JPH02200631A

JPH02200631A - 制癌剤

Info

Publication number: JPH02200631A
Application number: JP1018356A
Authority: JP
Inventors: Akira Nagakura; 長倉　晟; Megumi Satou; めぐみ佐藤; Mikio Kikuchi; 菊地　幹雄; Tetsuo Nakatsu; 哲夫中津
Original assignee: Takasago International Corp; Takasago Perfumery Industry Co
Current assignee: Takasago International Corp
Priority date: 1989-01-27
Filing date: 1989-01-27
Publication date: 1990-08-08

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は、副作用が少なく、優れた制癌作用を有する新
規な制癌剤に関する。

〔従来の技術〕

従来、癌の化学療法剤として、アルキル化剤、代謝拮抗
剤、抗生剤、植物アルカロイド剤等があるが、その他に
も天然物から種々の制癌性物質が発見されている。

例えば、グラゾル産植物であるＨｉｍａｔａｎｔｈｕ＋
ｓｓｕ　ｅ　ｕｕ　ｌｅａの樹皮部のヘキサン抽出部に
制癌活性があるという報告がある（　Ｇ、Ｐ、Ｐａｒｄ
ｕｅ　　ら：　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃ
ａｕｔｉｃａｌ　５ｃｉｅｎｃｅｓ、６７（９）（Ｉ９
７Ｂ）　（米）　ｐ、１３２２−１３２３）。

この活性成分は、次式（Ｉ）で示される既知化合物、Ｆ
ｕｌｖｏｐｌｕｎ＋１ｅｒｉｎであることが同定されて
いる。

一方１このＨｉｎ＋ａｔａｎｔｈｕｇ　５ｕｃｕｕｂａ
の樹液（以下８ｕｃｕｕｂａ　１ａｔｅｘと称する）、
あるいはこの植物と同属のＨｌｍｍｔａｎｔｈｕｇ　ｇ
ｒｔｌｃｕｌｇｔａ（俗称Ｌｅｉｔｅ　Ｄｅ　Ｊａｎａ
＋ｇｕｂａ　）の樹液（以下Ｊａｎａｇｕｂａ　１ａｔ
ｅｘと称する）が、当地方の民間薬として飲用又は塗布
用薬に使用されている。

本発明者らは、この５ｕｅｕｕｂａ　１ａｔｅｘ及びＪ
ＩＬｎａｇｕｂａ　１ａｔｅｘ　ｆ分画し、活性の本体
を追求したところ、予想された化合物（ｉ）は検出され
ず、下記一般式（ｒ）で示される１−ヒドロキシシス−
７−メへザビシクロ（４，３，０）ノナ−２−エン−４
−オンが検出された。

化合物（■）は、このほかＨａｌｌｓｒｉａ　１ｕｃｉ
ｄａ中に存在するという報告（Ｉ，ＭｓｓＩｎａら：Ｐ
ｈｙｔｏｅｈｅｔａｉｇｔｒｙ、　２３　（Ｉ１）　（
Ｉ９８４）　（英）ｐ、２６１７−２６１９、及び、Ｈ
，Ａｂｄｕｌｌｍｈｉら：Ｐｈｙｔｏｅｈａｍｉｓｔｒ
ｙ、２５（Ｉ２）（Ｉ９８６）（英〕ｐ、２８２１−２
８２３）や、レンギヨウ（Ｆｏｒｓｙｔｈｉａｓｕｓｐ
ａｎｇａ）中に存在するという報告（Ｋ。

Ｅｎｄｏら：　Ｃａｎａｄｉａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏ
ｆ　Ｃｈｅｍｌｓｔｒｙ。

６２（Ｉ９８４）（加）ｐ、２０１１−２０１４）が逼
れている。また更に、１．Ｓｍ１ｔｏらは、　　Ｊｏｕ
ｒｎａｌｏｆ　　ｔｈｅ　　Ａｍｅｒｉｃａｎ　　Ｃｈ
ｅｍｉｅａｌ　　５ｏｃｉｅｔｙ、９７（ＩＢ）（Ｉ９
７５）（米）ｐ、５２７２−５２７７の中で、本化合物
＜１）を光酸化反応によって得る方法を報告している。

しかしながら、化合物（ｒ）に制癌性があることは未だ
報告されていない。

〔発明が解決しようとする課題〕

上述したようＫ、各種制癌剤が提案されているが、いず
れの制癌剤もまだ多くの問題点をかかえている。例えば
、制癌作用の強いものは抗菌作用をも示し、副作用の強
いものが多く、実際の使用面で多大の制約があり、低毒
性で優れた制癌作用を有する制癌剤が強く望まれている
。

また、制癌剤を大量製造するにあたって、化学合成によ
って容易にしかも安価に供給されることが要求されてい
る。

〔課題を解決するための手段〕

このような実情において、本発明者らは化合物（Ｉ）の
作用について鋭意検討したところ、種々の癌細胞に対し
て優れた制癌活性のめることを見出し、本発明を完成し
た。

すなわち本発明は、化合物（＋＞’を有効成分とする制
癌剤を提供するものである。

化合物（Ｉ）を得るには、例えば乳白色液状の５ｕｃｕ
ｕｂａ　１ａｔｅ＋：９るいはＪａｎａｇｕｂａ　１ａ
ｔｅｘから、まず、無極性ないし、微極性の有機溶媒に
溶出する部分を除く。用いる有機溶媒の例トシては、ベ
ンゼン、トルエン、キシレン、ジクロロメタン、ジクロ
ロエタン、ｎ−ペンタン、ｎ−ヘキサン、ｎ−へブタン
、ｎ−オクタン、シクロヘキサン等が挙げられるが、中
でもベンゼンあるいはジクロロメタンが好適である。更
に、水層中の不溶物を遠心分離等の方法で取り除く。こ
うして得た水層中に食塩等の無機塩を飽和させ、水と分
離する極性有機溶媒で抽出する。抽出溶媒としては、酢
酸エチルが好適であるが、他に、ジエチルエーテル、ジ
メチルエーテル、ジイソゾロビルエーテル、クロロホル
ム、ベンシルアセテート、あるいはこれらの混合物等が
挙げられる。この抽出溶媒を留去して得られる油分を、
シリカゲルカラムＫかけ、適当な展開溶媒、例えば酢酸
エチル：ベンゼン＝　６　：　１でＲ出させ、目的とす
る本化合物（Ｉ）　ｅ単離収得する。

また、本化合物（Ｉ）Ｆｉ、　ＨＷＬｌｌｅｒｉｍ　ｌ
ｕｅ　ｉｄａよシ得られるハレロン（次式（Ｉ））を原
料として。

容易に合成することができる（　１．Ｍｅｓａａｎａら
：　Ｐｈｙｔｏｃｈｅｒａｉａｔｒｙ　、　２３　（Ｉ
１）　（Ｉ９８４）　（英）ｐ、２６１７−２６１９）
。

すなわち、ハレロンを希炭酸ナトリウム水で一晩、室温
で処理し、クロロホルム、酢酸エチル等で抽出すれば得
ることができる。

ｉ　タｓ　　ｐ−ハイドロキシフェニルエチルアルコー
ル（次式（■））を原料にして、水溶液中で光酸化反応
によシ１工程で得ることができる（　１．Ｓｍ１ｔｏら
：　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ａ＋ｎｅ＋　ｒｉ
ｃａｎＣｈｅｍｉｃａｌ　５ｏｃｉ１１ｔｙ、９７（Ｉ
８）（Ｉ９７５）（米）ｐ、５２７２−５２７７　）。

Ｈこうして得られた本化合物（Ｉ）は、皮下、筋肉若しく
は静脈注射剤；散剤、錠剤、カシセル剤、顆粒剤、液剤
などの経口投与剤；輸液混合剤または坐剤による直腸投
与等いずれの方法によっても投与することができる。

その投与量は、疾患の程度によっても異なるが５通常成
人において、経口投与の場合４０〜１０００■、非経口
投与の場合１５〜３５０■を１日１回〜数回に分けて投
与するのが好適である。

〔作用〕

以下、化合物０）の薬理効果及び生理活性について検討
した結果を示す。

（Ｉ）　　薬理効果（ｉ）　　ｉｎ　ｖｉｔｒ。

マウスマクロファージ由来細胞Ｊ−７７４（以下Ｊ−７
７４と略記する）、マウス繊維芽細胞Ｌ−９２９（以下
Ｌ−９２９と略記する〕、ヒト前骨髄性白血病ＨＬ−６
０Ｃ以下ＨＬ−６０と略記する）、マウス腹水癌Ｓ−１
８０、マウス白血病ＤＬ−８１１．マウスＴ細胞白血病
Ｌ−５１７８Ｙ。

ヒト子宮癌Ｈｅ１ｍ５３、ヒトＥｈｒｌｃｈ腹水癌以上
８種の癌細胞に対する細胞傷害活性を調べた。すなわち
、各種癌細胞をＲＰＭＩ（ＲｏｍｗｅｌｌＰａｒｋ　Ｍ
ｅｍｏｒｉａｌ　Ｉｎａｔｉｔｕｔｅ　）　−１６４０
培地（日永製薬）中に浮遊爆ぜた液を、９６穴マイクロ
ブレート中に細胞数が１０４個／入／穴るように入れ、
これに、本化合物（Ｉ）を最少量のジメチルスルホキシ
ド（ＤＭＳＯ）に溶解し、水で希釈して所定濃度溶液と
したものを加えて、３７℃３日間ＣＯ２培養器（５％Ｃ
Ｏ２１１１度）で培養し、検鏡によシ観察した。細胞に
形態変化が生じているか、あるいは死滅しているかを観
察することによシ、最小阻害濃度（Ｍｉｎｉｍｕｍ　１
ｎｂｉｂｉｔｏｒｙ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　：
ＭＩＣ）を測定し、μ２／ｗＬｅで示した。

以上の結果を第１表に示す。

表に示す如く、何れの癌細胞においても、本化合物（Ｉ
）が優れた細胞傷害活性を有することは明らかである。

第１表（ｉｔ）　　ｔｎ　ｖｌｔｒｏ　ＶＣおける細胞傷害活
性を指標とした、本化合物（Ｉ）のｐＨ及び温度に対す
る安定性本化合物（Ｉ）ｌｒ！Ｊン酸緩衝液で第２表に示したｐ
Ｈに調整し、上述のｉｎ　ｖｉｔｒｏの実験で用いた癌
細胞のうちＪ−７７４、Ｌ−９２９及びＨＬ−６０の３
種に対する細胞傷害活性を調べ、ＭＩＣを測定した。更
に、同ｐＨで本化合物＜１．）を１００℃、５分間加熱
したものについても同様の測定を行った。

測定方法は、上述（Ｉ）における方法と同様である。な
お、（＋）と同様に、本化合物（＋）を最少量のＤＭＳ
Ｏに溶解し、水で希釈したものをコントロールとした。

結果は第２表に示したとおシである。

つまり　ｐＨ３〜ｐＨ１１の範囲において、本化合物（
Ｉ）＃′ｉ安定で、その細胞傷害活性はほとんど変わら
ない。更に、同範囲のｐＨで１００℃、５分間加熱して
もやはシ安定である。

（ｉｉ）　　　ｉｎ　　ｖｉｖ。

マウス（ＩＣＲ、５週令、雄、体重１５〜２０ｔ）の腹
腔内に５Ｘ１０’個のＳａｒｃｏＩＴＩｍ　−１８０腹
水癌細胞を移植し、２４時間後よし１日１回計５回検体
を腹腔内に投与し、５０日間の生存数をみた。検体は本
化合物（Ｉ）を最少量のＤＭＳ　Ｏに溶解し、生理食塩
水で所定濃度溶液に調整したものを用いた。対照（生理
食塩水投与）群は１５匹とし、本化合物（Ｉ）投与群は
一群８匹とした。

以上の結果を第３表に示す。

米国国立病研究所（ＭＣＩ　）では、合成物質の場合延
命率１２０％以上、天然物では１３０％以上であるなら
ば制癌効果有効と定めている（癌と化学療法、１４Ｃ１
）（昭６２）ｐ、２３１〕。

表に示す如く、本化合物（りはどの投与群でもこの基準
値ｔｈ回っているので、制癌効果は明らかである。

以下余白（Ｉｖ）抗菌性試験本化合物（Ｉ）について、拡散法による抗菌性試験を常
法（Ｋ、Ｅ、Ｃｏｏｐｅｒ、”Ａｎａｌｙｔｉｅａｌ　
Ｍｉｃｒｏ　−ｂ　ｉ　ｏ　１　ｏｇｙ”（Ｉ９８３）
　Ａｃａｄｃ＋ｍｊ　ｃ　Ｐｒｅｓｓ　（米）％Ｐ、１
）に従って行った。使用した菌は、Ｂａｃｉｌｌｕｓｇ
ｕｂｔｉｌｉｓ、５ｔａｐｈｙｌｏｅｏｅｃｕｓ　ａｕ
ｒｓｕｓ、Ｍｌｅｒｏｅｏｃｃｕａｌｕｔｅｕ＠、Ｅａ
ｃｈｅｒｔｅｈｉＩＬｅｏｌｉ、Ｐｒｏｔｅｕｓ　ＭＬ
ｒａｂ目ｉｓ。

Ｐａｅｕｄｏｍｏｎａａ　ａｅｒｕｇｉｎｏｉａ及びＣ
ａｎｄｉｄ＋ａｔｒｏｐｉｃａｌ　ｉｎ　　の７種であ
る。これらの菌に対して、本化合物（Ｉ）Ｆｉ抗菌性を
示さなかった。

急性毒性１６匹のマウス（ＩＣＲ、５週令、雄、体重１５〜２０
１）に本化合物（Ｉ）　６．９　ｒｎｇを１日１回、５
日間にわたシ腹腔内投与した。合計投与量３４．９■に
至っても何れのマウスも健常でめり、異常は認められな
かった。従って、ＬＤｇは４６０■／にノ以上であシ、
毒性は極めて弱いことが明らかである。

〔実施例〕

以下、製造例及び実施例を掲げ、本発明を具体的に説明
するが、本発明はこれらに限定されるものではない。

（製造例〕乳白色液状のＪａｎｍｇｕｂａ　１ａｔｅｘ　１１にジ
クロロメタン１ノを加え、充分攪拌後分液し、ジクロロ
メタン層を除いた。この操作をもう一度くシ返し、更に
水漸中の不溶物を遠心分離により除き、得られた淡赤褐
色の水層に食塩を加え飽和させた。次いでこのものを酢
酸エチル５００１で３回抽出し、無水硫酸ナトリウムで
酢酸エチル抽出液を乾燥後、減圧下で酢酸エチルを留去
すると、赤褐色の油分５．９１が得られた。これを４０
０ｔのシリカゲルカラム（ナカライテスク社製シリカゲ
ル６０．２３０〜４００メツシユ）にかけ、酢酸エチル
：ベンゼン＝６＝１で流出させ、メルク社製ＴＬＣで分
析し、Ｒｆ値＝０．３２部分を分離した。ＴＬＣの展開
溶媒は、流出溶媒と同じく、酢酸エテル：ベンゼン−６
：　１　ｆ用いた。

かぐして淡黄色油状をした化合物（Ｉ）を１．４１得た
。

このものの物性値は、下記のとおシであつた。

ＭＳ（ｍ／ｅ値）：１５４（Ｍ　）＝１９− −２０　＝１１２．１１０，８２．６Ｂ、５４．３９ＩＲ測定値（
儂−１）：３４００，１６８８〜１６７０゜１３８７．
１２６２，１１３２゜１１００．１０６７．１０１７゜ＩＨ−ＮＭＲδ値：　２．３０（２Ｈ，ｔａ）２．７０
（２Ｈ，ｍ）４．００（２Ｈ，藷１）４．２５（ＩＨ，ｍ）６．０２（ＩＨ，ｄ）６．７６（ＩＨ，ｍ）（実施例１）注射剤本化合物（Ｉ）　　　　　　　　　２００■？リオキシ
エチレン硬化ヒマシ油　　　５００■注射用蒸留水全量　　　　１０ｍ上記処方に従い、常法によシ注射剤を調製し１アンゾル
２ｄずつ充填した。

（実施例２）錠剤本化合物（ｔ）　　　　　　　　　　　１ｏ　ｏをＤ−
マンニトール　　　　　　　　　　　１５０■結晶セル
ロース　　　　　　　　　　　　５０即バレイシヨデン
ゾン　　　　　　　　　２８ＩＩＩＩカルボキシメチル
セルロースカルシウム　　　１６■メルク　　　　　　
　　　　　　　　　４■ステアリン酸マグネシウム　　
　　　　　　　２■全量　　　　　　　３５０Ｒｇ上記成分を常法に従って混和し、６０メツシユの金網を
通して粒度を調整した後、打錠機を用いて錠剤１個を製
造した。

１日当９２〜６錠を経口的に投与する。

（実施例３つカプセル剤本化合物（Ｉ）　　　　　　　　２ｏｏｍｇトウモロコ
シデンゾン　　　　　　　１５０■タルク　　　　　　
　　　　　　　　８ｏ■ステアリン酸マグネシウム　　
　　３０■全量　　　　　　４６０■ 以上を充分混和し、６０メツシユの金網を通して粒度を
調整した後、ゼラチンカプセルに充填した。

１日当り１〜３力ゾセルヲ柱口的に投与する。

（実施例４）坐剤本化合物＜１）２５０１１１ｇカカオ脂　　　　　　　　　　　１７５０１１ｉ１全量
　　　　　　２０００ｍｇカカオ脂を５０℃に加熱して溶解し、これに本化合物（
Ｉ）を加えて均一にし、次いでコンテナーの中に流し込
み冷却固化させて坐剤を１個製造した。

〔発明の効果〕

以上のように、化合物（Ｉ）は強い制癌作用を有し、優
れた延命効果を示しながら、抗菌作用は示さないため、
これを有効成分とする本発明制癌剤は、制癌効果が高く
、副作用の少ない制癌剤である。

また、化合物（Ｉ）は一般の極性有機溶媒に溶解し易い
ほか水にもやや溶け、更に、広範囲のｐＨ及び高熱にも
安定で、制癌作用ＫｔＲとんど影響を受けない。このた
め製剤化における取扱いが容易である。

また、本化合物０）は天然物からの抽出のほか、化学合
成によシ宕易に供給され、多量提供上の利点がある。

以上のように多くの優れた特性を有する本発明制癌剤は
、産業上の利益に資するところが太きい。

以上

Claims

【特許請求の範囲】１、次式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ）で示される１−ヒドロキシ−シス−７−オキサビシクロ
〔４．３．０〕ノナ−２−エン−４−オンを有効成分と
する制癌剤。