JP7690486B2 - 芳香族ビニル系誘導体の結晶形及びその製造方法と使用 - Google Patents

Description

発明の詳細な説明

本出願は、出願日が２０２０年３月１７日である中国特許出願ＣＮ２０２０１０１８５５９７７の優先権を主張する。本出願は、当該中国特許出願の全文を引用する。
［技術分野］
本発明は、芳香族ビニル系誘導体の結晶形及びその製造方法と使用に関する。

［背景技術］
ヒトのプログラム細胞死リガンド１（ＰＤ－Ｌ１）は、Ｂ７－Ｈ１とも呼ばれ、Ｂ７ファミリーの一員に属し、末梢組織や造血細胞に広く分布している。ＰＤ－Ｌ１ｑの全長ｃＤＮＡは８７０ｂｐであり、２９０個のアミノ酸を含むＩ型膜貫通タンパク質をコードし、ＰＤ－Ｌ１は、主に成熟ＣＤ４Ｔ細胞、ＣＤ８Ｔ細胞、Ｂ細胞、単核細胞、樹状細胞（Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ Ｃｅｌｌｓ、ＤＣｓ）、マクロファージなどの造血細胞、及び内皮細胞、膵島細胞、マスト細胞等のいくつかの非造血系細胞の膜表面で発現している。その中でもＰＤ－Ｌ１は例えば肺がん、胃がん、多発性骨髄腫、メラノーマと乳がんなどの様々な腫瘍で高発現している。プログラム細胞死タンパク質１（Ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ Ｄｅａｔｈ－１、ＰＤ－１）はＰＤ－Ｌ１の主な受容体であり、主にＴ細胞、Ｂ細胞とＮＫ細胞などの免疫関連細胞に分布し、自己免疫疾患、腫瘍、感染症、臓器移植、アレルギー、免疫特権などの免疫応答プロセスに重要な役割を果たしている。

ＰＤ－Ｌ１は、その受容体であるプログラム細胞死タンパク質１と相互作用することにより、Ｔ細胞の活性化を阻害し、あるいは成熟Ｔ細胞のアポトーシスを誘導して、免疫反応を阻害する。腫瘍の発生過程で、がん細胞はＰＤ－Ｌ１の発現を上昇させることでＴ細胞のアポトーシスを誘導し、免疫系がそれに対するクリアランスを回避する。ＰＤ－Ｌ１標的抗体薬物は、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１相互作用を特異的にブロックすることにより、腫瘍の免疫寛容を破壊し、腫瘍細胞に対する腫瘍特異的Ｔ細胞の殺傷機能を回復させ、腫瘍のクリアランスを達成することができる。

ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１は負の免疫調節の役割を果たしている。ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１シグナルはＴ細胞の活性化と増殖を阻害し、同時にサイトカインのインターロイキン２（ＩＬ２）、インターフェロンγ、ＩＬ－１０の分泌も減少させる（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００２，３２（３），６３４－６４３．）。また、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１シグナルはＢ細胞に対する免疫機能がＴ細胞に似て、ＰＤ－１がＢ細胞抗原受容体と架橋した後、ＰＤ－１の細胞質領域がプロテインチロシナーゼ２結合部位を含むチロシナーゼと相互作用することにより、最終的にＢ細胞の活性化を阻害する。腫瘍の免疫逃避における免疫陰性調節因子ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１の役割は、ますます注目されている。腫瘍微小環境における腫瘍細胞表面のＰＤ－Ｌ１が増加すると、同時に活性化Ｔ細胞上のＰＤ－１と結合し、負の調節シグナルを伝達して、腫瘍抗原特異的Ｔ細胞のアポトーシス又は免疫不全をもたらし、それによって免疫反応を阻害し、腫瘍細胞の逃避を促進することが多数の研究により証明された。

現在市販されているＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１抗体阻害剤には、ＢＭＳ社のＮｉｖｏｌｕｍａｂ（２０１４）、Ｍｅｒｃｋ社のＬａｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ（２０１４）、Ｊｕｎｓｈｉ Ｂｉｏ社のＴｏｒｉｐａｌｉｍａｂ、Ｉｎｎｏｖｅｎｔ社のＳｉｎｔｉｌｉｍａｂ、Ｒｏｃｈｅ社のＡｔｅｚｏｌｉｚｕｍａｂ、及びＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ社のＤｕｒｖａｌｕｍａｂがある。生物高分子と比較して、低分子化合物は細胞膜を通過し、細胞内の標的に作用することができ、低分子化合物は化学修飾の後、しばしばより優れたバイオアベイラビリティとコンプライアンスを持ち、消化管での酵素の分解不活性を効果的に回避する。

現在、使いやすく経口で有効な低分子ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１阻害剤はまだ市販されていなく、特許ＣＮ１０９９８８１４４Ａは、芳香族エチレン系ＰＤ－Ｌ１低分子化合物を開示し、化学構造式が

であり、それはＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１の結合に対して強力な効果を有し、腫瘍細胞に対する腫瘍特異的Ｔ細胞の殺傷機能を回復させ、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１関連癌等に関連する疾患を効果的に緩和及び治療することができる。

キナーゼに対する優れた阻害活性に加えて、医薬品有効成分の結晶構造が薬物の化学的安定性に影響を与えることが多く、結晶形、製造方法、保存条件によって化合物の結晶構造が変化することがあり、時には他の形の結晶形の生成を伴うことがある。一般に、非晶質の医薬品は規則的な結晶構造を持たず、製品の安定性が低い、結晶化が細かい、ケーキングしやすい、流動性が悪いなどの欠点を持つことが多く、これらの違いが生産のスケールアップを困難にしていることが多い。また、結晶形は、薬物の生産、加工、貯蔵、輸送時の安定性と治療時でのバイオアベイラビリティに決定的な影響を与え、さらに、商業的に可能な製造方法を得る観点又は活性化合物を含む医薬組成物を製造する観点から、活性成分の化学的安定性、固体安定性及び保存期間はすべて重要な要素であり、したがって、望ましい性質を持つ薬物の適切な形態を提供することは、薬物の製造、貯蔵のために非常に重要である。

［発明の概要］
本発明は、芳香族ビニル系誘導体の結晶形及びその製造方法と使用を提供する。本発明の結晶形は、安定性がよく、吸湿しにくく、製造が容易であり、薬物の最適化と開発に重要な価値を有する。

本発明は、２θ角で表される粉末Ｘ線回折パターンが、９．９２３±０．２°、１０．８８３±０．２°及び１７．３５７±０．２°において特徴的なピークを有する式Ｉで表される化合物のＡ型結晶を提供する。

又は、３．９７９±０．２°、９．９２３±０．２°、１０．８８３±０．２°、１７．３５７±０．２°、１８．６０７±０．２°及び１９．２９４±０．２°において特徴的なピークを有する。

又は、３．９７９±０．２°、４．９９１±０．２°、９．９２３±０．２°、１０．８８３±０．２°、１４．２５１±０．２°、１６．２１０±０．２°、１７．３５７±０．２°、１８．６０７±０．２°、１９．２９４±０．２°、１９．５９４±０．２°及び２０．７９２±０．２°において特徴的なピークを有する。

又は、３．９７９±０．２°、４．９９１±０．２°、７．１１３±０．２°、８．１３５±０．２°、９．９２３±０．２°、１０．８８３±０．２°、１１．６１３±０．２°、１４．２５１±０．２°、１４．８６６±０．２°、１６．２１０±０．２°、１７．３５７±０．２°、１８．６０７±０．２°、１９．２９４±０．２°、１９．５９４±０．２°、２０．７９２±０．２°、２１．２７２±０．２°、２４．４３７±０．２°、２５．２５７±０．２°、２６．２２９５±０．２°、２７．８７０±０．２°、２８．６３１±０．２°、２９．１２６±０．２°、２９．９４３±０．２°において特徴的なピークを有する。

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記Ａ型結晶は、２θ角で表される粉末Ｘ線回折パターンにおける２θ値が表１に示される通りである。

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記Ａ型結晶の偏光顕微鏡分析において、結晶形状は好ましくは粒状又は棒状であり、粒子径は好ましくは１０～１００μｍであり、前記Ａ型結晶の偏光顕微鏡分析は、以下の条件で行うことができる：前記顕微鏡は好ましくは１０倍対物レンズであり、前記顕微鏡は好ましくは交差偏光子である。前記Ａ型結晶の偏光顕微鏡写真は好ましくは、図１に示される通りである。

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記Ａ型結晶の示差走査熱量分析において、２４７℃に吸熱ピークを有し、その融解熱は好ましくは１１８．０Ｊ／ｇであり、前記Ａ型結晶の示差走査熱量分析は、以下の条件で行うことができる：好ましくは非密閉アルミトレイで行われ、好ましくは窒素ガス流（例えば流速５０ｍＬ／分の窒素ガス流）で行われ、好ましくは２５℃において平衡され、好ましくは１０℃／分の加熱速度で昇温され、好ましくは２５℃から３００℃までに加熱される。前記Ａ型結晶の示差走査熱量分析パターン（ＤＳＣ）は好ましくは図２に示される通りである。

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記Ａ型結晶の熱重量分析において、試料は２６．７６℃から１１９．９７℃までの重量損失はわずか０．１４４７％であり、前記「％」は重量パーセンテージであり、前記Ａ型結晶の熱重量分析は、以下の条件下で行うことができる：好ましくは白金サンプルパン中で行われ、好ましくは窒素ガス流（例えば流速６０ｍＬ／分の窒素ガス流）中で行われ、好ましくは１０℃／分の加熱速度で昇温され、好ましくは２５℃から３００℃までに加熱される。前記Ａ型結晶の熱重量分析（ＴＧＡ）パターンは好ましくは図３に示される通りである。

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記Ａ型結晶のＸ線回折分析において、前記Ａ型結晶のＸ線回折分析は以下の条件で行うことができる：好ましくはＣｕＫの光源で行われ、好ましくはＸ線強度が４０ＫＶ／４０ｍＡであり、好ましくはスキャンモードがＴｈｅｔａ－Ｔｈｅｔａであり、好ましくは角度範囲が２°～４０°（例えば、４°～４０°）であり、好ましくはステップサイズが０．０５°であり、好ましくはスキャン速度が０．５秒／ステップである。前記Ａ型結晶の粉末Ｘ線回折パターン（ＸＲＰＤ）は好ましくは図４に示される通りである。

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記Ａ型結晶の動的水分吸着分析において、湿度８０％ＲＨでの吸湿重量増加は０．３１０％であり、湿度９５％ＲＨでの吸湿重量増加は０．４０９％であり、Ａ型結晶がわずかな吸湿性を有していることを示しており、前記Ａ型結晶の動的水分吸着分析は以下の条件で行うことができる：好ましくは温度２５℃で行われ、好ましくは湿度０％ＲＨで６０分間間乾燥された後で行われる。前記Ａ型結晶の動的水分吸着分析パターン（ＤＶＳ）は好ましくは図５に示される通りである。

本発明は、２θ角で表される粉末Ｘ線回折パターンが、３．４２４±０．２°、６．５７６±０．２°及び１９．２９７±０．２°において特徴的なピークを有する式Ｉで表される化合物のＢ型結晶を提供する。

又は、３．４２４±０．２°、６．５７６±０．２°、１８．２１７±０．２°、１９．２９７±０．２°、２０．９０１±０．２°及び２６．３７９±０．２°において特徴的なピークを有する。

又は、３．４２４±０．２°、６．５７６±０．２°、１４．４６７±０．２°、１６．４０６±０．２°、１７．５６７±０．２°、１８．２１７±０．２°、１９．２９７±０．２°、２０．５５７±０．２°、２０．９０１±０．２°、２２．４６０±０．２°、２５．０８４±０．２°、２５．８７８±０．２°、２６．３７９±０．２°及び２８．９８３±０．２°において特徴的なピークを有する。

又は、３．４２４±０．２°、６．５７６±０．２°、９．７３２±０．２°、１１．３０４±０．２°、１２．９０５±０．２°、１３．９１８±０．２°、１４．４６７±０．２°、１６．４０６±０．２°、１７．５６７±０．２°、１８．２１７±０．２°、１９．２９７±０．２°、２０．５５７±０．２°、２０．９０１±０．２°、２２．４６０±０．２°、２３．８７２±０．２°、２５．０８４±０．２°、２５．８７８±０．２°、２６．３７９±０．２°、２８．９８３±０．２°、２９．５３１±０．２°、３０．４５９±０．２°、３２．１７１±０．２°、３４．２９７±０．２°、３７．６７６±０．２°及び３８．９０２±０．２°において特徴的なピークを有する。

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記Ｂ型結晶は、２θ角で表される粉末Ｘ線回折パターンにおける２θ値が表２に示される通りである。

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記Ｂ型結晶のＸ線回折分析において、前記Ｂ型結晶のＸ線回折分析は以下の条件で行うことができる：好ましくはＣｕＫの光源で行われ、好ましくはＸ線強度が４０ＫＶ／４０ｍＡであり、好ましくはスキャンモードがＴｈｅｔａ－Ｔｈｅｔａであり、好ましくは角度範囲が２°～４０°（例えば、４°～４０°）であり、好ましくはステップサイズが０．０５°であり、好ましくはスキャン速度が０．５秒／ステップである。前記Ｂ型結晶の粉末Ｘ線回折パターン（ＸＲＰＤ）は好ましくは図６に示される通りである。

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記Ｂ型結晶の示差走査熱分析において、２４３℃に吸熱ピークを有し、その融解熱は好ましくは９３．７３Ｊ／ｇであり、前記Ｂ型結晶の示差走査熱分析は、以下の条件で行うことができる：好ましくは非密閉アルミトレイで行われ、好ましくは窒素ガス流（例えば流量５０ｍＬ／ｍｉｎの窒素ガス流）で行われ、好ましくは２５℃において平衡され、好ましくは１０℃／ｍｉｎの加熱速度で昇温され、好ましくは２５℃から３００℃までに加熱される。前記Ｂ型結晶の示差走査熱量分析パターン（ＤＳＣ）は好ましくは図７に示される通りである。

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記Ｂ型結晶の熱重量分析において、２５．３℃から９２．５℃までに加熱されると５．２％の重量損失があり、前記「％」は重量パーセンテージであり、前記Ｂ型結晶の熱重量分析は、以下の条件下で行われることができる：好ましくは白金サンプルパン中で行われ、好ましくは窒素ガス流（例えば流量６０ｍＬ／分の窒素ガス流）中で行われ、好ましくは１０℃／分の加熱速度で昇温し、好ましくは２５℃から３００℃までに加熱される。前記Ｂ型結晶の熱重量分析（ＴＧＡ）パターンは好ましくは図８に示される通りである。

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記Ｂ型結晶の動的水分吸着分析において、相対湿度（ＲＨ）０％から９５％ＲＨまでの試料の重量増加は７．２３５％であり、Ｂ型結晶が吸湿性を有することを示しており、前記Ｂ型結晶の動的水分吸着分析は以下の条件で行われることができる：好ましくは温度２５℃で行われ、好ましくは湿度０％ＲＨで６０分間乾燥させた後で行われる。前記Ｂ型結晶の動的水分吸着分析（ＤＶＳ）は好ましくは図９に示される通りである。

本発明は、２θ角で表される粉末Ｘ線回折パターンが、６．２５０±０．２°、１８．４５８±０．２°及び１９．３０２±０．２°において特徴的なピークを有する式Ｉで表される化合物のＣ型結晶を提供する。

又は、６．２５０±０．２°、８．７７９±０．２°、１３．７２０±０．２°、１８．４５８±０．２°及び１９．３０２±０．２°において特徴的なピークを有する。
又は、６．２５０±０．２°、８．７７９±０．２°、１２．６３５±０．２°、１３．７２０±０．２°、１６．５２５±０．２°、１８．４５８±０．２°及び１９．３０２±０．２°において特徴的なピークを有する。

又は、６．２５０±０．２°、６．９７９±０．２°、８．７７９±０．２°、１２．６３５±０．２°、１３．７２０±０．２°、１６．５２５±０．２°、１８．４５８±０．２°、１９．３０２±０．２°、２０．８５２±０．２°、２２．３４５±０．２°、２４．７７２±０．２°、２５．２３０±０．２°、２７．２８５±０．２°において特徴的なピークを有する。

又は、６．２５０±０．２°、６．９７９±０．２°、８．７７９±０．２°、１２．６３５±０．２°、１３．７２０±０．２°、１５．２８５±０．２°、１６．５２５±０．２°、１８．４５８±０．２°、１９．３０２±０．２°、２０．８５２±０．２°、２２．３４５±０．２°、２４．７７２±０．２°、２５．２３０±０．２°、２５．９９６±０．２°、２７．２８５±０．２°、２８．３０３±０．２°、２８．８２９±０．２°、２９．６９９±０．２°、３０．７０３±０．２°、３３．１３３±０．２°、３４．６５５±０．２°、３６．８２９±０．２°、３７．９６７±０．２°において特徴的なピークを有する。

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記Ｃ型結晶は、２θ角で表される粉末Ｘ線回折パターンにおける２θ値が表３に示される通りである。

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記Ｃ型結晶のＸ線回折分析において、前記Ｃ型結晶の粉末Ｘ線回折パターン（ＸＲＰＤ）は、好ましくは図１０に示される通りである。
本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記Ｃ型結晶の示差走査熱分析において、２４３℃に吸熱ピークを有し、融解熱は好ましくは９９．３３Ｊ／ｇであり、前記Ｃ型結晶の示差走査熱分析は、以下の条件で行われることができる：好ましくは非密閉アルミトレイで行われ、好ましくは窒素ガス流（例えば流量５０ｍＬ／分の窒素ガス流）で行われ、好ましくは２５℃において平衡され、好ましくは１０℃／分の昇温速度で昇温され、好ましくは２５℃から３００℃までに加熱される。前記Ｃ型結晶の示差走査熱量分析パターン（ＤＳＣ）は好ましくは図１１に示される通りである。

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、Ｃ型結晶の熱重量分析において、２４．０℃から５８．０℃までに加熱されると０．６２％の重量損失があり、５８．０℃から１６２．３℃までに加熱されると２．５％の重量損失があり、前記「％」は重量パーセンテージであり、前記Ｃ型結晶の熱重量分析は、以下の条件下で行われることができる：好ましくは白金サンプルパン中で行われ、好ましくは窒素ガス流（例えば流量６０ｍＬ／分の窒素ガス流）中で行われ、好ましくは１０℃／分の昇温速度で昇温され、好ましくは２５℃から３００℃までに加熱される。前記Ｃ型結晶の熱重量分析（ＴＧＡ）パターンは好ましくは図１２に示される通りである。

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記Ｃ型結晶の動的水分吸着分析において、０％ＲＨから９５％ＲＨまでの試料の重量増加は４．７６７％であり、Ｃ型結晶が吸湿性を有していることを示しており、前記Ｃ型結晶の動的水分吸着分析は以下の条件で行われることができる：好ましくは温度２５℃で行われ、好ましくは湿度０％ＲＨで６０分間乾燥させた後で行われる。前記Ｃ型結晶の動的水分吸着分析パターン（ＤＶＳ）は好ましくは図１３に示される通りである。

本発明において、前記粉末Ｘ線回折スペクトルに使用されスペクトルはＫαスペクトルである。
本発明において、前記粉末Ｘ線回折スペクトルに使用されるターゲットの種類はＣｕターゲットである。

また、本発明は、式Ｉで表される化合物のＡ型結晶の製造方法を提供し、下記の溶媒において、式Ｉで表される化合物を結晶化させるステップを含み、前記結晶化法は懸濁液平衡法、溶液加熱－徐冷法又は反溶媒法であり、前記溶媒はエタノールであり、前記結晶化法が反溶媒法である場合、反溶媒はアルカン系溶媒である。

前記Ａ型結晶の製造方法において、前記結晶化法が反溶媒法である場合、前記アルカン系溶媒は、当該技術分野における通常のアルカン系溶媒であってもよく、前記アルカン系溶媒は、好ましくはＣ_１－１０アルカン系溶媒であり、より好ましくはｎ－ヘプタンである。

前記Ａ型結晶の製造方法において、前記結晶化の温度は、当該技術分野における通常の温度であってもよく、前記結晶化の温度は、好ましくは２０℃～６０℃（例えば、室温（２０℃～２５℃）又は５０℃）である。

前記Ａ型結晶の製造方法において、前記式Ｉで表される化合物と前記溶媒との質量体積比は、当該技術分野における通常の比率であってもよく、好ましくは５ｍｇ／ｍＬ～２０ｍｇ／ｍＬ（例えば、７．７ｍｇ／ｍＬ～２０ｍｇ／ｍＬ）である。

前記Ａ型結晶の製造方法において、前記結晶化の時間は結晶を析出させることができれば特に限定されず、前記結晶化の時間は好ましくは１ｈ～２０ｄ（例えば、１ｈ～２ｈ、５ｈ～６ｈ又は１０ｄ～２０ｄ）である。

前記Ａ型結晶の製造方法において、前記結晶化法が反溶媒法である場合、前記反溶媒と前記溶媒との質量比は、当該技術分野における通常の比率であってもよく、好ましくは５：１～８：１（例えば、６．５：１）である。

前記Ａ型結晶の製造方法において、好ましくは下記のステップを含む：前記溶媒と前記式Ｉで表される化合物を混合し、超音波処理、回転、遠心分離により目的の結晶形を得る。前記回転は、好ましくは暗所で行われる。前記回転は、好ましくは室温で行われる。前記回転は、好ましくは、Ｌａｂｑｕａｋｅｒ回転装置で行われる。前記回転は、好ましくは１０ｄ～２０ｄ行われる。前記遠心分離終了後、さらに乾燥する操作を含むことが好ましい。前記式Ｉで表される化合物と前記溶媒との質量体積比は、好ましくは、５ｍｇ／ｍＬ～２０ｍｇ／ｍＬ（例えば、７．７ｍｇ／ｍＬ～２０ｍｇ／ｍＬ）である。

前記Ａ型結晶の製造方法において、好ましくは下記のステップを含む：前記溶媒と前記式Ｉで表される化合物を混合し、加熱溶解させ、室温まで徐冷させ、遠心分離して標的の結晶形を得る。前記加熱溶解の温度は、好ましくは５０℃～６０℃である。前記加熱溶解は、好ましくは水浴加熱である。前記加熱溶解は同時に攪拌操作を含むことが好ましく、前記攪拌の速度は好ましくは２００ｒｐｍである。前記加熱溶解終了後、保温操作を含むことが好ましく、前記保温時間は好ましくは１５分である。前記加熱溶解終了後、さらに熱時濾過操作を含むことが好ましく、前記濾過は好ましくは０．４５μｍのフィルター膜を採用する。前記徐冷速度は、好ましくは６℃／ｈである。前記遠心分離終了後、さらに溶媒の蒸発乾燥操作を含むことが好ましい。前記式Ｉで表される化合物と前記溶媒との質量体積比は、好ましくは５ｍｇ／ｍＬ～２０ｍｇ／ｍＬ（例えば、７．７ｍｇ／ｍＬ～２０ｍｇ／ｍＬ）である。

前記Ａ型結晶の製造方法において、好ましくは下記のステップを含む：上記溶媒と上記式Ｉで表される化合物を混合し、加熱溶解させ、前記反溶媒を滴下した後、自然冷却させ、遠心分離して目的の結晶形を得る。前記加熱溶解の温度は、好ましくは５０℃～６０℃である。前記加熱溶解は同時に攪拌操作を含むことが好ましく、前記攪拌の速度は好ましくは２００ｒｐｍである。前記加熱溶解終了後、保温操作を含むことが好ましく、前記保温時間は好ましくは１５分である。前記加熱溶解終了後、さらに熱時濾過操作を含むことが好ましく、前記濾過は好ましくは０．４５μｍのフィルター膜を採用する。前記反溶媒を滴下すると同時に、攪拌操作を含むことが好ましい。前記反溶媒と前記溶媒との体積比は、好ましくは５：１～８：１（例えば６．５：１）である。前記反溶媒の滴下が終了した後、保温操作を含むことが好ましく、前記保温時間は好ましくは１０分である。前記遠心分離終了後、さらに溶媒の蒸発乾燥操作を含むことが好ましい。前記式Ｉで表される化合物と前記溶媒との質量体積比は、好ましくは５ｍｇ／ｍＬ～２０ｍｇ／ｍＬ（例えば、７．７ｍｇ／ｍＬ～２０ｍｇ／ｍＬ）である。

また、本発明は、式Ｉで表される化合物のＢ型結晶の製造方法を提供し、下記の溶媒において、式Ｉで表される化合物を結晶化させるステップを含み、前記結晶化法は懸濁液平衡法又は反溶媒法であり、前記結晶化法が懸濁液平衡法である場合、前記溶媒は水、又はエタノールと水であり、前記結晶化法が反溶媒法である場合、前記溶媒はエタノール又はテトラヒドロフランであり、前記反溶媒は水である。

前記Ｂ型結晶の製造方法において、前記水は、蒸留水、脱イオン水、精製水、水道水及びミネラルウォーターのうちの一つ又は複数であってもよい。
前記Ｂ型結晶の製造方法において、前記結晶化の温度は、当該技術分野における通常の温度であってもよく、前記結晶化の温度は、好ましくは２０℃～６０℃（例えば、室温（２０℃～２５℃）又は５０℃）である。

前記Ｂ型結晶の製造方法において、前記式Ｉで表される化合物と前記溶媒との質量体積比は、当該技術分野における通常の比率であってもよく、好ましくは５ｍｇ／ｍＬ～４０ｍｇ／ｍＬ（例えば７．７ｍｇ／ｍＬ、１１．１ｍｇ／ｍＬ、２０ｍｇ／ｍＬ又は３３．３ｍｇ／ｍＬ）である。

前記Ｂ型結晶の製造方法において、前記結晶化法が懸濁液平衡法であり、前記溶媒はエタノール及び水である場合、前記エタノールと前記水との体積比は好ましくは１：３～１：５（例えば、１：４）である。

前記Ｂ型結晶の製造方法において、前記結晶化法が反溶媒法である場合、前記反溶媒と前記溶媒との体積比は好ましくは１：１～４：１（例えば、１：１又は２．７：１）である。
前記Ｂ型結晶の製造方法において、前記結晶化の時間は結晶を析出させることができれば特に限定されず、前記結晶化の時間は好ましくは１ｈ～２０ｄ（例えば、１ｈ～２ｈ、１ｄ又は１７ｄ）である。

前記Ｂ型結晶の製造方法において、前記結晶化法が懸濁液平衡法である場合、好ましくは下記のステップを含む：前記溶媒と前記式Ｉで表される化合物を混合し、スラリー化し、固体を分離して標的の結晶形を得る。前記スラリー化は好ましくは室温で行われる。前記スラリー化は好ましくは攪拌下で行われる。前記攪拌は好ましくは磁気攪拌である。前記スラリー化は、好ましくは１ｄ～１７ｄ行われる。前記固体の分離は好ましくは遠心分離又は濾過である。前記固体の分離が終了した後、さらに乾燥を含む操作が好ましく、前記乾燥は好ましくは４０℃で行われ、前記乾燥は好ましくは４ｈ行われる。前記式Ｉで表される化合物と前記溶剤との質量体積比は、好ましくは５ｍｇ／ｍＬ～４０ｍｇ／ｍＬ（例えば、７．７ｍｇ／ｍＬ、１１．１ｍｇ／ｍＬ、２０ｍｇ／ｍＬ又は３３．３ｍｇ／ｍＬ）である。

前記Ｂ型結晶の製造方法において、前記結晶化法が反溶媒法である場合、好ましくは下記のステップを含む：前記溶媒と前記式Ｉで表される化合物を混合し、加熱溶解させ、前記反溶媒を滴下した後、自然冷却させ、遠心分離して標的の結晶形を得る。前記加熱溶解の温度は好ましくは５０℃～６０℃である。前記加熱溶解は同時に攪拌操作を含むことが好ましく、前記攪拌の速度は好ましくは２００ｒｐｍである。前記加熱溶解終了後、保温操作を含むことが好ましく、前記保温時間は好ましくは１５分である。前記加熱溶解終了後、熱時濾過操作を含むことが好ましく、前記濾過は好ましくは０．４５μｍのフィルター膜を採用する。前記反溶媒の滴下は好ましくは攪拌の時に滴下する。前記反溶媒の滴下が終了した後、保温操作を含むことが好ましく、前記保温時間は好ましくは１０分である。前記遠心分離終了後、さらに溶媒の蒸発乾燥操作を含むことが好ましい。前記式Ｉで表される化合物と前記溶媒との質量体積比は、好ましくは５ｍｇ／ｍＬ～４０ｍｇ／ｍＬ（例えば、７．７ｍｇ／ｍＬ、１１．１ｍｇ／ｍＬ、２０ｍｇ／ｍＬ又は３３．３ｍｇ／ｍＬ）である。

また、本発明は、式Ｉで表される化合物のＣ型結晶の製造方法を提供し、下記の溶媒において、式Ｉで表される化合物を懸濁液平衡法で結晶化させるステップを含み、前記溶媒はイソプロパノール、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド又はアセトンと水である。

前記Ｃ型結晶の製造方法において、前記溶媒がアセトンと水である場合、前記アセトンと前記水との体積比は、好ましくは７：１～１０：１（例えば８：１）である。
前記Ｃ型結晶の製造方法において、前記水は、蒸留水、脱イオン水、精製水、水道水及びミネラルウォーターのうちの一つ又は複数であってもよい。

前記Ｃ型結晶の製造方法において、前記結晶化の温度は、当該技術分野における通常の温度であってもよく、前記結晶化の温度は好ましくは室温である。
前記Ｃ型結晶の製造方法において、前記式Ｉで表される化合物と前記溶媒との質量体積比は、当該技術分野における通常の比率であってもよく、前記式Ｉで表される化合物と前記溶媒との質量体積比は好ましくは１０ｍｇ／ｍＬ～５０ｍｇ／ｍＬ（例えば２０ｍｇ／ｍＬ、４０ｍｇ／ｍＬ又は４４．４ｍｇ／ｍＬ）である。

前記Ｃ型結晶の製造方法において、前記結晶化の時間は特に限定されないが、結晶を析出させることができれば限定されなく、前記結晶化の時間は好ましくは１ｄ～２０ｄ（例えば、１ｄ、７ｄ、１０ｄ又は２０ｄ）である。

前記Ｃ型結晶の製造方法において、好ましくは下記の前記溶媒と前記式Ｉで表される化合物を混合し、スラリー化又は回転し、固体を分離して標的の結晶形を得るステップを含む。前記混合終了後、さらに超音波操作を含むことが好ましく、前記超音波は好ましくは１分間行われる。前記Ｃ型結晶の製造方法がスラリー化を含む場合、前記スラリー化は好ましくは１ｄ間行われ、前記スラリー化は好ましくは攪拌下で行われ、前記攪拌は好ましくは磁気撹拌である。前記Ｃ型結晶の製造方法が回転を含む場合、前記回転は好ましくは１０ｄ～２０ｄ行われ、前記回転は好ましくは、Ｌａｂｑｕａｋｅｒ回転装置で行われ、前記回転は好ましくは暗所で行われる。前記固体の分離は好ましくは遠心分離又は濾過である。前記固体の分離が終了した後、さらに乾燥を含む操作が好ましい。前記乾燥は好ましくは７０℃で行われ、前記乾燥は好ましくは４ｈ行われる。前記式Ｉで表される化合物と前記溶媒との質量体積比は、好ましくは１０ｍｇ／ｍＬ～５０ｍｇ／ｍＬ（例えば、２０ｍｇ／ｍＬ、４０ｍｇ／ｍＬ又は４４．４ｍｇ／ｍＬ）である。

また、本発明は薬物の製造における式Ｉで表される化合物の結晶形の使用を提供する。当該化合物は癌による関連する疾患を予防、緩和及び／又は治療のための薬物の製造に使用され、前記癌は好ましくは肺癌、食道癌、胃癌、大腸癌、肝臓癌、鼻咽頭癌、脳腫瘍、乳癌、子宮頸癌、血液癌及び骨癌の一つ又は複数である。前記薬物は好ましくは治療有効量を含む前記式Ｉで表される化合物のＡ型結晶、Ｂ型結晶又はＣ型結晶である。

本明細書に使用される用語「ｄ」は日を指し、用語「ｈ」は時を指し、用語「ｍｉｎ」は分を指す。
当分野の常識に基づいて、上記各好ましい条件を任意に組み合わせれば、本発明の各好ましい実例が得られる。

本発明で用いられる試薬及び原料はいずれも市販品として得られる。
本発明の積極的な進歩効果は下記の通りである。
１．先行技術には式Ｉで表される化合物の結晶形は記載されておらず、本出願はその複数の新しい結晶形を初めて発見した。広範な実験とスクリーニングを通じて、Ａ型結晶、Ｂ型結晶及びＣ型結晶が候補として選択された。

２．本発明により製造されたＡ型結晶、Ｂ型結晶及びＣ型結晶は、良好な安定性を有し、吸湿しにくく、製造が容易であり、薬物の開発又は製造中のトランスクリスタル化のリスクを回避でき、バイオアベイラビリティ及び薬物の効能変化を回避し、臨床使用に適した剤形に開発でき、高い経済的価値を有する。

３．本発明はまた、式Ｉで表される化合物の新規な結晶形の製造方法を提供し、操作が簡単で容易であり、再現性が高く、溶媒が容易に残留せず、環境にやさしく、異なる規模での製造に適している。

図１は、式Ｉで表される化合物のＡ型結晶の偏光顕微鏡写真である。 図２は、式Ｉで表される化合物のＡ型結晶のＤＳＣ図である。 図３は、式Ｉで表される化合物のＡ型結晶のＴＧＡ図である。 図４は、式Ｉで表される化合物のＡ型結晶のＸＲＰＤ図である。 図５は、式Ｉで表される化合物のＡ型結晶のＤＶＳ図である。 図６は、式Ｉで表される化合物のＢ型結晶のＸＲＰＤ図である。 図７は、式Ｉで表される化合物のＢ型結晶のＤＳＣ図である。 図８は、式Ｉで表される化合物のＢ型結晶のＴＧＡ図である。 図９は、式Ｉで表される化合物のＢ型結晶のＤＶＳ図である。 図１０は、式Ｉで表される化合物のＣ型結晶のＸＲＰＤ図である。 図１１は、式Ｉで表される化合物のＣ型結晶のＤＳＣ図である。 図１２は、式Ｉで表される化合物のＣ型結晶のＴＧＡ図である。 図１３は、式Ｉで表される化合物のＣ型結晶のＤＶＳ図である。 図１４は、式Ｉで表される化合物のＶ型結晶のＸＲＰＤ図である。 図１５は、式Ｉで表される化合物のＶ型結晶のＤＳＣ図である。 図１６は、式Ｉで表される化合物のＶ型結晶のＴＧＡ図である。 図１７は、式Ｉで表される化合物のＶＩＩ型結晶のＸＲＰＤ図である。 図１８は、式Ｉで表される化合物のＶＩＩ型結晶のＤＳＣ図である。 図１９は、式Ｉで表される化合物のＶＩＩ型結晶のＴＧＡ図である。 図２０は、式Ｉで表される化合物のＶＩＩＩ型結晶のＸＲＰＤ図である。 図２１は、式Ｉで表される化合物のＶＩＩＩ型結晶のＤＳＣ図である。 図２２は、式Ｉで表される化合物のＶＩＩＩ型結晶のＴＧＡ図である。 図２３は、式Ｉで表される化合物のＩＸ型結晶のＸＲＰＤ図である。 図２４は、式Ｉで表される化合物のＩＸ型結晶のＤＳＣ図である。 図２５は、式Ｉで表される化合物のＩＸ型結晶のＴＧＡ図である。

［具体的な実施形態］
以下では、本発明を実施例によりさらに説明するが、本発明を前記実施例に限定するものではない。以下の実施例において、特定の条件が示されていない実験方法は、従来の方法及び条件に従うか、又は取引説明書に従って選択される。

以下の結晶形の製造方法において、添加する溶媒の体積（ｍＬ）＝試料質量×体積倍数（ｍＬ）であり、例えば実施例１の製造方法一におけるエタノールの体積は：０．０２×５０ｍＬ＝１ｍＬである。

非晶質化合物Ｉ（式Ｉで表される化合物）の製造：
室温で化合物５－ａ（化合物５－ａの製造は特許ＣＮ１０９９８８１４４Ａの方法を参考にして得た）と（Ｓ）－２－メチルセリン（６５ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）のメタノール（１０ｍＬ）とジクロロメタン（１０ｍＬ）の混合溶液に、氷酢酸（３２．８ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で１時間撹拌した。次にシアノ水素化ホウ素ナトリウム（８５．８ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ）を加え、１６時間攪拌した。反応液を減圧濃縮し、残留物を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解させ、水（２０ｍＬ）と飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥、減圧濃縮し、残留物をジクロロメタン：メタノール＝１０：１の移動相を用いてシリカゲル薄層クロマトグラフィー分取プレートで分離し、化合物Ｉを含むシリカゲルをメタノール（２０ｍＬ×３）で洗浄し、洗浄液を減圧濃縮して、非晶質化合物Ｉ（２４ｍｇ、収率１８．７％）を得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝４６８［Ｍ－Ｈ］^－

^１Ｈ ＮＭＲ （５００ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ）?： ８．１７ （ｓ， １Ｈ）， ７．８１－７．７９ （ｄ， Ｊ＝ ８．５Ｈｚ， １Ｈ）， ７．６８－７．６２ （ｍ， ２Ｈ）， ７．５７－７．５５ （ｄ，Ｊ＝ ８．０Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４６－７．４３ （ｍ， ２Ｈ）， ７．３９－７．２８ （ｍ， ５Ｈ）， ７．２０－７．１９ （ｄ， Ｊ＝ ７．０Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３６－４．２８ （ｑ，２Ｈ）， ４．０３－４．００ （ｄ， Ｊ＝ １２．５Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８６－３．８４ （ｄ， Ｊ＝ １２．５Ｈｚ， １Ｈ）， ２．３３ （ｓ，３Ｈ）， １．５７ （ｓ，３Ｈ） ｐｐｍ．

実施例１：Ａ型結晶の製造方法：
製造方法一：式Ｉで表される化合物２０ｍｇを４ｍＬのガラス瓶に秤量し、５０倍体積のエタノール（ＥｔＯＨ）をガラス瓶に加え、１分間超音波処理して試料の懸濁液を得、懸濁液試料バイアルをアルミホイルで包んで光を避け、Ｌａｂｑｕａｋｅｒ回転装置に載せ、室温（約２０～２５℃）で３６０度回転し平衡化開始し、試料をそれぞれ１０日目と２０日目に採取し、遠心分離し、乾燥後にＸＲＰＤで特性評価し、特性評価した結果はＡ型結晶であった。

製造方法二：式Ｉで表される化合物約２０ｍｇを１０ｍＬのガラスバイアルに秤量し、１３０倍体積のエタノール（ＥｔＯＨ）をガラスバイアルに加え、試料を磁気加熱スターラーに置き、水浴温度が約５０℃であり、回転速度は２００ｒｐｍであり、加熱により試料の溶解を促進し、１５分間保温した後、溶液を熱いうちに０．４５μｍフィルターでろ過し、ろ液を新しいガラス瓶に移し、６℃／ｈの速度で温度を室温（２０～２５℃）までゆっくりと下げ、固体が沈殿した溶媒系を遠心分離し、固体を取り出し、溶媒を蒸発乾固させた後でＸＲＰＤで特性評価し、特性評価した結果はＡ型結晶であった。

製造方法三：（反溶媒法）：式Ｉで表される化合物試料約８０ｍｇを２０ｍｌのガラスバイアルに秤量し、１３０倍体積の良溶媒エタノール（ＥｔＯＨ）をバイアルに加え、試料バイアルを磁気加熱スターラーに置き、水浴温度は約５０℃であり、回転速度は２００ｒｐｍであり、加熱により試料の溶解を促進し、１５分間保温した後、溶液を熱いうちに０．４５μｍのフィルターでろ過し、ろ液を新しいガラス瓶に移し、攪拌しながら各バイアルにゆっくりと８５０倍の反溶媒ｎ－ヘプタンを加え、１０分間保温した後、自然温度を下げ、次に固体が沈殿した溶媒系を遠心分離して固体を取り出し、溶媒を蒸発乾固させた後ＸＲＰＤで特性評価し、特性評価した結果はＡ型結晶であった。

実施例２：Ｂ型結晶の製造方法：
製造方法一：式Ｉで表される化合物２００ｍｇをバイアルに秤量し、バイアルに１０倍のエタノールと４０倍の水を加え、室温で１日間磁気で撹拌してスラリー化させ、溶液を遠心分離し、固体を収集して４０℃で４時間乾燥させ、乾燥した固体を特性評価し、特性評価した結果はＢ型結晶であった。

製造方法二：式Ｉで表される化合物１００ｍｇをガラスバイアルに秤量し、ガラスバイアルに３０倍体積の水を加え、室温で１７日間磁気で撹拌してスラリー化させ、減圧ろ過し、４０℃で４時間乾燥させ、ＸＲＰＤにより特性評価し、特性評価した結果はＢ型結晶であった。

製造方法三（反溶媒法）：式Ｉで表される化合物の試料約８０ｍｇを２０ｍＬのガラスバイアルに秤量し、下記の表に従って適切な体積の良溶媒をバイアルに加え（具体的な体積は表４を参照）、試料バイアルを磁気加熱スターラーに置き、水浴温度は約５０℃であり、回転速度は２００ｒｐｍであり、水浴の温度は試料の溶解を促進するために維持され、１５分間保温し、各溶液を熱いうちに０．４５μｍフィルターでろ過し、ろ液を新しいバイアルに移し、攪拌しながら各バイアルに順次に異なる反溶媒をゆっくりと滴下し、１０分間保温した後、自然に温度を下げ、次に固体を沈殿させた溶媒系を遠心分離して固体を取り出し、溶媒が乾固した後、ＸＲＰＤにより特性評価し、特性評価した結果はＢ型結晶であった。

実施例３：Ｃ型結晶の製造方法：
製造方法一：式Ｉで表される化合物試料２００ｍｇを秤量し、２０倍のアセトン及び２．５倍の水を加え、室温の条件下で１日間磁気攪拌してスラリー化させ、次に溶液を遠心分離し、固体を収集し、収集した固体を７０℃で４時間乾燥させ、乾燥した後の固体をＸＲＰＤにより特性評価し、特性評価した結果はＣ型結晶であった。

製造方法二：式Ｉで表される化合物２００ｍｇ＋２５倍のイソプロパノール（ＩＰＡ）を室温で７日間磁気攪拌してスラリー化させ、減圧濾過し、固体を７０℃で４時間乾燥させ、固体試料をＸＲＰＤにより特性評価し、特性評価した結果はＣ型結晶であった。

製造方法三：式Ｉで表される化合物２０ｍｇを４ｍＬのガラスバイアルに秤量し、５０倍体積のＮ，Ｎ－ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）をガラスバイアルに加え、１分間超音波処理して試料の懸濁液を得、懸濁液試料バイアルをアルミホイルで包んで光を避け、Ｌａｂｑｕａｋｅｒ回転装置に置き、室温（約２０～２５℃）で３６０度回転して平衡化を開始し、試料をそれぞれ１０日目と２０日目にサンプリングし、遠心分離し、乾燥後にＸＲＰＤで特性評価し、特性評価した結果はＣ型結晶であった。

粉末Ｘ線回折パターン（ＸＲＰＤ）、示差走査熱量分析（ＤＳＣ）、熱重量損失分析装置（ＴＧＡ）又は動的水分吸着分析装置（ＤＶＳ）などによって前記化合物のＡ型結晶、Ｂ型結晶、Ｃ型結晶に対して構造決定を行い、結晶形研究などを行った。

実施例４：Ａ型結晶の偏光顕微鏡特性評価（図１）
式Ｉで表される化合物のＡ型結晶の試料を少量取り、目盛り付きのガラススライド上に置き、適量の流動パラフィンを加えて分散させ、カバーガラスで覆い、１０倍の対物レンズを備えた顕微鏡下に置き、粒子形態、サイズ及び結晶特性を観察し、直交偏光顕微鏡で試料の複屈折性及び結晶性を示し、デジタルカメラで撮影した。

結果は、偏光顕微鏡下で試料に明らかな複屈折があり、粒状と棒状を示し、粒子径が１０～１００μｍであることを示している。
実施例５：Ａ型結晶の示差走査熱量測定分析（ＤＳＣ）（図２に示される通りである）
式Ｉで表される化合物のＡ型結晶の試料３．１８２０ｍｇを秤量し、非密封アルミニウムトレイに置き、窒素ガス流（５０ｍＬ／分）雰囲気で試料を２５℃で平衡化させ、その後１０℃／分の昇温速度で２５℃から３００℃まで加熱し、結果は表５に詳細に示される。

実施例６：Ａ型結晶の熱重量分析（ＴＧＡ）（図３）
式Ｉで表される化合物のＡ型結晶の試料１５．３２４０ｍｇを秤量し、白金サンプルパンに置き、試料窒素ガス流（６０ｍＬ／分）雰囲気で１０℃／分の昇温速度で２５℃から３００℃まで加熱し、試料の２６．７６℃から１１９．９７℃までの重量損失はわずか０．１４４７％であり、試料にはほとんど水又は溶媒が含まれていないことを示し、結果は表６に詳細に示される。

実施例７：Ａ型結晶の粉末Ｘ線回折分析（ＸＲＰＤ）（図４）
光源はＣｕＫであり、Ｘ線強度は４０ＫＶ／４０ｍＡであり、スキャンモードはＴｈｅｔａ－Ｔｈｅｔａであり、スキャン角度範囲は４°～４０°であり、ステップサイズは０．０５°であり、スキャン速度は０．５秒／ステップであり、結果は表７に詳細に示される。

実施例８：Ａ型結晶の動的水分吸着分析（ＤＶＳ）（図５）
適量の式Ｉで表される化合物のＡ型結晶の試料を秤量し、温度２５℃、湿度０％ＲＨの条件下で６０分間乾燥させた後、湿度が０％ＲＨ～９５％ＲＨに変化した時の試料の吸湿特性、及び湿度が９５％ＲＨ～０％ＲＨに変化した時の試料の除湿特性を測定した。各ステップの湿度変化は５％ＲＨであり、平衡基準は１０分以内の重量変化率は０．０１％／分未満であり、最長平衡時間は２時間であり、ＤＶＳの試験結果は、Ａ型結晶が２５℃、８０％ＲＨ湿度での吸湿重量増加は０．３１０％であり、９５％ＲＨ湿度での吸湿重量増加は０．４０９％であり、試料がやや吸湿性があることを示した。

実施例９：Ｂ型結晶の粉末Ｘ線回折分析（ＸＲＰＤ）（図６）
光源はＣｕＫであり、Ｘ線強度は４０ＫＶ／４０ｍＡであり、スキャンモードはＴｈｅｔａ－Ｔｈｅｔａであり、スキャン角度範囲は４°～４０°であり、ステップサイズは０．０５°であり、スキャン速度は０．５秒／ステップであり、結果は表８に詳細に示される。

実施例１０：Ｂ型結晶の示差走査熱量測定分析（ＤＳＣ）（図７）
式Ｉで表される化合物のＢ型結晶の試料１．５３３０ｍｇを秤量し、非密封アルミニウムトレイに置き、窒素ガス流（５０ｍＬ／分）の雰囲気で試料を２５℃で平衡化させ、その後１０℃／分の昇温速度で２５℃から３００℃まで加熱し、結果は表９に詳細に示される。

実施例１１：Ｂ型結晶の熱重量分析（ＴＧＡ）（図８）
式Ｉで表される化合物のＢ型結晶の試料１．７３１０ｍｇを秤量し、白金サンプルパンに置き、試料を窒素ガス流（６０ｍＬ／分）雰囲気で１０℃／分の昇温速度で２５℃から３００℃まで加熱し、開始試料は２５．３℃から９２．５℃まで加熱すると５．２％の重量損失があった。

実施例１２：Ｂ型結晶の動的水分吸着分析（ＤＶＳ）（図９）
式Ｉで表される化合物のＢ型結晶の試料適量を秤量し、温度２５℃、湿度０％ＲＨの条件下で６０分間乾燥させた後、湿度が０％ＲＨ～９５％ＲＨに変化した時の試料の吸湿特性、及び湿度が９５％ＲＨ～０％ＲＨに変化した時の試料の除湿特性を測定した。各ステップの湿度変化は５％ＲＨであり、平衡基準は５分以内の重量変化率が０．０１％／分未満であり、最長平衡時間は２時間であり、結果は、０％ＲＨから９５％ＲＨまでの試料重量増加が７．２３５％であり、試料が吸湿性を有していることを示した。

実施例１３：Ｃ型結晶の粉末Ｘ線回折分析（ＸＲＰＤ）（図１０）
光源はＣｕＫであり、Ｘ線強度は４０ＫＶ／４０ｍＡであり、スキャンモードはＴｈｅｔａ－Ｔｈｅｔａであり、スキャン角度範囲は４°～４０°であり、ステップサイズは０．０５°であり、スキャン速度は０．５秒／ステップであり、結果は表１０に詳細に示される。

実施例１４：Ｃ型結晶の示差走査熱量測定分析（ＤＳＣ）（図１１）
式Ｉで表される化合物のＣ型結晶の試料を１．５５０ｍｇ秤量し、非密封アルミニウムトレイに置き、窒素ガス流（５０ｍＬ／分）雰囲気で試料を２５℃で平衡化させ、その後１０℃／分の昇温速度で２５℃から３００℃まで加熱し、結果は表１１に詳細に示される。

実施例１５：Ｃ型結晶の熱重量分析（ＴＧＡ）（図１２）
式Ｉで表される化合物のＣ型結晶の試料５．３５７０ｍｇを秤量し、白金サンプルパンに入れ、試料を窒素ガス流（６０ｍＬ／分）雰囲気で１０℃／分の昇温速度で２５℃から３００℃まで加熱し、試料は２４．０℃から５８．０℃まで加熱した場合は０．６２％の重量損失があり、５８．０℃から１６２．３℃まで加熱した場合は２．５％の重量損失があった。試料を２００℃に加熱し、Ｃ型結晶がＡ型結晶に変換され、結果は表１２に詳細に示される。

実施例１６：Ｃ型結晶の動的水分吸着分析（ＤＶＳ）（図１３）
式Ｉで表される化合物のＣ型結晶の試料適量を秤量し、温度２５℃、湿度０％ＲＨの条件下で６０分間乾燥させた後、湿度が０％ＲＨ～９５％ＲＨに変化した時の試料の吸湿特性、及び湿度が９５％ＲＨ～０％ＲＨに変化した時の試料の除湿特性を測定した。各ステップの湿度変化は５％ＲＨであり、平衡基準は５分以内の重量変化率が０．０１％／分未満であり、最長平衡時間は２時間であり、結果は、０％ＲＨから９５％ＲＨまでの試料重量増加が４．７６７％であり、試料が吸湿性を有していることを示した。

実施例１７：Ａ型結晶、Ｂ型結晶、Ｃ型結晶の平衡溶解度及び溶解速度の比較
Ａ型結晶、Ｂ型結晶、Ｃ型結晶の純水と生体内の生理的関連媒体での平衡溶解度と溶解速度に違いがあるかどうかをさらに調べるため、４つの結晶形試料の平衡溶解度と溶解速度をそれぞれ水、模擬胃液（ＳＧＦ）、模擬空腹時腸液（ＦａＳＳＩＦ）及び模擬摂食腸液（ＦｅＳＳＩＦ）でテストした。試料Ａ、Ｂ、Ｃの約２０ｍｇを４ｍＬのガラスバイアルに秤量し、それぞれに培地３ｍＬを順次に加え、１５秒間超音波処理を行い、３７℃、回転速度２００ｒｐｍのシェーカーに入れ、０．５ｈ、２ｈ、２４ｈで約１ｍＬの懸濁液をとり、遠心分離し、回転速度が１２０００ｒｐｍであり、時間が５分間であり、必要に応じて上澄み液（希釈液：メタノール／水＝９／１）を適切な倍率で希釈した後、又はＨＰＬＣで直接濃度を測定することにより各サンプルの溶解度の値を算出した。各時点での溶解度試験の結果は表１３に示される通りである。

実施例１８：Ａ型結晶、Ｂ型結晶、Ｃ型結晶の固体安定性実験
Ａ型結晶、Ｂ型結晶、Ｃ型結晶の試料をそれぞれ２０ｍＬの無色透明ガラスバイアルに秤量し、試料バイアルをそれぞれ対応する影響因子及び加速条件下に置き（湿度条件下のバイアルは錫箔で密閉し、小さな穴を入れて置き、他の試料はキャップをしっかりと閉じて置いた）、それぞれ１週間と２週間置いた後に取り出し、ＨＰＬＣにより様々な条件下で試料の含有量と関連物質を検出し、上記と同じ方法に従って、それぞれ試料を秤量し、対応する影響因子と加速条件下に置き、２週間置いた後取り出し、各試料の外観とＸＲＰＤ特性を観察して、各結晶形の物理的安定性を考察し、試験方法は表１４及び表１５に詳細に示され、同時に、式Ｉで表される化合物のＡ型結晶、Ｂ型結晶、Ｃ型結晶の試料を２部ずつ２０ｍＬの無色透明ガラスバイアルに正確に秤量し、しっかりと蓋をし、－２０℃の冷蔵庫に入れて保存し、２週間目でＨＰＬＣ分析用の標準試料として取り出し、試験結果は表１６及び表１７に詳細に示される。

結論：
高温、高湿、光照射、加速の４つの条件に２週間置いたＡ型結晶、Ｂ型結晶、Ｃ型結晶の試料の外観は、初期試料と同じで、いずれもオフホワイトであり、Ａ型結晶及びＣ型結晶は初期試料と比較して顕著な差がなく、物理的安定性が良かったが、Ｂ型結晶は高温（６０℃）でトランスクリスタル化が見られ、物理的安定性は劣った。

Ａ型結晶、Ｂ型結晶、Ｃ型結晶は光照射の影響を大きく受け、２週間後の総関連物質量はそれぞれ１１．１８％、１．２８％及び１．５６％増加し、光照射がＡ型結晶、Ｂ型結晶、Ｃ型結晶に顕著な影響を与えることを示し、光を避けて保管するように注意する必要がある。

比較例１：Ｖ型結晶の製造（懸濁液平衡法）
式Ｉで表される化合物の試料１００ｍｇを秤量してバイアルに入れ、２０倍のメタノールをバイアルに加え、室温で１４日間磁気攪拌してスラリー化させ、溶液を遠心分離し、固体を収集し、４０℃で４時間乾燥させ、乾燥した後の固体を特性評価し、当該結晶形をＶ型結晶と定義し、Ｖ型結晶のＸＲＰＤパターンは図１４に示される通りであり、Ｖ型結晶のＤＳＣパターンは図１５に示される通りであり、Ｖ型結晶を８５℃に加熱すると、Ｖ型結晶がＡ型結晶に変換された。

図１６はＶ型結晶のＴＧＡ図である（図１６のように、試料は２４．８℃から８２．７℃に加熱すると、３．６９０％の重量損失があることを示す）。
比較例２：ＶＩＩ型結晶の製造（溶液加熱－徐冷法）
式Ｉで表される化合物の試料１００ｍｇを秤量してガラスバイアルに入れ、１００倍体積の酢酸エチル（ＥＡ）と２０倍体積のメタノール（ＭｅＯＨ）をバイアルに加え、試料を磁気加熱スターラーに置き、５０℃の水浴温度で磁気攪拌により溶解させ、濾過し、ろ液を６℃／ｈの速度で室温までゆっくりと冷却させ、一晩後、減圧ろ過し、固体を７０℃で４時間乾燥させ、乾燥した固体を特性評価し、当該結晶形をＶＩＩ型結晶と定義し、ＶＩＩ型結晶のＸＲＰＤパターンは図１７に示される通りであり、試料を２００℃に加熱し、室温に冷却させてＸＲＰＤを特性評価した結果、ＶＩＩ型結晶がＡ型結晶に変換された。

図１８は、ＶＩＩ型結晶のＤＳＣ図である（図１８のように、ＤＳＣ熱流曲線は、その初期融点が２４１．９℃であり、２００℃より前に複数の吸発熱ピークがあることを示す）。
図１９は、ＶＩＩ型結晶のＴＧＡ図である（図１９のように、試料は２６．２℃から１１２℃まで０．７５％の重量損失があり、１１２℃から２００℃まで１．６９％の重量損失があることを示す）。

比較例３：ＶＩＩＩ型結晶の製造（懸濁液平衡法）
式Ｉで表される化合物の試料１００ｍｇを秤量してバイアルに入れ、３０倍のアセトニトリル（ＡＣＮ）（試料の質量（ｇ）×体積倍数）をバイアルに加え、室温で２日間磁気攪拌してスラリー化させ、減圧ろ過し、固体を収集して４０℃で４時間乾燥させた後、乾燥した固体を特性評価し、当該結晶形をＶＩＩＩ型結晶と定義し、ＶＩＩＩ型結晶のＸＲＰＤ図は図２０に示される通りである。試料を１８０℃に加熱すると、ＶＩＩＩ型結晶試料がＡ型結晶に変換された。

図２１は、ＶＩＩＩ型結晶のＤＳＣ図である（図２１のように、ＤＳＣ熱流曲線は、その初期融点が２３９．０℃であり、１００℃より前に広い吸熱ピークがあることを示す）。
図２２は、ＶＩＩＩ型結晶のＴＧＡ図である（図２２のように、試料は２６．１℃から８５．２℃まで３．４０９％の重量損失があることを示す）。

比較例４：ＩＸ型結晶の製造（溶液加熱－徐冷法）
式Ｉで表される化合物の試料１００ｍｇを秤量してガラスバイアルに入れ、３０倍体積のＮ，Ｎ－ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）をバイアルに加え、試料を磁気加熱スターラーに置き、５０℃の水浴温度で磁気攪拌により溶解させ、濾過し、ろ液を６℃／ｈの速度で室温までゆっくり冷却させ、減圧ろ過し、固体を７０℃で４時間乾燥させ、乾燥した固体を特性評価し、当該結晶形をＩＸと定義し、ＩＸ型結晶のＸＲＰＤ図は図２３に示される通りである。試料を１８０℃に加熱し、ＩＸ型結晶試料がＡ型結晶に変換された。

図２４は、ＩＸ型結晶のＤＳＣ図である（図２４のように、ＤＳＣ熱流曲線は、その初期融点が２４１．８℃であり、２００℃より前に複数の吸発熱ピークがあることを示す）。
図２５は、ＩＸ型結晶のＴＧＡ図である（図２５のように、試料は２７．４℃から９５℃までわずか０．０３５％の重量損失があり、９５℃から２００℃まで０．８４１％の重量損失があることを示す）。

Claims (7)

1. ２θ角で表される粉末Ｘ線回折パターンが、９．９２３±０．２°、１０．８８３±０．２°及び１７．３５７±０．２°において特徴的なピークを有し、
   又は、３．９７９±０．２°、９．９２３±０．２°、１０．８８３±０．２°、１７．３５７±０．２°、１８．６０７±０．２°及び１９．２９４±０．２°において特徴的なピークを有し、
   又は、３．９７９±０．２°、４．９９１±０．２°、９．９２３±０．２°、１０．８８３±０．２°、１４．２５１±０．２°、１６．２１０±０．２°、１７．３５７±０．２°、１８．６０７±０．２°、１９．２９４±０．２°、１９．５９４±０．２°及び２０．７９２±０．２°において特徴的なピークを有し、
   又は、３．９７９±０．２°、４．９９１±０．２°、７．１１３±０．２°、８．１３５±０．２°、９．９２３±０．２°、１０．８８３±０．２°、１１．６１３±０．２°、１４．２５１±０．２°、１４．８６６±０．２°、１６．２１０±０．２°、１７．３５７±０．２°、１８．６０７±０．２°、１９．２９４±０．２°、１９．５９４±０．２°、２０．７９２±０．２°、２１．２７２±０．２°、２４．４３７±０．２°、２５．２５７±０．２°、２６．２２９５±０．２°、２７．８７０±０．２°、２８．６３１±０．２°、２９．１２６±０．２°、２９．９４３±０．２°において特徴的なピークを有する、ことを特徴とする式Ｉで表される化合物のＡ型結晶。
   
2. ２θ角で表される粉末Ｘ線回折パターンにおける２θ値は下記の表に示される通りであり、
   及び／又は、前記Ａ型結晶の偏光顕微鏡分析において、前記結晶形は顆粒状又は棒状であり、
   及び／又は、前記Ａ型結晶の示差走査熱量分析において、２４７℃に吸熱ピークを有し、その融解熱は１１８．０Ｊ／ｇであり、
   及び／又は、前記Ａ型結晶の熱重量分析において、試料は２６．７６℃から１１９．９７℃までの重量損失は０．１４４７％であり、前記「％」は重量パーセンテージであり、
   及び／又は、前記Ａ型結晶の動的水分吸着分析において、相対湿度８０％のときの吸湿重量増加は０．３１０％であり、相対湿度９５％のときの吸湿重量増加は０．４０９％である、ことを特徴とする請求項１に記載の式Ｉで表される化合物のＡ型結晶。
3. 溶媒において、式Ｉで表される化合物を結晶化させるステップを含み、前記結晶化法が懸濁液平衡法、溶液加熱－徐冷法又は反溶媒法であり、前記溶媒がエタノールであり、前記結晶化法が反溶媒法である場合、反溶媒がアルカン系溶媒である、ことを特徴とする請求項１又は２に記載の式Ｉで表される化合物のＡ型結晶の製造方法。
4. 前記結晶化温度は２０℃～６０℃であり、
   及び／又は、前記結晶化法が反溶媒法である場合、前記アルカン系溶媒はＣ_１－１０アルカン系溶媒であり、
   及び／又は、前記式Ｉで表される化合物と前記溶媒との質量体積比は５ｍｇ／ｍＬ～２０ｍｇ／ｍＬであり、
   及び／又は、前記結晶化時間は１ｈ～２０ｄであり、
   及び／又は、前記結晶化法が反溶媒法である場合、前記反溶媒と前記溶媒との質量比は５：１～８：１である、ことを特徴とする請求項３に記載の式Ｉで表される化合物のＡ型結晶の製造方法。
5. 前記結晶化温度は室温又は５０℃であり、
   及び／又は、前記結晶化法が反溶媒法である場合、前記アルカン系溶媒はｎ－ヘプタンであり、
   及び／又は、前記式Ｉで表される化合物と前記溶媒との質量体積比は７．７ｍｇ／ｍＬ～２０ｍｇ／ｍＬｄであり、
   及び／又は、前記結晶化時間は１ｈ～２ｈ、５ｈ～６ｈ又は１０ｄ～２０ｄであり、
   及び／又は、前記結晶化法が反溶媒法である場合、前記反溶媒と前記溶媒との質量比は６．５：１である、ことを特徴とする請求項４に記載の式Ｉで表される化合物のＡ型結晶の製造方法。
6. 薬物の製造における請求項１又は２に記載の結晶形の使用であって、前記薬物は、癌の予防、緩和及び／又は治療のための薬物である、使用。
7. 前記癌は、肺癌、食道癌、胃癌、大腸癌、肝臓癌、鼻咽頭癌、脳腫瘍、乳癌、子宮頸癌、血液癌及び骨癌の一つ又は複数である、請求項６に記載の使用。

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