JPH01157915A

JPH01157915A - スーパーオキサイドディスムターゼ誘導剤

Info

Publication number: JPH01157915A
Application number: JP62315485A
Authority: JP
Inventors: Kazuhiro Yoshino; 吉野　和広
Original assignee: Lion Corp
Current assignee: Lion Corp
Priority date: 1987-12-14
Filing date: 1987-12-14
Publication date: 1989-06-21

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は、生体内に蓄積されるスーパーオキサイドを分
解する酵素であるスーパーオキサイドディスムターゼ（
以下、ＳＯＤという）誘導剤に関するものであり、特に
、炎症治療、虚血性疾患、成人病、老人病などの治療や
予防に幅広く利用できるＳＯＤ誘導剤に関するものであ
る。

〔従来の技術〕

スーパーオキサイドが、炎症の起炎物質であり、炎症の
際、組織障害を起こすことが見い出されている。そこで
スーパーオキサイドを消去させる酵素であるＳＯＤが、
疾患の治療に利用されはじめている（例えば、星恵子ら
、炎症、７：２８１．１９８７や近藤元治、フリーラジ
カルの臨床１゜日本医学館、１９８７など）。

さらに、スーパーオキサイドは、正常な細胞、組織に損
傷を与え、一方細胞中のＳＯＤは、加齢とともに減少し
てゆくことが知られ（カトラー（Ｃｕｔｌｅｒ、ＲＧ）
　　、第２回協和発酵バイオサイエンスシンポジウム、
東京、１９８５．９）、スーパーオキサイドの永年の蓄
積による酸化障害が老化、成人病の原因であると考えら
れるようになってきた（ソハール（Ｓｏｈａｌ、　Ｒ３
）　：ベーシックライフサイエンス（Ｂａｓｉｃ　Ｌｉ
ｆｅ　Ｓｃｉ、）　　、　３５　ニア５．１９８５．加
藤邦彦、実験医学、４：６０，１９８６）。

ところが、現在までに老化、成人病の予防、治療剤とし
て利用されている医薬品は、ビタミンＥだけであり、下
等動物では確かに延命効果が認められているものの、高
等動物では効果が認められていない。

一方、ＳＯＤとはまったく異なるが、ＳＯＤ様作用を有
する物質すなわちＳＯＤ様物質については、トコフェロ
ール、シメチジン錯体、ＡｏＡ（Ａｎｔｉ　０ｘｉｄａ
ｎｔ　Ａｎａｌｏｇ）等が従来から知られており、これ
らの物質がスーパーオキサイドを分解する反応について
詳細な情報が得られている（木材ら、バイオケミストリ
ー、バイオフィジックス、アクタ（Ｂｉｏｃｈｉｍ、Ｂ
ｉｏｐｈｙｓ、Ａｃｔａ、）：　７４５．３７．１９８
３、ニワら：インフラメイション（Ｉｎｆｌａｍｍａｔ
ｉｏｎ）　。

１０．７９．１９８６及び特開昭６２−５９２１３号）
。

フタライド化合物を含む精油は、川きゅう以外の植物で
、セロリ油、ロページなどが知られている。（Ｈａｒｖ
ｅｒ　Ｊ、Ｇｏｌｄ、　ｅｔａｌ、　　Ｊ、Ｏｒｇ、　
Ｃｈｅｍ、。

２８　：９８５−９８７．１９６３）　（Ｍａｔｕｈａ
ｓｈｉ　Ｎ、　ｅｔａｌ、Ｃｈｅｍ。

Ｐｈａｒｍ、　Ｂｕｌｌｏ、　１１：１３１７−１３１
９．１９６３）セロリ種子油、ロベージは、食品香料と
して市販され、安全性は高く、商業的に容易に入手でき
る。そして、フタライド化合物を含むと思われる川きゅ
うの精油エキスが、放射線障害の防護作用を有すること
が報告されている（特開昭６２−１３５４１２号）。

また、川きゅう由来のフタライド新規物質誘導体が、強
心作用、冠動脈血流量増大作用を有することが報告され
ている（特開昭６１−７２６７号）。

しかしながら、これまでに有効なＳＯＤ誘導剤は知られ
ていない。

〔発明が解決しようとする問題点〕

従って、本発明はＳＯＤを誘導でき、体内に蓄積された
スーパーオキサイドを効率的に分解させ、スーパーオキ
サイドに帰因する炎症、老化等を有効に予防、治療でき
るＳＯＤ誘導剤を提供することを目的とする。

〔問題点を解決するための手段〕

本発明は、数ある生薬及び香料成分について効能を調べ
ていたところ、特定の香料成分がＳＯＤ誘導剤としてす
ぐれた効果を発揮し、上記問題点を有効に解決できると
の知見に基づいてなされたのである。

すなわち、本発明は、セロリまたはロベージのエキスを
含有することを特徴とするスーパーオキサイドディスム
クーゼ誘導剤を提供する。

本発明で用いるセロリとは、植物学名アピウムグラベオ
レンス（Ａｐｉｕｍ　ｇｒａｖｅｏｌｅｎｓ　Ｌ）の植
物であり、その茎、葉及び種子、好ましくは種子からの
抽出物を本発明では使用する。尚、セロリ種子は欧米で
家庭の食品香料として販売されている。

一方、本発明で用いるロベージとは、植物学名レピステ
ィカム　オフィシナレコッホ（Ｌｅｖｉｓｔｉｃｕｍｏ
ｆｆｉｃｉｎａｌｅ　Ｋｏｃｔ＋）というセリ科の植物
であり、茎、葉及び根からの抽出物を本発明では使用す
る。この抽出物も食品用香料として市販されている。こ
こで、セロリ及びロベージの抽出物を得る方法としては
、これらの葉などの水抽出、水蒸気蒸留による抽出や液
化炭酸ガスを用いる臨界抽出法などがあげられる。さら
に、また有機溶剤により抽出することもできる。ここで
、有機溶媒としては、ベンゼン、ヘキサン、シクロヘキ
サン、石油エーテル、四塩化炭素、クロロフォルム、ジ
クロルメタン、エチレンクロライド（ジクロルエタン、
モノクロルエタン等）、トルエン、酢酸エチル、エーテ
ル、エタノール、メタノール、ブタノールなどの一種又
は二種以上の混合物を使用する。この場合、抽出方法と
しては、上記セロリ又はロベージ１重量部に対して有機
溶媒を１〜２０重量部添加して行うのがよい。又、抽出
方法としては、バッチ法、還流法など通常の方法で行う
ことができ、室温又は加温下（３０〜７０℃）で、１５
分〜１０日程度行うのが望ましい。

本発明では上記抽出物を任意の濃度のものとして用いる
ことができるが、乾燥して用いることもできる。又、本
発明では上記抽出物を単独で用いることができるが、例
えば吸収性を高めるために界面活性剤や剤型のために乳
糖などを併用することができる。

本発明のＳＯＤ誘導剤は任意の形態で用いることができ
るが、皮膚等に塗布する外用剤の形態で用いるのがよい
。このような場合には、抽出物を０、０　Ｏ１〜１０％
配合することができる。また、内服剤、注射剤、点眼剤
、外用剤などの形態で用いるものも好ましい。内服剤、
注射剤として用いる場合には、有機溶媒抽出物を５　ｍ
ｇ〜５　ｇ　／　ｋｇ体重で投与できる。

次にセロリ種子及びロベージの抽出物の安全性データ（
ＬＤ５０）を示す。

これはセロリ種子またはロベージを水蒸気蒸留により抽
出し、その濃縮物の毒１生を次の方法により調べた。

動　物：ウィスター系雄うット６週令及びＤＤ系雄マウ
ス７週令投与法：抽出物を蒸留水に懸濁し超音波分散した後投与
した。

結果を次に示す。

〔発明の効果〕

本発明のＳＯＤ誘導剤によれば、体内のＳＯＤを上昇さ
せ、スーパーオキサイドが除去されるので医学的、生化
学的に酸素毒性からの防御ができる。

従って、従来用いられているビタミンＥのような対処療
法的方法とは異なり、本発明のＳ　ＯＤ　誘導剤によれ
ば、これまでとまったく異なった作用機構で、加齢と相
関して低下するＳＯＤ活性を、再び上昇させることがで
きる。よって、本発明のＳＯＤ誘導剤は成人病、虚血性
疾患、老人病の予防、治療及び炎症治療剤として幅広く
利用できる。

次に実施例により本発明を説明する。

〔実施例〕

実施例１セロリ種子またはロベージの葉を水蒸気蒸留して抽出物
を（尋、該抽出液を濃縮して粗抽出物を得た。各抽出物
についてＳＯＤ誘導活性を、つぎのようにして測定した
。

シー、ニレガフ　ス（Ｃ，ｅｌｅｇａｎｓ）　　の培養
ニジ−。

エレガンスを常法により３％酵母エキス、４％バタトソ
イトン、０．０５％ミオグロビン及び０．０５％植物ス
テロールを含む液体培地で、２週間、１１００ＰＰ振と
う（２０℃）培養し、その後、シー、エレガンスを遠沈
して集め、１％ＳＤＳで処理し、ダウエルラーバ−（Ｄ
Ｌ）だけを集めた。

ＳＯＤの誘導：粗抽出物を、１０％ツイーン（Ｔｗｅｅ
ｎ）　　８０で懸濁させ、１０−１００ｍｇ／ｍｆの濃
度にした。１５ｍ１の液体培地に、１×１０５匹のＤＬ
を加え、粗抽出懸濁液を添加し、最終的に０、０５　ｍ
ｇ　−０，５ｍｇ／ｍ１１度にした。シー、エレガンス
は、４８時間、２０℃ｌ　Ｑ　ＱＲＰＭで培養し誘導を
かけた。その後、組織を超音波で破壊し、遠心機とフィ
ルターでＳＯＤを含む細胞上清液を得た。この細胞上清
液を、１／１００．１１５０．１／２５．１　／　１２
．５．１／１０に希釈し、ＳＯＤ活性の試料測定溶液と
した。

ＳＯＤ活性の測定大樋の方法（大樋善彦：炎症、４．６３．１９８４　）
により測定した。

反応液Ａ液ニホウ酸塩（Ｂｏｒａｔｅ）　−に８２ＰＯ，緩衝
液（ｐＨ８，２＞Ｂ液：ハイポキサンチン　　　０．５
ｍＭＣ液：ヒドロキシアミン　　１０ｍ！ＪＤ液：蒸留
水Ｅ液：試料溶液Ｆ液：キサンチン　オキシダーゼ　３−５　Ｘ　１００
　／　ｉＧ液：スルファミド酸　　　　３ｍＭ測定操作：　０．２　ｄの希釈された各試料溶液に、Δ
液０．２　ｍｌ！、Ｂ液０．２ｍｌ、Ｃ液０．２−１及
びＤ液０．１−を添加して、全量を１．０ｍｌとし、３
７℃で３０分間インキュベートした。その後ただちに、
Ｇ液２ｍｌを加え、攪はん後、１時間室温に放置し、５
５０ｎｍにおける吸光度（Ｄｌ）を測定した。ブランク
については、Ｃ液の代わりに蒸留水を加えたものの吸光
度（Ｄ２）、またコントロールについては、試料溶液の
代わりに蒸留水を加えたものの吸光度（Ｄ３）を測定し
た。次式から各試料溶液のＳＯＤ活性を算出した。

ＳＯＤ活性／ｌＸｌ０’エレガンス＝１−（Ｄ３−Ｄ２＞／　（（Ｄｉ−Ｄ２）Ｘ１００）Ｓ
ＯＤ活性は、各試料測定溶液の濃度変化をグラフ化し、
５０％活性酸素生成阻害（＝ＩＮＵ）を算出した。タン
パク含壷はローリ−法を用いて常法どおり定量し、ＳＯ
Ｄ活性５０％活性酸素生成阻害を、タンパクｍｇ当たり
で換算した。そして、゛コントロールのＳＯＤユニット
を１００として、試料のＳＯＤユニットを表わした。結
果を第１表に示す。

第１表第１表から明らかなごとく、セロリ及びロベージの粗抽
出物が高いＳＯＤ誘導活性を示すことがわかる。

Claims

【特許請求の範囲】

セロリまたはロベージのエキスを含有することを特徴と
するスーパーオキサイドディスムターゼ誘導剤。