JPH01239148A - 支持体フリースの含浸法 - Google Patents

支持体フリースの含浸法

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JPH01239148A
JPH01239148A JP1015193A JP1519389A JPH01239148A JP H01239148 A JPH01239148 A JP H01239148A JP 1015193 A JP1015193 A JP 1015193A JP 1519389 A JP1519389 A JP 1519389A JP H01239148 A JPH01239148 A JP H01239148A
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔座業上の利用分封〕 本発明は、分離司北（ａｂ１６ｓｂａｒ　）に含浸され
る試薬用の支持体フリースに関する。
〔従来の技術〕
臨床診ｌｆＩ工びに賞品、必備品２よび水の分析におい
て、多くのパラメーターが非常に諭々測定される。この
丸めに、簾々、酵素を使用する検出法または免疫学的活
性物質を使用するイムノアッセイの原理に従った検出法
が実施される。
これらの常に実施されるべき測定のために、すでに分析
に必袂な全要素を含有する、予めｆ＄備された試験キッ
トが市販されている。この際、最も簡単な形では、個々
の要素が容易かつ迅速に使用されえる浴液として存在す
る。殊に大研究所における慣用診断のために使用される
自動分析機器の使用の際に、浴液状の試薬を使用する測
定方法が最も簡単に実施されうる。しかしながら多くの
物質、殊に生物学的活性分子は、浴液中では不安定で、
従ってこの形で長時間保存できない。従ってこれらの物
質は錠剤の形で使用される（この際これらが非常に固く
圧縮され、従って難解性となるか、または不十分な硬さ
を有し、崩れるので、問題が生じ、計量は不正確となる
）。さらに凍結乾燥物を使用することか公知であるが、
これは試験に使用する際、沼剤、大抵は水のｅｌｌ）Ｑ
によって後元される。しかしながらこの凍結乾燥物の欠
点は、非常に経費がかかシ、かつ高価な製法である。
これらの欠点を避けるために、紙フリースに試薬を含浸
し、その後これらの紙フリース全測定過程の間、反応溶
液中に入れることがすでに提案された。このためには、
試薬は、一方では紙フリース上に非常に良好に付層すべ
きであり、従って早すぎる分離によってフリース上で含
浸される量は変化しない。他方、反応浴液中へ入れる際
に、個有さ几た試薬は迅邪かつ完全に層比されることが
必要である。従来公知の紙フリースは、塗布された試薬
とほとんど結合せず、すでに保管の間に塗布された試薬
の一部分が分離するか、または試薬の結合が強く、迅速
かつ完全には溶出されえないので、なお満足ではない。
生物学的活性物質に関してに、さらに安定性の問題も任
じる。殊に酵系および免疫学的活性物質は、長い貯蔵の
際にはその活性を失い、これはその活性を利用する検出
法に不利な作用を及ぼす。
〔発明が解決しようとする課題〕
ところで不発明の課題は、試桑殊にハプテン、抗原、お
よび抗体と標識物質との接曾体およびタンパク質接合体
で分触可能に含浸することのできる支持体フリースを提
供することでおった。
これらの支持体フリースは、試薬と、宿性の損失が住じ
ないように結合すべきでシる。酔索は単独または接合体
で含浸てれてもならないし、生物活性物質は乾燥および
貯蔵によシその活性が失われてもならない・接合体（ｋ
ｏｎｊｕｇａｔ　）は、試料浴液中への役偵の際に容易
にかつ完全に浴出できるべきである。さらに支持体フリ
ースが、単位表面積当ジ、所定の杏生ｏＴ能−の試薬を
吸収することがム要である。さらに支持体フリースな、
湿潤状悪でも乾燥状、りでも、＋ｌｉ椋により分断する
ことができるべきである。これは湿潤状態でも乾燥状態
でも裂けてはならない。
丈に、この支持体フリースは、長期の貯蔵の際にも、活
性損失が起らないように試薬を安定化すべきでろる◎ 〔課題を解決するための手段〕 ところで、この課題は、分離可能に宮浸される試薬用の
支持体フリースによって解決され、これは、 ａ）セルロースを基礎とする域維 ｂ）ポリエステルおよび／　ｔ　７ｃはポリアミドｔ＝
ｈｑとするポリマー２．訣維 ２よび ｃ）　　ＯＨ−および／またはエステル基を有する有彩
〉結合バリ から唇成されている。
２外にも前記組成を有するフリースが、すべての別記課
題を一＄４１ｃすことが判明した。これは上 試薬の安定化も７’Ｃらし、従って非霜に長い貯蔵の後
も活性損失は起こらない。さらに、この支持体フリース
は機械により非？δに良好に分断することができるが、
湿病状懇でも乾燥状態でも裂けない。血韮され７ｃ試楽
は貯蔵の緑には分離しないが試料浴数中へ侃哉する際に
は直ちにかつ完全に損出する。試料中に存在する物質の
非特異的結合も起こらない。
この有利な特性を達成するために、支持体フリースは三
妥索から成るべきである。紀１振累はセルロース’ｋＭ
Ｗとする繊維である。ここでは主にセルロースから厄る
全ての公知繊維が好適である。セルロース繊維としては
ステープルファイバー、繊維素およびリンターを使用す
るのが有利である。セルロースをアルカリ性にしてアル
カリセルロースとし、引＠続き二硫化仄累での処理によ
りセルロースーキサントデネートを形成ざセ、このセル
ロースーキサントデネートｔ−苛性アルカ’ｌ　ｔＫ中
に浴かし、かつ紡糸して、ビスコース線条糸にすること
によって得られり物ａ　’ｉミスチープルファイバー称
する。ｉ、λ細索は、セルロース富有物質の完全な化学
的俗解および引き成く標目によって得ることができる。
綿実ｌ子から得られる短い、紡糸不可能な木綿繊維をリ
ンターと称する。
不発明による支持体フリースの有利な尖循形では、有利
に５＝１〜１：１の比のステープルファイバーとリンタ
ーとから成る混合物を使用する。
第２要素は、ポリエステルおよび／ま九はポリアミドを
基礎とするポリマー繊維でおる。この際、純粋なポリエ
ステルおよび／°またはポリアミド４維］びに混合ｉＲ
維を使用することかできる。
竹に有利には、比！　１．１４〜１．１５　ｊｉ／−”
、手 切口の長さ４〜６Ｂ、および；或維市７（Ｆａｓｅｒｆ
ｅｉｎｈｅｉｔ　）　２．２　ｄｔｅｘであるポリアミ
ド全使用する。
特に有利なポリエステル繊維は、比−約１．１７＆／−
３、ジ７口の長さ６〜６ｇおよび繊手 維番７１．７〜３，３　ｄｔｅｘの繊維である。
セルロース−およびポリマー；、ａ維は、繊維番手 ９１．７〜４．５　Ｄｅｔｅｘを有し、長さ６〜１　：
２ｓｔ：有するのが有利である。
さらに他のｌ長毀素として、不発明による支持体フリー
スは、ＯＨ−および／またはエステル基を有する有機結
合剤金含有する。このために、ポリビニルアルコールお
よびアクリル酸エステル又はポリアクリル酸エステルを
使用するのが有利である。
切口の長さ４ｍ、および比重１．２６〜１．６０、Ｆ　
／−’を有する鷹維′ｆ！ＩＪ質としてポリビニルアル
コールを使用するのがゴ利でるる。アクリル酸エステル
は、非イオン性で、自己架橋性のアクリル樹脂−分散液
である。
これらの三要素と水から、紙−Ａ造の慣用法で、支持体
フリースを傾が１漉網装置（ＳｃｈｒＫｇｓｉθｂ−ｍ
ａａｃｈｉｎｅ　）上で得る。さらに添加物および助剤
は不必要である。
これらの本発明で１要な６安素は、広範に変動すること
ができる。本発明による支持体フリースは、有利にはセ
ルロース含有よ維５〜６０重酋％およびポリマー繊維９
５〜４０止量％から成シ、かつ繊維の重量部に対して５
〜３０鬼２％の結合剤を含有する。ポリマーＤ維として
ポリエステル繊維を使用する賜金、ポリマー繊維分は有
利には高い方の範囲、すなわち６０〜９５７ｏである。
ポリマー繊維としてポリアミド繊維を使用する場合には
、その分は有利には低い方の範囲、殊に４０〜６０％に
ある。
本発明による支持体フリースは、免疫学的測定のための
試薬で含浸するために、非情に良好である。従って本発
明のもう１つの目的は、免疫学的測定のための試薬、例
えはノ・ブテン、抗原、抗体および／またはそのフラグ
メント、兼びにこれらの免役学的活性物質と標緘物気と
の接合体、並びに合成ペプテドを分離可能な含浸のため
に本発明の支持体フリースを使用することである。同様
に本発明の支持体フリースは、その他の結合成分、例え
ばビオチン／アビシン／ストレプトアビジン、プ日ティ
ンＡ／工ｇＧｉ窺はコンカナバリンＡ／マンノースの分
際可能な含浸のために好適でるる。
不￥Ａ明の支持体フリースを、免役活性物質と徐陳物負
例えば峙ちとからの猛合体の分離可能な百浸に使用する
のが有利である。これに／’−ガククトシタ゛−ゼー接
合体の分際可能な含浸に使用するのが特に有利である。
意外にも、本発明による支持体フリースを用いて、含浸
された試薬の優れ九安定性が達成できることが判った。
このことは、殊に本発明による支持体フリースの個々の
要素ではこの安定化作用ｔ−得ることはできないので、
意想外である。
〔実施例〕
不発＃ｙ４を次の例によシ詳述する。
例１ 手 繊維番？’３．３ａｔ・Ｘ、および繊維の長さ４１１手 のポリエステル繊維８０部、繊維査ｆＩｌ　、７　ｄｔ
ｅｘ。
および切口の長さ３ｍのステープルファイバー２０部、
遍びに切口の長さ４＋ｍの示すビニルアルコール繊維２
０部からなる支持体フリースを製造した。繊維系ポリエ
ステル、ステーゾルファイバーおよびポリビニルアルコ
ールを、混合槽中で水を用いて物ｊＸ蜜度０．６％で表
枠もしくはばらばらにした。
次いで繊維系を循環′ＩＭ網中にポンプで送り込んだ。
繊維混合物を脱水し、もしくは水分ｔ−Ｘ空で吸引する
間に、繊維は漉網の表面上で方向を定め、乾燥含量が約
２０％のフリースとなるように乾燥ドラムを通して接触
乾燥さセる。
例２ 例１に記載のように、次の組成を有する支持体フリース
全製造した： 手 ポリアミド：繊維査ｔ　２．２　ａｔｅｘ　７切口の長
さ６ｗｓ　　　　　　４０％ 手 ステープルファイバー：繊維番−ｊ？１．７ｄｔｅｘ　
／切口の長さ３ｍ５３０％ リンター：　　　　　　　　　　　　　　　２０％ポリ
げニルアルコール：切口の長さ ４ｓ＋ｓ　　　　　　　　　　　１０％例６ 第１々の支持体フリースｔ−製造し、ポリクローナルの
ヒップ−抗ゾゴキシンー抗体−ＩＩ′ａｂ−７ラグメン
トおよびＩ−ガラクトシダーゼ（ＰＡｘ＜Ｄｉｇ＞−８
−Ｆａｂ（工Ｓ）−β−Ｇａｌ　）を含浸さセる。支持
体フリース七、各々の支持体フリースが配糸活性１２４
９　ｍＩｃを有するように含浸さゼた。これらの支持体
フリースを水浴液中に入れ、この浴液中に移行した活性
を測定した。相応する接合体＊ｔ１ｏｏｍモル／ｌヘペ
ス（Ｈｅｐｅｓ　）　（ｐ”７．２５　）　２０μｌ　
＋　１．５％ポリエチレングリコール（ｐｘｅ　６００
０ン中に溶かし、フリース（６Ｘ８．４Ｗｊｓ）にこの
溶成を言浸避セた。この九めに、フリースを金属針で突
き刺し、かつ浸償俊直ちに儂環乾燥器中６５°Ｃで６０
分間乾燥させ、引吹きすぐに乾燥官中に入れ、４°Ｃで
一晩放匝する。このように含浸された支持体フリースは
、各々酵素活性１２４９　ｎＪ金■した。溶離度の測定
の丸めに、７リ一ス全インキユベーシヨンｕｍｆｉ　（
１００ｍモル／　ｌ　Ｈｅｐｅｓ　５ｐｊ（７，２５、
Ｎａ０Ａ　Ｏ，９？ｏ　、アスパライン咳Ｍｇ２ｍモル
／ｌ、ウシ血溜アルブミン０．１％、Ｔｗｅｅｎ　２０
（ポリオキシエチレン　ンルビタン刀ルボン酸エステル
）０．２％）１−で溶離ぢセた。その後、この険散甲に
移行したｍ累活注を測定した。計測は＠−日紛を弁して
行なう。１面々のフリースの組成、ユびに１結果を次の
一覧表に示しｋ。
ポリアミド　　　　　　　　４０部 ステープルファイバー　　　　３０部 リンター　　　　　　　　　　２０音ＩＩ　　　１２４
９　　１１５１　　　　８ポリビニルアルコール　　　
　１０ｉｔｓポリエステル　　　　　　　９０部 ステープルファイバー　　　　１０部 アクリル僚エステル　　　　６０部　　１２４９　　１
２５７　　　　１ポリニスチル　　　　　　　８　［Ｊ
　’Ｅｉ）ステープルファイバー　　　　２０部 ボリヒニルアルコール　　　　２０ＴｈｌＳ　　１２４
９　　１２６７１例４ 組成が次のリストに示しに不発明による支持体フリース
に次の組成を有する浴液を言浸避セ之； ５０　±０．２　ｍ七ル／ｌ　へベスｐ）（７，２５ク
ロテイｙ　（ｃｒｏｔｅｉｎ　）　ｅ　　Ｉ±０．０５
％アスパラギン酸Ｍｇ　　５±０．２ｍモル／ｌ凍結乾
燥物としてのＰＡＫ＜Ｄｉｇ＞−８−Ｆａｂ（工８）−
β−Ｇａｐ２００　Ｕ／１ このように含浸され友支持体フリースでその安定性を試
験した。これらを、湿度２％、６５℃で３：ｓ間貯蔵し
た。対照として、冷蔵庫内に湿度２％、＋４℃で保持さ
れたフリース、ユびに無処理の紙フリースを使用した。
活憔ａｔ＋＋定の１ζめに、試薬の凝に１後に酵素活性
（鳳）全、水中のクロルフェノールロート−β−Ｄ−ガ
ラクトシド（西ドイツ特許第３３　４５　７４８号明細
書に従って製造）５ｍモル／ｌの添加によシ測定し、こ
こで、５７８ｎｍにおける吸光度の増２７Ｄ金追跡し友
。
免疫学的活性（ＩＡ）も同様に測定し丸。このために、
浴出した先膜試薬に、一定量のジゴキシン（０〜５ｎ＆
／屑ｔ）ｔ−言荷する１：５８釈ヒト血消を添加した。
６７℃で５分間インキユベートシ、次いで、混合物を固
定ジゴキシンを含有する固相上に添加した。この固相か
ら遊離の後会体が績合し、その上液から、次いで、酵素
活性が上記のように似１」足場れる。測距１８号は試料
中のジゴキシン量に比例する。
結果上、久表に示した。
例５ ポリエステル　　　　　　９０部 ステイープルファイバー　１０部 および繊維に対して アクリル鍍エステル　　　６０部 からフリースを製造した。
このフリース上に接合体ｆ！ｃ塗布した。俗離性を試験
した。糸面された活性の９９％が溶離後に層液中に存在
した。
例６ ボリアミド　　　　　　　３０部 リンター　　　　　　　　　　２０部 ステイープルファイバー　　６０部 および ポリビニルアルコール　　　１０部 からフリースを製造し１こ。

Claims (10)

    【特許請求の範囲】
  1. １．分離可能に含浸される試薬用の支持体フリースにお
    いて、これは、 ａ）セルロースを基礎とする繊維 ｂ）ポリエステルおよび／またはポリアミドを基礎とす
    るポリマー繊維 および ｃ）ＯＨ基および／またはエステル基を有する有機結合
    剤 から構成されていることを特徴とする、分離可能に含浸
    される試薬用の支持体フリース。
  2. ２．セルロースを基礎とする繊維５〜６０重量％、ポリ
    マー繊維４０〜９５重量％および繊維の重量に対して５
    〜６０重量％の有機結合剤から構成されている、請求項
    １記載の支持体フリース。
  3. ３．セルロースを基礎とする繊維６０〜４０重量％、ポ
    リアミド４０〜６０重量％および繊維の重量に対して５
    〜３０重量％のポリビニルアルコールから成る、請求項
    １又は２記載の支持体フリース。
  4. ４．セルロースを基礎とする繊維５〜４０重量％、ポリ
    エステル９５〜６０重量％および繊維の重量に対して５
    〜６０重量％のポリビニルアルコールから成る、請求項
    １から６までのいずれか１項記載の支持体フリース。
  5. ５．セルロースを基礎とする繊維は、ステープルフアイ
    バー、リンターおよび／または繊維素から成る繊維であ
    る、請求項１から４までのいずれか１項記載の支持体フ
    リース。
  6. ６．セルロースを基礎とする繊維が、ステープルフアイ
    バーとリンターとの混合物である、請求項５記載の支持
    体フリース。
  7. ７．ポリマー繊維がポリエステル繊維である請求項１か
    ら６までのいずれか１項記載の支持体フリース。
  8. ８．有機結合剤がポリビエルアルコールおよび／または
    アクリル酸エステルである、請求項１から７までのいず
    れか１項記載の支持体フリース。
  9. ９．請求項１から５までのいずれか１項記載の支持体フ
    リースを使用して、ハプテン、抗原、抗体、そのフラグ
    メント、これらの免疫学的活性分子と標識物質および／
    または合成ペプテドとの接合体を分離町能に含浸する方
    法。
  10. １０．支持体フリースをβ−ガラクトシダーゼー接合体
    の分離可能な含浸に使用する、請求項９記載の方法。
JP1015193A 1988-01-27 1989-01-26 支持体フリースの含浸法 Granted JPH01239148A (ja)

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