JP7419243B2 - アフリカブタ熱ウイルスおよび古典的ブタ熱ウイルスの化学的緩和 - Google Patents
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Description
本願は、2018年3月3日に出願された「中鎖脂肪酸を用いたアフリカブタ熱ウイルス(ASFV)および古典的ブタ熱ウイルス(CSFV)などのウイルスの不活化(INACTIVATION OF VIRUSES SUCH AS AFRICAN SWINE FEVER VIRUS (ASFV) AND CLASSICAL SWINE FEVER VIRUS (CSFV) WITH MEDIUM CHAIN FATTY ACIDS)」という名称の米国仮特許出願第62/637,825号並びに2018年12月17日に出願された「アフリカブタ熱ウイルスの化学的緩和(CHEMICAL MITIGATION OF AFRICAN SWINE FEVER VIRUS)」という名称の米国仮特許出願第62/780,740号の優先件を主張するものである。
本発明は以下の通りである。
[1]動物飼料または動物飼料成分中のアフリカブタ熱ウイルスおよび/または古典的ブタ熱ウイルスの抑制方法であって、
前記飼料または飼料成分に化学的緩和剤を導入することを含んでなり、前記化学的緩和剤は中鎖脂肪酸および/または精油を含んでなり、
前記化学的緩和剤は、100重量%とする動物飼料または飼料成分の総重量に対して約0.125重量%~2重量%未満の含有率で導入される、方法。
[2]前記中鎖脂肪酸が、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、およびそれらの混合物からなる群から選択される、上記[1]に記載の方法。
[3]前記化学的緩和剤が、2種類以上の中鎖脂肪酸の混合物である、上記[1]または[2]に記載の方法。
[4]前記化学的緩和剤が、カプロン酸、カプリル酸、およびカプリン酸を含んでなる中鎖脂肪酸の混合物を含んでなる、上記[1]~[3]のいずれかに記載の方法。
[5]前記化学的緩和剤が、およそ等量のカプロン酸、カプリル酸、およびカプリン酸を含んでなる中鎖脂肪酸の混合物を含んでなる、上記[1]~[4]のいずれかに記載の方法。
[6]前記精油が、ニンニク含油樹脂、ウコン含油樹脂、トウガラシ含油樹脂、ローズマリー抽出物、ワイルドオレガノ精油、およびそれらの混合物からなる群から選択される、上記[1]~[5]のいずれかに記載の方法。
[7]前記化学的緩和剤が、中鎖脂肪酸の混合物と精油とを含んでなる、上記[1]~[6]のいずれかに記載の方法。
[8]前記動物飼料または動物飼料成分が、ブタ完全食、血粉、ブタ肉骨粉(MBM)、噴霧乾燥動物血漿、羽毛粉、鳥類血粉、家禽副産物粉、ビタミンD、塩酸リジン、塩化コリン、および大豆粕からなる群から選択される、上記[1]~[7]のいずれかに記載の方法。
[9]前記動物飼料または動物飼料成分が、ドライペットキブルであり、前記ドライペットキブルの表面に重硫酸ナトリウムを適用することをさらに含んでなる、上記[1]~[7]のいずれかに記載の方法。
[10]前記重硫酸ナトリウムが、100重量%とする動物飼料または飼料成分の総重量に対して約0.1重量%~約2重量%の含有率で前記ドライペットキブルの表面に適用される、上記[9]に記載の方法。
[11]動物飼料または動物飼料成分中のアフリカブタ熱ウイルスおよび/または古典的ブタ熱ウイルスの抑制において使用するための化学的緩和剤であって、中鎖脂肪酸および/または精油を含んでなる、化学的緩和剤。
[12]前記中鎖脂肪酸が、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、およびそれらの混合物からなる群から選択される、上記[11]に記載の化学的緩和剤。
[13]2種類以上の中鎖脂肪酸の混合物である、上記[1]または[12]に記載の化学的緩和剤。
[14]カプロン酸、カプリル酸、およびカプリン酸を含んでなる中鎖脂肪酸の混合物を含んでなる、上記[11]~[13]のいずれかに記載の化学的緩和剤。
[15]およそ等量のカプロン酸、カプリル酸、およびカプリン酸を含んでなる中鎖脂肪酸の混合物を含んでなる、上記[11]~[14]のいずれかに記載の化学的緩和剤。
[16]前記精油が、ニンニク含油樹脂、ウコン含油樹脂、トウガラシ含油樹脂、ローズマリー抽出物、ワイルドオレガノ精油、およびそれらの混合物からなる群から選択される、上記[11]~[15]のいずれかに記載の化学的緩和剤。
[17]中鎖脂肪酸の混合物と精油とを含んでなる、上記[11]~[16]のいずれかに記載の化学的緩和剤。
[18]およそ等量のニンニク含油樹脂、ウコン含油樹脂、トウガラシ含油樹脂、ローズマリー抽出物、およびワイルドオレガノ精油を含んでなる、上記[11]~[17]のいずれかに記載の化学的緩和剤。
[19]アフリカブタ熱ウイルスおよび/または古典的ブタ熱ウイルスに対する抵抗性を有する、処理された動物飼料または動物飼料成分であって、100重量%とする動物飼料または飼料成分の総重量に対して約0.125重量%~2重量%未満の化学的緩和剤を含んでなり、前記化学的緩和剤は中鎖脂肪酸および/または精油を含んでなり、ここで、前記動物飼料または動物成分はブタ完全食、血粉、ブタ肉骨粉(MBM)、噴霧乾燥動物血漿、羽毛粉、鳥類血粉、家禽副産物粉、ビタミンD、塩酸リジン、塩化コリン、大豆粕、ドライペットキブル、およびそれらの混合物からなる群から選択される、動物飼料または動物飼料成分。
[20]上記[19]に記載のアフリカブタ熱ウイルスおよび/または古典的ブタ熱ウイルスに対する抵抗性を有する処理された動物飼料または動物飼料成分であって、前記動物飼料または動物飼料成分がドライペットキブルであり、前記ドライペットキブルはその表面の重硫酸ナトリウムをさらに含んでなる、動物飼料または動物飼料成分。
種々の濃度の中鎖脂肪酸混合物(MCFA)をASFV(BA71v単離株)およびCSFV(Brescia単離株)と希釈および混合するためのプロトコールおよび手順を開発した。本研究は、それらの各細胞培養物、ベロ細胞およびブタ腎臓細胞で行った。第1段階として、MCFAを等容量のC6:C8:C10(カプロン酸:カプリル酸:カプリン酸)を1:1:1の容量比となるように混合することによって調製する。第2に、MCFA処理物を10%~0.625%の範囲の濃度で調製し、標準的な高濃度のウイルス(106TCID50/ml)と混合する。MCFAはこれらの実験に使用された細胞培養物を破壊せず、各アッセイにおいて陽性対照および陰性対照を含んでいたことが確認されている。予備的結果は、MCFAが10%~0.625%で試験した総ての用量でCSFVおよびASFVの両方を効果的に不活化することを示した。
アフリカブタ熱ウイルスの試験
特定のプロトコールおよび手順を用いて、20%DMSO中の種々の濃度の中鎖脂肪酸混合物をASFV(BA71v単離株)とベロ細胞において希釈および混合した。第1段階として、等容量のC6:C8:C10を20%DMSO中1:1:1の容量比となるように混合することによって中鎖脂肪酸を調製した。第2に、中鎖脂肪酸を2%~0.125%の範囲の濃度で調製し、標準的な高濃度ASFV(106TCID50/ml)と混合した。ウイルスの用量応答不活化を決定するために各アッセイに陽性対照を含めた。
古典的ブタ熱ウイルスの試験
細胞培養物中のCSFVに対するMCFAの効果を表4、ならびに図4および図5A~5Cに示す。種々のレベルの中鎖脂肪酸処理(1:1:1比のC6:C8:C10)を、細胞培養モデルにおいてCSFV Brescia単離株のウイルス力価の不活化または低減における有効性に関して試験した。10%~0.5%で試験したMCFAレベルは、CSFウイルス力価を、ブタ腎臓細胞での間接的蛍光抗体試験によって検出可能なレベルを下回るレベルに低減した。図5Bに示されるように、CSFVは、MCFA処理後に検出可能であった。CSFVウイルス力価の用量依存的低減が、0.4%~0.125%のレベルでMCFAに曝した後に示された。試験した最低のMCFA含有率(0.125%)は、緩和を行わなかった陽性対照と比較して、ウイルス力価に82.2%の低減をもたらした。
Claims (23)
- 動物飼料または動物飼料成分中のアフリカブタ熱ウイルスの抑制方法であって、
前記飼料または飼料成分に化学的緩和剤を導入することを含んでなり、前記化学的緩和剤は中鎖脂肪酸を含んでなり、
前記化学的緩和剤は、100重量%とする動物飼料または飼料成分の総重量に対して0.125重量%~2重量%未満の含有率で導入される、方法。 - 前記化学的緩和剤がさらに精油を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記中鎖脂肪酸が、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項1または2に記載の方法。
- 前記化学的緩和剤が、2種類以上の中鎖脂肪酸の混合物である、請求項1~3のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化学的緩和剤が、カプロン酸、カプリル酸、およびカプリン酸を含んでなる中鎖脂肪酸の混合物を含んでなる、請求項1~4のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化学的緩和剤が、およそ等量のカプロン酸、カプリル酸、およびカプリン酸を含んでなる中鎖脂肪酸の混合物を含んでなる、請求項1~5のいずれか一項に記載の方法。
- 前記精油が、ニンニク含油樹脂、ウコン含油樹脂、トウガラシ含油樹脂、ローズマリー抽出物、ワイルドオレガノ精油、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項2または請求項2を直接的または間接的に引用する請求項3~6のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化学的緩和剤が、中鎖脂肪酸の混合物と精油とを含んでなる、請求項1~7のいずれか一項に記載の方法。
- 前記動物飼料または動物飼料成分が、ブタ完全食、血粉、ブタ肉骨粉(MBM)、噴霧乾燥動物血漿、羽毛粉、鳥類血粉、家禽副産物粉、ビタミンD、塩酸リジン、塩化コリン、および大豆粕からなる群から選択される、請求項1~8のいずれか一項に記載の方法。
- 前記動物飼料または動物飼料成分が、ドライペットキブルであり、前記ドライペットキブルの表面に重硫酸ナトリウムを適用することをさらに含んでなる、請求項1~8のいずれか一項に記載の方法。
- 前記重硫酸ナトリウムが、100重量%とする動物飼料または飼料成分の総重量に対して0.1重量%~2重量%の含有率で前記ドライペットキブルの表面に適用される、請求項10に記載の方法。
- 動物飼料または動物飼料成分中のアフリカブタ熱ウイルスの抑制において使用するための化学的緩和剤であって、中鎖脂肪酸を含んでなる、化学的緩和剤。
- 前記化学的緩和剤がさらに精油を含む、請求項12に記載の化学的緩和剤。
- 前記中鎖脂肪酸が、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項12または13に記載の化学的緩和剤。
- 2種類以上の中鎖脂肪酸の混合物である、請求項12~14のいずれか一項に記載の化学的緩和剤。
- カプロン酸、カプリル酸、およびカプリン酸を含んでなる中鎖脂肪酸の混合物を含んでなる、請求項12~15のいずれか一項に記載の化学的緩和剤。
- およそ等量のカプロン酸、カプリル酸、およびカプリン酸を含んでなる中鎖脂肪酸の混合物を含んでなる、請求項12~16のいずれか一項に記載の化学的緩和剤。
- 前記精油が、ニンニク含油樹脂、ウコン含油樹脂、トウガラシ含油樹脂、ローズマリー抽出物、ワイルドオレガノ精油、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項13または請求項13を直接的または間接的に引用する請求項14~17のいずれか一項に記載の化学的緩和剤。
- 中鎖脂肪酸の混合物と精油とを含んでなる、請求項12~18のいずれか一項に記載の化学的緩和剤。
- およそ等量のニンニク含油樹脂、ウコン含油樹脂、トウガラシ含油樹脂、ローズマリー抽出物、およびワイルドオレガノ精油を含んでなる、請求項12~19のいずれか一項に記載の化学的緩和剤。
- アフリカブタ熱ウイルスに対する抵抗性を有する、処理された動物飼料または動物飼料成分であって、100重量%とする動物飼料または飼料成分の総重量に対して0.125重量%~2重量%未満の化学的緩和剤を含んでなり、前記化学的緩和剤は中鎖脂肪酸を含んでなり、ここで、前記動物飼料または動物成分はブタ完全食、血粉、ブタ肉骨粉(MBM)、噴霧乾燥動物血漿、羽毛粉、鳥類血粉、家禽副産物粉、ビタミンD、塩酸リジン、塩化コリン、大豆粕、ドライペットキブル、およびそれらの混合物からなる群から選択される、動物飼料または動物飼料成分。
- 前記化学的緩和剤がさらに精油を含む、請求項21に記載の処理された動物飼料または動物飼料成分。
- 請求項21に記載のアフリカブタ熱ウイルスに対する抵抗性を有する処理された動物飼料または動物飼料成分であって、前記動物飼料または動物飼料成分がドライペットキブルであり、前記ドライペットキブルはその表面の重硫酸ナトリウムをさらに含んでなる、動物飼料または動物飼料成分。
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