JPH02265469A - 微生物の培養法およびこれを利用した発酵生産物の製造方法 - Google Patents
微生物の培養法およびこれを利用した発酵生産物の製造方法Info
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- Y10S528/931—Physical treatment of natural rubber or natural rubber containing material or chemical treatment of non-rubber portion thereof, e.g. extraction of rubber from milk weed
- Y10S528/934—Latex
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S528/00—Synthetic resins or natural rubbers -- part of the class 520 series
- Y10S528/931—Physical treatment of natural rubber or natural rubber containing material or chemical treatment of non-rubber portion thereof, e.g. extraction of rubber from milk weed
- Y10S528/934—Latex
- Y10S528/936—Coagulating
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〈産業上の利用分野〉
本発明は、天然ゴムからゴム分を除いた廃棄物である天
然ゴム漿液の利用法に関し、特に漿液を用いた菌体の生
産法、および発酵生産物の製造方法に関する。
然ゴム漿液の利用法に関し、特に漿液を用いた菌体の生
産法、および発酵生産物の製造方法に関する。
〈従来技術とその問題点〉
天然ゴムの樹液からラテックスを分離した残りの漿液（
以下Ｎａｔｕｒａｌ Ｒｕｂｂｅｒ Ｓｅｒｕｍ略して
ＮＲＳと呼ぶ）は、いわば天然ゴム生産における産業廃
棄物であり、ゴム産業上は大きな公害発生源となり、天
然ゴム生産国におけるこれの放置は環境保全上看過でき
なくなりつつある。
以下Ｎａｔｕｒａｌ Ｒｕｂｂｅｒ Ｓｅｒｕｍ略して
ＮＲＳと呼ぶ）は、いわば天然ゴム生産における産業廃
棄物であり、ゴム産業上は大きな公害発生源となり、天
然ゴム生産国におけるこれの放置は環境保全上看過でき
なくなりつつある。
まして、ＮＲＳは、多量のタンパク質を含み、有機酸、
糖類、及びその誘導体をふくんでいるので、微生物にと
っては富栄養価をもつものと考えられ、放置すれば、大
きな環境汚染な引き起こすことになりかねないが、反面
、資源化できれば新しい大きなバイオマスとなりうる可
能性もひめでいる。
糖類、及びその誘導体をふくんでいるので、微生物にと
っては富栄養価をもつものと考えられ、放置すれば、大
きな環境汚染な引き起こすことになりかねないが、反面
、資源化できれば新しい大きなバイオマスとなりうる可
能性もひめでいる。
このような天然ゴム漿液は、ゴム工業において利用する
試みがなされており、それらは特願昭６１−３１３６１
２号等において本出願人により開示されている。
試みがなされており、それらは特願昭６１−３１３６１
２号等において本出願人により開示されている。
しかし、ゴム工業以外の分野での有効な利用法は未だ考
えられていない。
えられていない。
一方、微生物工業においては、一般に、微生物はその生
育に色々な栄養因子を要求することが多く、それらは、
アミノ酸、ビタミン、ミネラルなど多様であり、また、
必ずしも一つだけでなく、複数の栄養因子を要求するこ
とも多い、 従って、発酵用の培地には、複数の栄養因
子を供給する目的で、有機窒素源などの天然の有機栄養
が用いられる。
育に色々な栄養因子を要求することが多く、それらは、
アミノ酸、ビタミン、ミネラルなど多様であり、また、
必ずしも一つだけでなく、複数の栄養因子を要求するこ
とも多い、 従って、発酵用の培地には、複数の栄養因
子を供給する目的で、有機窒素源などの天然の有機栄養
が用いられる。
これら発酵培地には、酵母エキス、ポリペプトン、肉エ
キス、脱脂大豆、脱脂大豆加水分解液（ＨＶ Ｐ ）
、 Ｃｏｒｎ ５ｔｅｅｐ Ｌｉｑｕｏｒ（ＣＳＬ）、
綿実ミール、ビーナツツミール、ｐｈａｒｍａｍｅｄ！
ａ ｄｉｓｔｉｌｌｅｒｓ ５ｏｌｕｂｌｅ、家畜血
液、屠殺廃液、カゼイン氷解物など多種多様である。
キス、脱脂大豆、脱脂大豆加水分解液（ＨＶ Ｐ ）
、 Ｃｏｒｎ ５ｔｅｅｐ Ｌｉｑｕｏｒ（ＣＳＬ）、
綿実ミール、ビーナツツミール、ｐｈａｒｍａｍｅｄ！
ａ ｄｉｓｔｉｌｌｅｒｓ ５ｏｌｕｂｌｅ、家畜血
液、屠殺廃液、カゼイン氷解物など多種多様である。
しかも、これらを工業生産の発酵原料とする場合には、
コストが安価なこと、季節的突発的ではなく安定的に供
給できること、品質が安定していることなどが必須であ
る上に、色々な微生物に広く効果のある、普遍的なもの
であることが望ましい、 このような条件を満足するの
は、上記の多数の天然有機栄養源のなかでも、ＭＶＰ％
Ｃ３Ｌ、酵母エキスなどに限られる。
コストが安価なこと、季節的突発的ではなく安定的に供
給できること、品質が安定していることなどが必須であ
る上に、色々な微生物に広く効果のある、普遍的なもの
であることが望ましい、 このような条件を満足するの
は、上記の多数の天然有機栄養源のなかでも、ＭＶＰ％
Ｃ３Ｌ、酵母エキスなどに限られる。
しかし、ＨｖＰやＣ３Ｌはそれぞれ食品工業の副産物と
して製造されている為に、最近では製法の転換とともに
コスト高になったり、供給量が減少しており、酵母エキ
スはコスト高で工業用原料としては難点が多い。
して製造されている為に、最近では製法の転換とともに
コスト高になったり、供給量が減少しており、酵母エキ
スはコスト高で工業用原料としては難点が多い。
〈発明の目的〉
本発明の目的は、天然ゴムラテックス漿液の有効利用を
はかると共に、コストが安価で、安定した品質を定常的
に供給でき微生物の生育に必要な多様な栄養因子を含み
、多種類の微生物に対して広く効果のある微生物の培養
法およびこれを利用した発酵生産物の製造方法を提供し
ようとする。
はかると共に、コストが安価で、安定した品質を定常的
に供給でき微生物の生育に必要な多様な栄養因子を含み
、多種類の微生物に対して広く効果のある微生物の培養
法およびこれを利用した発酵生産物の製造方法を提供し
ようとする。
〈課題を解決するための手段〉
本発明者は、東南アジアのラテックス工場で排出するＮ
ＲＳを原料としてこれを濃縮し、あるいは粉末化して、
液状あるいは粉末のＮＲ３としたものを用いて実験し、
このような液状あるいは粉末のＮＲ３には色々な微生物
に対する生育促進効果や、生育必須因子を含んでいるこ
とを見いだし本発明に至った。
ＲＳを原料としてこれを濃縮し、あるいは粉末化して、
液状あるいは粉末のＮＲ３としたものを用いて実験し、
このような液状あるいは粉末のＮＲ３には色々な微生物
に対する生育促進効果や、生育必須因子を含んでいるこ
とを見いだし本発明に至った。
すなわち、本発明は、天然ゴムラテックスからゴム分を
分離した残りの漿液成分および／または該漿液成分の酵
素分解物を含有する発酵培地を用いて、菌体を増殖する
ことを特徴とする微生物の培養法を提供する。
分離した残りの漿液成分および／または該漿液成分の酵
素分解物を含有する発酵培地を用いて、菌体を増殖する
ことを特徴とする微生物の培養法を提供する。
また、本発明は、天然ゴムラテックスからゴム分を分離
した残りの漿液成分および／または該漿液成分の酵素分
解物を含有する発酵培地を用いて、発酵生産物を得るこ
とを特徴とする発酵生産物の製造方法を提供する。
した残りの漿液成分および／または該漿液成分の酵素分
解物を含有する発酵培地を用いて、発酵生産物を得るこ
とを特徴とする発酵生産物の製造方法を提供する。
以下に本発明の詳細な説明する。
本発明は、発酵培地の少なくとも一部に天然ゴムラテッ
クス漿液（ＮＲ５）および／またはＮＲ３の酵素分解物
を用いることを特徴としている。
クス漿液（ＮＲ５）および／またはＮＲ３の酵素分解物
を用いることを特徴としている。
本発明に用いる天然ゴムラテックス漿液（ＮＲ５）は、
天然ゴムラテックスから凝固剤として、蟻酸、酢酸、硫
酸等を用いてゴム分を凝固し取り除いた、残りの漿液（
Ｓｅｒｕｍ）を用いる。
天然ゴムラテックスから凝固剤として、蟻酸、酢酸、硫
酸等を用いてゴム分を凝固し取り除いた、残りの漿液（
Ｓｅｒｕｍ）を用いる。
天然ゴムラテックスの成分は１例を挙げると第Ａ表に示
す組成である。
す組成である。
第Ａ表
新規ラテックスの組成の１例
この天然ゴムラテックスからゴム炭化水素を凝固させそ
れを除いたものを漿液という。
れを除いたものを漿液という。
成分組成は原料である天然ゴムラテックスの成分によっ
て異なり、厳密に限定することはできないが、粗蛋白質
及び窒素化合物が約５０％、糖質が約３０％、Ｋ％Ｍｇ
％Ｃｕ％Ｆｅ。
て異なり、厳密に限定することはできないが、粗蛋白質
及び窒素化合物が約５０％、糖質が約３０％、Ｋ％Ｍｇ
％Ｃｕ％Ｆｅ。
Ｎａ、Ｃａ、Ｐ等の灰分（無機成分）が約１５％、脂質
０％、水分が約５％、繊維質は０％およびその他の微量
成分となっていて粗蛋白質含有量が、かなりの高水準で
ある。
０％、水分が約５％、繊維質は０％およびその他の微量
成分となっていて粗蛋白質含有量が、かなりの高水準で
ある。
漿液をそのまま用いる場合は、通常天然ゴム製造工程で
得られる漿液の固型分は、約２〜５ｗｔ％であるので、
エバポレーター 遠心分離、濾過等の方法で固型分濃度
を２５〜８０ｗｔ％程度に濃縮する前処理をして、本発
明法に用いるのが良い。
得られる漿液の固型分は、約２〜５ｗｔ％であるので、
エバポレーター 遠心分離、濾過等の方法で固型分濃度
を２５〜８０ｗｔ％程度に濃縮する前処理をして、本発
明法に用いるのが良い。
また、以下に説明する漿液を粉末化したものをそのまま
あるいは水溶液にして用いてもよい、 粉末化されたも
のは保存、運搬等に便利で、工業的に取扱いが容易であ
る。
あるいは水溶液にして用いてもよい、 粉末化されたも
のは保存、運搬等に便利で、工業的に取扱いが容易であ
る。
粉末化に用いる漿液の非ゴム分（固型分）濃度は、２〜
８０ｗｔ％のものを用いることができるが、生産効率、
製造コストおよび工程管理の点で固型分１５〜８０ｗｔ
％の漿液を原料とすることが好ましい。 通常天然ゴム
製造工程で得られる漿液の固型分は、約２〜５ｗｔ％で
あるので、エバポレーター 遠心分離、濾過等の方法で
固型分濃度を２５〜８０ｗｔ％程度に濃縮する前処理を
することが良い。
８０ｗｔ％のものを用いることができるが、生産効率、
製造コストおよび工程管理の点で固型分１５〜８０ｗｔ
％の漿液を原料とすることが好ましい。 通常天然ゴム
製造工程で得られる漿液の固型分は、約２〜５ｗｔ％で
あるので、エバポレーター 遠心分離、濾過等の方法で
固型分濃度を２５〜８０ｗｔ％程度に濃縮する前処理を
することが良い。
上記漿液を１５０〜２５０℃の高温雰囲気のスプレード
ライ容器内へ微小滴状にて供給し、瞬時に水分を蒸発さ
せて粉末状とする。 このためクローズドシステムのス
プレードライ方式を用いる。 クローズドシステムのス
プレードライ方式は、液体試料を微粒化された液滴を熱
風と瞬間的に接触させて、水分を蒸発させ乾燥して粉末
化するものであり、加圧ノズルや二流体ノズルで微粒化
するノズル式と、高速回転円板で微粒化するディスク式
がある。 いずれを用いてもよいがディスク式が効率良
く、好ましい、 ディスクの回転数は１０，０００〜３
０，０００ｒｐｍ 、ノズルの圧力は０．５〜２ 、０
ｋｇ／ｃｍ’が良い、 回転数の圧力がこの範囲外に
なると得られる粉末の大きさが１０〜１００μの範囲外
となり、１０μ未満の粉末であると吸湿して再凝固しや
すくなったり、スプレードライヤーの内壁に付着したり
凝集したりして回収率が悪くなり、得られる粉末がダン
ゴ状のものとなり微粒化しない、 １００μを超える
と非ゴム成分を工業的に利用する際に水や溶剤に溶解し
にくく、またカサが大きくなり運搬に不便となる。
ライ容器内へ微小滴状にて供給し、瞬時に水分を蒸発さ
せて粉末状とする。 このためクローズドシステムのス
プレードライ方式を用いる。 クローズドシステムのス
プレードライ方式は、液体試料を微粒化された液滴を熱
風と瞬間的に接触させて、水分を蒸発させ乾燥して粉末
化するものであり、加圧ノズルや二流体ノズルで微粒化
するノズル式と、高速回転円板で微粒化するディスク式
がある。 いずれを用いてもよいがディスク式が効率良
く、好ましい、 ディスクの回転数は１０，０００〜３
０，０００ｒｐｍ 、ノズルの圧力は０．５〜２ 、０
ｋｇ／ｃｍ’が良い、 回転数の圧力がこの範囲外に
なると得られる粉末の大きさが１０〜１００μの範囲外
となり、１０μ未満の粉末であると吸湿して再凝固しや
すくなったり、スプレードライヤーの内壁に付着したり
凝集したりして回収率が悪くなり、得られる粉末がダン
ゴ状のものとなり微粒化しない、 １００μを超える
と非ゴム成分を工業的に利用する際に水や溶剤に溶解し
にくく、またカサが大きくなり運搬に不便となる。
スプレードライ容器内の乾燥温度を１３０℃以下に保ち
、特に試料入口乾燥温度を１５０〜２５０℃とし、試料
出口温度５０〜１３０℃とすることが好ましい、 また
、減圧乾燥による方法を用いて粉末化してもよい。
、特に試料入口乾燥温度を１５０〜２５０℃とし、試料
出口温度５０〜１３０℃とすることが好ましい、 また
、減圧乾燥による方法を用いて粉末化してもよい。
以上説明したように、漿液はそのまま用いてもよいし、
あらかじめプロテアーゼ等の蛋白質分解酵素や、麹等の
菌体酵素等で処理し加水分解した後に用いてもよい。
あらかじめプロテアーゼ等の蛋白質分解酵素や、麹等の
菌体酵素等で処理し加水分解した後に用いてもよい。
加水分解する場合は、ＮＲＳをｐＨ一定として、不溶性
成分はそのままにして蛋白質分解酵素を添加し、加水分
解処理するのが好ましい。
成分はそのままにして蛋白質分解酵素を添加し、加水分
解処理するのが好ましい。
ＮＲ３および／またはＮＲ３酵素分解物を、少なくとも
一部に用いる発酵培地は、通常微生物の発酵培地として
用いられるものであればいかなるものでもよく、その形
態も、液体培地、固体培地、半固体培地等のいかなるも
のでもよい。
一部に用いる発酵培地は、通常微生物の発酵培地として
用いられるものであればいかなるものでもよく、その形
態も、液体培地、固体培地、半固体培地等のいかなるも
のでもよい。
ＮＲＳお゛よび／またはＮＲ３酵素分解物は、これらの
発酵培地中の窒素源の一部または全部と置に換えて用い
るのが好ましい。
発酵培地中の窒素源の一部または全部と置に換えて用い
るのが好ましい。
粉末ＮＲ３は、元素分析値では
Ｃ２２％
Ｈ５，５％
Ｎ ９．５％
Ａｓｈ １８．５％
であるが、この内、有機窒素のバランスをみてみると、
不溶性窒素化合物が６％、不溶性無窒素化合物が１．５
％、可溶性有機窒素化合物が１６．５％、可溶性無窒素
化合物が２８％、その他、硫酸アンモニウム２８％、灰
分１８％、水分２％となりている。
不溶性窒素化合物が６％、不溶性無窒素化合物が１．５
％、可溶性有機窒素化合物が１６．５％、可溶性無窒素
化合物が２８％、その他、硫酸アンモニウム２８％、灰
分１８％、水分２％となりている。
可溶性無窒素化合物２８％中発酵原料となりそうな有機
酸や還元糖の含量は小量であり、ＮＲ３は発酵の炭素源
とはなりにくいと考えられるが、単純な有機窒素源であ
るとも言えない。
酸や還元糖の含量は小量であり、ＮＲ３は発酵の炭素源
とはなりにくいと考えられるが、単純な有機窒素源であ
るとも言えない。
後に実施例で具体的に示すように、実験結果によれば、
ＮＲＳは、その形態が液体であれ、粉末であれ、細菌、
酵母において広く生育促進効果を示し、培地有機窒素源
に酵母エキス、ＭＶＰ、ＣＳＬ等を用いる発酵ではこれ
らをＮＲＳに置き換えて十分発酵生産の目的を達するこ
とが明らかとなつた。
ＮＲＳは、その形態が液体であれ、粉末であれ、細菌、
酵母において広く生育促進効果を示し、培地有機窒素源
に酵母エキス、ＭＶＰ、ＣＳＬ等を用いる発酵ではこれ
らをＮＲＳに置き換えて十分発酵生産の目的を達するこ
とが明らかとなつた。
また、ＮＲＳおよび／またはＮＲＳ酵素分解物を発酵培
地の少なくとも一部として用いる効果は、細菌の場合は
、好気性菌でも、嫌気性菌でも同様であった。 さらに
、一部の微生物では、ＮＲ３を培地に添加する前に、予
めプロプアーゼ処理によって加水分解しておいても、加
水分解せずにそのまま培地に添加しても同様の効果が見
られた。
地の少なくとも一部として用いる効果は、細菌の場合は
、好気性菌でも、嫌気性菌でも同様であった。 さらに
、一部の微生物では、ＮＲ３を培地に添加する前に、予
めプロプアーゼ処理によって加水分解しておいても、加
水分解せずにそのまま培地に添加しても同様の効果が見
られた。
このような実験事実を考えると、ＮＲ３の微生物に対す
る効果は、含まれるタンパク質やそれが分解して生ずる
アミノ酸の効果だけによるものではなく、ＮＲ３の中に
含まれる未同定の物質や、それとタンパク質との複合効
果によるものと考えられる。
る効果は、含まれるタンパク質やそれが分解して生ずる
アミノ酸の効果だけによるものではなく、ＮＲ３の中に
含まれる未同定の物質や、それとタンパク質との複合効
果によるものと考えられる。
〈実施例〉
以下実施例により、本発明を具体的に説明する。
本発明は、これらの実施例に限定されない。
（実施例１）
グルコース１０ｇ、ＭｇＳＯ４・７Ｈ３０，３４ｍｇ％
ＮａＨ２ＰＯ４” １２Ｈｚ ０１７７ｍｇ％ＫＣＬ
１０ｍｇに、ＮＲ３のプロテアーゼ分解液（ＮＲ３粉末
２０ｇをＭ／３０リン酸バッファーｐＨ７，ｏ ＩＪ
Ｚに添加し、不溶性物質はそのままにして、これにプロ
ナーゼ２００ｍｇを添加し、３０℃１２ｈｒ反応させた
もの、 タンパク質の分解率は約９４％である）をＮＲ
３粉末換算で２ｇ相当量を添加し、ｐｉ（を７．０に調
整したのち、純水でＩＪ：Ｌに希釈した。
ＮａＨ２ＰＯ４” １２Ｈｚ ０１７７ｍｇ％ＫＣＬ
１０ｍｇに、ＮＲ３のプロテアーゼ分解液（ＮＲ３粉末
２０ｇをＭ／３０リン酸バッファーｐＨ７，ｏ ＩＪ
Ｚに添加し、不溶性物質はそのままにして、これにプロ
ナーゼ２００ｍｇを添加し、３０℃１２ｈｒ反応させた
もの、 タンパク質の分解率は約９４％である）をＮＲ
３粉末換算で２ｇ相当量を添加し、ｐｉ（を７．０に調
整したのち、純水でＩＪ：Ｌに希釈した。
（比較例１）
一方、グルコース１０ｇ、ＭｇＳＯ４
７Ｈ２０，３４ｍｇ％Ｎ ａＨ２ＰＯ４” １２Ｈ，０
，７７ｍｇ％ ＫＣＬ、１０ｍｇに、酵母エキス（オリ
エンタル酵母社製）５ｇとポリペプトン（大五宋養製）
５ｇを加えＰＨ調整後純水によって１ｆｔとしたものを
対照とした。
，７７ｍｇ％ ＫＣＬ、１０ｍｇに、酵母エキス（オリ
エンタル酵母社製）５ｇとポリペプトン（大五宋養製）
５ｇを加えＰＨ調整後純水によって１ｆｔとしたものを
対照とした。
これら実施例１および比較例１０両培地に、チオグリオ
キシレート（ＴＧＣ）液体培地に３０℃で一夜培養した
ストレブトコッカスラクテイス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃ
ｃｕｓ Ｉａｃｔｉｓ） （ＡＴＣＣ１９４３５）を２
０ｍＩＬ接種し、３０℃で静置培養した。培養１２時間
後の菌体量を乾燥菌体重量法により、生成した乳酸量を
ＨＰＬＣによって定量した。
キシレート（ＴＧＣ）液体培地に３０℃で一夜培養した
ストレブトコッカスラクテイス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃ
ｃｕｓ Ｉａｃｔｉｓ） （ＡＴＣＣ１９４３５）を２
０ｍＩＬ接種し、３０℃で静置培養した。培養１２時間
後の菌体量を乾燥菌体重量法により、生成した乳酸量を
ＨＰＬＣによって定量した。
ＮＲＳを含む培地においては、乾燥菌体重量１．２８ｇ
／Ｊ２、乳酸生成ｆｉ９．２ｇ／ｌが得られた。 一方
、酵母エキス、ポリペプトンを含む対照培地では、乾燥
菌体重量１．２５ｇ／ｌ、乳酸生成量９．０ｇ／ｉが得
られた。
／Ｊ２、乳酸生成ｆｉ９．２ｇ／ｌが得られた。 一方
、酵母エキス、ポリペプトンを含む対照培地では、乾燥
菌体重量１．２５ｇ／ｌ、乳酸生成量９．０ｇ／ｉが得
られた。
結果を表１に示す。
表
（比較例２）
キャラサバ澱粉の酵素糖化液（キャラサバ澱粉１００ｇ
を５００ｍＩＬの純水に溶解の後、α−アミラーゼ６０
０ｍｇを添加して７０℃に加温して３０分間保持し、液
化を行う、 然る後、４０℃に冷却し、グルコアミラー
ゼを添加して、ゆっくり振とうしながら２４時間反応さ
せた糖化液）をグルコース１０ｇ相当量計量し、これに
酵母エキス０．３ｇ、ペプトン０．５ｇを添加し、ｐＨ
６，２に調整の後純水で１００ｍＪ２に希釈したものを
基準培地とした。
を５００ｍＩＬの純水に溶解の後、α−アミラーゼ６０
０ｍｇを添加して７０℃に加温して３０分間保持し、液
化を行う、 然る後、４０℃に冷却し、グルコアミラー
ゼを添加して、ゆっくり振とうしながら２４時間反応さ
せた糖化液）をグルコース１０ｇ相当量計量し、これに
酵母エキス０．３ｇ、ペプトン０．５ｇを添加し、ｐＨ
６，２に調整の後純水で１００ｍＪ２に希釈したものを
基準培地とした。
（実施例２）
一方、キャラサバ澱粉の酵素糖化液をグルコース１０ｇ
相当量計量し、これにＮＲＳ粉末（プロテアーゼ処理し
ないもの）０．３ｇとペプトン０．５ｇを添加し、ｐＨ
６，２に調整の後、純水で１００ｍｆｔに希釈したもの
を検討培地とした。
相当量計量し、これにＮＲＳ粉末（プロテアーゼ処理し
ないもの）０．３ｇとペプトン０．５ｇを添加し、ｐＨ
６，２に調整の後、純水で１００ｍｆｔに希釈したもの
を検討培地とした。
（比較例３および４）
また、キャラサバ澱粉の酵素糖化液をグルコース１０ｇ
相当量計量し、ペプトン０．５ｇを添加し、ｐＨ６，２
に調整の後純水で１００ｍｊ２に希釈したもの（比較例
３）、および、キャラサバ澱粉の酵素糖化液をグルコー
ス１０ｇ相当量計量し、あとは何も加えない培地（比較
例４）を比較培地とした。
相当量計量し、ペプトン０．５ｇを添加し、ｐＨ６，２
に調整の後純水で１００ｍｊ２に希釈したもの（比較例
３）、および、キャラサバ澱粉の酵素糖化液をグルコー
ス１０ｇ相当量計量し、あとは何も加えない培地（比較
例４）を比較培地とした。
これら４種類の実施例２および比較例２〜４の培地を発
酵瓶（ｍｅｉｓｓｅｌ）に入れて殺菌し、Ｙ Ｍ （Ｄ
ｉｆｃｏ）液体培地で３０℃、２日培養したザイモモナ
スモビリス（Ｚｙｍｏｍｏｎａｓ ｍｏｂｌｌｌｓ）Ｎ
ＲＲＬ Ｂ１４０２３を５ｍｊｌ接種後２日培養し、乾
燥菌体重量と生成したエタノールを測定した。
酵瓶（ｍｅｉｓｓｅｌ）に入れて殺菌し、Ｙ Ｍ （Ｄ
ｉｆｃｏ）液体培地で３０℃、２日培養したザイモモナ
スモビリス（Ｚｙｍｏｍｏｎａｓ ｍｏｂｌｌｌｓ）Ｎ
ＲＲＬ Ｂ１４０２３を５ｍｊｌ接種後２日培養し、乾
燥菌体重量と生成したエタノールを測定した。
粘液に酵母エキス、ペプトンを加えた培地（比較例２）
では、乾燥菌体重量２．０５ｍｇ７ｍａｌとエタノ−５
，２２ｍｊ！が得られ、ＮＲＳを用いた培地（実施例２
）では、菌体重量１ 、 ６１ ｔａｇ／ｍｆＬとエタ
ノール５．０１ｍｊ！がえられた。 一方、糖液にペプ
トンだけを加えた培地（比較例３）では、菌体重量０．
８４ｍｇ／ｍｆＬとエタノール３．８５ｍｆｔがえられ
たが、粘液だけの培地（比較例４）では菌の生育、エタ
ノールの生成共全く認められなかった。
では、乾燥菌体重量２．０５ｍｇ７ｍａｌとエタノ−５
，２２ｍｊ！が得られ、ＮＲＳを用いた培地（実施例２
）では、菌体重量１ 、 ６１ ｔａｇ／ｍｆＬとエタ
ノール５．０１ｍｊ！がえられた。 一方、糖液にペプ
トンだけを加えた培地（比較例３）では、菌体重量０．
８４ｍｇ／ｍｆＬとエタノール３．８５ｍｆｔがえられ
たが、粘液だけの培地（比較例４）では菌の生育、エタ
ノールの生成共全く認められなかった。
結果を表２に示す。
表 ２
（比較例５）
実施例２で用いたと同様の糖液（キャラサバ澱粉の酵素
糖化液）を、グルコース１０ｇ相当計量し、これに酵母
エキス０．３ｇ、マルトエキス０．３ｇ、ペプトン０．
５ｇを添加し、ｐＨ６，２に調整の後純水で１００ｍＡ
に希釈したものを基準培地とした。
糖化液）を、グルコース１０ｇ相当計量し、これに酵母
エキス０．３ｇ、マルトエキス０．３ｇ、ペプトン０．
５ｇを添加し、ｐＨ６，２に調整の後純水で１００ｍＡ
に希釈したものを基準培地とした。
（実施例３）
一方、実施例２で用いたと同様の粘液をグルコース１０
ｇ相当量計量し、これにＮＲ３粉末（プロテアーゼ処理
しないもの）０．３ｇとペプトン０．５ｇを添加し、ｐ
Ｈ６，２に調整の後、純水で１００ｍＪ！に希釈したも
のを検討培地とした。
ｇ相当量計量し、これにＮＲ３粉末（プロテアーゼ処理
しないもの）０．３ｇとペプトン０．５ｇを添加し、ｐ
Ｈ６，２に調整の後、純水で１００ｍＪ！に希釈したも
のを検討培地とした。
（比較例６および７）
また、実施例２で用いたと同様の糖液をグルコース１０
ｇ相当量計量し、ペプトン０．５ｇを添加し、ｐＨ６，
２に調整の後純水で１００ｍ１Ｌに希釈したもの（比較
例６）、および、糖液をグルコース１０ｇ相当量計量し
、あとは何も加えない培地（比較例７）を比較培地とし
た。
ｇ相当量計量し、ペプトン０．５ｇを添加し、ｐＨ６，
２に調整の後純水で１００ｍ１Ｌに希釈したもの（比較
例６）、および、糖液をグルコース１０ｇ相当量計量し
、あとは何も加えない培地（比較例７）を比較培地とし
た。
これら４種類（実施例３および比較例５〜７）培地を発
酵瓶（ｍｅｉｓｓｅｌ）に入れて殺菌し、グルコース１
０ｇ／ｕ、酵母エキス３ｇ／Ｉ１．、マルトエキス３ｇ
／４２、ペプトン５ｇ／ＩＬ（ｐＨ６，２）からなる前
培養培地で３０℃、２日培養しサッカロミセスウラルム
（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｕｒａｒｕｍ） ＩＦ
Ｏ０５６５を５１接種後２日培養し、乾燥菌体重量と生
成したエタノールを測定した。
酵瓶（ｍｅｉｓｓｅｌ）に入れて殺菌し、グルコース１
０ｇ／ｕ、酵母エキス３ｇ／Ｉ１．、マルトエキス３ｇ
／４２、ペプトン５ｇ／ＩＬ（ｐＨ６，２）からなる前
培養培地で３０℃、２日培養しサッカロミセスウラルム
（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｕｒａｒｕｍ） ＩＦ
Ｏ０５６５を５１接種後２日培養し、乾燥菌体重量と生
成したエタノールを測定した。
粘液に酵母エキス、マルトエキス、ペプトンを加えた培
地（比較例５）では、乾燥菌体重量４ 、 ９０ ｔａ
ｇ／ｓｉｔとエタノール４．８９ｍＪ２が得られ、Ｎ’
ＲＳを用いた培地（実施例３）では、菌体重量４ 、０
４ ｓ＋ｇ／ｍｌ！とエタノール４．５８ｍＡかえられ
た。 一方、粘液にペプトンだけを加えた培地（比較例
６）では、菌体重量０ 、 ６４ ｍｇ／＋ＩＩＪ２と
エタノール１．９９ｍＩＬがえられた。 また、粘液だ
けの培地（比較例７）でも菌体重量Ｑ 、 ３３ ｍｇ
／ｍｕとエタノール０．８４ｙｎＪ！かえられた。
地（比較例５）では、乾燥菌体重量４ 、 ９０ ｔａ
ｇ／ｓｉｔとエタノール４．８９ｍＪ２が得られ、Ｎ’
ＲＳを用いた培地（実施例３）では、菌体重量４ 、０
４ ｓ＋ｇ／ｍｌ！とエタノール４．５８ｍＡかえられ
た。 一方、粘液にペプトンだけを加えた培地（比較例
６）では、菌体重量０ 、 ６４ ｍｇ／＋ＩＩＪ２と
エタノール１．９９ｍＩＬがえられた。 また、粘液だ
けの培地（比較例７）でも菌体重量Ｑ 、 ３３ ｍｇ
／ｍｕとエタノール０．８４ｙｎＪ！かえられた。
結果を表３に示す。
表
（実施例４および比較例８〜１０）
グルコース１．０％、尿素０．０７％、ヘキサメタリン
酸ソーダ０．１７％、ＫＣＪＩｏ、１％、Ｍｇ５Ｏ，・
７Ｈ１０，０，０４％からなる培地（ｐＨ７，０）を基
本とし、 ■ 他にはなにも加えないもの（比較例８）■ 脱脂大
豆酸加水分解物（ＨＶＰ）を０．５ｖａＪＺ／ｄｆＬの
濃度になるよう添加したもの（比較例９） ■ 酵母エキス０．２５％を添加したもの（比較例１０
） ■ ＮＲ３粉末０．２５％を添加したもの（実施例４） の４種の培地を作成し、これを５００ ｍｆｔ振とうフ
ラスコに２０ｍＪ２づつ分注し殺菌の後、グルコース１
．０％、酵母エキス１．０％、ポリペプトン１．０％、
ＮａＣ１，０５％からなる前培養培地（ｐＨ７，０）に
シュードモナス・エルギノサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ
ａｅｒｕｇｌｎｏｓａ）にＹＵ−１（ＦＥＢＭ Ｐ−
９７０１）を接種し、３０℃−夜振とう培養した培養液
を１００μｍを添加して、３０℃で３日間振どう培養を
行い、生成した乾燥菌体重量を測定した。 培地■（比
較例８）では菌の生育は全く認められなかった。 培地
■（比較例９）では乾燥菌体重量は２．３ｍｇ／ｍＡに
、培地■（比較例１０）では乾燥菌体重量は２ 、９
ｍｇ７ｍｆｔに、培地■（実施例４）では乾燥菌体重量
は３．１Ｂ／ｍλに、それぞれ達した。
酸ソーダ０．１７％、ＫＣＪＩｏ、１％、Ｍｇ５Ｏ，・
７Ｈ１０，０，０４％からなる培地（ｐＨ７，０）を基
本とし、 ■ 他にはなにも加えないもの（比較例８）■ 脱脂大
豆酸加水分解物（ＨＶＰ）を０．５ｖａＪＺ／ｄｆＬの
濃度になるよう添加したもの（比較例９） ■ 酵母エキス０．２５％を添加したもの（比較例１０
） ■ ＮＲ３粉末０．２５％を添加したもの（実施例４） の４種の培地を作成し、これを５００ ｍｆｔ振とうフ
ラスコに２０ｍＪ２づつ分注し殺菌の後、グルコース１
．０％、酵母エキス１．０％、ポリペプトン１．０％、
ＮａＣ１，０５％からなる前培養培地（ｐＨ７，０）に
シュードモナス・エルギノサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ
ａｅｒｕｇｌｎｏｓａ）にＹＵ−１（ＦＥＢＭ Ｐ−
９７０１）を接種し、３０℃−夜振とう培養した培養液
を１００μｍを添加して、３０℃で３日間振どう培養を
行い、生成した乾燥菌体重量を測定した。 培地■（比
較例８）では菌の生育は全く認められなかった。 培地
■（比較例９）では乾燥菌体重量は２．３ｍｇ／ｍＡに
、培地■（比較例１０）では乾燥菌体重量は２ 、９
ｍｇ７ｍｆｔに、培地■（実施例４）では乾燥菌体重量
は３．１Ｂ／ｍλに、それぞれ達した。
結果を表４に示す。
表 ４
（実施例５）
グルコース１０％、ＫＨ２ＰＯ４０，１％、Ｍ ｇ Ｓ
０４７ Ｈｚ Ｏ５０，０４％、ＦｅＳＯ４７Ｈ２０
，０，００１％、 ＭｎＳＯ４争４Ｈ２０，０，００１％、ビタミンＢ、Ｚ
ｏｏγ／１、ビオチン３γ／Ｉｔからなる培地に、液状
ＮＲ５を１． ＯｔｔｒｆＬ／ｄＪｌの濃度で添加し、
ｐＨを７．０に調整の後殺菌し、全容１ｊ！のミニジャ
ーファーメンタ−に３００ｍｊ２を張り込んだ。
０４７ Ｈｚ Ｏ５０，０４％、ＦｅＳＯ４７Ｈ２０
，０，００１％、 ＭｎＳＯ４争４Ｈ２０，０，００１％、ビタミンＢ、Ｚ
ｏｏγ／１、ビオチン３γ／Ｉｔからなる培地に、液状
ＮＲ５を１． ＯｔｔｒｆＬ／ｄＪｌの濃度で添加し、
ｐＨを７．０に調整の後殺菌し、全容１ｊ！のミニジャ
ーファーメンタ−に３００ｍｊ２を張り込んだ。
（比較例１１）
一方ＮＲ５以外は実施例５と全く同様の組成の培地に、
ＮＲ３の替わりに、比較例９で用いたと同様の脱脂大豆
塩酸加水分解物を（ＨＶＰ）を０． ７５ ｍｆｌ／
ｄｆＬ（Ｄ濃度ニナルよう添加したものを、先と同様ｐ
Ｈを７．０に調整の後殺菌し、全容１１のミニジャーフ
ァーメンタ−に３００ｍｆｔを張り込み対照とした。
ＮＲ３の替わりに、比較例９で用いたと同様の脱脂大豆
塩酸加水分解物を（ＨＶＰ）を０． ７５ ｍｆｌ／
ｄｆＬ（Ｄ濃度ニナルよう添加したものを、先と同様ｐ
Ｈを７．０に調整の後殺菌し、全容１１のミニジャーフ
ァーメンタ−に３００ｍｆｔを張り込み対照とした。
この両ジャー（実施例５および比較例１１）に、グルコ
ース１．０％、酵母エキス１．０％、ポリペプトン１．
０％、ＮａＣｌ２．０．５％からなる前培養培地（ｐＨ
７，０）にプレヒハクテリウムフラブム（Ｂｒｅｖｌｂ
ａｃｔｅｒｌ ｉｕｍｆｌａｖｕａ＋） ＡＴＣＣ１４
０６７を接種し、３０℃−夜振どう培養した培養液を１
５ｍ１添加して、温度３４℃、通気攪拌は１ ／ ２
ｖ ｖ ｍ （Ｖｏｌｕｍｅ／Ｖｏ１ｕＩｌｅ／ｌ１
ｉｎｉｔ、）、１２００ｒｐｍ、ｐＨ制御はアモニア水
をフィードしながらｐＨを７．５に制御する方法で培養
した。 ３０時間培養の後、脱脂大豆塩酸加水分解物を
用いた培養液（比較例１１）には対糖４６．５％のグル
タミン酸が蓄積し、液状ＮＲ５を用いた培養液（実施例
５）には対糖４８．２％のグルタミン酸が蓄積していた
。
ース１．０％、酵母エキス１．０％、ポリペプトン１．
０％、ＮａＣｌ２．０．５％からなる前培養培地（ｐＨ
７，０）にプレヒハクテリウムフラブム（Ｂｒｅｖｌｂ
ａｃｔｅｒｌ ｉｕｍｆｌａｖｕａ＋） ＡＴＣＣ１４
０６７を接種し、３０℃−夜振どう培養した培養液を１
５ｍ１添加して、温度３４℃、通気攪拌は１ ／ ２
ｖ ｖ ｍ （Ｖｏｌｕｍｅ／Ｖｏ１ｕＩｌｅ／ｌ１
ｉｎｉｔ、）、１２００ｒｐｍ、ｐＨ制御はアモニア水
をフィードしながらｐＨを７．５に制御する方法で培養
した。 ３０時間培養の後、脱脂大豆塩酸加水分解物を
用いた培養液（比較例１１）には対糖４６．５％のグル
タミン酸が蓄積し、液状ＮＲ５を用いた培養液（実施例
５）には対糖４８．２％のグルタミン酸が蓄積していた
。
〈発明の効果〉
本発明法によれば、従来廃棄されてきた天然ゴムラテッ
クス漿液が有効に利用できる。
クス漿液が有効に利用できる。
また、本発明法は、多種類の微生物に対して広く効果の
ある微生物培養法であり、発酵生産物が高収率で得られ
る。
ある微生物培養法であり、発酵生産物が高収率で得られ
る。
また、発酵培養地に天然ゴムラテックス漿液および／ま
たはその酵素分解物を用いるので、発酵培地のコストが
安価で、品質が安定し、定常的に供給可能で多種類の微
生物の生育に必要な多様な栄養因子が得られる。
たはその酵素分解物を用いるので、発酵培地のコストが
安価で、品質が安定し、定常的に供給可能で多種類の微
生物の生育に必要な多様な栄養因子が得られる。
手続ネ甫正書（自発）
１、事件の表示
昭和６３年特許願第４３１４０号
２、発明の名称
微生物の培養法およびこれを利用した発酵生産物の製造
方法３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 名 称 （６７１）横浜ゴム株式会社４、代理人 住 所 〒１０１ 電話８６４−４４９８ 東京都千代田区岩本町３丁目２番２号 ６、補正の内容 （１）明細書第１２頁１０〜１１行目「プロプアーゼ」
を「プロテアーゼ」に補正する。
方法３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 名 称 （６７１）横浜ゴム株式会社４、代理人 住 所 〒１０１ 電話８６４−４４９８ 東京都千代田区岩本町３丁目２番２号 ６、補正の内容 （１）明細書第１２頁１０〜１１行目「プロプアーゼ」
を「プロテアーゼ」に補正する。
（２）同第１９頁９行目「５１」をｒ５ｍＪ！」に補正
する。
する。
（３）同第２１頁８行目ｒＮａｃｊ１．０５％」をｒＮ
ａｃｆｔｏ、５％」に補正する。
ａｃｆｔｏ、５％」に補正する。
（４）同第２２頁表４の下から７〜８行目「・・・の濃
度で添加し」を「・・・の濃度になるよう添加し」に補
正する。
度で添加し」を「・・・の濃度になるよう添加し」に補
正する。
明細書の「発明の詳細な説明」の欄
Claims (2)
- （１）天然ゴムラテックスからゴム分を分離した残りの
漿液成分および／または該漿液成分の酵素分解物を含有
する発酵培地を用いて、菌体を増殖することを特徴とす
る微生物の培養法。 - （２）天然ゴムラテックスからゴム分を分離した残りの
漿液成分および／または該漿液成分の酵素分解物を含有
する発酵培地を用いて、発酵生産物を得ることを特徴と
する発酵生産物の製造方法。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63043140A JPH02265469A (ja) | 1988-02-25 | 1988-02-25 | 微生物の培養法およびこれを利用した発酵生産物の製造方法 |
| US07/314,842 US5026641A (en) | 1988-02-25 | 1989-02-24 | Bacteria culture and fermentation using the same |
| EP89301903A EP0330518A3 (en) | 1988-02-25 | 1989-02-27 | Bacteria culture and fermentation using the same |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63043140A JPH02265469A (ja) | 1988-02-25 | 1988-02-25 | 微生物の培養法およびこれを利用した発酵生産物の製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH02265469A true JPH02265469A (ja) | 1990-10-30 |
Family
ID=12655533
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63043140A Pending JPH02265469A (ja) | 1988-02-25 | 1988-02-25 | 微生物の培養法およびこれを利用した発酵生産物の製造方法 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5026641A (ja) |
| EP (1) | EP0330518A3 (ja) |
| JP (1) | JPH02265469A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2009008206A1 (ja) * | 2007-07-10 | 2009-01-15 | Shigadry With Earth Co., Ltd. | エタノールの製造方法 |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2854119B2 (ja) * | 1990-10-23 | 1999-02-03 | 有限会社土壌微生物バイオ研究所 | 醗酵生成物およびその製造方法 |
| DE69307040T2 (de) * | 1992-07-22 | 1997-07-03 | Tokyo Electric Co Ltd | Papiervorschubapparat für Drucker |
| US7132247B1 (en) * | 1998-09-17 | 2006-11-07 | Regents Of The University Of Minnesota | Composite devices incorporating biological material and methods |
| CA2372399C (en) * | 2002-02-19 | 2010-10-26 | Long Manufacturing Ltd. | Low profile finned heat exchanger |
| WO2005014805A1 (en) * | 2003-08-08 | 2005-02-17 | Regents Of The University Of Minnesota | A structured material for the production of hydrogen |
| CN107418917A (zh) * | 2017-08-22 | 2017-12-01 | 云南柏昇生物科技有限公司 | 一种天然橡胶乳微生物保鲜菌及其制备方法和应用 |
| CN115227630A (zh) * | 2021-04-22 | 2022-10-25 | 云南省热带作物科学研究所 | 天然橡胶乳清发酵产物提取物、其制备方法及用途 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US1259794A (en) * | 1917-01-08 | 1918-03-19 | Gen Rubber Co | Rubber coagulum or similar material and process for the preparation of same for vulcanization. |
| US2097481A (en) * | 1933-01-09 | 1937-11-02 | Wallerstein Leo | Rubber |
| US4338399A (en) * | 1980-09-15 | 1982-07-06 | Standard Oil Company (Indiana) | Process for recovering hydrocarbons from hydrocarbon-containing biomass |
-
1988
- 1988-02-25 JP JP63043140A patent/JPH02265469A/ja active Pending
-
1989
- 1989-02-24 US US07/314,842 patent/US5026641A/en not_active Expired - Fee Related
- 1989-02-27 EP EP89301903A patent/EP0330518A3/en not_active Withdrawn
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2009008206A1 (ja) * | 2007-07-10 | 2009-01-15 | Shigadry With Earth Co., Ltd. | エタノールの製造方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0330518A2 (en) | 1989-08-30 |
| US5026641A (en) | 1991-06-25 |
| EP0330518A3 (en) | 1990-06-27 |
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