JP7270912B2

JP7270912B2 - アドレノメデュリン濃度変動による予後予測の情報提供方法及びその試薬

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Publication number: JP7270912B2
Application number: JP2019519602A
Authority: JP
Inventors: 和雄北村; 勇男恒吉; 豊明丸田; 哲與那覇; 浩二五十嵐; 怜史島本
Original assignee: University of Miyazaki; Tosoh Corp
Current assignee: University of Miyazaki; Tosoh Corp
Priority date: 2017-05-22
Filing date: 2018-05-17
Publication date: 2023-05-11
Anticipated expiration: 2038-05-17
Also published as: WO2018216580A1; JPWO2018216580A1

Description

本発明はヒト検体中のアドレノメデュリン量を測定し、その濃度変動を指標に急性機能不全患者に対し予後を予測する方法および検査薬に関する。

急性機能不全患者に対し治療介入する上で、治療介入方法や治療管理の方法を決定し患者の予後を判定することは極めて重要である。患者の予後を予測する指標としてはＡＰＡＣＨＥＩＩスコア（ＡｃｕｔｅＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙａｎｄＣｈｒｏｎｉｃＨｅａｌｔｈＥｖａｌｕａｔｉｏｎＩＩＳｃｏｒｅ）ならびにＳＯＦＡスコア（ＳｅｑｕｅｎｔｉａｌＯｒｇａｎＦａｉｌｕｒｅＡｓｓｅｓｍｅｎｔＳｃｏｒｅ）が代表である。ＳＯＦＡスコアやＡＰＡＣＨＥＩＩスコアは複数のパラメーターから算出されるスコアリング方法である。ＳＯＦＡスコアは、呼吸器を酸素比（ＰａＯ_２／ＦｉＯ_２）で、凝固系を血小板数で、肝機能をビリルビン値で、心血管系を血圧やエピネフリン投与量で、中枢神経をＧｌａｓｇｏｗＣｏｍａＳｃａｌｅで、腎機能をクレアチニンもしくは尿量で、それぞれ５段階に分類しスコアリングする。さらに、ＧｌａｓｇｏｗＣｏｍａＳｃａｌｅは、開眼機能、言語機能、及び運動機能からなる３機能のスコアリングの合計値をもってスコアリングがなされる。ＡＰＡＣＨＥＩＩスコアは、さらに複数のパラメーターからスコアリングがなされる。

集中治療室（ＩＣＵ）においてこれらスコアの取得は可能であるが、パラメーターが多く煩雑であること、医師の主観に左右されるパラメーターも存在するため医師間差が危惧されること、治療介入により大きく変動するパラメーターが存在すること、等の問題点がある。また、ＩＣＵ以外ではこれらスコアを取得することは容易ではなく、ＳＯＦＡスコアやＡＰＡＣＨＥＩＩスコアに置き換わる簡便な診断マーカーが切望されている。

急性機能不全患者を敗血症に限れば予後予測が可能なマーカーとしてプロカルシトニン（以下、ＰＣＴと記載する場合もある）、アドレノメデュリン（非特許文献１、２）が報告されている。これら報告は単点測定値をある閾値をもって弁別した際の予後予測結果であり、実際の臨床現場では採血が行われた時点での患者の状態は軽度から重度まで非常に幅広く、採血時点での各マーカーの濃度幅は非常に大きいため単点測定値では予後予測精度が十分でないことが予想される。さらに、透析、血液浄化、侵襲性の高い手術などの治療介入が行われるとこれらマーカーを含めＳＯＦＡスコアなども大きく変動するため、単点測定での診断精度が確保できないことが予想される。

アドレノメデュリンは北村らによりヒト褐色細胞腫組織から発見された血管拡張性ペプチドであり、５２個のアミノ酸からなり、最終的にＣ末端がアミド化され生理活性を有した成熟型アドレノメデュリンとなる（非特許文献３、特許文献１）。ヒトアドレノメデュリン前駆体は１８５個のアミノ酸からなり、Ｎ末端側より２１アミノ酸からなるシグナルペプチド、２０個のアミノ酸からなるプロアドレノメデュリン（ＰＡＭＰ）、５４アミノ酸からなる中間領域プロアドレノメデュリン（ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ）、５２アミノ酸からなるアドレノメデュリン（以下、ＡＭと記載する場合もある。配列番号１に記載のアミノ酸配列から成るもの。）、及び３８アミノ酸からなるＣ末端アドレノメデュリンで構成される。ＡＭは前駆体であるｐｒｅｐｒｏＡＭからプロセッシングを受け切断された後、Ｃ末端にグリシンが付加した状態の中間体アドレノメデュリン（以下、ｉＡＭと記載する場合もある。配列番号１に記載のアミノ酸配列のＣ末端にグリシン（Ｇｌｙ）が付加したもの。）を経て、アミド化酵素によりＣ末端がアミド（－ＣＯＮＨ_２）の成熟型アドレノメデュリン（以下、ｍＡＭと記載する場合もある。配列番号１に記載のアミノ酸配列のＣ末端がアミド化（－ＣＯＮＨ_２）したもの。）となる。
ＰＡＭＰならびにｍＡＭはそのレセプターを介した生理活性を有することから血清中での消失が通常の代謝に加えレセプターによる取込みにより極めて短い特徴を有している。ＡＭの生理活性は血行動態改善、臓器保護作用、抗炎症作用、組織再生等の報告があるが未だ不明な点も多い。またアドレノメデュリンは血中半減期が極めて短いことから血清マーカーとしての利用が困難（非特許文献４、５）とされていた。血清中のＡＭ濃度が変動する疾患としては、敗血症、心疾患、炎症性腸疾患等の報告があり、また単点測定で敗血症の予後予測が可能であることを示す報告もある。

本発明者らは、敗血症、あるいは敗血症が疑われる患者等の急性機能不全患者に対して各種パラメーター値と患者予後の関係を検討したところ、単点測定ではＳＯＦＡスコアが最も予後予測能が高いこと、ならびにアドレノメデュリンは単点測定では論文報告にあるような予後予測が困難であるという結論を得た。

特開平７－１９６６９３号公報

Ｉｎｔ．Ｊ．Ａｄｖ．Ｒｅｓ．Ｂｉｏｌ．Ｓｃｉ．２０１６；３：１３６－１４１Ｊ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ２０１７；３８：６８－７２Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１９９３；１９２：５５３－５６０Ｊ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．１９９７；８２：９５－１００Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．１９９８；４４：５７１－５７７

これまで急性機能不全患者に対し、ＡＰＡＣＨＥＩＩスコアやＳＯＦＡスコアの代用となる簡便な予後予測マーカーが切望されていた。本発明の目的は、患者予後を簡便に予測する方法を提供することにある。

本発明者らは、敗血症が疑われるような急性機能不全患者に対し経時的に各種パラメーターを解析した結果、アドレノメデュリンの濃度変動が最も良好な予後予測因子であることを見いだし、本発明に到達した。即ち本発明は下記の発明を包含する。

（１）急性機能不全患者の予後を予測するための情報を提供する方法であって、下記のステップを含む方法：
（ａ）前記患者に由来する検体中のアドレノメデュリン類量を測定するステップ、
（ｂ）ステップ（ａ）と同じ患者に由来する検体であって、ステップ（ａ）の検体を採取後に採取された検体中のアドレノメデュリン類量を測定するステップ、
（ｃ）前記（ａ）の測定値と前記（ｂ）の測定値との差分を求めるステップ、及び
（ｄ－１）前記（ｃ）の差分において、（ｂ）の測定値から（ａ）の測定値を差引いた値が正の場合、もしくは（ａ）の測定値から（ｂ）の測定値を差引いた値が負の場合は、前記患者の予後が不良であると予測することを関連づけるステップ、及び／又は
（ｄ－２）前記（ｃ）の差分において、（ｂ）の測定値から（ａ）の測定値を差引いた値が負の場合、もしくは（ａ）の測定値から（ｂ）の測定値を差引いた値が正の場合は、前記患者の予後が良好であると予測することを関連づけるステップ。

（２）前記（ａ）の検体が治療介入前の検体であり、前記（ｂ）の検体が治療介入後の検体である、（１）に記載の方法。
（３）治療介入が手術である、（２）に記載の方法。
（４）患者が敗血症あるいは敗血症が疑われる患者である、（１）～（３）いずれかに記載の方法。
（５）ステップ（ｂ）の検体が、治療介入後７日以内に採取されたものである、（２）～（４）いずれかに記載の方法。
（６）ステップ（ｂ）の検体が、治療介入後４８時間以内に採取されたものである、（２）～（５）いずれかに記載の方法。
（７）ステップ（ｂ）の検体が、治療介入後２４時間以内に採取されたものである、（２）～（６）いずれかに記載の方法。
（８）ステップ（ｂ）の検体が、治療介入後１２時間以内に採取されたものである、（２）～（７）いずれかに記載の方法。
（９）治療介入してから４週間以内の予後を予測する、（１）～（８）いずれかに記載の方法。
（１０）アドレノメデュリン類が配列番号１に記載のアミノ酸配列を含む、（１）～（９）いずれかに記載の方法。
（１１）アドレノメデュリン類が、配列番号１に記載のアミノ酸配列から成るアドレノメデュリン、中間体アドレノメデュリン、成熟型アドレノメデュリン、及びアドレノメデュリン部分ペプチドからなる群から選択される一種又は二種以上である、（１）～（９）いずれかに記載の方法。
（１２）アドレノメデュリン類が、アドレノメデュリン部分ペプチドである、（１１）に記載の方法。
（１３）アドレノメデュリン類が、配列番号１に記載のアミノ酸配列から成るアドレノメデュリン、中間体アドレノメデュリン、成熟型アドレノメデュリン、及びアドレノメデュリン部分ペプチドである、（１１）に記載の方法。
（１４）アドレノメデュリン類が、成熟型アドレノメデュリンおよびその部分ペプチドである、（１１）に記載の方法。
（１５）アドレノメデュリン類を認識する抗体を用いて免疫化学的方法により測定する、（１）～（１４）いずれかに記載の方法。
（１６）アドレノメデュリン類を認識する抗体を含有することを特徴とする、（１）～（１５）いずれかに記載の方法に使用するための測定試薬。
以下、本発明をさらに詳細に説明する。

本発明において、急性機能不全患者とは特に限定されるものではないが、例えば敗血症あるいは敗血症が疑われる患者等を上げることができる。

本発明において用いられる検体は特に限定はなく、血液成分等をあげることができ、その中でも全血、血球、血漿などが好ましく、血清、血漿が更に好ましい。また、検体採取後のアドレノメデュリン（ＡＭ）類の分解を抑える目的で消化酵素阻害剤を添加する、あるいは添加された採血管の使用、あるいは採血後冷蔵保存することが好ましい。
本発明において、通常は、ステップ（ａ）より先に、前記患者に由来する検体を用意するステップ（ａ’）が行われる。また、通常は、ステップ（ｂ）より先にかつステップ（ａ’）より後に、同患者に由来する検体を用意するステップ（ｂ’）が行われる。通常は、ステップ（ａ’）で用意された検体はステップ（ａ）の測定に供され、ステップ（ｂ’）で用意された検体はステップ（ｂ）の測定に供される。なお、「用意する」とは、検体を患者から採取すること、必要に応じて測定前処理を施すこと、及び測定に供する状態に整えることを含む。通常は、ステップ（ａ’）とステップ（ｂ’）とでは同じ前処理等が施される。

また本発明において、ステップ（ｂ）で測定される検体は、ステップ（ａ）と同じ患者に由来するものであって、但し、ステップ（ａ）で測定される検体が採取された後に、採取されたものである。即ち、ステップ（ｂ）で測定される検体は、ステップ（ａ）で測定される検体が採取された後、ある時間が経過してから同じ患者から採取されたものである。そのため、ステップ（ａ）及び（ｂ）により、同一患者に由来する検体中のＡＭ類の濃度変動を知ることができる。
なお、本明細書において患者に「由来する」ものとは、患者から採取したもの、または該採取したものに処理を施したものを意味する。前記処理としては、例えば消化酵素阻害剤等の添加や、遠心分離、冷蔵保存等が挙げられる。

本発明において、患者の予後を予測するとは、生存／死亡の二者を識別し予測するだけでなく、生存～死亡間の程度や割合を予測することも含まれるものである。

本発明の方法により、急性機能不全患者の予後を予測するための情報が提供される。そして医師等は、提供された情報等を参照して、予後を予測する。即ち本発明の方法自体は、急性機能不全患者の予後予測に関する最終的な判断行為は含まず、医師等に判断材料を提供する段階までを含むものである。

本発明においては、前記ステップ（ａ）の検体が治療介入前に採取された検体であり、前記ステップ（ｂ）の検体が治療介入後に採取された検体であることが好ましい。また本発明の方法は、治療介入が手術であることが好ましく、特に集中治療室での処置を必要とする患者予後を予測するための情報を提供するのに好ましいものである。また患者として、敗血症あるいは敗血症疑いの患者の予後を予測することが好ましいものである。またステップ（ｂ）の検体が、治療介入後７日以内に採取されたものであることが好ましく、またより好ましくは治療介入後４８時間以内、さらに好ましくは２４時間以内、とりわけ好ましくは１２時間以内に採取されたものである。さらに予測の際には、治療介入してから４週間以内の予後を予測するものであることが好ましく、特に４週間後の予後を予測するものであることが好ましい。またステップ（ａ）の検体を採取する好ましい時期は、治療介入前であれば特に限定されないが、通常は急性機能不全（例えば敗血症）の確定診断または急性機能不全（例えば敗血症）疑いの診断がついた後であり、治療介入前の好ましくは２時間以内、より好ましくは１時間以内、さらに好ましくは０．５時間以内である。

本発明において、測定されるアドレノメデュリン類には特に限定はないが、配列番号１記載のアミノ酸配列を含むものが好ましい。また配列番号１に記載のアミノ酸配列から成るアドレノメデュリン、ｉＡＭ、又はｍＡＭの量を測定することも好ましく、特にｍＡＭ量を測定することが更に好ましい。一方、アドレノメデュリン類として、アドレノメデュリン部分ペプチド量を測定してもよい。このアドレノメデュリン部分ペプチドとは、ＡＭ、ｉＡＭ、ｍＡＭなどのアドレノメデュリン類がペプチダーゼなどにより分解を受けた部分ペプチドのことを意味する。

また、配列番号１に記載のアミノ酸配列から成るアドレノメデュリン、ｉＡＭ、ｍＡＭ、及びアドレノメデュリン部分ペプチドから選択される二種以上のアドレノメデュリン類量を測定することも好ましい。さらにアドレノメデュリン類として、配列番号１に記載のアミノ酸配列から成るアドレノメデュリン、ｉＡＭ、ｍＡＭ、及びアドレノメデュリン部分ペプチドの量を測定する、即ちこれらすべてを測定対象とすることも好ましく、本発明ではこれらの合計量をｔＡＭ（ｔｏｔａｌＡＭを意味する）量と記載する場合もある。アドレノメデュリン類として、ｍＡＭおよびその部分ペプチドを測定対象とすることも好ましいものである。

以上のように測定対象のアドレノメデュリン類には種々のものがあるが、なかでもｍＡＭ又はｔＡＭの量を測定することが、本発明の方法においては好ましく、特にｍＡＭ量を測定することが好ましいものである。

本発明において上述のようなＡＭ類量を測定する方法には特に限定はないが、例えばこれらを認識する抗体を用いた免疫化学的方法があげられる。より具体的には、測定対象のＡＭ類を認識する抗体を含有する試薬を用いて行うことができる。このとき、例えば測定対象のＡＭ類を認識する固相化抗体と、それとは異なる部位で測定対象のＡＭ類を認識する標識化抗体とを含む試薬を用いて、サンドイッチ法により行うことができる。このときの標識としては、酵素等があげられる。なお、ｔＡＭ量の測定方法及びｍＡＭ量の測定方法は、Ｃｒｉｔ．ＣａｒｅＭｅｄ．１９９７；２５：９５３－９５７、およびＣｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．１９９９；４５：２４４－２５１に記載の抗体を用いて作製された、Ｅｎｄｏ．Ｃｏｎｎｅｃｔ．２０１５；４：４３－４９に記載の測定法により、測定可能である。
なお、本明細書においてＡＭ類の量は、通常は検体中の濃度で表される。

本発明者らは、集中治療室入室患者において各種パラメーターを測定し、予後予測が可能な診断パラメーターを検証した。その結果、アドレノメデュリン類量の変動による予測が極めて優れていること、特にｍＡＭ量の変動による予測が優れていることを見いだした。

その機序はプロカルシトニン（血中半減期２４時間）等に比較しアドレノメデュリンの代謝速度（血中半減期２０分）が極めて速いため、採血時の全身状態をリアルタイムに反映する。そのため、治療介入時のＡＭ濃度への影響が極めて少なく、治療前から治療介入により全身状態が改善すれば濃度が低減すること、また治療介入によっても全身状態が改善されなければ濃度が上昇していることに基づくものと考察している。アドレノメデュリン類量の経時的変動と予後予測の関係については、アドレノメデュリン類量が低下する症例においては予後が良好であり、アドレノメデュリン類量が上昇する症例では予後不良であり、その予後予測能は極めて優れたものである。

本発明によれば、検体中のアドレノメデュリン類の濃度変動により、急性機能不全患者の予後を予測するための情報を提供することが可能である。本発明の測定試薬を用い測定を実施すれば、短時間でアドレノメデュリン類を定量可能であり、ＳＯＦＡスコアやＡＰＡＴＣＨスコアのような煩雑な算出値を出さなくとも予後の予測が可能である。したがって、予後不良と予測された患者への手厚い管理の指標となること、また集中治療室入室前や退出後の患者に対しても煩雑なＳＯＦＡスコアやＡＰＡＴＣＨスコアの代用として重症度の層別化により適切な予後管理を可能とする簡便、低コストな検査試薬を提供することができる。

非敗血症、敗血症、生存、又は死亡で分類した際の各パラメーターの１日目データの分布図である。横棒は中央値を示す。非敗血症、敗血症、生存、又は死亡で分類した際の各パラメーターの１日目データの分布図である。横棒は中央値を示す。非敗血症、敗血症、生存、又は死亡で分類した際のＳＯＦＡスコア、ｔＡＭ濃度、ｍＡＭ濃度、及びＰＣＴ濃度の１日目データの分布図である。横棒は中央値を示す。非敗血症、敗血症、生存、又は死亡で分類した際の各パラメーターの３日目データから１日目データを減じた値の分布図である。横棒は中央値、横点線は差分ゼロを示す。非敗血症、敗血症、生存、又は死亡で分類した際の各パラメーターの３日目データから１日目データを減じた値の分布図である。横棒は中央値、横点線は差分ゼロを示す。ＳＯＦＡスコア、ｔＡＭ濃度、及びｍＡＭ濃度の３日目データから１日目データをそれぞれ減じた値による、非敗血症、敗血症によらず生存、又は死亡の弁別能のＲＯＣ曲線である。非敗血症、敗血症、生存、又は死亡で分類した際のＳＯＦＡスコア、ｔＡＭ濃度、ｍＡＭ濃度、及びＰＣＴ濃度の３日目データから１日目データをそれぞれ減じた値の分布図である。横棒は中央値、横点線は差分ゼロを示す。ＰＣＴ濃度、ｔＡＭ濃度、及びｍＡＭ濃度の３日目データから１日目データをそれぞれ減じた値による非敗血症、敗血症によらず生存、又は死亡の弁別能のＲＯＣ曲線である。１日目単点測定値、又は３日目測定値から１日目測定値を減じた数値、５日目測定値から１日目測定値を減じた数値、若しくは７日目測定値から１日目測定値を減じた数値を用いた際の、各パラメーターのＡＵＣ値を棒グラフで示した図である。生存、又は死亡で分類した際のｍＡＭ濃度の６、１２、及び２４時間後の測定値から０時間時点の測定値をそれぞれ減じた値の分布図である。横点線は差分ゼロを示す。

以下に実施例を示すが、本発明は実施例に記載された例に限られるものではない。以下の実験を行うに当たっては、各施設の研究倫理委員会での承認のもと実施した。ｔＡＭ量測定ならびにｍＡＭ量測定は、前述のＣｒｉｔ．ＣａｒｅＭｅｄ．１９９７；２５：９５３－９５７、およびＣｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．１９９９；４５：２４４－２５１に記載の抗体を用いて作製された、Ｅｎｄｏ．Ｃｏｎｎｅｃｔ．２０１５；４：４３－４９に記載の測定法により、自動免疫測定装置ＡＩＡシリーズ（東ソー社製）を用い実施した。

参考例１：患者背景と検体数
集中治療室（ＩＣＵ）入室患者を対象とし、日本版敗血症診療ガイドライン２０１６に従い敗血症又は非敗血症の弁別を行った。また、対象患者の４週間後の生存、死亡を予後指標とした。以上分類における患者数ならびに対象検体数を表１に示す。対象患者に対しては集中治療室入室後１日目手術前のデータを１日目データとし、取得パラメーターとして、ＳＯＦＡスコア（ＳＯＦＡ）、ｔＡＭ濃度、ｍＡＭ濃度、ＣＲＰ（Ｃ反応性ペプチド）濃度、血小板数（ＰＬＴ）、ＳＩＲＳスコア（ＳＩＲＳ）、白血球数（ＷＢＣ）、乳酸値（ＬＡＣ）、ＡＮＰ（心房性ナトリウム利尿ペプチド）濃度、ＢＮＰ（脳性ナトリウム利尿ペプチド）濃度、クレアチニン（Ｃｒｅ）濃度を取得した。また、ＰＣＴ（プロカルシトニン）濃度に関しては欠損値があるため、ＰＣＴ値までを含めた全データが揃っている例数をカッコ内に記載した。手術は集中治療室入室後１日目に行った。なお、非敗血症予後不良例（死亡）２例はいずれも間質性肺炎増悪によるものである。

比較例１：ＩＣＵ入室１日目の単点測定での弁別能解析
参考例１記載の２６例の対象患者（ＰＣＴ値欠損患者を含む）において、ＰＣＴ濃度を除く１日目の各パラメーターによる敗血症又は非敗血症の弁別、敗血症患者の予後の弁別、及び敗血症に関わらない予後の弁別を行った。ＲＯＣ（ＲｅｃｉｖｅｒＯｐｅｒａｔｉｎｇＣｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ）解析による曲線下面積（ＡＵＣ：ＡｒｅａＵｎｄｅｒＣｕｒｖｅ）で比較した結果を表２に示す。また、２群の有意差検定（Ｍａｎｎ－ＷｈｉｔｎｅｙＵ－ｔｅｓｔ）の結果を表３に示す。また、各分類による各パラメーターの分布図を図１及び２に示す。その結果、いずれの弁別においても単点測定の場合、ＳＯＦＡスコアが最も優れた弁別能を示した。その際のＳＯＦＡスコアによる予後予測に関する弁別能の正確性、感度、特異度、陽性的中率、及び陰性的中率を表４に示す。なお、ＲＯＣ解析から求めた値である、敗血症弁別では８以上、予後予測では９以上を、閾値として用い算出した。一方、ｔＡＭ濃度、ｍＡＭ濃度は既報とは異なり単点測定での弁別能は優れたものではなかった。

比較例２：ＩＣＵ入室１日目の単点測定でのＰＣＴによる弁別能解析
参考例１記載のＰＣＴ濃度測定が実施された２１例の対象患者において、１日目のＰＣＴ濃度、ＳＯＦＡスコア、ｔＡＭ濃度、及びｍＡＭ濃度による、敗血症又は非敗血症の弁別、敗血症患者の予後の弁別、及び敗血症に関わらない予後の弁別を行った。比較例１と同様にＲＯＣ解析によるＡＵＣ比較の結果を表５に、２群の有意差検定の結果を表６に、各分類による各パラメーターの分布図を図３に、それぞれ示す。その結果、いずれの弁別においても単点測定の場合ＳＯＦＡスコアが最も優れた弁別能を示しＰＣＴ濃度の弁別能は優れたものではなかった。

実施例１：ＩＣＵ入室３日目のデータから１日目のデータを減じた値での弁別能解析
参考例１記載の対象患者において、１日目ならびに３日目のパラメーターが取得されている患者２３例の内訳を表７に示す。なおカッコ内はＰＣＴ濃度測定値が欠損していない（ＰＣＴ値までを含めた全データが揃っている）例数を示している。３日目の各パラメーター値から１日目の各パラメーター値を減じた差を求め、各パラメーターの変動を指標とした弁別能を比較例１同様に解析した。なお、プロカルシトニンに欠損値がある症例は本解析から除外した。ＲＯＣ解析によるＡＵＣ比較を表８に、２群の有意差検定結果を表９に、それぞれ示す。また、各分類による各パラメーターの分布図を図４及び５に示す。

その結果、非敗血症又は敗血症の弁別はいずれのパラメーター変動をもっても弁別能が低いことが確認された。一方、敗血症又は非敗血症に関わらず生存又は死亡の予後弁別においてアドレノメデュリン類濃度が優れた弁別能を示し、特にｍＡＭ濃度においてはＡＵＣが０．９以上となり、比較例１で得られたＳＯＦＡスコア単点測定のＡＵＣ以上の弁別能を示すものであった。
本試験でのＳＯＦＡスコア、ｔＡＭ濃度、ｍＡＭ濃度のＲＯＣ曲線を図６に示す。その際のｍＡＭ濃度、ｔＡＭ濃度による予後予測に関する弁別能の正確性、感度、特異度、陽性的中率、陰性的中率を表１０に示す。

実施例２：ＩＣＵ入室３日目のデータから１日目のデータを減じた値でのＰＣＴによる弁別能解析
実施例１記載のＰＣＴ濃度測定が実施された１３例の対象患者において、３日目の各パラメーター値から１日目の各パラメーター値を減じた差を求め、各パラメーター（ＰＣＴ濃度、ＳＯＦＡスコア、ｔＡＭ濃度、ｍＡＭ濃度）の変動を指標とした、敗血症患者の予後の弁別、及び敗血症に関わらない予後の弁別を行った。比較例１と同様ＲＯＣ解析によりＡＵＣ比較を表１１に、２群の有意差検定の結果を表１２に、各分類による各パラメーターの分布図を図７に、それぞれ示す。敗血症又は非敗血症の弁別は症例数が少なく解析できなかった。

その結果、敗血症又は非敗血症に関わらず生存又は死亡の予後弁別においてｍＡＭ濃度においてはＡＵＣが０．９以上と優れた弁別能を示した。一方、ＰＣＴ濃度の弁別能もＳＯＦＡスコアの変動での弁別に対しては優れているもののｍＡＭ濃度の弁別能に対しては大きく劣るものであった。本試験でのＳＯＦＡスコア、ｔＡＭ濃度、ｍＡＭ濃度のＲＯＣ曲線を図８に示す。ｍＡＭ濃度ならびにＰＣＴ濃度による予後予測に関する弁別能の正確性、感度、特異度、陽性的中率、陰性的中率を表１３に示すが、ＰＣＴ濃度に対してｍＡＭ濃度が優れた正確性（診断精度）を示すものであった。

実施例３：ＩＣＵ入室３日目、５日目、又は７日目のデータから１日目のデータを減じた値での弁別能解析
参考例１記載の対象患者において、１日目および３日目、５日目、７日目のパラメーターを用い、敗血症又は非敗血症に関わらない予後予測能をデータ取得ごとに比較検証した。
対象患者、検体数、及び検体内訳を表１４に示す。１日目の各パラメーターによる単点測定でのＲＯＣ解析によるＡＵＣ値（比較例１の結果より）、３日目データから１日目データを減じた数値を用いてのＡＵＣ値（実施例１の結果より）、５日目データから１日目データを減じた数値を用いてのＡＵＣ値、及び７日目データから１日目データを減じた数値を用いてのＡＵＣ値、の４カ所の評価時期における比較解析結果を表１５ならびに図９に示す。

１日目単点測定での予後弁別能はＳＯＦＡスコアのＡＵＣ値０．８１７が最も優れている。３日目以降においてはｍＡＭのＡＵＣ値は３、５、７日目それぞれ０．９０７、０．８４８、０．８７５といずれも１日目のＳＯＦＡスコアのＡＵＣ値を上回る結果を示した。また、ｔＡＭにおいても５、７日目においてそれぞれＡＵＣ値０．８４８、０．８３３と優れた弁別能を示した。ＳＯＦＡスコア、ｔＡＭ、ｍＡＭ以外のパラメーターはＡＵＣ値０．７５０を超えるもの存在しなかった。

実施例４：ＩＣＵ入室後６時間、１２時間、および２４時間のデータからＩＣＵ入室時（０時間）のデータを減じた濃度での予後予測
ＩＣＵ入室後、２４時間以内のｍＡＭ濃度の測定が実施できた１５例の患者（敗血症２例、非敗血症１３例）において、６時間後から０時間の測定値を減じた濃度差、同様に１２時間、２４時間後から０時間の測定値を減じた濃度差を算出し、予後良好（生存）群及び予後不良（死亡）群ごとに解析を行なった。なお、予後の指標は４週間後の生存又は死亡とした。
その結果、予後不良群におけるｍＡＭの濃度変動は６時間後の濃度上昇をもって弁別することはできなかったが、１２時間後ならびに２４時間後においては濃度上昇が認められた（図１０）。本結果は、実施例２に示す３日目の結果と一致するもので、１２時間以降でｍＡＭの濃度上昇を認めた場合、予後不良群として弁別できることを示す結果である。

Claims

敗血症又は敗血症が疑われる患者の予後を予測するための情報を提供する方法であって、下記のステップを含み、下記検体が血液成分である方法：
（ａ）前記患者に由来する治療介入前の検体中のアドレノメデュリン類量を測定するステップ、
（ｂ）ステップ（ａ）と同じ患者に由来する治療介入後の検体であって、ステップ（ａ）の検体を採取後１２時間以降かつ治療介入後２４時間以内に採取された検体中のアドレノメデュリン類量を測定するステップ、
（ｃ）前記（ａ）の測定値と前記（ｂ）の測定値との差分を求めるステップ、及び
（ｄ－１）前記（ｃ）の差分において、（ｂ）の測定値から（ａ）の測定値を差引いた値が正の場合、もしくは（ａ）の測定値から（ｂ）の測定値を差引いた値が負の場合は、前記患者の予後が不良であると予測するための情報を関連づけるステップ、及び／又は
（ｄ－２）前記（ｃ）の差分において、（ｂ）の測定値から（ａ）の測定値を差引いた値が負の場合、もしくは（ａ）の測定値から（ｂ）の測定値を差引いた値が正の場合は、前記患者の予後が良好であると予測するための情報を関連づけるステップ。
治療介入が手術である、請求項１に記載の方法。
ステップ（ｂ）の検体が、治療介入後１２時間以内に採取されたものである、請求項１又は２に記載の方法。
治療介入してから４週間以内の予後を予測するための情報を提供する、請求項１～３いずれかに記載の方法。
アドレノメデュリン類が配列番号１に記載のアミノ酸配列を含む、請求項１～４いずれかに記載の方法。
アドレノメデュリン類が、配列番号１に記載のアミノ酸配列から成るアドレノメデュリン、中間体アドレノメデュリン、成熟型アドレノメデュリン、及びアドレノメデュリン部分ペプチドからなる群から選択される一種又は二種以上である、請求項１～５いずれかに記載の方法。
アドレノメデュリン類が、アドレノメデュリン部分ペプチドである、請求項６に記載の方法。
アドレノメデュリン類が、配列番号１に記載のアミノ酸配列から成るアドレノメデュリン、中間体アドレノメデュリン、成熟型アドレノメデュリン、及びアドレノメデュリン部分ペプチドである、請求項６に記載の方法。
アドレノメデュリン類が、成熟型アドレノメデュリンおよびその部分ペプチドである、請求項６に記載の方法。
アドレノメデュリン類を認識する抗体を用いて免疫化学的方法により測定する、請求項１～９いずれかに記載の方法。
アドレノメデュリン類を認識する抗体を含有することを特徴とする、請求項１～１０いずれかに記載の方法に使用するための測定試薬。