JPH02210242A - 吸着性表面を備えた器具およびその製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は結合反応、たとえば抗体−抗原結合または核酸
ハイブリダイゼーションを実施するための吸着性表面を
備えた器具の分野に関する。

（従来の技術） 顕微鏡スライドは一般にたとえば７５＋ｍないしは３イ
ンチ（７６，２ｍ＋）の長さく高さ）およびたとえば２
５關ないしは１インチ（２５，４ｍ＋）の幅をもつ長方
形のガラス製物体である。この種のスライドは種々の厚
さ、たとえば０．９，１３０または１．２Ｉｗｆｆｉに
作られる。Ｎ々の目的で、たとえば利用者がスライドに
試料固定情報を記入しうるように、スライド前面の一部
または全体を艶消しすることは一般に行われる。このよ
うな艶消しその他の理由のため、前面の一部が粗面化ま
たは彫刻される。スライド前面の他の部分は光学的に透
明であるのに十分な程度に平坦な状態に保たれるであろ
う。

米国特許第４，４８１，２４６．４，６２４，８８２お
よび４．６９７，９１４号明細書に記載され、スーパー
フロスト（５ｔｌＰＥＲＦＲＯ３Ｔ）の登録商標で市販
されている部分被膜スライドはスライド表面の一端（た
とえば末端１０ｍｍ）に厚さ２０浦のポリマー被膜を備
えている。

ブリガティの米国特許第４，７３１，３３５号（英国特
許公開第２，１８０，６４７号も参照されたい、１９８
７年４月１日公表）明細書には、毛管作用を利用した方
法に用いられる改良された顕微鏡スライドが記載されて
いる。２枚の顕微鏡スライドが前面を対向させて配置さ
れ、かつこれらの面が毛管間隙（たとえば約５０〜５０
０，１ｍｌの厚さ）だけ離れた状態に保たれる。この間
隙は、提示された形態においては、並置された前面の上
部間に固定または保持されたシム（チーブまたはカバー
スリップ）により定められる。提示された他の形態にお
いては、この間隙はこれらのスライドの一方にある被膜
によって定められる。

この種の顕Ｗ＆鐘スライドは組織切片その他の薄い固体
試料の免疫学的分析および核酸ハイブリダイゼーシゴン
分析には利用されているが、この種のスライド上に備え
られた平滑なガラス表面は液体試料の吸着は助成しない
、その代わりに、液体試料（直接的に、たとえば血液、
血清もしくは尿、あるいは間接的に、たとえば抽出液、
またはカラムもしくは電気泳動ケル上を走行した材料）
は−般にこの種の分析のために吸着性ポリマー表面に施
される。この種の表面の例はニトロセルロス、ポリエス
テル、ポリアミド（ナイロン）または他の天然、半合成
もしくは合成ポリマー製のプロッティングフィルターで
ある。この種の材料はシュライヘル・ラント・シュル、
′濾過、分離およびライフサイエンス研究用品”、Ｆ１
〜Ｆ９頁（１９８５年カタログ）（Ｆ３頁の参考文献も
参照されたい）に説明されている。

この種のが材を用いる方法は一般に、液体が吸着材に施
される各工程に続いて多数回の洗浄工程を伴う、たとえ
ばフィルターハイブリダイゼーション法の場合、固定化
試料を含有するフィルターにプローブ試薬を施し、変性
条件下、次いで再生条件下にインキュベートし、次いで
３種の異なるストリンジエンシーのＭ衝液で３回洗浄し
て、ハイブリダイズしていないプローブを除去する一試
料を炉材にスポットしたのち、もしくは炉材からプロッ
トしたのち、各種の試薬を吸着試料成分に施したのち、
および各種の試薬（たとえば色原体）を固定化標識（た
とえば抗体またはプローブを介して試料の被分析体成分
に結合した酵素）に施したのちにも、同じ多数回洗浄が
要求される。

（発明の詳細な説明） 本発明は、試料を固定化したのち多工程で毛管作用によ
り処理しうる吸着性ポリマー表面を備えた器具およびそ
の製法を提供する。この製法は、ガラス上にきわめて薄
い吸着性ポリマー被膜の層を形成するために、より広範
に利用しうる技術を含む。

従って本発明は第１観点においては、 ａ）平坦な前面、直線的な下縁、および約０．５〜約５
．０ＩｗＩＩの厚さを有する透明なシート様物体、ｂ）
上記の平坦な面の第１部分上の、厚さ約５２〜約５００
．ｆｉｌの硬質ポリマー被膜、ならびにＣ）上記の平坦
な面の第２部分上の、厚さ約２〜約５０ＪＩｌの吸着性
ポリマー層 からなり、硬質ポリマー被膜の厚さが吸着性ポリマー層
の厚さより少なくとも５０．１１１１１大きい器具、を
提供する。

本発明は第２ｖｉｉ点においては、 ａ）平坦な前面、直線的な下縁、および約０．５〜約５
．０ｎｎｎの厚さを有する第１硬質ライド、ｂ）平坦な
前面、直線的な下縁、および約０．５〜約５．０ｍｍの
厚さを有する第２硬質スライド、Ｃ）第１硬質スライド
の平坦な前面の一部における第１吸着性ポリマー層、 ｄ）第１および第２スライドが平行にかつ実質的に垂直
に整合し、第１吸着性ポリマー層が第２硬質スライドか
ら厚さ約５０〜約５００μの間隙だけ間隔を置いた状態
を保持するためのスペーサー手段、 からなるスライドアセンブリーを提供する。

第３１ｊ！点においては本発明は ａ）極性溶剤中のセルロース系ポリマーおよびアクリル
アミド系ポリマーよりなる群から選ばれる吸着性ポリマ
ーの溶液を正に帯電したカラス表面に施し、そして ｂ）正に帯電したガラス表面における工程（ａ）の溶液
を乾煉させる工程からなり、 その際、該溶液中の吸着性ポリマーの濃度および施され
る溶液量は、乾燥工程（ｂ）により形成される乾煉した
層が約２〜５０ｎの厚さであり、かつ連続被膜を形成す
るものである、 ガラス表面に吸着性ポリマー被覆のきわめて薄い層を施
す方法を提供する。

ガラス表面に吸着材表面の頂部よりさらに５０〜５００
ｍ上方に伸びた硬質被膜が、付与工程（ａ）の前に（ま
たはガラス表面を正に帯電させる前に）ガラス表面に施
されるか、または付与工程（ａ）の後に（好ましくは乾
燥工程（ｂ）の後に）器具に付与されるので、この種の
方法の好ましい形態によれば、本発明の好ましい形態の
器具が得られる。

図面について簡単に述べる。

第１図は本発明の第１形態によるスライドの前両立面図
である。

第２Ａ図は本発明による２枚のスライドからなるスライ
ドアセンブリーの端面立面図である。

第２Ｂ図は第２Ａ図のスライドアセンブリーの下部の、
さらに拡大した端面立面図である。

第２Ｃ図は第２Ｂ図と同様に、スライドアセンブリーの
同じく下部の図であるが、この場合は各スライド１１０
および１３０の中央を通る断面を示す。

第３Ａ図は第２Ａ図のスライドアセンブリーにより形成
される毛管間隙に吸込まれる液体を示す端面立面図であ
る。

第３Ｂ図は第２Ａ図のスライドアセンブリーにより形成
される毛管間隙から吸出される液体を示す端面立面図で
ある。

第４Ａ図は本発明の第２形態による部分被覆スライドの
前両立面図である。

第４Ｂ図は第４Ａ図に示すスライドおよび他のスライド
が一緒に第２Ａ図のホルダーに挿入された状態の端面立
面図である。

第４Ｃ図は本発明の第３形態によるスライドの、第１図
と同様な前両立面図である。

第５図は第２Ａおよび４Ｂ図に示すものと同じスライド
ホルダーに一緒に挿入された、本発明の第３様式による
２枚のスライドの、第４Ｂ図と同様な端面立面図である
。

図面に基づいて詳細に説明する。

第１図には本発明の第１形態による顕微鏡スライド１１
０を示す、スライド１１０の前面１１２（第２Ａ図）は
スライド１１０の下部（高さ７６．２間のうち４４．４
１１１１ｔｌ）に施された吸着性ポリマー被ＷＪ、１１
３を備えている。上部被膜１２２がスライドの前面の一
部（たとえば全体の高さ７６．２ｍｍのうち上部３１．
８ｍｍ）を覆う、小三角形の被膜部分または隆起アイラ
ンド１２５がスライド１１０の前面の底部左右かとを覆
う、被１１１１１２２および１２５それぞれは第２Ａ図
に示すスライドアセンブリーの目的とする間隙の半分の
厚さである。

被覆１２２の一般的寸法は高さ立３１．８ｎｉａ、幅里
２５．４ｒｍ（スライド１１０の幅全体）および厚さ七
〇、０７５　ｔｍ　（７５Ｊ１１　）である、高さｈお
よび幅立の有意の変動が許容され、後記のように厚さｔ
は５０〜２５０賜であってよい、三角形被膜部分１２５
（隆起アイランド）についての一般的寸法は最大高さ４
ｍ（スライド１１０の外側左右縁に沿ったもの）、最大
幅４ｍ（底縁１１４に沿ったもの）および厚さ７５、Ｉ
ｌｌである。隆起アイランド１２５の高さおよび全般的
形状の実質的な変動が許容される（バビットおよびプリ
ガティによる１９８７年１０月２６日出願の出願中の米
国特許出願第１１２　、４０４号明細書に詳述されてい
る）が、各隆起アイランドがスライド１１０の各かどか
ら底縁１１４に沿って内側へ、および側縁に沿って上方
へ伸びていることが好ましい。

吸着性ポリマー層１１３はこの第１形態においては２０
趨の厚さをもつ、この厚さと被膜１２２および１２５の
厚さとの関係の重要性は下記の第２Ａ、２Ｂおよび２Ｃ
についての記述において明らかになるであろう、ニトロ
セルロースの吸着性ポリマー層を形成する方法の例はの
ちに記述および例示する。

第２Ａ図はスライドホルダー中の２枚の等しいスライド
１１０および１３０の側面図である。スライド１１０お
よび１３０は互いに第２Ａ図に示す状態に保持された際
に、互いにスライドアセンブリーを形成する。スライド
１１０上の上部被膜１２２はスライド１３０上の等しい
上部被ｆｉ　１４２に対して接する。スライド１１０の
底かどの被膜１２５はスライド１３０の底かどの被膜１
４５に対して接する。スライド１１０と１３０は、被膜
１２２および１４２の中心点のそれぞれ上方および下方
にあるクリップ１６１および１６２によって互いに押し
つけられる。スライド１１０および１３０の上方は米国
特許出頭第０３２．８７４号（１９８７年３月３１日出
願、現在−は米国特許第４，８０１，４３１号）明細書
に記載されたスライドホルダーの整合用ストリップ１５
６のスロット１５８内に受容される。このスライドホル
ダーは各列のスライド対につき、各スライド対の２個の
上かとがスロット内でかみ合うべく配置された多数のス
ロット（たとえば１０スライド対の列に対し、それぞれ
２枚の整合用ストリップにおける１０個のスロット）を
含む２枚の整合用ストリップを備えている。スライドホ
ルダーの仕切ブラケットがスライド対の各列の両側に下
方へ向かって伸びている。

仕切ブラケット上のクリップ（各仕切ブラケットにつき
１個の上部クリップおよび１ｍの底部クリップ、すなわ
ち１０スライド対の１列につき合計４０個のクリップと
して図示）がスライド対のスライドを互いに向けて保持
し、かつスライド対を平行な配列に維持する。

再び第２Ａ図について述べると、スロット１５８の水平
に広がる面はスライド１１０と１３０の正確に垂直な配
列を維持する。米国特許出願第０３２，８７４号明細書
に記載のホルダーにつき、スライド１１０および１３０
の２個の上かとそれぞれの近くにスロットが設けられ、
側壁はスライド１１０　と１３０を第２Ａ図においてそ
の頁の中へ向かう方向に水平に配列した状態を維持すべ
く設けられる。この種のスライドホルダーにおいて、そ
れぞれの整合ストリップは多数のスロット（１０個とし
て説明）を備え、従って多数〈１０個）のスライド対を
固定された列として保持することができる。

第２Ｂ図はスライド１１０および１３０のコーナースポ
ット１２５および１４５付近の端面図をより拡大して示
す、スライド１１０の裏面１１６から前面１１２までの
厚さはＩｍ　（１１０００ｊ　）である、スライド１３
０の前面１３２はその裏面から同様に１＋ｍ離れている
。厚さ７５μｍの被膜１２５が前面１１２の最下部４ｗ
ｍにあり、厚さ７５ａの被［１４５が前面１３２の最下
部４■にある。この厚さは第２Ｂ図のｔに示されている
。ニトロセルロース層１２５ｎがコーナースポット１２
５の前面を覆い、ニトロセルロース層１４５ｎがコーナ
ースポット１４５の前面を覆う、ニトロセルロース層１
２５ｎおよび１４５ｎはそれぞれｎの単位厚さ（２０ｐ
として説明）であり、互いに接する。従ってスライド１
３０の前面１３２からスライド１１０の前面１１２の間
隔は底（下端１１４の高さ）において単位五であり、こ
れは２１＋２旦、すなわち１９０　Ａｌｌである。第２
Ａ図に戻ると、上部被膜１２２および１４２も同様に厚
さ２０．１１Ｉｌのニトロセルロス層で被覆されており
、従って面１１２と面１１３の間隔は一櫟に１９０膚で
ある。

第２Ｂ図に戻ると、スライド１１０および１３０の末端
付近においては面１１２　と１３２の間隙はコーナース
ポット１２５および１４５、ならびに層１２５ｎおよび
１４５ｎで充填されていることが分かる。コーナースポ
ット１２５および１４５の上方（すなわち下縁１１４の
４關上方）には間隙１４０がある。それぞれ厚さｎのニ
トロセルロース層１１３および１３３がそれぞれ間隙１
４０に隣接するガラス表面１１２および１３２を覆う、
すなわちユが２０−である場合、間隙１４０は厚さＩＬ
であり、これは盈−２旦＝１５０膚である。

次いで第２Ｃ図を参照すると、スライドアセンブリーの
下端の内部が見られる０番号１１０．１１２゜１１３、
１１４．１１６．１２５．１２５ｎ、　１３０．１３２
．１３３．１４０．１４５および１４５ｎはすべて第２
Ａおよび２Ｂ図と同一の要素を表わす、ここにはガラス
スライド１１０および１３０が断面で示されており、ニ
トロセルロース層１１３および１３３も同様である。こ
の図に見えるコーナースポット１２５および１４５、な
らびにニトロセルロース層１２５ｎおよび１４５ｎはス
ライドアセンブリーの下縁の、遠方のかどにある。

第２Ｃ図において、ニトロセルロース層１１３および１
３３により囲まれた間隙１４０はスライドアセンブリー
の底（下縁１１４の高さ）にまで伸びている。第１図を
参照すると、間隙１４０は底では幅亘」−にわたって伸
び、４５度の角度αで広がってスライドアセンブリーの
底の４層上方では幅立全体に及ぶことが分かる。この第
１形態においては、間隙１４０全体が層１１３および１
３３によってＷＩまれ、被［１２２の底まで−様な厚さ
１５０．１！１′ｌである。

使用に際しては、３０スライド対まで（各対の一方また
は双方のスライド上に試料を含むもの）をホルダーに挿
入する０次いでホルダーを一連の液体、一般に液状試薬
上へ下降させる。各液体は浴もしくはシートの形、液滴
ホルダー（米国特許第４．７３１，３３５号明細書の図
７を参照されたい）に保持された個々の丸い液滴の形、
または改良型液滴ホルダー上に横に広がったアリコート
の形（ブリガティの米国特許出願第０３２，８７５号、
１９８７年３月３１日出願、現在は米国特許出願第４，
７９８，７０６号明細書、図３Ａ、３Ｂおよび３Ｃを参
照されたい）のいずれであってもよい、液体は毛管作用
により、それぞれの第１スライド１１０と隣接する第２
ないしは対面スライド１３０との間隙１４０中へ上昇す
る。

この明細書の第３Ａ図を参照されたい、液体を一方また
は双方のスライド上にある試料に適宜な期間接触させた
のち、この明細書の第３Ｂ図に示すようにスライドアセ
ンブリーを平坦なプロ・ｙター１７２上に下降させる０
次いで液柱１７０を毛管作用によってプロッター１７２
中へ吸取って、各毛管間隙１４０を排液する。液滴ホル
ダーを特定の工程に用いる場合、この処理を個別化して
、異なるスライド対を異なる液体（たとえば異なる一次
抗体、核酸プローブ、酵素または色原体）で処理するこ
とができる。排液後にスライドアセンブリーを液滴、横
方向に伸びるアリコート、または液体のシートもしくは
浴の形の池の試薬と接触させることができる。

第３Ａ図を見ると、液滴は硬質支持体１６２上のエラス
トマー員子１６４を貫通した孔１６６中にある。

スライド１１０および１３０の下縁１１４および１３４
がそれぞれ液滴の上部に接触し、従って間隙１４０の下
縁１４２も液滴に接触する。上昇する液柱１７０は米国
特許第４，７３１，３３５号明細書に詳述されるように
、毛管作用によって間隙１４０中へ吸上げられる。

この形態においては液柱１７０中の液体が吸着性ポリマ
ー層１１３および１３３と接触することを理解すべきで
ある。

第３Ｂ図を見ると、スライド１１０および１３０の下縁
１１４および１３４が処理工程または洗浄工程の終了時
に吸収材料製のプロッター１７２に接触している。液体
は次いで毛管作用により間隙１４０からその下縁１４２
を通ってプロッター１７２中へ吸出され、ここでこれは
下方および外側へ広がる液体最前部を形成し、間隙１４
０中の液柱１７０を落下させる。

多段処理工程に際しては、スライド対１１０および１３
０を処理液源（これらのうち幾つかはたとえば孔１６６
中の別個の液滴であってもよい）および吸収材料、たと
えばプロッター１７２と反復接触する。第２Ａおよび３
Ｂ図を見ると、被膜１２２および１３２はスライド１１
０および１３０の剛性と連係して、通常は（必ずしも常
にではない）下縁１１４と１３４の間隙の厚さを一定に
維持するのに十分なものでなければならないことを認識
すべきである。

特に下縁１１４および１３４をプロッター１７２中へ押
しつける際に、プロッター１７２がスライド１１０およ
び１３０の縁１１４および１３４を互いに押しつける傾
向にある。この種の圧迫はプロッター１７２に対する縁
１１４および１３４の抵抗が、現在のフィッシャー・サ
イエンティック・カンパニー製ヒストマチック（旧５Ｔ
ＯＨ＾ＴＩＣ）スライド染色装置、コード・オン様式の
型〜スライド列が抵抗を受けた場合に下向きに動（のを
止めるためにソレノイド機構を採用するーの場合のよう
に、プロッター１７２に対する縁１１４および１３４の
抵抗がスライド列の下向きの軌きを止めることに依存し
ている場合に起こりやすい。

隆起アイランド丁２５および１４５（第２Ａ、２Ｂおよ
び２Ｃに見られる）を設けることにより、縁１１４と１
３４が接近して間隙１４０の下縁を閉じるのが阻止され
る。この種の隆起アイランド１２５および１４５ならび
にこの種のアイランドの変形の機能は米国特許出願第１
１２，４０４号明細書に詳述されており、その記述をこ
こに参考として引用する。

吸着性ポリマー被膜１１３および１３３は間隙１４０へ
の液体の流入および流出に実質的な影響を与えない、従
って第３Ａおよび３Ｂ図を米国特許第４．７３１，３３
５号明細書の図３Ａおよび３Ｂと比較すると、間隙の厚
さが約１５０〜約２５０μの好ましい範囲内にあるなら
ば、それぞれの場合の間隙１４０への流入および流出は
各種の液体についてＩ＆適なものとなる、約１５０側よ
り薄い間隙は、ある種の液体を速やかに排出させるのが
困難となる可能性がある。約２５０ｊＭより厚い間隙は
ある種の液体を充填するのが困器となる可能性がある。

それにもかかわらず、約５０〜約５００１１、好ましく
は約１００〜約２５０側、より好ましくは約１５０〜約
２５０　ｐｎ、きわめて好ましくは約１５０〜約２００
廁の種々の範囲が、若干のスライドアセンブリーは急速
な充填もしくは急速な排出が要求されない用途、または
特定の種類の液体のみに遭遇する用途には使用できるこ
とを認識することによって支持される。より好ましい範
囲およびきわめて好ましい範囲の厚さはスライド対に最
大限の順応性を与える。

この形態において間隙の厚さは一方の吸着性ポリマー層
１１３から他方の１３３までの間隔を表わす。

ある種の他の形態（第４Ｂ図参＠）においては、間隔の
厚さは一方の吸着材層からガラス表面までの間隔を表わ
す、ｆｌ！１のある種の形態（第４Ｃ図参照）において
は、後記のように２枚のガラス表面の間隔も重要となる
であろう、一般に吸着性ポリマー層は約２〜５０側、好
ましくは約５〜約５０，１１１１、より好ましくは約１
０〜約３０μｍの厚さをもつべきである。

第４Ａ図は第１図の被ＷＡ１２２およびコーナースポッ
ト１２５と同様な上部液＄　２２２およびコーナースポ
ット２２５を有するスライド２１０の正面図を示す、こ
の第２形態の場合、吸着性ポリマー層はスライド２１０
のガラス前面の底部３１．Ｌｍのみを覆う。

従って平坦なガラス前面２１２の中央１２．６１（７６
、２−３Ｌ８−３１．８＞が第４Ａ図においてエポキシ
被膜２２２の下方およびニトロセルロース層２１３の下
方に見える。

第４Ｂ図は第２Ａ図および米国特許出願第０３２．８７
４号明細書のホルダー１５６のスロット１５８にスライ
ド２３０と共に挿入された第４Ａ図のスライド２１０を
示す、クリップ１６１および１６２がスライド２３０の
ガラス表面２３２上の上部被膜２４２をスライド２１０
上の上部被膜２２２に押しつける。上部液ＷＡ２４２の
下方においては、スライド２３０の平坦なガラス前面は
被覆されていない（コーナースポット２４５を除く）、
従って間隙２４０の底部３Ｌｋｍはニトロセルロース層
２１３の前面からガラス表面２３２までの厚さである。

厚さの一例はスライド２１０および２３０につき１市（
１０００ＪＩｌ）、上部被膜２２２および２４２につき
９０層、コーナースポット２２５および２４５につき９
０ｎである（コーナースポットはニトロセルロースによ
り被覆されていないものとする）、従ってガラス表面２
１２はカラス表面２３２から１８０ｎの間隔をもつ。

従ってニトロセルロース層２１３が厚さ３０膚であれば
間隙２４０の厚さが好ましい最小限１５０　ｔｉｔ＋未
満に減少することはない、連続ニトロセルロース層を溶
液（後述する）から施す場合、その厚さは間隙が少なく
とも１５０μｍの厚さとなるのに十分なほど小さく維持
することが好ましいくすなわちこの形態で層２１３の厚
さが３０用以下である。しかしニトロセルロース層は接
着剤または他の方法で表面２１２に直接施された薄いフ
ィルター層であってもよい、この様式において厚さ５０
μｍの層を施した場合、間隙の厚さは１３０−であり、
これはなお多くの用途に適している０ｍｍ隙の厚さを　
１５０．ｉｓに回復させたい場合は、エポキシ被膜２２
２．２２５．２４２および２４５を９０頭から１００ｊ
ｌｌｌｌに増すだけでよい。

第４Ｃ図は第３の形態によるスライド３１０を示す、エ
ポキシ被ＷＡ３２２がスライド３１０の前面３１２の上
部り部分を覆う（この場合、上部３０ｍ）、コーナース
ポット３２５はこの場合も前面３１２の対向するかどか
ら内側へ向かって、スラ、イド３１０の下縁３１４に沿
って伸びる、最大高さ４侑および最大幅４市の直角二等
辺三角形である。この場合、被膜３２２および３２５は
たとえば８５瀾の厚さをもつ。

吸着性ポリマー層３１３はスライド３１０の前面３１２
の一部を覆い、これは下縁３１４の５關上方において始
まる０層３１３は２０　ａｍの幅をもち、スライド３１
０の幅２５．４ｎｍの中央に位置する１層３１３は上方
へ３０ｍｍ伸び、従ってエポキシ被膜３２２の底縁の下
方１１．２ｍｍにおいて終結する０層３１３の厚さはた
とえば２０．１１１１である。

２枚のスライド３１０を第２Ａ図のスロットおよびクリ
ップ内に配置した場合、前面３１２の間隔は１９０層と
なるであろう（被膜３２２および３２５の厚さの２倍）
、向き合うニトロセルロース層は互いに間隙厚さ１５０
ｎの間隔を置くであろう、第３Ａ図を参照して、間隙下
端（第３Ａ図の１４２に相当）はこの第３の形態におい
ては１９０層１ｍの厚さであることを認識すべきである
。これは液体が間隙内へ吸込まれるのに十分な厚さであ
る。液体は柱状で上昇し、各層３１３に接触するであろ
う、このスライドアセンブリーをプロッタ＝（たとえば
第３Ｂ図中のプロッター１７２）へ移動させると、液体
は間隙から吸出されるであろう０ｍｍ隙は層３１３付近
で最小であるので、カラムの中心は縁より低速で排液さ
れると予想される。それにもかかわらず最小間隙厚さ１
５０メ１において間隙は各種液体を速やかに排気すると
期待される。特に層３１３が有機溶剤中の溶液から好ま
しい方法で施された場合（たとえばメタノール溶液から
施されたニトロセルロース）、排出後に層３１３に付着
する液体の量はごく少量であると予想される。Ｐ材を用
いる場合ですら、実際に付着する液体は各種洗浄工程の
回数を増すことにより補償することができる。

第５図はドツティング（ｄｏｔｔｉｎａ）またはプロッ
ティング（ｂ　１ｏｔｔ　１ｎｋ）アッセイに適した２
枚のスライド６１０および６３０を示す、プロッティン
グの場合（ドツティングと異なり）、試料は炉材へ移行
する前に幾何学的に分離される。スライド６１０および
６３０を同じスライドホルダーに挿入する。

スライド６１０上の上部被膜６２２およびスライド６３
０上の上部被膜６４２はクリップ１６１および１６２の
圧迫により互いに接する。スライド６１０および６３０
はそれらの上端においてホルダーの整合ストリップ１５
６のスロット１５８に挿入される。ニトロセルロース系
材料または他のメンブレンフィルター材料の薄いストリ
ップ６１３がスライド６１０の被ＷＡ６２２の下方の内
面を覆う、ニトロセルロースまたは他の炉材の薄いスト
リップ６３３がスライド６３０の被ＷＡ６４２の下方の
内面を覆う、スライド６１０および６３０がガラスであ
る必要はなく、薄いストリップ６１３および６３３がそ
れぞれ強固に結合しうる熱可塑性または熱硬化性材料で
あってもよい。

薄いストリップ６１３および６３３の向き合う表面の間
隙は米国特許第４，７３１，３３５号明細書に記載の第
１距離の厚さをもつ（一般に５０〜５００頭、好ましく
は１５０〜２５０ＪＩＩ＋、より好ましくは１５０〜２
００ｍ）、薄いストリップ６１３および６３３がそれぞ
れ５０．ＩＩＩノ厚サテすル場合、被１１１ｊ　６２２
　オＪ：　’Ｉｆ　６４２（ならびにコーナ・−スポッ
ト６２５および６４５）それぞれを１２５７Ｉ１１の厚
さとすることにより１５０μｍの間隙を形成しうる。さ
らに、スライド６１０は（特にプラスチックである場合
）、上部か底部よりさらに１２５ＪＩＩＩＩ伸びた一体
構造として、成形により、下部から材料を除去すること
により、または池の方法で成形することができる。薄い
ストリップ６１３は化学的に、接着剤により、またはス
ライド６１０が適切な材料である場合はヒートセット（
アイロン掛けと同じ）により接着することができる。ス
ライド６１０、被膜６２２および層６１３により示され
る構造全体をエルキンスの米国特許第４，３０８，０２
８号明細書の図１７〜２０と同様に積層品として形成す
ることもできる。

ドツティングアッセイに用いる場合、試料（たとえば細
胞、または蛋白質もしくは精製ＤＮＡの細胞抽出物）を
手動または自動ピペッティング装置によりスライド６１
０に直接にスポットする。試料は加熱、乾燥、吸着、吸
収、または化学結合によりスライド６１０上の炉材の膜
に結合する０次いでスライド６１０および６３０の薄い
ストリップを並置し、それらの上端をホルダーの整合ス
トリップ１５６のスロット１５８に挿入して、第３Ａお
よび３Ｂ図に示したものと同様な毛管作用間隙を形成す
る。

プロッティングに使用する際は、スライド６１０（およ
び別個にスライド６３０）を電気泳動ゲルまたは他の分
離装置に対しプロットし、これによりあらかじめ分離さ
れていた種類（たとえば抗原またはポリヌクレオチド）
を一定の間隔関係で（たとえば短いポリヌクレオチドは
長いものより深くゲル内へ移行する）ストリップ６１３
上に移し取る。

次いでスライドをゲルから離し、またはその逆をを行う
、プロットされた材料は次いで所望により乾燥もしくは
加熱により、または化学結合試薬（たとえばグルタルア
ルデヒド）を用いて、より堅固にニトロセルロースに結
合させることができる。第５図には３個の検体スポット
６２０ａ、６２０ｂおよび６２０Ｃがニトロセルロース
ストリップ６１３上に示されている。ａの２個の検体ス
ポット６２０ｄおよび６２０ｅがニトロセルローススト
リップ６３３上に示されている。これらの検体スポット
は膜上にスポットされたか、またはプロットされたかに
関係なく、次いで組織検体に関して米国特許筒４．７３
１，３３５号明細書に記載された多工程法と同様に、一
連の検出、分析、洗浄、処理、および発色試薬に暴露さ
せることができる。処理の終了時に各スポットの位置に
、試薬がそれに対し特異的な発色団を沈着させる。たと
えばＤＮＡ源の制限酵素消化物を電気泳動し、プロット
し、そしてどの長さの制限断片が求める配列をもつかを
調べることができる。結合対置子の結合はあらかじめ通
常の結合化学（たとえばカルボジイミド化学）によって
行うことができる。あるいは、毛管作用間隙に試料を充
填する際に試料がその位置と接触した場合、試料の反応
性部分（たとえばアミン、カルボキシ、スルホヒドリル
、プリン、ピリミジン、またはヒドロキシル基）に直接
に結合する特定のあらかじめ結合させた化学反応基（た
とえばＮ−ヒドロキシスクシンイミド、アジド、または
アルデヒド基）をもつべく、膜上の位置にスポットして
おくこともできる。これらの場合（前記の場合と異なり
）、スライド６１０および６３０のスライドアセンブリ
ーはいずれのスライドにも試料をあらかじめ結合させる
ことなく形成される。第１工程として、または１回もし
くは２回以上の調製用洗浄工程（第３Ａおよび３Ｂ図の
場合のように毛管作用による吸込みおよび排出による）
ののち、試料、たとえば−滴の血清をストリップ６１３
と６３３の間隙に毛管作用により吸上げる（第３Ａ図に
示したものと同様な様式で）０次いでアセンブリーを適
宜な温度または温度プロフィルでインキュベートする。

結合が起こった場合、試料中の被分析体がストリップ６
１３または６３３の適宜な位置に結合するであろう、た
とえばウィルス性抗原をニトロセルロースストリップ６
１３上のある位置に結合させると、この抗原に対する血
清試料中の抗体はいずれもこの位置に結合する。血清資
料中の他の抗体は結合しない０次いで間隙を排液し、米
国特許筒４．７３１．３３３号明細書、１３−１５Ｉ！
ｌＩの染色処理における工程１８Ａ〜１９Ｂに相当する
各種洗浄工程を施す０次にいずれかのヒト抗体にも特異
的な標識抗体（たとえば家兎−抗−ヒトＩｇ）または特
定のヒト抗体に特異的な標識抗体（たとえばヤギ抗−ヒ
トーＩｇＧ）を導入する。Ｗ識抗体は直接に読取り可能
である（たとえば螢光タグ）か、または読取り可能な標
識がさらに結合するための部位として用いられる（たと
えばアビジン−酵素、アビジン−螢光、またはＡＢＣ試
薬のアフィニティ部位として用いられるとオチオン）か
、もしくは酵素（たとえばセイヨウワサビ・ペルオキシ
ダーゼまたはアルカリホスファターセ）がさらに結合す
るための部位として用いられる。その際血清抗体が最初
に結合した場に酵素が存在する場合、次いで（さらに洗
浄したのち）原色体を導入することができる（上記染色
処理の工程２３Ａ〜２５Ｂと同様にして）、この処理が
終了した時点でスライド６１０を肉眼により、顕微鏡に
より、または電子工学的な可視化デバイスにより検査し
、目的とする抗体が血清試料中に存在していたかくかつ
準定量的にその量）の指標として、そのスポットにおけ
る色の有無を判定することができる。

この方法の利点は、その位置を対照としての周囲の膜と
、または他のスポットと比較して、定量のための簡単な
対照システムを提供しうろことである。たとえばこれら
他のスポットに既知量の被分析体を単一量または多数量
あらかじめ結合させておくことができる。あるいは他の
スポットに負の対照をあらかじめ結合させ、または試料
にスパイクされた結合対置子に対する結合パートナ−を
あらかじめ結合させ、読取りのための検量体または内部
対照として用いることもできる。

異なる抗原を既知のパターンのスポットとしてスリップ
６１３および６３３上にあらかじめ結合させておいた場
合単一試料を異なる抗原に対する抗体につき同時にアッ
セイしうろことを認識すべきである。あるいは等しいス
ポットをスリップ６１３および６３３上に形成し、同一
血清試料に暴露し、洗浄することができる０次いでスラ
イドをホルダーからはずし、別個のスライド対に再配列
し、たとえはスライド６１０を抗ヒトｒｇ抗体、次いで
発色試薬に暴露し、一方スライド６３０を抗ヒトＩｇＧ
抗体（または抗ヒトＩｇＭ抗体）、次いで発色試薬に暴
露することができる。第３の様式においては多数の抗原
に対する抗体を既知パターンのスポットとしてストリッ
プ６１３および６３３上にあらかじめ結合させておくと
、単一試料を多数の抗原について分析することができる
。第４形態においては、調製試料、たとえば試料の核酸
が露出され、標識され、変性およびハイブリダイゼーシ
ョンに適したハイブリダイゼーション媒質に装入された
ものについてのパイプリダイゼーションアッセイに特異
的な核酸配列をストリップ６１３および６３３Ｆの特定
の位置にスポットする。この第４形態は核酸サンドイッ
チアッセイにも利用できる。

この種の使用法においては、種々の工程（インキュベー
ション、酵素反応）を熱により（米国特許第４．７３１
．３３５号明細書の記載と同様）または電磁線により促
進することができる。適切なホルダー（金属製でないも
の）を用いると、マイクロ波照射を採用することができ
る。赤外線を用いる方法（これはホルダーが金属であっ
ても採用できる）はケブラー、クオモおよびブリガティ
の米国特許出願第１６８．１７３号明細書（１９８８年
３月１５日出願、出願中、同一出願人による）に記載さ
れている。

本発明方法は吸着材、たとえはニトロセルロースの薄層
を平坦なガラス表面に施すための一般法を提供する。こ
れは本発明の好ましい形態の器具およびスライドアセン
ブリーの薄い吸着性ポリマー層（たとえば各図の層１１
３．１３３，２１３，３１３，６１３および６３３）の
形成に特に利用される。

本発明方法は正に帯電したガラス表面から開始する。施
される吸着性ポリマーが負の正味電荷をもつ場合にトロ
セルロースの場合のように）、正電荷を付与する以外に
さらに前処理を必要としない、ポリマーとしてのポリア
クリルアミドに関連してのちに述べるように、他の場合
にはガラス表面をたとえばグルタルア・ルデヒド、中性
緩衝化ホルマリン、または池の安定な架橋剤でさらに誘
導体化することが必要であろう。

正に帯電したガラス表面は既知の方法により、たとえば
コーニング・ガラス・ワークのハワード・ライ−トール
により開発された方法により形成しうる。たとえばアミ
ノアルキルシラン化合物をアセトンなどの溶剤中でガラ
ス表面に施すことができる。この種の一化合物（アミノ
プロピルトリエトキシシランまたはＡＰＴＳ＞を水溶液
として施すことについて後記の例中に記載する。

吸着性ポリマーは溶液として（懸濁した未溶解ポリマー
を含まない）正に帯電したガラス表面に施すべきである
。［！性有機溶剤を使用すべきである。ニトロセルロー
スにはメタノールが好まし、い溶剤である。これは層を
２〜５０μｍの厚さにわたって連続かつ透明なものにす
る。イン１０パノールおよびエタノールなどの溶剤は、
層がさほど透明でなく、若干不均一となる可能性がある
ため、これまで上記のものより好ましくないことが認め
られている。限られた実験においてアセトンが一般に不
満足であった。これらの限られた実験においては不連続
なニトロセルロース層が形成されたからである。しかし
これらの実験においては必ずしもニトロセルロースがす
べてアセトンに溶解していなかったか、またはアセトン
の乾燥が最適な様式で行われなかった可能性がある。従
っていがなる極性有機溶剤（アセトンですら）をも完全
に除外するのに十分な情報は得られていない。

一般に希溶液が用いられる。メタノール中のニトロセル
ロースについては、１〜２重量％の濃度が有効であ′る
ことが認められ、これより若干高い濃度および低い濃度
も適切であろう、形成される層の厚さは溶液の濃度を調
整することにより、またある種の形状の場合は施す溶液
の量をＷｆＪＭすることにより制御できる。ガラスを溶
液に浸漬する場合、濃度が制御のための第１基準であり
、濃厚な溶液はど厚い層をもたらすであろう。

ガラス表面上の溶液の乾燥は各種の熱源または線源によ
って促進しうる。今日まで実施された実験のうち若干に
おいてマイクロ波を用いた０層が均一に形成されるよう
に、ガラス表面は普通は乾燥期間中水平に保たれる。

ポリアクリルアミドについてはＩ）Ｈ７，０〜７．５の
０．１Ｍリン酸塩ｍｉｓ液中の電気泳動用ポリアクリル
アミドの１％溶液が用いられるであろう、正に帯電した
ガラス表面をｐＨ７，０〜７．５の０．１Ｍリン酸塩Ｈ
ＷＩ液中の１％グルタルアルデヒド溶液で処理し、次い
でリンスし、乾燥させたのち、ポリアクリルアミド溶液
を施す、ポリアクリルアミド溶液を乾燥させたのち、ス
ライドをいずれかの水溶液でリンスする。

実施例 米国特許出願第０３３，０７３号明細書の図５Ａおよび
５日の一般的形状をもつブローブーオン−スライド（本
発明の第１図の形態の層１１３を含まないもの）を蒸留
水でリンスし、次いで蒸留水中の２％ＡＰＴＳ　（カタ
ログＮｏ、　Ａ３６４８、シグマ・ゲミカル）に２分間
浸漬した０次いでスライドを順次５個の蒸留水の１１容
器に浸漬することによりリンスし、８０℃の熱対流炉内
で、次いで空気中で室温において乾燥させた。

この処理により調製された正に帯電した表面をもつスラ
イドを、次いでメタノール中のニトロセルロースの溶液
を入れた５０−のコニカル遠心管に浸漬した。この溶液
は全重量的１．１ｇの２枚のニトロセルロースｔｉＡ（
８８侑Ｘ　８８ｍ、シュライヘル・アンド・シェルＢＡ
−８５）を切取り、これらの細片を合計３０−の無水メ
タノールに回転撹拌により溶解することによって調製さ
れた。溶液は所望により使用前に一過して、未溶解ニト
ロセルロースを除去することができる。

遠心管から取出したスライドを次いで水平に向けてマイ
クロ波炉内で３０秒間乾燥せさな、乾燥スライドの鏡検
により、メタノール溶液に浸漬したガラスおよびエポキ
シの表面すべてを均一に被覆した、厚さ約５〜１０μｍ
の光学的に透明な層を示した９食用色素を添加したメタ
ノール溶液を用いてこの処理を反復した際、層の完全な
被覆および均一性が確認された。第１回の付与後に追加
のニトロセルロース／メタノール溶液の層を付与するこ
とにより、被膜の厚さも調製された。

この時点で先に第１．２Ａ、２Ｂおよび２０図に関して
述べた特色を備え、ただしニトロセルロース層１１３．
１３３．１２５ｎおよび１４５ｎが約１０側であるスラ
イドを下記の用途において評価した。

ニトロセルロース積層ガラスの結合能をまず（Ａ）ビオ
チン標識ヤギ−抗−家兎１ｇＧ、（Ｂ）セイヨウワサビ
・ペルオキシダーゼ、および（Ｃ）アルカリホスファタ
ーゼを用いて試験した。ビオチン標識ヤギ−抗−家兎Ｉ
ｇＧは希Ｎａ１ｌ″Ｃ″ｐＨを７．５に調整した蒸留水
中の０．Ｏｔ　Ｈ−Ｎａｃｌに希釈された。セイヨウワ
サビ・ペルオキシダーゼは蒸留水で希釈された。アルカ
リホスファターゼは０゜０１　Ｍ塩化亜鉛および０．０
１Ｍ塩化マグネシウムを含有する０、０１ＨトリスＨＣ
Ｊ　［１ｉ液（希ＮａＱＨでｏＨ８，５に調！！Ｅ）中
に希釈された。各試薬を５μＪの液滴状でスライドのニ
トロセルロース層上にスポットし、風乾しな、３種の溶
液をすべて１０■／−から始め、適正な希釈液中に系列
１０倍希釈で希釈した。従ってｓｏμｇ、Ｓμａ、０−
５ｔｔＱ　、　Ｏ，０５μりおよびｏ、　ｏｏｓμｑを
含有する５μｍのスポット５個が１枚のスライド上に１
列にスポットされた。

２種の酵素（試験（八）および（８））については、洗
浄工程以外は適宜な色原体のみを間隙内の乾燥スポット
に施した。セイヨウワサビ・ペルオキシダーゼ（試験（
Ｂ））については、■×オートメーション・バッフ　Ｆ
　（Ａｕｔｏｍａｔｉｏｎ　Ｂｕｆｆｅｒ後記）に希釈
した０、０１％過酸化水素中の０．５Ｒ／−ジアミノベ
ンジジン溶液を用いた。室温において５分間で発色が起
こった。５μｑおよび０．５μＱの酵素を含有するスポ
ットを光学顕微鏡で見ることができた。

アリカリホスファターゼ（試験（Ｃ））については、Ｂ
ＣＩＰ／ＮＯＴ溶液を用いた。５μＱ、０．５μＱおよ
び０゜０５μ９の酵素を含有するスポットを３７℃で２
時間の発色ののち、光学顕微鏡で見ることができた。

ビオチン標識ヤギ−抗−家兎１ｇＧ希釈液ドツト（試験
（Ａ）は一連の工程で可視化された。第１に、各スライ
ドを毛管間隙が形成される配置となし、ＩＸオートメー
ション・バッファーで予Ｓａ潤させた。このＭ衝液（バ
イオメダ・コーポレーションより）は毛管流を高める界
面活性剤を含有するトリス型緩衝系である０次いでスラ
イドを室温で２０分間、１％ウシ血清アルブミン（シグ
マ、フラクションＶ）を含有する１×オートメーシヨン
・バッファー中に希釈された１１１０／Ｎｌｊのペルオ
キシダーゼ結合アビジン（バイオスティン（ＢＩＯ３Ｔ
ＡＩＮ）　、バイオメダ・コーポレーション）溶液の１
：２００希釈液で処理した。スライドをＩ×オートメー
ション・バッファー中で３回洗浄し、０．１％過酸化水
素を含有するＩＸオートメーション・バッファーに溶解
した０、５１ｇ／　ＩＮ　ＤＡＢ溶液により３７℃で５
分間洗浄した０次いでスライドをＩ×オートメーション
・バッファー中で洗浄し、風乾した。この状態で、ビオ
チンｌ＠識ヤギー抗−家兎抗体の５個のドツトのうち３
個を見ることができた。

仄遅ｍ太土 抗原位置決定試験を行うために、ヒトＨＣＧの精製ベー
タサブユニットを蒸留水に希釈して１００単位／　ｌＪ
にした。１０倍希釈液５μｍのスポット３個をスライド
のニトロセルロース層に施した。

従ってドツトは０，５．０，０５および０．００５単位
のベータサブユニットＨＣＧを含有していた。ドツトを
含むスライドを順次：（Ａ）毛管間隙を形成する状態に
配置し、（Ｂ）ＩＸオートメーションｙＩ衝液中で３回
洗浄し、（Ｃ）家兎−抗−ＨＣＧベータサブユニットの
１　：　２００希釈液と共にインキュベートしく３７℃
で２０分間）、（Ｄ）ｌｘオートメーション・バッファ
ー中で２回洗浄し、（０セイヨウワサビ・ペルオキシダ
ーゼ結合ヤギ−抗−家兎抗体と共にインキュベートしく
３７℃で２０分間）、（Ｆ）ＩＸオートメーション・バ
ッファ中で２回洗浄し、（Ｇ）０．１％過酸化水素を含
有するＩＸオートメーションＭｉｌｌ液中の０．５１ｃ
＋／ｎｄ　ＤＡＢ溶液により３７℃で５分間処理し、（
旧ＩＸオートメーション・バッファー中で２回洗浄し、
そして（１）スライドホルダーから取りはずした０次い
でスライドを風乾し、標準的な光学顕ｍ鏡により検査し
た。ベーターＨＣＧの０．５単位のスポットを顕微鏡下
で見ることができた。

以上ノ」１友北 ＤＮＡ固定化試験を行うなめに、使用前にニックトラン
スレーション法によりビオチニル化したヒト胎盤ＤＮＡ
　（シグマ）１０μ９．１μＱおよび０．１μ９を前記
に従って調製したニトロセルロース層上に固定化した。

ビオチニル化ＤＮＡは０．１Ｍリン酸塩緩衝液を含むｐ
Ｈ７，５の蒸留水中においてスポットされ、８０℃で４
時間ベーキングすることにより乾燥された（レリー、ブ
リガティおよびワード、Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｉｏｎａｌ＾
ｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ｖｏｌ、　８０ｐｐ　４０４５−
４０４９　（１９８３）　、およびワードら、米国特許
第４，６８７，７３２号明細書参照）０次いでニトロセ
ルロース被覆スライドを毛管作用形成形態に配置し、次
いで順次（Ａ）ｌｘオートメーシ、ヨン・バッファで２
回湿潤させ、（Ｂ）１％ＢＳＡ、Ｏ，ｌｎｇ／　ｍ塩化
亜鉛および０．１Ｈ／−塩化マグネシウムを含有するＩ
Ｘオートメーション・バッファー中のアルカリホスファ
ターゼ結合アビジン〈ダコ・コーポレーション）の１：
２００希釈液で処理しり３７℃で２０分間）、（Ｃ）ｌ
ｘオートメーション・バッファー中で２回洗浄し、（０
）ＢＣＩＰ　／Ｎ８Ｔ溶液と共に３７℃で２時間インキ
ュベートすることにより検出し、（Ｅ）ＩＸオートメー
ション・バッファー中で２回洗浄し、そして（Ｆ）ホル
ダーから取りはずしな９次いでスライドを風乾し、光学
顕微鏡下で検査した。１０μｇおよび１μりのビオチニ
ル化ＤＮＡのスポットを青色のドツトとして見ることが
できた。１０μｑのドツトは１μｇのドツトより濃色で
あった。

次いで細胞に対するスライドの結合性を未処理のガラス
、ＡＰｒＳ処理後のスライド、ならびにＡＰＴＳおよび
ニトロセルロース／メタノール処理後のスライド（前記
）につき評価した。へＰＴＳ処理ガラスはそのままで、
またはさらに０．ＩＭｌ衝液（ｐＨ７，５）に溶解した
１％グルタルアルデヒド、または１％中性緩衝化ホルマ
リンで処理したのち用いた。

各種の細胞を２０００ｒｐｎで５分間遠心分離し、スラ
イドに施し、スライド上で風乾するか、または５０％エ
タノール中で１分間固定したのち風乾した。各種細胞型
の最良の付着性は、アルデヒド処理ＡＰＴＳガラス、次
いでニトロセルロース処理ＡＰＴＳガラス、次いでＡＰ
ＴＳガラス、最後に未処理ガラスによるものであった。

ニトロセルロース処理＾ＰＴＳガラスはＩＸオートメー
ション・バッファ中で洗浄したのちも細胞の付着を良好
に維持した。これに対しＡＰＴＳガラスはある種の細胞
懸濁液を他より良好に付着させた。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明の第１形態によるスライドの前両立面図
である。 第２Ａ図は本発明による２枚のスライドからなるスライ
ドアセンブリーの端面立面図である。 第２Ｂ図は第２Ａ図のスライドアセンブリーの下部の、
さらに拡大した端面立面図である。 第２Ｃ図は第２Ｂ図と同様に、スライドアセンブリーの
同じく下部の図であるが、この場合は各スライド１１０
および１３０の中央を通る断面を示す。 第３Ａ図は第２Ａ図のスライドアセンブリーにより形成
される毛管間隙に吸込まれる液体を示す端面立面図であ
る。 第３Ｂ図は第２Ａ図のスライドアセンブリーにより形成
される毛管間隙から吸出される液体を示す端面立面図で
ある。 第４Ａ図は本発明の第２形態による部分被覆スライドの
前両立面図である。 第４Ｂ図は第４Ａ図に示すスライドおよび他のスライド
が一緒に第２Ａ図のホルダーに挿入された状態の端面立
面図である。 第４Ｃ図は本発明の第３形態によるスライドの、第１図
と同様な前両立面図である。 第５図は第２Ａおよび４Ｂ図に示すものと同じスライド
ホルダーに一緒に挿入された、本発明の第３様式による
２枚のスライドの、第４Ｂ図と同様な端面立面図である
。 各国において記号は下記のものを表わす。 １０１３０．２１０，２３０，３１０，６１０，６３０
　ニスライド１２１３２２１２．２３２，３１２　ニス
ライドの前面１３１３３２１３．３１３，６１３．６３
３　：吸着性ポリマー層２２．１４２，２２２，２４２
，３２２，６２２，６４２　：上部被膜２５．１４５，
２２５，２４５，３２５，６２５，６４５　：コーナー
スポット １４．１３４，３１４　　＋スライド下縁１６：スライ
ド裏面 ６１．１６２　　：クリップ ５６：スライドホルダーの整合用ストリップ５８：１５
６のスロット ４０：毛管間隙 ４２：１４０の下縁 １６２：液滴ホルダーの支持体 １６４ニ−ｎ滴ホルダーのエラストマー異子１６６　：
　１６４の孔　　　　１７０：液柱１７２：プロッター ６２０ａ〜ｅ：検体スポット （外４名）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、ａ）平坦な前面、直線的な下縁、および約０．５〜
   約５．０ｍｍの厚さを有する透明なシート様物体、 ｂ）上記の平坦な面の第１部分上の、厚さ約５２〜約５
   ００μｍの硬質ポリマー被膜、ならびにｃ）上記の平坦
   な面の第２部分上の、厚さ約２〜約５０μｍの吸着性ポ
   リマー層 からなり、硬質ポリマー被膜の厚さが吸着性ポリマー層
   の厚さより少なくとも５０μｍ大きい器具。 ２、硬質ポリマー被膜が約７５〜約１２５μｍの厚さを
   有する、請求項１に記載の器具。 ３、吸着性ポリマー層が約５〜約５０μｍの厚さを有す
   る、請求項１または２に記載の器具。 ４、吸着性ポリマー層がセルロース系ポリマーである、
   請求項１ないし３のいずれかに記載の器具。 ５、吸着性ポリマー層が平坦な前面に極性有機溶剤中の
   溶液として施されたニトロセルロースである、請求項４
   に記載の器具。 ６、平坦な前面の第１部分が直線的な下縁から遠方にあ
   る部分を含み、平坦な前面の第２部分が直線的な下縁に
   近接した部分を含む、請求項１ないし５のいずれかに記
   載の器具。 ７、透明なシート様物体が顕微鏡スライドであり、吸着
   性ポリマー層が光学的に透明なニトロセルロース層であ
   る、請求項１ないし６のいずれかに記載の器具。 ８、ａ）平坦な前面、直線的な下縁、および約０．５〜
   約５．０ｍｍの厚さを有する第１硬質スライド、ｂ）平
   坦な前面、直線的な下縁、および約０．５〜約５．０ｍ
   ｍの厚さを有する第２硬質スライド、ｃ）第１硬質スラ
   イドの平坦な前面の一部における第１吸着性ポリマー層
   、 ｄ）第１および第２スライドが平行にかつ実質的に垂直
   に整合し、第１吸着性ポリマー層が第２硬質スライドか
   ら厚さ約５０〜約５００μの間隙だけ間隔を置いた状態
   を保持するためのスペーサー手段、 からなるスライドアセンブリー。 ９、スペーサー手段が第１および第２硬質スライド上の
   平坦な前面上における、全厚約５２〜約５００μｍの隣
   接する硬質ポリマー被膜からなる、請求項８に記載のス
   ライドアセンブリー。 １０、第１吸着性ポリマー層が約２〜約５０μｍの厚さ
   を有し、第２硬質スライドの平坦な前面の、第１吸着性
   ポリマー層に隣接する部分が被覆されておらず、第１吸
   着性ポリマー層から約５０〜約４５０μｍの間隔を置く
   、請求項８または９に記載のスライドアセンブリー。 １１、第２硬質スライドの平坦な前面の被覆されていな
   い部分が第１吸着性ポリマー層から間隙約１５０〜約２
   ５０μｍの間隔を置く、請求項１０に記載のスライドア
   センブリー。 １２、第２吸着性ポリマー層が第２硬質スライドの平坦
   な前面の一部を被覆し、第１および第２吸着性ポリマー
   層がそれぞれ約２〜約５０μｍの厚さを有する、請求項
   ８または９に記載のスライドアセンブリー。 １３、第１吸着性ポリマー層が第２吸着性ポリマー層か
   ら間隙約１５０〜約２５０μｍの間隔を置く、請求項１
   ２に記載のスライドアセンブリー。 １４、ａ）極性溶剤中のセルロース系ポリマーおよびア
   クリルアミド系ポリマーよりなる群から選ばれる吸着性
   ポリマーの溶液を正に帯電したガラス表面に施し、そし
   て ｂ）正に帯電したガラス表面における工程（ａ）の溶液
   を乾燥させる工程からなり、 その際、該溶液中の吸着性ポリマーの濃度および施され
   る溶液量は、乾燥工程（ｂ）により形成される乾燥した
   層が約２〜約５０μｍの厚さであり、かつ連続被膜を形
   成するものである、 ガラス表面に吸着性ポリマー被膜のきわめて薄い層を施
   す方法。 １５、吸着性ポリマーがニトロセルロースであり、極性
   有機溶剤がメタノールである、請求項１４に記載の方法
   。 １６、溶液が平坦なガラス表面の第１部分に施され、平
   坦なガラス表面の第２部分が厚さ約５２〜約２５０μｍ
   の硬質ポリマー被膜により被覆される、請求項１４また
   は１５に記載の方法。 １７、乾燥工程（ｂ）により形成された層が約５〜約５
   ０μｍの厚さである、請求項１４または１５または１６
   に記載の方法。