JP7245918B2

JP7245918B2 - サルササポゲニン構造に基づく誘導体、医薬組成物及びその使用

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Publication number: JP7245918B2
Application number: JP2021542240A
Authority: JP
Inventors: ムー，ショーン; ワン，ナー
Original assignee: Phytovent Biopharma
Current assignee: Phytovent Biopharma
Priority date: 2018-09-29
Filing date: 2019-05-13
Publication date: 2023-03-24
Anticipated expiration: 2039-05-13
Also published as: EP3858849A4; WO2020062883A1; CN109053854B; JP2022502509A; KR20210096074A; AU2019345516A1; CA3114637C; KR102655595B1; CA3114637A1; EP3858849A1; US20220033436A1; CN109053854A; KR20240033704A; AU2019345516B2

Description

本願は、2018年9月29日に提出した出願番号201811145429.4の中国特許出願の優先権を主張し、その内容を本願に引用導入する。
本発明は、医薬の技術分野に関し、特に医薬品の化学合成分野に関し、具体的には、サルササポゲニン構造に基づく誘導体、その医薬組成物及びその使用に関するものである。

ハナスゲは、中国でよくみられる漢方薬の１種であり、リリア科植物であるハナスゲＡｎｅｍａｒｒｈｅｎａａｓｐｈｏｄｅｌｏｉｄｅｓＢｕｎｇｅの乾燥塊茎であり、体内の熱を取り除き、邪気を追い出し、体の浮腫を解消するという効果を有し、一般的な滋陰薬の１種である。その抽出物は利尿、抗糖尿病、抗血小板凝集、抗真菌などの生物学的活性があることが確認されており、そして環状ヌクレオチドホスホジエステラーゼに対する阻害作用も示している。

癌は現在、人間の健康を危険にさらす最も重要な病気の１つであり、世界中の人間の死亡の約１５％は癌が原因である。現在、癌の治療手段は主に手術切除、放射線療法、化学療法又はこれらの方法の併用があるが、化学療法が主である。癌の発症及び進行は外部の環境要因と遺伝物質との相互作用の結果である。悪性腫瘍の発症及び進行の重要な基礎は細胞の制御できない増殖と転移性拡散であり、したがって、細胞のアポトーシス経路と放出を制御することで腫瘍疾患を治療するという目的を達成させることができ、これは、現在の癌治療の重要な手段の１つである。多数の領域の発展に伴い、抗癌薬の種類が明らかに増えていき、細胞毒性薬、ホルモン薬、生物学的応答調節剤、モノクローナル抗体薬などがある。効率が高くて選択性が高く、毒性が低くて薬剤耐性がなく、緊急に必要とされる新しい抗癌薬を見つけることは、依然として非常に困難であり、非常に緊急である。中国には豊富な漢方薬資源があり、カンプトテシンなどの天然物も抗腫瘍治療に使われている。ステロイドサポニンは、抗菌、抗ウイルス、抗真菌、抗炎症活性、さらには抗血小板凝集、抗糖尿病や良好な細胞毒性などの様々な活性を有することが証明されている。

悪性腫瘍細胞の正常表現型への分化誘導は腫瘍治療の新しい手段の１つであり、低毒性で高効率な分化誘導剤を探すことは分化誘導治療の肝心な点である。ジンセノサイドなどの一部の天然物は、白血病細胞、奇形腫細胞、肝がん細胞など、様々な悪性細胞の表現型逆転を誘導することができる。これは天然物が癌細胞の誘導分化において一定の応用将来性があることを示している。

したがって、抗癌薬の調製に用いられるサルササポゲニン構造の誘導体は非常に実用的である。

本発明の目的は、上記従来技術の欠陥を解決するためになされたもので、サルササポゲニン構造に基づく誘導体を提供し、また、サルササポゲニン構造に基づく誘導体の合成方法を提供する。

上記目的を達成させるためになされた、本発明の第１の態様は、下記一般式（I）を有する化合物であるサルササポゲニン構造に基づく誘導体を提供する。

（そのうち、Ｚは単複素環、二複素環又はＮＲ^１Ｒ^２であり、前記単複素環、二複素環中のヘテロ原子は硫黄、酸素、ＮＨ又はＮＲ^ａのうちの１つ又は２つであり、Ｒ^１及びＲ^２はそれぞれ独立して水素、置換又は無置換のＣ^１－Ｃ^１０アルキル基であり、若しくはＲ^１及びＲ^２は一緒に３～８員環を形成し、該３～８員環は１つ、又は複数の置換基により置換されてもよく、置換基はＣ_１－Ｃ_１０アルキル基、Ｃ_３－Ｃ_１０シクロアルキル基、Ｃ_６－Ｃ_２０アリール基、又はＣ_３－Ｃ_１４ヘテロアリール基、ハロゲン、ヒドロキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、アルデヒド基、カルボキシ基、アルコキシ基、－ＣＦ_３、－ＳＦ_５又は３～８員複素環から選ばれ、ヘテロ原子は硫黄、酸素、ＮＨ又はＮＲ^ａであり、
ＸはＣ（Ｒ^ｂ）（Ｒ^ｃ）、Ｃ（Ｏ）又はＳ（Ｏ）_２であり、Ｒ^ｂ及びＲ^ｃは一緒に３～８員炭素環又はヘテロ原子が硫黄、酸素、Ｎ、ＮＨ又はＮＲ^ａである３～８員複素環を形成し、該環は１つ、又は複数の置換基により置換されてもよく、置換基はＣ_１－Ｃ_１０アルキル基、Ｃ_３－Ｃ_１０シクロアルキル基、Ｃ_６－Ｃ_２０アリール基、又はＣ_３－Ｃ_１４ヘテロアリール基、ハロゲン、ヒドロキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、アルデヒド基、カルボキシ基、アルコキシ基、－ＣＦ_３、－ＳＦ_５又はヘテロ原子がＯ、Ｓ、ＮＲ^ａのうちの１つ又は２つである３～８員複素環から選ばれ、
ＹはＣ（Ｒ^ｄ）（Ｒ^ｅ）、Ｃ（Ｏ）又はＳ（Ｏ）_２であり、Ｒ^ｄ及びＲ^ｅは一緒に３～８員環又は３～８員複素環を形成し、ヘテロ原子は硫黄、酸素、ＮＨ又はＮＲ^ａであり、
Ｒ^ａ、Ｒ^ｂ、Ｒ^ｃ、Ｒ^ｄ、Ｒ^ｅは独立してＨ、若しくは、非置換又は少なくとも１つの置換基で置換されたＣ_１－Ｃ_１０アルキル基、Ｃ_３－Ｃ_１０シクロアルキル基、Ｃ_６－Ｃ_２０アリール基、又はＣ_３－Ｃ_１４ヘテロアリール基であり、ここでの置換基は、ハロゲン、ヒドロキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、アルデヒド基、カルボキシ基、アルコキシ基、－ＣＦ_３、－ＳＦ_５を含み、
Ｒ^ｂ及びＲ^ｄは１つの化学結合を介して連結されてもよく、
ｎは０～１０の整数であり、
ｍは０又は１である。）

好ましくは、前記誘導体の構造式は一般式IIで示される。

（式中、Ｙ、Ｒ^１、Ｒ^２、ｎは上記と同義である。）

好ましくは、前記誘導体の構造式は一般式IIIで示される。

（式中、Ｒ^１、Ｒ^２は上記と同義である。）

別の好適例では、前記誘導体の構造式は一般式IVで示される。

（式中、Ｒ^１、Ｒ^２は上記と同義である。）

好ましくは、前記誘導体は以下の化合物、以下の化合物のジアステレオマー混合物又は以下の化合物のエナンチオマーのうちの１種である。

好ましくは、前記誘導体は、その任意の１つ、又は複数の水素原子がその安定的な同位体である重水素により置換されて生成された対応する重水素化化合物である。

本発明の別の態様は、医薬組成物を提供し、前記医薬組成物は、上記一般式I化合物、その薬学的に許容される塩、立体異性体、互変異性体、プロドラッグ又はその薬学的に許容される担体を含み、好ましくは、抗腫瘍薬をさらに含み、前記抗腫瘍薬は化学療法薬、腫瘍標的治療薬又は腫瘍治療抗体薬のうちの１種又は複数種を含む。

好ましくは、前記薬学的に許容される塩は、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、メシル酸塩、トリフルオロメシル酸塩、ベシル酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩（トシル酸塩）、１－ナフタレンスルホン酸塩、２－ナフタレンスルホン酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、シュウ酸塩、コハク酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、安息香酸塩、サリチル酸塩、フェニル酢酸塩、マンデル酸塩からなる群から選ばれる。

好ましくは、前記抗腫瘍薬は、癌の免疫治療薬としてＰＤ－１抗体、ＣＴＬＡ－４抗体、ＰＤ－Ｌ１抗体、ＰＤ－Ｌ２抗体、任意の１種の他の化学療法薬又は標的治療薬、たとえばキナーゼ阻害剤を含むが、これらに限定されない。

本発明は、前記化合物の、癌、目の疾患、精神障害、うつ病、不安、アルツハイマー病及び／又は自己免疫疾患の治療における使用をさらに提供する。

好ましくは、前記癌は、結腸癌、乳癌、胃癌、肺癌、大腸癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、腎臓癌、肝臓癌、脳癌、黒色腫、多発性骨髄腫、慢性骨髄性白血病、血液腫瘍、リンパ腫を含むが、これらに限定されず、腫瘍の原発部位から離れた組織又は器官への転移性病変も含まれる。

本発明のサルササポゲニン構造に基づく誘導体、医薬組成物及びその使用を採用し、サルササポゲニン構造に対して体系的な修飾及び誘導化を行い、関連する腫瘍細胞阻害活性のテストと組み合わせたところ、意外なことに、多数の誘導化合物が優れた腫瘍細胞阻害活性を有し、特に多数の脳腫瘍細胞の成長に対しては予想外に高い阻害活性を有し、このため、多数の癌の治療において潜在的に幅広い用途及び巨大な価値があり、サルササポゲニン構造に修飾された誘導体についての従来技術における不備を補い、重要な科学的及び商業的応用価値がある。

本発明の技術内容を明確に理解するために、以下、本発明の具体的な実施方法をさらに説明する。

本発明における用語「アルキル基」とは、一価飽和脂肪族炭化水素基を意味し、１～１０個の炭素原子を有し、直鎖と分岐鎖状の炭化水素基、たとえばメチル基（ＣＨ_３－）、エチル基（ＣＨ_３ＣＨ_２－）、n‐プロピル基（ＣＨ_３ＣＨ_２ＣＨ_２－）、イソプロピル基（（ＣＨ_３）_２ＣＨ－）、ｎ－ブチル基（ＣＨ_３ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２－）、イソブチル基（（ＣＨ_３）_２ＣＨＣＨ_２－）、ｓ－ブチル基（（ＣＨ_３）（ＣＨ_３ＣＨ_２）ＣＨ－）、ｔ－ブチル基（（ＣＨ_３）_３Ｃ－）（（ＣＨ_３）_３Ｃ－）、ｎ－ペンチル基（ＣＨ_３ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２－）、ネオペンチル基（ＣＨ_３）_３ＣＣＨ_２－）を含む。

本発明において、用語「アルキル基」は置換又は無置換のアルキル基を含む。

本発明において、用語「置換又は無置換の」とは、前記基が無置換であるか、若しくは前記基中のＨが１つ、又は複数の（好ましくは１～６個、より好ましくは１～３個）置換基によって置換されることを意味する。

本発明において、前記「置換の」とは、前記基が、ハロゲン、ヒドロキシ基、－ＮＨ_２、ニトロ基、－ＣＮ、Ｃ_１－Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１－Ｃ_４ハロアルキル基、Ｃ_１－Ｃ_４アルコキシ基、Ｃ_３－Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_２－Ｃ_４アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_４アルキニル基、フェニル基、ベンジル基からなる群から選ばれる１つ、又は複数の（好ましくは１～６個、より好ましくは１～３個）置換基を有することを意味する。

本発明において、用語「シクロアルキル基」とは、置換又は無置換のＣ_３－Ｃ_１２シクロアルキル基を示す。

本発明において、用語「アルコキシ基」とは、－０－アルキル基を指し、ここで、前記アルキル基は飽和又は不飽和であってもよく、分岐鎖、直鎖、又は環状であってもよい。好ましくは、前記アルコキシ基は、１～１０個の炭素原子を有し、より好ましくは、１～６個の炭素原子を有する。代表的な例としては、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基などを含む（ただし、これらに限定されるものではない）。

本発明において、「アリール基」という用語は、炭素数６～２０（好ましくは６～１４）の一価芳香族炭素環基を意味し、単環（たとえばフェニル基）又は縮合環（たとえばナフチル基、アントラニル基）を有し、その連結点が芳香族炭原子上にある場合、縮合環は非芳香族（たとえば２－ベンゾアゾロン、２Ｈ－１，４－ベンゾアジン－３（４Ｈ）－オン－７－イルなど）であってもよい。好ましいアリール基は、フェニル基、ナフチル基を含む。この用語は置換又は無置換の形態を含み、ここで、置換基は上記と同義である。

本発明において、「アルケニル基」という用語は、２～１０（たとえば、２～６又は２～４）個の炭素原子を有し、少なくとも１（たとえば、１～２）個の不飽和オレフィン結合（＞Ｃ＝Ｃ＜）を有するアルケニル基を意味する。このような基としては、たとえば、ビニル基、アリル基、ブタ－３－エニル基が挙げられる。

本発明において、「シクロアルキル基」という用語は、３～１０個の炭素原子を有し、単環又は多環（縮合系、橋環系及びスピロ環系を含む）を有する環状アルキル基を意味する。縮合環系では、連結部位がシクロアルキル基を通る環である限り、１つ、又は複数の環がシクロアルキル基、複素環、アリール基又はヘテロアリール基であってもよい。適切なシクロアルキル基の例としては、たとえば、アダマンチル基、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基及びシクロオクチル基などが含まれる。

本発明において、「ハロ」又は「ハロゲン」という用語は、フッ素、塩素、臭素、及びヨウ素を意味する。

本発明において、「ヘテロアリール基」という用語は、環内に１～１０個の炭素原子と、酸素、窒素及び硫黄から選ばれる１～４個のヘテロ原子とを有する芳香族基であり、このようなヘテロアリール基は、単環（たとえば、ピリジル基、フリル基）又は縮合環（たとえば、インダジニル基（ｉｎｄｏｌｉｚｉｎｙｌ）又はベンゾチエニル基）であってもよく、前記縮合環は、連結点が芳香族ヘテロアリール基を通る原子である限り、非芳香族であってもよく、及び／又は、１つのヘテロ原子を含んでいてもよい。一実施例では、ヘテロアリール基の環原子窒素及び／又は硫黄は任意的にＮ－オキシド（Ｎ－Ｏ）、スルフィニル基又はスルホニル基に酸化されてもよい。ヘテロアリール基としては、ピリジル基、ピロリル基、インドリル基、チエニル基及びフリル基が好ましい。この用語には、置換又は非置換のヘテロアリール基が含まれる。

本発明において、「置換ヘテロアリール基」という用語は、置換アリール基と同一の置換基から選ばれる１～５個、好ましくは１～３個、より好ましくは１～２個の置換基で置換されたヘテロアリール基を意味する。

本発明において、「複素環」又は「複素環式」又は「複素環式アルキル基」又は「複素環基」という用語は、飽和、部分的飽和又は不飽和の基（ただし芳香族ではない）を意味し、それは、単環又は縮合環（架橋環系及びスピロ環系を含む）を有し、環内に１～１０個の炭素原子と、窒素、硫黄又は酸素から選ばれる１～４個（たとえば３個）のヘテロ原子とを有し、縮合環系では、連結点が非芳香族環を通る限り、１つ、又は複数の環はシクロアルキル基、アリール基又はヘテロアリール基であってもよい。一実施例では、複素環基の窒素原子及び／又は硫黄原子は任意的に酸化され、Ｎ－オキシド、スルフィニル基及びスルホニル基部分を提供するようにする。

本発明において、「置換複素環の」又は「置換複素環式アルキル基」又は「置換複素環基」という用語は、置換複素環アルキルで定義される置換基と同一の１～５個（たとえば１～３個）の置換基で置換された複素環基を意味する。

本発明において、「立体異性体」という用語は、立体中心のキラルが異なる１つ、又は複数の化合物を意味する。立体異性体には、エナンチオマー及びジアステレオマーが含まれる。

本発明において、「互変異性体」という用語は、エノール－ケトン及びイミン－エナミン互変異性体のようなプロトン位置の異なる化合物の代替形態、又はピラゾール、イミダゾール、ベンズイミダゾール、トリアゾール及びテトラゾールのような環の－ＮＨ部分とＮ部分に連結した環原子を含むヘテロアリール基の互変異性体を意味する。

本発明は、安全有効量の範囲内の活性成分と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を提供する。

本発明の「活性成分」とは、本発明の一般式（I）化合物又はその薬学的に許容される塩、その立体異性体若しくは互変異性体、又はそのプロドラッグを意味する。

本発明に記載の「活性成分」及び医薬組成物は、ＩＤＯ阻害剤として有用である。別の好適例では、腫瘍を予防及び／又は治療する医薬品の製造に用いられる。別の好適例では、ＩＤＯを介する疾患を予防及び／又は治療する医薬品の製造に用いられる。

「安全有効量」とは、重篤な副作用を生じさせずに症状を明らかに改善する程度の量である。通常、医薬組成物は、１～２０００ｍｇ活性成分／ドース、より好ましくは、１０～２００ｍｇ活性成分／ドースを含有する。好ましくは、前記「ドース」は１つの錠剤である。

「薬学的に許容される担体」とは、１つ、又は複数の相溶性の固体又は液体の充填剤又はゲル状物質であり、それらは人が使用するのに適しており、十分な純度と毒性が十分に低い必要がある。「相溶性」とは、組成物中の各成分が、活性成分の薬効を明らかに低下させることなく本発明の活性成分と相互に配合することができることを意味する。

本発明の好ましい実施例の化合物は、単独の活性薬剤として投与してもよく、癌を治療するための１つ、又は複数の他の薬剤と組み合わせて使用してもよい。

本発明の好ましい実施例の化合物は、公知の治療剤及び抗癌剤と組み合わせて使用することも有効であり、現在、公知の化合物と他の抗癌剤又は化学療法剤との組み合わせは、好ましい実施例の範囲内である。このような薬剤の例は『癌の原理と実践腫瘍学』（ＣａｎｃｅｒＰｒｉｎｃｉｐｌｅｓａｎｄＰｒａｃｔｉｃｅｏｆＯｎｃｏｌｏｇｙ），Ｖ．Ｔ．ＤｅｖｉｔａとＳ．Ｈｅｌｌｍａｎ（編者），第６版（２００１年２月１５）日），ＬｉｐｐｉｎｃｏｔｔＷｉｌｌｉａｍｓＷｉｌｋｉｎｓ出版社に記載されている。当業者は、薬剤の特殊な性質及び関与する癌に応じて、有効な薬剤の組み合わせを同定することができる。この抗癌剤には、エストロゲン受容体調節剤、アンドロゲン受容体調節剤、レチノール受容体調節剤、細胞傷害／細胞増殖阻害剤、抗増殖剤、プレニルタンパク質転移酵素阻害剤、アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）阻害剤、ＨＭＧ－ＣｏＡレダクターゼ阻害剤及びその他の血管新生阻害剤、細胞増殖・生存シグナル阻害剤、アポトーシス誘導剤及び細胞周期チェックポイント（ｃｅｌｌｃｙｃｌｅｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ）妨害剤、ＣＴＬＡ４抗体、ＰＤ－１抗体、ＰＤ－Ｌ１抗体などが含まれる（ただし、これらに限定されない）。好ましい実施例の化合物は、放射線療法と同時に投与された場合にも有効である。

一般に、好ましい実施例の化合物は、同様の作用を有する薬剤のいずれかの許容される手段により、治療有効量で投与される。好ましい実施例の化合物（すなわち活性成分）の実際の用量は、治療されるべき疾患の重症度、患者の年齢及び相対的な健康度、使用される化合物の効力、投与経路及び形態、ならびに他の要因など、複数の要因に基づいて決定される。この医薬品は、１日に複数回、好ましくは１日に１回又は２回投与することができる。これらすべての要因は主治医の考慮の範囲内にある。

好ましい実施例の目的に応じて、治療有効用量は、一般に、患者に１回投与又は分割投与される場合の１日の総用量、たとえば、１日約０．００１～約１０００ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは１日約１．０～約３０ｍｇ／ｋｇ体重とすることができる。単位用量組成物（Ｄｏｓａｇｅｕｎｉｔｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）は、その用量係数を含んで１日の用量を形成することができる。剤形の選択は、投与パターンや薬物物質のバイオアベイラビリティーなどの様々な要因に依存する。一般に、好ましい実施例の化合物は、経口、全身投与（たとえば、経皮、鼻内、又は坐剤経由）、又は非経口投与（たとえば、筋内、静脈内、又は皮下）のいずれかの経路で医薬組成物として投与され得る。好ましい投与方法は経口投与であり、苦みの程度に応じて都合のよい日量を調節することができる。組成物は、錠剤、丸薬、カプセル剤、半固体、散剤、徐放性製剤、溶液、懸濁液、エリキシル剤、エアゾール剤、又は他の適切な組成物の形態をとることができる。好ましい実施例の化合物を投与する別の好ましい態様は吸入である。これは、治療薬を気道に直接輸送するための効果的な方法である（米国特許第５，６０７，９１５号を参照）。

適切な薬学的に許容される担体又は賦形剤は、リン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、単糖類、二糖類、デンプン、ゼラチン、セルロース、メチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロース、グルコース、ヒドロキシプロピル－Ｂ－シクロデキストリン、ポリビニルピロリドン、低融点ワックス、イオン交換樹脂などの処理剤、医薬品送達用改質剤や促進剤、及びこれらの任意の２種以上（２種含む）の組み合わせを含む。液体及び半固体の賦形剤は、グリセリン、プロピレングリコール、水、エタノール、及び石油、動物油、植物油、又は落花生油、豆油、鉱油、ゴマ油などの合成由来を含む種々の油から選択されてもよい。好ましい液体担体、特に注射可能な溶液用の担体は、水、塩水、グルコース水性溶液、及びエチレングリコールを含む。他の適切な薬学的に許容される賦形剤は『レミントン薬物科学』（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ），ＭａｃｋＰｕｂ．Ｃｏ．，ニュージャージー（１９９１）に記載されており、引用により本文に組み入れられる。

本発明において、「薬学的に許容される塩」という用語は、一般式I化合物の非毒性の酸又はアルカリ土類金属塩を意味する。これらの塩は、一般式I化合物を最終的に分離して精製する際にその場で製造することができ、又はそれぞれ適切な有機酸又は無機酸又は塩基を塩基性又は酸性官能基と反応させることによって製造することができる。代表的な塩は、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、硫酸水素塩、酪酸塩、カンフル酸塩、カンフルスルホン酸塩、ジグルコシル酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ラウリル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、カプロン酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２－ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メシル酸塩、ニコチン酸塩、２－ナフチルスルホン酸塩、シュウ酸塩、ジヒドロキシナフトエ酸塩、ペクチン酸塩、チオシアン酸塩、３－フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバリン酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、及びウンデカン酸塩を含むが、これらに限定されない。さらに、窒素を含む塩基性基は、メチル基、エチル基、プロピル基、ブチル基の塩化物、臭化物やヨウ化物などのハロゲン化アルキル基；ジメチル基、ジエチル基、ジブチル基やジペンチル硫酸エステルなどのジアルキル硫酸塩；デシル基、ラウリル基、ミリスチン基やステアリル基の塩化物、臭化物やヨウ化物などの長鎖ハロゲン化物；ベンジル基、フェネチル臭化物などのアラルキルハライドという試薬によって第４級アンモニウム塩化されてもよい。これにより、水溶性又は油溶性又は分散性の製品が得られる。薬学的に許容される酸付加塩を形成するために使用され得る酸の例としては、塩酸、硫酸、リン酸などの無機酸、シュウ酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、コハク酸、クエン酸などの有機酸が含まれる。塩基性付加塩は、一般式I化合物を最終的に分離して精製する際にその場で製造することができ、又はカルボン酸部分をそれぞれ適切な塩基（たとえば、薬学的に許容される金属カチオンの水酸化物、炭酸塩、又は重炭酸塩）又はアンモニア、又は有機第１級、第２級、又は第３級アミンと反応させることにより製造することができる。薬学的に許容される塩としては、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アルミニウムなどのアルカリ金属及びアルカリ土類金属に基づくカチオン、並びにアンモニア、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミンなどを含むが、これらに限定されない非毒性アンモニウム、第４級アンモニウム及びアミンカチオンを含むが、これらに限定されない。塩基性付加塩を形成するために使用される他の代表的な有機アミンとしては、ジエチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジンなどが含まれる。

本発明において、「薬学的に許容されるプロドラッグ」という用語は、インビボで上記一般式で示される親化合物に速やかに変換される化合物、たとえば血液中で加水分解される化合物のような好ましい実施例のプロドラッグを意味する。完全な議論は「Ｔ．ＨｉｇｕｃｈｉとＶ．Ｓｔｅｌｌａ，新型送達システムとしてのプロドラッグ（Ｐｒｏ－ｄｒｕｇｓａｓＮｏｖｅｌＤｅｌｉｖｅｒｙＳｙｓｔｅｍｓ），Ａ．Ｃ．Ｓ．１５ＳｙｍｐｏｓｉｕｍＳｅｒｉｅｓ１４巻」と「ＥｄｗａｒｄＢ．Ｒｏｃｈｅ編，医薬品設計における生物学的可逆性担体（ＢｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅＣａｒｒｉｅｒｓｉｎＤｒｕｇＤｅｓｉｇｎ），米国薬学協会とＰｅｒｇａｍｏｎ出版社，１９８７年」に掲載されており、両者はともに参照として本明細書に組み込まれている。

本発明は、一般式（I）化合物の製造方法を提供する。２種の異なる異性体は、それぞれスキーム１とスキーム２に記載の製造方法によって得られ得る。

ここで、スキーム１は以下のとおりである。

スキーム２は以下のとおりである。

各式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｙ、ｎの定義は前記の通りである。

以下、特定の実施例にて本発明をさらに説明する。なお、これらの実施例は本発明を説明するために過ぎず、本発明の範囲を制限するものではない。

以下の略語は下記定義を有する。

ＤＢＵは１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ－７－エンを表し、ＤＩＢＡＬは水素化ジイソブチルアルミニウムを表し、ＤＩＡＤはジイソプロピルアゾジカルボキシレートを表し、ＤＩＥＡはジイソプロピルエチルアミンを表し、ＤＭＡＰはＮ，Ｎ－ジメチルアミノピリジンを表し、ＤＭＥは１，２－ジメトキシエタンを表し、ＤＭＦはＮ,Ｎ－ジメチルホルムアミドを表し、ＤＭＰＥは１，２－ビス（ジメチルホスフィノ）エタンを表し、ＤＭＳＯはジメチルスルホキシドを表し、ＤＰＰＢは１，４－ビス（ジフェニルホスフィノ）ブタンを表し、ＤＰＰＥは１，２－ビス（ジフェニルホスフィノ）エタンを表し、ＤＰＰＦは１，１’－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンを表し、ＤＰＰＭは１，１’－ビス（ジフェニルホスフィノ）メタンを表し、ＥＤＣは１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩を表し、ＨＡＴＵはＯ－（７－アザベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロリン酸塩を表し、ＨＭＰＡはヘキサメチルホスホルアミドを表し、ＩＰＡはイソプロパノールを表し、ＬＤＡはリチウムジイソプロピルアミドを表し、ＬＨＭＤＳはリチウムビス（トリメチルシリル）アミドを表し、ＬＡＨはリチウムアルミニウムハイドライドを表し、ＮＣＳはＮ－クロロスクシンイミドを表し、ＰｙＢＯＰはヘキサフルオロリン酸（ベンゾトリアゾール－１－イルオキシ）トリピロリジノホスホニウムを表し、ＴＤＡ－１はトリス（２－（２－メトキシエトキシ）エチル）アミンを表し、ＤＣＭはジクロロメタンを表し、ＴＥＡはトリエチルアミンを表し、ＴＦＡはトリフルオロ酢酸を表し、ＴＨＦはテトラヒドロフランを表し、ＮＣＳはＮ－クロロスクシンイミドを表し、ＮＭＭはＮ－メチルモルホリンを表し、ＮＭＰはＮ－メチルピロリドンを表し、ＰＰｈ_３はトリフェニルホスフィンを表し、ＲＢＦは丸底フラスコを表し、ｒ．ｔ．は室温を表す。

特に定義されていない限り、本明細書で使用されている専門用語及び科学用語は、当業者が熟知している用語と同じ意味を有する。さらに、記載された内容と類似又は均等な任意の方法や材料は、本発明の方法に適用することができる。本明細書に記載の好適な実施方法及び材料は、あくまで例示的なものである。

実施例１（ＱＢＨＮ０１７４）

ＱＢＨＮ０１７４の製造過程は、具体的には、以下のとおりである。

第１のステップ：中間体１

５００ｍＬ丸底フラスコに５ｇの原料Ａを加え、１００ｍＬのアセトンで溶解し、０℃で５ｍＬＪｏｎｅｓＲｅａｇｅｎｔを、溶液が紫赤色から緑色に変化しなくなるまで反応系に滴下し、１５分間後ｒ．ｔ．に上昇して撹拌しながら１時間反応させ、ＴＬＣで反応終了まで検出した（ＰＭＡ発色）。反応終了後、吸引濾過によりろ滓を除去し、ろ液を濃縮させ、ＤＣＭで再溶解し、２回水洗し、乾燥させて、シリカゲルカラムクロマトグラフィーをして５ｇの白色固体製品（中間体１）を得た。

第２のステップ：中間体２

１００ｍＬ丸底フラスコに５ｇの中間体１と１．７ｇのＮＨ_３ＯＨ・ＨＣｌを加え、乾燥させた５０ｍＬピリジンで溶解し、反応系を７０℃で撹拌しながら１～２時間反応させ、ＴＬＣにより反応終了まで検出した（ＰＭＡ発色）。反応終了後、溶媒を濃縮乾燥させ、ＤＣＭで再溶解し、１ＮＨＣｌ水溶液で２回洗浄し、乾燥させ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーをして５．２ｇ淡黄色固体である粗製品を得た。

第３のステップ：中間体３

５００ｍＬ丸底フラスコに５ｇの中間体２を加え、乾燥させた１００ｍＬＭｅＯＨで溶解し、０℃で４．２ｇのＮｉＣｌ_２・６Ｈ_２Ｏを加え、１５分間後、２．７ｇのＮａＢＨ_４をバッチ式で加え、３０分間後、ｒ．ｔ．に昇温し、撹拌しながら４時間反応させ、ＴＬＣにより反応終了まで検出した（ＰＭＡ発色）。反応終了後、吸引濾過によりろ滓を除去し、ろ液を濃縮させ、５ｇ白色固体製品を得た。

第４のステップ：ＱＢＨＮ０１７４

丸底フラスコに、０．０５５ｇの中間体３、０．０４１ｇの３－（４－メチルピペラジン－１－イル）－プロピオン酸、０．０４６ｇのＥＤＣ、０．０８４ｍＬのトリエチルアミン、及び０．００３ｇのＤＭＡＰを２ｍＬのジクロロメタンに溶解し、常温で２時間反応させ、反応を検出した。反応終了後、飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液で２回洗浄し、乾燥させ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーをして２５ｍｇの製品を得た。

ＮＭＲデータ：¹HNMR (400 MHz, CDCl₃) δ 0.76 (s, 3H),0.80-2.30 (m, 36H), 2.25-2.80 (m, 11H), 3.25-4.10 (m, 2H), 4.150-4.55 (m, 2H), 8.60-8.70 (m, 5H)；質量分析スペクトル：[M+1]570.5

実施例１Ａ（ＱＢＨＮ０１７４Ａ）

ＱＢＨＮ０１７４Ａの製造過程は、具体的には、以下のとおりである。

第の１ステップ：中間体４

アルゴンガス保護下、０．５ｇのサルササポゲニン原料Ａ、０．４ｇのｐ－ニトロ安息香酸、０．６３ｇのＰＰｈ_３を乾燥させた５ｍＬのＴＨＦに溶解し、氷水浴にて５分間撹拌し、次にＤＩＡＤを反応系に緩やかに滴下し、さらに１０分間撹拌し、氷浴を除去し、常温で３時間反応させ、反応を検出した。溶剤を濃縮させ、重炭酸ナトリウム溶液／ジクロロメタンで抽出して、シリカカラムＰＥ：ＥＡ＝４５：１を通して精製し、ＰＥ：ＥＡ＝１５：１で薄層クロマトグラフィーを行い、バニリン溶液で反応を観測した。収率５５％。

第２のステップ：中間体５

０．３６ｇの中間体４と０．３５ｇのＫ_２ＣＯ_３に１５ｍＬのＭｅＯＨを加え、反応系を温度５５℃で一晩撹拌した。溶剤を濃縮させ、水／ジクロロメタンで抽出し、有機層を濃縮させ、生成物を得て、そのまま次のステップの反応に用い、バニリン溶液で反応を観測した。収率８０％。

第３のステップ：中間体６

アルゴンガス保護下、０．２ｇの中間体４、０．１４ｇのフタルイミド、０．２５ｇのＰＰｈ_３を乾燥させた４ｍＬのＴＨＦに溶解し、氷水浴にて５分間撹拌し、次に０．１９ｇのＤＩＡＤを緩やかに反応系に滴下し、さらに１０分間撹拌し、氷浴を除去し、常温で３時間反応させ、反応を検出した。溶剤を濃縮させ、水／ジクロロメタンで抽出し、シリカカラムＰＥ：ＥＡ＝４５：１を通して精製し、ＰＥ：ＥＡ＝１５：１で薄層クロマトグラフィーを行い、バニリン溶液で反応を観測し、収率は５０％であった。

第４のステップ：中間体７

０．１３ｇの中間体６と０．０７２ｇのＮ_２Ｈ_４・Ｈ_２Ｏに１０ｍＬのＭｅＯＨを加え、反応系を温度５５℃で一晩撹拌した。溶剤を濃縮させ、水／ジクロロメタンで抽出し、有機層を濃縮させ、生成物を得て、そのまま次のステップの反応に用い、バニリン溶液で反応を観測した。収率９０％。

第５のステップ：実施例１Ａ（ＱＢＨＮ０１７４Ａ）

アルゴンガス保護下、０．０７ｇの中間体７、０．０５８ｇの３－（４－メチルピペラジン－１－イル）-プロピオン酸、０．０６５ｇのＥＤＣ、及び０．０１ｇのＤＭＡＰを４ｍＬのジクロロメタンに溶解し、常温で４ｈ反応させ、反応を検出した。重炭酸ナトリウム溶液／ジクロロメタンで抽出し、塩基性アルミナカラムＰＥ：ＥＡ＝１：１を通した。バニリン溶液で反応を観測し、収率は６５％であった。

ＮＭＲデータ：¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.85 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 4.41 (dd, J = 13.0, 6.6 Hz, 1H), 4.18 (s, 1H),3.95 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 3.30 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.01-2.20(brs, 8H), 2.62 (d, J = 3.0 Hz, 2H), 2.39(s, 2H), 2.30 (s, 3H), 1.23-2.07 (m, 27H), 1.08 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.05-0.93 (m, 6H), 0.76 (s, 3H)。

実施例１B（ＱＢＨＮ０１７４Ｂ）

ＱＢＨＮ０１７４Ｂの製造過程は、具体的には、以下のとおりである。

第の１ステップ：中間体８

原料Ａを出発原料として、実施例１Ａの第３のステップと同じ条件で、中間体８を得て、収率は５０％であった。

第２のステップ：中間体９

このステップでは、中間体８を原料として、実施例１Ａの第４のステップと同じ条件で、中間体９を得て、収率は９０％であった。

第３のステップ：実施例１Ｂ（ＱＢＨＮ０１７４Ｂ）

このステップでは、中間体９と３－（４－メチルピペラジン－１－イル）-プロピオン酸を原料として、実施例１Ａの第５ステップと同じ条件で、実施例１Ｂ（ＱＢＨＮ０１７４Ｂ）を得て、収率は６５％であった。

ＮＭＲデータ：¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.15 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.33 (dd, J = 14.8, 7.5 Hz, 1H), 3.88 (dd, J =10.9, 2.4 Hz, 1H), 3.65 (m, 1H), 3.23 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 2.90-2.10(brs, 8H), 2.56 (t, J = 6.2 Hz, 2H),2.26 (m, 2H), 2.24 (s, 3H), 1.23-2.07 (m, 27H), 1.01 (d, J =7.1Hz, 3H), 0.95-0.83 (m, 6H), 0.69 (s,3H)。

実施例２（ＱＢＨＮ０１７３）

中間体３と１－メチルピペリジン－４－ギ酸を原料として、実施例１の第４のステップに記載された実験ステップと同じ条件で、実施例２（ＱＢＨＮ０１７３）を得た。

ＮＭＲデータ：¹HNMR(CDCl₃, 400MHz): δ 0.75 (s, 3H), 0.80-2.70 (m, 43H), 2.95-4.00 (m, 7H), 4.40-4.55 (m, 1H), 6.05 (s, 1H)；質量分析スペクトル：[M+1]541.5

実施例３（ＱＢＨＮ０１７７）

中間体３とＮ，Ｎ－ジメチルグリシンを原料として、実施例１の第４のステップに記載された実験ステップと同じ条件で、実施例３（ＱＢＨＮ０１７７）を得た。

ＮＭＲデータ：¹HNMR(CDCl₃, 400MHz): δ 0.76 (s, 3H), 0.80-2.20 (m, 36H), 2.29 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 2.80-3.00 (m, 2H), 3.20-3.35 (s, 1H), 3.85-4.40 (m, 3H), 7.10-7.40 (m, 1H)；質量分析スペクトル：[M+1]501.3

実施例４（ＱＢＨＮ０１７８）

中間体３とＮ，Ｎ－ジメチル－Ｂ－アラニンを原料として、実施例１の第４のステップに記載された実験ステップと同じ条件で、実施例４（ＱＢＨＮ０１７８）を得た。

ＮＭＲデータ：¹HNMR(CDCl₃, 400MHz): δ 0.76 (s, 3H), 0.80-2.20 (m, 36H), 2.32 (s, 3H), 2.36 (s, 3H), 2.45-2.70 (m, 4H), 3.25-3.40 (m, 1H)、 3.80-4.45 (m, 3H), 8.90-9.10 (m, 1H)；質量分析スペクトル：[M+1]515.3

実施例４Ａ（ＱＢＨＮ０１７８Ａ）

中間体７とＮ，Ｎ－ジメチル－Ｂ－アラニンを原料として、実施例１Ａの第５のステップに記載された実験ステップと同じ条件で、実施例４Ａ（ＱＢＨＮ０１７８Ａ）を得た。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.20 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.41 (dd, J = 14.1, 7.6 Hz, 1H), 4.19 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 3.95 (dd, J = 11.0, 2.5 Hz, 1H), 3.30 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 2.59-2.50 (m, 2H), 2.38-2.33 (m, 2H), 2.30 (s, 6H), 1.23-2.07 (m, 27H), 1.08 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.02-0.92 (m, 6H), 0.76 (s, 3H).

実施例４Ｂ（ＱＢＨＮ０１７８Ｂ）

中間体９とＮ，Ｎ－ジメチル－Ｂ－アラニンを原料として、実施例１Ａの第５のステップに記載された実験ステップと同じ条件で、実施例４Ｂ（ＱＢＨＮ０１７８Ｂ）を得た。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.77 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.41 (dd, J = 14.1, 7.5 Hz, 1H), 3.95 (dd, J = 10.9, 2.3 Hz, 1H), 3.78-3.65 (m, 1H), 3.30 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 2.53 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.32 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.27 (s, 6H), 1.23-2.07 (m, 27H), 1.08 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.02-0.93 (m, 6H), 0.76 (s, 3H).

実施例５（ＱＢＨＮ０１８０）

中間体３と３－ｏｘｏ－３－（４－メチルピペラジン－１－イル）プロピオン酸を原料として、実施例１の第４のステップに記載された実験ステップと同じ条件で、実施例５（ＱＢＨＮ０１８０）を得た。

ＮＭＲデータ：¹HNMR(CDCl₃, 400MHz): δ 0.76 (s, 3H), 0.80-2.20 (m, 36H), 2.40（s, 3H）、2.55-2.70 (m, 4H), 3.25-4.20 (m, 9H), 4.45-4.55 (m, 1H)；質量分析スペクトル：[M+1]584.3

実施例６（ＱＢＨＮ０１８５）

中間体３と３－ｏｘｏ－３－（１－メチルピペラジン－４－アミノ）プロピオン酸を原料として、実施例１の第４のステップに記載された実験ステップと同じ条件で、実施例６（ＱＢＨＮ０１８５）を得た。

ＮＭＲデータ：¹HNMR(CDCl₃, 400MHz): δ 0.76 (s, 3H), 0.80-2.20 (m, 40H), 2.75-3.70 (m, 12H), 3.25-3.70 (m, 2H), 3.84 - 4.40 (m, 3H), 7.60-7.80 (m, 5H)；質量分析スペクトル：[M+1]598.3

実施例７（ＱＢＨＮ０１８６）

中間体３と３－ｏｘｏ－３－（１－メチルピペリジン－４－メチルアミノ）プロピオン酸を原料として、実施例１の第４のステップに記載された実験ステップと同じ条件で、実施例７（ＱＢＨＮ０１８６）を得た。

ＮＭＲデータ：¹HNMR(CDCl₃, 400MHz): δ 0.76 (s, 3H), 0.80-2.30 (m, 41H), 2.75-3.00 (m, 4H), 3.25-3.70 (m, 11H), 3.84-4.40 (m, 2H), 7.60-7.70 (m, 1H)；質量分析スペクトル：[M+1]612.3

実施例８（ＱＢＨＮ０１８７）

中間体３と３－ｏｘｏ－３－（３－モルホリノプロピル）アミノプロピオン酸を原料として、実施例１の第４のステップに記載された実験ステップと同じ条件で、実施例８（ＱＢＨＮ０１８７）を得た。

ＮＭＲデータ：¹HNMR(CDCl₃, 400MHz): δ 0.75 (s, 3H), 0.80-2.30 (m, 38H), 2.45-2.60 (m, 4H), 3.25-4.00 (m, 13H), 4.10-4.55 (m, 2H), 7.60-7.80 (m, 1H)；質量分析スペクトル：[M+1]628.3

実施例９（ＱＢＨＮ０１９０）

中間体３と３－ｏｘｏ－３－（１，４－ビスピペリジン－１－イル）プロピオン酸を原料として、実施例１の第４のステップに記載された実験ステップと同じ条件で、実施例９（ＱＢＨＮ０１９０）を得た。

ＮＭＲデータ：¹HNMR(CDCl₃, 400MHz, ppm): δ 0.76 (s, 3H), 0.80-2.30 (m, 46H), 2.55-3.60 (m, 10H), 3.75-4.55 (m, 5H), 7.20-7.40 (m, 1H)；質量分析スペクトル：[M+1]652.3

実施例１０（ＱＢＨＮ０１９１）

中間体３と３－ｏｘｏ－３－（ピペラジン－１－イル）プロピオン酸を原料として、実施例１の第４のステップに記載された実験ステップと同じ条件で、実施例１０（ＱＢＨＮ０１９１）を得た。

ＮＭＲデータ：¹HNMR(CDCl₃, 400MHz): δ 0.77 (s, 3H), 0.80-2.20 (m, 36H), 2.85-4.00 (m, 13H), 4.40-4.55 (m, 1H), 7.40-7.40 (m, 1H)；質量分析スペクトル：[M+1]570.3

実施例１１（ＱＢＨＮ０１９２）

中間体３と３－（ヘキサヒドロピロロ［３，４－ｃ］ピロール－２（１Ｈ）－イル）－３－オキソプロピオン酸（英語名：３－（ｈｅｘａｈｙｄｒｏｐｙｒｒｏｌｏ［３，４－ｃ］ｐｙｒｒｏｌ－２（１Ｈ）－ｙｌ）－３－ｏｘｏｐｒｏｐａｎｏｉｃａｃｉｄ）を原料として、実施例１の第４のステップに記載された実験ステップと同じ条件で、実施例１１（ＱＢＨＮ０１９２）を得た。

ＮＭＲデータ：¹HNMR(CDCl₃, 400MHz): δ 0.76 (s, 3H), 0.80-2.20 (m, 38H), 2.95-4.00 (m, 13H), 4.40-4.55 (m, 1H), 7.20-7.50 (m, 2H)；質量分析スペクトル：[M+1]596.4

実施例１２（ＱＢＨＮ０１９９）

中間体３と３－オキソ－３－（４－（２－（ピロリジン－１－イル）エチル）ピペラジン-1-イル）プロピオン酸（英語名：３－ｏｘｏ－３－（４－（２－（ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎ－１－ｙｌ）ｅｔｈｙｌ）ｐｉｐｅｒａｚｉｎ－１－ｙｌ）ｐｒｏｐａｎｏｉｃａｃｉｄ）を原料として、実施例１の第４のステップに記載された実験ステップと同じ条件で、実施例１２（ＱＢＨＮ０１９９）を得た。

ＮＭＲデータ：¹HNMR(CDCl₃, 400MHz): δ 0.74(s, 3H), 0.80-2.30 (m, 36H), 2.45-2.80 (m, 8H), 3.25-4.00 (m, 11H), 4.10-4.45 (m, 2H)；質量分析スペクトル：[M+1]667.5

実施例１３化合物の活性テスト
ＣＴＧ細胞増殖実験－チモサポニン誘導体による複数種の腫瘍細胞インビトロ成長への阻害
腫瘍細胞は、ヒトＡ５４９細胞（肺癌細胞）（ＡＴＣＣ、製品カタログ番号ＣＣＬ－１８５）、ＨｅＬａ細胞（子宮頸癌細胞）（ＡＴＣＣ、製品カタログ番号ＣＣＬ－２）、ＨｅｐＧ２細胞（肝臓癌細胞）（ＡＴＣＣ、製品カタログ番号ＨＢ－８０６５）、Ａ３７５細胞（黒色腫細胞）（ＡＴＣＣ、製品カタログ番号ＣＲＬ－１６１９）、ＭＣＦ－７（乳癌細胞）（ＡＴＣＣ、製品カタログ番号ＨＴＢ－２２）及びＵ８７ＭＧ（グリオーマ細胞）（ＡＴＣＣ、製品カタログ番号ＨＴＢ－１４）、ＬＮ２９９（ＡＴＣＣ、製品カタログ番号ＣＲＬ－２６１１）、Ａ１７２（ＡＴＣＣ、製品カタログ番号ＣＲＬ－１６２０）、ＫＮＳ－４２（ＪＣＲＢ、製品カタログ番号ＩＦＯ５０３５６）、ＢＥ（２）－Ｃ（ＡＴＣＣ、製品カタログ番号ＣＲＬ－２２６８）、Ｕ１１８ＭＧ（ＡＴＣＣ、製品カタログ番号ＨＴＢ－１５）、ＳＷ－１０８８（ＡＴＣＣ、製品カタログ番号ＨＴＢ－１２）、ＳＨ－ＳＹ５Ｙ（ＣＬＳ、製品カタログ番号３００１５４）を含む。

具体的な過程は以下のとおりである。

上記の腫瘍細胞をウェルごと（１.８～１５）×１０^３個、特定の培養基を含む底透壁白の９６-ウェル培養板（Ｃｏｒｎｉｎｇ、製品カタログ番号ＣＬＳ３９０３）の中に接種し、３７℃、５％のＣＯ_２インキュベータに入れて２４時間インキュベートした。

各化合物についてＤＭＳＯ（Ｓｉｇｍａ、製品カタログ番号Ｄ２６５０）で１０ｍＭのストック液を調整し、培地で所望の濃度（ＤＭＳＯ最終濃度０．２％）まで希釈した後、各ウェルに２ウェル／濃度で加え、３７℃、５％ＣＯ_２インキュベータで７２時間インキュベートした。次に、各ウェルに１００μＬのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）細胞活性検出試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ、製品カタログ番号Ｇ７５７３）を加え、振動機において１０分間かけて均一に混合し、細胞を溶解した。９６ウェル板を室温で１０分間放置し、その発光信号を安定化させた。白色の膜を培養板の底部に貼り付け、ＥｎＳｐｉｒｅを使用して板を測定した。ＸＬｆｉｔソフトウェアでデータを処理して、ＩＣ_５０値を得た。

上記チモサポニン誘導体が複数種の腫瘍細胞のインビトロ成長を明らかに阻害したという実験結果を表１～２に示す。

表１と表２に示しているように、本発明の化合物は、複数種の腫瘍細胞の成長に対して高い阻害活性を有し、特に各種の脳腫瘍細胞（表２）に対しては幅広い阻害活性を有していた。

この明細書において、本発明はその特定の実施例を参照して説明した。

ただし、勿論、本発明の主旨及び範囲を逸脱することなくさまざまな修正を行うことができる。したがって、明細書は説明するためのものであり、限定的なものとして見なすべきではない。

Claims

構造式が一般式I

（そのうち、Ｚは単複素環、二複素環又はＮＲ^１Ｒ^２であり、単複素環又は二複素環中のヘテロ原子が硫黄、酸素、ＮＨ又はＮＲ^ａのうちの１つ又は２つであり、Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、水素、置換又は無置換のＣ_１－Ｃ_１０アルキル基であり、若しくはＲ^１及びＲ^２は一緒に３～８員環を形成し、前記３～８員環はＣ_１－Ｃ_１０アルキル基、Ｃ_３－Ｃ_１０シクロアルキル基、Ｃ_６－Ｃ_２０アリール基、又はＣ_３－Ｃ_１４ヘテロアリール基、ハロゲン、ヒドロキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、アルデヒド基、カルボキシ基、アルコキシ基、－ＣＦ_３、－ＳＦ_５又はヘテロ原子が硫黄、酸素、ＮＨ又はＮＲ^ａである３～８員複素環から選ばれる１つ、又は複数の置換基を含み、
Ｒ ^ａは独立してＨ、若しくは、非置換又は少なくとも１つの置換基を含むＣ _１－Ｃ _１０アルキル基、Ｃ _３－Ｃ _１０シクロアルキル基、Ｃ _６－Ｃ _２０アリール基、又はＣ _３－Ｃ _１４ヘテロアリール基であり、ここでの置換基は、ハロゲン、ヒドロキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、アルデヒド基、カルボキシ基、アルコキシ基、－ＣＦ _３又は－ＳＦ _５を含み、
ＸはＣ（Ｏ）又はＳ（Ｏ）_２であり、
ＹはＣ（Ｒ^ｄ）（Ｒ^ｅ）、Ｃ（Ｏ）又はＳ（Ｏ）_２であり、Ｒ ^ｄ及びＲ ^ｅは独立して非置換又は少なくとも１つの置換基を含むＣ _１－Ｃ _１０アルキル基、Ｃ _３－Ｃ _１０シクロアルキル基、Ｃ _６－Ｃ _２０アリール基、又はＣ _３－Ｃ _１４ヘテロアリール基であり、ここでの置換基は、ハロゲン、ヒドロキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、アルデヒド基、カルボキシ基、アルコキシ基、－ＣＦ _３又は－ＳＦ _５を含み、又はＲ^ｄ及びＲ^ｅは一緒に３～８員環又はヘテロ原子が硫黄、酸素、ＮＨ又はＮＲ^ａである３～８員複素環を形成し、
ｎは０～１０の整数であり且つｎは０でなくｍは１であり、又は
ｎは０であり且つｍは１であり、又は
ｎは０～１０の整数であり且つｎは０でなくｍは０である。）
で示される、サルササポゲニン構造に基づく誘導体。
構造式が前記一般式I中、
ＹはＣ（Ｒ ^ｄ）（Ｒ ^ｅ）、Ｃ（Ｏ）又はＳ（Ｏ） _２であり、Ｒ ^ｄ及びＲ ^ｅは独立して非置換又は少なくとも１つの置換基を含むＣ _１－Ｃ _１０アルキル基、Ｃ _３－Ｃ _１０シクロアルキル基、Ｃ _６－Ｃ _２０アリール基、又はＣ _３－Ｃ _１４ヘテロアリール基であり、ここでの置換基は、ハロゲン、ヒドロキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、アルデヒド基、カルボキシ基、アルコキシ基、－ＣＦ _３又は－ＳＦ _５を含み、Ｒ ^ｄ及びＲ ^ｅは一緒に３～８員環又はヘテロ原子が硫黄、酸素、ＮＨ又はＮＲ ^ａである３～８員複素環を形成するものであることと特徴とする請求項１に記載のサルササポゲニン構造に基づく誘導体。
構造式が一般式II

（そのうち、Ｒ ^１及びＲ ^２は、それぞれ独立して、水素、置換又は無置換のＣ _１－Ｃ _１０アルキル基であり、若しくはＲ ^１及びＲ ^２は一緒に３～８員環を形成し、前記３～８員環はＣ _１－Ｃ _１０アルキル基、Ｃ _３－Ｃ _１０シクロアルキル基、Ｃ _６－Ｃ _２０アリール基、又はＣ _３－Ｃ _１４ヘテロアリール基、ハロゲン、ヒドロキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、アルデヒド基、カルボキシ基、アルコキシ基、－ＣＦ _３、－ＳＦ _５又はヘテロ原子が硫黄、酸素、ＮＨ又はＮＲ ^ａである３～８員複素環から選ばれる１つ、又は複数の置換基を含み、Ｒ ^ａは非置換又は少なくとも１つの置換基を含むＣ _１－Ｃ _１０アルキル基、Ｃ _３－Ｃ _１０シクロアルキル基、Ｃ _６－Ｃ _２０アリール基、又はＣ _３－Ｃ _１４ヘテロアリール基であり、ここでの置換基は、ハロゲン、ヒドロキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、アルデヒド基、カルボキシ基、アルコキシ基、－ＣＦ _３又は－ＳＦ _５を含み、
ＹはＣ（Ｒ ^ｄ）（Ｒ ^ｅ）、Ｃ（Ｏ）又はＳ（Ｏ） _２であり、Ｒ ^ｄ及びＲ ^ｅは独立して非置換又は少なくとも１つの置換基を含むＣ _１－Ｃ _１０アルキル基、Ｃ _３－Ｃ _１０シクロアルキル基、Ｃ _６－Ｃ _２０アリール基、又はＣ _３－Ｃ _１４ヘテロアリール基であり、ここでの置換基は、ハロゲン、ヒドロキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、アルデヒド基、カルボキシ基、アルコキシ基、－ＣＦ _３又は－ＳＦ _５を含み、Ｒ ^ｄ及びＲ ^ｅは一緒に３～８員環を形成するものであり、
ｎは０～１０の整数である。）
で示されることを特徴とするサルササポゲニン構造に基づく誘導体。
構造式が一般式III

（そのうち、Ｒ ^１及びＲ ^２は、それぞれ独立して、水素、置換又は無置換のＣ _１－Ｃ _１０アルキル基であり、若しくはＲ ^１及びＲ ^２は一緒に３～８員環を形成し、前記３～８員環はＣ _１－Ｃ _１０アルキル基、Ｃ _３－Ｃ _１０シクロアルキル基、Ｃ _６－Ｃ _２０アリール基、又はＣ _３－Ｃ _１４ヘテロアリール基、ハロゲン、ヒドロキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、アルデヒド基、カルボキシ基、アルコキシ基、－ＣＦ _３、－ＳＦ _５又はヘテロ原子が硫黄、酸素、ＮＨ又はＮＲ ^ａである３～８員複素環から選ばれる１つ、又は複数の置換基を含み、Ｒ ^ａは非置基又は少なくとも１つの置換基を含むＣ _１－Ｃ _１０アルキル基、Ｃ _３－Ｃ _１０シクロアルキル基、Ｃ _６－Ｃ _２０アリール基、又はＣ _３－Ｃ _１４ヘテロアリール基であり、ここでの置換基は、ハロゲン、ヒドロキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、アルデヒド基、カルボキシ基、アルコキシ基、－ＣＦ _３又は－ＳＦ _５を含み、
ｎは０～１０の整数である。）
で示されることを特徴とするサルササポゲニン構造に基づく誘導体。
構造式が一般式IV

（そのうち、Ｒ ^１及びＲ ^２は、それぞれ独立して、水素、置換又は無置換のＣ _１－Ｃ _１０アルキル基であり、若しくはＲ ^１及びＲ ^２は一緒に３～８員環を形成し、前記３～８員環はＣ _１－Ｃ _１０アルキル基、Ｃ _３－Ｃ _１０シクロアルキル基、Ｃ _６－Ｃ _２０アリール基、又はＣ _３－Ｃ _１４ヘテロアリール基、ハロゲン、ヒドロキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、アルデヒド基、カルボキシ基、アルコキシ基、－ＣＦ _３、－ＳＦ _５又はヘテロ原子が硫黄、酸素、ＮＨ又はＮＲ ^ａである３～８員複素環から選ばれる１つ、又は複数の置換基を含み、Ｒ ^ａは非置換又は少なくとも１つの置換基を含むＣ _１－Ｃ _１０アルキル基、Ｃ _３－Ｃ _１０シクロアルキル基、Ｃ _６－Ｃ _２０アリール基、又はＣ _３－Ｃ _１４ヘテロアリール基であり、ここでの置換基は、ハロゲン、ヒドロキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、アルデヒド基、カルボキシ基、アルコキシ基、－ＣＦ _３又は－ＳＦ _５を含み、
ｎは０～１０の整数である。）
で示されることを特徴とするサルササポゲニン構造に基づく誘導体。
以下の化合物、以下の化合物のジアステレオマー混合物又は以下の化合物のエナンチオマーのうちの１種である、ことを特徴とするサルササポゲニン構造に基づく誘導体。
１つ又は複数の水素原子が重水素原子である、ことを特徴とする請求項１～５の何れかに記載のサルササポゲニン構造に基づく誘導体。
第１の成分又は第１の成分と第２の成分の組み合わせと薬学的に許容される担体とを含み、
前記第１の成分は請求項１～５のいずれかに記載のサルササポゲニン構造に基づく誘導体、又はその薬学的に許容される塩、立体異性体又は互変異性体、並びに、薬学的に許容される担体であり、
前記第２の成分は、化学療法薬、腫瘍標的治療薬又は腫瘍治療抗体薬のうちの１種又は複数種を含む抗腫瘍薬である、ことを特徴とする医薬組成物。
前記薬学的に許容される塩は、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、メシル酸塩、ベシル酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、１－ナフタレンスルホン酸塩、２－ナフタレンスルホン酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、シュウ酸塩、コハク酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、安息香酸塩、サリチル酸塩、フェニル酢酸塩又はマンデル酸塩から選ばれる１種又は複数種であり、
前記抗腫瘍薬は、ＰＤ－１抗体、ＣＴＬＡ－４抗体、ＰＤ－Ｌ１抗体又はＰＤ－Ｌ２抗体のうちの１種又は複数種である、ことを特徴とする請求項８に記載の医薬組成物。
請求項８又は９に記載の医薬組成物の、癌、目の疾患、精神障害、うつ病、不安、アルツハイマー病及び／又は自己免疫疾患を治療する医薬品の製造における使用。
前記癌は、結腸癌、乳癌、胃癌、肺癌、大腸癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、腎臓癌、肝臓癌、脳癌、黒色腫、多発性骨髄腫、慢性骨髄性白血病、血液腫瘍、若しくはリンパ腫又は腫瘍原発部位から離れたほかの組織又は器官への転移性病変である、ことを特徴とする請求項１０に記載の医薬組成物の使用。