JPH01502268A - アミノグリコシド誘因腎臓毒に対する保護 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

アミノグリコシド誘因■臓毒に対する保護１、序論 本発明は、アミノグリコシドの毒性作用を媒介する反応性酸素代謝物の発生を抑 制し、該代謝物を効果的に清掃ま合物は、ヒドロキシルラジカル等のフリーラジ カルまたは過酸化水素および超酸化物等のその代謝性前駆体の発生を抑制し、効 果的に清掃または無毒化する薬剤を含む。本発明の特定な実施態様において、ヒ ドロキシルラジカル清掃剤である化合物は、アミノグリコシドの肝臓前に対する 防護を与えることができる。本発明の他の実施態様において、鉄キレート化剤（ Ｃｈｅｌａｔｏｒ）である化合物は、アミノグリコシド誘導腎臓損傷を減少する ことができる。 アミノグリコシド坑生物質（例えばストレプトマイシン、ゲンタマイシン、カナ マイシン、トブラマイシン等）は、グラム陰性細菌によって引き起こされた感染 の処置に広く用いられている。アミノグリコシド類（アミノグリコシブ４　ツク アミノシクリトール類（ａｍ＋ｉｎｏｇｌｙｃｏｓｉｄｉｃ　ａｍｉｎｏｅｙ’ ｅ１ｉｔｏｌｓ））全てはヘキソース類（アミノシクリトール類）核へのグリコ シディック結合におけるアミノ糖類を含む。ヘキソースは、ストレブチジン（ス トレプトマイシン中）または２−デオキシストレプトアミンのいずれかである。 アミノグリコシド族は、ヘキソースに付着されたアミノ糖類に基づいて識別され る［グツドマンおよびジルマン編、１９８０年、ファーマコロジカル　ベイシス 　オブ　セラビニ−ティクス、第６版、シーエイチ、５１．第１１６２〜１１９ ９頁（Ｇｏｏｄｉａｎ　ａｎｄ　Ｇｉｌｍａｎ　ｅｄｓ、、　１９８０．　Ｔｈ ｅ　ＰｈａｒｍａｅｏｌｏｇｉｃａｌＢａｓｉｓ　ｏｆ　Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉ ｃｓ、　８ｔｈ　Ｅｄ、、　Ｃｈ　５１．１）Ｉ）、　１１６２−１１９９）］ 。　アミノグリコシド坑生物質の速やかな殺菌作用は、感染性微生物におけるタ ンパク質合成の禁止によって生じる。いくつかの感染性微生物を挙げると、少な いがエシニリキア種（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｓｐｐ、）、ヘモフィラス種（ Ｈａｅｍｏｐｈｉ　Ｉｕｓ　ｓｐｐ、）、　リステリア種（Ｌｉｓｔｅｒｉａ　 ｓｐｐ、）、シュードモナス類（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ｓｐｐ、）、ノカル ディア類（Ｎｏｃａｒｄｉａ　ｓｐｐ、）、エルジニア種（Ｙｅｒｓｉｎｉａ　 ｓｐｐ、）、クエブシエラ種（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ　ｓｐｐ、）、エンテロバ クタ一種（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ｓｐｐ、）、サルモネラ種（Ｓａｌｍｏ ｎｅｌｌａ　ｓｐｐ、）、ブドウ球菌種（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｅｏｃａｓ　ｓｐ ｐ、）、連鎖法菌種（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｓｐｐ、）ｌ　ミコバクテ リウス種（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａ　ｓｐｐ、）、赤痢菌種（Ｓｈｉｇｅｌｌ ａ　ｓｐｐ、）およびセラチア種（Ｓｅｒｒａｔｉａ　ｓｐｐ、）が挙げられる ０タンパク質合成禁止は、３０Ｓ　リポソーム　サブユニットに対して直接作用 することにより翻訳、開始の干渉および遺伝子コードの読み違いを引き起こすこ とにより生じるらしい（グツドマンおよびジルマン前述）。 そのアミノ基のためにアミノグリコシドの全ては、生理学的ｐＨにおいて陽イオ ン性であり、そして陽イオン度は存在アミノ基の数と分子中のその位置の両者の 関数である。 アミノグリコシドの極性は、基の部分によって分配された薬物速度論理的性質に 主に応答性である。例えば、これらの薬剤は、経口投与後吸収されることはなく 、脳を髄液に容易に浸透せず、−また肝臓により速やかに排出さ、れる。またこ れらの薬剤は、極性が高いので受動拡散がほとんどなく、かつ細胞膜を横切って 活性的に移送される（グツドマンおよびジルマン、前述）。陽イオン性はまた、 アミノグリコシド毒における臨界的役割を果すらしい。 重大な毒性は、アミノグリコシドの有効性に対する主な制限である［ヒュームズ 　エイチ、ディー、ヴニインバーグ、ジェイ、エム、、１９８６年、トキシック 　ネフロファティーズ、イン　ザ　キドニー、ブレンナー、ビー、エム。 およびエフ、シー、レフター編、ダブり二一、ビー、サウンダーズ　カンパニー 、フィラデルフィア、ペンシルバニア州、第１４９１〜１５３２頁（Ｈｕｍｅｓ 、　Ｈ，Ｄ、　ａｎｄ　Ｗｅｉｎｂｅｒｇ、　Ｊ、Ｍ。 、１９８６．　Ｔｏｘｉｃ　Ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｉｅｓ、　ｉｎ　Ｔｈｅ　Ｋ ｉｄｎｅｙ、　Ｂｒｅｎｎｅｒ。 Ｂ、Ｍ、　ａｎｄ　Ｆ、Ｃ，Ｒｅｃｔｏｒ、　ｅｄｓ、、　Ｗ、Ｂ、　５ａｕｎ ｄｅｒｓ　Ｃｏｍｐａｎｙ、　Ｐｈ１ｌａｄｅｌｐｈｉａ、　Ｐａ、、　ｐｐ、 　１４９１−１５３２）に記載、グツトマンおよびジルマン、前述も参照］。３ 系統の毒性がアミノグリコシドの使用でしばしば起こる。すなわち（１）それは 第８頭蓋神経の聴覚および前庭の両方の使用を含み得る聴器毒性、（２）急性細 管壊死として顕著な肝臓前；および（３）胸内および腹腔内投与に次いで起こり 得、呼吸窮迫となる神経筋閉塞として顕著な急性中毒である。 肝臓前は急性腎不全の全ケースの１０〜１５％の原因を示す抗生アミノグリコシ ドの使用の主要な合併症である（ヒュームズ、エイチ、ディー、およびヴエイン バーグ、ジエイ、エム、前述）。最初にエンザイムユリア（ｅｎｚｙｍｕｒｉａ ）として表わされる。アミノグリコシドの単純服用投与後２４時間程で刷子縁膜 酵素の活性は、尿中に検出され治療の続行に従って活性の急性な増加を伴う。近 位細管移送プロセスもまた損われグリコスユリア（ｇｌｙｃｏｓｕｒｉａ）　、 アミノ酸ユリア（ａｍｉｎｏａｃｉｄｕｒｉａ）および他のベータ２−ミクログ ロブリンユリアとのファンコニ一様シンドローム関連疾患および細管タンパク質 ユリアを導く。腎臓のＫ”およびＭｇ−消耗もまた生じ、明白な低カリウム血症 および低マグネシウム血症を導く。抗バソプレミン性尿濃縮疾患の結果、多床症 もまたアミノグリコシド腎臓前の初期に発達する。 急性腎不全は、代表的には処置後５〜７日後に生じ、血尿窒素および血漿クレア チニンレベルの急激な増加により臨床的に表わされる。光学顕微鏡の基量も明ら かな組織生理学的変化は、近位細管壊死である。細管超微粒子構造は、骨髄様体 として表わされる同心性の多層稠密模様を含む顕著なチトセグレーソーニス（ｅ ｙｔｏｓｅｇｒｅｓｏｍｅｓ）の証拠を示すＯ肝臓前に対するゲンタマイシンの 特異性は、明らかに肝臓近位回施状細管におけるその優先的蓄積に関連する（血 漿の５０〜１００倍）。しかしながら、組織生理学的欠損が近位細胞に対して制 限されるので、糸状の濾過割合の観察される落差（ｆａｌｌ）に対する原因は、 明確でない。 生物学的膜に対するゲンタマイシンの効果は、おそらく病原性連鎖に臨界的であ ろうがその正確なメカニズムは未知である。しかなしながら、アミノグリコシド 陽イオン性は、その重要な役割を果すことが推定される。アミノグリコシド陽イ オン性の結果、酸性リン脂質が薬剤の部位を結合する主要な膜である。脱酸リン 脂質に対するアミノグリコキシドの親和性は、脱酸リン脂質が膜構造およびと透 過性を与え、膜結合酵素の作用並びにホルモン−膜レセプター相互作用に重要な 役割を果すので多数の血漿膜および細胞下（ｓｕｂｃｅｌ　Ｊａｒ）プロセスを 影響する可能性があるかもしれない。生体内で観察されたいくつかの細胞下膜に 対するアミノグリコシドの影響の例として（ヒニームズおよびヴエインバーグ、 前述）、（ａ）ナトリウム−カリウムＡＴＰアーゼの活性の抑制、（ｂ）腎皮質 からのりソソーホスファリパーゼＡおよびＣのおよびエクストラリソワームホス ファチジルイノシトール特異性ホスフォリパーゼの抑制、（Ｃ）孤立腎刷子縁膜 におけるナトリウム依存グルコース取り込みの抑制、（ｄ）アデニルシクラーセ を刺激し従って隔離膀胱における水透過性を増加する抗利尿ホルモンの能力の抑 制、（ｅ）低アミノグリコシド濃度におけるリソソームの安定化および高アミノ グリコシド濃度におけるリソソームの能力の増加、および（ｆ）ミトコンドリア 膨張およびミトコンドリア呼吸作用の改質がある。生体内で観察された細胞外シ ステムに対するアミノグリコシドの影響の例として（ヒュームズおよびヴエイン バーグ）、（ａ）リゾソーム性スフィンゴミエリナーゼおよびホスフォリパーゼ Ａ等のリゾソーム改質の抑制およびリソソームおよびリゾソーム外ホスファジル イノシトールの両者の増加、（ｂ）グリコスユリアおよびカリウムよおびマグネ シウム消費により示されるごとく腎臓毒の初期段階における細管移送異常、（Ｃ ）ミトコンドリア作用の異常および（ｄ）主に糸状毛細限外濾過率の減少（また おそらく二次的に腎臓内アンジオテンシン１１発生）により面積あたりの腎系状 濾過割合の減少がある。 従って、アミノグリコシドの生体内外効果において多くの情報がある。これは、 アミノグリコシド誘因腎不全の病因を説明するいくつかの仮説を導く　（ヒニー ムズおよびヴエインバーグ、前述）、そしてそれはリゾソーム、ミトコンドリア 、および血漿の構造および機能の破壊を含む。しかしながら、細胞、細胞外また は細胞成分のいずれかがアミノグリコシド細胞損傷の発達に最も臨界であるかは 未知である。 アミノグリコシドの潜在的臨界生物学的効果を抑制する研究は、必ずしも腎臓毒 の好転を導いていない。例えば、増加脂質過酸化がゲンタマイシンを接種された ラットの腎皮質に生じることが明確に示されている［ラムサミー、エル、ニス、 等、１９８５年、バイオケム、、ファーマック、。 ３４：第３８９５〜３９００頁（Ｒａｍｓａｍｍｙ、　Ｌ、Ｓ、、　ｅｔ　ａｌ 、、　１９８５．　Ｂｉ。 ｃｈｅｌｌ、　Ｐｈａｒｍａｃ、　３４：３９８５−３９００）コ。これは、脂 質過酸化がアミノグリコシド腎臓毒の病因に加わることができるという可能性を 提起した。脂質過酸化をアミノグリコシド腎臓毒の病因に結びつけるという仮定 は、ジフェニルフェニレンジアミン（Ｄ　Ｐ　Ｐ　Ｄ）の投与が脂質過酸化を禁 止するかどうか、そして従ってゲンタマイシン誘因腎不全を好転するかどうかを 決定すうることにより試験された（ラムサミー、エル、ニス、ら、１９８６年、 ジエイ、ファーム、エキスプ、サー　２３８：第８３頁（Ｒａｍｓａｍｍｙ、Ｌ 、Ｓ、、　ｅｔ　ａｔ、、　１９８６．　Ｊ、　Ｐｈａｒｍ、　Ｅｘｐ、　Ｔｈ ｅｒ、　２３８：８３）　ｏゲンタマイシンは、ラット腎皮質において脂質過酸 化産生物、マロンジアルデヒドを増加した。しかしながら、ＤＰＰＤでの同時処 置は、脂質過酸化を禁じたが、ゲンタマイシン処置により引き起こされた機能的 または組織学的のいずれの腎不全も抑制しなかった。従って、この研究は、アミ ノグリコシドが生体内外のいずれかにおけるいくつかの生物学的プロセスを影響 するという事実が必ずしも急性腎不全の病因におけるこのような影響の重要性を 推論するものではないということ、すなわちアミノグリコシドの特異的生物学的 効果が急性腎不全の抑制を必ずしも導かないことを説明する。 別の研究は、アミノグリコシド活性および毒性に対する付加的化合物の効果を考 察している。ＰＣＴ国際出願番号ＰＣＴ／ＵＳ８４１００８５５号（公表番号ν ０８５１０５０８０．１９８５年、１１月２５日公表）は、投与後に、アミノグ リコシドと薬剤のその内因性毒性レセプターへの結合を引き続いて抑制または減 少するリガンド（脂質または脂質頭基）との混合によりアミノグリコシド毒性を 減少する方法を開示している。ポリアスパラギンおよびポリアスパラギン酸等の 多価アミノ酸は、生体外におけるゲンタマイシンが肝臓刷子縁膜小嚢へ結合する ことを禁止し、かつラットにおけるゲンタマイシンおよびアミカシン腎臓毒を禁 止するこが示されている。［ウィリアムス、ピー、ディー、等、１９８６年、ジ エイ、ファーム、エキスプ、セラーブ、　２３７　：第９１９頁（Ｖｉｌｌｉａ ｉｓ、　Ｐ。 Ｄ、、　ｅｔ　ａｌ、、　１９８Ｂ、　Ｊ、　Ｐｈａｒｍ、　ＥＸＩ）、　Ｔｈ ｅｒａｐ、　２３７：９１９）］。 アミノグリコシド坑生物質の副作用、すなわち腎臓毒おび第８神経毒は２．５− ジーＯ−アセチルーＤ−グルコーサヵロ−１，４：６．３−ジラクトン（フルノ 等（Ｐｕｒｕｎｏ　ｅｔａｌ、）による米国特許第３．９２８．５８３）または 一定の他のグルコ糖酸またはその金属塩（フルノ等による米国特許第３，９６２ ．４２９号）の投与によって減少し得る。例えば超酸化物および／またはヒドロ キシルラジカルの使用によるアミノグリコシドの酸素ラジカル活性化は、薬剤の 極性を減少するらしく、従ってその細胞膜浸透を増強しまた殺菌有効性を増加す る（欧州特許出願番号８１４０２３９４．７、公開番号０１３４３７２．１９８ ５年３月２０日公開）。鉄キレート化剤であるデフニロキシアミンの役割は、リ コキシドの抗細菌作用に関して生体外で研究された［フォノ　アスペック、ビー 、ニス。 等、１９８３年、ユーロ、ジェイ、クリン、ミクロパイオル。 ２：第４３２〜４３ｇ頁（Ｖａｎ　Ａｓｂｅｃｋ、　Ｂ、Ｓ、、　ｅｔ　ａｌ、 、Ｅｕｒ、　Ｊ、　Ｃｌ１ｎ、　Ｍｉｅｒｏｂｉｏｌ、　２：４３２−４３８） ］　、　２．　３−ジヒドロキシ安息香酸またはジメチルスルフオキシドは、セ プミス助長による死亡率に対する化合物の効果を決定するため膜腔内ス［ピアー ス、アール、エイ、等、１９８５年、アーチ、サーブ、１２０：９３７　（Ｐｅ ａｒｃｅ、　Ｒ，Ａ、、　ｅｔ　ａｌ、、　１９８５．　Ａｒｃｈ、　Ｓｕｒｇ 。 １２０：９３７）］。］２．３−ジヒドロキシ安息香のみ生存時間を増加しジメ チルスルフオキシドは増加しなかった。 ２．２０反応性酸素代謝物 １価の経路（ｕｎｉｖａｌｅｎｔ　ｐａｔｈｗａｙ）　による酸素完全な減少は 、中間体として超酸化アニオンラジカル、過酸化水素およびヒドロキシシルラジ カル（ＯＨ’）の生成をもたらす［フリートビ・シヒ、アイ、、１９７６年、オ キシジエン。 ラジカルズ、ハイドロシュン　パーオキシド　アンド　オキシジエン　トキシシ ティ、　イン　フリー　ラジカルズイン　バイオロジー　第１巻、アカデミツク 　プレス、。 第２３９〜２７８頁；マスドロ、　アール、エフ、、１９８０年、アクタ、フィ シオル、　スキヤント、サブ、９２：第１５３〜１６８頁（Ｆｒｉｄｏｖｉｅｈ 、　１．、１９７Ｂ、　Ｏｘｙｇｅｎ　Ｒａｄｉｃａｌｓ、　Ｈｙｄｒｏｇｅｎ 　ｐｅｒｏｘｉｄｅ　ａｎｄ　ｏｘｙｇｅｎ　ｔｏｘｉｃｉｔｙ、ｉｎ　Ｆｒｅ ｅ　ＲａｄｉｃａＩｓ　ｉｎ　Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｖｏｌ、Ｉ、Ａｃａｄｅｍｉｃ 　Ｐｒｅｓｓ　ｐｐ、２３９−２７８；　Ｍａｓｔｒｏ、Ｒ，Ｆ、、１９１１１ ０．　Ａｃｔａ、Ｐｈｙｓｉｏｌ、５Ｃａｎｄ、５ＬＩｐｌ）、９２：１５３− １６８）］。これらの中間体は、庄体組織に容認するのに反応性がありすぎ酸素 の電子スピン制限をバイパスし酸素の水への２価および４偏速元を達成し得る種 々の酵素メカニズムが展開している。従って細胞を呼吸することによって消費さ れるほとんどの酸素は、超酸化物または過酸化水素のいずれも放出せずに酸素を 水に還元するチトクロムオキシターゼに利用される（フリードビッヒ（アイ１． 前述）。 これにもかかわらず細胞の呼吸において少なくとも酸素のいくらかの還元は、− 偏速元経路を経て生ずる。生体外研究においてミクロソームおよびミトコンドリ アの超酸化物および過酸化水素の発生する能力［チャンス、ビー０９等、１９７ ９年、フィシオル、シブ。５９：第５２７〜６０５頁；フォアマン、エイチ、ジ エイ、およびボバリス、エイ、　、　１９８２年、スーパオキシド　ラジカル　 アンド　ヒドロジエン　パー第６５〜９０頁（Ｃｈａｎｃｅ、　Ｂ、、　ｅｔ　 ａｌ、、　１９７９．　Ｐｈｙｓｉｏｌ、　Ｒｅｖ。 ５９：５２７−６０５；　Ｆｏｒｍａｎ　Ｈ，Ｊ、、　ａｎｄ　Ｂｏｖｅｒｉｓ 、　Ａ、、１９８２．５ｕｐｅｒｏｘｉｄｅ　ｒａｄｉｃａｌ　ａｎｄ　ｈｙｄ ｒｏｇｅｎ　ｐｅｒｏｘｉｄｅ　ｉｎ　ｍ１ｔｏｃｈｎｏｄｒｉａ、　ｉｎ　Ｆ ｅｅ　Ｒａｄｉｃａｌｓ　ｉｎ　Ｂｉｏｌｏｇｙ、　Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅ ｓｓ、　ｐｐ、　６５−９０）コが証明されている。 ミトコンドリア呼吸を影響する試薬は、過酸化水素発生を増強することが示され ている［フォアマンおよびボバリス、前述、ドロショウ、ジエイ、エイチおよび デビース。 ケイ、ジェイ、エイ、　１９８６年、ジエイ、　パイオル、ケム。 ２６１：第３０８８〜３０７４頁（Ｄｏｒｏｓｈｏｗ、　Ｊ、Ｈ，ａｎｄ　Ｄａ ｖｉｅｓ、　Ｋ、Ｊ、Ａ、、　１９８Ｂ、　Ｊ、Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｗ、　２６ １：３０Ｂｇ−３０７４）コ。本発明者らは、予め、ゲンタマイシンが腎皮質ミ トコンドリアにより過酸化水素の産生を増加することを示している。［ウォーカ ー。 ビー、ディー、等、１９８５年　ゲンタマイシン　インデニースド　ジェネレー ション　オブ　ハイドロジエン　パーオキシド　バイ　レナル　ミトコンドリア （ミド）、アブストラクト、アメリカン　ソサイエティー　オブ　ネフォロジー 　ミーティング　１９８４年１１日、キドニー　インターナショナル　２７：第 ２３８頁；ウォーカー、ビー、ディー等、１９８６年、リアクティブ　オキシジ エン　メタボライン　アンド　リピッド　バーオキシデーション　イン　ゲンタ マイシン　ネフォロトキシティー、　アブストラクト、インターナショナル　ア カデミイー　オブ　ファタロジー　ミーティング、　１９８６年８月　ラボ、イ ンヴエスト、５４：第６７Ａ頁（Ｗａｌｋｅｒ、　Ｐ、Ｄ、、　ｅｔ　ａｌ、、 　１９８５．　Ｇｅｎｔａｍｉｃｉｎ　ｉｎｄｕｃｅｄｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　 ｏｆ　ｈｙｄｒｏｇｅｎ　ｐｅｒｏｘｉｄｅ　ｂｙ　ｒｅｎａｌ　ｍ１ｔｏｃｈ ｏｎｄｒｉａ　（ＭＩＴＯ）、　ａｂｓｔｒａｃｔ、　Ａｍｅｒｉｃａｎ　５ｏ ｃｉｅｔｙ　ｏｆ　ＮｅｐｈｒｏｌｏｇｙＭｅｅｔｉｎｇ、　Ｄｅｃｅｍｂｅｒ 、　１９８４．　Ｋｉｄｎｅｙ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　２７：２３８： 　Ｗａｌｋｅｒ、　Ｐ、Ｄ、、　ｅｔ　ａｌ、、　１９８Ｂ、　Ｒｅａｃｔｉｖ ｅ　ｏｘｙｇｅｎ　ｍｅｔａｂ。 １ｉｔｅｓ　ａｎｄ　１ｉｐｉｄ　ｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｇｅｎｔ ａｍｉｃｉｎ　ｎｅｐｈｒｏｔｏｘｉｅｉｔｙ、Ａｂｓｔｒａｃｔ、１ｎｔｅｒ ｎａｔｉｏｎａｌ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　ＰａｔｈｏｌｏｇｙＭｅｅｔｉｎｇ 、　Ｍａｒｃｈ　１９８Ｂ、　Ｌａｂ、　Ｉｎｖｅｓｔ、　５４：６７Ａ）コ。 はとんどミトコンドリアにより発生した過酸化水素は、超酸化物アニオンより導 かれるが全てではない（フォアマン、エイチ。 ジエイ、およびボバリス、エイ８．前述）。 超酸化物および過酸化水素に対する酵素の防御は、スーパーオキシドディスムタ ーゼ、カタラーゼおよびグルタチオンパーオキシターゼを含む。スーパーオキシ ドディスムターゼは、超酸化物ラジカルを過酸化ラジカルを過酸化水素および酸 素分子に変える。 ２０２−　＋２Ｈ”　−Ｈ２０２＋０２２つのスーパーオキシドディスムターゼ が哺乳類組織において同定された。すなわち、チトブラスミック銅−亜鉛および ミドコンドリアルマグネシウム依存酵素である［ファントン、ジエイ、シー、お よびワード、ビー、エイ、１９イ、　、　１９８５年、ヒユーマン　ファトロジ −１６（１０）：第９７３〜９７８頁　に記載；フリードビッヒ１．アイ、　、 　１９７９年。 スーパーオキシドディスムターゼ；ディフエニス　アゲインスト　エンドジエナ ス　スーパーオキシドラジカル。 イン　オキシジエン　フリーラジカルズ　アンド　テラシュ　ダメージ、チバ　 シンポジウム（ｒｅｖｉｅｗｅｄ　ｉｎ　Ｆａｎｔｏｎｅ、Ｊ、Ｃ，ａｎｄ　Ｗ ａｒｄ、　Ｐ、Ａ、、１９８２．　Ａｍｅｒ、　Ｊ、Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ　１０ ７：３９７−４１６；　Ｆａｎｔｏｎｅ、Ｊ、Ｃ，ａｎｄ　Ｗａｒｄ、Ｐ、Ａ、 、１９８５．Ｈｕｍａｎ　Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ　ＩＥｆ（ｔｏ）：９７３−９７ ８；　Ｆｒ１ｄｏｖｉｅｈ、！、　１９７９．５ｕｐｅｒｏｘｉｄｅ　ｄｊｓｍ ｕｔａｓｅ；　ｄｅｆｅｎｓｅ　ａｇａｉｎｓｔ　ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ　５ｕ ｐｅｒｏｘｉｄｅ　ｒａｄｉｃａｌ、　ｉｎ　ｏｘｙｇｅｎ　ｆｒｅｅ　ｒａｄ ｉｃａｌｓ　ａｎｄ　ｔｉｓｓｕｅ　ｄａｍａｇｅ、　Ｃ１ｂａ　Ｓｙｍｐｏｓ ｉｕｍ　６５ニア７−８５３゜過酸化水素に対する細胞無毒化に関する酵素メカ ニズムは、カラターゼおよびグルタチオンパーオキシターゼである［ファントン 、ジエイ、シー、およびワード、ビー、エイ、　、　１９８２年、前述；フリー ドビッヒ、アイ、　、　１９７６年、前述マエスト口、アール、エフ、　、　１ ９８０．アクタ、フィシオル、スキヤント、サブ、９２：第１５３〜１６８頁、 チャンス、ビー、等、１９７９年、フィシオル、シブ。５９：第５２７〜６０５ 頁（Ｍａｅｓｔｒｏ、　Ｒ，Ｆ、、　１９８０、　Ａｃｔａ、　Ｐｈｙｓｌｏｌ 、　５ｃａｎｄ、　５ｕｐｐ、　９２：１５３−１８８；Ｃｈａｎｃｅ、　Ｂ。 、　ｅｔ　ａｔ、、　１９７９．　Ｐｈｙｓｉｏｌ、　Ｒｅｖ、　５９：、　５ ２７−６０５）コ。ヘム酵素であるカタラーゼは、過酸化水素の水への２偏速元 を触媒する。 ２Ｈ２０２→２Ｈ２０＋０２ セレン依存酵素であるグルタチオンパーオキシターゼは、低濃度の過酸化水素で 有効であり、また脂質過酸化水素に対しても作用し、従って広範囲の過酸化物に 対抗する［ローレンス、アール、エイ、お！く−ク、エフ、アール、。 １９７６年、　／（イオケム、バイオフィズ、レス、コミューン。 ７１：第９５２〜９５ｇ頁（Ｌａｗｒｅｎｃｅ、　Ｒ，Ａ、　ａｎｄ　Ｂｕｒｋ 　Ｒ，Ｆ、、　１９７Ｂ、Ｂｉｏｅｈｅｍ、Ｂｉｏｐｂｙｓ、Ｒｅｓ、Ｃｏｖｒ ｔｒｕｎ、　７１：　９５２−９５８）コ。　最近、有機過酸化物を無毒化でき るが過酸化水素を固定化できないセレン依存グルタチオンパーオキシターゼ活性 が同定されている［ローレンス、アール、エイ、およびパーク、アール、エフ、 　、　１９７８年、ジエイ、ネーチャ＋、　１０８：第２１１１〜２１５０頁（ Ｌａｗｒｅｎｃｅ、　Ｒ，Ａ、　ａｎｄ　Ｂｕｒｋ、　Ｒ，Ｆ、、　１９７ｇ。 Ｊ、Ｎｕｔｒ、１０８：２１１−２１５）コ。 酵素メカニズムに加えて、細胞性無毒化もまた、還元グルタチオン（Ｇ　Ｓ　Ｈ ）により媒介されるらしい。実質的に全ての哺乳類細胞において高濃度に生じる トリペプチドであるＧＳＨは、フリーラジカルおよび反応性酸素中間体（例えば 過酸物）の作用に対する細胞の保護に機能すると思われる［メイタスター、エイ 、　、　１９８３年、サイエンス。 ２：第４７２〜４７８；ソイスター。エイ、およびアンダーソン。 エム、イー、　、　１９８３年、アン、ロブ、　バイオヶム、５２：第７１１〜 ６０頁；ソイスター。エイ、　、　１９８４年、ヘパトロジー４（４）：第７３ ９〜７４２；アンドレオシー、ニス、ビー、等、１９８６年、ジエイ、ラボ、タ リン、メト、　１０８（３）　；第１９０〜１９８頁；ジエンセン、ジー、エル 、およびソイスター。エイ、　、　１９８３年、プロス、ナトル、アヵド、サイ 、ニー、ニス、エイ、８０；第４７エ４〜４７１７頁；デスマーズ、ジニイ、ケ イ、およびメイスター　エイ、　、　１９８１年、ブロス、ナトル。 アカド、サイ、ニー、ニス、エイ、　７ｇ（１２）；第７４９２〜７４９Ｂ頁； アリツク、ビー、エイ、等、　１９８３年、ジニイ、パイオル、ケム、　２５２ （３）　：第１２３１〜第１２３７頁　Ｕｅｊｓｔｅｒ　Ａ、、　１９８３、５ ｃｉｅｎｃｅ、　２２：４７２−４７８；　Ｍｅｉｓｔｅｒ、　Ａ、　ａｎｄ　 Ａｎｄｅｒｓｏｎ、　Ｍ、Ｅ、、　１９８３．　Ａｎｎ、　Ｒｅｖ、　Ｂｉｏｅ ｈｅｍ、　５２ニア１１−６０：Ｍｅｉｓｔｅｒ、　Ａ、。 １９８４、　Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ　４（４）；７３９−７４２：　Ａｎｄｒｅ ｏｌｉ、　Ｓ、Ｐ、、　ｅｔ　ａｌ、、　１９８Ｂ、　Ｊ、　Ｌａｂ、　Ｃｌ１ ｎ、　Ｍｅｄ、　１０８（３）；１９０−１９８；　Ｊｅｎｓｅｎ。 Ｇ、Ｌ、　ａｎｄ　Ｍｅｉｓｔｅｒ、　Ａ、、　１９８３．　Ｐｒｏｅ、　Ｎａ ｔＪ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ。 Ｕ、Ｓ、Ａ、　８０：４７１４−４７１７；　Ｄｅｔｈｍｅｒｓ、　Ｊ、に、　 ａｎｄ　Ｍｅｉｓｔｅｒ、　Ａ、。 １９８１、　Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｅａｄ、　Ｓｃｉ、　Ｌｌ、Ｓ、Ａ、 　７８（１２）；７４９２−７６４９６；　Ａｒｒｉｃｋ、　Ｂ、Ａ、、ｅｔ　 ａｔ、、　１９８２．　Ｊ、　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｗ、　２５７（３）：１２３ １−１２３７）コ。 過酸化物および過酸化水素の発生が増強された際、超酸化物および過酸化水素は 、直接的に細胞毒であり得るばかりでなく、加えてバーバー−ウニイス反応によ り相互作用して（触媒として鉄とともに）ヒドロキシルラジカルを発生する［ホ ー、ニス、等、　１９８２年、ケム、−パイオル、インターアクションズ　ｌ： 第７５０１頁；オースト、シー、ディー等、　１９８５年、ジエイ、フリー　ラ ジカルズ　バイオロジー　アンド　メディシン　１：第３〜２５頁（Ｈｏｅ、　 Ｓ、、　ｅｔ　ａｔ、、　１９８２．　Ｃｈｅｍ、−Ｂｉｏｌ、　Ｉｎｔｅｒａ ｃｔｉｏｎｓ　４１ニア５０１；　Ａｕ５ｔ、　Ｃ，Ｄ、、　ｅｔ　ａｌ、、　 １９８５．　Ｊ、　Ｆｒｅｅ　Ｒａｄｉｃａｌｓ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　＆　Ｍｅｄ ｉｃｉｎｅｌ：３−２５）コ　。 Ｆ　ｅ３＋０２−＊Ｆ　ｅ　”＋０２ いくつかの研究がミトコンドリアにより過酸化水素および超酸化物ラジカルの発 生を増強する薬剤もまたヒドロキシルラジカルの発生を増強することが示されて いる［ドローショウおよびデビース、前述；コミャマ、ティー、等。 １９８２年バオケム、ファーム、　３１（２２）　：第３６５１〜３６５Ｂ頁（ Ｋ。 ｍｉｙａｍａ、Ｔ、、　ｅｔ　ａｔ、、　１９ｇ２．　Ｂｉｏｃｈｅｔ　Ｐｈａ ｒｍ、　３１（２２）　：　３６５１−３６５６）］。 フリーラジカル種を含む反応性酸素代謝物（例えば超過酸化物およびヒドロキシ ルラジカル）および他の酸素代謝物（例えば過酸化水素、次亜塩素酸）の細胞毒 は、よく提出される［ファントン、ジェイ、シー、およびワード、ビー、エイ、 　１９８２年、アム、ジエイ、ファトル、　１０７：第３９７−４１８：ファン トン、ジエイ、シー、およびワード、ビー、エイ、　、　１９８５年、ヒユーム 、ファトル、１６：第９７３〜９７８頁；ウニイス、　ニス、ジニイ、およびロ ブグリオ、エイ、エフ、　、　１９８２年、ラボ、インヴエスト、　４７（１） 　：第５〜１８頁（Ｆａｎｔｏｎｅ、Ｊ、Ｃ，ａｎｄ　Ｗａｒｄ、Ｐ、Ａ、、１ ９ｇ２．　Ａｔ　Ｊ、Ｐａｔｈｏｓ。 １０７：３９７−４１８；　Ｆａｎｔｏｎｅ、　Ｊ、Ｃ，ａｎｄ　Ｗａｒｄ、　 Ｐ、Ａ、、　１９８５．　Ｈｕｍ、　Ｐａｔｈｏｌ、　１８：９７３−９７８ニ ジｅｉｓｓ、　Ｓ、Ｊ、　ａｎｄ　ＬｏＢｕｇｌｉｏ、　Ａ、Ｐ、、　１９ｇ２ ．　Ｌａｂ、　Ｉｎｖｅｓｔ、　４７（１）：５−１８）コ。とくに最近の生体 内研究は、組織損傷のいくつかのモデルにおいてヒドロキシルラジカルおよび／ または鉄キレート化剤（おそらく鉄触媒バーバー−ウニイス反応によりヒドロキ シルラジカルの発生を抑制することによる）の保護効果を示している［ワード、 ビー、エイ、等、　１９８５年１．タリン、インヴエスト、７６：第５１７〜５ ２７頁、ワード、ビー、エイ、等、１９８３年、ジェイ、タリン、インヴエスト 、７２：第７８９〜８０１頁；フォックス、アール、ビー、　、　１９８４年、 ジエイ、クリン　インヴエスト、７４：第１４５６〜１４６４頁；フリジェル。 ニス、イー、キュー、等、１９８４年、エイ、ジエイ、ビー。 １１５（３）　；第３７５〜３８２頁；ジョンソン、ケイ、ジエイ、。 等、　１９８６年、ラボ、インヴエスト、　５４（５）　；第４９９〜５０６頁 ；ティル、ジー、オー、等、　１９８５年、エイ、ジエイ、ビー、　１１９（３ ）：第３７６〜３ｇ４頁（Ｗａｒｄ、　Ｐ、Ａ、、　ｅｔ　ａｔ、、　１９８５ ゜Ｊ、　Ｃｌ１ｎ、　Ｉｎｖｅｓｔ、　７６：５１７−５２７：　Ｗａｒｄ、　 Ｐ、Ａ、、　ｅｔ　ａｌ、、　１９８３、　Ｊ、　Ｃｌ１ｎ、　Ｉｎｖｅｓｔ、 　７２ニア８９−８０１；Ｆｏｘ、　Ｒ，Ｂ、、　１９８４．　Ｊ。 ＣＬＩＮ、　Ｉｎｖｅｓｔ、　７４：１４５Ｂ−１４６４；　Ｆｌｉｇｉｅｌ、 　Ｓ、Ｅ、Ｑ、、　ｅｔ、ａｌ、。 １９８４、Ａ、Ｊ、Ｐ、　１１５（３）：　３７５−３８２：　Ｊｏｈｎｓｏｎ 、　Ｋ、Ｊ、　ｅｔ　ａｔ、。 １９８Ｂ、　Ｌａｂ、　Ｉｎｖｅｓｔ、　５４（５）：４９９−５０６；　Ｔｉ １１．　Ｇ、Ｏ，、ｅｔ　ａｔ。 、　１９８５．　Ａ、Ｊ、Ｐ、　１１９（３）：３７６−３８４）］。加えて、 生体内外の両方の研究がおそらく酸化性フリーラジカルのその無毒化によりアド リアマイシン（アントラシフリン抗生物質）心臓前に対する保護におけるグルタ チオンの役割を提案している［オルソン、アール、ディー、等、１９８１年、ラ イフサイエンシス　２９：第１３９３〜１４０１頁；ヨダ、ワイ、　、　１９８ ６年、キャンサー　リス、４６：第２５１頁（Ｏｌｓｏｎ、　Ｒ，Ｄ、　ｅｔ　 ａｌ、、　１９８１．　Ｌｉ、ｆｅ　５ｃｉｅｎｃｅｓ　２９：１３９３−１４ ０１；　Ｙｏｄａ、　Ｙ、、　１９８Ｂ、　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、　４Ｂ−２ ５１）コ。いくつかの制限された研究は、腎臓疾患における反応性酸素代謝物の 役割を検討している。 本発明者らは、反応性酸素代謝物が糸球疾患における潜在的に重要ないくつかの 生物学的プロセスを影響することを示しており［サー、ニス、ブイ、　、　１９ ８４年、ジエイ、クリン　インヴエスト、７４：第３９３〜４０１頁（Ｓｈａｈ 、　Ｓ、Ｖ、、　１９８４、　Ｊ、　Ｃｌ１ｎ、　Ｉｎｖｅｓｔ、７４　：　３ ９３−４０１）コ、また他者によりその好中球媒介糸球疾患を示している［リー フ１ン、エイ、等、１９８４年、ラボ、インヴエスト、５１：第３９６〜４０３ 頁；り一ハン、エイ、等、　１９８５年、キドニー　イントル、２７：第５０３ 〜５１１頁；シーハン、エイ、等、１９８６年、アム、ジエイ。 フィジロル、１２３（１）：第５７〜６６頁（Ｒｅｈａｎ、　Ａ、、　ｅｔ　ａ ！、ｔ　１９８４、　Ｌａｂ、　Ｉｎｖｅｓｔ、　５１：３９Ｂ−４０３；　Ｒ ｅｈａｎ、　Ａ、、　ｅｔ　ａｌ、、　１９８５、　Ｋｉｄｎｅｙ　Ｉｎｔｌ、 　２７：５０３−５１１；　Ｒｅｈａｎ、　Ａ、、　ｅｔ　ａｌ、、　１９８Ｂ 。 Ａｍ、　Ｊ、　Ｐｈｙｓｉｏｌ、　１２３（１）：５７−６６）コ。加えて、反 応性酸素でいる。［ポーラ−、エム、ニス、等、１９８４年、ジエイ。 タリン、インヴエスト、７４第１１５６〜１１６４頁（Ｐａｌｌｅｒ、　Ｍ。 Ｓ、、ｅｔ　ａｌ、、１９８４．　Ｊ、Ｃｌ１ｎ、Ｉｎｖｅｓｔ、７４：１１５ ６−１１６４）コ　。 しかしながら、アミノグリコシド腎臓前における反応性酸素代謝物の役割は今迄 のところ検討されてない。 ３、発明の概要 本発明は、アミノグリコシドの毒性作用を媒介する反応性代謝物（ＲＯＭ）の発 生を抑制し、該代謝物を効果的に清掃または無毒化する化合物（以下「保護薬剤 」と命名する）の生体内における使用を導くものである。本発明の保護薬剤は、 これに限定されないが、反応性酸素代謝物を固定化し、該代謝物をほとんど無毒 状態に変えかつ／または他の毒性種の産生を抑制するフリーラジカル清掃剤、キ レート化剤および酵素を含むものである。また保護薬剤は、ＲＯＭを効果的に無 毒化し重要な細胞生成物の代わりに酸化を行うことにより保護効果を発揮する酸 化性化合物を含む。保護薬剤の別の分類は、生体内における内因性保護薬剤の濃 度を高めるいずれの化合物（例えばバイオ合成前駆体）も含む。 本発明は、一つには、生体内におけるアミノグリコシドの腎臓毒作用がＲＯＭに より媒介されるという知見に基づ（。本発明によると、保護薬剤は、アミノグリ コシド投与前、投与中または投与後に治療学的に使用しアミノグリコシド誘因腎 臓前を抑制または減少することができる。特定の実施態様において、ヒドロキシ ルラジカル清掃剤、鉄キレート化剤を使用して腎臓損傷に対して保護し得る。本 発明の他の実施態様において、カタラーゼおよび／またはスーパーオキシドディ スムターゼ等の酵素を使用して反応性代謝物Ｈ２Ｏ２およびｏ２−をほとんど無 害の産生物に変え、かつ他の毒性代謝物の発生を抑制することができる。 特定の実施態様において鉄キレート化剤であるフェロキシアミン、ヒドロキシル ラジカル清掃剤であるジメチルチオウレアまたはグルタチオンバイオ合成前駆体 を投与して抗生アミノグリコシド誘因腎臓前に対して保護し得る。 ３．１．定　義 次の用語並びに略語を以下に示す意味に用いる。 保護薬剤：毒性作用を媒介するアミノグリコシド誘因反応性酸素代謝物の発生を 抑制し、該代謝物を効果的に清掃または無毒化する化合物。 ｏＣ：酸化性化合物。反応性酸素代謝物の代わりに酸化を行うことにより反応性 酸素代謝物を無毒化し他の細胞性成分の有害な酸化を抑制する保護薬剤。 ＢＵＮ：血中尿素窒素。 ＤＭＳＯニジメチルスルフオキシド。 ＤＭＴＵ：ジメチルチオユリア。 ＲＯＭ：反応性酸素代謝物。 ４、

【図面の簡単な説明】

第１Ａ図は、血中尿素窒素Ｃｍｇ／ｄ　１　）により測定されたゲンタマイシン （ＧＥＮＴ）誘因急性腎不全に対するヒドロキシルラジカル清掃剤であるジメチ ルチオユリア（ＤＭＴＵ）およびジメチルチオウレア（ＤＭＳＯ）の保護効果を 表わす。生理食塩水は、生理食塩水処置ラットの対照グループを表わす。Ｎは、 各グループにおける動物数である。 第１Ｂ図は、血漿クレアチニンレベル（ｗ＋ｇ／ｄ　１　）により測定されたゲ ンタマイシン（ＧＥＮＴ）誘因急性腎不全に対するヒドロキシルラジカル清掃剤 であるジメチルチオウレア（ＤＭＴＵ）およびジメチルスルフオキシド（ＤＭＳ ｏ）の保護効果を表わす。生理食塩水は、生理食塩水処置ラットの対照グループ を表わす。各グループにおける動物数である。 第２Ａ図は、血中尿素窒素（＋ｅｇ／ｄ　ｆｌ　）により測定されたゲンタマイ シン（ＧＥＮＴ）誘因急性腎不全に対するヒドロキシルラジカル清掃剤である安 息香酸ナトリウム（ＢＥＮＺＯＡＴＥ）およびデフエロキシアミン（Ｄ　Ｆ　Ｏ ）の保護効果を表わす。生理食塩水は、生理食塩水処置ラットの対照グループを 表わす。Ｎは、各グループにおける動物数である。 第２Ｂ図は、血漿クレアチニンレベル（ｍｇ／ｄ　（１）により測定されたゲン タマイシン（ＧＥＮＴ）誘因急性腎不全に対するヒドロキシルラジカル清掃剤で ある安息香酸ナトリウム（ＢＥＮＺＯＡＴＥ）および鉄キレート化剤であるデフ ェロキシアミン（Ｄ　Ｆ　Ｏ）の保護効果を表わす。生理食塩水は、生理食塩水 処置ラットの対照グループを表わす。 各グループにおける動物数である。 第３図は、血中尿素窒素（ｓｇ／ｄ　ｌｌ　）により測定されたゲンタマイシン （ＧＥＮＴ）誘因腎不全に対する鉄キレート化剤である２、３−ジヒドロキシ安 息香酸（ＤＨＢ）の保護効果を表わす。生理食塩水は、生理食塩水処置ラットの 対照グループを表わす。 第４Ａ図は、内層上皮および管腔破片の脱落を伴う重傷の管状上皮壊死を示すゲ ンタマイシンのみを受けたラットからの腎臓の光学顕微鏡写真断面図である。倍 率は、２００倍である。 第４Ｂ図は、実質的に組織学的異常のないことを示すゲンタマイシンおよびデフ エロキンアミンを受けたラットからの腎臓の光学顕微鏡写真断面図である。倍率 は、２００倍である。 ５、発明の詳細な説明 本発明は、アミノグリコシドの毒性作用を媒介する反応性酸素代謝物（ＲＯＭ） の発生を抑制し該代謝物を効果的に清掃または無毒化する化合物の生体内におけ る使用に関する。本発明は、一つには、生体内におけるアミノグリコシドの腎臓 毒作用がＲＯＭにより媒介されるという知見に基づく。本発明の化合物は、細胞 成分とヒドロキシルラジカル、超酸化物ラジカル、過酸化水素および他のＲＯＭ の有害な反応の産生を抑制し該反応を除去または抑制することにより作用する。 これらの化合物を以下「保護薬剤」と本発明の保護薬剤は、アミノグコシドによ ってもたらさ特表平１−５０２２ｆ；８　（８） れる腎臓前等の毒性副作用を抑制するため生体内に使用し得る化合物である。該 保護薬剤は、ＲＯＭの発生を抑制し、ＲＯＭを効果的に清掃または無毒化するこ とによりその効果を発揮るすものであり限定するつもりはないが、フリーラジカ ルおよび他のＲＯＭの清掃剤、鉄キレート化剤、および生体内において内因性保 護薬剤の有効濃度を高める化合物（例えばバイオ合成前駆体）を含むものである 。本発明の実施に使用し得るＲＯＭの清掃剤は、ヒドロキシルラジカル、スーパ ーオキシドラジカル、過酸化水素および一重項酸素の清掃剤を含むがこれに限定 されるものではない。 本発明のヒドロキシルラジカル清掃剤は、ジメチルチオユリア、ジメチルスルフ オキシドおよび安息酸ナトリウムを含むがこれに限定されるものではない。該保 護薬剤はまた、ＲＯＭをほとんど無毒の状態に変えるかあるいはＲＯＭ（例えば ０２−およびＨ２０２）を固定し、従って他のＲＯＭのさらなる発生を抑制する 酵素（例えはスーパーオキシドディスムターゼ、カタラーゼおよびグルタチオン パーオキシターゼ等）も含むがこれに限定されるものではない。 保護薬剤の別のカテゴリーは、重要な細胞成分の代わりに酸化を受けることによ りＲＯＭを効果的に無毒化する非酵素酸化性化合物（以下、ＯＣと命名する）で ある。該ｏＣは、例えばグルタチオンのようなチオールを含むがこれに限定され るものではない。チオールは、容易に酸化されるので、反応性酸素により優先的 に酸化され酸化性損傷から組織を保護する。ＯＣの代謝性前駆体である分子を生 体内における有効内因性ＯＣ濃度を増加するため投与し得る。 例えば、これらに限定されないがガンマ−グルタミンシスティン、ガンマ−グル タミルシスティンジスルフィドおよびガンマ−グルタミンシスチン等の還元グル タチオンのバイオ合成前駆体を使用し得る［アンダーソン、エム、イー。 およびメイスター、イー、　１９８３年、ブロス、ナトル、アカド、サイ、ニー 、ニス、エイ、８０：第７０７〜７１１頁（Ａｎｄｅｒｓｏｎ、Ｍ、Ｅ、　ａｎ ｄ　Ｍｅｉｓｔｅｒ、　Ｅ、、　１９８３．　Ｐｒｏｅ、　Ｎａｔｌ、　Ａｅａ ｄ、　Ｓｃ１．　Ｕ、Ｓ、Ａ、　８０ニア０７−７１１）、本発明の鉄キレート 化剤は、毒性フリーラジカルまたはその前駆体の発生に必要な鉄イオンを結合し 、従ってこれらの発生を抑制する化合物を含む。 本発明の保護薬剤がほとんど無毒の産生物に変えることのできるフリーラジカル の代謝性前駆体としは、以下に限定されるものではないが、過酸化水素およびス ーパーオキシドラジカルであり、該前駆体は、保護薬剤により転換されない場合 、反応してヒドロキシルラジカルを産生じ得る。 本発明のＲＯＭ清掃剤、鉄キレート化剤および酵素は、生体内において著しい毒 性作用なしでＲＯＭ発生または蓄積の適当な部位でその保護機能を発揮し得る化 合物である。 本発明に使用する保護薬剤は、以下の第−表に示す清掃剤、ＯＣ１代謝性前駆体 １、鉄キレート化剤および酵素を含むがこれに限定されるものではない。 第１表 アミノグリコシドの毒性作用に対して保護するために使用し得る薬剤 Ｉ、ＲＯＭ清掃剤、ｏＣまたはその代謝性前駆体６ジメチルチオユリア ジメチルスルフオキシド 安息香酸ナトリウム ダブコ（ｄａｂｅｏ） ヒスチジン メルカプトアルキルアミン類 ３−アミノプロパチオール （３−メルカプトプロピルアミン）、２−アミノプロパチオール１−了ミノー２ −プロパチオール ＤＬ−）ランス−２−了ミノシクロへキサンチオール２−（（−７！／プロピル 了ミン）　エタンネスホロチオ酸（ＷＲ２７２１） Ｎ−（２−メルカプトプロピオニル）−グリシンガンマ−グルタミルシスティン ガンマーグルタミルシステインジスルフイドガンマーグルタミルシスチン システイン誘導体： システインメチルエステルヒドロクロリドシステインエチルエステルヒドロクロ リドシステインブ口ビルエステルヒドロクロリドシステインイソプロピルエステ ルヒド口クロリドシステインブチルエステルヒドロクロリドシステインイソブチ ルエステルヒＦロクＯＶドシステインインアミルエステルヒドロクＨｑドルＦシ ジル−２′−メチレンシステイン２．３−ジメチル刀ブ１プロパンスルフ１ネー ｝（ユニチオール）クレランズ薬剤およびその誘導体 ビス（２−　アミノエチル）ジスルフィド（シスタミン）チオクト酸有機チオ硫 酸塩［ブンテ（Ｂｕｎｔｅ）塩］２−アミノエタンチオ硫酸 ２−アミノブ口バンチオ硫酸 Ｎ−アルキル化−２−アミノエタンチオ硫酸Ｎ一（４−　７ェニルブチル）アミ ノエタンチ才ｉ酸およびその暦導体ホスホロチオエートおよびその誘導体 ２−アミノエタンホスホ口チオエート ２−グルニジノエタンホスホロチオエート３−グアニジノプロパンホスホロチオ エート他のチオユリア 特表平１−５０２２６８　（９） チオユニア メチルチオユリア エチレンチオユリア メチルチオブソイドユニア エチルチオプソイドユリア α，ω−ビス（チオブソイドユリア） ５−エチルイソチウ口ニムエチルホスフィン２一了ミノエチルインチウロニウム ブロミＦヒドロプロミド（ＡＥＴ）アミノエチルインチウロニウムアデニントリ ネスフニート［了デテニロン（Ａｄ　ｅ　ｌυｒａｎ）］ビス（２−グ了二シル エチル）ジスルフィＦ（ＧＥＤ）２−アミノプチルチオブンイドユリアジヒドロ プロミドチ了プリンチアジンン類 チアゾリンおよびその誘導体 没食子酸誘導体 没食子酸ナトリウム 没食子酸プロビル ｐ−アミノアセトフニノン ｐ−ア今ノブロピオフエノン（ＰＡＰＰ）■．鉄キレート化剤 デフェロ干シ了ミン（デフェロキシアミン　Ｂメシレート）２．３−ジヒドロキ シ安息香酸 ジ；テレントリアミンぺ冫夕酢酸（ＤＥＴＡＰＡＣ，ＤＴＰＡ）アボラクトフエ リン（ラクトフエリン）■．酵素 スーパーオキシドディスムターゼ カタラーゼ グルタチオンパーオキシターゼ １　いくつかの上記化合物の議論について、キリツクーオスマー、エンサイクル ビディア　オブ　ケミカルテクノロジー、第３編　ボリューム　１９．　１９８ ２年、ジョン　ウイレイ　アンド　サンズ、ニ二ーヨーク、第８０１〜８３２頁 （Ｋｉｒｋ−Ｏｔｈｍｅｒ．　Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｃ ａｌ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．　３ｒｄ．Ｅｄ．　Ｖｏｌ．　１９．　１９８２ ．　Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ　＆　Ｓｏｎｓ．　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ．　ｐｐ．８０ １−８３２）参照のこと。　− ５．２．保護薬剤の治療的使用 本発明の保護薬剤を使用して毒性作用が反応性酸素代謝物により媒介されるいず れのアミノグリコシド毒性副作用に対しても保護することができる。該保護薬剤 を毒性を抑制または減少するためにアミノグリコシドの投与に先立って、同時に または投与後に投与し得る。該保護薬剤を、例えばこれに限定されないが腹腔内 、静脈内、皮下、経口、鼻腔内、筋肉内等を含むいずれかの種々の経路により投 与し得る。該保護薬剤を種々の処方にてデリバリーし得る。 これらをポリマーまたはキャリャー分子等との接合により改質されたリポソーム 内またはリポソーム上に取り込み得る。該処方を使用して所望の限局化、デリバ リーまたは細胞浸透を高めることができる。例えばスーパーオキシドディスムタ ーゼまたはカタラーゼをリポソームのカプセルに包み、その細胞内デリバリーを 高めることができる。 アミノグリコシドを治療的に投与する際、該保護薬剤を治療摂生に含有し、望ま しくない副作用を抑制することができる。このようなアミノグリコシドの治療的 使用は、限定されるものではないが、細菌感染の処置における坑生アミノグリコ シドの使用を含む。保護薬剤を使用して毒性を減少することができ、アミノグリ コシドを敗血病の処置のために利用する際、一定の細菌代謝性産生物の生体内形 成を抑制または一定の化合物の生体内細菌性分解を防ぐこと等ができる。特定の 実施態様において、フリーラジカル清掃剤、鉄キレート化剤、スーパーオキシド ディスムターゼまたはカタラーゼを抗生アミノグリコシドの投与中および投与後 のの両方に投与することができる。有害な副作用が本発明に従って避けることが できるか減少することができるアミノグリコシドは、以下の第ｎ表に示すものを 含むがこれに限定されるものでなはい。 第■表 毒性作用が保護薬剤の投与により減少または抑制し得るアバラモマイシン（Ｐａ ｒａｍｏｍｙｅｉｎ）　ＩバラモマイシンＩＩ リボスタマイシン（Ｒｉｂｏｓｔａｍｙｅｉｎ）リビドマイシン（Ｌｉｖｉｄｏ ｍｙｃｉｎ）アミカシン（Ａｍｉｋａｅｉｎ） ジベカシン（Ｄｉｂｅｋａｃｉｎ） ブタ力シン（Ｂｕｔａｋａｃｉｎ） ドプラシン（Ｔｏｂｒａｍｙｃｉｎ） ゲンタマイシンＸ２ ゲンタマイシンＪｌ　２ＯＡ ゲンタマイシン誘導体 Ｓｃｈ　２０２７８ Ｓｃｈ　２１４２０ Ｓｃｈ　２３７２２ Ｓｃｈ　２４４４３ Ｓｃｈ　２１２１１ Ｓｃｈ　２１７６８ Ｓｃｈ　２３２００ Ｓｃｈ　２３４５６ ２’、３’　−ジデオキシゲンタマイシンＢストレプトマイシン ジヒドロストレプトマイシン シソマイシン（Ｓｉｓｏｍｉｃｉｎ） ５−エビ−シソマイシン（５−Ｅｐｉ−８ｉｓｏｍｉｃｉｎ）ベルダマイシン（ Ｖｅｒｄａｉｉｃｉｎ）ネチルマイシン（Ｎｅｔｉｌｍｉｅｉｎ）Ｓｃｈ　２１ ５６２ Ｓｃｈ　２７０８２ Ｓｃｈ　２２５９１ Ｓｃｈ　２７０８２ Ｓｃｈ　２７５．９８ フラマイセチン（Ｆｒａｍｙｃｅｔｉｎ）ゲンタマイシン（Ａｐｒａｍｙｃｉｎ ）フォルチマイシン（Ｆｏｒｔｉｍｉｃｉｎ）ＡフォルチマイシンＢ ブチカシン（Ｂｕｔｉｋａｃｉｎ） プロビカシン（Ｐｒｏｐｉｋａｃｉｎ）５″−了ミノー５′−デオキシブチロシ ン　（Ｂｕｔｉｒｏｓｉｎ）Ａアミノグリコシド投与の有害な副作用の一つは、 腎臓前である。本発明の保護薬剤をアミノグリコシドの投与前、投与中または投 与後に使用して反応性酸素代謝物産生に起因する腎臓損傷に対して保護すること ができる。保護薬剤により減少また抑制できるアミノグリコシド投与によって引 き起こされる腎臓に対する毒性作用として例えば急性細管壊死および腎不全があ る（第６節参照、後述）。本発明の特定の態様においてジメチルチオユリア、安 息香酸ナトリウム、ジメチルスルフオキシド、デフエロキシアミンまたは２．３ −ジヒドロキシ安息香酸等の保護薬剤を使用して腎臓毒化合物であるトブラマイ シンおよびゲンタマイシンにより誘引される腎臓前を減少することができる。こ の態様の一つの実施例において、鉄キレート化剤、デフェロキシアミンをゲンタ マイシンおよび薬学的キャリヤーとともに処方し、ゲンタマイシン誘因腎臓前の 抑制のため筋肉投与することができる。研究は、合成前駆体、ガンマ−グルタミ ルシスティンおよびガンマグルタミルシスチンが皮るであるうということが示さ れている［アンダーソン、エム、イー、およびメイスター、エイ、　、　１９８ ３年、プロス。 ナトル、アカド、サイ、ニー、ニス、エイ、８０：第７０７〜７１１頁（Ａｎｄ ｅｒｓｏｎ、Ｍ、Ｅ、　ａｎｄ　Ｍｅｉｓｔｅｒ、　Ａ、、　１９８３．　Ｐｒ ｏｅ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　Ｕ、Ｓ、Ａ、　８０ニア０７−７ １１）］　、患者の腎臓機能特表平１−５０２２ｆ：８　（１１） の注意深い観察は、アミノグリコシドの濃度または他の標準技術で基礎量の尿窒 素（ＢＵＮ）　、血漿クレアチニンレベルの測定によってなされる。 ６、実施例二ラットにおけるゲンタマイシン誘因急性腎不全の抑制 以下の節の実施例に詳述する実験は、ビトロキシルラジカルの発生を抑制しまた ヒドロキシルラジカルを効果的に清掃する化合物での処置がラットにおけるゲン タマイシン誘因急性腎不全に対して効果的に保護することを示す。 体重２００〜２５０ｇ、水および標準ラット飼料（カルシウム１．００％、マグ ネシウム０．２１％、ナトリウム０．４０％、カリウム１．１０％）へ自由に近 づけさせた生体雄スプラーグーダウレイ（Ｓｐｒａｑｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ）ラッ トをこれらの実験に使用した。ラットは、８日間連続して１日に１ｍｌの滅菌等 張食塩水またはゲンタマイシン（１００ｍｇ／ｋｇ／日）のいずれかの皮下接種 を受けた［ヒュームス、エイチ、ディー、等、　１９８４年、ジエイ、タリン、 インヴエスト、７３：第１３４〜１４７頁（Ｈｕｅｓ、　Ｈ，Ｄ、、　ｅｔ　ａ ｌ、、　１９８４．　Ｊ、　Ｃｌ１ｎ、　Ｉｎｖｅｓｔ、　７３：１３４−１４ ７）コ。最終接種後２４時、ラットを犠牲にし血漿をＢＵＮ　（血中尿素窒素） および／またはクレアチニンの測定のため得て、腎臓を組織学的検討およびゲン タマイシンレベルの決定のため切り離した。 ６、　１．　２．干渉的治療 ゲンタマイシン誘因急性腎不全に対するいくつかのヒドロキシルラジカル清掃剤 および鉄キレート化剤の効果を検投与しひきつづき１日２度１２５ｍｇ／ｋｇ　 Ｉ　Ｐ投与した。使用した他のヒドロキシルラジカル清掃剤は、ジメチルスルフ オキシド（ＤＭＳＯ）　、１日に２度４ｇ＋＋＋／　ｋｇ　［ロタン、ディー、 等、１９８４年、キドニー　イントル、２５：第７７８〜７８８頁（Ｌｏｔａｎ 、　Ｄ、、　ｅｔ　ａｌ、、　１９８４．　Ｋｉｄｎｅｙ　Ｉｎｔｌ、　２５ニ ア７ｇ−７８８）］腹腔投与、および安息香酸ナトリウム、１日に２度１５０ｍ ｇ／ｋｇの服用量でＩＰ投与、である。鉄キレート化剤であるデフエロキシアミ ンＢミシレート［デスフニラル、チバーガイギー　コーポレーション、サミット 　ニューシャーシー州（Ｄｅｓｔｅｒａｌ、　Ｃｈｉｂａ−Ｇｅｉｇｙ　Ｃｏｒ ｐ、、　Ｓｕ＋ａ＋ｅｉｔ　Ｎ、ｊ）］を最初のゲンタマイシン投与の直前２０ ｍｇ／ラットの服用量で静脈内接種した。同時にデフエロキシアミンを皮下移植 された透過性ポンプ［タイプ　２ＭＬ　２：　エイエルゼットエイ　コーポレー ション、パロ　アルド。 カリフォルニア州（ＡＬＺＡ　Ｃｏｒｐ、、　Ｐａ１ｏ　ＡＩｔｏ、ＣＡ））］ を介して投与した。薬剤を１７５１ｇ／ｍｌ水中に、再形成し、ポンプを５μｇ ／時間の一定速度で１匹のラットに対して２０■ｇデリバリーした。先の研究は 、薬剤の一定血漿レベルがデフェロキシアミンをこの経路で投与した際維持され るこを示している［ボーウォーン、エフ０等、１９８４年、ジエイ。 エキスプ、メト１６０：第１５３２〜１５４３頁（Ｂｏｖｅｒｎ、　Ｎ、、　ｅ ｔ　ａｌ、、　１９８４．　Ｊ、　Ｅｘｐ、　Ｍｅｄ、　１６０：１５３２−１ ５４３）］。 ６、　１．　３．生体内研究に関する定量的検定ユリア窒素およびクレアチニン をベックマンＢＵＮアナライザー２およびベックマンクレアチニンアナライザー を使用して血漿サンプル中において測定した。 ゲンタマイシン検定のため腎皮質ホモジネート１部を０゜１５％トリトン　Ｘ− １００９部とともに蒸留水に希釈した。ついで、さらに希釈をし、タンパク質濃 度１■ｇ／ｋｇに調製し、ゲンタマイシンの濃度を標準酵素放射線化学検定［ス ミス、ディー、エイチ０等、１９７２年、メディカルインテリジェンス　２８Ｂ （１１）　：第５８３〜５８Ｂ頁（Ｓｍｉｔｈ、　Ｄ、　Ｈ，、ｅｔ　ａｔ、、 　１９７２．　Ｍｅｄｉｃａｌ、　Ｉｎｔｅｌｌｉｇｅｎｃｅ　２８Ｂ（１１） ：５８３−５８６）］を使用して決定した。簡単には、１４Ｃ標識化アセチル補 酵素Ａをゲンタマイシンおよびケマンタマイシンアセチルトランス゛ファラーゼ 含有サンプルで１０分間培養し、ゲンタマイシンのアセチルゲンタマイシンへの 転化を完結させた。反応液をついでアセチルゲンタマイシンが非常にしっかりと 結合するホスフォセルロースディスク上にピペットした。洗浄して未反応のアセ チル補酵素Ａを除いた後、結合放射線活性を液体シンチレーションカウンターで カウントした。この決定の有効性を未ゲンタマイシン処置ラットからのの腎臓ホ モジネートおよびゲンタマイシンを２゜５．１０．１５および２０μｇ　／　ｍ ｌの濃度に加えた未ゲンタマイシン処置ラット中のゲンタマイシンの測定により 評腎臓を断面に切り一部分を１０％ホルマリン中（光学顕微鏡検定用）または３ ％グルタルアルデヒド中（電子顕微鏡用）のいずれかに固定した。光学顕微鏡検 定用に用いる組織を脱水し、グリコールメタクリレート中に埋封した。 切断面を２ミクロンで切断し、過ヨウ祖酸−シッフ（ＰＡＳ）指薬で染色した。 スライドをコードし、処置プロトコールの知識なしで調査した。電子顕微鏡検定 用組織を１時間１％オスミラロムテトロキシドに後固定しくｐｓｔ　ｆｉｘｅｄ ）、脱水し、マラグラス（ｍａｒａｇｌａｓ）中に埋封した。銀色切断面を得、 クエン酸鉛およびウラニルアセテートで染色し、フィリップス３００電子顕微鏡 で検査した。 腎臓切断面の光学顕微鏡半定量（ｓｅｍｉｅｏｎｔｉｔａｔｉｖｅ）分析をヒユ ートン等の技術（Ｈｏｕｇｈｔｏｎ　ｅｔ　ａｌ、）　［ヒユートン。 ディー、シー、等１９７８年、アム、ジエイ、ファトール、９３：第１３７〜１ ５２頁（Ｈｏｕｇｈｔｏｎ、Ｄ、Ｃ，、ｅｔ　ａｌ、、　１９７ｇ、　Ａｍ、　 Ｊ。 Ｐａｔｈｏｌ、　９３：　１３７−１５２）コを用いて実施した。見られた変化 を管状介在性（ｔｕｂｕｌｏｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ）領域に制限し、次のと おり等扱方けした。〇−正常、１−小さな病巣において管状上皮細胞剥離を有す るまたは有さない管状管腔における病巣顆粒空胞上の上皮細胞退化および顆粒状 汚染の領域（１％未満の剥離が関与する総管状個体）；２−管状上皮壊死が容易 に見られるが半分未満の皮質細管が関与する；３−近位の細管の半分以上が剥離 および壊死を示すが関与しない細管を容易に見い出せる；４＝完全またはほぼ完 全の細管壊死。組織学的等級分けに加えて近位細管上皮細胞における細胞質ＰＡ Ｓ陽性体の存在または不存在（電子顕微鏡法によりチトセグレソームであること を確認）も記録本発明者らは、腎皮質ミトコンドリアによる過酸化水素ゲンタマ イシン増強された発生に対するジメチルチオユリア（ＤＴＵ）（１０畦）および デフエロキシアミン（１ｍｇ／　ｍｌ　）の生体外作用を研究した。ミトコンド リアを基本的にはジョンソン（Ｊｈｏｎｓｏｎ）およびシーデイ−（Ｌａｒｄｙ ）　［１９６７年、イン　メンツヅ　イン　エンザイモロジー　ボリューム　１ ０．ニスタブルック、アール、ダブり二一、およびエム、イー、プルマン、編、 アカデミツクプレス、ニューヨーク第９４〜９Ｂ頁（１９６７、ｉｎ　Ｍｅｔｈ ｏｄｓ　ｉｎ　Ｅｎｚｙｍｏｌｏｚｙ。 Ｖｏｌ、　１００．　Ｅｓｔａｂｒｏｏｋ、　Ｒ，ν、　ａｎｄ　Ｍ、Ｅ、　Ｐ ｕｌｌｍａｎ、　ｅｄｓ、、　Ａｅａｄｅｉｉｃ　Ｐｒｅｓｓ、　Ｎｅｗ　Ｙｏ ｒｋ、　ｐｐ　９４−９８）］により記載されたとおりに単離した。単離培地は 、０．２７Ｍショ糖、１ｍＭＥＧＴＡ、　５ｍＭ　トリス　ＨＣＩ、　ｐＨ７， ４を含んだ。ミトコンドリアを１０分間６００ｘｇで遠心分離することにより沈 降しつづいて１０分間１０．０００ｘｇで得られた上澄液の遠心分離をした。最 終ベレットを０．２５ｍショ糖に再懸濁し、約１０■ｇタンパク質／ｍｌのタン パク質濃度を得た。２．５以上の呼吸比インデックス（状態３／状態４呼吸）を 有するミトコンドリアのみを検査に使用した。過酸化水素産生をスコポレチン（ ｓｃｏｐｏｌｅｔｉｎ）法［ボバリス、エイ、等、１９７３年、アナル、バイオ ケム。 ８０：第１４５〜１５ｇ頁（Ｂｏｖｅｒｉｓ、　Ａ、、　ｅｔ　ａｌ、、　１９ ７３．　Ａｎａｌ。 Ｂｉｏｃｈａｍ、　８０：１４５−１５８）　］を使用して測定した。０．５＠ Ｈのミトコンドリアタンパク質を総量３ｍｌの１５０ｍＭ　ＫＣｌ、１０ｍＭ　 ）リスリン酸塩　、５ｍＭ）リス　Ｈｅ１ｐＨ７，４および０，１ｍｌのホース ラデツシュペルオキシターゼ（４００ｇｇ／ｍｌ）を含有する反応混合物に加え た。 スコボレチンを５ｍＭの最終濃度まで加え１００％基線螢光をファラフド　シス テム３　スペクトロフルオロメーター［ファラフド　オプティカル　カンパニー 　パルハラ、二ニーヨーク（Ｆａｒｒａｎｄ　０ｐｔｉｃａｌ　Ｃｏ、、　Ｖａ ｌｈａｌｌａ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ）］に設置した。螢光の減少（励起波長３８ ５ｎ■および発光波長４６０ｎ層）を第１に基質（１０畦Ｍ琥珀酸ナトリウム基 線値）の転化後に記録しつづいてゲンタマイシン（４ｍＭ）を同様の反応混合物 に加えた後行った。過酸化水素のゲンタマイシン刺激産生に対するゲンタマイシ ンの転化に先立つＤＭＴＵ　（１０ｍ１）およびデフエロキンアミンの効果を調 査した。 ６．２．ヒドロキシルラジカル清掃剤または鉄イオンキレート化剤はゲンタマイ シン誘因腎臓損傷を保護する 本発明者らの予備研究において、本発明者らは、腎機能に対する日にゲンタマイ シンのみ（１００■ｇ　／　ｋｇ　）の皮下接種の時間経過の効果（最終接種後 ２４時間のＢＵＮ、血中尿素窒素、濃度により測定）を検査した［ヒューニス。 エイチ、ディー、等、１９８４年、ジエイ、タリン、インヴエスト、７３：第１ ３４〜１４７頁（Ｈｕｍｅｓ、　Ｈ，Ｄ、、　ｅｔ　ａｌ、ｅ　１９ｇ４゜Ｊ、 　Ｃ１１ｒｒ、　Ｉｎｖｅｓｔ、　７３：　１３４−１４７）］。ＢＵＮの著し い増加をゲンタマイシン処置ラットのすべてにおいて８回の接種後示した。この データを基にして、本発明者らはゲンタマイシン８回接種後のＢＵＮおよびクレ アチニンレベルに対する種々の干渉の効果を検査した。 ６．２．１．ジメチルチオユリアまたはデフエロキシアミンはゲンタマイシン誘 因急性腎不全に対する保護効果を有する 本発明者らは、ゲンタマイシン誘因急性腎不全に対するジメチルチオユリア（Ｄ ＭＴＵ）おびデフエロキシアミンの効果を調べた。生体外におるＤＭＴＵは、ヒ ドロキシルラジカル清掃剤として働き［フォックス、アール、ビー、゛。 １９８４年、ジエイ、タリン、インヴエスト、７４：第１４５６〜１４６４頁（ Ｆａｘ、　Ｒ，Ｂ、、　１９８４．　Ｊ、　Ｃｌ１ｎ、　Ｉｎｖｅｓｔ、　７４ ：１４５Ｂ−１４６４）］、またはデフエロキシアミンミシレートは、ヒドロキ シルラジカルの発生を妨害することが示されるいる［ホー。 ニス、等、１９８２年、ケム、−パイオル、インターアクションズ、４１：第７ ５〜８１頁（、Ｓｌ、　ｅｔ　ａｌ、、　１９８２．　Ｃｈｅｍ、−Ｂｉｏｌ、 　Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ、　４１ニア５−８１）］　ｏ加えて、生体内におい てＤＭＴＵ　（腹腔内投与）は、ラットにおいて３４時間の半減期でヒドロキシ ルラジカルを清掃するのに十分な濃度を達成することが示されている（フォック ス、アール、ビー、。 前述）。 ４日間ゲンタマイシンで処置されたラットは、食塩水処置対照（ＢＵＮ：１６± １　ｍｇ／ｄ　Ｄ　、ｎ　＝８）と比較してＢＵＮ（２１５±３０ｍｇ／ｄ　Ｄ 　、ｎ　＝　８）の著しい上昇を示した。これに対して、ゲンタマイシンおよび ＤＭＴＵで処置したラットは、相当低いＢＵＮ値（ＢＵＮ：４８±１７＋ａｇ／ ｄ（１，ｎ−８ｐ　０．００１）を示した。同様にデフエロキシアミンは、ゲン タマイシン誘因急性腎不全に対する顕著な保護効果を与えた（ＢＵＮ　：　３０ ±７ｏ＋ｇ／ｄ１、　ｎ−８ｐ　０．　００１）。 本発明者らは、干渉剤が早期時点で表わされるゲンタマイシン腎臓前を引き起こ し、またこれらラットが回復段階であったのでＢＵＮが８回接種後低かったとい う可能性を考察する。従って本発明者らは、デフエロキシアミンの効果または６ 回のゲンタマイシン接種を受けるラットを調べた。デフエロキシアミン処置動物 において、ＢＵＮは、ゲンタマイシンのみで処置されたラットにおけるＢＵＮ（ ８０±５ｍｇ／ｄ　１　、ｎ−６）と比較して著しく低かった（２２±２ｍｇ／ ｄ１．ｎ＝６　ｐ　Ｏ−００１）。 ＤＭＴＵまたはデフエロキシアミンの保護効果が腎組織による取り込みに関係し ないことを示すために、本発明者らは、腎皮質におけるゲンタマイシンレベルを 測定した。 腎皮質濃度に関して得られた値は、次のとおりであ。ゲンタマイシンのみ、１４ ±０．７μｇ／ｍｌ、ｎ＝８　＜他から得られた結果と同様）：ゲンタマイシン ブラスＤＭＴＵ。 １９±１．９μｇ　／　ｍｌ　；ゲンタマイシンブラスデフェロキシアミン、２ ０±１．５μｇ／ｒｎ１．上記の結果は、上記指薬の保護効果が腎皮質細胞によ るゲンタマイシンの取り込みに無関係であることを示す。 本発明者らはまた、ＤＭＴＵまたはデフエロキシアミンの保護効果が腎皮質ミト コンドリアのゲンタマイシン応答能のいくつかの直接妨害に関連するかどうかを 調査した。 本発明者らは、生体外において腎皮質ミトコンドリアによる過酸化水素のゲンタ マイシン増強された発生に対するＤＭＴＵまたはデフエロキシアミンの効果を調 べた。ＤＭＴＵ（１０＋ＩＩＭ＞およびデエロキシアミン（ｌａｇ／ｍｌ）は、 過酸水素のゲンタマイシン増強された発生に対する著しい効果を示さなかった。 ＤＭＴＵ［ヴアラニ、ジニイ０等、１９８５、ラボ、インヴエスト＋　５３（６ ）　：第６５６〜６６３頁：フォックス、アール、ビー、　、　１９８４年、ジ エイ、タリン、インヴエスト、　７４　：　１１４５８〜１４６４頁ＣＶａｒａ ｎｉ、　Ｊ、　ｅｔ　Ｊｌｌ、、　１９８５、Ｌａｂ、Ｉｎｖｅｓｔ、５３（６ ）：　６５６−６６３：　Ｆｏｘ、Ｒ，Ｂ、、１９８４．　Ｊ。 Ｃｌ１ｎ、　Ｉｎｖｅｓｔ、　７４：　１４５Ｂ−１４６４）およびデフェロキ シアミン［ヴアラニ、ジエイ１．前述；ワード、ビー、エイ、等、１９８３年、 ジエイ、タリン、インヴエスト、７２：第７８９〜８０１頁（Ｗａｒｄ、　Ｐ、 Ａ、、　ｅｔ　ａｌ、　１９８３．　Ｊ、　Ｃｌ１ｎ、　Ｉｎｖｅｓｔ、　７２ ニア８９−８０１）］は、好中球により超酸化物および／または過酸化水素の発 生を影響しないことを同様に示している。合わせると、上記の結果は、ゲンタマ イシン誘因急性腎不全に対するＤＭＴＵまたはデフニロキシアミンの著しい効果 を示し、また保護効果がゲンタマイシンへのミトコンドリア応答におけるまたは 腎皮質組織によるゲンタマイシンの取り込みにおける改質によるものでないこと を示す。 ６、　２．　２．　ジメチルチオユリアまたはジメチルスルフオキシドは、ゲン タマイシン誘因急性腎不全に対する保護効果を示す 第２の実験において、本発明者らは、ゲンタマイシン誘因急性腎不全に対する再 びＤＭＴＵの効果および第２のヒドロキシルラジカル清掃剤であるジメチルルフ ォキシド（ＤＭＳＯ）の効果［リパイン、ジエイ、イー、等、１９７９年、ジエ イ、タリン、インヴエスト、８４：第１６４２〜１６５１頁Ｒｅｐｉｎｅ、　Ｊ 、Ｅ、、　ｅｔ　ａｌ、、　１９７９．　Ｊ、　Ｃｌ１ｎ　Ｉｎｖｅｓｔ、　６ ４：１８４２−１６５１）］を調べた。ＤＭＴＵは、ゲンタマイシンのみで処置 されたものより著しく低い（第１図）ＢＵＮおよび血漿クレアチニンを示す顕著 な保護効果（前述の結果を確認）をもたらした。またＤ　Ｍ　Ｓ　Ｏで連続的に 処置されたラットにおいて、ＢＵＮおよび血漿クレアチニンレベルの両方は、ゲ ンタマイシンのみで処置されたものにおけるよりも著しく低かった（第１図）。 ６、　２．　３．安息香酸ナトリウムまたはデフエロキシアミンは、ゲンタマイ シン誘因急性腎不全に対する保護効果を示す 第３の実験において、本発明者らは、第３のヒドロキシルラジカル清掃剤である 安息香酸ナトリウムの効果を調べた［ティル、ジー、オー、等、１９８５年、エ イ、ジエイ、ピ＋、　１１９（３）：第３７６〜３８４頁（Ｔｉ１１．　Ｇ、０ ．　ｅｔ　ａｌ、、　１９８５゜Ａ、Ｊ、Ｐ、　１１９（３）：３７Ｂ−３８４ ）］。加えて本発明者らは再びゲンタマイシン誘因急性腎不全に対する鉄キレー ト化剤であるデフエロキシアミンの効果を調べた。ＢＵＮおよび血漿クレアチニ ンは、ゲンタマイシンに加えて安息香酸またはデフエロキシアミンを受けたラッ トにおいて著しく低かった（第２図）。同実験において、鉄飽和デフエロキシア ミンは部分的保護のみであった（ＢＵＮ　６４±６．ｎ＝６）。 ６．２．４．２．３−ジヒドロキシ安息香酸は、ゲンタマイシン誘因急性腎不全 に対する保護効果を示す 本発明者らはまた、ゲンタマイシン誘因急性腎不全に対する鉄キレート化剤であ る２、３−ジヒドロキシ安息香酸（ＤＨＢ）効果を調べた。ＤＨＢは、ゲンタマ イシンのみで処置されたラットのものより著しく低いＢＵＮを示す顕著な保護効 果を示す（第３図）。 ６、　２．　５．　ヒドロキシルラジカル清掃剤またはデフエロキシアミンは、 ゲンタマイシン誘因細管損傷に対する保護効果を示す 本発明者らは、前述の第６．２．２節および第６．２゜３節に記載の実験の終了 時、異る処置を受けたラットの腎臓組織における組織学的変化を調べた。組織学 的変化を前述の第６．１．４節に記載のごとく等扱方けし、結果を第■表に示し た。 第■表 ゲンタマイシン　−−４４６ ゲンタマイシン＋ＤＭＴｔｌ　２　１　４　１　１ゲンタマイシン＋ＤＭＳＯ８ −−−− ゲンタマイシン＋ベンゾエート　４−　１　１−ゲンタマイシン＋ＤＦＯ８−− −− 組織学的等級分けは、次のとおりであ。０＝正常；１＝１％未満の上皮細胞隔離 を示す総細管個体を有する病巣の顆粒空胞状の上皮細胞退化の領域、２＝５０％ 未満の皮質細管に関し細管の上皮壊死および隔離、３−５０％以上の近位細管が 剥離を示す（無関係細管が容易に見い出させる）；４＝完全またはほぼ完全の近 位細管壊死。種々の細胞質のＰＡＳ−陽性体は、干渉的処置または処置なしで全 ゲッタマイへシン処置動物の近位管状上皮細胞に存在。ＤＭＴＵ：ジメレチルチ オユリア；ＤＭＳＯ；ジメチルスルフオキシド；ベンゾエート；安息香酸ナトリ ウム；ＤＦＯ：デフニロキシアミン。 ８日間ゲンタマイシンのみで処置されたラットにおいて、細管壊死の範囲は、先 の研究［ホートン、ディー、シー。 等、１９７８年、アム、ジェイ、ファトル、９３：第１３７〜１５２頁）］に記 載のごとく細管の１０％未満（第２等級）から７５％以上（第３および第４等級 ）に変化した。加えて数多くのＰ　Ａ　Ｓ陽性細胞体（電子顕微鏡法によるチト セグレソーム）第１ゲンタマイシン接種にひきつづいて４８時間以内チトセグレ ソームの特徴的発展を示すという先の研究［ヒュームズ、エイチ、ディー、およ びヴエインバーグ、ジエイ、エム、　、　１９８６年、イン　ザ　キドニー、ブ レンナー。 ビー、エム、およびエフ、シー、レクター、ジュニア編、ダブり二一、ビー、サ ランダース　カンパニー、フィラデルフィア、ペンシルバニア州、第１４９１〜 １５３２頁（Ｈｕｍｅｓ、　Ｈｒ、Ｂ、Ｍ、、ａｎｄ　Ｆ、Ｃ，Ｒｅｃｔｏｒ、 Ｊｒ、、ｅｄｓ、、ν、Ｂ、　５ａｕｎｄｅｒｓ　Ｃｏｍｐａｎｙ、　Ｐｈ１ｌ ａｄｅｌｐｈｉａ、　Ｐａ、、　ｐｐ、　１４９１−１５３２）コと一致して全 ての動物に見られた。（ＰＡＳ陽性は、過ヨウ素酸シッフ指薬と反応して光学顕 微鏡下、可視の紫またはマゼンタ色を産生ずることを示す。）ヒドロキシルラジ カル清掃剤またはデフエロキシアミン（ゲンタマイシンに加えて）で処置された 動物においてもＰＡＳ陽性細胞質個体を動物のすべてに見い出すことができるが 第■表に示すごとく細管の損傷の範囲の顕著な減少がある。ゲンタマイシン処置 ラットの腎臓に対するデフエロキシアミンの保護効果を示す光学顕微鏡断面図を 第４Ａ−Ｂ図に示す。 従ってデータは、ヒドロキシルラジカル清掃剤、ＤＭＴＵ、ＤＭＳＯ，および安 息香酸ナトリウムおよび鉄キレータ−であるデフエロキシアミンおよび２，３− ジヒドロキシ安息香酸がラットにおけるゲンタマイシン誘因急性腎不全に対する 機能的および組織学的の両方の保護効果を与えることを示す。 特定の理論に結びつけられないが、いくつかのメカニズムは、腎臓損傷の媒体に おける鉄の根本的役割を説明することができる。デフェロキシアミンの保護効果 は、鉄触媒されたバーバー−ウニイス反応における過酸化水素からのヒドロキシ ルラジカル生成の抑制によりき起こされるであろう［ホー、ニス、等、１９８２ 年、ケム、−パイオル、インターアクションズ　４１：第７５〜８１頁；オウス ト、ニス、ディー、等、　１９８５年、ジエイ、フリー　ラジカズ　バイオロジ ー　アンド　メディシン１：第３〜２５頁（Ｈｏｅ、　Ｓ、、　ｅｔａｌ、、　 １９８２．　Ｃｈｅｍ、−Ｂｉｏｌ、　Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ　４１ニア５ −８１；　Ａｕ５ｔ。 Ｓ、Ｄ、、　ｅｔ　ａｌ、、　１９８５．　Ｊ、　Ｆｒｅｅ　Ｒａｄｉｃａｌｓ 　Ｂｉｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　１：３−２５）］。 Ｆ　ｅ３　＋０２−　→Ｆ　ｅ”＋０２Ｆ　ｅ　２＋十Ｈ２０２−＋Ｆ　ｅ　” ＋ＯＨ’″ＯＨ−ＯＨ−場合鉄の要求は、バーフエリルイオンの形成、鉄、ＮＡ ＤＰＨ−チトクロム　ｐ−４５０リダクターゼ、ＮＡＤＰＨおよび酵素を要求す る反応におけるその関りあいから生じる。 Ｆ　ｅ　２＋＋　０２　−＋Ｆ　ｅ　”Ｏ（パーフェリルイオン）　；２　Ｆ　 ｅ　”０２　−この説明は、Ｆｅ”０２−が腎臓前を媒介するフリーラジカルま たはその前駆体であることを推定する。いくつかのフリーラジカル清掃剤の保護 効果は、バーバー−ウニイス反応を介する鉄の役割を支持するらしい。 本発明者らは、ヒドロキシルアジカルにより影響され得、急性腎不全を導く生物 学的プロセスを調べなかった。ヒドロキシルラジカルが組織損傷を引き起こすこ とを仮定されるメカニズムの一つは、膜（ｍｅ＋＋＋ｂｒａｎｅ）脂質の過酸化 を引き起こすことによるものである。脂質過酸化は、ヒドロキシルラジカルが重 要であるとして密接にむすびつけられている組織損傷と関連することが示されて いる［ワード、ビ−、エイ、等、　１９８５年、ジエイ、タリン、インヴエスト 。 ７６；第５１７〜５２７頁；ティル、ジー、オー、等、　１９８５年、エイ、ジ エイ、ピー、１１９（３）　：第３７６〜３８４頁（Ｗａｒｄ、　Ｐ。 Ａ、、　ｅｔ　ａｌ、、　１９８５．　Ｊ、　Ｃｌ１ｎ、　Ｉｎｖｅｓｔ、　７ ６：５１７−５２７；　Ｔｉ１ｌ。 Ｇ、Ｏ，、ｅｔ　ａｌ、　１９８５．　Ａ、Ｊ、Ｐ、　１１９（３）：　３７６ −３８４）コ。しかしながら、時間経過に基づいて、脂質過酸化は、酸素媒介組 織損傷の結果というよりむしろ媒介子およびその伝播子であるらしい（ティル、 ジー、オー、等、前述）、同様にゲンタマイシン処置ラットにおいて脂質過酸化 産生物であるマロンジアルデヒド（ＴＢＡ反応性物質）の腎皮質の含量の増加が あるが脂質過酸化の抑制は、ゲンタマイシン誘因急性腎不全を抑制しない［ラム サミー、エル、ニス、等、１９８６年、ジエイ、ファーム、エキスブ：セラブ、 　２３ｇ（１）　：第８３〜８６頁（Ｒａｍｓａｍｉｙ、　Ｌ、Ｓ、、　ｅｔ　 ａｌ、、　１９８Ｂ、　Ｊ　Ｐｈａｒｍ、　Ｅｘｐ、　Ｔｈｅｒａｐ、　２３ｇ （１）：８３−８６）］、これらの知識に基づき、ゲンタマイシン誘因急性腎不 全におけるヒドロキシルラジカルの役割が脂質酸化以外の生物学的プロセスに対 するその効果であるらしい。 ＦＩＧ、ＩＡ ＦＩＧ、　Ｉ　Ｂ ＦＩＧ、　２　Ａ ＦＩＧ、　２　Ｂ と１痕もＬ　ＧＥＮＴ　ＤＨＢ ＦＩＧ、３ 国際調査報告 １”１１”＃′＃４０ａ１ｍ’ｌ　ｗ　ｐ（τ／（：５８７１０３４６８１＄１ ％１１＆１４＄・１＾Ｅ−−１啼ＩＩＩ＋４２ＣＴ１口Ｓ８７１０３４６８

Claims (42)

【特許請求の範囲】
1. １．生体内における有効服用量のアミノグリコシドの腎臓毒作用を媒介する反応 性酸素代謝物の発生を抑制または該代謝物を効果的に清掃または無毒化する化合 物を投与することからなるアミノグリコシドの毒性を抑制または減少する方法。
2. ２．該化合物がフリーラジカル清掃剤からなる請求の範囲第１項に記載の方法。
3. ３．フリーラジカル清掃剤がヒドロキシルラジカル清掃剤からなる請求の範囲第 ２項に記載の方法。
4. ４．ヒドロキシルラジカル清掃剤がジメチルチオコリアからなる請求の範囲第３ 項に記載の方法。
5. ５．ヒドロキシルラジカル清掃剤がジメチルスルフォキシドからなる請求の範囲 第３項に記載の方法。
6. ６．ヒドロキシルラジカル清掃剤が安息香酸ナトリウムからなる請求の範囲第３ 項に記載の方法。
7. ７．該化合物が鉄キレート化剤である請求の範囲第１項に記載の方法。
8. ８．鉄キレート化剤がデフェロキシアミンである請求の範囲第７項に記載の方法 。
9. ９．鉄キレート化剤が２，３−ジヒドロキシ安息香酸である請求の範囲第７項に 記載の方法。
10. １０．該化合物が酵素からなる請求の範囲第１項に記載の方法。
11. １１．酵素がスーパーオキシドディスムターゼからなる請求の範囲第１０項に記 載の方法。
12. １２．酵素がカタラーゼからなる請求の範囲第１０項に記載の方法。
13. １３．該化合物が反応性酸素代謝物により酸化を受ける酸化性化合物からなる請 求の範囲第１項に記載の方法。
14. １４．該化合物がアミノグリコシドの腎臓毒作用を媒介する反応性酸素代謝物の 発生を抑制するかあるいは該代謝物を効果的に清掃または無毒化する内因性剤の 生体内有効濃度を増加する分子からなる請求の範囲第１項に記載の方法。
15. １５．内因性剤が反応性酸素代謝物により酸化を受ける酸化性化合物である請求 の範囲第１４項に記載の方法。
16. １６．化合物が該酸化性剤のバイオ合成前駆体からなる請求の範囲第１５項に記 載の方法。
17. １７．該酸化性剤がグルタチオンからなる請求の範囲第１６項に記載の方法。
18. １８．合成前駆体がガンマーグルタミルシステイン、ガンマーグルタミルシスチ ンおよびガンマーグルタミルシステインジスルフィドからなる群から選ばれる請 求の範囲第１７項に記載の方法。
19. １９．坑生物質がゲンタマイシンからなる請求の範囲第１項、第２項、第３項、 第７項、第１０項、第１３項または第１６項に記載の方法。
20. ２０．坑生物質がゲンタマイシンからなる請求の範囲第８項に記載の方法。
21. ２１．坑与が筋肉内である請求の範囲第１項または第２０項に記載の方法。
22. ２２．（ａ）有効量のアミノグリコキシドおよび（ｂ）アミノグリコシドの腎臓 毒作用を媒介する反応性酸素代謝物の発生を抑制または該代謝物を効果的に清掃 または無毒化する化合物の混合物からなる減少された毒性の薬剤組成物。
23. ２３．該化合物がフリーラジカル清掃剤からなる請求の範囲第２２項に記載の薬 剤組成物。
24. ２４．フリーラジカル清掃剤がヒドロキシルラジカル清掃剤からなる請求の範囲 第２３項に記載の薬剤組成物。
25. ２５．ヒドロキシルラジカル清掃剤がジメチルチオコリアからなる請求の範囲第 ２４項に記載の薬剤組成物。
26. ２６．ヒドロキシルラジカル清掃剤がジメチルスルフォキシドからなる請求の範 囲第２４項に記載の薬剤組成物。
27. ２７．ヒドロキシルラジカル清掃剤が安息香酸ナトリウムからなる請求の範囲第 ２４項に記載の薬剤組成物。
28. ２８．該化合物が鉄キレート化剤である請求の範囲第２２項に記載の薬剤組成物 。
29. ２９．鉄キレート化剤がデフェロキシアミンである請求の範囲第２８項に記載の 薬剤組成物。
30. ３０．鉄キレート化剤が２，３−ジヒドロキシ安息香酸である請求の範囲第２８ 項に記載の薬剤組成物。
31. ３１．該化合物が酵素からなる請求の範囲第２２項に記載の薬剤組成物。
32. ３２．酵素がスーパーオキシドディスムターゼからなる請求の範囲第３１項に記 載の薬剤組成物。
33. ３３．酵素がカタラーゼからなる請求の範囲第３１項に記載の薬剤組成物。
34. ３４．該化合物が反応性酸素代謝物により酸化を受ける酸化性化合物からなる請 求の範囲第２２項に記載の薬剤組成物。
35. ３５．該化合物がアミノグリコシドの腎臓毒作用を媒介する反応性酸素代謝物の 発生を抑制するかあるいは該代謝物を効果的に清掃または無毒化する内因性剤の 生体内有効濃度を増加する分子からなる請求の範囲第２２項に記載の薬剤組成物 。
36. ３６．内因性剤が反応性酸素代謝物により酸化を受ける酸化性化合物である請求 の範囲第３５項に記載の薬剤組成物。
37. ３７．化合物が該酸化性剤のバイオ合成前駆体からなる請求の範囲第３６項に記 載の薬剤組成物。
38. ３８．該酸化性剤がグルタチオンからなる請求の範囲第３７項に記載の薬剤組成 物。
39. ３９．合成前駆体がガンマーグルタミルシステイン、ガンマーグルタミルシスチ ンおよびガンマーグルタミルシステインジスルフィドからなる群から選ばれる請 求の範囲第３８項に記載の薬剤組成物。
40. ４０．坑生物質がゲンタマイシンからなる請求の範囲第２２項、第２３項、第２ ４項、第２８項、第３１項、第３４項または第３７項に記載の薬剤組成物。
41. ４１．坑生物質がゲンタマイシンからなる請求の範囲第２９項に記載の薬剤組成 物。
42. ４２．筋肉内投与される請求の範囲第２２項または第４１項に記載の薬剤組成物 。