JP7618397B2 - 粘膜洗浄用組成物 - Google Patents
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Description
稿1. (A)乳酸及び/又はその塩、(B)グリシン、並びに(C)酢酸及び/又はその塩を含有する粘膜洗浄用組成物。
項2. 前記(A)成分の含有量が総量で0.5~2重量%である、項1に記載の粘膜洗浄用組成物。
項3. 前記(B)成分の含有量が0.5~5重量%である、項1又は2に記載の粘膜洗浄用組成物。
項4. 前記(C)分の含有量が総量で0.1~1.5重量%である、項1~3のいずれかに記載の粘膜洗浄用組成物。
項5. pHが3.8~8である、項1~4のいずれかに記載の粘膜洗浄用組成物。
項6. 膣粘膜に用いられる、項1~5のいずれかに記載の粘膜洗浄用組成物。
本発明の粘膜洗浄用組成物は、(A)成分として乳酸及び/又はその塩を含有する。
本発明の粘膜洗浄用組成物は、(B)成分としてグリシンを含有する。グリシンは、保湿成分として、化粧品、医薬部外品等に配合される成分である。
本発明の粘膜洗浄用組成物は、(C)成分として酢酸及び/又はその塩を含有する。酢酸及び/又はその塩は、pH調整剤として、化粧品、医薬部外品等に配合される成分である。
本発明の粘膜洗浄用組成物には、前記成分の他に、本発明の効果を損なわない範囲で、製剤化等に必要とされる他の基剤や添加剤が含まれていてもよい。このような基剤や添加剤については、薬学的に許容されることを限度として特に制限されないが、例えば、水、炭素数1~5の低級アルコール、及び多価アルコール等の水性基剤、界面活性剤、防腐剤、着香剤、着色剤、粘稠剤、pH調整剤、湿潤剤、安定化剤、酸化防止剤、紫外線吸収剤、キレート剤、粘着剤、緩衝剤、溶解補助剤、可溶化剤、保存剤等の添加剤が挙げられる。これらの基材や添加剤は、1種単独で使用してもよく、また2種以上を組み合わせて使用してもよい。これらの基剤や添加剤の含有量は、製剤形態等に応じて適宜設定することができる。
本発明の粘膜洗浄用組成物のpH(25℃)は、粘膜を傷害しない程度であれば特に制限されないが、例えば3.8~8、好ましくは3.9~6、より好ましくは4~5、さらに好ましくは4.1~4.5、一層好ましくは4.2~4.4が挙げられる。本発明の組成物をこのようなpHに調整するためには、従来公知の方法に従って行うことができ、例えば、塩酸、クエン酸、グルコン酸、コハク酸、酒石酸、マレイン酸、硫酸、リン酸、リンゴ酸、アルギニン、アンモニア水、ジイソプロパノールアミン、ジエタノールアミン、トリイソプロパノールアミン、トリエタノールアミン、モノエタノールアミン、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化ナトリウム、及びこれらの塩等の緩衝剤を適宜添加して行うことができる。また、(A)成分及び/又は(C)成分における酸(乳酸及び/又は酢酸)並びに/若しくはその塩(乳酸の塩及び/又は酢酸の塩)の量を調整することによってpHを調整することもできる。
本発明の粘膜洗浄用組成物は、粘膜への刺激性が低く防腐性に優れるため、粘膜の洗浄用として使用される。本発明の粘膜洗浄用組成物が適用される粘膜としては、特に限定されないが、例えば、鼻腔、咽頭、口腔、耳、膣、膀胱、直腸等の粘膜に対して適用することができ、好ましくは膣の粘膜に対して適用することができる。特に、本発明の粘膜洗浄用組成物が膣に対して適用される場合、本発明の粘膜洗浄用組成物は、細菌性膣症(BV)関連菌に対して抗菌性を示し、膣内常在菌である乳酸桿菌に対しては抗菌性を示さない、選択抗菌を目的として使用することができる。
表1に示す組成の粘膜洗浄用組成物を調製した。表1に示す(A)成分の詳細は以下の通りである。なお、表1に示す粘膜洗浄用組成物は液状であった。
・乳酸(乳酸90重量%含有発酵物;商品名ムサシノ乳酸90F;株式会社武蔵野化学研究所製)なお、表中の数値は、当該乳酸材料に含まれる乳酸の量を示している。
・乳酸ナトリウム(乳酸ナトリウム50重量%)含有発酵物;商品名乳酸ソーダF;株式会社武蔵野化学研究所製)なお、表中の数値は、当該乳酸材料に含まれる乳酸ナトリウムの量を示している。
また、全ての粘膜洗浄用組成物において、組成物中の乳酸イオン及び乳酸分子の総量を1.0重量%となるようにそろえた。
以下に示す浅賀法により防腐効力試験を行った。
(1)Aspergillus brasiliensis(KPB1042)をSCD培地に、Candida albicans(KPB1039)をPDA培地に、白金耳で塗布し、35℃で18~24時間前培養した。
(2)前培養した菌を10μLのプラスチック白金耳ですりきり一杯分採取し、生理食塩水10mLに懸濁し、A.brasiliensis胞子液及びC.albicans菌液を調製した。
(3)予め20g分注しておいた粘膜洗浄用組成物に、胞子液又は菌液0.1mLを接種し、撹拌し、初期菌数を測定した。
(4)25℃で保存し、1週間後(1w)、2週間後(2w)及び4週間後(4w)における菌数を測定した。測定した菌数を、初期菌数を100%とする相対値(%)で表した。結果を表1に示す。
試験菌として、以下の細菌性膣症(BV)関連菌及び乳酸桿菌(膣内常在菌)を用い、粘膜洗浄用組成物を膣粘膜に適用する場合を想定した選択殺菌能を試験した。それぞれの菌の菌種、増殖培地、及び生菌数測定用寒天培地の詳細な以下の通りである。
試験菌種:Fusobacterium nucleatum subsp. Nucleatum ATCC 25586
増殖培地:F. nucleatum→変法GAM液体培地
生菌数測定用寒天培地:Fetal Bovine Serumを終濃度10重量%となるように添加した変法GAM寒天培地
試験菌種:Mobiluncus curtisii ATCC 35241
増殖培地:Fetal Bovine Serumを終濃度10重量%となるように添加した変法GAM液体培地
生菌数測定用寒天培地:Fetal Bovine Serumを終濃度10重量%となるように添加した変法GAM寒天培地
試験菌種:Lactobacillus crispatus ATCC 33820
増殖培地:Fetal Bovine Serumを終濃度10重量%となるように添加したMRS液体培地
生菌数測定用寒天培地:MRS寒天培地
1.保存菌株をMRS寒天培地に移植し、37℃で24時間、アネロパック・ケンキを用いて嫌気的に前培養した。
2.前培養後の試験菌を3倍濃縮の増殖培地を用いて、約1.0×107CFUml/Lとなるように調製したものを試験菌液とした。
1.グローブボックス内に液体窒素を所定量入れた容器を設置した。また、試験試料と試験菌液の作用に使用する密閉容器を、蓋を開けた状態で、グローブボックス内に設置した。
2.所定時間放置し、液体窒素を気化させ、グローブボックス内の空気を窒素に置換した。
3.試験室の空気を用いて、グローブボックス内の酸素濃度を2%に調整した。
4.実験用ガス(二酸化炭素)を用いて、グローブボックス内の二酸化炭素濃度を5%に調整した。
1.安全キャビネット内で、試験試料(粘膜洗浄用組成物)と試験菌液とを2:1で混合し、シャーレに分注した。
2.(2)で調整したグローブボックス内に分注したシャーレを入れ、予め設置しておいた密閉容器にシャーレを入れ、グローブボックス内で蓋をして密閉させた。
3.蓋をした密閉容器をグローブボックスから取り出し、37℃で所定時間作用させた。
4.安全キャビネット内で、所定時間放置後の試験菌懸濁液0.5mLをSCDLP4.5mLに添加して混合した。
5.アネロパック・ケンキを用いて、混釈平板培養法による生菌数測定を行った。結果を表2に示す。
(1)培養角膜モデルLabCyte CORNE-MODEL24の準備
アッセイ培地を温め、24ウェルアッセイプレート第1行に0.5mLずつ添加した。培養角膜モデルLabCyte CORNEA-MODEL24(ロット番号LCC24-191014-A)を、24ウェルアッセイプレート第1行に移した。24ウェルアッセイプレートをCO2インキュベーターに入れ、一晩静置した。
PBSを温め、24ウェルアッセイプレート第3行に0.5mLずつ添加した。被験物質(粘膜洗浄用組成物)を培養カップの培養表皮に50μLのせ、全体に行き渡らせた。7分間暴露した後、培養角膜モデルを20回洗浄し、滅菌綿棒で水分を拭き取り、24ウェルアッセイプレート第3行に移した。
EBSSを37℃で温め、CellCounting Kit-8:EBSS=1:10(体積比)となるように希釈し、WST-8希釈液を調製し、24ウェルアッセイプレート第4行に0.3mLずつ添加した。培養角膜モデルの水分を滅菌綿棒で拭き取り、24ウェルアッセイプレート第4行に移した。ブランク用に、空きウェルにWST-8添加培地を入れておいた。CO2インキュベーターにプレートを入れ、3.5時間反応を行った。反応終了後、培養カップを取り出し、WST-8反応液200μLを96ウェルプレートに移した。なお、A1にブランク用培地200μLを入れた。マイクロプレートリーダーで、450nm及び650nmの吸光度を測定した。
450nmの吸光度から650nmの吸光度を差し引いた値を測定値とし、下記式に基づいて被験物質の性細胞率を計算した。結果を表2に示す。
表3に示す処方の液状の粘膜洗浄用組成物を調製した。それぞれの粘膜洗浄用組成物に用いられる乳酸材料及び乳酸ナトリウム材料は試験例と同様であり、表中の数値は、当該乳酸材料に含まれる乳酸の量及び当該乳酸材料に含まれる乳酸ナトリウムの量を示している。いずれの粘膜洗浄用組成物についても、刺激性が低く防腐性に優れており、膣粘膜に適用される場合には、細菌性膣症(BV)関連菌に対する選択抗菌も有していた。
Claims (5)
- (A)乳酸及び/又はその塩、(B)グリシン、並びに(C)酢酸及び/又はその塩を含有し、pHが3.8~6である粘膜洗浄用組成物。
- 前記(A)成分の含有量が総量で0.5~2重量%である、請求項1に記載の粘膜洗浄用組成物。
- 前記(B)成分の含有量が0.5~5重量%である、請求項1又は2に記載の粘膜洗浄用組成物。
- 前記(C)分の含有量が総量で0.1~1.5重量%である、請求項1~3のいずれかに記載の粘膜洗浄用組成物。
- 膣粘膜に用いられる、請求項1~4のいずれかに記載の粘膜洗浄用組成物。
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