JP7144007B2 - 血液検体を用いたmci及び認知症の補助診断方法 - Google Patents
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Description
(1)被験対象から採取された血液中における、ILEIの量を測定する工程、及び
(2)工程(1)で得られた測定値が、血液中のILEIの量の正常値と比較して低い場合に、MCI及び/又は認知症であると予測する工程。
項2.前記認知症が、アルツハイマー病である、項1に記載の方法。
項3.前記工程(1)におけるILEIの量の測定を、ELISA、ウェスタンブロッティング、又は質量分析法により行う、項1又は2に記載の方法。
項4.前記工程(2)において、前記測定値が、血液中のILEIの量の正常値と比較して10%以上低い場合に、MCI及び/又は認知症であると予測する、項1~3のいずれか一項に記載の方法。
項5.以下の工程を含む、MCI及び/又は認知症を診断及び治療する方法:
(1)被験対象から採取された血液中における、ILEIの量を測定する工程、
(2)工程(1)で得られた測定値が、血液中のILEIの量の正常値と比較して低い場合に、MCI及び/又は認知症であると予測する工程、及び
(3)MCI及び/又は認知症であると予測された被験対象に対して、認知症治療薬の有効量を投与する工程。
(1)被験対象から採取された血液中における、ILEIの量を測定する工程、及び
(2)工程(1)で得られた測定値が、血液中のILEIの量の正常値と比較して低い場合に、MCI及び/又は認知症であると予測する工程。
<器具及び試薬>
・96ウェルプレート : Nunc Maxsorp 96 well plate (Nunc, code.469914)
・固相化用希釈バッファー : 0.2M sodium carbonate/bicarbonate (pH9.4)
・サンプル希釈バッファー : Human LRG EIA Buffer 100 (IBL, code.27769D100)
・検出抗体希釈バッファー : IMMUNO SHOT Reagent 2 ,- (-) (コスモ・バイオ株式会社, code.IS-002-250)
・ブロッキングバッファー : Blocking Reagent for ELISA-Chemically Defined- (コスモ・バイオ株式会社, code.IS-CD-500E)
・10×PBS (ナカライテスク株式会社, code.27575-31)
・Tween(登録商標)20 (SIGMA-ALDRICH, code.P7949)
・Na2CO3 (SIGMA-ALDRICH, code.S-7795)
・NaHCO3 (SIGMA-ALDRICH, code.S-6297)
・HRP検出試薬 : TMB Microwell Peroxidase Substrate System (KPL, code.5120-0047)
・Stop solution : 1M硫酸 (ナカライテスク株式会社, code.95626-06)
・HRP-labeling : Peroxidase Labeling kit-NH2 (Dojindo, code.LK11)
・測定機器 : Benchmark Plus (Bio Rad)
・スタンダード : Mouse ILEI (R&D, code.2868-FM-50)
・固相化抗体(capture) : FAM3C 42C1 (1.08 mg/mL)
・検出抗体(detect) : FAM3C 24C1 (1.15 mg/mLをHRPラベルし、430μg/mLに調製)
ELISAのバリデーションは、Standard curve, Dilution parallelism及びSpiking recoveryにより行った。
・対照例:66.6±6.0歳、男性7人,女性3人
・軽度認知機能低下例(MCI):71.3±6.2歳、男性6人,女性4人
・アルツハイマー病例(AD):72.5±5.2歳、男性3人,女性7人
年齢は平均±標準偏差
0.2M sodium carbonate/bicarbonate (pH9.4)で1.44μg/mL(×750)に希釈した固相化抗体を100μL/wellで分注した。プレートシールを貼り、蒸発を防いで4℃オーバーナイトでインキュベートした。その後、固相化した抗体をデカンタで廃棄し、液をよく切った。
Student-t検定で健常者群との比較をした。
結果を図1及び以下に示す。図1及び以下のデータから、AD群及びMCI群では、血漿ILEIが健常対照群と比較して有意に低下する傾向が見られた。認知機能異常群(AD)ばかりではなく、認知症の初期に当たるMCI群と健常対象群との間にも有意差が見られた。
対照例=519.6±104.0 ng/mL
MCI=395.0±77.4 ng/mL
AD=430.1±103.6 ng/mL
値は平均±標準偏差
AD+MCI vs. 対照例:p = 0.007
MCI vs. 対照例:p = 0.007
AD vs. 対照例:p = 0.070
Claims (4)
- 以下の工程を含む、MCI及び/又は認知症の罹患の可能性を検査する方法:
(1)被験対象から採取された血液中における、ILEI (interleukin-like epithelial-mesenchymal transition inducer)の量を測定する工程、及び
(2)工程(1)で得られた測定値が、血液中のILEIの量の正常値と比較して低い場合に、MCI及び/又は認知症に罹患している可能性が高いと評価するための工程。 - 前記認知症が、アルツハイマー病である、請求項1に記載の方法。
- 前記工程(1)におけるILEIの量の測定を、ELISA、ウェスタンブロッティング、又は質量分析法により行う、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記工程(2)が、前記測定値が、血液中のILEIの量の正常値と比較して10%以上低い場合に、MCI及び/又は認知症に罹患している可能性が高いと評価するための工程である、請求項1~3のいずれか一項に記載の方法。
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008537143A (ja) | 2005-04-19 | 2008-09-11 | バーミリオン, インコーポレイテッド | アルツハイマー病のためのバイオマーカーであるサポシンd及びfam3c |
US20140086836A1 (en) | 2011-05-03 | 2014-03-27 | Mental Health Research Institute | Method for detection of a neurological disease |
WO2014097978A1 (ja) | 2012-12-19 | 2014-06-26 | 国立大学法人滋賀医科大学 | アミロイドβタンパク質が異常に蓄積する疾患の治療及び/又は予防用の医薬組成物 |
WO2015103594A1 (en) | 2014-01-06 | 2015-07-09 | Children's Medical Center Corporation | Biomarkers for dementia and dementia related neurological disorders |
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Lei Liu, Naoki Watanabe, Hiroyasu Akatsu, Masaki Nishimura,Neuronal expression of ILEI/FAM3C and its reduction in Alzheimer’s disease,Neuroscience,2016年05月30日,Volume 330,Pages 236-246 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2020051749A (ja) | 2020-04-02 |
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