JPH02142724A - チロシンキナーゼ阻害剤及び制癌剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、ペプチドのチロシン残基を特異的にリン酸化
する酵素であるチロシンキナーゼ阻害剤、及び制癌剤に
関する。

［従来の技術］ 最近、細胞増殖因子の受容体、例えば、ＥＧＦレセプタ
ー、ＰＤＧＦレセプター、Ｃ３Ｆ−ルセプター、インス
リンレセプター等がチロシンキナーゼ活性を有し、また
、発癌遺伝子の生産物にチロシンキナーゼ活性が認めら
れ、活性化された発癌遺伝子でチロシンキナーゼ活性が
上昇していることが明らかになり、チロシンキナーゼが
細胞の増殖、癌化に重要な役割を果たしていることが知
られてきた。そこで、チロシンキナーゼ活性を特異的に
阻害する薬剤が、新しい作用機序を持った副作用の少な
い制癌剤、発癌防止剤となりうろことが期待され、かか
る薬剤の研究開発が進められている。

従来、チロシンキナーゼ阻害剤として微生物由来のアー
プスタチン（Ｅｒｂｓｔａｔｉｎ）、ハービマイシンＡ
　（Ｈｅｒｂｉｍｙｃｉｎ　Ａ　）或いはゲニスタイン
（Ｇｅ−ｎｉｓｔｅｉｎ）等、化学合成品では次式に示
すような４−ヒドロキシ桂皮酸アミド誘導体〔バイオケ
ミカルアンドバイオフィジカルリサーチコミュニケーシ
ョンズ（Ｂｉｏｃｈｅｍｊｃａｌ　ａｎｄ　ｂｊｏｐｈ
ｙｓｉｃａｌ　　ｒｅｓｅａｒｃｈ　　ｃｏｕ＋ｍｕｎ
ｉｃａｔｉｏｎｓ）　　Ｖｏｌ、１４７　　Ｎｏ、］ｐ
３２２　（１９８７））、３，５−ジイソプロピル−４
−ヒドロキシスチレン誘導体（特開昭６２−３９５２２
号公報）さらには３．５−ｔ−ブチル−４−ヒドロキシ
スチレン誘導体（特開昭６２−３９５２３号公報）等が
提案されている。

［発明が解決しようとする課題］ 上記化合物は構造が比較的複雑であり、一般に製造コス
トが高くなる傾向にある。本発明は、比較的簡単な構造
からなり、製造が容易な新しいチロシンキナーゼ阻害剤
及び制癌剤を提供することを課題とするものである。

［課題を解決するための手段］ 本発明者は、チロシンキナーゼがチロシンのフェノール
性水酸基にリン酸を付加する活性を有することに鑑み、
当該酵素がチロシンの場合と同様に作用し、かかる作用
の過程において酵素活性を失わせるような化合物がチロ
シンのアナログに存在するとの予測を立て、鋭意研究を
進めた結果、ある種のチロシンアナログ体がチロシンキ
ナーゼ阻害活性を有することを見出した。

本発明は、かかる知見に基づき発明されたもので、本発
明は、チロシンキナーゼ阻害剤及び制癌剤として、ｌ・
記の一般式（１） （ここで、Ｘは−○Ｉ］、−ＮＨ２又は−ＯＲで、この
Ｒは低級アルキル基を示す）で表されるヒドロキシフェ
ニルプロペン酸誘導体を有効成分とすることからなるも
のである。

本発明における上記ヒドロキシフェニルプロペン酸誘導
体の代表的なものとしては、２−ヒドロキシフェニルプ
ロペン酸、３−ヒドロキシフェニルプロペン酸、４−ヒ
ドロキシフェニルプロペン酸及びこれらの酸アミド或い
はこれらとメタノール、エタノール、プロパツール、ブ
タノール等の低級アルコールとのエステルを例示するこ
とができる。

これらの化合物はチロシンキナーゼ阻害剤或いは制癌剤
として用いられるが、これらは、経口、経腸又は非経口
的な投与のいずれの形態にでも、例えば、錠剤、カプセ
ル剤、細粒剤、シロップ剤、座薬、軟膏剤、注射剤等に
製剤して用いることができる。この場合、製剤の担体と
して、経口、経腸又は非経口的に投与するに適した有機
又は無機の固体又は液体の薬学的に不活性な担体、例え
ば、結晶性セルローズ、ゼラチン、乳糖、澱粉、ステア
リン酸マグネシウ１１、タルク、植物性及び動物性脂肪
及び油、刀１１、ポリアルキレングリコール等を用いる
ことができる。本発明の薬剤は、これらの担体に対し、
上記化合物を０．１〜２００％の範囲で適宜選定して用
いることができる。また、本発明の薬剤は、他の同様の
薬剤或いはその他の医薬と混合して使用することもでき
る。

本発明のチロシンキナーゼ阻害剤或いは制癌剤は、所望
の作用が、著しい副作用を伴わないで達成されるような
投与量が投与され、一般には、成人−人当り１ｍｇ〜Ｌ
ｏｇの範囲で適宜選定して投与することができる。

［実施例コ ２−ヒドロキシフェニルプロペン酸、３−ヒドロキシフ
ェニルプロペン酸、４−ヒドロキシフェニルプロペン酸
を用い、チロシンキナーゼ阻害作用を調べた。

このチロシンキナーゼ阻害作用は、ニス、コーエン（Ｓ
、Ｃｏｈｅｎ）らのチロシンキナーゼ活性測定法〔ザジ
ャーナルオブバイオロジカルヶミストリー（Ｊ、Ｂｉｏ
ｌ、Ｃｈｅｍ、）、Ｖｏｌ、　２５７．Ｐ１５２３（１
９８２））の方法に準じて測定した。すなわち、ヒト癌
細胞由来のＡ−４３１株を、牛胎児血清１０％を含むダ
ルベツコ変法イーグル培地中で、３７℃、５％炭酸ガス
雰囲気で培養した。得られた細胞を上記チロシンキナー
ゼ活性測定法に記載の方法で処理し、上皮細胞増殖因子
受容体−チロジンキナーゼ複合体を含有する股標品を得
た。この膜標品は可溶化することなく、測定に用いた。

Ｎ−２−ハイドロキシエチルピペラジノ−Ｎ′−２−エ
タンスルホン酸緩衝液２０ｍＭ（ＰＨ７，４）、塩化マ
ンガン１ｍＭ、牛血清アルブミン７．５μｇ及び上記膜
標品３０μｇ（蛋白として）からなる液に、エタノール
に溶解した２−ヒドロキシフェニルプロペン酸、３−ヒ
ドロキシフェニルプロペン酸及び４−ヒドロキシフェニ
ルプロペン酸をそれぞれ加え、これにさらに上皮細胞増
殖因子１１００ｎを加え、０℃で、１０分間インキュベ
ートした。次いで、３０００Ｃｉ／ｍｍｏｌ濃度の（ｙ
−”Ｐ）ＡＴＰを５μＣｉ添加し、最終的に５０μｍと
し、更に０℃で１０分間インキュベートした後、リーム
リ（Ｌｅａｍｍｌｉ）　Ｓ　Ｄ　Ｓサンプルバッファー
５０μｌを加えて、反応を停止させた。次にこの反応液
を１００℃で、５分間沸騰させた後、７．５％アクリル
アミドよりなるＳＤＳゲル電気泳動法により分画した。

次に、オートラジオグラフィーで、１７００００ダルト
ンの上皮細胞増殖因子受容体−チロジンキナーゼ複合体
の位置を確認した後、その部分を切り出し、液体シンチ
レーションカウンターを用いて放射能を測定した。

チロシンキナーゼ阻害作用を２−ヒドロキシフェニルプ
ロペン酸、３−ヒドロキシフェニルプロペン酸及び４−
ヒドロキシフェニルプロペン酸等を添加しない場合の反
応による放射能の量を５０％まで低下させることができ
るこれらの化合物の濃度（μＭ）として求めた。この結
果を第１表に示した。

第　　１　　表 一８＝ この結果から、これらの化合物が強いチロシンキナーゼ
阻害活性を示すことが分かる。尚、これらの阻害活性は
、これらの化合物のうち主に水酸基を有する芳香環の部
分によって発揮されているものと認められ、これらの化
合物の酸アミド或いはエステル誘導体についても同様な
阻害活性を有することは容易に予測しうる。また、この
強いチロシンキナーゼ阻害活性から、制癌作用を有する
ことは明らかで、制癌剤として使用できることは十分に
予測できる。

［発明の効果］ 本発明の化合物は、比較的簡単な構造からなり、製造が
容易でチロシンキナーゼ阻害活性を有し、副作用の少な
い、新しいチロシンキナーゼ阻害剤さらには制癌剤とし
て利用できるという格別の効果を奏するものである。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）下記の一般式（ I ）で表されるヒドロキシフェ
   ニルプロペン酸誘導体を有効成分とするチロシンキナー
   ゼ阻害剤。 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （ここで、Ｘは−ＯＨ、−ＮＨ＿２又は−ＯＲで、この
   Ｒは低級アルキル基を示す。）
2. （２）下記の一般式（ I ）で表されるヒドロキシフェ
   ニルプロペン酸誘導体を有効成分とする制癌剤。 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （ここで、Ｘは−ＯＨ、−ＮＨ＿２又は−ＯＲで、この
   Ｒは低級アルキル基を示す。）