JP7181084B2 - 心臓傷害を処置するための方法 - Google Patents
心臓傷害を処置するための方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP7181084B2 JP7181084B2 JP2018515924A JP2018515924A JP7181084B2 JP 7181084 B2 JP7181084 B2 JP 7181084B2 JP 2018515924 A JP2018515924 A JP 2018515924A JP 2018515924 A JP2018515924 A JP 2018515924A JP 7181084 B2 JP7181084 B2 JP 7181084B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cardiac
- peptide
- progenitor cells
- composition
- subject
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
- A61K38/1883—Neuregulins, e.g.. p185erbB2 ligands, glial growth factor, heregulin, ARIA, neu differentiation factor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
- A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/34—Muscles; Smooth muscle cells; Heart; Cardiac stem cells; Myoblasts; Myocytes; Cardiomyocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
- A61P25/32—Alcohol-abuse
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/12—Antihypertensives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/14—Vasoprotectives; Antihaemorrhoidals; Drugs for varicose therapy; Capillary stabilisers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
- C07K14/4756—Neuregulins, i.e. p185erbB2 ligands, glial growth factor, heregulin, ARIA, neu differentiation factor
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/5044—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics involving specific cell types
- G01N33/5073—Stem cells
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/475—Assays involving growth factors
- G01N2333/4756—Neuregulins, i.e. p185erbB2 ligands, glial growth factor, heregulin, ARIA, neu differentiation factor
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/32—Cardiovascular disorders
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/52—Predicting or monitoring the response to treatment, e.g. for selection of therapy based on assay results in personalised medicine; Prognosis
Description
本願は、2015年9月25日に出願された米国仮特許出願第62/233,148号の優先権の利益を主張し、その内容全体が本明細書中に参照によって組み込まれる。
この仕事は、援助金U01 HL 100398のもとの米国国立衛生研究所/米国国立心肺血液研究所によって部分的に援助された。したがって、政府は、本発明において一定の権利を有する。
a)ヒト心臓前駆細胞を、心臓傷害を有するかまたは心臓傷害のリスクのある被験体から単離する工程;
b)上記被験体の細胞を、NRGペプチドまたは機能的改変体もしくはフラグメントに曝露する工程;
c)線維芽細胞および筋線維芽細胞への細胞の変換が抑制されるかどうか、ならびに/または上記細胞が心筋細胞へと優先的に分化するかどうかを決定することによって、上記細胞がNRGに応答性であるかどうかを評価する工程;
を包含し、ここで線維芽細胞および筋線維芽細胞への心臓前駆細胞の変換の抑制または心筋細胞への優先的分化が見出される場合、上記被験体は、NRGペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントでの心臓傷害の処置または防止から利益を得る。関連する局面において、上記方法は、上記被験体に由来する心臓前駆細胞に対して行われ、上記方法は、それら細胞を単離する工程を包含しない。例えば、NRGでの心臓傷害の処置または防止から利益を得る被験体を同定する方法が提供され、上記方法は、
a)心臓傷害を有するかまたは心臓傷害のリスクのある被験体に由来するヒト心臓前駆細胞を、NRGペプチドその機能的改変体もしくはフラグメントにインビトロで曝露する工程;ならびに
b)線維芽細胞および筋線維芽細胞への細胞の変換が抑制されるかどうか、ならびに/または上記細胞が心筋細胞へと優先的に分化するかどうかを決定することによって、上記細胞がニューレグリンに応答性であるかどうかを評価する工程;
を包含し、ここで線維芽細胞および筋線維芽細胞への心臓前駆細胞の変換の抑制または心筋細胞への優先的分化が見出される場合、上記被験体は、上記NRGペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントでの心臓傷害の処置または防止から利益を得る。
a)ヒト心臓前駆細胞を、心臓傷害を有するかまたは心臓傷害のリスクのある被験体から単離する工程;
b)線維芽細胞および筋線維芽細胞への心臓前駆細胞の変換を抑制すること、ならびに/または心筋細胞への心臓前駆細胞の分化を促進することによって、上記被験体の心臓前駆細胞がNRGペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントに応答するかどうかを評価する工程;ならびに
c)上記心臓前駆細胞が応答性である場合、NRGペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントを投与して、心臓傷害を処置または防止するか、またはその重篤度を低減する工程
を包含する。
関連する局面において、本発明は、このような方法で使用するための、あるいは心臓傷害の処置または防止から利益を得る被験体であると本明細書で記載されるとおりの方法によって同定された被験体を処置するための方法において使用するための、NRGペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントを提供する。
a)線維芽細胞および筋線維芽細胞への心臓前駆細胞の変換を抑制すること、ならびに/または心筋細胞への心臓前駆細胞の分化を促進することによって、NRGペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントに応答し得ることが見出された心臓前駆細胞を培養および拡大する工程;ならびに
b)上記拡大した心臓前駆細胞を、NRGペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントの治療上有効な量とともに上記被験体に投与する工程
を包含する。このような方法において使用するための、NRGペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントもまた提供される。
a)被験体から得られる心臓前駆細胞を単離する工程;
b)上記細胞を増殖培地中で培養する工程;
c)上記細胞を、NRGペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントの有効量とともにインキュベートして、心筋細胞の分化を促進する工程;および
d)上記筋細胞を単離する工程
を包含する。
この方法に続いて、上記心筋細胞が上記被験体に投与され得る。上記細胞は、工程a)においてサンプル(例えば、本明細書で記載されるとおりの生検サンプル)からインビトロで単離され得る。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目1)
ニューレグリンでの心臓傷害の処置または防止から利益を得る被験体を同定するための方法であって、該方法は、
a)ヒト心臓前駆細胞を、心臓傷害を有するかまたは心臓傷害のリスクのある被験体から単離する工程;
b)該被験体の細胞を、ニューレグリンペプチドまたは機能的改変体もしくはフラグメントに曝露する工程;
c)線維芽細胞および筋線維芽細胞への細胞の変換が抑制されるかどうか、ならびに/または該細胞が心筋細胞へと優先的に分化するかどうかを決定することによって、該細胞がニューレグリンに応答性であるかどうかを評価する工程;
を包含し、そしてここで線維芽細胞および筋線維芽細胞への該心臓前駆細胞の該変換の抑制または心筋細胞への優先的分化が見出される場合、該被験体は、該ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントでの心臓傷害の処置または防止から利益を得る、方法。
(項目2)
心臓組織再生の必要性のある被験体を処置するための方法であって、該方法は、
a)該被験体から単離された心臓前駆細胞を、ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントに曝露する工程;
b)該心臓前駆細胞がニューレグリンに応答性であるかどうかを評価する工程;ならびに
c)該被験体の心臓前駆細胞が応答性である場合、ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントの治療上有効な量を投与する工程
を包含する方法。
(項目3)
前記ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントは、前記被験体において、心筋細胞への心臓前駆細胞の分化を促進し、線維芽細胞および筋線維芽細胞への心臓前駆細胞の変換を抑制する、項目2に記載の方法。
(項目4)
前記被験体は、心臓傷害に罹患しているかまたは罹患していると予測される、項目2または項目3に記載の方法。
(項目5)
線維芽細胞および筋線維芽細胞への心臓前駆細胞の変換を抑制する工程は、心臓傷害後に心臓組織再生を誘導する、項目2~4のいずれか1項に記載の方法。
(項目6)
線維芽細胞および筋線維芽細胞への心臓前駆細胞の変換を抑制する工程は、心臓傷害後に心臓組織の修復を生じる、項目2~5のいずれか1項に記載の方法。
(項目7)
線維芽細胞および筋線維芽細胞への心臓前駆細胞の変換を抑制する工程は、心臓傷害後に心臓線維症を低減する、項目2~6のいずれか1項に記載の方法。
(項目8)
心臓傷害後に心臓線維症を低減することは、瘢痕形成を防止する、項目7に記載の方法。
(項目9)
線維芽細胞および筋線維芽細胞への心臓前駆細胞の変換を抑制する工程は、心臓傷害の発症を防止する、項目2~4のいずれか1項に記載の方法。
(項目10)
前記心臓前駆細胞は、幹細胞抗原-1(sca-1)細胞を発現する、項目2~9のいずれか1項に記載の方法。
(項目11)
前記sca-1細胞は、左室自由壁または心臓の血管もしくは血管周囲領域内に位置する、項目10に記載の方法。
(項目12)
ニューレグリンに応答性の心臓前駆細胞を有すると以前に決定された被験体において、心臓傷害後に心臓組織再生を誘導するための方法であって、該方法は、ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントの治療上有効な量を投与する工程を包含する方法。
(項目13)
ニューレグリンに応答性の心臓前駆細胞を有すると以前に決定された被験体において、心臓傷害後に心臓組織を修復するための方法であって、該方法は、ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントの治療上有効な量を投与する工程を包含する方法。
(項目14)
ニューレグリンに応答性の心臓前駆細胞を有すると以前に決定された被験体において心臓傷害の発症を防止するための方法であって、該方法は、ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントの治療上有効な量を投与する工程を包含する方法。
(項目15)
前記心臓傷害は、心臓血管疾患から生じる、項目4または12~14のいずれか1項に記載の方法。
(項目16)
前記心臓血管疾患は、冠動脈疾患;心不全;脳卒中;心筋梗塞;心筋症;高血圧症;虚血性心疾患;心房細動;先天性心疾患;心筋炎;心内膜炎;心膜炎;アテローム性動脈硬化症;血管疾患;左室収縮機能障害;冠動脈バイパス手術;心臓毒性化合物への曝露;甲状腺疾患;ウイルス感染;歯肉炎;薬物乱用;アルコール乱用、または高い血中コレステロールから生じる、項目15に記載の方法。
(項目17)
前記被験体は、心筋梗塞に罹患したことがある、項目16に記載の方法。
(項目18)
前記被験体は、心不全に罹患している、項目16に記載の方法。
(項目19)
前記心不全は、収縮性心不全である、項目18に記載の方法。
(項目20)
前記被験体は、哺乳動物である、項目2~19のいずれか1項に記載の方法。
(項目21)
前記哺乳動物は、ヒトである、項目20に記載の方法。
(項目22)
前記ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントは、静脈内投与または皮下投与される、項目2~21のいずれか1項に記載の方法。
(項目23)
前記ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントは、化学療法剤の治療上有効な量を投与する前、投与する間、もしくは投与した後に投与される、項目2~22のいずれか1項に記載の方法。
(項目24)
前記化学療法剤は、アザシチジンである、項目23に記載の方法。
(項目25)
前記ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントは、化学療法剤およびヒト心臓前駆細胞またはヒト胚性幹細胞とともに共投与される、項目23または24に記載の方法。
(項目26)
インビトロで、心筋細胞に向かう心臓前駆細胞の分化を促進し、線維芽細胞および筋線維芽細胞への心臓前駆細胞の変換を抑制するための方法であって、該方法は、
a)ヒト心臓前駆細胞を生物学的サンプルから単離する工程;
b)該細胞を増殖培地中で懸濁する工程;
c)該細胞を、ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントの有効量とともにインキュベートすることによって、心筋細胞分化を誘導する工程
を包含する方法。
(項目27)
心筋細胞が富化された細胞集団を生成するための方法であって、該方法は、
a)ヒト心臓前駆細胞を被験体から単離する工程;
b)該細胞を増殖培地中で培養する工程;
c)該細胞を、ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントの有効量とともにインキュベートして、心筋細胞への分化を促進する工程;および
d)該心筋細胞を単離する工程、
を包含する方法。
(項目28)
前記単離された心筋細胞は、前記被験体に投与される、項目27に記載の方法。
(項目29)
a)線維芽細胞および筋線維芽細胞への心臓前駆細胞の変換を抑制することならびに/または心筋細胞への該心臓前駆細胞の分化を促進することによって、ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントに応答し得ることが見出された心臓前駆細胞を培養および拡大する工程;ならびに
b)該拡大された心臓前駆細胞を、ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントの治療上有効な量とともに、被験体に投与する工程
を包含する方法。
(項目30)
ニューレグリンでの心臓傷害の処置または防止から利益を得る被験体を同定するための方法であって、該方法は、
a)ヒト心臓前駆細胞を、心臓傷害を有するかまたは心臓傷害のリスクのある被験体から単離する工程;
b)該被験体の細胞を、ニューレグリンペプチドまたは機能的改変体もしくはフラグメントに曝露する工程;
c)線維芽細胞および筋線維芽細胞への細胞の変換が抑制されるかどうか、および/または該細胞が心筋細胞へと優先的に分化するかどうかを決定することによって、該細胞がニューレグリンに応答性であるかどうかを評価する工程;
を包含し、そしてここで線維芽細胞および筋線維芽細胞への該心臓前駆細胞の該変換の抑制または心筋細胞への優先的分化が見出される場合、該被験体は、該ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントでの心臓傷害の処置または防止から利益を得る、方法。
(項目31)
心臓傷害を処置または防止するための方法であって、該方法は、
a)ヒト心臓前駆細胞を、心臓傷害を有するかまたは心臓傷害のリスクのある被験体から単離する工程;
b)線維芽細胞および筋線維芽細胞への心臓前駆細胞の変換を抑制すること、ならびに/または心筋細胞への該心臓前駆細胞の分化を促進することによって、該被験体の心臓前駆細胞が、ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントに応答するかどうかを評価する工程;ならびに
c)該心臓前駆細胞が応答性である場合、ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントを投与して、心臓傷害を処置または防止するかまたはその重篤度を低減する工程、
を包含する方法。
(項目32)
前記ヒト心臓前駆細胞は、心臓手術または心臓カテーテル検査の間に前記被験体から単離される、項目1、26、27、30、または31のいずれか1項に記載の方法。
(項目33)
前記ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントは、ヒト胚性幹細胞またはヒト心臓前駆細胞とともに共投与される、項目2、12~14、または31のいずれか1項に記載の方法。
(項目34)
前記共投与される心臓前駆細胞は、処置されている前記被験体から元々採取された、項目33に記載の方法。
(項目35)
前記ヒト胚性幹細胞またはヒト心臓前駆細胞は、前記ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントとともに同時に、逐次的に、連続して、または断続的に共投与される、項目33に記載の方法。
(項目36)
前記ニューレグリンペプチドは、NRG-1βペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントである、項目1~33のいずれか1項に記載の方法。
(項目37)
前記NRG-1βペプチドは、配列番号19または配列番号20のアミノ酸配列を含む組換えタンパク質である、項目36に記載の方法。
(項目38)
前記NRG-1βペプチドは、GGF2またはその機能的改変体もしくはフラグメントである、項目36に記載の方法。
(項目39)
前記ニューレグリンペプチドは、配列番号1もしくは配列番号2のアミノ酸配列またはその機能的改変体もしくはフラグメントを含む、項目38に記載の方法。
(項目40)
GGF2機能的改変体は、配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、または配列番号10のアミノ酸配列を含む、項目38に記載の方法。
(項目41)
前記ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントは、EGF様ドメインを含む、項目1~33のいずれか1項に記載の方法。
(項目42)
前記上皮増殖因子様ドメインは、配列番号13、配列番号14、配列番号15、配列番号16、配列番号17、または配列番号18のアミノ酸配列を含む、項目41に記載の方法。
(項目43)
前記ニューレグリンペプチドは、NRG-2またはその機能的改変体もしくはフラグメントである、項目1~33のいずれか1項に記載の方法。
(項目44)
前記ニューレグリンペプチドは、配列番号21もしくは配列番号22のアミノ酸配列またはその機能的改変体もしくはフラグメントを含む、項目1~33のいずれか1項に記載の方法。
(項目45)
ニューレグリンでの心臓傷害の処置または防止から利益を得る被験体を同定するための方法であって、該方法は、
a)心臓傷害を有するかまたは心臓傷害のリスクのある被験体に由来するヒト心臓前駆細胞を、ニューレグリンペプチドまたは機能的改変体もしくはフラグメントにインビトロで曝露する工程;および
b)線維芽細胞および筋線維芽細胞への細胞の変換が抑制されるかどうか、ならびに/または該細胞が心筋細胞へと優先的に分化するかどうかを決定することによって、該細胞がニューレグリンに応答性であるかどうかを評価する工程;
を包含し、ここで線維芽細胞および筋線維芽細胞への該心臓前駆細胞の該変換の抑制、または心筋細胞への優先的分化が見出される場合、該被験体は、該ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントでの心臓傷害の処置または防止から利益を得る、方法。
(項目46)
項目1~44のいずれか1項に記載の方法における使用のための、ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメント。
(項目47)
心臓組織再生の必要性のある被験体を処置するための方法での使用のためのニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントであって、該方法は、
a)該被験体から単離された心臓前駆細胞をニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントに曝露する工程;
b)該心臓前駆細胞がニューレグリンに応答性であるかどうかを評価する工程;を包含し、
該被験体の心臓前駆細胞が応答性である場合、ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントの治療上有効な量を投与する、
ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメント。
(項目48)
心臓組織再生の必要性のある被験体を処置するための方法における使用のためのニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントであって、ここで該被験体は、項目1または45に記載の方法によって、心臓傷害の処置または防止から利益を得る被験体であると同定されたことがある、ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメント。
(項目49)
心臓傷害を処置または防止するための方法における使用のためのニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントであって、該方法は、
a)ヒト心臓前駆細胞を、心臓傷害を有するかまたは心臓傷害のリスクのある被験体から単離する工程;
b)線維芽細胞および筋線維芽細胞への心臓前駆細胞の変換を抑制すること、ならびに/または心筋細胞への該心臓前駆細胞の分化を促進することによって、該被験体の心臓前駆細胞が、ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントに応答するかどうかを評価する工程;ならびに
c)該心臓前駆細胞が応答性である場合、ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントを投与して、心臓傷害を処置または防止またはその重篤度を低減する工程、
を包含する、
ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメント。
本開示がより容易に理解され得るために、ある特定の用語が、最初に定義される。これらの定義は、本開示の残りに鑑みて、および当業者によって理解されるものとして読まれるべきである。別段定義されなければ、本明細書で使用される全ての技術用語および科学用語は、当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。さらなる定義は、詳細な説明全体を通じて示される。
通常は、心臓線維芽細胞の活性化に起因する線維症は、心臓傷害後に、心臓再生を妨げ、収縮機能の喪失、病的リモデリング、ならびに心不全および心筋梗塞への罹病性に寄与する。哺乳動物の心臓は、NRGペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントを投与することによって、心臓傷害後に天然の再生能力を最大化するように刺激され得ることがいまや見出された。いくつかの実施形態において、その患者は、天然の心臓前駆細胞の供給を有するとして以前の手順によって同定された。あるいは、この天然の再生可能性は、ヒト心臓前駆細胞またはヒト胚性幹細胞の共投与(同時または逐次的、連続してまたは間欠的に)によって補充され得る。理想的には、共投与される心臓前駆細胞は、処置されている被験体から元々得られた。
NRGは、ErbBレセプターに結合する上皮増殖因子スーパーファミリーに関連する増殖因子である。それらは、心不全、心臓毒性および虚血の複数のモデルにおいて心機能を改善することが示されてきた。NRGはまた、脳卒中、脊髄損傷、神経因子曝露、末梢神経損傷および化学毒性のモデルにおいて神経系を保護することが示された(総説に関しては、Sawyer and Caggiano, 2011を参照のこと)。
いくつかの実施形態において、NRGペプチドは、NRG-1βまたはその機能的改変体もしくはフラグメントである。より具体的な実施形態において、NRG-1ペプチドまたはその機能的フラグメントは、NRG-1βアイソフォーム1、アイソフォーム2、アイソフォーム3、アイソフォーム4、アイソフォーム5、アイソフォーム6、アイソフォーム7、アイソフォーム8、アイソフォーム9、アイソフォーム10、アイソフォーム11、またはアイソフォーム12である。特に好ましい実施形態において、そのアイソフォームは、GGF2である。
いくつかの実施形態において、上記NRGペプチドは、グリア増殖因子、GGF2である。成熟GGF2のアミノ酸配列は、配列番号1および配列番号2に示される。いくつかの実施形態において、ペプチドは、GGF2の機能的改変体もしくはフラグメントを含む。心臓前駆細胞上のErbB3レセプターに結合しかつ活性化し、ErbBシグナル伝達を活性化するGGF2の機能的フラグメントは、配列番号2の371アミノ酸もしくはこれより少ない、例えば、370アミノ酸、369アミノ酸、368アミノ酸、367アミノ酸、366アミノ酸、365アミノ酸、360アミノ酸、355アミノ酸、350アミノ酸、340アミノ酸、330アミノ酸、320アミノ酸、310アミノ酸、300アミノ酸、290アミノ酸、280アミノ酸、270アミノ酸、260アミノ酸、250アミノ酸、240アミノ酸、230アミノ酸、220アミノ酸、210アミノ酸、200アミノ酸、190アミノ酸、180アミノ酸、170アミノ酸、160アミノ酸、150アミノ酸、140アミノ酸、130アミノ酸、120アミノ酸、110アミノ酸、100アミノ酸、90アミノ酸、80アミノ酸、70アミノ酸、60アミノ酸、55アミノ酸、50アミノ酸、45アミノ酸、40アミノ酸、35アミノ酸、30アミノ酸、25アミノ酸、20アミノ酸、もしくはこれより少ないアミノ酸を含み得る。
いくつかの実施形態において、上記NRGペプチドは、NRG-2ペプチド、例えば、NRG-2αまたはNRG-2βである。NRG-2αのアミノ酸配列は、配列番号21に示され、NRG-2βのアミノ酸配列は、配列番号2に示される。いくつかの実施形態において、ペプチドは、NRG-2αまたはNRG-2βの機能的改変体もしくはフラグメントを含む。心臓前駆細胞上のErbB3レセプターに結合しかつこれを活性化し、ErbBシグナル伝達を活性化するNRG-2αの機能的フラグメントは、配列番号21の329アミノ酸もしくはこれより少ない、例えば、325アミノ酸、320アミノ酸、310アミノ酸、300アミノ酸、290アミノ酸、280アミノ酸、270アミノ酸、260アミノ酸、250アミノ酸、240アミノ酸、230アミノ酸、220アミノ酸、210アミノ酸、200アミノ酸、190アミノ酸、180アミノ酸、170アミノ酸、160アミノ酸、150アミノ酸、140アミノ酸、130アミノ酸、120アミノ酸、110アミノ酸、100アミノ酸、90アミノ酸、80アミノ酸、70アミノ酸、60アミノ酸、55アミノ酸、50アミノ酸、45アミノ酸、40アミノ酸、35アミノ酸、30アミノ酸、25アミノ酸、20アミノ酸、もしくはこれより少ないアミノ酸を含み得る。心臓前駆細胞上のErbB3レセプターに結合しかつこれを活性化し、ErbBシグナル伝達を活性化するNRG-2βの機能的フラグメントは、配列番号22の297アミノ酸もしくはこれより少ない、例えば、295アミノ酸、290アミノ酸、280アミノ酸、270アミノ酸、260アミノ酸、250アミノ酸、240アミノ酸、230アミノ酸、220アミノ酸、210アミノ酸、200アミノ酸、190アミノ酸、180アミノ酸、170アミノ酸、160アミノ酸、150アミノ酸、140アミノ酸、130アミノ酸、120アミノ酸、110アミノ酸、100アミノ酸、90アミノ酸、80アミノ酸、70アミノ酸、60アミノ酸、55アミノ酸、50アミノ酸、45アミノ酸、40アミノ酸、35アミノ酸、30アミノ酸、25アミノ酸、20アミノ酸、もしくはこれより少ないアミノ酸を含み得る。
本開示の方法における使用に適したNRG改変体ペプチドまたはその機能的フラグメントは、EGF様ドメイン含有ペプチドを含む。いくつかの実施形態において、上記EGF様ドメイン含有ペプチドは、配列番号11または配列番号12のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、本発明の方法において使用されるNRGペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントは、NRG-1β、特にGGF2に由来するEGF様ドメインを含む。具体的な実施形態において、本発明の方法において使用されるNRGペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントは、GGF2に由来するEGF様ドメインを含む。他の具体的実施形態において、本開示の方法において使用されるペプチドまたはその機能的フラグメントは、NRG-1β、特に、GGF2に由来するEGF様ドメインを含む。本発明の方法における使用に適した例示的なEGF様ドメイン含有ペプチドは、配列番号13(EGFL1)、配列番号14(EGFL2)、配列番号15(EGFL3)、配列番号16(EGFL4)、配列番号17(EGFL5)、または配列番号18(EGFL6)に示されるアミノ酸配列を含み得る。
ある特定の実施形態において、本発明の方法における使用に適したNRGペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントは、精製された組換えペプチドもしくは化学合成されたペプチドである。
上記NRGペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントは、単独の活性薬剤として投与され得るか、またはそれらは、ヒト心臓前駆細胞もしくはヒト胚性幹細胞と組み合わせて投与され得る。さらなる薬剤は、上記NRGペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントと、他の化合物(例えば、同じもしくは類似の治療活性を示し、このような組み合わされた投与に関して安全かつ効果的であることが決定されるペプチド)を含め、ヒト心臓前駆細胞とともにもしくはなしで投与され得る。CHFの処置のために使用される他のこのような化合物としては、以下が挙げられる:脳性ナトリウム利尿ペプチド(BNP);スタチン(例えば、アトロバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、もしくはシンバスタチン);特定の神経ホルモンの形成もしくは作用をブロックする薬物(例えば、アンギオテンシン変換酵素インヒビター(ACEインヒビター)、アンギオテンシンレセプターアンタゴニスト(ARB)、アルドステロンアンタゴニストおよびβアドレナリン作動性レセプターブロッカー);心収縮性を増強するための変力物質(例えば、ドブタミン、ジゴキシン);血管拡張薬(例えば、ニトレート、ネシリチド);うっ血を低減するための利尿薬(例えば、フロセミド);1もしくはこれより多くの抗高血圧薬(例えば、βブロッカー、ACEインヒビターおよびARB);ニトレート(例えば、二硝酸イソソルビド);ヒドラジン;ならびに/またはカルシウムチャネルブロッカー。
心臓カテーテル検査もしくは心臓手術に関連して、被験体が、NRGに応答性である心臓前駆細胞の集団を有するか否かが決定され得る。代表的には、この分析は、上記被験体の心臓組織から生検材料を採取し、心臓前駆細胞のマーカー(例えば、Sca-1およびc-Kitのような)に関して組織をスクリーニングすることによって、行われる。ErbB2およびErbB3レセプターの存在はまた、心臓前駆細胞の存在を示す。上記被験体が、心臓前駆細胞の適切な集団を有すると一旦同定されたら、上記細胞は、上記細胞が線維芽細胞および筋線維芽細胞への低減した変換を示すこと、ならびに/または心臓細胞へと優先的に分化することによって応答するか否かを決定するために、NRGペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントに曝露される。心臓前駆細胞が上記NRGペプチドまたはその機能的改変体もしくはフラグメントに対するこの応答を示す被験体は、次いで、NRGペプチドまたはその機能的フラグメントもしくは改変体で処置される。これらの方法は、心不全を含め、任意の現在の心臓傷害、疑われる心臓傷害、または予期される心臓傷害と関連して使用され得る。
参考文献:
1.Arbustini et al.,Heart 80:548-558,1998
2.Bachinski and Roberts,Cardiol.Clin.16:603-610,1998
3.Carraway et al.,Nature 387:512-516,1997
4.Chang et al.,Nature 387:509-512,1997
5.Cohn et al.,N.Engl.J Med.339:1810-1816,1998
6.Galindo et al.,Journal of American Heart Assocication 3:e000773,2014
7.Falls.Exp.Cell Res.284(1):14-30,2003.
8.Higashiyama et al.,J.Biochem.122:675-680,1997
9.Hijazi et al.,Int.J.Oncol.13:1061-1067,1998
10.Holmes et al.,Science 256:1205-1210,1992
11.Joseph et al.,Tex.Heart Inst.J.36(6):510-20,2009
12.Lemke,Mol.Cell.Neurosci.7:247-262,1996
13.Lenihan et al.,American College of Chemistry Meeting,March 9-11,2013
14.No authors listed,Am.J.Cardiol.,83(2A):1A-38-A,1999
15.Peles and Yarden,BioEssays 15:815-824,1993
16.Sawyer and Caggiano,J.Mol.Cell Cardiol.51(4):501-5,2011
17.Siu et al.,Circulation 8:1022-1026,1999
18.SOLVD Investigators,N.Engl.J.Med.327:685-691,1992
心臓の細胞の単離
マウスの心臓の細胞の単離を、10mg/ml コラゲナーゼII、2.5U/ml ディスパーゼII、1μg/ml DNase I、および2.5mM CaCl2を使用して、20分間、37℃において心室の消化後に行った。心臓のCD31posCD45neg内皮細胞およびSca-1posCD31neg前駆細胞を、磁性活性化セルソーティングMicroBead技術(Miltenyi Biotec, Inc)を使用して単離した。
心筋生成分化を誘導するために、心臓前駆細胞を、10% FBSを補充したDMEM-LG培地中で72時間、5μM 5’-アザシチジンで予備処理し、2% FBS、1ng/ml TGFβ、100μM アスコルビン酸、0.2% DMSO、および10ng/ml bFGFを補充したDMEM-LG培地中で培養し、3日ごとに交換した。
マウスにおける心筋梗塞を、左冠動脈の恒久的な結紮によって誘導した。
αSMAおよびコラーゲンタイプIに関する細胞内染色を、固定し、透過化した細胞(Cytofix/Cytoperm kit, BD Biosciences)において、モノクローナルFITC結合体化抗αSMA抗体(Sigma)およびビオチン結合体化抗コラーゲンタイプI抗体(600-401-103; Rockland, Inc., Rockland, PA)を使用して行った。マウスIgG2a-FITC結合体化(Sigma)およびビオチン結合体化ウサギ全IgG(Jackson ImmunoResearch, Inc., West Grove, PA)を、アイソタイプコントロールとして使用した。生細胞および非生細胞を、LIVE/DEAD Fixable Stainキット(Life Technologies, Carlsbad, CA)を使用して区別した。
国際公開番号WO2010030317およびWO2014138502に記載されるとおりの確立されたアプローチに従って、複数のNRGスプライス改変体を、クローニングして生成した。
心臓前駆細胞の単離された亜集団の純度を決定するために、磁性活性化前および磁性活性化後のセルソーティングを行った(図1A)。次に、NRGレセプター(すなわち、ErbB2、ErbB3、Erb4)のいずれがマウス心臓前駆細胞において発現されるのかを決定するために、ErbBレセプターのmRNAを分析した。図1Bに示されるように、マウス心臓Sca-1posCD31neg間質細胞は、機能的なErbB2およびErbB3レセプターを発現した。NRGレセプターの発現を、Sca-1pos/CD31neg心臓前駆細胞上での細胞表面マーカーのフローサイトメトリーヒストグラム(図1C)を分析することによって確認した。これらの研究から、マウス心臓前駆細胞は、高レベルのErbB2、中程度のレベルのErb3、および非常に少ないErbB4を発現することが示された(図1B)。
図2Aは、増殖培地または内皮細胞分化培地中での心臓前駆細胞のインキュベーション後の、毛細管様構造形成の顕微鏡写真を示す。CD31pos心臓内皮細胞を、陽性コントロールとして使用した。図2Bは、増殖培地中または内皮細胞分化培地中でインキュベートした心臓前駆細胞、および心臓内皮細胞の形態発生活性のグラフ表示を示す。毛細管形成を、それらの全長を測定することによって評価した。通常の増殖培地中または心筋細胞分化培地中で、1週間または3週間培養した心臓Sca-1posCD31neg細胞における心臓特異的遺伝子発現を、リアルタイムRT-PCRを使用して分析した(図2C)。この研究から、マウス心臓前駆細胞は、内皮細胞および心筋細胞に向かって分化することを示す。値は、3回の実験の平均である。
代表的なフローサイトメトリードットプロットは、心臓前駆細胞が、マウスでの実験的心筋梗塞後7日目に、インビボでαSMA陽性およびコラーゲン1生成筋線維芽細胞に向かって蓄積することを示す(図3A)。図3Bは、αSMA陽性およびコラーゲン1α陽性Sca-1posCD31neg心臓前駆細胞のフローサイトメトリー分析からのグラフによる代表的データを示す。P値が示される(対応のないt検定)。TGFβ単独とともに、または30ng/ml NRG-1と組み合わせて、48時間インキュベートした心臓前駆細胞におけるαSMAタンパク質の発現は、図3Cにおいて代表的な細胞蛍光グラフィックドットプロットにおいて図示される。興味深いことに、この実験は、NRG-1が筋線維芽細胞発現を低減することを示す。さらに、心臓Sca-1posCD31neg前駆細胞におけるαSMA発現の平均蛍光強度を、フローサイトメトリーによって評価した(図3D)。データは、3回の独立した実験からの平均±SEMを表す。P値は、t検定によって計算された有意レベルを示す。
この研究は、ヒト心臓におけるNRGレセプターの位置決定を調べる。図4は、マウス心臓におけるErbBレセプターの類似の発現が、ヒト心臓に由来する心臓posCD31neg前駆細胞に存在することを示す。具体的には、ErbB2およびErbB3レセプターは、ヒト心臓の血管/血管周囲領域に位置する(図4)
この研究は、NRG-1で心臓前駆細胞を刺激することの効果を調査した。図5Aは、単一細胞由来クローンを再プレートした直後および3日後のヒト心臓前駆細胞の例示的な位相差顕微鏡写真を示す。スケールバー=100μm。次に、分化培地中で1週間または2週間培養する前および培養した後のヒト心臓前駆細胞における心臓特異的遺伝子発現を、リアルタイムPCRを使用して分析した(図5B)。値は、3回の実験の平均である(対応のないt検定)。図5Cは、ヒト心臓前駆細胞上の細胞表面マーカーの代表的フローサイトメトリーヒストグラムを示す。影付きの領域は、相当するアイソタイプマッチ抗体コントロールで処理した細胞の蛍光を表す。これらの研究は、NRG-1および内因性ErbBレセプターリガンドでの細胞の刺激が、筋線維芽細胞へのそれらの移行を防止することを示した。
Claims (47)
- ニューレグリンでの心臓傷害の処置または防止から利益を得る被験体を同定するための方法であって、該方法は、
a)心臓傷害を有するかまたは心臓傷害のリスクのある被験体から単離された心臓前駆細胞を、ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくは機能的フラグメントに曝露する工程;ならびに
b)線維芽細胞および筋線維芽細胞への該細胞の変換を抑制することによって、該心臓前駆細胞が該ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくは機能的フラグメントに応答するかどうかを評価する工程;
を包含し、そしてここで線維芽細胞および筋線維芽細胞への該心臓前駆細胞の変換が抑制される場合、該被験体は、ニューレグリンでの心臓傷害の処置または防止から利益を得るものであり、
前記機能的改変体は、EGF様ドメインを有し、心臓前駆細胞上にErbB3に結合し、かつNGR/ErbBシグナル伝達を誘導するペプチドであり、
前記機能的フラグメントは、心臓前駆細胞上にErbB3に結合し、かつNGR/ErbBシグナル伝達を誘導するペプチドである、方法。 - 心臓組織再生の必要性のある被験体を処置するための組成物であって、該組成物はニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくは機能的フラグメントを含み、ここで該被験体は、
a)該被験体から単離された心臓前駆細胞を、該ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくは機能的フラグメントに曝露する工程;ならびに
b)線維芽細胞および筋線維芽細胞への該細胞の変換を抑制することによって該心臓前駆細胞が、該ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくは機能的フラグメントに応答するかどうかを評価する工程;
を包含する方法によって決定される場合に、該ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくは機能的フラグメントに応答性である心臓前駆細胞を有し、
前記機能的改変体は、EGF様ドメインを有し、心臓前駆細胞上にErbB3に結合し、かつNGR/ErbBシグナル伝達を誘導するペプチドであり、
前記機能的フラグメントは、心臓前駆細胞上にErbB3に結合し、かつNGR/ErbBシグナル伝達を誘導するペプチドである、組成物。 - 被験体において心臓傷害を処置または防止するための組成物であって、該組成物は、ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくは機能的フラグメントを含み、ここで該被験体が心臓傷害を有するかまたは心臓傷害のリスクを有し、該被験体は、
a)該被験体から単離された心臓前駆細胞を、該ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくは機能的フラグメントに曝露する工程;ならびに
b)線維芽細胞および筋線維芽細胞への該細胞の変換を抑制することによって、該心臓前駆細胞が、該ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくは機能的フラグメントに応答するかどうかを評価する工程;
を包含する方法によって決定される場合に、該ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくは機能的フラグメントに応答性である心臓前駆細胞を有し、
前記機能的改変体は、EGF様ドメインを有し、心臓前駆細胞上にErbB3に結合し、かつNGR/ErbBシグナル伝達を誘導するペプチドであり、
前記機能的フラグメントは、心臓前駆細胞上にErbB3に結合し、かつNGR/ErbBシグナル伝達を誘導するペプチドである、組成物。 - 前記組成物が、前記被験体において、線維芽細胞および筋線維芽細胞への心臓前駆細胞の前記変換を抑制することを特徴とする、請求項2または請求項3に記載の組成物。
- 前記被験体は、心臓傷害に罹患しているかまたは罹患していると予測される、請求項2~4のいずれか1項に記載の組成物。
- 線維芽細胞および筋線維芽細胞への心臓前駆細胞の前記変換を抑制する工程は、心臓傷害後に心臓組織再生を誘導する、請求項2~5のいずれか1項に記載の組成物。
- 線維芽細胞および筋線維芽細胞への心臓前駆細胞の前記変換を抑制する工程は、心臓傷害後に心臓組織の修復を生じる、請求項2~6のいずれか1項に記載の組成物。
- 線維芽細胞および筋線維芽細胞への心臓前駆細胞の前記変換を抑制する工程は、心臓傷害後に心臓線維症を低減する、請求項2~7のいずれか1項に記載の組成物。
- 心臓傷害後に心臓線維症を低減することは、瘢痕形成を防止する、請求項8に記載の組成物。
- 線維芽細胞および筋線維芽細胞への心臓前駆細胞の前記変換を抑制する工程は、心臓傷害の発症を防止する、請求項2~5のいずれか1項に記載の組成物。
- 前記心臓前駆細胞は、心臓手術または心臓カテーテル検査の間に前記被験体から単離される、請求項2~10のいずれか1項に記載の組成物。
- 前記心臓前駆細胞は、幹細胞抗原-1(sca-1)を発現する、請求項2~11のいずれか1項に記載の組成物。
- 前記心臓前駆細胞は、前記被験体の心臓における左室自由壁または血管もしくは血管周囲領域内由来である、請求項12に記載の組成物。
- 被験体において、心臓傷害後に心臓組織再生を誘導するための組成物であって、該組成物は、ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくは機能的フラグメントを包含し、ここで該被験体が、ニューレグリンに応答性の心臓前駆細胞を有する被験体として請求項1に記載の方法によって特定されている、組成物。
- 被験体において、心臓傷害後に心臓組織を修復するための組成物であって、該組成物は、ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくは機能的フラグメントを包含し、ここで該被験体が、ニューレグリンに応答性の心臓前駆細胞を有する被験体として請求項1に記載の方法によって特定されている、組成物。
- 被験体において心臓傷害の発症を防止するための組成物であって、該組成物は、ニューレグリンペプチドまたはその機能的改変体もしくは機能的フラグメントを包含し、ここで該被験体が、ニューレグリンに応答性の心臓前駆細胞を有する被験体として請求項1に記載の方法によって特定されている、組成物。
- 前記心臓傷害は、心臓血管疾患から生じる、請求項3~16のいずれか1項に記載の組成物。
- 前記心臓血管疾患は、冠動脈疾患;心不全;脳卒中;心筋梗塞;心筋症;高血圧症;虚血性心疾患;心房細動;先天性心疾患;心筋炎;心内膜炎;心膜炎;アテローム性動脈硬化症;血管疾患;左室収縮機能障害;冠動脈バイパス手術;心臓毒性化合物への曝露;甲状腺疾患;ウイルス感染;歯肉炎;薬物乱用;アルコール乱用、および/または高い血中コ
レステロールから生じる、請求項17に記載の組成物。 - 前記被験体は、心筋梗塞に罹患したことがある、請求項18に記載の組成物。
- 前記被験体は、心不全に罹患している、請求項18に記載の組成物。
- 前記心不全は、収縮性心不全である、請求項20に記載の組成物。
- 前記被験体は、哺乳動物である、請求項2~21のいずれか1項に記載の組成物。
- 前記哺乳動物は、ヒトである、請求項22に記載の組成物。
- 前記組成物が、静脈内投与または皮下投与されることを特徴とする、請求項2~23のいずれか1項に記載の組成物。
- 前記組成物が、化学療法剤の治療上有効な量を投与する前、投与する間、もしくは投与した後に投与されることを特徴とする、請求項2~24のいずれか1項に記載の組成物。
- 前記化学療法剤は、アザシチジンである、請求項25に記載の組成物。
- 前記組成物が、前記化学療法剤およびヒト心臓前駆細胞またはヒト胚性幹細胞とともに同時に、逐次的に、連続して、または断続的に共投与されることを特徴とする、請求項25または請求項26に記載の組成物。
- 前記組成物が、ヒト心臓前駆細胞またはヒト胚性幹細胞とともに同時に、逐次的に、連続して、または断続的に共投与されることを特徴とする、請求項2~27のいずれか1項に記載の組成物。
- 前記共投与される心臓前駆細胞は、処置されている前記被験体由来である、請求項28に記載の組成物。
- 前記ニューレグリンペプチドは、NRG-1ペプチドまたはその機能的改変体もしくは機能的フラグメント、NRG-2ペプチドまたはその機能的改変体もしくは機能的フラグメントならびに/あるいは上皮増殖因子(EGF)様ドメインである、請求項2~29のい
ずれか1項に記載の組成物。 - 前記NRG-1ペプチドまたはその機能的改変体もしくは機能的フラグメントは、NRG-1βペプチドおよび/またはGGF2ペプチドを含む、請求項30に記載の組成物。
- 前記NRG-1βペプチドは、配列番号19、配列番号20、または配列番号19もしくは配列番号20の機能的改変体もしくは機能的フラグメントのアミノ酸配列を含む、請求項31に記載の組成物。
- 前記GGF2ペプチドは、配列番号1~10のいずれか一つ、または配列番号1~10のいずれか一つの機能的改変体もしくは機能的フラグメントのアミノ酸配列を含む、請求項31に記載の組成物。
- 前記EGF様ドメインは、配列番号13~18のいずれか一つ、または配列番号13~18のいずれか一つの機能的改変体もしくは機能的フラグメントのアミノ酸配列を含む、請求項30に記載の組成物。
- 前記NRG-2ペプチドまたはその機能的改変体もしくは機能的フラグメントは、配列番号21、配列番号22、または配列番号21もしくは配列番号22の機能的改変体もしくは機能的フラグメントのアミノ酸配列を含む、請求項30に記載の組成物。
- 前記ニューレグリンペプチドは、配列番号2のアミノ酸配列を含むGGF2ペプチドを含む、請求項2~29のいずれか1項に記載の組成物。
- 前記心臓前駆細胞は、前記被験体から単離されたものである、請求項1に記載の方法。
- 前記心臓前駆細胞は、心臓手術または心臓カテーテル検査の間に前記被験体から単離される、請求項37に記載の方法。
- 前記心臓傷害は、心臓血管疾患から生じる、請求項1、37または38に記載の方法。
- 前記心臓血管疾患は、冠動脈疾患;心不全;脳卒中;心筋梗塞;心筋症;高血圧症;虚血性心疾患;心房細動;先天性心疾患;心筋炎;心内膜炎;心膜炎;アテローム性動脈硬化症;血管疾患;左室収縮機能障害;冠動脈バイパス手術;心臓毒性化合物への曝露;甲状腺疾患;ウイルス感染;歯肉炎;薬物乱用;アルコール乱用、および/または高い血中コ
レステロールから生じる、請求項39に記載の方法。 - 前記ニューレグリンペプチドは、NRG-1ペプチドまたはその機能的改変体もしくは機能的フラグメント、NRG-2ペプチドまたはその機能的改変体もしくは機能的フラグメントならびに/あるいは上皮増殖因子(EGF)様ドメインである、請求項1または請求
項37~40のいずれか1項に記載の方法。 - 前記NRG-1ペプチドまたはその機能的改変体もしくは機能的フラグメントは、NRG-1βペプチドおよび/またはGGF2ペプチドを包含する、請求項41に記載の方法。
- 前記NRG-1βペプチドは、配列番号19、配列番号20、または配列番号19もしくは配列番号20の機能的改変体もしくは機能的フラグメントのアミノ酸配列を含む、請求項42に記載の方法。
- 前記GGF2ペプチドは、配列番号1~10のいずれか一つ、または配列番号1~10のいずれか一つの機能的改変体もしくは機能的フラグメントのアミノ酸配列を含む、請求項42に記載の方法。
- 前記EGF様ドメインは、配列番号13~18のいずれか一つ、または配列番号13~18のいずれか一つの機能的改変体もしくは機能的フラグメントのアミノ酸配列を含む、請求項41に記載の方法。
- 前記NRG-2ペプチドまたはその機能的改変体もしくは機能的フラグメントは、配列番号21、配列番号22、または配列番号21もしくは配列番号22の機能的改変体もしくは機能的フラグメントのアミノ酸配列を含む、請求項41に記載の方法。
- 前記ニューレグリンペプチドは、配列番号2のアミノ酸配列を含むGGF2ペプチドを含む、請求項1または請求項37~40のいずれか1項に記載の方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2021201826A JP2022022459A (ja) | 2015-09-25 | 2021-12-13 | 心臓傷害を処置するための方法 |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201562233148P | 2015-09-25 | 2015-09-25 | |
US62/233,148 | 2015-09-25 | ||
PCT/US2016/053438 WO2017053794A1 (en) | 2015-09-25 | 2016-09-23 | Methods for treating cardiac injury |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2021201826A Division JP2022022459A (ja) | 2015-09-25 | 2021-12-13 | 心臓傷害を処置するための方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2018533922A JP2018533922A (ja) | 2018-11-22 |
JP7181084B2 true JP7181084B2 (ja) | 2022-11-30 |
Family
ID=57138119
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2018515924A Active JP7181084B2 (ja) | 2015-09-25 | 2016-09-23 | 心臓傷害を処置するための方法 |
JP2021201826A Pending JP2022022459A (ja) | 2015-09-25 | 2021-12-13 | 心臓傷害を処置するための方法 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2021201826A Pending JP2022022459A (ja) | 2015-09-25 | 2021-12-13 | 心臓傷害を処置するための方法 |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20180296642A1 (ja) |
EP (1) | EP3353546A1 (ja) |
JP (2) | JP7181084B2 (ja) |
CN (1) | CN108474787A (ja) |
AU (1) | AU2016327974A1 (ja) |
CA (1) | CA2999301A1 (ja) |
IL (2) | IL258197A (ja) |
MA (1) | MA42936A (ja) |
MX (2) | MX2018003780A (ja) |
WO (1) | WO2017053794A1 (ja) |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110835368A (zh) * | 2018-08-15 | 2020-02-25 | 上海泽生科技开发股份有限公司 | 神经调节蛋白多肽片段及其用途 |
CN111407881A (zh) * | 2019-01-07 | 2020-07-14 | 上海泽生科技开发股份有限公司 | 神经调节蛋白用于预防、治疗或延迟心肌损伤的方法和组合物 |
CN113350346B (zh) * | 2021-06-01 | 2023-06-27 | 广西医科大学第一附属医院 | 长春新碱在预防或治疗心肌纤维化中的应用 |
TW202400217A (zh) * | 2022-03-15 | 2024-01-01 | 美商信立泰生物醫藥公司 | 用神經調節蛋白-1融合蛋白治療纖維化及心律不整的方法 |
CN114958742B (zh) * | 2022-05-23 | 2024-01-26 | 电子科技大学 | 一种分离草鱼脾脏巨噬细胞的方法 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2000037095A1 (en) | 1998-12-21 | 2000-06-29 | The Victor Chang Cardiac Research Institute | Cardiac muscle function and manipulation |
JP2012509908A (ja) | 2008-11-28 | 2012-04-26 | ゼンサン (シャンハイ) サイエンス アンド テクノロジー リミテッド | ニューレグリン及び心臓幹細胞 |
WO2014114465A1 (en) | 2013-01-24 | 2014-07-31 | Bernardo Nadal-Ginard | Modulation of cardiac stem-progenitor cell differentiation, assays and uses thereof |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5530109A (en) | 1991-04-10 | 1996-06-25 | Ludwig Institute For Cancer Research | DNA encoding glial mitogenic factors |
US5716930A (en) | 1991-04-10 | 1998-02-10 | Ludwig Institute For Cancer Research | Glial growth factors |
US7037888B1 (en) | 1992-04-03 | 2006-05-02 | Acorda Therapeutics, Inc. | Methods for treating muscle diseases and disorders |
US5912326A (en) | 1995-09-08 | 1999-06-15 | President And Fellows Of Harvard College | Cerebellum-derived growth factors |
EP2357004B1 (en) | 2000-05-23 | 2016-10-12 | CeNeS Pharmaceuticals, Inc. | NRG-2 nucleic acid molecules, polypeptides and diagnostic and therapeutical methods |
CA2686959C (en) * | 2007-05-10 | 2017-06-13 | Acorda Therapeutics Inc. | Methods for detecting cardiac damage |
EP3632459A1 (en) | 2008-07-17 | 2020-04-08 | Acorda Therapeutics, Inc. | Therapeutic dosing of a neuregulin or a subsequence thereof for treatment or prophylaxis of heart failure |
WO2014138502A1 (en) | 2013-03-06 | 2014-09-12 | Acorda Therapeutics, Inc. | Therapeutic dosing of a neuregulin or a fragment thereof for treatment or prophylaxis of heart failure |
-
2016
- 2016-09-23 AU AU2016327974A patent/AU2016327974A1/en not_active Abandoned
- 2016-09-23 WO PCT/US2016/053438 patent/WO2017053794A1/en active Application Filing
- 2016-09-23 MX MX2018003780A patent/MX2018003780A/es unknown
- 2016-09-23 CA CA2999301A patent/CA2999301A1/en active Pending
- 2016-09-23 EP EP16782123.0A patent/EP3353546A1/en active Pending
- 2016-09-23 JP JP2018515924A patent/JP7181084B2/ja active Active
- 2016-09-23 US US15/762,271 patent/US20180296642A1/en not_active Abandoned
- 2016-09-23 MA MA042936A patent/MA42936A/fr unknown
- 2016-09-23 CN CN201680068203.1A patent/CN108474787A/zh active Pending
-
2018
- 2018-03-18 IL IL258197A patent/IL258197A/en unknown
- 2018-03-26 MX MX2022008273A patent/MX2022008273A/es unknown
-
2020
- 2020-08-09 IL IL276577A patent/IL276577A/en unknown
-
2021
- 2021-01-14 US US17/248,217 patent/US20210401938A1/en active Pending
- 2021-12-13 JP JP2021201826A patent/JP2022022459A/ja active Pending
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2000037095A1 (en) | 1998-12-21 | 2000-06-29 | The Victor Chang Cardiac Research Institute | Cardiac muscle function and manipulation |
JP2012509908A (ja) | 2008-11-28 | 2012-04-26 | ゼンサン (シャンハイ) サイエンス アンド テクノロジー リミテッド | ニューレグリン及び心臓幹細胞 |
WO2014114465A1 (en) | 2013-01-24 | 2014-07-31 | Bernardo Nadal-Ginard | Modulation of cardiac stem-progenitor cell differentiation, assays and uses thereof |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20180296642A1 (en) | 2018-10-18 |
WO2017053794A1 (en) | 2017-03-30 |
CA2999301A1 (en) | 2017-03-30 |
EP3353546A1 (en) | 2018-08-01 |
AU2016327974A1 (en) | 2018-04-12 |
US20210401938A1 (en) | 2021-12-30 |
IL276577A (en) | 2020-09-30 |
CN108474787A (zh) | 2018-08-31 |
IL258197A (en) | 2018-05-31 |
JP2018533922A (ja) | 2018-11-22 |
JP2022022459A (ja) | 2022-02-03 |
MX2022008273A (es) | 2022-08-04 |
MX2018003780A (es) | 2018-09-28 |
MA42936A (fr) | 2018-08-01 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20210401938A1 (en) | Methods for treating cardiac injury | |
JP7209382B2 (ja) | 心不全の治療用組成物 | |
JP2023089263A (ja) | 心不全の治療または予防のためのニューレグリンまたはその断片の治療的投与の方法 | |
Bao et al. | Intermittent hypoxia mediated by TSP1 dependent on STAT3 induces cardiac fibroblast activation and cardiac fibrosis | |
US9655949B2 (en) | Neuregulin based methods for treating heart failure | |
EP2440236B1 (en) | Neuregulin based methods for treating heart failure | |
US11246909B2 (en) | Neuregulin based methods for treating heart failure | |
JP2008530003A (ja) | 創傷治癒を向上させるための、および線維症予防のためのミオスタチン(gdf−8)アンタゴニストの使用 | |
US7919315B2 (en) | In vitro method for the diagnosis of cardiovascular functionality of bone marrow precursor cells (BMPS) and/or blood-derived circulating precursor cells (BDPS) | |
Morimoto et al. | Bone marrow-derived CXCR4+ cells mobilized by macrophage colony-stimulating factor participate in the reduction of infarct area and improvement of cardiac remodeling after myocardial infarction in mice | |
Rao et al. | Human epicardial cell-conditioned medium contains HGF/IgG complexes that phosphorylate RYK and protect against vascular injury | |
KR101969526B1 (ko) | 악성 종양 전이 억제용 의약 | |
KR20120023633A (ko) | 허혈 및 당뇨병 상처 치유를 촉진하기 위한 조성물, 키트 및 방법 | |
EP3211004B1 (en) | Use of macrophage inflammatory protein-1 (mip-1 ) inhibitor for improving tissue ischemia and diabetes vasculopathy by promoting angiogenesis | |
US8580739B2 (en) | Methods of reducing myocardial injury following myocardial infarction | |
SESSION | MONDAY, 22 MAY 2017 | |
CA3185193A1 (en) | Composition comprising ttf-ngr for use in treating soft-tissue sarcoma | |
Dingenouts et al. | Endoglin deficiency alters the epicardial response following myocardial infarction | |
Dieterich et al. | Lymphatic vessels in cancer 11 | |
Sud | Bone Metastasis: mechanisms, therapies and biomarkers. |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20190920 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20200924 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20201223 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210121 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210615 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20210910 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20211112 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20211213 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20220418 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20220713 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20220916 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20221013 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20221021 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20221117 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7181084 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |