JP7202313B2

JP7202313B2 - （ｅ）－２，６－ジアルコキシスチリル４－置換ベンジルスルホンを投与するための安定性及びバイオアベイラビリティを向上させた製剤

Info

Publication number: JP7202313B2
Application number: JP2019556217A
Authority: JP
Inventors: マニアー，マノイ
Original assignee: オンコノバセラピューティクスインコーポレイテッド
Priority date: 2017-04-13
Filing date: 2018-04-13
Publication date: 2023-01-11
Anticipated expiration: 2038-04-13
Also published as: KR20190134705A; MX2022011860A; EA201992436A1; AU2018253291B2; ZA201906671B; ES2926042T3; CL2019002899A1; EP3733163B1; IL269757A; ZA202107580B; ES2941538T3; CA3058664A1; TW202222303A; WO2018191634A4; EP3733163A1; TWI759459B; AR109503A1; WO2018191634A2; EP3609471A2; KR102643626B1

Description

関連出願への相互参照

本出願は、２０１７年４月１３日に出願された米国仮出願第６２／４８５，３５５号の利益を主張する。この出願は、２０１７年８月２８日に出願された米国特許出願番号１５／６８８３２０及び２０１７年８月２８日に出願された国際出願番号ＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０４８８９０の一部継続出願である。これらのすべては、表、図、及び特許請求の範囲のすべてを含む全体として本明細書に組み込まれる。

本発明は、リゴサチブ（Ｒｉｇｏｓｅｒｔｉｂ）の医薬組成物、並びに癌及び増殖性障害の治療のためのその使用に関する。具体的には、本発明の組成物は、良好な安定性及びバイオアベイラビリティを有するリゴサチブの製剤である。

（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホン及びそれらの薬学的に許容される塩は、受容体チロシンキナーゼを標的とすると共にＲａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫキナーゼカスケードを拘束する抗増殖剤である。ナトリウム塩は、リゴセルチブ及びＯＮ０１９１０．Ｎａとして知られており、そして、米国特許第８，０６３，１０９号明細書、米国特許第８，４７６，３２０号明細書、及び米国特許第７，５９８，２３２号明細書に記載されている。

リゴサチブは、薬剤候補であり、米国特許第８，４７６，３２０号明細書に記載されているように、ＰＥＧ４００などの水溶性ポリマー及び水性緩衝液で製剤化されている。しかしながら、これらの製剤は許容できないレベルの不純物をもたらす。特に、リゴセルチブ及びＰＥＧ４００を含むバイアルは、室温で保管すると数か月で許容できないレベルの不純物を示すために、このようなバイアルは冷蔵保管する必要があり、これは簡便ではなく費用がかかる。さらに、１００％ＰＥＧ４００，ＮＦのリゴサチブは、輸液バッグを介して投与される場合には、長い輸液期間のうちに分解する恐れがあり、薬物を正確に送達する能力が低下する。また、リゴサチブ、ＰＥＧ４００、及び高いｐＨのリン酸緩衝液を含むバイアルは、結晶を形成する恐れがある。したがって、経口及び非経口投与の安定性が向上した医薬組成物が必要である。経口バイオアベイラビリティが改善された医薬組成物も求められている。

経口投与される場合には、一般的な有害事象は尿路上皮毒性である（Bowles, et al., Clin. Cancer Res. 2014 March 15; 20(6): 1656-1665）。すなわち、尿路上皮毒性を低減する方法でリゴサチブを投与する方法も必要である。

本発明は、ポリエチレングリコール溶液中のリゴセルチブ溶液（希釈されていないｐＨが約１１．０～約１４．０である）が安定性及び不純物レベルが驚くほど改善されたという発見に少なくとも部分的に基づいている。これらの医薬組成物は、驚くほど良好な経口バイオアベイラビリティ特性を有することも発見された。

本発明の第１の観点では、以下を含む医薬組成物が提供される：
ａ）（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホン、及びそれらの薬学的に許容される塩；
ｂ）塩基性の前処理が行われた低分子量ポリエチレングリコール；
ｃ）約１１．０～約１４．０の希釈されていないｐＨ；及び
ｄ）５％未満の水又は水溶液。

本発明の第２の観点では、以下を含む医薬組成物が提供される：
ａ）（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンナトリウム塩；
ｂ）塩基性の前処理が行われたＰＥＧ４００；
ｃ）約１１．０～約１４．０の希釈されていないｐＨ；及び
ｄ）２％以下の水又は水溶液。

本発明のさらに別の観点では、以下を含む医薬組成物を投与することにより、癌及び増殖性障害を治療する方法が提供される：
ａ）（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホン、及びそれらの薬学的に許容される塩；
ｂ）塩基性の前処理が行われた低分子量ポリエチレングリコール；
ｃ）約１１．０～約１４．０の希釈されていないｐＨ；及び
ｄ）５％未満の水又は水溶液。

本発明のさらに別の観点では、以下を含む医薬組成物を投与することにより、癌及び増殖性障害を治療する方法が提供される：
ａ）（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンナトリウム塩；
ｂ）塩基性の前処理が行われたＰＥＧ４００；
ｃ）約１１．０～約１４．０の希釈されていないｐＨ；及び
ｄ）２％以下の水又は水溶液。

本発明のさらに別の観点では、以下を含む医薬組成物を投与することにより、癌及び増殖性障害の治療に使用するための医薬組成物が提供される：
ａ）（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホン、及びその薬学的に許容される塩；
ｂ）塩基性の前処理が行われた低分子量ポリエチレングリコール；
ｃ）約１１．０～約１４．０の希釈されていないｐＨ；及び
ｄ）５％未満の水又は水溶液。

本発明のさらに別の観点では、以下を含む医薬組成物を投与することにより、癌及び増殖性障害の治療に使用するための医薬組成物が提供される：
ａ）（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンナトリウム塩；
ｂ）塩基性の前処理されたＰＥＧ４００；
ｃ）約１１．０～約１４．０の希釈されていないｐＨ；及び
ｄ）２％以下の水又は水溶液。

本発明のさらに別の観点では、尿毒性を低減する（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンナトリウム塩の使用による癌及び増殖性障害の治療のための経口投与計画が提供され、この計画では、朝食の約１～２時間前に投与される約８４０ｍｇの最初の投与量で（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホン及びそれらの薬学的に許容される塩を投与し、その後、昼食の約２時間後又は最初の投与の約６～約８時間後に約２８０ｍｇの２回目の投与を行うことを含む。本発明のさらに別の観点では、尿毒性を低減する癌及び増殖性障害の治療のための経口投与計画が提供され、朝食の約１～２時間前に投与する約５６０ｍｇの最初の投与量で（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホン及びそれらの薬学的に許容される塩を投与し、その後、昼食の約２時間後又は最初の投与の約６～８時間後に約２８０ｍｇ～５６０ｍｇの２回目の投与を行うことを含む。

本発明のさらに別の観点では、癌及び増殖性障害の薬剤の製造のための（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンナトリウム塩の使用が提供され、その薬剤は、経口投与計画に従って投与されるように準備され、その経口投与計画は、朝食の１～２時間前に投与される約８４０ｍｇの最初の投与を行い、続いて、昼食の約２時間後又は最初の投与の約６～約８時間後に投与される約２８０ｍｇの２回目の投与を行うか；又は、朝食の１～２時間前に最初の約５６０ｍｇを投与し、その後、昼食の約２時間後又は最初の投与の約６～８時間後に約２８０ｍｇ～５６０ｍｇの２回目の投与を行うことを含む。

本明細書で言及されるすべての刊行物及び特許出願は、それぞれ個々の刊行物又は特許出願が参照により組み込まれることが具体的かつ個別に示されるのと同程度の範囲まで、それらの全体が参照により組み込まれる。

図１は、０～１８ヶ月間で２５℃／６０％ＲＨに保存された各製剤における総不純物のパーセントを示している。

図２は、３種類のＯＮ０１９１０．Ｎａ経口カプセルを使用して、投与後のイヌの血漿中のＯＮ０１９１０濃度の経時変化を示している。

発明の詳細な説明

本発明は、（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホン及びそれらの薬学的に許容される塩を含む新規の医薬組成物を提供する。医薬組成物は、経口及び非経口溶液、特に液体充填経口カプセル及び濃縮注射液の形態である。医薬組成物は、塩基性の低分子量ポリエチレングリコールを含み、約１１．０～約１４．０の希釈されていないｐＨを有し；５％未満の水又は水溶液を含む。

本発明の新規な医薬組成物は、実施例２に示されるように、従来の製剤と比較して、予想外に優れた安定性及び貯蔵時における不純物の顕著な減少を有する。本発明の医薬組成物は、また、実施例３～５に示されるように、従来の製剤と比較して、非常に良好な経口のバイオアベイラビリティを有する。

一実施形態では、（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンのナトリウム塩が、組成物中の原薬として使用される。

低分子量液体ポリエチレングリコール、例えば、ＰＥＧ２００、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ６００、及びＰＥＧ８００は、例えば本発明の製剤において、独立して又は互いに組み合わせて使用することのできる好ましい水溶性ポリマーである。ＰＥＧ２００、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００、及びＰＥＧ６００が、特に好ましい。例えば、Ｌｕｔｒｏｌ（登録商標）Ｅ３００、Ｌｕｔｒｏｌ（登録商標）Ｅ４００、及びＬｕｔｒｏｌ（登録商標）Ｅ６００は、ニュージャージー州ＭｏｕｎｔＯｌｉｖｅのＢＡＳＦ社から市販されている。ＰＥＧ４００（ポリエチレングリコール４００、Ｍａｃｒｏｇｏｌ４００、ＰＥＧ４００、及びＬｕｔｒｏｌ（登録商標）Ｅ４００）が最も好ましい。

塩基性低分子量ポリエチレングリコールは、アルカリ化剤で処理してｐＨを約１０～約１４（直接プローブ法を用いて測定される）に上げられた低分子量ポリエチレングリコールからなる。別の観点では、アルカリ化剤で処理された塩基性低分子量ポリエチレングリコールは、非希釈直接プローブ法を使用して測定される約１１～約１３のｐＨを有する。別の観点では、医薬組成物は、また、１つ又は複数のアルカリ化剤を含み、これは、（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホン及びそれらの薬学的に許容される塩を塩基性低分子量ポリエチレングリコールに加えた後に加えることができる。

１つの観点では、ポリエチレングリコールは、水酸化バリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、メタケイ酸ナトリウム、水酸化カルシウム、リン酸三ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、水酸化アンモニウム、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トロメタミン、ピコリン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ、Ｎ’－ジベンジルエチレンジアミン、及びアルギニン、リジン、グリシンを含むアミノ酸、並びにそれらの塩からなる群から選択される少なくとも１つの塩基で、前処理される１つの観点では、ポリエチレングリコールは、ＫＯＨ及びＮａＯＨ、特に４Ｎ～１０Ｎ、とりわけ４ＮのＮａＯＨを含む群からの少なくとも１つの塩基で前処理される。

１つの観点では、前処理されたＰＥＧは、約９．０～約１１．０、又は約１０．０～約１１．０の希釈されたｐＨを有する。

１つの観点では、医薬組成物は、直接プローブ又は非希釈法を使用して測定される約１２．０～約１３．５のｐＨを有する。別の観点では、医薬組成物は、１２．６～１３．０の希釈されていないｐＨを有する。別の観点では、医薬組成物は１２．８±０．２の希釈されていないｐＨを有する。

１つの観点では、医薬組成物は、２．０％以下の水又は水溶液、又は１．０％以下の水又は水溶液を含む。別の観点では、組成物は、追加の緩衝液を実質的に含まない。

いくつかの実施形態では、医薬組成物は、非経口投与に適しており、そして、約６重量％～約８．５重量％の（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンナトリウム塩である。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、非経口投与に適しており、６．７～８．３重量％の（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンナトリウム塩である。いくつかの実施形態では、医薬組成物は非経口投与に適しており、約６～約７重量％の（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンナトリウム塩である。いくつかの実施形態では、組成物は、約８７から約９４重量％のＰＥＧ４００を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約９２から約９４重量％のＰＥＧ４００を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約６．７重量％の（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンナトリウム塩と約９２重量％のＰＥＧ４００とを含む。

（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンナトリウム塩の重量％を記述する場合には、それは、純粋な薬物であり、例えば水又は不純物を含まない。

いくつかの実施形態では、医薬組成物は、経口投与に適しており、約３重量％～約２９重量％の（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンナトリウム塩である。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、経口投与に適しており、３．８～２８．５重量％の（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンナトリウム塩である。いくつかの実施形態では、組成物は、約６４～約７１重量％のＰＥＧ４００を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約２８．５重量％の（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンナトリウム塩及び約６８．７重量％のＰＥＧ４００を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約２８．５重量％の（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンナトリウム塩、約６８．７重量％のＰＥＧ４００、及び約２．６％水を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、約２８．５重量％の（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンナトリウム塩、約７０．５重量％のＰＥＧ４００、及び約１．０％未満の水を含む。

いくつかの実施形態では、医薬組成物は、経口投与に適しており、約３５ｍｇ／ｍＬ～約３００ｍｇ／ｍＬの（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンナトリウム塩を有する。１つの観点では、医薬組成物は、経口投与に適しており、約３５ｍｇ／ｍＬ、約７０ｍｇ／ｍＬ、１４０ｍｇ／ｍＬ、又は約２８０ｍｇ／ｍＬの（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンナトリウム塩である。

１つの観点では、医薬組成物は、非経口投与に適しており、約６～約８．５重量％の（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンナトリウム塩である。別の観点では、原薬は、約７５ｍｇ／ｍＬ～約２８０ｍｇ／ｍｌである。別の観点では、原薬は、約７５ｍｇ／ｍＬである。

１つの観点では、医薬組成物は、約９２重量％のＰＥＧ４００及び約６．７重量％（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンナトリウム塩を含む。

１つの観点では、医薬組成物は、経口投与に適しており、約３５ｍｇ／ｍＬ～約３００ｍｇ／ｍＬの原薬である。別の観点では、原薬は、約３５ｍｇ／ｍＬ、約７０ｍｇ／ｍＬ、７５ｍｇ／ｍＬ、１４０ｍｇ／ｍＬ、又は約２８０ｍｇ／ｍＬである。

１つの観点では、医薬組成物は、
ａ）（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］
－４－メトキシベンジルスルホンのナトリウム塩；
ｂ）塩基性の前処理が行われたＰＥＧ４００；
ｃ）約１２．６～約１３．０の希釈されていないｐＨ；及び
ｄ）２％以下の水又は水溶液
を含む。

本発明の１つの観点では、以下を含む経口投与剤形が提供される：
ａ）約３５～約４００ｍｇの（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンナトリウム塩；
ｂ）塩基性の前処理が行われた低分子量ポリエチレングリコール；
ｃ）約１１．０～約１４．０の希釈されていないｐＨ；及び
ｄ）５％未満の水又は水溶液。

一実施形態において、そのような経口剤形は、ゲルカプセル、非ゼラチンカプセル、及び腸溶カプセルから選択される。そのような経口剤形では、薬物の濃度は、約３５～約３００ｍｇ／ｍＬ、又は約３５～２８０ｍｇ／ｍＬである。他の実施形態では、薬物の投与量は、経口剤形において約７０～８０ｍｇ又は約２７０～約２９０ｍｇである。

一実施形態において、治療される疾患は、血液癌又は増殖性疾患である。一実施形態では、疾患はＡＭＬ及びＭＤＳから選択される。

用語
別に定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。

本明細書で使用される用語は、以下の意味を有する。

本明細書では、用語「アルカリ化剤」は、塩基、例えば、水酸化バリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、メタケイ酸ナトリウム、水酸化カルシウム、リン酸三ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、水酸化アンモニウム、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トロメタミン、ピコリン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ、Ｎ’－ジベンジルエチレンジアミン、及び、アルギニン、リジン、及びグリシンを含むアミノ酸、並びに、それらの塩を指す。好ましいアルカリ化剤は、ＫＯＨ及びＮａＯＨ、特に４Ｎ～１０Ｎ、とりわけ４ＮのＮａＯＨである。

本明細書では、用語「塩基性低分子量ポリエチレングリコール」は、１つ以上のアルカリ化剤で処理された低分子量ポリエチレングリコールを指しており、このアルカリ化剤は、２番目のサプリメント（ＵＳＰ３９－ＮＦ３４，ｐｐ８５６０－８５６３，２０１６年１２月１日）に記載されているＰＥＧのモノグラフに従って測定された約１１～約１３の希釈されていないｐＨ、又は約９～約１１のｐＨを有している。ｐＨ測定の詳細な手順は、以下の実施例１に記載されている。

本明細書では、用語「化学的純度」は、製品に存在する不純物の割合を指す。不純物は、例えば、望ましくない溶媒、分解生成物、又は酸化生成物の形態であり得る。特定の実施形態では、化学純度は高く、すなわち９５％を超え、特に９７％、９８％、又は９９％を超える。

用語「追加の緩衝液を実質的に含まない」は、１重量％未満の追加された緩衝液を有する医薬組成物を指す。追加の緩衝液は、固体の形でも、又は弱酸とその共役塩基で構成される水溶液とすることができる。

本明細書では、用語「約」の意味は、それが使用される文脈に依存する。ｐＨに関して使用される場合には、用語「約」は、±０．２ｐＨ単位以内のレベルが含まれる。薬物濃度に関して使用される場合には、用語「約」は、非経口組成物の±５％の濃度を含み、そして、経口投与用溶液の±１５％の濃度を含む。例えば、約７５ｍｇ／ｍＬのリゴサチブの非経口組成物には、６７．５～８２．５ｍｇ／ｍＬのリゴサチブが含まれる。

本明細書では、用語「医薬組成物」は、病気を治療するための哺乳動物（例えば、人間）に投与される薬学的に許容される担体における、例えば、特定量（例えば、治療有効量）の治療化合物を含む混合物を意味する。

本明細書では、用語「薬学的に許容される」は、それらの化合物、材料、組成物、及び／又は剤形を指し、これらは、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、及び、合理的な利益／リスク比に見合ったものであるその他の問題の合併症がない状態で、健全な医学的判断の範囲内で、哺乳類（特に、人間）の組織との接触に適している。

用語「治療」は、疾患、状態、又は障害と闘うことを目的とするための患者の管理及びケアを意味すると理解される。

用語「低分子量ポリエチレングリコール」又は「ＰＥＧ」は、ＰＥＧ２００、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ６００、及びＰＥＧ８００、並びに、それらの組み合わせを含むと理解される。

剤形

医薬組成物には、経口又は非経口（特に静脈内）の投与に適したものが含まれる。医薬組成物は、その単位投与量で及び経口使用のために液体として利用することができる形態（例えば、全く同じように充填された溶液、エリキシル、又はカプセル）で、又は、非経口使用のために、投与前に希釈される濃縮溶液を含む無菌注射溶液の形態で、配置することができる。そのような医薬組成物及びその単位剤形は、従来の割合で従来の成分を含むこともでき、そして、そのような単位投与形態は、使用すべき予定された１日投与量範囲と同等な任意の適切な有効量の活性成分を含むことができる。

リゴセルチブは、多種多様な経口及び非経口剤形で投与することができる。経口剤形には、硬カプセル又は軟カプセルの濃縮液が含まれる。カプセルのシェルは、ゼラチン又は非ゼラチンで構成することができる。カプセルは、遅延放出ポリマーでコーティングすることができ、又は、そのような遅延放出ポリマーはシェルの組成物の一部とすることができる。特定の実施形態では、リゴサチブは、経口投与用の軟ゲルカプセルに液体として配合される。別の実施形態において、リゴサチブは、腸溶性コーティングされたカプセル中の液体として処方される。別の実施形態では、リゴセルチブは、Ｃａｐｓｕｇｅｌ社によるｅｎＴＲｉｎｓｉｃ（商標）カプセルなどの遅延放出セルロース材料で作られたカプセル中に液体として製剤化される。

リゴサチブは、また、水又は他の適切な飲料に濃縮液体製剤を混合し、次いで患者に液体を飲ませることによって、経口投与することができる。

経口使用に適した水溶液は、活性化合物をポリエチレングリコールに溶解し、必要に応じて、適切な着色剤、香料、安定化剤及び増粘剤を加えることによって、調製することができる。経口製剤は、標準的な担体を含むことができる。そのような組成物は、患者への適切な投与のための形態を提供するために、適切な量の担体と共に、好ましくは精製された形態で、治療有効量の化合物を含む。

カプセル当たり３５ミリグラム、７０ミリグラム、１４０ミリグラム、２８０ミリグラム、３００ミリグラム、又は４００ミリグラムの活性成分、又は、より広範な３５～４００ミリグラムを含む経口製剤は、結果的に、適切な代表的な単位剤形である。そのような経口剤形は、約３５ｍｇ／ｍＬ～約３００ｍｇ／ｍＬのリゴサチブの濃度を有することができる。そのような経口剤形は、３５ｍｇ、７０ｍｇ、７５ｍｇ、１４０ｍｇ又は２８０ｍｇの投与量を含むことができる。

活性剤は、（例えば、（例えば濃縮製剤の希釈後の連続注入を介した）注射による）非経口投与を行うために製剤化することができ、そして、アンプル、バイアル、事前に充填されたシリンジ、小容量の注入の単位投与量形態で、又は、防腐剤の追加の有無にかかわらない複数回投与容器で提供することができる。非経口製剤は、適切な抗酸化剤、浸透圧調整剤、安定化剤、及び他の薬学的に許容される賦形剤を含むことができる。適切な抗酸化剤には、亜硫酸水素ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、アスコルビン酸ナトリウム、Ｌ－システイン及びチオ硫酸ナトリウム、ホルムアルデヒドスルホキシル酸ナトリウム、クエン酸、ｄ，ｌ－α－トコフェロール、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、モノチオグリセロール、アスコルビン酸、及び没食子酸プロピルが含まれる。

特定の実施形態では、バイアル内の溶液は、約６重量％～約８．５重量％のリゴサチブを含む。別の実施形態では、バイアル内の溶液は、約６重量％～約７重量％のリゴサチブを含む。これらのバイアルは、飲料を形成するために混合される非経口液剤又は経口液剤のために使用することができる。

好ましい実施形態では、本発明の組成物は、ヒトへの静脈内投与に適合した医薬組成物として、日常的な手順に従って製剤化される。通常、静脈内投与用の組成物は、塩基性ポリエチレングリコールの滅菌溶液である。必要な場合、組成物は、注射部位の痛みを和らげるために、可溶化剤とリグノカインなどの局所麻酔薬とを含むことができる。一般に、成分は、例えば、密閉容器（例えば、活性剤の量を示すバイアル、アンプル又はサシェ）における水を含まない濃縮物として、個別に、又は単位剤形で一緒に混合して供給される。本発明の組成物を注入により投与する場合には、それは、希釈及び／又は投与に適した流体（例えば、滅菌医薬グレードの水、リンゲル液、乳酸リンゲル液、５％デキストロース溶液）、又は生理食塩水を含有する注入バッグ又はボトルで分配することができる。注入期間は、約１５分から約７日とすることができる。本発明の組成物が注射により投与される場合には、成分が投与前に混合することが可能なように、注射用滅菌水又は生理食塩水のアンプルを提供することができる。

非経口製剤は、約３５ｍｇ／ｍＬ～約３００ｍｇ／ｍＬの濃度のリゴサチブを含むことができる。いくつかの実施形態において、リゴサチブの濃度は、約７５ｍｇ／ｍＬである。

本発明の医薬組成物は、単位投与量又は複数投与量の容器（例えば、密封されたアンプル及びバイアル）で提供されており、但し、滅菌液体キャリア（例えば、注射用水）の追加が、使用する直前に必要となる。

本発明は、リゴセルチブのバイアル又はアンプルと担体として適切な液体（例えば、水）の容器とを含むキットを含む。

治療方法

本発明の治療方法で治療することのできる悪性及び転移状態には、血液癌及び固形腫瘍が含まれるがこれらに限定されず、本明細書に記載されその他の当該技術分野で公知のすべての癌を含む（そのような障害の評価については、Fishman et al., Medicine, 2d Ed., J. B. Lippincott Co., Philadelphia (1985)参照）。

血液学的悪性疾患は、血液、骨髄、及びリンパ節に影響を及ぼす癌の種類である。３つの系統は免疫系を介して密接に関連しているため、３つの系統のうちの１つに影響を与える疾患は、他の系統にしばしば影響を与えることがあるであろう。例えば、リンパ腫はリンパ節の病気であるが、しばしば、骨髄に拡がって血液に影響を与え、場合によってはパラプロテインを生成する。

血液癌は、通常、２つの主要な血液細胞系統（骨髄系及びリンパ系細胞系）のいずれかに由来する。骨髄細胞株は、通常、顆粒球、赤血球、血小板、マクロファージ、マスト細胞を生成する。リンパ系細胞株は、Ｂ，Ｔ，ＮＫ及び形質細胞を生成する。リンパ腫、リンパ球性白血病、及び骨髄腫はリンパ系に由来しており、急性及び慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、骨髄増殖性疾患は骨髄由来である。血液疾患としては、数ある中で、白血病、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、ＭＤＳ（骨髄異形成症候群）、ＭＰＮ（骨髄増殖性腫瘍）、ＭＤＳ／ＭＰＮオーバーラップ、並びに、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性単球性白血病（ＡＭＯＬ）、リンパ腫、ホジキンリンパ腫（４つのサブタイプのすべて）、非ホジキンリンパ腫、及び、好酸球増加症を伴うＰＤＧＦＲ／ＦＧＦＲ１を再構成する骨髄／リンパ系新生物が挙げられるが、これらに限定されない。

固形腫瘍としては、数ある中で、前立腺癌、肺、乳、卵巣、胃、膵臓、喉頭、食道、精巣、肝、耳下腺、胆道、結腸、直腸、子宮頸部、子宮、子宮内膜、腎臓、膀胱、甲状腺癌；原発腫瘍及び転移、黒色腫；膠芽腫、カポジ肉腫；平滑筋肉腫、非小細胞肺がん、大腸がん、頭及び首が挙げられるが、これらに限定されない。

本発明の医薬組成物及び方法は、造血幹細胞に関連する疾患の症状の治療及び／又は改善に特に有効である。血液の細胞要素は、多能性造血幹細胞に由来する。幹細胞は、広範囲の再生能力と分化能力を有しており、そしてリンパ球及び骨髄前駆細胞を生成し、その後、リンパ球、好中球、好酸球、好塩基球、赤血球、及び血小板を生成する。骨髄異形成症候群では、分化プロセスの調節不全が発生するものと考えられる。骨髄異形成症候群の死亡率は、出血、再発感染、及び白血病の変化に関連している。治療が行われない場合には、骨髄異形成症候群は、急性骨髄性白血病への変換を伴うか又は伴わない、急速に致命的な疾患になる可能性がある。骨髄異形成症候群の成人の推定２０～４０％が白血病を発症し、骨髄異形成症候群の患者の３０～４０％が感染、出血、又はその両方で死亡する。

急性骨髄性白血病は、成人に発生する急性白血病の最も一般的な変異体であり、２０歳を超える個体で診断された急性白血病の症例の約８０～８５％を含む。骨髄造血細胞の急性白血病障害の不均一なグループは、急性骨髄性白血病、急性骨髄性白血病、急性骨髄性白血病、急性骨髄芽球性白血病、急性顆粒球性白血病、及び急性非リンパ性白血病を含めたさまざまな名前で呼ばれている。ｒｅｄｄｙｎａｎｔ芽球の骨髄性は、特徴的な形態学的及び免疫学的所見の検出により決定できる。この病気の臨床的側面は、C. A. Schiffer 及び R. M. Stone in Cancer Medicine, Ed. David W. Kuferootら, 6.sup.th Edition, B. C. Decker, 2003によって、評価され、その全開示は参照により本明細書に組み込まれる。

腫瘍細胞の生存及び有糸分裂経路に対する二重の効果によって、リゴサチブは、血液悪性腫瘍や固形腫瘍など、さまざまな種類の癌に有用である可能性がある。進行中の臨床試験では、ＭＤＳでのリゴセルチブの活性を評価している：第ＩＩＩフェーズ及び第ＩＩフェーズ試験、ＡＭＬ及びＣＬＬを含むその他の血液悪性腫瘍：転移性膵臓がんのランダム化された第ＩＩフェーズ及び卵巣がんの第ＩＩフェーズを含む、固形腫瘍。

リゴセルチブを用いた広範な第Ｉフェーズ、第ＩＩフェーズ及び第ＩＩＩフェーズ試験は、ＭＤＳ及びＡＭＬを含む固形腫瘍及び血液癌を有する１２００人以上の患者を対象に、米国及び海外の主要施設で実施されてきたか又は実施中である。ＭＤＳとＡＭＬは管理が困難であると広く認識されている血液疾患であり、患者（特に、薬剤耐性疾患の患者）には限られた治療選択肢しかない。

リゴサチブは、この薬物の最適な投与量及び抗白血病有効性を決定するために設計された第Ｉフェーズ及び第ＩＩフェーズの臨床試験で治療されたＭＤＳ及びＡＭＬ患者で安全であり活性を有していた。これらの研究は、リゴサチブの安全性と活性の包括的な評価の一部である。現在までに、ＭＤＳ又はＡＭＬの患者４００人以上が第Ｉフェーズ及び第ＩＩフェーズ試験で治療されている。これらの研究により、低メチル化剤での以前の治療に失敗した高リスクのＭＤＳ患者を対象とした進行中のマルチサイトの第ＩＩＩフェーズ試験が行われた。

一実施形態によれば、リゴサチブは、ＭＤＳ患者への静脈内注入として与えられた。１つの試験では、患者は、１週間おきに２～５日間、８００ｍｇのリゴサチブを投与された。別の実施形態によれば、患者は、１週間おきに３～６日間、６５０～１，７００ｍｇのリゴサチブが投与された。さらに別の実施形態によれば、患者は、最初に、８００ｍｇ～１，５００ｍｇのリゴサチブで３週間にわたり毎週２日間治療され、その後、治療なしで１週間治療された。これらの研究の治療計画は、１週間おきに３日間、１日あたり１，８００ｍｇのリゴサチブに変更された。一般に、患者は未熟な骨髄細胞（芽球）の数の少なくとも５０パーセントの減少又は安定化を示した。

一実施形態によれば、リゴサチブは、１日あたり６５０ｍｇ～３１２０ｍｇで癌患者に静脈内注入で与えられる。

一実施形態によれば、リゴサチブは、ＭＤＳ患者に経口投与された。１件の試験では、７０ｍｇ、１４０ｍｇ、２８０ｍｇ、５６０ｍｇ、及び７００ｍｇが１週間に１日１回投与され、そして、別の試験では、リゴセルチブは、２１日間のサイクルのうちの最初の１４日間については、７０ｍｇ（１日２回）、１４０ｍｇ（１日２回）、２８０ｍｇ（１日２回）、５６０ｍｇ（１日２回）、７００ｍｇ（１日２回）を投与するか、又は、１日あたり合計１１２０ｍｇの分割投与を行った。

一実施形態によれば、リゴサチブは、２つに分けた投与計画でＭＤＳ患者に経口投与された。１つの試験では、５６０ｍｇを朝に投与し、２８０ｍｇを２回目の夕方に２週間投与し、その後リゴサチブを１週間投与した。リゴサチブは、経口投与される場合には、通常、空腹状態で、特に食事の前後約１～約２時間、とりわけ食事の前後約２時間で投与される。

一実施形態によれば、リゴサチブは、尿路上皮毒性を低減することを意図した投与計画によって癌患者に経口投与され、この投与計画は、朝食の約１～２時間前に５６０ｍｇを投与し、続いて昼食の約２時間後又は最初の投与の約６～約８時間後に５６０ｍｇ又は２８０ｍｇを投与するか；又は、朝食の約１～２時間前に８４０ｍｇを投与し、続いて昼食の約２時間後又は最初の投与の約６～約８時間後に２８０ｍｇを投与することを含む。モデル化によると、２回目の投与をより短い間隔で投与することにより、睡眠サイクル中にリゴセルチブとその代謝物についての膀胱濃度が低下し、尿路上皮毒性が低下する。一実施形態では、リゴサチブは３週間投与され、その後１週間休薬される。一実施形態において、リゴセルチブは、尿路上皮毒性を低減することを意図した投与計画で癌患者に経口投与され、その投与計画は、朝食の約１～２時間前に５６０ｍｇを投与し、続いて昼食の約２時間後又は最初の投与から約６～８時間後に５６０ｍｇ又は２８０ｍｇを投与することを含むか；又は、朝食の約１～２時間前に８４０ｍｇを投与し、続いて昼食の約２時間後又は最初の投与の約６～約８時間後に２８０ｍｇを投与することを含む。ここで、リゴサチブは、３週間投与され、その後１週間休薬され、前記患者は２８日周期のうちの８日目から開始して、月に１週間、注射可能なアザシチジン７５ｍｇ／ｍ^２／日で治療される。そのような一実施形態では、前記癌患者は血液癌を有する。そのような一実施形態では、前記血液癌は、ＭＤＳ及びＡＭＬから選択される。一実施形態において、前記患者は、１日当たり少なくとも２Ｌの液体を飲むことが奨励される。一実施形態では、特に尿のｐＨが７．５未満である場合には、前記患者は重炭酸ナトリウム（６５０ｍｇ）を１日３回服用することが推奨される。

一実施形態において、リゴサチブは、尿路上皮毒性を低減することを目的とする投与計画で血液癌患者に空腹状態で経口投与され、この投与計画は、朝食の約１～２時間前に５６０ｍｇを投与し、続いて昼食の約２時間後又は最初の投与の約６～約８時間後に５６０ｍｇ又は２８０ｍｇを投与することを含むか；又は、朝食の約１～２時間前に８４０ｍｇを投与し、続いて昼食の約２時間後又は最初の投与の約６～約８時間後に２８０ｍｇを投与することを含む。リゴセルチブは、３週間投与し、その後１週間休薬する。
そして、前記患者は、２８日周期のうちの８日目から開始して、月に１週間、注射可能なアザシチジン７５ｍｇ／ｍ^２／日で治療される。そのような一実施形態では、前記血液癌患者は、ＭＤＳ及びＡＭＬから選択される癌を有する。一実施形態において、前記患者は、１日当たり少なくとも２Ｌの液体を飲むことが奨励される。一実施形態では、特に尿のｐＨが７．５未満である場合には、前記患者は重炭酸ナトリウム（６５０ｍｇ）を１日３回服用することが推奨される。

本明細書では、そのような特定の範囲を列挙することによって、列挙された範囲は、列挙された範囲の間のすべての特定の整数量も含むことを意図している。たとえば、約６５０ｍｇ～１，７００ｍｇのリゴサチブの範囲又は８００ｍｇ～１，５００ｍｇのリゴサチブの範囲では、６００ｍｇ、７５０ｍｇ、８５０ｍｇ、９００ｍｇ、９５０ｍｇ、１０００ｍｇ、１１００ｍｇ、１２００ｍｇ、１３００ｍｇ、１４００ｍｇ、１６００ｍｇ、及び１７００ｍｇのリゴセルチブを包含することを意図している。

別の実施形態において、リゴサチブの有効性は、ビダザ（アザシチジン）又はダコゲン（デシタビン）による治療に以前に失敗した高リスクのＭＤＳ患者において示された。彼らは、以前の治療の失敗が、リゴサチブへの反応に悪影響を及ぼさないことを発見した。これらの患者は、未熟な骨髄細胞の数が少なくとも５０パーセント減少又は安定化しており、生存期間の中央値は約３６週間であった。

後天性耐性癌

本発明の一実施形態によれば、本発明の化合物は、癌患者が耐性を獲得した特定の抗癌剤の投与の前に、同時に、及び／又は後に、薬剤耐性癌患者に投与することができる。

抗癌剤としては、数ある中で、細胞毒性剤、化学療法剤（数ある中で、アルキル化剤、代謝拮抗剤、アントラサイクリン、アルカロイド、トポイソメラーゼ阻害剤、モノクローナル抗体を含む）、ＥＰＯ（内生、組換え及び／又は合成ＥＰＯ）を含むＥＳＡを含む赤血球生成調節剤、エポエチンアルファ、プロクリット、エポゲン、エポエチンベータ、ダルベポエチンアルファ、及び／又はメトキシポリエチレングリコールエポエチンベータ；ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤（アザシチジン、デシタビン、５－フルオロ－２’－デオキシシチジン、５，６－ジヒドロ－５－アザシチジン、ゼブラリン、ファザラビン、ヒドラリジン、プロカイン、プロカインアミド、エピガロカテキンガレート、プサンマプリンＡ、又は（Ｓ）－２－（１，３－フィオキソ－１，３－ジヒドロ－イソインドール－２－イル）－３－（１Ｈ－インドール－３－イル）－プロピオン酸、又はその薬学的に許容される塩を含む）、レナリドマイドなどの免疫調節薬が挙げられる。

患者の癌が特定の治療に応答しないことは、２つの一般的な原因（すなわち、宿主因子及び癌細胞における特定の遺伝的又は後成的変化）のうちの１つから生じ得る。宿主因子には、以下が含まれる：薬物の吸収不良又は急速な代謝又は排泄が含まれ、その結果、血清レベルが低下する；特に高齢患者における薬物の効果に対する耐性が低く、その結果、線量を最適レベル以下に減らす必要がある；かさ高い腫瘍で発生する可能性やモノクローナル抗体や免疫毒素などの高分子量で組織浸透性の低い生物剤で発生する可能性があるので、腫瘍部位に薬物を送達できない。さらに、ホスト腫瘍環境の種々の変化は、がん治療に対する腫瘍の反応に影響を与える可能性があり、これらの影響には、数ある中で、正常細胞による薬物の局所代謝、腫瘍内の薬物の通過時間に影響を与える可能性のある腫瘍血液供給の正常ではない特徴、及び／又は普通ではない特徴が含まれる。

本発明の医薬組成物及び請求項に記載の治療計画は、抗癌剤又は治療に対する耐性又は抵抗性を高めることにより、癌治療における前述の障害の１つ又は複数を克服するのに有効である。したがって、本発明の方法は、癌患者の薬物抵抗性と闘い打ち負かすための効果的な癌治療のための追加のツールを提供する。

多くの癌が化学療法薬に対する耐性を発生させる主なメカニズムである多剤耐性は、多くの形態の化学療法が失敗する主な要因である。それは、様々な血液癌や固形腫瘍の患者に影響する。腫瘍は、通常、悪性細胞の混合集団で構成され、そのいくつかは、薬剤に敏感なものもあれば、その他は、薬剤に耐性があるものもある。化学療法は、薬物感受性細胞を破壊できるが、薬物耐性細胞の割合が高いままである。腫瘍が再び成長し始めると、残りの腫瘍細胞が薬剤耐性になるので、化学療法が失敗する恐れがある。

治療に対する抵抗性は、内部から化学療法薬を積極的に排出する腫瘍細胞膜における少なくとも２つの分子の「ポンプ」の存在に関連している。これにより、腫瘍細胞は、核又は細胞質内の薬物又は分子プロセスの毒性作用を回避できる。癌で化学療法抵抗性を付与することが一般的に見られる２つのポンプは、Ｐ糖タンパク質と、いわゆる多剤耐性関連タンパク質（ＭＲＰ）とである。それらの機能と重要性によって、それらは、いくつかの抗癌努力の標的である。

一実施形態によれば、本発明の組成物及び方法は、ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤、ＥＳＡ、又はそれらの組み合わせに対する耐性を克服する。

本発明の方法及び組成物は、特に外因性エリスロポエチン（ＥＰＯ）に対する抵抗性を獲得した患者における、癌及び癌に関連する貧血の治療に有用である。外因性ＥＰＯに対する耐性は、死亡リスクの増加と関連している。がん患者の貧血は、さまざまな作用及び経路のメカニズムを介して上昇する。これは、がん細胞の生物学的に活性な産物の結果として、又はがんの治療の結果として、体内のがん細胞の直接的な影響である可能性がある。貧血と血液がんとの進行の間にも関連がある。貧血の主な原因は、エリスロポエチン（ＥＰＯ）の産生不足、鉄欠乏、及び内因性ＥＰＯ抵抗性を伴う慢性疾患である。ＥＰＯを受けている患者の最大１０％が治療に対して反応性が低く、大量の薬剤が必要である。赤血球前駆細胞に抑制効果を発揮することによって、及び鉄代謝を破壊することによって、炎症性サイトカインは、ＥＰＯの作用に拮抗する。米国特許第８，６６４，２７２号明細書を参照。

本発明は、また、本発明の医薬組成物の１つ以上の成分で満たされた１つ以上の容器を含む医薬パック又はキットを提供する。製造、医薬品又は生物学的製剤の使用又は販売を規制する政府機関によって規定された形式の通知（この通知は、人的管理のための製造、使用、又は販売の機関による承認を反映している）は、場合により、そのような容器に関連付けられている。

本発明は、更に、以下の実施例によって説明するが、これらの実施例は、本発明の範囲に限定を課すものと決して解釈されるべきではない。それどころか、他の様々な実施形態、修正、及び均等物に頼ることができ、これらは、本明細書の詳細な説明を読んだ後に、本発明の精神及び／又は添付の特許請求の範囲から逸脱することなく、当業者にそれ自体を示唆することができることを明確に理解されたい。

（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－［（３－カルボキシメチル）アミノ－４－メトキシベンジルスルホンナトリウム塩（ＯＮ０１９１０．Ｎａ）は、米国特許第７，５９８，２３２号明細書の実施例４ａに記載されているように合成した。しかし、他の薬学的に適切な方法を使用することができる。（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－［（３－カルボキシメチル）アミノ－４－メトキシベンジルスルホンナトリウム塩は、０．１％～３％の水を含むことができる。

ＰＥＧ４００は、Ｃｒｏｄａから入手し、０．１～２％の水を含むことができる。その密度は１．１３Ｇｍｓ／ｍＬである。

実施例１
希釈法と直接プローブ法によるｐＨの測定

希釈法
二酸化炭素を含まない水１００ｍＬにサンプル５ｇを溶解し、飽和塩化カリウム溶液０．３０ｍＬを加える。詳細なサンプル調製手法については、ＵＳＰ３９－ＮＦ３４；第８５６２頁の２番目の補足資料に記載されています。ＵＳＰ３９＜７９１＞に記載のように、得られた溶液のｐＨを２５oＣ±２oＣで測定する。

２．１直接プローブ法によるｐＨの測定（希釈されていないｐＨとも呼ばれる）

Ｓｏｌｖｏｔｒｏｄｅプローブ（Ｍｅｔｒｏｈｍ、Ｃａｔ＃：６．０３３９．０１０又は均等物）は、非水溶液のｐＨを測定するように設計されており、これは、≦２．０％の水を有する溶液を一般に指す。新しいプローブは、製造元の指示に従って、使用する前に、最初に検査、調整、及び試験される。次に、ｐＨ４、７、９、及び１２のｐＨ標準緩衝液を使用して、Ｓｏｌｖｏｔｒｏｄｅ電極を備えたｐＨメータで較正を行う。ｐＨ１３緩衝液のｐＨ（０．２ＭのＮａＯＨで０．２ＭのＫＣｌをｐＨ１３に調整）をブラケット標準として確認した。この方法の有効範囲はｐＨ９．１～１３．０である。較正後に、ｐＨメータで「測定」モードに切り替え、電極を蒸留水ですすぎ、柔らかいティッシュを使用して電球の水を拭き取る。医薬品溶液を取り、サンプルが室温に達するようにする。サンプルの温度を取得して記録する（２５oＣ±３oＣ以内でなければならない）。次に、最低１５ｍＬのサンプルをきれいな２０ｍＬビーカー又はカップに注ぐ。小さな攪拌棒をビーカーに落とす。攪拌プレートにサンプルを置き、攪拌を開始する。電極の電球をサンプルに浸し、タイマーを開始する。１０分間で、小数点以下３桁でｐＨ値を記録する。電極をきれいにし、脱イオン水で完全にすすぐ。電極に潤いを与えて、同じサンプルを使用してもう一度ｐＨを測定する。すべてのサンプル分析が完了した後に、ブラケット溶液としてｐＨ１３緩衝液の読み取り値を確認する。小数点以下２桁で平均ｐＨ値を計算して報告する。この方法は、製剤の希釈されていないｐＨを決定するために使用される。希釈されていないｐＨは、通常、希釈法を使用して測定された相当するサンプルよりも、ｐＨ単位が約２高くなる。

実施例２
リゴサチブ（ＯＮ０１９１０．Ｎａ）注射用の非ｐＨ調整及びｐＨ調整の医薬品についての製造及び長期安定性

イントロダクション
リゴセルチブ（ＯＮ０１９１０．Ｎａ）の注射液（７５ｍｇ／ｍＬ）は、最初、ｐＨの調整なしで製造された。医薬品製剤は、ＰＥＧ４００中でのリゴセルチブの非水溶液である。医薬品の安定性は、ＮａＯＨの追加によって製剤のｐＨを上げることで、大幅に改善された。製造プロセス及び安定性は、ｐＨが調整されていない医薬品（ＺＢＮ０６０＆ＺＢＮ０６１）とｐＨを調整した医薬品（ＺＢＰ０２６＆ＺＢＲ００６）とで比較された。米国特許第８，４７６，３２０号明細書の実施例ＶＩＩＩ及びＩＸに示すように、２５％のＰＥＧ４００（７５％リン酸緩衝液、ｐＨ１０．０）及び５０％のＰＥＧ４００（５０％リン酸緩衝液、ｐＨ１０．０）中のリゴセルチブ水溶液に関するデータも提供される。

製造プロセス

ＯＮ０１９１０．ＮａのｐＨを調整していない濃縮物は、少量のＯＮ０１９１０．ＮａＡＰＩをＰＥＧ４００にゆっくり追加することにより調製した。完全に溶解するまで内容物を混合した。次に、バイアルに充填し栓をして密封する前に、溶液をろ過しました。

ｐＨを調整した濃縮物について、ＰＥＧ４００を４．０ＮのＮａＯＨで前処理して、希釈されていないｐＨを約ｐＨ１０から約ｐＨ１１に増加させた。次に、ＮａＯＨで処理されたＰＥＧ４００に攪拌しながら、ＯＮ０１９１０．ＮａＡＰＩをゆっくりと追加することにより、配合を開始した。２時間攪拌した後に、混合物のｐＨを直接プローブ法で測定し、ｐＨが目標（１２．８±０．２）内にない場合には、追加の４．０ＮのＮａＯＨを混合物に～２５０μｌずつ追加した。最終ｐＨが目標ｐＨ（１２．６±０．２）に達するまで、次のｐＨ測定の前に更に３０～４０分間撹拌を続けた。ＺＢＲ００６の最終組成は０．８％の水を含み、ＺＢＰ０２６の最終含水量は０．９重量％になるように計算される。次に、バイアルに充填して栓をして密封する前に、医薬品溶液をろ過した。本発明による高ｐＨ製剤の２ロット分についての成分の合計量を表１に示す。

安定性

医薬品のバイアルをさまざまな条件で安定性チャンバーに入れ、安定性プロトコルに従って、さまざまな時点で分析するためにサンプルを取り出した。上記４つのバッチ並びに米国特許第８，４７６，３２０号明細書の実施例ＶＩＩＩ及びＩＸの２５％及び５０％の水性ＰＥＧ／緩衝液製剤についての２５℃／６０％ＲＨ貯蔵条件での全不純物を表２にまとめる。異なるバッチ間での不純物の合計も図１に示されている。

要約

２５℃／６０％ＲＨで２か月以上保管した場合には、ｐＨが調整されていない医薬品（ＺＢＮ０６０及びＺＢＮ０６１）の合計不純物は、仕様限界（２．０％）を超えていた。リン酸緩衝液を含む２５％ＰＥＧも、２５℃／６０％ＲＨで２か月以上保存した場合には仕様外であった。これに対して、ｐＨが調整された医薬品（ＺＢＲ００６及びＺＢＰ０２６）についての放出時の合計不純物は大幅に減少し、そして、また、同じ保管条件（２５℃／６０％ＲＨ）で増加は大幅に低下した。２５℃／６０％ＲＨで１８か月保存した後でも、合計不純物は０．５％以下であり、他の製剤の合計不純物は１２か月で１．３％を超えていた。ｐＨが調整された医薬品（ＺＢＲ００６及びＺＢＰ０２６）の合計不純物は、傾向に基づいて、２４か月間において２５℃／６０％ＲＨで仕様（ＮＭＴ２．０％）内にあると予想される。

実施例３

リゴサチブ溶液の投与後におけるイヌでのリゴサチブの経口吸収

イントロダクション
リゴセルチブ（ＯＮ０１９１０．Ｎａ）の経口溶液を絶食させた外来種の雄ビーグルイヌに投与し、２つの製剤の間で吸収を比較した。

１．実験手順
経口リゴサチブ溶液の２つの製剤を調製した：
Ａ．７５ｍｇ／ｍＬのＯＮ０１９１０．Ｎａの通常ｐＨ濃縮液（ＵＳＰ＜７９１＞による最終ｐＨ：７．１１）
Ｂ．７５ｍｇ／ｍＬのＯＮ０１９１０．Ｎａの高ｐＨ濃縮液（ＵＳＰ＜７９１＞による最終ｐＨ：１０．１２）

２．１医薬品製剤の調製
ＯＮ０１９１０．ＮａについてのｐＨを調整していない濃縮物は、ＯＮ０１９１０．ＮａＡＰＩをＰＥＧ４００にゆっくりと追加し更に均一な溶液が得られるまでオーバーヘッド攪拌を使用して攪拌することによって、調製された。次に、医薬品を０．４５ μｍ膜フィルタでろ過した。最終医薬品のｐＨを希釈法で測定し（最終ｐＨは７．１１）、その後、冷蔵状態で保存しました。高ｐＨ製剤は、最初にＰＥＧ４００溶媒に４．０ＮのＮａＯＨを加えて、次に計量されたＯＮ０１９１０．ＮａＡＰＩをゆっくり加えて、そして均質な溶液が得られるまで～２時間混合することによって、調製した。溶液のｐＨを測定し、更に、ｐＨが１０に近づくまで４．０のＮａＯＨでさらに調整した。次に、医薬品を膜フィルタで濾過して、最終ｐＨを希釈法で測定した。次に、医薬品を０．４５μｍ膜フィルタでろ過し、使用するまで冷蔵状態で保存した。最終ｐＨは１０．１２である。両製剤の最終濃度は、～７５ｍｇ／ｍｌであった。

２．２動物への投与と採血
すべての動物は、強制経口投与を介する２５ｍｇ／ｋｇの単回経口投与の前に少なくとも１２時間絶食させた。約１．０ｍＬの全血を、頸静脈を介して、Ｋ２ＥＤＴＡを含むチューブに収集した。投与前に、約１０ｍＬの全血が採取された。採取後約３０分間で、血液を穏やかに混合して、抗凝固剤の分布を確保した。血液サンプルを収集して混合した直後に、それを湿った氷の上に置くか冷蔵してから、約３，０００ｒｐｍで４～８℃で１０分間遠心分離した。その後、血漿を採取し、サンプル収集から２時間以内に約－８０℃で凍結保存した。詳細な研究計画を以下に記載する（表３）。

２．３ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法による薬物濃度測定
イヌの血漿サンプル中の薬物濃度は、ＯＮ０１９１０について１０～４０００ｎｇ／ｍＬの較正範囲を有する社内開発のＬＣ－ＭＳ／ＭＳアッセイによる多重反応モニタリング（ＭＲＭ）により決定した。簡単に言うと、５容量のアセトニトリルを使用して、タンパク質沈殿法によってサンプルを抽出した。ボルテックス後に、サンプルを１２，０００ｒｐｍで５分間、冷蔵状態で遠心分離した。次に、上清を収集し、分析のために５μＬをＡｇｉｌｅｎｔ６４１０ＬＣ／ＭＳ／ＭＳシステムに注入した。移動相Ａ（ＭＰＡ）は水中の１０ｍＭ酢酸アンモニウムであり、移動相Ｂ（ＭＰＢ）はアセトニトリル中の０．１％ギ酸である。サンプルは、ＨｙｐｅｒｓｉｌＢＤＳＣ１８カラム（５μｍ，１００ｘ２．１ｍｍ）で５．５分間、５０％ＭＰＢの定組成溶離で分離した。使用した流量は０．２５ｍＬ／ｍｉｎであった。

２．結果
２つの異なるＯＮ０１９１０．Ｎａ医薬品溶液を投与した後のＯＮ０１９１０の濃度は表４にまとめられており、この表において、Ａ１、Ａ２、及びＡ３として識別される個々のイヌのデータが提供されており、ここで、同じイヌに最初にｐＨが調整されていない製剤が投与され、次に投与と投与の間に９６時間の休薬期間を設けて高ｐＨ製剤を投与した。薬物の吸収と暴露は、通常のｐＨ製剤と比較して、高ｐＨ製剤を経口投与されたイヌで顕著に高くなる。

イヌのデータ

実施例４
異なるロットのＡＰＩを使用して調製されたリゴサチブ製剤の投与後のイヌにおけるリゴサチブの経口吸収

イントロダクション
リゴサチブ（ＯＮ０１９１０．Ｎａ）の経口溶液を絶食させた外来種の雄ビーグル犬に投与し、３種の製剤間で吸収を比較した。

実験手順
経口リゴサチブ溶液の３種の製剤を調製した：
Ｃ．ＯＮ０１９１０．Ｎａについての７５ｍｇ／ｍＬのｐＨを調整していない濃縮液（ＵＳＰ＜７９１＞による最終ｐＨ：６．９８；ＡＰＩバッチ番号：ＯＮＡ１ＬＡ０３Ｊ）
Ｄ．ＯＮ０１９１０．Ｎａの７５ｍｇ／ｍＬの高ｐＨ濃縮液（ＵＳＰ＜７９１＞による最終ｐＨ：９．８２；ＡＰＩバッチ番号：ＯＮＡ１ＬＡ０３Ｊ）
Ｅ．ＯＮ０１９１０．Ｎａの７５ｍｇ／ｍＬの高ｐＨ濃縮液（ＵＳＰ＜７９１＞による最終ｐＨ：９．８０；ＡＰＩバッチ番号：ＯＮＡ１ＮＡ０４Ｊ）

医薬品製剤の調製
ＯＮ０１９１０．Ｎａ（ＡＰＩロット番号ＯＮＡ１ＬＡ０３Ｊ）のｐＨを調整していない濃縮液は、ＯＮ０１９１０．ＮａＡＰＩをＰＥＧ４００溶液にゆっくり加えて、均一な溶液が得られるまでオーバーヘッド攪拌を使用して攪拌するだけで調製された。次に、医薬品を０．４５μｍ膜フィルタでろ過した。最終医薬品のｐＨは、希釈法（最終ｐＨは６．９８）で測定され、その後冷蔵状態で保存された。

高ｐＨ製剤は、最初に４．０ＮのＮａＯＨをＰＥＧ４００媒体に加え、次に計量されたＯＮ０１９１０．ＮａＡＰＩをゆっくり加え、均質な溶液が得られるまで～２時間混合することによって、調製した。溶液のｐＨをＵＳＰ＜７９１＞希釈法で測定して、ｐＨが１０に近くなるまで４．０のＮａＯＨで更に調整した。次に、医薬品を膜フィルタでろ過し、希釈法により最終ｐＨを測定した。次に、医薬品を０．４５μｍ膜フィルタでろ過し、そして、使用するまで冷蔵状態で保存した。ｐＨが調整された製剤では、ＡＰＩが吸収に影響を与えるかどうかを比較するために、２つの異なるロットのＡＰＩ（ロット番号：ＯＮＡ１ＬＡ０３Ｊ及びＯＮＡ１ＮＡ０４Ｊ）を使用した。

動物への投与と採血
経口プレースメントを介して２５ｍｇ／ｋｇで単回経口投与する前に、すべての動物を一晩絶食させた。約１．０ｍＬの全血を、頸静脈を介して、Ｋ２ＥＤＴＡを含むチューブに収集した。投与前に、約１０ｍＬの全血が採取された。採取後の約３０分間において、血液を穏やかに混合して、抗凝固剤の分布を確保した。血液サンプルを採取して混合した直後に、それを湿った氷の上に置くか又は冷蔵して、４～８℃で約３，０００ｒｐｍで１０分間攪拌冷蔵した。血漿を採取して、サンプル採取から２時間以内に約－８０℃で凍結保存した。詳細な研究計画を以下に記載する（表５）。

ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ方法による薬物濃度測定
イヌの血漿サンプル中の薬物濃度は、実施例３について上述したように、ＯＮ０１９１０の較正範囲が１０－５０００ｎｇ／ｍＬである社内開発ＬＣ－ＭＳ／ＭＳアッセイによって、多重反応モニタリング（ＭＲＭ）により決定された。

結果
３種類の異なるＯＮ０１９１０．Ｎａの医薬品溶液を個々のイヌに投与した後のＯＮ０１９１０のＣｍａｘ及びＡＵＣを表５に示す。製剤に使用される多くの医薬原料のロットに関係なく、通常のｐＨ製剤と比較して高ｐＨ製剤で経口投与されたイヌにおいて高い吸収をイヌが示したことを、データは示した。

実施例５
３種類のカプセルを投与した後のイヌにおけるリゴサチブの経口吸収

イントロダクション
リゴサチブの３つの異なる形態（ＯＮ０１９１０．Ｎａ）の経口製剤をビーグル犬に投与して、異なる製剤間での吸収を比較した。

実験手順
経口リゴサチブの３種の製剤が調製された：
Ａ．２８０ｍｇのＯＮ０１９１０．ＮａＡＰＩのパウダーを充填した腸溶ｅｎＴＲｉｎｓｉｃ（商標）カプセル
Ｂ．１４０ｍｇのＯＮ０１９１０．Ｎａの高ｐＨ製剤を充填した腸溶ｅｎＴＲｉｎｓｉｃ（商標）カプセル
Ｃ．２８０ｍｇのＯＮ０１９１０．ＮａのｐＨが調整されていない製剤（Ｐｉｉバッチ番号：１９７０２．００８Ａ）を充填したソフトゲルカプセル。

高ｐＨ製剤の調製
高ｐＨ製剤を以下のように調製した（２００ｍＬの医薬製剤について）：

１６９．４６ｇのＰＥＧ４００（ＣｒｏｄａＳｕｐｅｒｒｅｆｉｎｅｄＰＥＧ４００）を５００ｍＬビーカーに量った。撹拌（Ｍｅｔｒｏｈｍのカタログ番号：６．０２２９．０１０）しながら直接プローブを使用して、初期ｐＨを５．９０に決定した。０．５ｍＬの４．０ＮＮａＯＨを加えて室温で～３０分間攪拌した後に、ｐＨは１３．３９として測定された。次に、５７．１４ｇのＯＮ０１９１０．Ｎａの医薬原料（ロット番号：１４２０８３４４）をｐＨ調整されたＰＥＧ４００にゆっくりと加えた。均質な懸濁液が得られるまで、混合物を７００ｒｐｍで～１時間撹拌した。直接プローブ法により、ｐＨは１０．３１として測定された。４．０ＮＮａＯＨを追加して毎回～３０分間攪拌した後にｐＨを再度測定するプロセスを、直接プローブ法によってｐＨが１２．３０～１３．００になるまで繰り返した。追加された４．０ＮＮａＯＨの合計量は～０．６ｍＬであり、医薬品の最終ｐＨは１２．６９であった。合計混合時間は、～３時間であった。ｐＨを調整した製剤を２５０μＭのふるいでろ過して、透明な淡黄色の溶液を得た。ろ過された医薬品の最終ｐＨは１２．２６であった。最終医薬品を冷蔵条件下でガラスバイアルに保存した。製剤の最終濃度は、２８０ｍｇ／ｍｌであった。

カプセル充填
製剤Ａについては、２８０ｍｇのＯＮ０１９１０．Ｎａの医薬原料のパウダーを慎重に計量し、空のｅｎＴＲｉｎｓｉｃカプセルに手動で充填した。キャップを閉じた。製剤Ｂについては、約１４０ｍｇの医薬を含む０．５６ｇの高ｐＨ製剤をシリンジで空のｅｎＴＲｉｎｓｉｃカプセルに移した。キャップを閉じた。製剤Ｃのソフトゲルには、約２８０ｍｇの医薬を含む１ｍＬのｐＨを調整されていない製剤が含まれている。

２８０ｍｇの経口ＯＮ０１９１０．Ｎａ（リゴサチブ）ソフトゼラチンカプセル（製剤Ｃ）の調製
Ｒｉｇｏｓｅｒｔｉｂのソフトゼラチンカプセルは、ＯＮ０１９１０．Ｎａの濃い透明な溶液を含む黄色の楕円形の不透明なカプセルで構成されていた。これらのカプセルには、ゼラチン，ＮＦ；グリセリン，ＵＳＰ；ソルビトールソルビタン溶液，ＮＦ；ＯｐａｔｉｎｔＷｈｉｔｅ（Ｇ－１８０００）；ＦＤ＆ＣＹｅｌｌｏｗ＃６パウダー；Ｄ＆Ｃイエロー＃１０；及び精製水，ＵＳＰが追加で含まれていた。リゴサチブカプセルは、次のように２８０ｍｇ効力で製造された。１０００ｍｇの重量である各２８０ｍｇ効力のカプセルには、６７３．４ｍｇのポリエチレングリコール４００，（ＮＦ）（ＤｏｗＣｈｅｍｉｃａｌＣｏｍｐａｎｙ）；２０ｍｇのポリエチレングリコール４０００，ＮＦ（ＤｏｗＣｈｅｍｉｃａｌＣｏｍｐａｎｙ）、及び２６．６ｍｇの精製水，ＵＳＰ中に溶解した２８０ｍｇのＯＮ０１９１０．Ｎａが含まれている。

２８０ｍｇの医薬品の製造プロセスでは、窒素ブランケット下で、ステンレス鋼製容器において、ＯＮ０１９１０．ＮａをＰＥＧ４００に加えることを含む。賦形剤及び薬物が完全に分散するまで、生成物を１５℃～２０℃で均質化した。生成物を室温で９～１２時間保持して、その後、溶解していない粒子がないか視覚的に確認した。未溶解の粒子が存在する場合には、内容物を氷浴又はチラーで３０～６０分間均質化した。次に、内容物を＃４０メッシュのハンドスクリーンに通して、その後、スクリーニングされたすべての材料を収集した。生成物は、１時間以上、気泡が観察されなくなるまで真空脱気された。次に、製品をカプセル化し、乾燥させ、視覚的に検査して、漏れ、不規則なもの、充填不足、及び粘着性を除去した。

動物への投与と採血
９匹のオスのビーグル犬を３つのグループ（３匹／グループ）に割り当てた。すべての動物を一晩絶食させた後に、２８０ｍｇの単回投与カプセルを単回経口投与した。約１．０ｍＬの全血を、頸静脈又は四肢静脈を介して、Ｋ２ＥＤＴＡを含むチューブに採取した。ただし、投与前に各イヌから２ｍＬの全血を採取したものは除く。血液を穏やかに反転させて、抗凝固剤と確実に均一に混合した。血液サンプルを収集して混合した直後に、それを湿った氷又は氷パックに置き、約３，０００ｒｐｍで１０分間、４～８℃で冷蔵遠心分離した。その後、血漿をあらかじめラベルを付けたｓｎａｐ－ｔｏｐの１．５ｍＬチューブに採取し、サンプル収集から２時間以内に約－８０℃で凍結保存した。詳細な投与計画は以下に記載した（表７）。

ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ方法による薬物濃度測定
血漿サンプル中の薬物濃度は、ＯＮ０１９１０の較正範囲が１０～１０，０００ｎｇ／ｍＬであり、そして潜在的な代謝物ＯＮ０１５００が１～１０００ｎｇ／ｍＬである、検証済みＬＣ－ＭＳ／ＭＳアッセイにより、多重反応モニタリング（ＭＲＭ）で決定した。簡単に言えば、４容量のアセトニトリルを使用したタンパク質沈殿法によってサンプルを抽出した。ボルテックス後に、サンプルを１４，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。次に、上清は、２０％ＡＣＮ／０％Ｈ２Ｏでさらに３倍に希釈され、そして、分析用のＡＢＳｃｉｅｘＡＰＩ－４０００ＬＣ／ＭＳ／ＭＳシステムに３μＬを注入しました。移動相Ａ（ＭＰＡ）は水中の酢酸アンモニウム１０ｍＭであり、移動相Ｂ（ＭＰＢ）はアセトニトリル中のギ酸０．１％である。ＨｙｐｅｒｓｉｌＢＤＳＣ１８カラム（５μｍ、１００ｘ２．１ｍｍ）で５５％ＭＰＢを使用したアイソクラティック溶出によって、サンプルを分離した。使用した流速は、０．２５ｍＬ／分であり、カラムを洗浄するために２．６～４．４分間０．５ｍＬ／分に変更した。実行時間の合計は、～５．１分間であった。

結果
３種の異なる経口製剤を投与した後のＯＮ０１９１０の濃度は、投与時間に対して、図２に示されている。薬物動態パラメータＣｍａｘを計算し、表８にまとめた。ソフトゲルの現在のｐＨを調整していない臨床投与形態と比較して、高ｐＨ製剤を充填したｅｎＴＲｉｎｓｉｃカプセルを投与したイヌでは、薬物への曝露が～１．７倍増加することをデータが示した。ＡＰＩパウダーで充填されたｅｎＴＲｉｎｓｉｃカプセルの露出は非常に低いものである。

概要
イヌの研究では、高ｐＨ製剤が充填されたｅｎＴＲｉｎｓｉｃカプセルの経口製剤は、ｐＨが調整されていない製剤を充填したソフトゲルカプセルと比較して、薬物曝露を～１．７倍増加させることが示された。

実施例６

輸液にリゴサチブ濃縮物を使用する治療プロトコル
リゴサチブ濃縮物は、ラベル付きの密封ガラスバイアルに入れた滅菌済みの濃縮溶液であり、２°Ｃ～８°Ｃで保管しなければならない。投与の直前に、リゴセルチブ濃縮物を解凍し、注射用の０．９％塩化ナトリウムで希釈する必要がある。再構成されたリゴセルチブは室温に維持し、投与は、再構成から６時間以内に、インラインフィルターを備えた注入ポンプを使用してポート又は中央ラインから開始しなければならない。

リゴサチブのラベルには、適用される規制要件を満たすための情報が含まれる。最初の８サイクルについての２週間サイクルの１、２、３日目、及びその後の４週間サイクルの１、２、３日目に、リゴサチブ１８００ｍｇ／２４時間を７２時間ＣＩＶ注入として投与した。輸液バッグは２４時間ごとに交換する必要があり、合計７２時間の輸液時間が完了するまで、その後の２４時間ごとに新しい輸液バッグを使用しなければならない。

供給方法
治験薬ＯＮ０１９１０．Ｎａ濃縮物，７５ｍｇ／ｍＬは、ｐＨ調整のための少量の水酸化ナトリウムを含むポリエチレングリコール４００（ＰＥＧ４００）を滅菌溶液として、１ｍＬあたり７５ｍｇのＯＮ０１９１０．Ｎａ（１ｍＬあたり７５ｍｇのリゴセルチブナトリウムに相当）を含むように製剤化されている。ＯＮ０１９１０．Ｎａ濃縮物，７５ｍｇ／ｍＬは、２４ｍＬの医薬品（１８００ｍｇ）を含むテフロン加工されたゴム栓付きの使い捨てガラスバイアルに包装されている。サイトでは、ＯＮ０１９１０．Ｎａ濃縮物の２５バイアルを含むカートンで提供されている。

ＯＮ０１９１０．Ｎａ濃縮物，７５ｍｇ／ｍＬの保管ガイドライン
バイアルは、光から保護するために、元の保管カートンで冷蔵（２°～８°Ｃ）において保管する必要がある。

バイアルの内容物が２°～８°Ｃで適切に保管された場合には、通常、固体又は液体の状態に見える。希釈の準備のためにバイアルを室温まで温めると、バイアルの内容物は、透明で、無色から黄色がかった、わずかに粘性の液体になるはずである。

投与用のＯＮ０１９１０．Ｎａ濃縮物の希釈
１．ＯＮ０１９１０．Ｎａ濃縮，７５ｍｇ／ｍＬは、投与前に０．９％塩化ナトリウム，ＵＳＰで希釈しなければならない。

２．希釈を準備する前に、冷蔵庫からバイアルを取り出し、室温で３０～６０分間放置してから、バイアルの内容物を静かに混ぜる。バイアルを周囲温度以上に温めることはできない。

３．ＯＮ０１９１０．Ｎａ濃縮物，７５ｍｇ／ｍＬには、抗菌防腐剤は含まれていない。希釈を準備するには、厳密な無菌技術に従わなければならない。

４．処方投与量（表９を参照）に必要なＯＮ０１９１０．Ｎａ濃縮物の容量，７５ｍｇ／ｍＬを０．９％塩化ナトリウムで希釈し、輸液バッグ内で最終容量５００ｍＬに濃縮する。ラテックスとＤＥＨＰを含まない輸液バッグを使用することを推奨する。あなたの場所がこれらを日常的に保持している場合には、光から保護するバッグが推奨される。

５．ＯＮ０１９１０．Ｎａ濃縮物が０．９％塩化ナトリウムと完全かつ均一に混合されるように、輸液バッグを数回静かに反転させる（ＰＥＧ４００媒体の密度と粘度は混合に影響する場合がある）。

６．使用前に、粒子状物質及び変色について輸液を視覚的に検査する。得られる溶液は、透明であり無色又はわずかに黄色でなければならない。

７．輸液が調製されると、室温で３０時間安定である。すなわち、輸液溶液が調製されると、輸液の投与は６時間以内に開始する必要がある。連続７２時間注入計画の２４時間セグメントごとに注入溶液の新しいバッチを準備する必要があり、新しいバッチごとに新しいＩＶバッグ及び注入セットを使用する必要がある。７２時間の計画を完了するには、５００ｍＬ注入の３つのバッチが必要である。

８．投薬エラー防止ソフトウェアを備えた輸液ポンプを使用して５００ｍＬの各輸液を２４時間にわたって管理し、ポンプが事前に設定された所定の制限を超えて動作する場合において、オペレーター及び患者に警告する。注入は、０．２～１．２ミクロンの孔径のインラインフィルターを備えた投与セットを通じて行う必要がある。

９．少し中断した場合には、注入を再開して、残りのリゴセルチブを送達する必要がある。被験者が増加に耐えられる場合には、２４時間以内に残りを送達するために注入速度を上げる必要がある場合がある（つまり、３０時間の安定時間枠内であれば、残りを送達できる）。長時間の中断により大量のリゴセルチブが残っている場合には、注入された量をＥＤＣに入れ、次のバッグを（安定性のために）開始する必要がある。見逃されたリゴセルチブを送達するために、４日目に新しいバッグを準備することができる。

１０．ＯＮ０１９１０．Ｎａ濃縮物と他の医薬とをＩＶバッグにおいて混合したり、又は、同じラインでＯＮ０１９１０．Ｎａと同時に他の医薬を投与したりしない。

実施例７

尿路上皮毒性を低するために、経口リゴサチブカプセルを単独で使用するか、アザシチジンと組み合わせて使用する治療プロトコル

リゴサチブのソフトゼラチンカプセルは、ｃＧＭＰの下で製造された。カプセルの充填材料の組成は、下記の通りである：

湿潤シェル材料の組成は以下の通りである：

上記組成のソフトゼラチンカプセルは、当該技術分野で公知の標準的な方法を使用して製造され、そして、以下の研究で使用された。

臨床プロトコルの要約：

連続投与と間欠投与との比較研究

リゴセルチブのソフトゼラチンカプセルは、ＬＲ（低リスク中間体１、又はＩＰＳＳ分類ごとの低リスク）輸血依存ＭＤＳ患者におけるこのフェーズ２試験で試験された。カプセル（５６０ｍｇ）は、空腹時、約１２時間間隔で１日２回投与された。医薬の総投与量は１日あたり１１２０ｍｇであった。
さまざまな治療計画が試験された：
・連続投与、つまり、４週間のうち４週間。９人の患者が治療された。
・間欠投与、つまり、２週間投与して１週間休薬。３５人の患者が治療された。

連続的なリゴセルチブ投与のコホートは、尿中有害事象（ＡＥ）が高いため早期に中止された。間欠投与は連続投与よりも許容性が良好であったが、尿中有害事象の発生率には依然として問題があった。したがって、間欠投与でも、尿中有害事象を減らす改善された投与計画が依然として必要であった。

２つの投与間の短い間隔の研究：フェーズＩＩ、パート２（拡張）（Ｎ＝最大４０人の評価可能な患者）：

この研究は、高リスクＭＤＳの患者で実施された。ＲＡＥＢ－ｔ（形質転換における過剰な芽球を伴う難治性貧血）／非増殖性ＡＭＬは適格であったが、ＣＭＭＬ（慢性骨髄単球性白血病）の患者は除外された。

この試験のフェーズＩＩ，パート２のコンポーネントは、２４時間にわたって１１２０ｍｇのリゴセルチブを投与する最大２０人の患者の２つのコホート（空腹状態の朝食前の朝に５６０ｍｇ及び午後に５６０ｍｇであるか、又は、空腹状態の朝食前の朝に８４０ｍｇ及び午後に２８０ｍｇである）に１：１でランダム化された、評価可能な患者４０人までの２つのコホートで構成されている。両方のコホートの午後の投与は、昼食後の少なくとも２時間において午後３時（±１時間）に投与する必要がある。各コホートは、ＨＭＡ（低メチル化剤）の投薬を受けていない患者とＨＭＡ難治性患者との間で層別化される。

投与された治療：

各患者は、医薬摂取の日及び時間を示す日記に記入し、毎日の尿検査のｐＨと顕微鏡での血尿検査とを記録する必要があった。リゴサチブは、Ｏｎｃｏｎｏｖａによって（異なる投与量が必要な場合には）２８０ｍｇ及び７０ｍｇのカプセルとして供給された。患者は間欠投与の計画としてリゴセルチブを経口投与した（３週間の投与、１週間の休薬）。リゴサチブは、患者が別の理由で入院しない限り、外来患者ベースで投与された。リゴセルチブの経口投与は、アザシチジン（「ＡＺＡ」）の投与に７日間先行していた。リゴサチブは、空腹状態で１日２回服用する必要がある。患者は、一晩絶食した後に空腹で朝の服用を行い、服用後１時間待って朝食を取るように指示された。午後の投与量は、昼食後少なくとも２時間、空腹時におよそ午後３時（±１時間）に服用し、患者は次の食事まで１時間待つ必要がある。午後の投与は、最初の投与から約６～８時間後に行われた。断食期間中には水が許可された。良好な水分補給（すなわち、１日あたり少なくとも２リットルの水）がすべての患者に推奨された。患者が就寝前に膀胱を空にすることも推奨された。患者が朝の投与から約２時間後に尿のｐＨ試験を行い、ｐＨが７．５未満であった場合には、患者は６５０ｍｇの炭酸水素ナトリウムを１日３回服用することが提案された。

８日目から開始して、ＡＺＡは、２８日間のサイクルの７日目において、ＳＣ注射又はＩＶ注入により７５ｍｇ／ｍ^２の１日投与量で投与された。

評価の基準：

安全性評価：病歴、身体検査、バイタルサイン（血圧、体温、呼吸数、脈拍）、体重、標準的な１２誘導心電図、検査室評価、毒性、及びＡＥ評価が研究全体を通じて監視された。尿中有害事象は、頻尿、排尿切迫、尿路痛、血尿、及び排尿障害である。

結果：表１０のデータは、薬物を約８時間の間隔で投与する場合には、尿中有害事象の発生率が劇的に減少することを示している。

特許、特許出願、及び刊行物を含めた、本明細書で引用されるすべての参考文献は、以前に具体的に組み込まれたかどうかにかかわらず、その全体が参照により組み込まれる。

上記の個々の節で言及された、本発明の様々な特徴及び実施形態は、必要に応じて、必要な変更を加えて他の節で応用される。したがって、１つの節で特定された特徴は、必要に応じて、他の節で特定された特徴と組み合わせることができる。

いくつかの特定の実施形態の前述の説明は、一般的な概念から逸脱することなく、他の人が現在の知識を適用することにより、そのような特定の実施形態に様々な応用を容易に修正又は適応できるのに十分な情報を提供しており、したがって、そのような応用及び修正は、開示された実施形態の均等物の意味及び範囲内で理解されるべきであり意図されるものである。本明細書で使用される語法又は用語は説明するためのものであり、限定のためではないことを理解されたい。図面及び説明において、例示的な実施形態が開示されており、そして、特定の用語が採用されている可能性があるが、それらは、特に明記しない限り、限定を目的としない一般的かつ説明的な意味のみで使用されており、すなわち、特許請求の範囲は限定されていない。さらに、本明細書で説明された方法の特定の工程は代替の順番で並んでいてもよく、又は工程が組み合わされてもよいことを、当業者は理解するであろう。したがって、添付の特許請求の範囲は、本明細書に開示された特定の実施形態に限定されないことが意図されている。当業者は、本明細書に記載の本発明の実施形態に対する多くの均等物を認識するか、又は日常的な実験のみを使用してその均等物を確認することができるであろう。そのような均等物は、添付の特許請求の範囲に含まれる。

Claims

（ａ）（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホン及びその薬学的に許容される塩；
（ｂ）ＰＥＧ２００、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ６００、及び／又はＰＥＧ８００のうちの１以上を含む、塩基性の前処理が行われた低分子量ポリエチレングリコール；及び
（ｄ）５％未満の水又は水溶液；
を含む、医薬組成物であって、
約１１．０～約１４．０の希釈されていないｐＨを有する医薬組成物。
２％以下の水又は水溶液が存在する、請求項１に記載の医薬組成物。
前記ポリエチレングリコールが、水酸化バリウム；水酸化ナトリウム；水酸化カリウム、メタケイ酸ナトリウム；水酸化カルシウム；リン酸三ナトリウム；炭酸カリウム；炭酸ナトリウム；水酸化アンモニウム；アルギニン、リジン、及びグリシンからなる群より選択されるアミノ酸、及びそれらの塩；ジエチルアミン；トリエチルアミン；トロメタミン；ピコリン；ジシクロヘキシルアミン；及びＮ，Ｎ’－ジベンジルエチレンジアミンからなる群から選択される少なくとも１つの塩基によって、前処理されている、請求項１又は２に記載の医薬組成物。
前記ポリエチレングリコールがＮａＯＨで前処理されている、請求項１～３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
前記前処理されたポリエチレングリコールについての希釈されたｐＨが、約９．０～約１１．０である、請求項１から４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
前記医薬組成物についての希釈されていないｐＨが、約１２．０～約１３．５である、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
前記医薬組成物についての希釈されていないｐＨが、約１２．６～約１３．０である、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンのナトリウム塩を含む、請求項１～６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
前記の前処理が行われた低分子量ポリエチレングリコールがＰＥＧ４００である、請求項１～８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
前記組成物が約１％未満の水を含む、請求項１～９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
前記組成物が追加の緩衝液を実質的に含まない、請求項１～１０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
前記組成物が、非経口投与に適しており、そして、約６～約８．５重量％の（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンのナトリウム塩を含む、請求項１～９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
前記組成物が、非経口投与に適しており、そして、約６．７～約８．３重量％の（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンのナトリウム塩を含む、請求項１～１２のいずれか一項に記載の医薬組成物。
前記組成物が、非経口投与に適しており、そして、約６～約７重量％の（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンのナトリウム塩を含む、請求項１～１２のいずれか一項に記載の医薬組成物。
前記組成物が、経口投与に適しており、そして、約３５ｍｇ／ｍＬ～約３００ｍｇ／ｍＬの（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンのナトリウム塩を含む、請求項１～９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
前記組成物が、経口投与に適しており、そして、約３５ｍｇ／ｍＬの（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンのナトリウム塩を含む、請求項１５に記載の医薬組成物。
前記組成物が、経口投与に適しており、そして、約７０ｍｇ／ｍＬの（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンのナトリウム塩を含む、請求項１５に記載の医薬組成物。
前記組成物が、経口投与に適しており、そして、約２８０ｍｇ／ｍＬの（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンのナトリウム塩を含む、請求項１５に記載の医薬組成物。
前記組成物が、非経口投与に適しており、そして、約７５ｍｇ／ｍＬの（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンのナトリウム塩を含む、請求項１２～１４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
前記組成物が、約８７重量％～約９４重量％のＰＥＧ４００を含む、請求項１２～１４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
前記組成物が、約９２ｗ／ｗ％のＰＥＧ４００及び約６．７ｗ／ｗ％の（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンのナトリウム塩を含む、請求項２０に記載の医薬組成物。
前記組成物が、
（ａ）（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンのナトリウム塩；
（ｂ）塩基性の前処理が行われたＰＥＧ４００；及び
（ｄ）２％以下の水又は水溶液；
を含む、請求項１に記載の医薬組成物であって、
約１２．６～約１３．０の希釈されていないｐＨを有する、請求項１に記載の医薬組成物。
各経口製剤において、約３５～約４００ｍｇの（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンのナトリウム塩を有する請求項１～１１、１５～１８、及び２２のいずれか一項に記載の医薬組成物を含む、経口製剤。
前記経口製剤が、ゲルカプセル、非ゼラチンカプセル、及び腸溶カプセルから選択される、請求項２３に記載の経口製剤。
医薬の濃度が約３５～約３００ｍｇ／ｍＬである、請求項２３～２４のいずれか一項に記載の経口製剤。
医薬の投与量が、約７０～約８０ｍｇ、又は約２７０ｍｇ～約２９０ｍｇである、請求項２３～２５のいずれか一項に記載の経口製剤。
異常な細胞増殖によって媒介される状態を治療するための、請求項１～２２のいずれか一項に記載の医薬組成物であって、前記組成物の有効量が、それを必要とする対象に投与される、請求項１～２２のいずれか一項に記載の医薬組成物。
前記状態が血液の癌から選択される、請求項２７に記載の医薬組成物。
前記血液の癌がＡＭＬ及びＭＤＳから選択される、請求項２８に記載の医薬組成物。
前記医薬組成物が、製剤当たり７０ｍｇ～２８０ｍｇの（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンのナトリウム塩を含む経口製剤である、請求項２７～２９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
前記医薬組成物が、製剤当たり２８０ｍｇの（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンのナトリウム塩を含む経口製剤において存在し、そして、前記経口製剤が、１日２回、約２８０ｍｇ～８４０ｍｇの投与量で前記対象に投与される、請求項２７～３０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
異常な細胞増殖によって媒介される状態を治療するための、請求項１～３１のいずれか一項に記載の医薬組成物であって、前記医薬組成物は、（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンのナトリウム塩の有効量を含み、
患者が、朝食の約１～２時間前に８４０ｍｇの１回目の投与量を経口投与され、そして、昼食の約２時間後に２８０ｍｇの２回目の投与量を経口投与されるか、又は、朝食の約１～２時間前に５６０ｍｇの１回目の投与量を投与され、昼食の約２時間後に２８０～５６０ｍｇの２回目の投与量を投与される、請求項１～３１のいずれか一項に記載の医薬組成物。
前記患者が、（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンのナトリウム塩を３週間投与した後に、１週間休薬し、更に、その患者に対して８日目から１週間アザシチジンも投与される、請求項３２に記載の医薬組成物。
異常な細胞増殖によって媒介される状態を治療するための、請求項１～３１のいずれか一項に記載の医薬組成物であって、前記医薬組成物は、（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンのナトリウム塩の有効量を含み、
患者が、朝食の約１～２時間前に８４０ｍｇの１回目の投与量を経口投与され、その１回目の投与から約６～約８時間後に空腹状態で２８０ｍｇの２回目の投与量を経口投与されるか、又は、朝食の約１～２時間前に５６０ｍｇの１回目の投与量を投与され、その１回目の投与から約６～約８時間後に空腹状態で２８０～５６０ｍｇの２回目の投与量を投与される、請求項１～３１のいずれか一項に記載の医薬組成物。
前記患者が、（Ｅ）－２，４，６－トリメトキシスチリル－３－［（カルボキシメチル）アミノ］－４－メトキシベンジルスルホンのナトリウム塩を３週間投与した後に、１週間休薬し、更に、その患者に対して８日目から１週間アザシチジンも投与される、請求項３４に記載の医薬組成物。