JP7309695B2 - ポテックスウイルスベクターの安定性を改善する方法 - Google Patents
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Description
(1)目的とするタンパク質を植物において発現させるためのポテックスウイルスベクターを作製する方法であって、
前記目的とするタンパク質をコードする第2のORFを含み、かつ、前記目的とするタンパク質を第1の異種核酸配列においてコードする第1のORFと比較して、増大したGC含量を前記第2のORFにおいて有する第2の異種核酸配列を作製する工程、及び
以下のセグメント、(i)ポテックスウイルスのRNA依存性RNAポリメラーゼをコードする核酸配列と、(ii)ポテックスウイルスの三重遺伝子ブロックを含む核酸配列又はコードする核酸配列と、(iii)前記第2の異種核酸配列、又は前記第2のORFを含むその一部分とを含む前記ポテックスウイルスベクターを提供する工程(ただし、前記一部分は前記第2のORFからなる場合がある)
を含む方法。
前記目的とするタンパク質をコードする第2のORFを含み、かつ、前記目的とするタンパク質を第1の異種核酸配列においてコードする第1のORFと比較して、増大したGC含量を前記第2のORFにおいて有する第2の異種核酸配列を作製する工程、及び
以下のセグメント、(i)ポテックスウイルスのRNA依存性RNAポリメラーゼをコードする核酸配列と、(ii)ポテックスウイルスの三重遺伝子ブロックを含む核酸配列又はコードする核酸配列と、(iii)前記第2のORFとを含む前記ポテックスウイルスベクターを提供する工程
を含む方法。
前記目的とするタンパク質をコードする第2のORFを含み、かつ、前記目的とするタンパク質を第1の異種核酸配列においてコードする第1のORFと比較して、増大したGC含量を第2のORFにおいて有する第2の異種核酸配列を作製する工程、及び
前記ポテックスウイルスレプリコン、あるいは前記ポテックスウイルスレプリコンを含むポテックスウイルベクター又はコードするポテックスウイルベクターを提供する工程であって、前記ポテックスウイルスレプリコンが、以下のセグメント、(i)ポテックスウイルスのRNA依存性RNAポリメラーゼをコードする核酸配列と、(ii)ポテックスウイルスの三重遺伝子ブロックを含む核酸配列と、(iii)前記第2の異種核酸配列、又は前記第2のORFを含むその一部分とを含む、工程(ただし、前記一部分は前記第2のORFからなる場合がある)
を含む方法。
前記目的とするタンパク質をコードする第2のORFを含み、かつ、前記タンパク質を第1の異種核酸配列においてコードする第1のORFと比較して、増大したGC含量を第2のORFにおいて有する第2の異種核酸配列を作製する工程、及び
前記ポテックスウイルスレプリコン、あるいは前記ポテックスウイルスレプリコンを含むポテックスウイルベクター又はコードするポテックスウイルベクターを提供する工程であって、前記ポテックスウイルスレプリコンが、以下のセグメント、(i)ポテックスウイルスのRNA依存性RNAポリメラーゼをコードする核酸配列と、(ii)ポテックスウイルスの三重遺伝子ブロックを含む核酸配列と、(iii)前記第2のORFとを含む、工程
を含む方法。
前記タンパク質を第1の異種核酸配列においてコードする第1のORFのGC含量を増大させ、それにより、前記タンパク質をコードし、かつ、増大したGC含量を有する第2のORFを含む第2の異種核酸配列を得る工程、及び
前記第2の異種核酸配列、又は前記第2のORFを含有するその一部分を、(i)ポテックスウイルスのRNA依存性RNAポリメラーゼをコードする核酸配列と、(ii)ポテックスウイルスの三重遺伝子ブロックを含む核酸配列又はコードする核酸配列とを含む核酸に挿入して、前記ウイルスレプリコンを含むポテックスウイルスベクター又はコードするポテックスウイルスベクターを作製する工程であって、前記ポテックスウイルスベクターが前記第2の異種核酸配列、又は前記第2のORFを含むその一部分を含む、工程
を含む方法。
前記ORFが、少なくとも200個、最大でも400個のヌクレオチドからなり、かつ、少なくとも50%のGC含量を有する;又は
前記ORFが、少なくとも401個、最大でも800個のヌクレオチドからなり、かつ、少なくとも55%のGC含量を有する;及び/又は
前記ORFが、少なくとも801個のヌクレオチドからなり、かつ、少なくとも58%のGC含量を有する、核酸。
前記ORFが、少なくとも100個、最大でも500個のヌクレオチドからなり、かつ、少なくとも50%のGC含量を有する;又は
前記ORFが、少なくとも501個、最大でも1000個のヌクレオチドからなり、かつ、少なくとも55%のGC含量を有する;及び/又は
前記ORFが、少なくとも1001個のヌクレオチドからなり、かつ、少なくとも58%のGC含量を有する、核酸。
(i)ポテックスウイルスのRNA依存性RNAポリメラーゼ(RdRp)をコードする核酸配列;
(ii)下記を含む核酸配列:
(a)ポテックスウイルスの三重遺伝子ブロック、及び
(b)必要な場合には、ポテックスウイルスコートタンパク質をコードする配列;又はトバモウイルス移行タンパク質をコードする配列;ならびに
(iii)目的とするタンパク質をコードするORFを含む異種核酸配列。
(i)ポテックスウイルスのRNA依存性RNAポリメラーゼ(RdRp)をコードする核酸配列;
(ii)核酸配列であって、
(a)ポテックスウイルスの三重遺伝子ブロックを含む、又はコードする、かつ
(b)必要な場合には、ポテックスウイルスコートタンパク質をコードする配列を含む;又はトバモウイルス移行タンパク質をコードする配列を含む
核酸配列;及び
(iii)目的とするタンパク質をコードするORFを含む異種核酸配列。
植物において発現させられる目的とするタンパク質をコードするポテックスウイルスレプリコンの前記植物における遠距離移行のための能力を改善する方法であって、
前記目的とするタンパク質をコードする第2のORFを含み、かつ、前記目的とするタンパク質を第1の異種核酸配列においてコードする第1のORFと比較して、増大したGC含量を第2のORFにおいて有する第2の異種核酸配列を作製する工程、及び
前記ポテックスウイルスレプリコン、あるいは前記ポテックスウイルスレプリコンを含むポテックスウイルスベクター又はコードするポテックスウイルスベクターを提供する工程であって、前記ポテックスウイルスレプリコンが、以下のセグメント、(i)ポテックスウイルスのRNA依存性RNAポリメラーゼをコードする核酸配列と、(ii)(a)ポテックスウイルスの三重遺伝子ブロック、及び(b)ポテックスウイルスコートタンパク質をコードする核酸配列又はトバモウイルス移行タンパク質をコードする核酸配列を含む核酸配列と、(iii)前記第2のORF、前記第2の異種核酸配列、又は前記第2のORFを含む後者の一部分とを含む、工程
を含む方法;
植物において発現させられる目的とするタンパク質をコードするポテックスウイルスレプリコンの前記植物における遠距離移行のための能力を改善する方法であって、
前記目的とするタンパク質をコードする第2のORFを含み、かつ、前記目的とするタンパク質を第1の異種核酸配列においてコードする第1のORFと比較して、増大したGC含量を第2のORFにおいて有する第2の異種核酸配列を作製する工程、及び
前記ポテックスウイルスレプリコン、あるいは前記ポテックスウイルスレプリコンを含むポテックスウイルスベクター又はコードするポテックスウイルスベクターを提供する工程であって、前記ポテックスウイルスレプリコンが、以下のセグメント、(i)ポテックスウイルスのRNA依存性RNAポリメラーゼをコードする核酸配列と、(ii)(a)ポテックスウイルスの三重遺伝子ブロック、及び(b)ポテックスウイルスコートタンパク質をコードする核酸配列又はトバモウイルス移行タンパク質をコードする核酸配列を含む核酸配列と、(iii)前記第2のORF、前記第2の異種核酸配列、又は前記第2のORFを含む後者の一部分とを含む、工程
を含む方法。
前記タンパク質を第1の異種核酸配列においてコードする第1のORFのGC含量を増大させ、それにより、前記タンパク質をコードし、かつ、増大したGC含量を有する第2のORFを含む第2の異種核酸配列を得る工程、及び
前記第2の異種核酸配列、又は前記第2のORFを含有するその一部分を、(i)ポテックスウイルスのRNA依存性RNAポリメラーゼをコードする核酸配列と、(ii)ポテックスウイルスの三重遺伝子ブロックを含む核酸又はコードする核酸とを含む核酸に挿入して、前記RNAレプリコンを含むポテックスウイルスベクター又はコードするポテックスウイルスベクターを作製する工程であって、前記ポテックスウイルスベクターが前記第2の異種核酸、又は前記第2のORFを含むその一部分を含む、工程。
前記タンパク質をコードする第2のORFを含み、かつ、前記タンパク質を第1の異種核酸配列においてコードする第1のORFと比較して、増大したGC含量を第2のORFにおいて有する第2の異種核酸配列を作製する工程、及び
前記ポテックスウイルスRNAレプリコン、あるいは前記ポテックスウイルスRNAレプリコンを含むポテックスウイルベクター又はコードするポテックスウイルベクターを提供する工程であって、前記ポテックスウイルスRNAレプリコンが、以下のセグメント、(i)ポテックスウイルスのRNA依存性RNAポリメラーゼをコードする核酸配列と、(ii)ポテックスウイルスの三重遺伝子ブロックを含む核酸配列と、(iii)前記第2の異種核酸、又は前記第2のORFを含むその一部分とを含む、工程。
例1:プラスミド構築物
PVXに基づく組み立てられたウイルスベクターのpNMD670及びpNMD4300(図1)を、目的とするDNAインサートのクローニングのために使用した。pNMD4300は、国際公開第2012/019660号パンフレットに記載されるpNMD670構築物の改変型である。pNMD670とは対照的に、pNMD4300は、T-DNA移入の効率を増大させるためにプラスミド骨格に挿入される、アグロバクテリウムツメファシエンス(Agrobacterium tumefaciens)のLBA4404株からのvirG N54D変異遺伝子配列(GenBankアクセション番号CP007228、ヌクレオチド位置161000~161725)を含有する。
AtFT、CaDREB-LP1、AmROS1、GmLOG1、SlLOG1、sGFP、SIGR、SIDREB1、SIOVATE、SlSUN、GUS及びSlWoollyのコード配列(合計で12個)をpNMD4300クローニングベクターにサブクローニングした(表1)。sGFPを除くそれらのすべてが、対応する生物からの生来型配列であった。sGFPは、発現効率における実質的な増大をもたらした、高発現のヒトタンパク質の好んで使用されるコドンに一致するように変更されるオワンクラゲ(Aequorea victoria)由来の緑色蛍光タンパク質のための合成コード配列である(Haas et al 1996;Chiu et al 1996)。
GC含量/長さ比=(GC含量(%)/長さ(bp)×100。
トマト(Solanum lycopersicum)のアントシアニン1(SlANT1)遺伝子(AY348870.1)はMYB転写因子アントシアニン1(SlANT1)(AAQ55181)をコードする。ANT1転写因子は、アントシアニンの蓄積を引き起こす生合成経路を活性化する;ANT1遺伝子を過剰発現する植物は、アントシアニンが蓄積するために非常に濃い紫色となる(Mathews et al 2003)。
インサートのGC含量における低下がPVXベクターの不安定性をもたらすかどうかもまた分析した。
配列表11 <223>GUS、ヌクレオチド交換:G835C及びG903A
配列表14 <223>タバコ(Nicotiana tabacum)のコドン使用頻度を有するSlANT1
配列表15 <223>シロイヌナズナ(Arabidopsis thaliana)のコドン使用頻度を有するSlANT1
配列表16 <223>ジャガイモウイルスXのコドン使用頻度を有するSlANT1
配列表17 <223>ヒト(Homo sapiens)のコドン使用頻度を有するSlANT1
配列表18 <223>イネ(Oryza sativa)のコドン使用頻度を有するSlANT1
配列表19 <223>オオムギ(Hordeum vulgare)のコドン使用頻度を有するSlANT1
配列表20 <223>ビフィズス菌(Bifidobacterium)のコドン使用頻度を有するSlANT1
配列表21 <223>イネ(Oryza sativa)のコドン使用頻度を有するSlLOG1
配列表22 <223>イネ(Oryza sativa)のコドン使用頻度を有するSlOVATE
配列表25 <223>オリゴヌクレオチド
配列表26 <223>オリゴヌクレオチド
配列表27 <223>BsaI切断部位
<223>nは、a、c、g又はtである
配列表28 <223>ドナー/アクセプタースプライシング部位
配列表38 <223>タバコ(Nicotiana tabacum)のコドン使用頻度を有するsGFPのコード配列
Claims (15)
- 以下を含む、目的とするタンパク質を植物において発現させるためのポテックスウイルスベクターを作製する方法
前記目的とするタンパク質をコードする第2のORFを含み、かつ、前記タンパク質を第1の異種核酸配列においてコードする第1のORFと比較して、増大したGC含量を前記第2のORFにおいて有する第2の異種核酸配列を作製する工程、及び
以下のセグメントを含む前記ポテックスウイルスベクターを提供する工程、
(i)ポテックスウイルスのRNA依存性RNAポリメラーゼをコードする核酸配列、 (ii)(ii-a)ポテックスウイルスの三重遺伝子ブロックを含む核酸配列又はコードする核酸配列、及び(ii-b)ポテックスウイルスコートタンパク質をコードする核酸配列又はトバモウイルス移行タンパク質をコードする核酸配列、ならびに
(iii)前記第2の異種核酸配列、又は前記第2のORFを含むその一部分、ただし、
第2のORFは、少なくとも200個、最大で400個のヌクレオチドからなり、GC含量として少なくとも50%を有するか、もしくは、
第2のORFは、少なくとも401個、最大で800個のヌクレオチドからなり、GC含量として少なくとも55%を有するか、もしくは、
第2のORFは、少なくとも801個のヌクレオチド、からなり、GC含量として少なくとも58%を有するか、もしくは、
第2のORFは、少なくとも100個、最大で500個のヌクレオチドからなり、GC含量として少なくとも50%を有するか、もしくは、
第2のORFは、少なくとも501個、最大で1000個のヌクレオチドからなり、GC含量として少なくとも55%を有するか、及び/又は、
第2のORFは、少なくとも1001個のヌクレオチドからなり、GC含量として少なくとも58%を有する。 - 下記を含む、植物において発現させられる目的とするタンパク質をコードするポテックスウイルスレプリコンの前記植物における遠距離移行のための能力を改善する方法
前記目的とするタンパク質をコードする第2のORFを含み、かつ、前記目的とするタンパク質を第1の異種核酸配列においてコードする第1のORFと比較して、増大したGC含量を前記第2のORFにおいて有する第2の異種核酸配列を作製する工程、及び
前記ポテックスウイルスレプリコン、あるいは前記ポテックスウイルスレプリコンを含むポテックスウイルベクター又はコードするポテックスウイルベクターを提供する工程であって、前記ポテックスウイルスレプリコンが、以下のセグメントを含む工程:
(i)ポテックスウイルスのRNA依存性RNAポリメラーゼをコードする核酸配列 、
(ii)(ii-a)ポテックスウイルスの三重遺伝子ブロック、及び(ii-b)ポテックスウイルスコートタンパク質をコードする核酸配列、又はトバモウイルス移行タンパク質をコードする核酸配列を含む核酸配列、
(iii)前記第2の異種核酸配列又は前記第2のORFを含むその一部分、ただし、
第2のORFは、少なくとも200個、最大で400個のヌクレオチドからなり、GC含量として少なくとも50%を有するか、もしくは、
第2のORFは、少なくとも401個、最大で800個のヌクレオチドからなり、GC含量として少なくとも55%を有するか、もしくは、
第2のORFは、少なくとも801個のヌクレオチド、からなり、GC含量として少なくとも58%を有するか、もしくは、
第2のORFは、少なくとも100個、最大で500個のヌクレオチドからなり、GC含量として少なくとも50%を有するか、もしくは、
第2のORFは、少なくとも501個、最大で1000個のヌクレオチドからなり、GC含量として少なくとも55%を有するか、及び/又は、
第2のORFは、少なくとも1001個のヌクレオチドからなり、GC含量として少なくとも58%を有する。 - ポテックスウイルスベクター又はポテックスウイルスレプリコンを提供する工程が、第2の異種核酸配列、又は第2のORFを含むその一部分を、(i)ポテックスウイルスのRNA依存性RNAポリメラーゼをコードする核酸配列、及び(ii)ポテックスウイルスの三重遺伝子ブロックをコードする核酸配列とを含む核酸に挿入して、前記ポテックスウイルスベクター、あるいは前記第2の異種核酸配列、又は前記第2のORFを含むその一部分を含む前記ポテックスウイルスレプリコンを作製する工程を含む、請求項1又は2に記載の方法。
- 目的とするタンパク質を植物又は植物組織において発現させるための達成方法であって、請求項1又は2に記載の方法に従うポテックスウイルスベクターを作製する工程、及び作製されたポテックスウイルスベクターを前記植物の少なくとも一部に与える工程を含む、達成方法。
- 植物が、タバコ属(Nicotiana)の種(例えば、ベンサミアナタバコ(Nicotiana benthamiana)及びタバコ(Nicotiana tabacum)など)、トマト、ジャガイモ、コショウ、ナス、ダイズ、ペチュニア(Petunia hybrida)、セイヨウアブラナ(Brassica napus)、ブラシカカンペストリス(Brassica campestris)、カラシナ(Brassica juncea)、クレス(cress)、ルッコラ、カラシ、イチゴ、ホウレンソウ、ケノポジウムカピタツム(Chenopodium capitatum)、アルファルファ、レタス、ヒマワリ、ジャガイモ、キュウリ、トウモロコシ、コムギ及びイネから選択される、請求項1~4のいずれかに記載の方法又は達成方法。
- タバコ属(Nicotiana)の種がベンサミアナタバコ(Nicotiana benthamiana)又はタバコ(Nicotiana tabacum)である、請求項5に記載の方法又は達成方法。
- 以下を含む、植物において発現させられる目的とするタンパク質をコードするポテックスウイルスレプリコンの前記植物における遠距離移行のための能力を改善する方法
前記タンパク質を第1の異種核酸配列においてコードする第1のORFのGC含量を増大させ、それにより、前記タンパク質をコードし、かつ、増大したGC含量を有する第2のORFを含む第2の異種核酸配列を得る工程、及び
前記第2の異種核酸配列、又は前記第2のORFを含有するその一部分を、
(i)ポテックスウイルスのRNA依存性RNAポリメラーゼをコードする核酸配列、及び
(ii)(ii-a)ポテックスウイルスの三重遺伝子ブロックを含む核酸配列を含むか又はコードする核酸配列、及び(ii-b)ポテックスウイルスコートタンパク質をコードする核酸配列又はトバモウイルス移行タンパク質をコードする核酸配列とを含む核酸に挿入して、前記ウイルスレプリコンを含むポテックスウイルスベクター又はコードするポテックスウイルスベクターを作製する工程、前記ポテックスウイルスベクターは前記第2の異種核酸配列、又は前記第2のORFを含むその一部分を含む、ただし、
第2のORFは、少なくとも200個、最大で400個のヌクレオチドからなり、GC含量として少なくとも50%を有するか、もしくは、
第2のORFは、少なくとも401個、最大で800個のヌクレオチドからなり、GC含量として少なくとも55%を有するか、もしくは、
第2のORFは、少なくとも801個のヌクレオチド、からなり、GC含量として少なくとも58%を有するか、もしくは、
第2のORFは、少なくとも100個、最大で500個のヌクレオチドからなり、GC含量として少なくとも50%を有するか、もしくは、
第2のORFは、少なくとも501個、最大で1000個のヌクレオチドからなり、GC含量として少なくとも55%を有するか、及び/又は、
第2のORFは、少なくとも1001個のヌクレオチドからなり、GC含量として少なくとも58%を有する。 - 以下のセグメントを含むポテックスウイルスベクター:
(i)ポテックスウイルスのRNA依存性RNAポリメラーゼをコードする核酸配列、
(ii)(ii-a)ポテックスウイルスの三重遺伝子ブロックを含む核酸配列又はコードする核酸配列、及び(ii-b)ポテックスウイルスコートタンパク質をコードする核酸配列又はトバモウイルス移行タンパク質をコードする核酸配列、ならびに
(iii)目的とするタンパク質をコードするORFを含む異種核酸配列、ただし、
前記ORFは、少なくとも200個、最大で400個のヌクレオチドからなり、GC含量として少なくとも50%を有するか、もしくは、
前記ORFは、少なくとも401個、最大で800個のヌクレオチドからなり、GC含量として少なくとも55%を有するか、もしくは、
前記ORFは、少なくとも801個のヌクレオチド、からなり、GC含量として少なくとも58%を有するか、もしくは、
前記ORFは、少なくとも100個、最大で500個のヌクレオチドからなり、GC含量として少なくとも50%を有するか、もしくは、
前記ORFは、少なくとも501個、最大で1000個のヌクレオチドからなり、GC含量として少なくとも55%を有するか、及び/又は、
前記ORFは、少なくとも1001個のヌクレオチドからなり、GC含量として少なくとも58%を有する。 - 以下のセグメントを含む核酸:
(i)ポテックスウイルスのRNA依存性RNAポリメラーゼをコードする核酸配列、
(ii)(ii-a)ポテックスウイルスの三重遺伝子ブロックを含む核酸配列又はコードする核酸配列、及び(ii-b)ポテックスウイルスコートタンパク質をコードする核酸配列又はトバモウイルス移行タンパク質をコードする核酸配列、ならびに
(iii)目的とするタンパク質をコードするORFを含む異種核酸配列、
前記ORFが、少なくとも200個、最大でも400個のヌクレオチドからなり、かつ少なくとも50%のGC含量を有し、又は
前記ORFが、少なくとも401個、最大でも800個のヌクレオチドからなり、かつ少なくとも55%のGC含量を有し、及び/又は
前記ORFが、少なくとも801個のヌクレオチドからなり、かつ少なくとも58%のGC含量を有し、
前記目的とするタンパク質が植物ウイルスタンパク質でない、又は前記目的とするタンパク質が、植物ウイルスに対して異種であるタンパク質である。 - 以下のセグメントを含む核酸:
(i)ポテックスウイルスのRNA依存性RNAポリメラーゼをコードする核酸配列、(ii)(ii-a)ポテックスウイルスの三重遺伝子ブロックを含む核酸配列又はコードする核酸配列、及び(ii-b)ポテックスウイルスコートタンパク質をコードする核酸又はトバモウイルス移行タンパク質をコードする核酸、ならびに
(iii)目的とするタンパク質をコードするORFを含む異種核酸配列、
前記ORFが、少なくとも100個、最大でも500個のヌクレオチドからなり、かつ少なくとも50%のGC含量を有し、又は
前記ORFが、少なくとも501個、最大でも1000個のヌクレオチドからなり、かつ少なくとも55%のGC含量を有し、及び/又は
前記ORFが、少なくとも1001個のヌクレオチドからなり、かつ少なくとも58%のGC含量を有し、
前記目的とするタンパク質が植物ウイルスタンパク質でない、又は前記目的とするタンパク質が、植物ウイルスに対して異種であるタンパク質である。 - 第1の核酸と第2の核酸とを含み、前記第1の核酸は請求項9又は10で定義されるセグメント(i)及びセグメント(ii)を含み、前記第2の核酸は請求項9又は10で定義されるセグメント(iii)を含む、組合せ又はキット。
- 第1の核酸がセグメント(ii)の下流側において部位特異的リコンビナーゼによって認識可能である第1の部位特異的組換え部位を有し、
第2の核酸がセグメント(iii)の上流側において前記部位特異的リコンビナーゼによって認識可能である第2の部位特異的組換え部位を有し、前記第1の部位特異的組換え部位と前記第2の部位特異的組換え部位との間での部位特異的組換え及び請求項9又は10に記載の核酸の形成を可能にする、請求項11に記載の組合せ又はキット。 - 目的とする異種核酸配列にコードされる目的とするタンパク質を植物又は植物組織において発現させる方法であって、
前記植物又は植物組織に、前記目的とするタンパク質をコードする前記目的とする異種核酸配列を含む請求項9又は10に記載の核酸、又は前記目的とするタンパク質をコードする前記目的とする異種核酸配列を含む請求項8に記載のポテックスウイルスベクターを与えること;及び
前記目的とするタンパク質を前記目的とする異種核酸配列から発現させること
を含む、方法。 - 請求項9もしくは10において定義される核酸、又は請求項8に記載のポテックスウイルスベクターの使用であって、異種核酸によってコードされるタンパク質を発現させるための、及び植物におけるポテックスウイルスベクターの改善された遠距離移行を達成するための使用。
- 目的とするタンパク質が植物ウイルスタンパク質でない、又は目的とするタンパク質が、植物ウイルスに対して異種であるタンパク質である、請求項1又は2に記載の方法によって得られたポテックスウイルスベクター。
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