知ら
れているのみで、肝疾患に対する作用は報告されていな
い。

発明が解決しようとする問題点 本発明の目的は、ノブトウ根のメタノール冷浸エキスを
酢酸エチル−水混合溶媒で分配し、酢酸エチル層を濃縮
して得られるノブトウ根抽出物よりなる肝疾患治療剤を
提供することである。

問題を解決するための手段 本発明者らは、これまで生薬、特に東洋薬物の中から、
肝疾患治療剤として有効な薬物を見出すべく検討を行っ
てきた（薬学雑誌、１０５巻、２号、１０９〜１１８ペ
ージ、１９８５年）。そして、台湾産の生薬の中に肝疾
患治療効果の強いものをいくつか見出し先に報告した〔
ジャーナル　オブ　ニスノア７　７コロジー（Ｊ、　Ｅ
ｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ、）　１９巻、１０３〜１
１０ページ、１９８７年〕。

本発明者はこれらの生薬の中で特に強い活性を示したノ
ブトウ根についてさらに検討を重ねた結果、ノブトウ根
のメタノール冷浸エキスを酢酸エチル−水混合溶媒で分
配し、酢酸エチル層を濃縮して得られるノブトウ根抽出
物が強い肝疾患治療効果を示し、肝疾患治療剤として有
用であることを見出し、本発明を成すに到った。

さらに本発明者はこのノブトウ根抽出物の分画、精製を
行い、いくつかの肝疾患治療活性成分を単離することに
成功し、その構造を明らかにすることができた。

本発明は以上のような知見に基づくものである。

本発明に用いられるノブトウ根は蛇葡萄（漢名）（和名
ニップドウ）属の植物の乾燥根であればよ＜、ｔｌｔｌ
萄Ｃ学名：アンペロプシス　ブレビベデュンクラタ　（
マキシム）　トラウトブ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓｂｒｅ
ｖｉｐｅｄｕｎｃｕｌａｔａ　（Ｍａｘｉｍ、）　Ｔｒ
ａｕｔｖ、）または小’！蛇１１萄（学名：アンベロプ
シス　ブレビペデュンクラタ　バリエンタス　ハンセイ
　（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓｂｒｅｖｉｐｅｄｕｎｃｕｌ
ａｔａ　ｖａｒ、　ｈａｎｃｅｉ）　　Ｅなどを用いる
ことができる。

本発明の・抽出物は以下のようにして製造することがで
きる。すなわち、上記のようなノブトウ根を適当な大き
さに破砕し、５〜１０倍ｌ　（ｖ／ｗ）のメタノールに
浸して室温下で３〜４日放置して冷浸し、冷浸液を減圧
下に濃縮してエキスを得る。同様な操作をさらに２回繰
り返して得られたエキスを合わせ、エキスに対し、１０
〜１５倍量（ｖ／ｗ）の酢酸エチル及び水を加えて分配
する。酢酸エチル層を分取し、水層にさらに同量の酢酸
エチルを加えて２回抽出を繰り返し、酢酸エチル抽出液
を合わせて減圧下に溶媒を留去してノブトウ根抽出物を
得る。

このノブトウ根抽出物には肝疾患治療効果を示す種々の
活性成分が含まれており、これらの活性成分は上記抽出
物をカラムクロマトグラフィー高速液体クロマトグラフ
ィー、分取薄層クロマトグラフィーなどを組み合わせて
精製する事により分画、単離することができる。

例えば、上記で得た酢酸エチル抽出物をシリカゲルカラ
ムクロマトグラフィーにかけ、クロロホルム及びメタノ
ールの混合溶媒を順次混合比を変えつつ溶出して、第１
次分画を行い、１２の粗両分に分ける。

この粗画分のうち、粗画分Ｎα３を放置して析出する結
晶を精製することにより、式 で表されるレスベラトロール（Ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ
）を単離することができる。

上記粗画分Ｎα５を、更にシリカゲルカラムクロマトグ
ラフィー（溶出溶媒：クロロホルム／メタノール＝９２
．５／７．５）で精製することにより、式で表されるε
−ビニフェリン（ε−Ｖｉｎｉｆｅｒｉｎ　）を単離す
ることができる。

粗画分Ｎα６をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（
溶出溶媒：ベンゼン／酢酸エチル＝　１／３）で精製し
、さらに高速液体クロマトグラフィー（ＬＳ−４１００
ＤＳ　ＳＩＬカラム、溶出溶媒：水／アセトニトリル＝
７５／２５、流速約５ａｉ２／ｍ１ｎ）で分離、精製す
ることにより、式 で表されるエビカテキン（Ｅｐｉｃａｔｅｃｈｉｎ）及
び、式Ｈ で表される化合物を単離することができる。

粗画分Ｎα７を高速液体クロマトグラフィー（ＬＳ４１
００ＤＳ　ＳＩＬカラム、溶出溶媒：水／アセトニトリ
ル＝７５／２５、流速約５＋ｒ！！／ｍ１ｎ）で精製す
ることにより、式 で表されるミャベノールＣ（Ｍｉｙａｂｅｎｏｌ　Ｃ）
を単離することができる。

粗画分Ｎα８をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（
溶出溶媒：ベンゼン／酢酸エチル＝　１／３）にかけて
分割した両分を、それぞれ更に同条件でシリカゲルカラ
ムクラマドグラフィーに付し、得られた細分画画分をそ
れぞれ高速液体クロマトグラフィー（ＬＳ−４１００Ｄ
Ｓ　ＳＩＬカラム、溶出溶媒：水／アセトニトリル＝７
５／２５または水／アセトニトリル＝７０／３０、流速
約５威／ｍｉｎ＞で精製することにより、式 で表される化合物、式 で表されるグネチンＨ （Ｇｎｅｔｉｎ Ｈ） 式 で表される化合物及び、 Ｈ 式 で表されるパリ ドール（Ｐａｌｌｉｄｏｌ）、 式 で表される化合物をそれぞれ単離することができる。

粗画分Ｎ（Ｌ　９をシリカゲルクロマトグラフィーｌ自
溶１　：ベンゼン／酢酸エチル−１／３→メタノール〉
で分割した両分をそれぞれ高速液体クロマトグラフィー
（ＬＳ−４１００ＤＳ　ＳＩＬカラム、溶出溶媒：水／
アセトニトリル＝７０／２５または水／アセトニトリル
＝８０　／２０、流速約５ｄ／ｍ１ｎ）で精製Ｈ で表される化合物及び、式 で表される化合物、 で表されるピセイ 式 ％式％） 式 Ｈ で表すレルレスヘラトロロシド（Ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏ
ｌｏｓｉｄｅ）をそれぞれ単離することができる。

さらに、粗画分Ｎα１０をシリカゲルカラムクロマトグ
ラフィー（溶出溶媒：ベンゼン／酢酸エチル＝１／３）
、高速液体クロマトグラフィー＜ＬＳ４１００ＤＳ　Ｓ
ＩＬカラム、溶出溶媒：水／アセトニトリル−Ｔｏ／２
５、流速的５ｍ６／ｍ１ｎ）及び分取薄層クロマトグラ
フィー（ＫＣ，８Ｆ逆逆相系層板、展開溶媒：水／エタ
ノール＝８／３）で精製して、式で表される化合物を単
離することができる。

このようにして、単離、精製された活性成分の中で強い
肝疾患治療効果を示す化合物として、式％式％（） される化合物をあげることができる。

また、本発明において単離、精製された活性成分の中で
、式（Ｄ）、（Ｆ）、（１）、（Ｋ）及び（０）で表さ
れる化合物はこれまで全く報告されていない新規な化合
物であり、式（Ｊ）で表される化合物は報告されている
構造式とは異なる構造式をもつ化合物と推定される。

本発明のノブトウ根抽出物から単離、精製された活性成
分は、分子中に二重結合及び／または不斉炭素を有して
おり、そのためにシス、トランス異性体あるいは光学活
性異性体がそれぞれ存在するが、本発明においてはその
異性体の中のいずれか１つの異性体に限定するものでは
ない。

本発明のノブトウ根抽出物及びそれに含まれる活性成分
は、四塩化炭素、ガラクトサミン、過酸化物、イオノフ
オアＡ２３１８７などによる肝細胞障害または補体介在
性肝細胞障害に対し顕著な改善効果を示し、毒性も低く
、肝疾患治療剤としてきわめて有用である。

本発明のノブトウ根抽出物を実際の治療に用いる場合、
その抽出物をそのまま、あるいは適当な賦形剤を加えて
通常の調剤に行われる手法によって適当な剤型とし経口
的あるいは非経口的に投与する。

また、本発明のノブトウ根抽出物から単離される活性成
分を治療に用いる場合、それぞれの活性成分を１種ある
いは数種用い、上記抽出物の場合と同様に必要に応じ、
適当な賦形剤を加えて製剤化を行って適当な剤型となし
、経口的あるいは非経口的に投与する。

本発明のノブトウ根抽出物あるいはそれに含まれる活性
成分を実際の治療に用いる場合の投与量は、対象となる
患者の年令、性別、症状の度合等によって適宜決定され
るが、抽出物そのものを用いる場合、成人１日当り、経
口投与で１〜１００ｍｇ／ｋｇ、非経ロ投与で０．１−
１０　ｍｇ　／　ｋｇ、活性成分を用いる場合、成人１
日当り、経口投与で０．５〜５０ｍｇ／ｋｇ、非経ロ投
与で０．０５〜５　ｍｇ　／　ｋｇの範囲で投与される
。

発明の効果 本発明のノブトウ根抽出物は１ｍｇ／−の濃度でラット
肝細胞を用いた四塩化炭素による肝細胞障害に対し６０
％程度の抑制効果を示す。また、本発明のノブトウ根抽
出物から単離、精製された活性成分は、ラット肝細胞を
用いた四塩化炭素、ガラクトサミン、クメン過酸化物ま
たはイオノフオア＾２３１８７による肝細胞障害及びマ
ウス肝細胞を用いた補体介在性肝細胞障害に対し、１〜
１００■／ｄの濃度で３０〜６０％の抑制作用を示す。

特に活性成分中、前記式（Ｂ）、（Ｆ）及び（Ｇ）で表
される化合物はう７）肝細胞を用いた四塩化炭素による
肝細胞障害に対し、１００ｘ／ｍｊ２で５５〜６０％の
抑制効果を示す。

実施例 本発明の内容を以下の実施例によりさらに詳細に説明す
る。なお、各実施例中の化合物の融点はすべて未補正で
ある。

実施例　１ ノブトウ根抽出物の調製 台湾産小葉蛇葡萄［：Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ　ｂｒｅｖ
ｉｐｅｄｕｎｃｕｌａｔａ（Ｍａｘｉｍ、）　Ｔｒａｕ
ｔｖｌｗａｒ、ｈａｎｃｅｉ　Ｒｅｈｄｅｒ　〕の乾燥
根５　ｋｇを適当な大きさに破砕し、約４０ｆ！のメタ
ノールに浸し、３〜４日放置した。冷浸液をろ過し、約
４０〜５０℃の水浴上減圧下に溶媒を留去した。ノブト
ウ根に更にメタノール４０１を加えて３〜４日冷浸し、
同様にしてエキスを得た。冷浸抽出操作を３回行い、メ
タノール冷浸エキス２２５ｇを得た（収量４．５％）。

メタノール冷浸エキスに水３β、酢酸エチル３βの混合
溶媒を加えて分液ロートで分配し、酢酸エチル層を分取
した。水層にさらに酢酸エチル３βを加えて２回抽出を
繰り返し、酢酸エチル抽出液を合わせ、減圧下に溶媒を
留去してノブトウ根抽出物４０．３ｇを得たく収量１７
．９％）。

実施例　２〜１２ ノブトウ根抽出物の活性成分の単離、精製実施例１で得
たノブトウ根抽出物３０　ｇを適量の酢酸エチル及びメ
タノールの混合溶媒に溶解し、セライ）５０ｇを加えて
よく混合した後、減圧下に溶媒を留去してノブトウ根抽
出物とセライトの均一な混合物を得た。

内径６０＋ｎｍ、長さ約１００ｃｍのガラスカラムにシ
リカゲル（メルク社製、キーゼルゲル６０）１５０ｇを
充填し、上部に上記で製したノブトウ根抽出物とセライ
トの混合物をのせ、クロロホルム−メタノール混合溶媒
を溶出溶媒とし、混合比を順次変えつつ溶出して第１次
分画を行い、下記のような粗画分に分けた。

〔第１次分画〕 流速は約５＋ｎｊ！／ｍｉｎでＵｖ検出器によりピーク
を確認しつつ分取した。また、分取薄層クロマトグラフ
ィーには、ホワットマン社製ＫＣ＋ｓＦ逆相系薄層板（
５Ｘ２０ｃｍ、　２００　μ）　　を使用した。

得られた粗画分中、シリカゲル薄層クロマトグラフィー
上でメインスポットが３忍められるものを更にシリカゲ
ルカラムクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフ
ィー、分取薄層クロマトグラフィーなどによって精製し
、活性成分を単離した。

なお、高速液体クロマトグラフィーは東洋曹達部ＬＳ−
４１００ＤＳ　ＳＱＬカラム（２，５４０ｍ　Ｘ３０　
ｃｍ　）を用い、実施例　２ 化合物Ａ（レスベラトロール、Ｒｅ５ｖｅｒａｔｒｏｌ
）の単離 上記で分画した粗画分Ｎα３を放置し、析出した粗結晶
をろ取し、クロロホルムで再結晶して結晶１５０ｍｇを
得た。

融　　点：　　　２６０℃ ＩＲ（ＫＢｒ） ν、、、　：　３３００．１６０５．１５９０．１４５
０゜９６５　Ｃｍ−’ ｔｌＶ　　（ＭｅＯＨ） λ□、（ｌｏｇε）：　　３０６（５，３５）’　Ｈ−
ＮＭＲ（９０ＭＩｌｚ、　　アセトン−ｄ、）δ：　　
６．２７（ＩＨ，ｔ、Ｊ・２）、　　６．５３（２Ｈ，
ｄ、　　Ｊ＝２）、　　６．８３（ＩＩ（、ｄ、　　Ｊ
＝１６）、　　６．８３（２Ｈ。

ｄ、　　Ｊ＝８．５）、　　７．０５（ＬＨ，ｄ、　　
Ｊ＝１６）、　　７．４２（２Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝８．５
） ＭＳ　　（ＥｌＩ−Ｌｏｗ） ｍ／ｚ：　　　２２８　　（Ｍ”） 各スペクトルデータより本化合物は下記構造のレスベラ
トロールと同定した。

Ｈ 実施例　３ 化合物Ｂ（ε−ビニフェリン、ｔ：　−Ｖｉｎｉｆｅｒ
ｉｎ）の単離 上記で分画した粗画分Ｎα５を濃縮し、残留物をシリカ
ゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：クロロホル
ム／メタノール＝９２．５　：　７．５）にかけて精製
し、非晶質物質２００ｍｇを得た。

融　　点　＝　　　２４０℃ 〔α〕・　＋３５°　（ｃｍ１．８３．　　メタノール
）ＩＲ（にＢｒ） ν□、　：　３３００．　１５９０．　１５１０．　１
４４０゜９６０　　ｃｍ−’ ＵＶ　　（ＭｅＯＨ） λｍｍｎ　　（ｌｏｇε）：　　３２４（５，３６）’
Ｈ−ＮＭＲ（１００Ｈｚ、　　アセト”’　　ａｓ）δ
：　　４．４４（ＩＩＩ、　　ｄ、　　Ｊ＝５．５）、
　　５．４０（ＩＨ，ｄ、Ｊ・５．５）、　　６．２２
（３８，ｓ）、　　６．３１（１８，ｄ、　　Ｊ２．０
）、　　６．６５（ＬＨ，ｄ、　　Ｊ＝１６．０）、　
　６．７０（ＬＨ，ｄ、　　Ｊ＝２．０）、　　６．７
１（２）１．　　ｄ、　　Ｊ８．５）、　　６．８０（
２Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝８．５）、　　６．９１（ｉｌｌ。

ｄ、　　Ｊ＝１６．０）、　　７．１５（２８，ｄ、　
　Ｊ＝８．５）。

７゜１９（２Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝８．５）Ｉ３Ｃ−Ｎ１４
Ｒ（２５Ｍｔ（ｚ、　　アセトン−ｄＳ）δ：　　５７
，５（ｄ）、　　９４．２（ｄ）、　　９７．２（ｄ）
、　　１０２．５（ｄ）、　　１０４．６（ｄ）、　　
１０７．４（ｄ）、　　１１６．５（ｄ）。

１１６．７（ｄ）、　　１２０．１（ｓ）、１２３．８
（ｄ）。

１２８．２（ｄ）、　　１２９．０（ｄ）、　　１３０
．２（ｓ）。

１３０．４（ｄ）、　　１３４．１（ｓ）、　　１３６
．７（ｓ）。

１４７．７（ｓ）、　　１５８．３（ｓ）、　　１５９
．７（ｓ）。

１６０．０　　（ｓ）、　　１６２．６（ｓ）ＵＳ　　
（Ｅｌ−ＬＯ９１） ｍ／ｚ　二　　　４５４　　（ＡＰ）、　　３４７．　
１０７各スペクトルデータより、本化合物は下記の構造
のε−ビニフェリンと同定した。

Ｈ 実施例 粗画分Ｎα６を濃縮し、残留物をシリカゲルカラムトゲ
ラフイー（溶出溶媒：ベンゼン／酢酸エチル＝　１／３
）にかけ、５０ｍ１ずつ採取し、フラクションＮ１１ｉ
ｌ−１５の流出分を集め濃縮した。残留物をさらに高速
液体クロマトグラフィー（溶出溶媒：水／アセトニトリ
ル＝７５／２５、流速５ｍｌ／ｍ１ｎ）にかけ保持時間
約２．５時間及び約５時間の流出分を採取して、化合物
Ｃ（２０ｍｇ）　　および化合物Ｄ（１０ｍｇ）をそれ
ぞれ単離した。

化合物Ｃ 融　　点　：　　２４０　℃ 〔α）＝−２６°　（Ｃ・１．０９．　　メタノール）
ＩＲ（ＫＢｒ） ν□、　：　３４５０．１６２０．１５２０．１４５０
　　ｃｎｒ’ＬＩＶ　（ＭｅＯＨ） λ□Ｘ（ｌｏｇε）　：　２８０（４，４８）’）Ｉ−
ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、　　７　セトン−ｄ６）δ　：
　　２．６５（２Ｈ，ｍ）、　　　４．０５（ＩＬ　　
ｍ）、　　　４．７２（１８゜ｂｒｓ）、　５．７６（
１８，ｄ、　Ｊ＝　２．０）、　５．８７（ｌｆｔ、　
ｄ、　Ｊ＝２．０）、　６．６４（２Ｈ，ｂｒｓ）。

６．８８（１）１．　ｂｒｓ） ３Ｃ−Ｎ　Ｍ　Ｒ（２５！Ａ　Ｈｚ　、　　アセトン−
ｄ６）δ：　　２９．５（ｔ）、　　６７．４（ｄ）、
　　７９．８（ｄ）、　　９６．２（ｄ）、　　９６．
６（ｄ）、　　１００．０（ｓ）、　　１１５．７（ｄ
）。

１１６．０（ｄ）、　　１２０．０（ｄ）、　　１３２
．６（ｓ）。

１４５．７（ｓ）、　　１４５．８（ｓ）、　　１５７
．５（ｓ）。

１５８、０　（ｓ） ＭＳ　　（ＦＡＤ） ｍ／ｚ：　　　２９０　　（Ｍ”）、　　１３９各スペ
クトルデータより、本化合物は下記の構造の（−）−エ
ピカテキンと同定した。

Ｈ 化合物り 融　　点　： Ｈ １７０℃ 〔α〕 ＋１２３°　（Ｃ＝０．９３．　　メタノール）ＩＲ（
にＢｒ） ｖ、、、　　：　３４００．　１６１０．　１５１５．
　１４５０　　ｃｎｒ’ＵＶ　　（Ｍｅｎ）Ｉ） λ□、Ｉ　（ｌｏｇε）：　　２８１（４，７３）’Ｈ
−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、　　アセトン−ｄｓ）δ：　
　３．２０（ＩＨ，ｄｄ、　　Ｊ＝４．０　　ａｎｄ　
　１８．０）、　　３．６０（１）１．　　ｄｄ、　　
Ｊ＝４．０　　ａｎｄ　　１８．０）、　　４．１９（
ＬＨ。

ｄ、　　Ｊ＝１１．５）、　　５．２３（ｉｌｌ、　　
ｔ、　　Ｊ＝４．０）。

５．７４（ＩＨ，ｄ、　　Ｊ＝１１．５）、　　６．０
７（ＬＨ，ｄ。

Ｊ＝２．０）、　　６．２４（ＬＨ，ｂｒｓ）、　　６
Ｊ５（ＬＨ，ｄ。

Ｊ＝２．０）、　　６．４５（ＩＨ，ｄ、　　Ｊ＝２．
０）、　　６．６６（２Ｈ，ｄ、　　Ｊ・８．５）、　
　６．７８（２Ｍ、　　ｄ、　　Ｊ８．５）、　　６．
９５（２１（、ｄ、　　Ｊ＝８．５）、　　７．１１（
２Ｈ。

ｄ、　　Ｊ＝８．５） ”Ｃ−ＮＭＲ（１２５Ｍ）Ｉｚ、　　アセトンａｓ）δ
：　　３４．３（ｔ）、　　３６．４（ｄ）、　　４９
．８（ｄ）、　　８８．８（ｄ）、　　９６．２（ｄ）
、　　１０２．０（ｄ）、　　１０６．０（ｄ）。

１０９．５（ｄ）、　　１１６．１（ｄ）、　　１１６
．５（ｄ）。

１］、９．５（ｓ）、　　　１２３．３（ｓ）、　　　
１２９．０（ｄ）。

１３０、５　（ｄ）。

１３８．６（ｓ）。

１５７．１（Ｓ）。

１５９．３（Ｓ）。

１３１．５（ｓ）、１３５．２（ｓ）。

１４３、０　（ｓ）　、　　１５６．５　（ｓ）。

１５７、７　（ｓ）　、　　１５９．０　（ｓ）　。

１６０、９　（ｓ） ＭＳ　　（ＦＡＢ） ｍ／ｚ：　　　４５４　　（Ｍ゛） 各スペクトルデータより、 造の化合物と推定した。

本化合物は下記の構 Ｈ 実施例　５ 化合物Ｅ（ミャベノールＣ５Ｍ１ｙａｂｅｎｏｌ　Ｃ）
の単粗画分Ｎ（Ｌ　７を濃縮し、残留物を高速液体クロ
マトグラフィー（溶出溶媒：水／アセトニトリル７５　
／２５、流速５　ｍｊ！　／ｍ１ｎ）　１．：かけ、保
持時間約４時間の流出分を濃縮して非晶質物質３０ｍｇ
を得た。

融　　点　：　　　２１５℃ 〔α）＝＋６４°　（Ｃ＝１．１６．　　メタノール）
ＩＲ（ＫＢｒ） ν□、　　：　　３４００．　１６１０．　１５１５．
　１４５５゜９６０　　ｃｎｒ’ ［Ｉ　Ｖ　　（！Ｊ　ｅ　Ｏ）１　） λ、、、　　（ｌｏｇ　Ｅ）　　：　　２９５（４，１
４）、　　３２４（４，１１）’Ｈ−ＮＭＲ（５００Ｍ
Ｈｚ、　　アセトンａｓ）δ：　　４，３２（ｉｌｌ、
　　ｂｒｓ）、　　４．６４（ＩＨ，ｄ、　　Ｊ＝５．
０）５．２０（１）１．　　ｂｒｓ）、　　５．３９（
ＩＨ，ｄ、　　Ｊ□５．Ｏ）。

６．０８（ＩＨ，ｄ、　　Ｊ＝２．０＞、　　６．１８
（２Ｈ，ｄ、　　Ｊ２．０）、　　６．２３（ＩＮ、　
　ｔ、　　Ｊ＝２．０）、　　６．３１（０１゜ｄ、　
　Ｊ＝２．０）、　　６．３６（ＩＨ，ｄ、　　Ｊ＝２
．０）。

６．５１（２Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝８．５）、　　６．５６
（２Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝８．５）、　　６．６２（０１，
ｄ、　　Ｊ＝１６．６）、　　６．６７（ＩＨ，ｂｒｓ
）、　　６．７４（２Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝８．５）。

６．８２（２１１，ｄ、　　Ｊ＝８．５）、　　６．９
０（ＩＨ，ｄ、　　Ｊ＝１６．０）、　　７．１３（２
Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝８．５）、　　７．１７（２Ｈ，ｄ、
　　Ｊ＝８．５） Ｉｓ　　（ＦＡＢ） ｍ／ｚ：　　　６８０　　（ＩＬ”） 各スペクトルデータより、本化合物は下記の構造のミャ
ベノールＣと同定した。

実施例　６ 化合物Ｆ及び化合物Ｇ（グネチンＨＳＧｎｅｔｉｎＨ）
の単離 粗画分Ｎα８を濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロ
マトグラフィー（溶出溶媒：ベンゼン／酢酸エチル＝　
１／３）にかけ、５０−ずつ採取し、フラクションＮｏ
、　１〜５の流出物を集め濃縮した。残留物をシリカゲ
ルフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ベ
ンゼン／酢酸エチル−１／３）にかけ、フラクションＮ
α２７〜３５の流出分を集め濃縮した。残留物をさらに
高速液体クロマトグラフィー（溶出溶媒：水／アセトニ
トリル−７５／２５、流速５ｄ／ｍ１ｎ）にかけ、保持
時間約２．５１１１！間と約３．５時間の流出分から化
合物Ｆ　（１０ｍｇ）及び化合物Ｇ　（１０ｍｇ）をそ
れぞれ単離した。

化合物Ｆ 融　　点　：　　１９０　℃ 〔α〕・　＋８°　（Ｃ＝１．７７、　　メタノール）
ＩＲ（ＫＢｒ） ν□、：　　３４００．　１６１０．　１５１５．　１
４５０６９０　　ｃｍ−’ ［Ｉ　Ｖ　　（ｉＡ　ｅ　ＯＨ） λ□、　　　（ｌｏｇ　　ε’）　　　：　　　２７８
（３，８３）、　　　２８３（３，１３）Ｈ−ＮＭＲ（
５００ＭＨｚ、　　アセトン−ｄＳ）δ：　　３．８２
（２Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝５．０）、　　５．１９（２Ｈ，
ｄ、　　Ｊ５．０）、　　５．４８（ＬＨ，ｄ、　　Ｊ
＝１２．０）、　　５．９２（４Ｈ，ｄ、　　Ｊ・２．
０）、　　５．９４（ＩＨ，ｄ、　　Ｊ１２．０）、　
　６．０６（２Ｈ，ｔ、　　Ｊ＝２．０）、　　６．２
６（ＬＨ，ｓ）、　　６．５５（２Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝８
．５）、　　６．６７（４Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝８．５）、
　　６．７６（２Ｈ，ｄ、　　Ｊ８、’５）、　　６．
９２（４Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝８．５）３Ｃ−ＮＭＲ（１２
５ＭＨｚ、　　アセト”’　−ｄ　ｓ　）δ：　　５７
．６（ｄ）、　　９１．７（ｄ）、　　９５．０（ｄ）
、　　１０２．４（ｄ）、　　１０７．４（ｄ）、　　
１１６．４５（ｄ）、　　１１６．５４（ｄ）、　　１
２１．５（ｓ）、　　１２４．６（ｄ）、　　１２８．
８（ｄ）。

１３０．１（ｓ）、　　１３１．０（ｄ）、　　１３１
．８（ｄ）。

１３４．０（ｓ）、　　１３４．９（ｓ）、　　１４７
．１（ｓ）。

１５８．３（ｓ）、　　１５８．７（ｓ）、　　１５９
．９（ｓ）。

１６２．６　　（ｓ） ＭＳ　　（ＦＡＢ） ｍ／ｚ：　　　６８０　　（Ｍ”） 各スペクトルデータより、本化合物は下記の構造の化合
物と推定した。

化合物Ｇ 融　　点　：　　　１８５℃ 〔α〕＝＋５°　（Ｃ＝２．０６゜ ＩＲ（ＫＢｒ） メタノール） し、、、：　　３４００．　１６１０．　１５１５．　
１４６０゜９６５　　ｃ＋ｙｒ’ ＵＶ　　（Ｍｅｏｌｌ） λｙａａ、Ｉ　（ｌｏｇε）：　　２８５（４，３１）
、３２４（４，４４＞’Ｈ−ＮＭＲ（５００Ｍｆｌｚ、
　　アセトン−ｄ、）δ：　　４．５８（２Ｈ，ｄ、　
　Ｊ＝５．０）、　　５．４７（２Ｈ，ｄ、　　Ｊ５．
０）、　　６．２１（２）１．　　ｔ、　　Ｊ＝２．０
）、　　６．２８（４Ｈ。

ｄ、　　Ｊ＝２．０）、　　６．４９　（ＩＨ，ｓ）　
、　　６．５８　（ＩＨ。

ｄ、　　Ｊ・１６．０）　　６．６３（２］１．　　ｄ
、　　Ｊ・８．５）。

６．６８（ＩＨ，ｄ、　　Ｊ＝１６．０）、　　６．８
７（４Ｎ、　　ｄ。

Ｊ＝８．５）、　　６．９６（２Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝８．
５）、　　７．２７（４）１．　　ｄ、　　Ｊ＝８．５
） ＭＳ　　（ＦＡＢ） ｍ／ｚ：　　　６８０　　（Ｍ”） 各スペクトルデータより、本化合物は下記の構造のグネ
チンＨと同定した。

Ｈ 実施例　７ 化合物Ｈ（パリドール、Ｐａ１ｌｉｄｏｌ）　　の単離
実施例６のシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフ
ィーを継続し、フラクションＮα３６〜５４の流出分を
集めて濃縮し、残留分をさらに高速液体クロマトグラフ
ィー（溶出溶媒：水／アセトニトリル＝７５／２５、流
速５ｍｇ／ｍ１ｎ）で精製し、保持時間約２時間の流出
分を濃縮して非晶質物質１００ｍｇを得た。

融　　点　：　　　＞３００℃ 〔α〕−＝５°　（ｃｍ１．８０．　　メタノール）Ｉ
Ｒ（ＫＢｒ） Ｌ’、、、　：　３３５０．　１６０５．１５１０．１
４７０　　ｃｍ−’ＵＶ　（ＭｅＯＨ） λ、。、　（ｌｏｇε）　：　２８１（３，７４）、　
２８６（３，７４）Ｈ−ＮＭＲ（５００Ｍｆｌｚ、　　
アセトン−ｄ６）δｚ３．８３（２Ｎ、　ｂｒｓ）、　
４．５８（２ｔｌ、　ｂｒｓ）、　６．１９（２Ｈ，ｄ
、　Ｊ＝２．５）、　６．６２（２Ｈ，ｄ、　Ｊ＝２．
５）、　６．７０（４Ｈ，ｄ、　Ｊ＝９．５）、　６．
９８（４Ｎ。

ｄ、　Ｊ＝９．５） ３Ｃ−ＮＭＲ（２５ＭＨｚ、　　アセトン−ｄ、）δ：
　５４．２（ｄ）、　６０．８（ｄ）、　　１０２．９
（ｄ）、　　１０３．７（ｄ）、　１１６．２（ｄ）、
　　１２３．６（ｓ）、　１２９．３（ｄ）。

１３８．０（ｓ）、　　１５０．６（ｓ）、　　１５５
．５（ｓ）。

１５６、５　（ｓ）　、　　１５９．５　（ｓ）’、Ｉ
ｓ　　（ＦＡＢ） ｍ／ｚ：　　　４５４　　（Ｍ”） 各スペクトルデータより、本化合物は下記の構造のバリ
ドールと同定した。

実施例　８ 化合物Ｉの単離 実施例７のシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフ
ィーを継続し、フラクションＮα５５〜１００の流出分
を集めて濃縮し、残留物をさらに高速液体クロマトグラ
フィー（溶出溶媒：水／アセトニトリル−＝７０／３０
、流速５ｍｌ／ｍ１ｎ）で精製し、保持時間約１時間の
流出分を濃縮して非晶質物質４５０ｍｇを得た。

融　　点　：　　２２３　℃ 〔α）＝＋１４°　（ｃｍ１．９８．　　メタノール）
ＩＲ（ＫＢｒ） ν、、、：　　３３００．　１６１０．　１５１０．　
１４６０　　ｃ＋＋ｒ’ｊｌＶ　　（Ｍｅｎｕ） λ□Ｘ　　（ｌｏｇε）：　　２８１（３，８９）’　
Ｈ−ＮＭＲ（５００！ＪＨｚ、　　アセトン−ｄ６）δ
：　　３．２３（ＬＨ，ｓ）、３．５２（ＬＨ，ｓ）、
　　４．０１（ＬＨ。

ｓ）、　　４．０７（ＩＩ（、ｓ）、　　５．９４（Ｉ
Ｈ，ｄ、　　Ｊ・２．５）、　　６．０３（ＩＩＩ、　
　ｄ、　　Ｊ＝２．５＞、　　６．３２（ＩＨ。

ｄ、　　Ｊ＝２．５）、　　６．３９（ＩＨ，ｄ、　　
Ｊ＝２．５）。

６．４４（２Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝７．５）、　　６．６３
（２１１，ｄ、　　Ｊ＝７．５）、　　６．６６（２１
１，ｄ、　　Ｊ＝７．５）、　　６．９７（２Ｈ。

ｄ、　　Ｊ＝７．５） ’Ｃ−ＮＭＲ（２５ＭＨｚ、　　アセトン−ｄ６）δ：
　　４７．５（ｄ）、　　５０．１（ｄ）、　　５０．
８（ｄ）、　　５８．５（ｄ）、　　１０２Ｊ（ｄ）、
　　１０４．６（ｄ）、　　１０６．Ｈｄ）。

１１３．８　　（ｓ）、　　１１５．９（ｄ）、　　１
１６．０（ｄ）。

１２ｇ、２（ｓ＞。

１３５．７　（ｓ＞　。

１４７．９（Ｓ）。

１５７．３（Ｓ）。

１２９．６（ｄ）。

１３８、７　（ｓ）　。

１５３．４＜ｓ）。

１５８、１　（ｓ）　。

１３０、３　（（１）。

１４７、７　（Ｓ） １５６．４（ｓ）。

１５８、８　（ｓ） ＭＳ　　（ＦＡＢ） ｍ／ｚ：　　　４５４　　（Ｍ”） 各スペクトルデータより、 造の化合物と推定した。

本化合物は下記の構 Ｈ 実施例　９ 化合物Ｊの単離 実施例６で行った粗画分Ｎα８のシリカゲルカラムクロ
マトグラフィーを継続して行い、フラグジョンＮα６〜
１０の流出分を集めて濃縮し、残留物を集めて濃縮し、
残留物をさらにシリカゲルカラムクロマトグラフィー（
溶出溶媒：ベンゼン／酢酸エチル＝　１／３）で精製し
て非晶質物質５００ｍｇを得た。

融　　点　：　　　１８５℃ 〔α〕＝　　＋１６７°　（Ｃ＝２．１２．　　メタノ
ール）ＩＲ（ＫＢｒ） ν、、、　　：　　３３００．　１６０５．　１５１５
．　１４５０　　ｃｍ−’ＬＩＶ　（ＭｅＯＨ） λ、、、　　（ｌｏｇ　ｇ）　　：　２８３（４，０１
）’Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、　　アセトン−ｄＳ）
δ：　４．１７（ｉｌｌ、　　ｄ、　　Ｊ＝１１．７）
、　　５．４２（ＩＨ，ｄ。

Ｊ＝５．０）、　　５．４５（ＬＨ，ｄ、　　Ｊ＝５．
０）、　　５．７７（ＬＨ，ｄ、　　Ｊ＝１１，７）、
　　６．１６（ＩＨ，ｄ、　　Ｊ＝２．３）、　　６．
２４（１）１．　　ｄ、　　Ｊ＝２．３）、　　６．４
３（１１（。

ｄ、　　Ｊ＝２．３）、　　６．６２（１）１．　　ｄ
、　　Ｊ＝２．３）。

６．６５（２Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝８．３）、　　６．７８
（２Ｈ，ｄ、　　Ｊ８．３）、　　６．９０（２Ｈ，ｄ
、　　Ｊ＝８．３）、　　７．１２（２Ｈ。

ｄ、　　Ｊ＝８．　３） ”　Ｃ−ＮＭＲ（２５ＭＨｚ、　　アセトン−ｄ６）δ
：　　４３．７（ｄ）、　　４９．４（ｄ）、７１．２
（ｄ）、８８Ｊ（ｄ）、　　９７．２（ｄ）、　　１０
１．６（ｄ）、　　１０５．４（ｄ）。

１１０．４　　ｄ　　、　　１１５．４（ｄ　　、　　
１１５．９（ｄ　。

１１８．１　　ｓ　　、　　１１８．８（ｓ　　、　　
１２８．６（ｄ　　。

１２９．１３　　ｄ　　、　　１３０．６（ｓ　　、　
　１３２．３（ｓ　　。

１３９．８　　ｓ　　、　　１４２．８（ｓ　　、　　
１５５．８（ｓ）。

１５７　０　　ｓ　　、　　１５８．６（ｓ　　、　　
１５９．９（ｓ■　（ＦＡＢ） ｍ／ｚ：　　　４７０　　（Ｍ”）、　　４５２本化合
物のＮＭＲスペクトルデータは前記Ｂｕｌｌ。

Ｓｏｃ、　Ｃｈｉｍ、　Ｂｅ１ｇ、　ｖｏｌ　９５．　
　Ｎｏ、９〜１０．　ｐＨ７３７〜７４８　（１９８６
）　　記載のグネチンＧとほぼ一致するが、化学構造は
リンズ（Ａｒｌｅｔｅ　Ｐ、Ｌｉｎ５）らの推定構造で
はなく下記の構造をもつものと推定される。

Ｈ 実施例　１０ 化合物にの単離 粗画分Ｎα９を濃縮し、残留物をさらにシリカゲルカラ
ムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ベンゼン／酢酸エチ
ル＝１／３）にかけ、５０ｍｇずつ採取し、フラクショ
ンＮα２〜５の流出分を集めて濃縮した。残留物を高速
液体クロマトグラフィー（溶出溶媒：水／アセトニトリ
ル＝７０／２５、流速５ｍｌ／ｍ１ｎ）で精製し、保持
時間約１．４時間の流出分を濃縮して非晶質物質１０ｍ
ｇを得た。

融　　点　；　　　２２５℃ 〔α）＝＋３２°　（Ｃ・０．２３．　　メタノール）
ＩＲ（ＫＢｒ） ｖ−−−：　　３４５０．　１６１０．　１５１５．　
１４５５　　ｃａｒ’ＵＶ　（Ｍｅ叶） λ、ａｘ　　（ｌｏｇε）　　：　　２８４（４，９５
）’ｔｌ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、　　アセトン−ｄＳ
）δ：　　３．３３（１Ｎ、　　Ｓ）、　　３．５３（
ＩＨ，Ｓ）、　　４．０９（ＩＨ。

ｓ）、　　４．１５（ＬＨ，ｂｒｄ、　　Ｊ＝１．０）
、　　４．５５（ＬＨ。

ｄ、　　Ｊ＝８．０）、　　５．６０（１）１．　　ｄ
、　　Ｊ＝８．０）。

６．１０ｆｌ）Ｉ、　　ｓ）、　　６．１８（１）１．
　　ｄ、　　Ｊ＝２．０）。

６．３５（１）１．　　ｔ、　　Ｊ＝２．０）、　　６
．４８（１）１．　　ｄ、　　Ｊ２．０）、　　６．５
４（２Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝２．０）、　　６．６０　（２
１１゜ｄ、　　Ｊ＝８．５）、　　６．６６（２Ｈ，ｄ
、　　Ｊ＝８．５）。

６．７０（２Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝８．５）、　　６．８４
（２Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝８．５）、　　６．９９（２Ｈ，
ｄ、　　Ｊ＝８．５）、　　７．２４（２１１゜ｄ、　
　Ｊ＝８．５） ”Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ、　　アセトン−ａＳ）δ
：　　４５．４（ｄ）、　　５０．９（ｄ）、　　５１
゜９（ｄ）、　　５２．４（ｄ）、　　５８．１（ｄ）
、　　９４．６（ｄ）、　　９６．６（ｄ）。

１０２．４（ｄ）、　　１０２．８（ｄ　、　　１０６
．２（ｄ）。

１０８．５（ｄ　、　　１１３．７（ｓ　　、　　１１
６．０（ｄ）。

１１６．１（ｄ　　、　　１１６．５　　ｄ　　、　　
１１９．２（ｓ）。

１２８．５（ｄ　　、　　１２９．３　　ｓ　　、　　
１３０．０（ｄ）。

１３０．４（ｄ　　、　　１３３．８　　ｓ　、　　１
３４．９　　（ｓ）。

１３８．５（ｓ　、　　１４２．９　　ｓ　、　　１４
６．３（ｓ）。

１４８．２（ｓ）、　　１５３．７　　ｓ）、　　１５
６．５（ｓ）。

１５７．７（ｓ）、１５８．３　ｓ）、１５８．６（ｓ
）。

１６０、４　（ｓ）　、　　１６３．６　（ｓ＞ＭＳ　
　（ＦＡＢ） ｍ／ｚ：　　　６８０　　（Ｍ”） 各スペクトルデータより本化合物は下記構造の化合物と
推定した。

実施例 実施例９で行った粗画分Ｎα９のシリカゲルカラムクロ
マトグラフィーを継続して行い、ベンゼン−酢酸エチル
混合溶媒（１：　３）で１２５０ｆｆ＋７！（５０ｍＮ
×２５）溶出したのち、溶媒をメタノールに変えて溶出
した。メタノール流出分を集めて濃縮し、残留物（６８
０ｍｇ）を高速液体クロマトグラフィー（溶出溶媒：水
／アセトニトリル＝８０／２０、流速５Ｉｌｔ１２／＋
ｎ１ｎ）で精製し、保持時間１時間、１．５ｉＩＭ及び
３時間のピークより、化合物Ｌ　（９０ｍｇ）　、化合
物Ｍ（１０ｍｇ）及び化合物Ｎ（１０■）をそれぞれ得
た。

化合物り 融　　点：　　　２２０℃ 〔α〕＝　　−５０°　（ｃｍ１．０２．　　メタノー
ル）ＩＲ（ＫＢｒ） ν□、：　　３４００．　１５８５．　１５１５．　１
４５５゜９７０　　ｃｍ−’ ＵＶ　　（Ｍｅｎ）Ｉ） λｗａｘ　　（１０ｇε）：　　３０７（５，３２）’
）Ｉ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、　　７　セ　トン−ｄ、
）δ：　　３ＪＯ〜３．９０（６１（、ｍ）、　　４．
９２（１）１．　　ｄ、　　Ｊ＝７．０）、　　６．４
５（ＩＨ，ｔ、　　Ｊ＝２．０）、　　６．６５（２Ｈ
。

ｄ、　　Ｊ＝２．０）、　　６．８２（２Ｈ，ｄ、　　
Ｊ・８．５）。

６．８４（ＩＨ，ｄ、　　Ｊ＝１６．０）、　　７．０
８（ＩＨ，ｄ。

Ｊ・１６．０）、　　７．３８（２Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝８
．５）’Ｃ−ＮＭＲ（２５ＭＨｚ、　　アセトンｄ６）
δ：　　６２．９（ｔ）、　　７１．６（ｄ）、　　７
５．０（ｄ）、　　７７．９（ｄ）、　　　７８．Ｈｄ
ン、　　　１０２．２（ｄ）、　　　１０４．２（ｄ）
。

１０７．１（ｄ）、　　１０８．６（ｄ）、　　１１６
．８（ｄ）。

１２６．８（ｄ）、　　１２９．２（ｄ）、　　１３０
．１（ｄ）。

１３０．１（ｓ）、　　１４１．４（ｓ）、　　１５８
．５（ｓ）。

１５９．６（ｓ）、　　１６０．３（ｓ）ＭＳ（εｌ−
Ｌｏｗ） ｍ／ｚ：　　　３９０　　（Ｍ”）、２２８各スペクト
ルデータより本化合物は下記構造のピセイドと同定した
。

化合物Ｍ 融　　点　： ２０２℃ 〔α）＝　　−１７°　（ｃｍ１．００．　　メタノー
ル）ＩＲ（ＫＢｒ） ν、、、：　　３４００．　１６００．　１５１５．　
１４５５゜８００　　ｃ＋ｒｒ’ ＵＶ　（ＭｅＯＨ） λｓａ　、ｌ　（ｌｏｇ　　ε）　二　２９０（４，１
３＞’ｆｌ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、　　アセト”’　
−ｄ６　）δ：　　３，３６（ＬＨ，ｍ）、　　３．４
０（ＬＨ，ｔ、　　Ｊ＝８．０）。

３．４６（ｌｔｌ、　　ｔ、　　Ｊ＝８．０）、　　３
．４９（ＩＨ，ｔ、　　Ｊ・８．０）、　　３．７０（
ＩＨ，ｄｄ、　　Ｊ＝５．０　　ａｎｄ１２．０）、　
　３．８０（ＬＨ，ｄｄ、　　Ｊ＝３．Ｑ　　ａｎｄ１
２、Ｏ）、　　４．７７（ＩＨ，ｄ、　　Ｊ＝８．０）
、　　６．３７（１Ｎ、　　ｄ、　　Ｊ＝１２．０）、
　　６．４５（ＩＩ、　　ｔ、　　Ｊ＝２、０＞、　　
６．４６　（ＩＨ，ｂｒｓ）　、　　６．５０　（ＬＨ
，ｄ。

Ｊ＝１２．０）、　　６．５１（１）１．　　ｂｒｓ）
、　　６．７５（２Ｈ。

ｄ、　　Ｊ＝８．０）、　　７．１６（２Ｎ、　　ｄ、
　　Ｊ＝８．０）ＭＳ　　（Ｅｌ−Ｌｏｗ） ｍ／ｚ：　　　３９０　　（Ｍ＝）、　　２２８各スペ
クトルデータより本化合物は下記構造のシスービセイド
と同定した。

Ｈ Ｈ 化合物Ｎ 融　　点　； 〔α〕 ［Ｒ（ＫＢｒ） ２５３℃ ２９°　（ｃｍ０．９６．　　メタノール）ν□、　　
：　　３４５０．　１６００．　１５１０．　１４５０
゜９６０　　ｃｍ−’ ＵＶ　　（ＭｅＯＨ） λ、、、　　（ｌｏｇ　Ｅ）　　：　３０４（５，２０
＞’Ｈ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、　　アセトン−ｄｓ）
δ：　３．１６〜３．９（６Ｈ，ｍ）、　　４．９７（
１）１．　　ｄ、　　Ｊ＝６．０）、　　６．２６（Ｉ
Ｎ、　　ｔ、　　Ｊ＝２．０）、　　６．５４（２Ｎ。

ｄ、　　Ｊ・２．０＞、　　６．８８（ＩＨ，ｄ、　　
Ｊ＝１６．０）。

７．０２（２Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝８．０）、　　７．０６
（ＩＨ，ｄ、　　Ｊ＝１６．０）、　　７．４６（２Ｈ
，ｄ、　　Ｊ＝８．０）ＭＳ　　（Ｅｌ−Ｌｏｗ） ｍ／ｚ：　　　３９０　　（Ｍ”）、　　２２８各スペ
クトルデータより本化合物は下記構造のレスベラトロロ
シドと同定した。

実施例　Ｉ２ 化合物Ｏの単離 粗画分Ｎα１０の流出分を集めて濃縮し、残留物（２，
７ｇ）をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶
媒：ベンゼン／酢酸エチル＝１／３）にかけ、５０ｍＪ
ずつ採取しテｌｏ００ｍｌ（５０Ｘ２０）　　溶出した
流出分を集めて濃縮した。残留物（１，４ｇ）を高速液
体クロマトグラフィー（溶出溶媒：水／アセトニトリル
＝７０／２５、流速５ｒｎ１／ｍ１ｎ）で精製し、保持
時間的２．５時間のピークを採取し、さらに分取薄層ク
ロマトグラフィー（展開溶媒：水／エタノール＝８／３
）で精製し、Ｒｆ値０．４のスポット部分から非晶質物
質１０ｍｇを単離した。

融　　点　：　　　２０５℃ 〔α〕。＝　　＋１０５°　（ｃｍ０．８３．　　メタ
ノール）ＩＲ（ＫＢｒ） ν、、、　　：　　３４５０．　１６１５．　１５１５
．　１４５５　　ｃｍ−’ＵＶ　　（ＭｅＯ）１） λｗａｍ　（ｌｏｇε’）　　：　２８５（４，７１）
ＩＩ−ＮＭＲ（５ＱＱＭｔｌｚ、、　　アセト”　−ｄ
ｔ＋　）δ：　３．５４（２）１．　ｓ）、　４．６２
（２Ｎ、　ｓ）、　４．８８（２８゜ｄ、　　Ｊ＝８．
０）、　　５．２９（２Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝８．０）。

６．２６（２Ｈ，Ｓ）、　６．２７（４Ｈ，ｄ、　　Ｊ
＝２．０）。

６．３２（２）１．　　ｔ、　　Ｊ＝２．０＞、　　６
．４０（４Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝９．０）、　　６．４９（
４）ｉ、　　ｄ、　　Ｊ・９．０＞、　　６．９０（４
Ｈ。

ｄ、　　Ｊ・９．０）、　　７．２８（４Ｈ，ｄ、　　
Ｊ＝９．０）”Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ、　　アセト
ン−ｄ、）δ：　　４９．９（ｄ）、　　５７．５（ｄ
）、　　５９．９（ｄ）、　　５．２（ｄ）。

９７．４（ｄ）、　　１０２．７（ｄ）、　　１０８．
０（ｄ）、　　１１５．９（ｄ）、　　１６．６（ｄ）
、　　１１７．０（ｓ）、　　１２５．７（ｓ）。

１２９．２　６）、　　１２９．６（ｄ）、　　１３３
．７（ｓ）。

１３７．０　ｓ）、　　１４５．６（ｓ）、　　１４５
．８（ｓ）。

１５５．９　ｓ）、　　１５６．４（ｓ）、　　１５８
．８（ｓ）。

１６０．５　　ｓ）、　　１６３．３（ｓ）ＭＳ　　（
ＦＡＢ） ｍ／ｚ：　　　９０６　　（Ｍ＝） 各スペクトルデータより本化合物は下記構造の化合物と
推定した。

実施例　１３ ブランク　メゾイカ（Ｐｌａｎｔａ　Ｍｅｄｉｃａ）　
１９８３年（４９巻）、２２２〜２２５ページ、同朋年
、５０〜５２ページ、同断年、２４１〜２４７ページ、
ジャーナル　オブ　ナチュラル　プロダクツ（Ｊ、Ｎａ
ｔ。

Ｐｒｏｄ、）　４６巻、８４１〜８４７ページ（１９８
３年）及び生薬学雑誌３９巻、２１８〜２２２ページ（
１９８５年）に記載した方法に従い、ラットあるいはマ
ウス初代培養肝細胞を用い、四塩化炭素（ＣＣ１，）、
ガラクトサミン（ＧａｌＮ）、クメン過酸化物（Ｃｕｍ
ｅｎ　ＨＰ）、イオノフオア＾２３１８７　（Ａ　２３
１８７）による肝細胞障害または補体介在性肝細胞障害
（ＣＭＣ）に対する抑制作用を培地中に逸脱するグルタ
ミン酸ピルビン酸アミノ基転移酵素（ＧＰＴ）活性を指
標として測定した。

ＣＣ１，による肝細胞障害に対する抑制作用測定試験は
２時間前培養したラット肝細胞にｌＱｍＭのＣ（：ｌ。

及び検体を加え、１．５時間後の培地中のＧＰＴ活性を
測定して行った。

にａｌＮによる肝細胞障害に対する抑制作用試験は、２
時間前培養後のラット肝細胞に、０．５ｍＭのＧａ１Ｎ
及び検体を加え、３０時間後の培地中のＧＰＴ活性を測
定して行った。

Ｃｕｍｅｎ　）ＩＰによる肝細胞障害に対する抑制作用
測定試験は、２時間前培養後のラット肝細胞に０．５ｍ
ＭのＣｕｍｅｎ　ＨＰ及び検体を加え、２時間培養後の
培地中のＧＰＴ活性を測定して行った。

Ａ２３１８７による肝細胞障害に対する抑制作用測定試
験は、２時間前培養後のラット肝細胞に２０μＭのＡ２
３１８７及び検体を加え、３時間後の培養中のＧＰＴ活
性を測定して行った。

補体介在性肝細胞障害（ＣＭＣ）に対する抑制作用測定
試験は、３時間前培養後のマウス肝細胞に抗マウス肝特
異性抗体及びモルモット補体をそれぞれ最終濃度が１％
及び１０％となるように加え、これに検体を加えて２時
間後の培養中のＧＰＴ活性を測定して行なった。

検体としてノブトウ根抽出物の場合は１　ｍｇ　／　ｍ
ｅ　苓加え、単離した活性成分の場合はそれぞれ１．１
０及び１００■／ｄを加え、検体を加えない時（対照群
）の培地中のＧＰＴ活性を１００として相対的な肝細胞
障害率を求めた。

結果は以下の通りであった。なお、活性成分の結果にお
いて（＊）及び（＊＊）を付した値はそれぞれ検体１■
／ｍｇおよび１０■／−を添加した時の値であり、無印
の値は検体１００■／１ＴＬ１２を添加した時の値であ
る。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. ノブトウ根のメタノール冷浸エキスを酢酸エチル−水混
   合溶媒で分配し、酢酸エチル層を濃縮して得られるノブ
   トウ根抽出物よりなる肝疾患治療剤