JPH01151504A - 殺線虫剤の製造法 - Google Patents
殺線虫剤の製造法Info
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- JPH01151504A JPH01151504A JP31152187A JP31152187A JPH01151504A JP H01151504 A JPH01151504 A JP H01151504A JP 31152187 A JP31152187 A JP 31152187A JP 31152187 A JP31152187 A JP 31152187A JP H01151504 A JPH01151504 A JP H01151504A
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Landscapes
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
この発明はマリーゴールドに含まれるα−ターチェニル
を主たる有効成分とする殺線虫剤の製造法に関するもの
である。
を主たる有効成分とする殺線虫剤の製造法に関するもの
である。
従来の技術
殺線虫剤として一般的に使用され′ζいるものは、合成
された薬剤であり、残留毒性による環境汚染や人畜に対
する悪影響が指摘され、また薬効の持続性が乏しいなど
の問題点があって、満足しうるちのは見当たらない。
された薬剤であり、残留毒性による環境汚染や人畜に対
する悪影響が指摘され、また薬効の持続性が乏しいなど
の問題点があって、満足しうるちのは見当たらない。
キク科の植物であるマリーゴールドには、殺線虫力を備
えた下式 で示されるα−ターチェニル及びその類縁物質を含有す
ることが知られでいる。〔例えばレキュレエ デス ト
ラパックス キミーク デス ベイズ−パス（Ｒｅｃｕ
ｅｉｌｌｅ ｄｅｓ Ｔｒａｖｅａｕｘ Ｃｈｉｍｔｑ
ｕｅ ｄｅｓ Ｐａｙｓ−Ｈａｓ）第７７を １００４
頁ないし１００９頁（１９５８）及び同第７９巻３８２
頁ないし３９０負（１９５９） ）マリーゴールドを直
かに田畑に植えて土壌中の線虫密度を低減させる方法は
広く知られており、化学薬品に較べて残留毒性の心配が
なく且つ効果が長時間持続するなどのメリットを備えて
いるか、反面マリーゴールドを植えた田畑では同時に野
菜類を栽培し難いので、その間休耕あるいは減産を余儀
なくされていた。
えた下式 で示されるα−ターチェニル及びその類縁物質を含有す
ることが知られでいる。〔例えばレキュレエ デス ト
ラパックス キミーク デス ベイズ−パス（Ｒｅｃｕ
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ｕｅ ｄｅｓ Ｐａｙｓ−Ｈａｓ）第７７を １００４
頁ないし１００９頁（１９５８）及び同第７９巻３８２
頁ないし３９０負（１９５９） ）マリーゴールドを直
かに田畑に植えて土壌中の線虫密度を低減させる方法は
広く知られており、化学薬品に較べて残留毒性の心配が
なく且つ効果が長時間持続するなどのメリットを備えて
いるか、反面マリーゴールドを植えた田畑では同時に野
菜類を栽培し難いので、その間休耕あるいは減産を余儀
なくされていた。
またα−ターチェニルを化学的に合成する方法も研究さ
れているが（例えば特開昭５２−１１８４６２号公報）
、未だ実用化されるには至っていない。
れているが（例えば特開昭５２−１１８４６２号公報）
、未だ実用化されるには至っていない。
問題点を解決するための手段
本発明者等は、このような事情に鑑みマリーゴールドを
組織培養によって量産する方法について、種々の試験研
究を重ねた結果、組織培養においてマリーゴールドをオ
ーキシンあるいはオーキシンとサイトカイニンを含有す
るカルス化培地でカルス誘導したのち、オーキシンを０
．０１Ｂ／１ないし１ｍｇ／ｌの低い濃度に規制した増
殖培地を用いて増殖するごとによって、特に強い殺線虫
力を示す培養物が出来ることを知見し、これをｎ−ヘキ
サン、アセトン、アセトニトリル等の有機溶媒によって
抽出して、根腐れ線虫に対しても有効な優れた殺虫性能
を有する殺線虫剤を見い出した。
組織培養によって量産する方法について、種々の試験研
究を重ねた結果、組織培養においてマリーゴールドをオ
ーキシンあるいはオーキシンとサイトカイニンを含有す
るカルス化培地でカルス誘導したのち、オーキシンを０
．０１Ｂ／１ないし１ｍｇ／ｌの低い濃度に規制した増
殖培地を用いて増殖するごとによって、特に強い殺線虫
力を示す培養物が出来ることを知見し、これをｎ−ヘキ
サン、アセトン、アセトニトリル等の有機溶媒によって
抽出して、根腐れ線虫に対しても有効な優れた殺虫性能
を有する殺線虫剤を見い出した。
本発明方法の実施に適する代表的なマリーゴールド（ｒ
ａｇａｔｅｓ ｉ）は、フレンチマリーゴールド（Ｔａ
ｇｅｔｅｓ ｐａｔｕｌａ） 、アフリカンマリーゴー
ルド（Ｔａｇｅｔｅｓ ｅｒｅｃｔａ）等であり、本発
明においては、これらマリーゴールドの葉、茎、根、蕃
などから採取された組織片を常法により殺菌処理したの
ち、植物ホルモンとしてオーキシンあるいはオーキシン
とサイトカイニンを含有するカルス化１６地においてカ
ルス化誘導を行う。
ａｇａｔｅｓ ｉ）は、フレンチマリーゴールド（Ｔａ
ｇｅｔｅｓ ｐａｔｕｌａ） 、アフリカンマリーゴー
ルド（Ｔａｇｅｔｅｓ ｅｒｅｃｔａ）等であり、本発
明においては、これらマリーゴールドの葉、茎、根、蕃
などから採取された組織片を常法により殺菌処理したの
ち、植物ホルモンとしてオーキシンあるいはオーキシン
とサイトカイニンを含有するカルス化１６地においてカ
ルス化誘導を行う。
なお、本発明の実施に通ずる代表的なオーキシンは、イ
ンドール酢酸、ナフタレン酢酸、 ２．４−ジクロロ
フェノキシ酢酸等であり、サイトカイニンの代表的なも
のは、カイネチン、ベンジルアデニン、ゼアチン等であ
る。
ンドール酢酸、ナフタレン酢酸、 ２．４−ジクロロ
フェノキシ酢酸等であり、サイトカイニンの代表的なも
のは、カイネチン、ベンジルアデニン、ゼアチン等であ
る。
カルス化培地としては、ムラシゲ・スクーグの培地、リ
ンスマイヤー・スクーグの培地、ガンボルグの培地、ニ
ラチエの培地などの基本培地に、前記植物ホルモンの他
にシ＝Ｉ糖、ぶどう糖等の炭素源などを適当射添加した
ものが好適であり、例えばムラシゲ・スクーグの基本培
地にシ：ＩＩ７！を１〜５重量％、寒天を０．５〜１．
０重足％、オーキシンとしてナフタレン酢酸を０．０１
〜２０ｍｇ ／ １ 、サイトカイニンとしてベンジル
アデニンを０〜２０ｍｇ／ｌの範囲で加えた培地にあっ
ては、２〜３週間の培養によって良好なカルス形成が認
められる。カルス化培養の条件としては、通常の植物組
織培養と同じであり、温度は１５〜３５゛Ｃ１好ましく
は２０〜３０℃、ｐＨは４〜８、好ましくは５〜６の範
囲が夫々適当である。
ンスマイヤー・スクーグの培地、ガンボルグの培地、ニ
ラチエの培地などの基本培地に、前記植物ホルモンの他
にシ＝Ｉ糖、ぶどう糖等の炭素源などを適当射添加した
ものが好適であり、例えばムラシゲ・スクーグの基本培
地にシ：ＩＩ７！を１〜５重量％、寒天を０．５〜１．
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〜２０ｍｇ ／ １ 、サイトカイニンとしてベンジル
アデニンを０〜２０ｍｇ／ｌの範囲で加えた培地にあっ
ては、２〜３週間の培養によって良好なカルス形成が認
められる。カルス化培養の条件としては、通常の植物組
織培養と同じであり、温度は１５〜３５゛Ｃ１好ましく
は２０〜３０℃、ｐＨは４〜８、好ましくは５〜６の範
囲が夫々適当である。
カルス誘導されたマリーゴールドは、引き続き前記と同
じオーキシンあるいはオーキシンとサイトカイニンを他
の添加物と共に含む増殖培地において増殖されるが、本
発明の実施においては、特に強い殺線虫力を有する培養
物を得るために、増殖培地におけるオーキシンの添加量
を０．０１ｍｇ／ １ないし１ｍｇ／εの低濃度とし、
且つサイトカイニンについても不存在若しくは３ｍｇ／
４２以下の低濃度とすべきである。
じオーキシンあるいはオーキシンとサイトカイニンを他
の添加物と共に含む増殖培地において増殖されるが、本
発明の実施においては、特に強い殺線虫力を有する培養
物を得るために、増殖培地におけるオーキシンの添加量
を０．０１ｍｇ／ １ないし１ｍｇ／εの低濃度とし、
且つサイトカイニンについても不存在若しくは３ｍｇ／
４２以下の低濃度とすべきである。
増殖培地におけるオーキシンの添加量及びサイトカイニ
ンの添加量が所定量より多くなると、培養物を抽出して
得られる殺線虫剤の効力が著しく低下する。
ンの添加量が所定量より多くなると、培養物を抽出して
得られる殺線虫剤の効力が著しく低下する。
なお、増殖培養の方法としては、寒天を含んだ固体培地
による静置培養、寒天を除いた液体培地による振盪培養
のいずれでも可能である。
による静置培養、寒天を除いた液体培地による振盪培養
のいずれでも可能である。
培養されたマリーゴールドの抽出工程は、乾燥したのち
、ｎ−ヘキサン、アセトン、アセトニトリル等の有機溶
媒を用いて抽出する。
、ｎ−ヘキサン、アセトン、アセトニトリル等の有機溶
媒を用いて抽出する。
例えば乾燥した培養物を軽く粉砕し、これを１０〜１ｏ
ｏ４ｒｊｌのｎ−ヘキサンに浸漬し、３０分ないし数時
間攪拌を行い、固形物を濾別すれば良い。
ｏ４ｒｊｌのｎ−ヘキサンに浸漬し、３０分ないし数時
間攪拌を行い、固形物を濾別すれば良い。
本発明殺線虫剤の使用に当っては、散布時に有機溶媒を
気化逸散させても良いが、予め抽出液から有機溶媒を除
去し、これに公知の増量剤を加えて固形剤とし、あるい
は水、乳化剤等を加えて水溶液ないし乳濁液とすること
ができる。
気化逸散させても良いが、予め抽出液から有機溶媒を除
去し、これに公知の増量剤を加えて固形剤とし、あるい
は水、乳化剤等を加えて水溶液ないし乳濁液とすること
ができる。
本発明殺線虫剤を高速液体クロマトグラフ法による分析
の結果、培養に用いたマリーゴールドの根の抽出液と酷
似しており、α−ターチェニルとその類縁物質を含むも
のであった。
の結果、培養に用いたマリーゴールドの根の抽出液と酷
似しており、α−ターチェニルとその類縁物質を含むも
のであった。
以下本発明方法の実施例及び効果について試験例に基づ
いて具体的に説明する。
いて具体的に説明する。
なお、これら試験例における殺線虫試験法は、２０〜５
０μｌの抽出液をスライドグラス上に落とし、溶媒を風
乾除去したのち、その上に脱イオン水中あるいは線虫培
養１Ｂ地中の同一種の線虫を２０〜１００匹置き、これ
を温室したシャーレ中に写し、２５゛Ｃの温度に保った
照明付インキュベーク−中に静置し、一定時間毎に顕微
鏡観察して、線虫の生存状態を判定したものである。
０μｌの抽出液をスライドグラス上に落とし、溶媒を風
乾除去したのち、その上に脱イオン水中あるいは線虫培
養１Ｂ地中の同一種の線虫を２０〜１００匹置き、これ
を温室したシャーレ中に写し、２５゛Ｃの温度に保った
照明付インキュベーク−中に静置し、一定時間毎に顕微
鏡観察して、線虫の生存状態を判定したものである。
実施例１及び比較例１
フレンチマリーゴールド（品種名：ボレロ）の発芽後２
週間経過した無菌苗の子葉を概略５鴫角の大きさに切り
、これをムラシゲ・スクーグの基本培地にシジ糖３重量
％、寒天０．８重量％、ナフタレン酢酸０．１ａ＋ｇ／
１ 、ベンジルアデニン０．１ｍｇ／ｌ！、を加え、
常法により滅菌したカルス化培地に置床した。この状態
で２５°Ｃの温度に保ち連続照明下でカルス誘導を行い
、１ケ月後に前記培養物をカルス化培地からベンジルア
デニンを除いた組成の増殖培地に継代し、同じ条件で再
び１ケ月培養し、増殖を行った。その後１ケ月間隔で２
回継代して増殖させた。
週間経過した無菌苗の子葉を概略５鴫角の大きさに切り
、これをムラシゲ・スクーグの基本培地にシジ糖３重量
％、寒天０．８重量％、ナフタレン酢酸０．１ａ＋ｇ／
１ 、ベンジルアデニン０．１ｍｇ／ｌ！、を加え、
常法により滅菌したカルス化培地に置床した。この状態
で２５°Ｃの温度に保ち連続照明下でカルス誘導を行い
、１ケ月後に前記培養物をカルス化培地からベンジルア
デニンを除いた組成の増殖培地に継代し、同じ条件で再
び１ケ月培養し、増殖を行った。その後１ケ月間隔で２
回継代して増殖させた。
このようにして得られた培養物は、濃緑色の非常に固い
カルスであり、１回当りの増殖によって生重量比で約１
５倍の増加が認められた。
カルスであり、１回当りの増殖によって生重量比で約１
５倍の増加が認められた。
次いで、この培養物を常温、無菌下で乾燥し、軽く砕き
、乾燥した培養物１ｇ当たりｎ−ヘキサンを５０＋＋＋
１の割合に混合し３０分間抽出を行い、固形物を濾別
して抽出液を得た。
、乾燥した培養物１ｇ当たりｎ−ヘキサンを５０＋＋＋
１の割合に混合し３０分間抽出を行い、固形物を濾別
して抽出液を得た。
このようにして得られた抽出液を用いて殺線虫試験を実
施した。
施した。
殺線虫試験にはキタネグサレ線虫（ＰｒａＬｙｌｅｎｃ
ｈｕｓ ｐｅｎｅｔｒａｎｓ）及びセノルハプディテス
エレガンス（ＣａｅｎｏｒｈａｂｄｉＬｉｓ ｅｌｅ
ｇａｎｓ以下Ｃ１ｅｌｅｇａｎｓと略記する）を用いた
。
ｈｕｓ ｐｅｎｅｔｒａｎｓ）及びセノルハプディテス
エレガンス（ＣａｅｎｏｒｈａｂｄｉＬｉｓ ｅｌｅ
ｇａｎｓ以下Ｃ１ｅｌｅｇａｎｓと略記する）を用いた
。
キタネグサレ線虫（Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ ｐｅｎ
ｅｔｒａｎｓ）を用いた試験は以下の通りである。すな
わち、抽出液及びその希釈液並びにコントロールとして
純ｎ−ヘキサンを夫々５０μｌずつ別のスライドグラス
上に落として風乾させ、その上にルーサンカルスに°で
培養したキタネグサレ線虫（Ｐｒａｔｙｌｅｎｃ）＋ｕ
ｓｐｅｎｅＬｒａｎｓ ）をベルマン法で脱イオン水中
に集めた液を各々５０μｌ（この中に線虫は２０〜４０
匹いる。）落とし、そのスライドグラスを、温室にした
シャーレの中に置き、２５°Ｃの照明付インキュベータ
ー中８時間静置した後、顕微鏡観察を行い、線虫の生死
を判定した。
ｅｔｒａｎｓ）を用いた試験は以下の通りである。すな
わち、抽出液及びその希釈液並びにコントロールとして
純ｎ−ヘキサンを夫々５０μｌずつ別のスライドグラス
上に落として風乾させ、その上にルーサンカルスに°で
培養したキタネグサレ線虫（Ｐｒａｔｙｌｅｎｃ）＋ｕ
ｓｐｅｎｅＬｒａｎｓ ）をベルマン法で脱イオン水中
に集めた液を各々５０μｌ（この中に線虫は２０〜４０
匹いる。）落とし、そのスライドグラスを、温室にした
シャーレの中に置き、２５°Ｃの照明付インキュベータ
ー中８時間静置した後、顕微鏡観察を行い、線虫の生死
を判定した。
Ｃ，ｅｌｅｇａｎｓを用いた試験も概略同様であり、抽
出物及びその希釈液並びにコントロールとして純ｎ−へ
キサンを各々２０ｔｔ１．ずつ別のスライドグラス上に
落として風乾し、その上に、ＮＧ培地にて大腸菌を餌と
して培養したＣ、ｅｌｅｇａｎｓを２０〜１００匹移し
、この上にＮＧ培地を３０μ！加え、そのスライドグラ
スを温室にしたシャーレの中に置き、２５°Ｃの照明付
インキュベーター中で８時間静置したのち、顕微鏡観察
を行い、線虫の生死を判定した。
出物及びその希釈液並びにコントロールとして純ｎ−へ
キサンを各々２０ｔｔ１．ずつ別のスライドグラス上に
落として風乾し、その上に、ＮＧ培地にて大腸菌を餌と
して培養したＣ、ｅｌｅｇａｎｓを２０〜１００匹移し
、この上にＮＧ培地を３０μ！加え、そのスライドグラ
スを温室にしたシャーレの中に置き、２５°Ｃの照明付
インキュベーター中で８時間静置したのち、顕微鏡観察
を行い、線虫の生死を判定した。
なお、比較例として、天然栽培法によるフレンチマリー
ゴールド（品種名：ボレロ）の根を乾燥し、前記と同様
の抽出処理を行って得た抽出液及びその希釈液について
、Ｃ，ｅｌｅｇａｎｓを用いた殺線虫試験を行った。
ゴールド（品種名：ボレロ）の根を乾燥し、前記と同様
の抽出処理を行って得た抽出液及びその希釈液について
、Ｃ，ｅｌｅｇａｎｓを用いた殺線虫試験を行った。
これらの試験結果は第１表に示したとおりであり、本発
明方法によって得られた抽出液は天然栽培の根から得ら
れた抽出液に匹敵する強い殺線虫力が認められた。
明方法によって得られた抽出液は天然栽培の根から得ら
れた抽出液に匹敵する強い殺線虫力が認められた。
また本実施例及び比較例の抽出液を夫々高速液体クロマ
トグラフ法によりＰｌｕｋａ社製のα−ターチェニルを
用いて分析した結果、本実施例の抽出？＆ハ０．５μｇ
７ｍｌ！の割合でα−ターチェニルヲ含有し、比較例の
抽出液には０．４μｇ／ｍｅのα−ターチェニルが含ま
れていた。
トグラフ法によりＰｌｕｋａ社製のα−ターチェニルを
用いて分析した結果、本実施例の抽出？＆ハ０．５μｇ
７ｍｌ！の割合でα−ターチェニルヲ含有し、比較例の
抽出液には０．４μｇ／ｍｅのα−ターチェニルが含ま
れていた。
比較例２及び３
実施例１においてフレンチマリーゴールドの子葉を、ム
ラシゲ・スクーグの基本培地にショｔ１１３重量％、寒
天０．８重量％、ナフタレン酢酸３彌ｇ／！、ベンジル
アデニン３ｍｇ／／！を加えたカルス化培地でカルス誘
導を行い、カルス培地と成分及び濃度が同じである増殖
培地を用いて同様の培養処理を行い、その培養物を前記
と同じように抽出処理してキタネグサレ線虫に対する殺
線虫試験を行った。（比較例２） また、カルス化培地及び増殖培地におけるナフタレン酢
酸を３ｎ＋ｇ／ｌ、ベンジルアデニンを１０ｍｇ／ｌに
して同様の培養を行い、このようにして得た培養物の抽
出液についてＣ，ｅｌｅｇａｒｌｓに対する殺線虫試験
を行った。（比較例３） これらの試験結果は第２表に示したとおりであり、オー
キシン濃度が高い増殖培地で組織培養したマリーゴール
ドから得られる抽出液の殺線虫力は′極め°ζ弱いもの
であった。
ラシゲ・スクーグの基本培地にショｔ１１３重量％、寒
天０．８重量％、ナフタレン酢酸３彌ｇ／！、ベンジル
アデニン３ｍｇ／／！を加えたカルス化培地でカルス誘
導を行い、カルス培地と成分及び濃度が同じである増殖
培地を用いて同様の培養処理を行い、その培養物を前記
と同じように抽出処理してキタネグサレ線虫に対する殺
線虫試験を行った。（比較例２） また、カルス化培地及び増殖培地におけるナフタレン酢
酸を３ｎ＋ｇ／ｌ、ベンジルアデニンを１０ｍｇ／ｌに
して同様の培養を行い、このようにして得た培養物の抽
出液についてＣ，ｅｌｅｇａｒｌｓに対する殺線虫試験
を行った。（比較例３） これらの試験結果は第２表に示したとおりであり、オー
キシン濃度が高い増殖培地で組織培養したマリーゴール
ドから得られる抽出液の殺線虫力は′極め°ζ弱いもの
であった。
実施例２ないし４及び比較例４
フレンチマリーゴールド（品種名：ボレロ）の発芽後２
週間経過した子葉（実施例２）を採取し、常法に従い７
０％エタノール及びアンチホルミン液で殺菌後、よく滅
菌精製水で水洗し、これをムラシゲ・スクーグの基本培
地に、シヨ抛３重槽％、寒天０．８重量％、ナフタレン
酢酸１ｍｇ／ｊ！を加え、常法により滅菌したカルス化
培地に置床してカルスを誘導し、また、同じく前記マリ
ーゴールドの根（実施例３）及び蕾（実施例４）につい
ても同様の条件によってカルスを誘導した。
週間経過した子葉（実施例２）を採取し、常法に従い７
０％エタノール及びアンチホルミン液で殺菌後、よく滅
菌精製水で水洗し、これをムラシゲ・スクーグの基本培
地に、シヨ抛３重槽％、寒天０．８重量％、ナフタレン
酢酸１ｍｇ／ｊ！を加え、常法により滅菌したカルス化
培地に置床してカルスを誘導し、また、同じく前記マリ
ーゴールドの根（実施例３）及び蕾（実施例４）につい
ても同様の条件によってカルスを誘導した。
培養はいずれも２５°Ｃの温度で連続照明下にて行い、
１ケ月後に培養物を前記と同組成の増殖培地に継代し、
さらに同一培養条件下で１ケ月間増殖を行い、さらに１
ケ月間隔で２回継代して増殖させ、このようにして得た
培養物は、いずれも黄緑色から褐色のカルスに多数の短
い根の分化を起ごしたものであったが、これを常温、無
菌下で乾燥し、軽く砕き、１μ当たり５０ｎ＋ Ｉｔの
ｎ−へ；トサンを加えて３０分間抽出を行い、固形物を
濾別して抽出液を得た。
１ケ月後に培養物を前記と同組成の増殖培地に継代し、
さらに同一培養条件下で１ケ月間増殖を行い、さらに１
ケ月間隔で２回継代して増殖させ、このようにして得た
培養物は、いずれも黄緑色から褐色のカルスに多数の短
い根の分化を起ごしたものであったが、これを常温、無
菌下で乾燥し、軽く砕き、１μ当たり５０ｎ＋ Ｉｔの
ｎ−へ；トサンを加えて３０分間抽出を行い、固形物を
濾別して抽出液を得た。
高速液体クロマトグラフ法による分析の結果、いずれの
実施例における抽出液も０．０４μｇ７ｍ１２のα−タ
ーチェニルを含有していた。
実施例における抽出液も０．０４μｇ７ｍ１２のα−タ
ーチェニルを含有していた。
従って、比較例４として合成されたα−ターチェニル（
Ｆｌｕｋａ社製）をｎ−へキサン溶液に０．０４μｇ／
ｍｌの割合で加えた試料をつくり、前記各抽出液と共に
殺線虫試験を行った。
Ｆｌｕｋａ社製）をｎ−へキサン溶液に０．０４μｇ／
ｍｌの割合で加えた試料をつくり、前記各抽出液と共に
殺線虫試験を行った。
これらの試験結果は第３表に示したとおりであり、マリ
ーゴールドはいずれの組織部位がら組織培養したものも
同じように殺線虫性を有しており、且つα−ターチェニ
ルの濃度が同じであっても、マリーゴールド培養物から
の抽出液は合成α−ターチェニルを含むものに較べて明
らかに強い殺線虫を有していることがわかった。
ーゴールドはいずれの組織部位がら組織培養したものも
同じように殺線虫性を有しており、且つα−ターチェニ
ルの濃度が同じであっても、マリーゴールド培養物から
の抽出液は合成α−ターチェニルを含むものに較べて明
らかに強い殺線虫を有していることがわかった。
第 ３ 表 （生存率二％）
実施例５及び６
フレンチマリーゴールド〔品種名：ボレロ（実施例５）
〕及びアフリカンマリーゴールド〔品種名ニオレンジハ
ワイ（実施例６）〕の発芽後２週間経過した子葉を採取
し、エタノール及びアンチホルミン液で殺菌したのち滅
菌精製水で水洗し、これらをムラシゲ・スクーグの基本
培地にシヨ糖３重量％、寒天０．８重量％、ナフタレン
酢酸１ｍｇ／２．ベンジルアデニン３ｍｙ、／ｌを加え
、常法により滅菌したカルス化培地に置床してカルスを
誘導した。カルス化培養はどちらも２５°Ｃの温度で連
続照明を行い、１ケ月後に得られた培養物を前記と同一
組成の増殖培地に継代し、さらに同一培養条件で１ケ月
間増殖を行った。その後さらにもう一度同一組成の培地
及び同一条件で１ケ月間増殖を行った。
〕及びアフリカンマリーゴールド〔品種名ニオレンジハ
ワイ（実施例６）〕の発芽後２週間経過した子葉を採取
し、エタノール及びアンチホルミン液で殺菌したのち滅
菌精製水で水洗し、これらをムラシゲ・スクーグの基本
培地にシヨ糖３重量％、寒天０．８重量％、ナフタレン
酢酸１ｍｇ／２．ベンジルアデニン３ｍｙ、／ｌを加え
、常法により滅菌したカルス化培地に置床してカルスを
誘導した。カルス化培養はどちらも２５°Ｃの温度で連
続照明を行い、１ケ月後に得られた培養物を前記と同一
組成の増殖培地に継代し、さらに同一培養条件で１ケ月
間増殖を行った。その後さらにもう一度同一組成の培地
及び同一条件で１ケ月間増殖を行った。
このようにして得られた培養物は、いずれも黄緑色のカ
ルスであり、また１回当りの増殖によって生重量比で約
２０倍の増加があった。
ルスであり、また１回当りの増殖によって生重量比で約
２０倍の増加があった。
前記培養物を常温、無菌下で乾燥し、軽く砕いたのぢ、
１ｇ当たり５０ｒｓ １２の割合のｎ−ヘキサンと混合
し、３０分間抽出を行 い、固形物を濾別して抽出液を得た。
１ｇ当たり５０ｒｓ １２の割合のｎ−ヘキサンと混合
し、３０分間抽出を行 い、固形物を濾別して抽出液を得た。
このようにして得られた抽出液及びその希釈液を用いて
前記実施例と同様にして殺線虫試験を行った。
前記実施例と同様にして殺線虫試験を行った。
試験の結果は第４表に示したとおりであり、フレンチマ
リーゴールド及びアフリカンマリ−のいずれもその培養
物から得られた抽出液は優れた殺第 ４ 表 （生存率
：％） 実施例７及び８ フレンチマリーゴールド（品種名：ボレロ）の発芽後２
週間目の子葉を採取し、常法に従って７０％エタノール
及びアンチホルミン液で殺菌し、よく滅菌精製水で水洗
し、これをムラシゲ・スクーグの基本培地にシｇ糖３重
四％、寒天０．８重量％、インドール酢Ｍ ｌ ｖａｇ
／ ｌ 、ベンジルアデニン１ｔａｇ ／−４２を加え
常法により滅菌した培地（実施例７）及びムラシゲ・ス
クーグの基本培地にシヨ糖３重量％、寒天０．８重量％
、ナフタレン酢酸１ ｍｇ／！、カイネチン１ｍｇ／ｌ
を加え常法により滅菌した培地（実施例８）に置床し、
カルスを誘導した。
リーゴールド及びアフリカンマリ−のいずれもその培養
物から得られた抽出液は優れた殺第 ４ 表 （生存率
：％） 実施例７及び８ フレンチマリーゴールド（品種名：ボレロ）の発芽後２
週間目の子葉を採取し、常法に従って７０％エタノール
及びアンチホルミン液で殺菌し、よく滅菌精製水で水洗
し、これをムラシゲ・スクーグの基本培地にシｇ糖３重
四％、寒天０．８重量％、インドール酢Ｍ ｌ ｖａｇ
／ ｌ 、ベンジルアデニン１ｔａｇ ／−４２を加え
常法により滅菌した培地（実施例７）及びムラシゲ・ス
クーグの基本培地にシヨ糖３重量％、寒天０．８重量％
、ナフタレン酢酸１ ｍｇ／！、カイネチン１ｍｇ／ｌ
を加え常法により滅菌した培地（実施例８）に置床し、
カルスを誘導した。
培養はどちらも２５°Ｃの温度で連続照明を行い、１ケ
月後に得られた培養物をそれぞれ前記と同じ組成の培地
に継代し、同一培養条件でさらに１ケ月間増殖を行い、
その後１ケ月間隔で２回継代して増殖させた。
月後に得られた培養物をそれぞれ前記と同じ組成の培地
に継代し、同一培養条件でさらに１ケ月間増殖を行い、
その後１ケ月間隔で２回継代して増殖させた。
このようにして得られた培養物は、どちらも黄゛・緑色
のカルスであり、これを常温、無菌下で乾燥、し、軽く
砕いたのち、１ｇ当たり５０ｍ ｌのｎ−ヘキサノを加
えて３０分間抽出を行い、固形物を濾別し゛ζ抽出液を
得た。前記抽出液及びその希釈液を用いて実施例１に示
したと同じ方法で殺線虫試験を行った。
のカルスであり、これを常温、無菌下で乾燥、し、軽く
砕いたのち、１ｇ当たり５０ｍ ｌのｎ−ヘキサノを加
えて３０分間抽出を行い、固形物を濾別し゛ζ抽出液を
得た。前記抽出液及びその希釈液を用いて実施例１に示
したと同じ方法で殺線虫試験を行った。
試験結果は第５表に示したとおりであり、オーキシン及
びサイトカイニンの種類に関係なく、これらの培養物の
抽出液には優れた殺線虫性が認められた。
びサイトカイニンの種類に関係なく、これらの培養物の
抽出液には優れた殺線虫性が認められた。
第 ５ 表 （生存率二％）
Claims (3)
- （１）マリーゴールドをオーキシンあるいはオーキシン
とサイトカイニンを含有するカルス化培地でカルス誘導
したのち、オーキシンを０．０１ｍｇ／ｌないし１ｍｇ
／ｌの低い濃度に規制した増殖培地を用いて組織培養し
、前記処理によって得た培養物を有機溶媒によって抽出
することを特徴とする殺線虫剤の製造法。 - （２）マリーゴールドの種類がフレンチマリーゴールド
である特許請求の範囲（１）に記載の方法。 - （３）マリーゴールドの種類がアフリカンマリーゴール
ドである特許請求の範囲（１）に記載の方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP31152187A JPH01151504A (ja) | 1987-12-08 | 1987-12-08 | 殺線虫剤の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP31152187A JPH01151504A (ja) | 1987-12-08 | 1987-12-08 | 殺線虫剤の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01151504A true JPH01151504A (ja) | 1989-06-14 |
| JPH0581561B2 JPH0581561B2 (ja) | 1993-11-15 |
Family
ID=18018241
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP31152187A Granted JPH01151504A (ja) | 1987-12-08 | 1987-12-08 | 殺線虫剤の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH01151504A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2311009A (en) * | 1996-03-06 | 1997-09-17 | Mohd Taufiq Khan | Pharmaceutical compositions containing extracts of Tagetes (Marigolds) |
| US10478782B2 (en) | 2015-04-28 | 2019-11-19 | Toray Industries, Inc. | Composite hollow fiber membrane and method for producing same |
-
1987
- 1987-12-08 JP JP31152187A patent/JPH01151504A/ja active Granted
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2311009A (en) * | 1996-03-06 | 1997-09-17 | Mohd Taufiq Khan | Pharmaceutical compositions containing extracts of Tagetes (Marigolds) |
| GB2311009B (en) * | 1996-03-06 | 2000-01-26 | Mohd Taufiq Khan | Pharmaceutical compositions containing tagetes plants |
| US10478782B2 (en) | 2015-04-28 | 2019-11-19 | Toray Industries, Inc. | Composite hollow fiber membrane and method for producing same |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0581561B2 (ja) | 1993-11-15 |
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