JP7128305B2

JP7128305B2 - 水性点眼液

Info

Publication number: JP7128305B2
Application number: JP2021000409A
Authority: JP
Inventors: 孝司稲垣; 直樹松本; 敏弘小川; 祐喜久若林; 明日香神村; 善弘大下; 仁志中澤; 功松岡
Original assignee: Santen Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Santen Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2015-06-05
Filing date: 2021-01-05
Publication date: 2022-08-30
Anticipated expiration: 2036-06-03
Also published as: TW202038974A; TWI711453B; JP2017002036A; WO2016195073A1; TWI743858B; TW201701881A; JP2017114902A; JP2021075534A; JP6875884B2; JP6104433B2; JP2022166224A

Description

本発明は、０．１～１０％（ｗ／ｖ）の濃度のジクアホソルまたはその塩を含有する水性点眼液（以下、ジクアホソル点眼液ともいう）であって、０．０００１～０．１％（ｗ／ｖ）の濃度のクロルヘキシジン類を含有する水性点眼液に関する。

一般に、点眼液には、開封後一定期間にわたり何回も使用するタイプ（マルチドーズ型点眼液）と１回使い切りタイプ（ユニットドーズ型点眼液）がある。特に、マルチドーズ型点眼液には、使用時の微生物汚染等による製品の腐敗を防止し、点眼液の保存安定性を確保するために、防腐剤が含まれることが一般的である。

防腐剤としては、優れた防腐効果を有する塩化ベンザルコニウム（以下、ＢＡＫともいう）が汎用されている。一方、ＢＡＫを高濃度で使用すると角膜障害を引き起こす可能性が知られている。また、ＢＡＫを含有する点眼液を使用者がソフトコンタクトレンズ装用中に点眼するとＢＡＫがコンタクトレンズに接触してソフトコンタクトレンズそのものを変形させるなどの悪影響を及ぼすことも指摘されている。そのため、ソフトコンタクトレンズ装用中はＢＡＫを含有する点眼液を点眼することは通常禁止されている。

ところで、ジクアホソルはＰ^１，Ｐ^４－ジ（ウリジン－５’）四リン酸、Ｕｐ_４Ｕ等とも呼ばれるプリン受容体アゴニストであり、我が国においては、３％（ｗ／ｖ）の濃度のジクアホソルナトリウムを含有する点眼液（製品名：ジクアス^{（登録商標）}点眼液３％）として、ドライアイ治療に使用されている。そのジクアス^{（登録商標）}点眼液３％には、上記の理由によりＢＡＫが含まれている。

また、特許文献１には、０．１～１０％（ｗ／ｖ）の濃度のジクアホソルまたはその塩および０．０００１～１％（ｗ／ｖ）の濃度のキレート剤を含有する水性点眼液が開示されている。

特開２０１３－２２７２９１号公報

本発明の課題は、ＢＡＫを含まず、安全性がより高いジクアホソル点眼液を提供することである。さらに、本発明の課題は、点眼液の調製時かつ長期保存時においても物理化学的に安定な防腐剤を含有するジクアホソル点眼液を提供することである。

本発明者らは、上記課題を解決するため鋭意研究を行った結果、０．１～１０％（ｗ／ｖ）の濃度のジクアホソルまたはその塩、および０．０００１～０．１％（ｗ／ｖ）の濃度のクロルヘキシジン類を含有する水性点眼液（以下、本点眼液ともいう）が、優れた保存効力を有することを見出し、本発明に至った。さらに、本発明者らは、本点眼液がソフトコンタクトレンズの変形を抑制することを見出した。また、本発明者らは、本点眼液が、ＢＡＫを含有する点眼液およびジクアホソルまたはその塩を含まないクロルヘキシジン類を含有する点眼液よりも、培養した不死化ヒト角膜上皮細胞において高い生細胞活性を示すことを見出した。また、本発明者らは、本点眼液がソフトコンタクトレンズ装用眼において、顕著にＮＩＢＵＴ（非侵襲涙液層破壊時間）を上昇させること、すなわち、ソフトコンタクトレンズ装用眼において、涙液層を安定化させることを見出した。一方で、人工涙液ではそのような効果は認められなかった。ソフトコンタクトレンズ装用によるドライアイ症状の発生／悪化は、涙液層の安定性の低下に起因するものであることから、本点眼液による涙液層の安定化はソフトコンタクトレンズ装用眼における、ドライアイの予防および／または治療に有用である。また、本点眼液は、ソフトコンタクトレンズ装用眼における、眼乾燥感および／または眼不快感の予防および／または治療にも有用である。さらに、本発明者らは、特定の濃度範囲、すなわち０．００１～０．００５％（ｗ／ｖ）の濃度のクロルヘキシジン類を含有するジクアホソル点眼液が、点眼液調製時に高いクロルヘキシジン類の残存率を維持し、かつ該点眼液中のクロルヘキシジン類が優れた長期安定性を有することを見出した。

すなわち、本発明は、以下に掲げる、水性点眼液を提供する。
（１）０．１～１０％（ｗ／ｖ）の濃度のジクアホソルまたはその塩、および０．０００１～０．１％（ｗ／ｖ）の濃度のクロルヘキシジン類を含有する水性点眼液。
（２）クロルヘキシジン類が、クロルヘキシジングルコン酸塩である、（１）に記載の水性点眼液。
（３）点眼液中のクロルヘキシジン類の濃度が、０．０００５～０．０５％（ｗ／ｖ）である、（１）または（２）に記載の水性点眼液。
（４）点眼液中のクロルヘキシジン類の濃度が、０．００１～０．００５％（ｗ／ｖ）である、（１）または（２）に記載の水性点眼液。
（５）点眼液中のクロルヘキシジン類の濃度が、０．００１％（ｗ／ｖ）超乃至０．００５％（ｗ／ｖ）以下である、（１）または（２）に記載の水性点眼液。
（６）点眼液中のクロルヘキシジン類の濃度が、０．００１５～０．００５％（ｗ／ｖ）である、（１）または（２）に記載の水性点眼液。
（７）点眼液中のクロルヘキシジン類の濃度が、０．００２～０．００５％（ｗ／ｖ）である、（１）または（２）に記載の水性点眼液。
（８）点眼液中のジクアホソルまたはその塩の濃度が、３％（ｗ／ｖ）である、（１）～（７）のいずれかに記載の水性点眼液。
（９）さらに、キレート剤を含有する、（１）～（８）のいずれかに記載の水性点眼液。
（１０）キレート剤がエデト酸またはその塩である、（９）に記載の水性点眼液。
（１１）ソフトコンタクトレンズ用である、（１）～（１０）のいずれかに記載の水性点眼液。
（１２）ソフトコンタクトレンズがシリコーンハイドロゲルコンタクトレンズである、（１１）に記載の水性点眼液。

また、本発明は、以下に掲げる、ソフトコンタクトレンズの変形を抑制する方法を提供する。
（１３）（１）～（１２）のいずれかに記載の水性点眼液による、ソフトコンタクトレンズの変形を抑制する方法。

さらに、本発明は、以下にも関する。
（１４）０．１～１０％（ｗ／ｖ）の濃度のジクアホソルまたはその塩、および０．０００１～０．１％（ｗ／ｖ）の濃度のクロルヘキシジン類を含有する、ドライアイの予防および／または治療用の水性点眼液。
（１５）０．１～１０％（ｗ／ｖ）の濃度のジクアホソルまたはその塩、および０．０００１～０．１％（ｗ／ｖ）の濃度のクロルヘキシジン類を含有する水性点眼液のドライアイの予防および／または治療における使用。
（１６）０．１～１０％（ｗ／ｖ）の濃度のジクアホソルまたはその塩、および０．０００１～０．１％（ｗ／ｖ）の濃度のクロルヘキシジン類を含有する水性点眼液を投与することを含む、ドライアイを予防および／または治療する方法。

また、本発明は、以下に掲げる、水性点眼液を提供する。
（１７）ソフトコンタクトレンズ装用眼における、ドライアイの予防および／または治療のための、（１）～（１２）のいずれかに記載の水性点眼液。
（１８）ソフトコンタクトレンズ装用眼における、涙液層の安定性を向上させるための、（１）～（１２）のいずれかに記載の水性点眼液。
（１９）ソフトコンタクトレンズ装用眼における、眼乾燥感または眼不快感の予防または治療のための、（１）～（１２）のいずれかに記載の水性点眼液。
（２０）ソフトコンタクトレンズがシリコーンハイドロゲルコンタクトレンズである、（１７）～（１９）のいずれかに記載の水性点眼液。

また、本発明は、以下に掲げる方法を提供する。
（２１）０．１～１０％（ｗ／ｖ）の濃度のジクアホソルまたはその塩、およびクロルヘキシジン類を含有する水性点眼液の調製において、０．０００１～０．００５％（ｗ／ｖ）の濃度のクロルヘキシジン類を用いることにより、該水性点眼液中のクロルヘキシジン類の残存率の低下を抑制する方法。
（２２）０．１～１０％（ｗ／ｖ）の濃度のジクアホソルまたはその塩、およびクロルヘキシジン類を含有する水性点眼液中のクロルヘキシジン類を安定化する方法であって、該クロルヘキシジン類の濃度が０．００１％（ｗ／ｖ）超乃至０．１％（ｗ／ｖ）以下である、方法。

後述する試験例の結果から明らかなように、本点眼液は、優れた保存効力を有する。さらに、本点眼液が、ソフトコンタクトレンズの変形を抑制することから、ソフトコンタクトレンズ用として使用することができる。また、本点眼液は、ＢＡＫを含有する点眼液およびジクアホソルまたはその塩を含まないクロルヘキシジン類を含有する点眼液よりも、培養した不死化ヒト角膜上皮細胞において高い生細胞活性を示す。よって、本点眼液は、生体、特に角結膜上皮に対する安全性がより高く、ドライアイのような角結膜上皮が不安定な疾患に用いるのに有用である。また、本点眼液は、ソフトコンタクトレンズ装用眼において、顕著にＮＩＢＵＴを上昇させる。一方、人工涙液ではそのような効果は認められない。すなわち、本点眼液は、ソフトコンタクトレンズ装用眼において、涙液層を安定化させる。ソフトコンタクトレンズ装用によるドライアイ症状の発生／悪化は、涙液層の安定性の低下に起因するものであることから、本点眼液による涙液層の安定化はソフトコンタクトレンズ装用眼における、ドライアイの予防および／または治療に有用である。また、本点眼液は、ソフトコンタクトレンズ装用眼における、眼乾燥感および／または眼不快感の予防および／または治療にも有用である。さらに、特定の濃度範囲、すなわち０．００１～０．００５％（ｗ／ｖ）の濃度のクロルヘキシジン類を含有するジクアホソル点眼液は、点眼液調製時に高いクロルヘキシジン類の残存率を維持し、かつ該点眼液中のクロルヘキシジン類が優れた長期安定性を有する。

図１は、試験例３において、角膜上皮細胞による細胞障害性試験の結果を示す図である。図２は、試験例４において、ＮＩＢＵＴ上昇作用の評価試験１の結果を示す図である。図３は、試験例５において、ＮＩＢＵＴ上昇作用の評価試験２の結果を示す図である。

本発明に関してさらに詳しく説明する。

ジクアホソルは、下記化学構造式で示される化合物である。

「ジクアホソルの塩」としては、医薬として許容される塩であれば特に制限はなく、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、亜鉛などとの金属塩；塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸などの無機酸との塩；酢酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、クエン酸、酒石酸、アジピン酸、グルコン酸、グルコヘプト酸、グルクロン酸、テレフタル酸、メタンスルホン酸、乳酸、馬尿酸、１，２－エタンジスルホン酸、イセチオン酸、ラクトビオン酸、オレイン酸、パモ酸、ポリガラクツロン酸、ステアリン酸、タンニン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、硫酸ラウリルエステル、硫酸メチル、ナフタレンスルホン酸、スルホサリチル酸などの有機酸との塩；臭化メチル、ヨウ化メチルなどとの四級アンモニウム塩；臭素イオン、塩素イオン、ヨウ素イオンなどのハロゲンイオンとの塩；アンモニアとの塩；トリエチレンジアミン、２－アミノエタノール、２，２－イミノビス（エタノール）、１－デオキシ－１－（メチルアミノ）－２－Ｄ－ソルビトール、２－アミノ－２－（ヒドロキシメチル）－１，３－プロパンジオール、プロカイン、Ｎ，Ｎ－ビス（フェニルメチル）－１，２－エタンジアミンなどの有機アミンとの塩などが挙げられる。

本発明において、「ジクアホソルまたはその塩」には、ジクアホソル（フリー体）またはその塩の水和物および有機溶媒和物も含まれる。

ジクアホソルまたはその塩に、結晶多形および結晶多形群（結晶多形システム）が存在する場合には、それらの結晶多形体および結晶多形群（結晶多形システム）も本発明の範囲に含まれる。ここで、結晶多形群（結晶多形システム）とは、それらの結晶の製造、晶出、保存などの条件および状態により、結晶形が変化する場合の各段階における個々の結晶形およびその過程全体を意味する。

本発明の「ジクアホソルまたはその塩」として好ましいのはジクアホソルのナトリウム塩であり、下記化学構造式で示されるジクアホソル四ナトリウム塩（以下、単に「ジクアホソルナトリウム」ともいう）が特に好ましい。

ジクアホソルまたはその塩については、特表２００１－５１０４８４号公報に開示された方法などにより製造することができる。

本点眼液はジクアホソルまたはその塩以外の有効成分を含有することもできるが、好ましくは、ジクアホソルまたはその塩を唯一の有効成分として含有する。

本点眼液中のジクアホソルまたはその塩の濃度は、０．１～１０％（ｗ／ｖ）であるが、１～１０％（ｗ／ｖ）であることが好ましく、３％（ｗ／ｖ）であることが特に好ましい。

本発明において、「水性点眼液」とは水を溶媒（基剤）とする点眼液を意味する。

本発明において、「クロルヘキシジン類」には、クロルヘキシジンおよびその塩が含まれる。クロルヘキシジンは、下記化学構造式で示される化合物であり、１，１’－ヘキサメチレンビス［５－（４－クロロフェニル）ビグアニド］とも称される化合物である。

本発明において、上記クロルヘキシジン類の内、「クロルヘキシジンの塩」としては、医薬として許容される塩であれば特に制限はなく、具体的には、有機酸塩［例えば、モノカルボン酸塩（酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、酪酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩等）、多価カルボン酸塩（フマル酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、マロン酸塩等）、オキシカルボン酸塩（グルコン酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩等）、有機スルホン酸塩（メタンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、トシル酸塩等）等］、無機酸塩（例えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩等）、有機塩基との塩（例えば、メチルアミン、トリエチルアミン、トリエタノールアミン、モルホリン、ピペラジン、ピロリジン、トリピリジン、ピコリン等の有機アミンとの塩等）、無機塩基との塩［例えば、アンモニウム塩；アルカリ金属（ナトリウム、カリウム等）、アルカリ土類金属（カルシウム、マグネシウム等）、アルミニウム等の金属との塩等］等が挙げられる。これらの塩の中でも、好ましくは有機酸塩および／または無機酸塩、より好ましくはオキシカルボン酸塩、モノカルボン酸塩および／または無機酸塩、更に好ましくはグルコン酸塩、酢酸塩および／または塩酸塩、特に好ましくはグルコン酸塩が挙げられる。これらのクロルヘキシジンの塩は、１種単独で使用してもよく、また２種以上を任意に組み合わせて使用してもよい。

クロルヘキシジンおよびその塩は、公知の方法により合成してもよく、市販品として入手することもできる。

本点眼液中のクロルヘキシジン類の濃度は、０．０００１～０．１％であるが、０．０００５～０．０５％（ｗ／ｖ）であることが好ましく、０．００１～０．００５％（ｗ／ｖ）または０．００１％（ｗ／ｖ）超乃至０．００５％（ｗ／ｖ）以下であり、０．００１５～０．００５％（ｗ／ｖ）であることが好ましく、０．００２～０．００５％（ｗ／ｖ）であることがより好ましい。より具体的には、０．００１５（ｗ／ｖ）％、０．００２０（ｗ／ｖ）％、０．００２５（ｗ／ｖ）％、０．００３０（ｗ／ｖ）％、０．００３５（ｗ／ｖ）％、０．００４０（ｗ／ｖ）％、０．００４５（ｗ／ｖ）％、０．００５０（ｗ／ｖ）％であることが好ましい。

本発明において、「キレート剤」とは、金属イオンをキレート化する化合物であれば特に制限はされないが、例えば、エデト酸（エチレンジアミン四酢酸）、エデト酸一ナトリウム、エデト酸二ナトリウム、エデト酸三ナトリウム、エデト酸四ナトリウム、エデト酸二カリウム、エデト酸三カリウム、エデト酸四カリウムなどのエデト酸またはその塩；クエン酸、クエン酸一ナトリウム、クエン酸二ナトリウム、クエン酸三ナトリウム、クエン酸一カリウム、クエン酸二カリウム、クエン酸三カリウムなどのクエン酸またはその塩；メタリン酸、メタリン酸ナトリウム、メタリン酸カリウムなどのメタリン酸またはその塩；ピロリン酸、ピロリン酸四ナトリウム、ピロリン酸四カリウムなどのピロリン酸またはその塩；ポリリン酸、ポリリン酸ナトリウム、ポリリン酸カリウムなどのポリリン酸またはその塩；リンゴ酸一ナトリウム、リンゴ酸二ナトリウム、リンゴ酸一カリウム、リンゴ酸二カリウムなどのリンゴ酸またはその塩；酒石酸ナトリウム、酒石酸カリウム、酒石酸カリウムナトリウムなどの酒石酸またはその塩；フィチン酸ナトリウム、フィチン酸カリウムなどのフィチン酸またはその塩、などを挙げることができる。なお、本発明において、「エデト酸、クエン酸、メタリン酸、ピロリン酸、ポリリン酸、リンゴ酸、酒石酸、フィチン酸およびそれらの塩」には、それぞれのフリー体またはそれらの塩の水和物および有機溶媒和物も含まれるものとする。

本発明において、キレート剤は、エデト酸、エデト酸の塩（エデト酸塩）、クエン酸、クエン酸の塩（クエン酸塩）、メタリン酸、メタリン酸の塩（メタリン酸塩）、ポリリン酸、ポリリン酸の塩（ポリリン酸塩）が好ましく、エデト酸のナトリウム塩（エデト酸二ナトリウム水和物などの水和物を含む）、クエン酸（クエン酸一水和物などの水和物を含む）、メタリン酸のナトリウム塩（メタリン酸ナトリウム）、ポリリン酸のナトリウム塩（ポリリン酸ナトリウム）が特に好ましい。

本発明において、エデト酸塩としても最も好ましいのは、エデト酸二ナトリウム水和物（以下、単に「エデト酸ナトリウム水和物」ともいう）である。

また、これらのキレート剤は、１種単独で使用してもよく、また２種以上を任意に組み合わせて使用してもよい。

本点眼液中のキレート剤の濃度は、例えば０．０００１～１％（ｗ／ｖ）であるが、０．０００５～０．５％（ｗ／ｖ）が好ましく、０．００１～０．１％（ｗ／ｖ）が特に好ましい。

本発明における水性点眼液には、必要に応じて非イオン性界面活性剤を配合することができる。非イオン性界面活性剤としては、医薬として許容される範囲内であれば特に制限されるものでないが、例えば、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、ショ糖脂肪酸エステルなどが挙げられる。ポリオキシエチレン脂肪酸エステルとしては、ステアリン酸ポリオキシル４０などが挙げられ、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルとしては、ポリソルベート８０、ポリソルベート６０、ポリソルベート４０、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレンソルビタントリオレート、ポリソルベート６５などが挙げられ、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体としては、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油１０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油４０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油５０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０、ポリオキシル５ヒマシ油、ポリオキシル９ヒマシ油、ポリオキシル１５ヒマシ油、ポリオキシル３５ヒマシ油、ポリオキシル４０ヒマシ油などが挙げられ、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコールとしては、ポリオキシエチレン（１６０）ポリオキシプロピレン（３０）グリコール、ポリオキシエチレン（４２）ポリオキシプロピレン（６７）グリコール、ポリオキシエチレン（５４）ポリオキシプロピレン（３９）グリコール、ポリオキシエチレン（１９６）ポリオキシプロピレン（６７）グリコール、ポリオキシエチレン（２０）ポリオキシプロピレン（２０）グリコールなどが挙げられる。

本発明において、非イオン性界面活性剤として、例えばポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルが挙げられ、好ましくはポリソルベート８０、ポリソルベート６０、ポリソルベート４０、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレンソルビタントリオレート、ポリソルベート６５などが挙げられ、特に好ましくはポリソルベート８０が挙げられる。

また、これらの非イオン性界面活性剤は、１種単独で使用してもよく、また２種以上を任意に組み合わせて使用してもよい。

本点眼液中の非イオン性界面活性剤の濃度は、例えば０．０００１～１０％（ｗ／ｖ）であるが、０．０００５～１％（ｗ／ｖ）が好ましく、０．０００５～０．１％（ｗ／ｖ）が特に好ましい。

本点眼液には、汎用されている技術を用い、必要に応じて製薬学的に許容される添加剤を添加することができ、例えば、リン酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、酢酸ナトリウム、イプシロン－アミノカプロン酸などの緩衝化剤；塩化ナトリウム、塩化カリウム、濃グリセリンなどの等張化剤などを必要に応じて選択し、添加することができる。

本点眼液のｐＨは眼科製剤に許容される範囲内にあればよいが、通常４～８の範囲内が好ましい。本点眼液には、適宜、塩酸や水酸化ナトリウムなどのｐＨ調節剤を添加することができる。

本点眼液は、ソフトコンタクトレンズ用として、ソフトコンタクトレンズ装着時にも使用することができる。ソフトコンタクトレンズとしては、例えば、ヒドロキシエチルメタクリレートを主成分とするコンタクトレンズまたはシリコーンハイドロゲルコンタクトレンズなどが挙げられる。

本点眼液の適用対象となるソフトコンタクトレンズの種類については特に制限されるものでなく、また、イオン性または非イオン性、含水性または非含水性の別を問わない。例えば、繰り返し使用されるレンズの他、１日使い捨て用レンズ、１週間使い捨て用レンズ、２週間使い捨て用レンズなどの現在市販されているまたは将来市販されるすべてのソフトコンタクトレンズに適用可能である。

本点眼液、本点眼液の用法は、剤型、投与すべき患者の症状の軽重、年令、体重、医師の判断などに応じて適宜変えることができるが、例えば、剤形として点眼剤を選択した場合には、１日１～１０回、好ましくは１日２～８回、より好ましくは１日４～６回に分けて眼局所に投与することができる。

ドライアイは「様々な要因による涙液および角結膜上皮の慢性疾患であり、眼不快感や視覚異常を伴う疾患」と定義づけられ、乾性角結膜炎（ＫＣＳ）はドライアイに含まれる。本発明においては、ソフトコンタクトレンズ装用を原因とするドライアイ症状の発生もドライアイに含まれるものとする。

ドライアイ症状には、眼乾燥感、眼不快感、眼疲労感、鈍重感、羞明感、眼痛、霧視（かすみ目）などの自覚症状の他、充血、角結膜上皮障害などの他覚所見も含まれる。

ドライアイの病因については不明点も多いが、シェーグレン症候群；先天性無涙腺症；サルコイドーシス；骨髄移植による移植片対宿主病（ＧＶＨＤ：ＧｒａｆｔＶｅｒｓｕｓＨｏｓｔＤｉｓｅａｓｅ）；眼類天疱瘡；スティーブンス・ジョンソン症候群；トラコーマなどを原因とする涙器閉塞；糖尿病；角膜屈折矯正手術（ＬＡＳＩＫ：Ｌａｓｅｒ（－ａｓｓｉｓｔｅｄ）ｉｎＳｉｔｕＫｅｒａｔｏｍｉｌｅｕｓｉｓ）などを原因とする反射性分泌の低下；ｍｅｉｂｏｍ腺機能不全；、眼瞼炎などを原因とする油層減少；眼球突出、兎眼などを原因とする瞬目不全または閉瞼不全；胚細胞からのムチン分泌低下；ＶＤＴ作業などがその原因であると報告されている。

本点眼液は、「ドライアイの予防および／または治療」に使用することができる。

本発明において、「ドライアイの予防および／または治療」とは、ドライアイに伴う病的症状および／または所見を予防および／または治療もしくは改善することと定義づけられ、ドライアイに伴う眼乾燥感、眼不快感、眼疲労感、鈍重感、羞明感、眼痛、霧視（かすみ目）などの自覚症状の予防および／または治療もしくは改善を意味するだけでなく、ドライアイに伴う充血、角結膜上皮障害などの予防および／または治療もしくは改善も含まれる。また、「ドライアイの予防および／または治療」には、ソフトコンタクトレンズ装用眼における涙液層の安定性の向上によってドライアイ症状を予防および／または治療もしくは改善せしめることも含まれる。なお、ドライアイ症状の予防および／または治療もしくは改善には、ドライアイ患者がソフトコンタクトレンズ装用することで悪化するに至ったドライアイ症状の予防および／または治療もしくは改善、ソフトコンタクトレンズ装用そのものにより発生するに至ったドライアイ症状の予防および／または治療もしくは改善をも意味する。

本発明において、涙液層の安定性の向上とは、涙液が量的または質的に改善されることを意味する。なお、涙液層の安定性はＢＵＴ（涙液層破壊時間）を測定することで確認することができる。ＢＵＴの中でも、染色液等の負荷をかけずに、より自然の状態に近い測定したものをＮＩＢＵＴ（非侵襲涙液層破壊時間）という。

本発明において、「ソフトコンタクトレンズ装用眼における、眼乾燥感または眼不快感の予防または治療」とは、ソフトコンタクトレンズ装用による涙液層の不安定化に伴う眼乾燥感または眼不快感の予防または治療や前記不安定化を原因とする角結膜上皮障害により引き起こされる眼乾燥感または眼不快感の予防または治療を意味する。

本発明は、０．１～１０％（ｗ／ｖ）の濃度のジクアホソルまたはその塩、およびクロルヘキシジン類を含有する水性点眼液の調製において、０．００５％（ｗ／ｖ）以下の濃度のクロルヘキシジン類を用いることにより、該水性点眼液中のクロルヘキシジン類の残存率の低下を抑制する方法を提供する。ここで、用いるクロルヘキシジン類の濃度は、０．００５％（ｗ／ｖ）以下、または０．０００１～０．００５％（ｗ／ｖ）であることが好ましい。

本発明は、０．１～１０％（ｗ／ｖ）の濃度のジクアホソルまたはその塩、およびクロルヘキシジン類を含有する水性点眼液中のクロルヘキシジン類を安定化する方法を提供する。ここで、該クロルヘキシジン類の濃度は、０．００１％（ｗ／ｖ）超、または０．００１％（ｗ／ｖ）超乃至０．１％（ｗ／ｖ）以下であることが好ましい。

以下に、保存効力試験、ソフトコンタクトレンズの変形抑制評価試験、角膜上皮細胞による細胞障害性試験、ＮＩＢＵＴ上昇作用の評価試験、ＮＩＢＵＴ上昇作用の比較試験、クロルヘキシジングルコン酸塩の残存率測定試験およびクロルヘキシジングルコン酸塩の長期安定性試験の結果を示すが、これらの例は本発明をよりよく理解するためのものであり、本発明の範囲を限定するものではない。なお、ＣＬはコンタクトレンズ、ＳＣＬはソフトコンタクトレンズの略である。

試験例１．保存効力試験
表１に示す処方の点眼液１～６について、保存効力試験を行った。

（試料調製）
点眼液１：
表１に示す処方に従って、点眼液１を調製した。具体的には、ジクアホソルナトリウム（３ｇ）、リン酸水素ナトリウム水和物（０．２ｇ）、塩化ナトリウム（０．３９ｇ）、塩化カリウム（０．１５ｇ）、エデト酸ナトリウム水和物（０．０１ｇ）、ポリソルベート８０（０．０００５ｇ）およびクロルヘキシジングルコン酸塩（０．００２ｇ）を水に溶解して１００ｍＬとし、ｐＨ調節剤を添加して、ｐＨ７．２とした。

点眼液２～６：
表１に示す処方に従って、点眼液１と同様に点眼液２～６の各点眼液を調製した。

（試験方法）
保存効力試験は、第十六改正日本薬局方の保存効力試験法に準拠して行なった。本試験では、試験菌として、ＥｓｈｅｒｉｃｈｉａＣｏｌｉ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、Ｃａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓ（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）およびＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）を用いた。

（試験結果）
試験結果を表２に示す。

なお、表２の試験結果は検査時の生菌数が接種した菌数に比べてどの程度減少したかをｌｏｇｒｅｄｕｃｔｉｏｎで示しており、たとえば「１」の場合には、検査時の生菌数が接種菌数の１０％に減少したことを示している。

表２に示された通り、点眼液１～６は、日本薬局方の保存効力試験基準に適合することが示された。

（考察）
上記の結果から、本点眼液は、優れた保存効力を有することが示された。

試験例２．ソフトコンタクトレンズの変形抑制評価試験
点眼液４を使用して、ソフトコンタクトレンズに及ぼす影響について検討した。

（試料調製）
表１に示す処方に従って、点眼液１と同様に点眼液４を調製した。

（試験方法）
表３に示すＦＤＡによるコンタクトレンズ分類のうち、グループIVに該当するコンタクトレンズ（２ｗｅｅｋアキュビュー^{（登録商標）}）を点眼液４に２４時間浸漬し、前後でのコンタクトレンズの直径、ベースカーブの変化量を算出し、以下の表４に示す判定基準を満たすか否か検討した。また、試験終了後の各コンタクトレンズの性状を観察した。なお、当該判定基準は、厚生労働省告示第３４９号視力補正用コンタクトレンズ基準（平成１３年１０月５日）に基づき設定した。

（判定基準）

（結果）
結果を表５に示す。

表５に示すように、長時間浸漬後のコンタクトレンズは判定基準を満たした。よって、点眼液４は、ソフトコンタクトレンズの変形を抑制することが示された。

（考察）
上記の結果から、本点眼液は、ソフトコンタクトレンズの変形を抑制することから、ソフトコンタクトレンズ用として使用することができる。

試験例３．角膜上皮細胞による細胞障害性試験
本点眼液が角膜上皮細胞に及ぼす影響を検討するため、角膜上皮細胞による細胞障害性試験を行った。

（試料調製）
表６に示す処方に従って、点眼液１と同様に点眼液７、８、９、１０を調製した。

（試験方法）
ＳＶ４０不死化ヒト角膜上皮細胞（ＨＣＥ－Ｔ：理化学研究所、バイオリソースセンター、ＣｅｌｌＮｏ．：ＲＣＢ２２８０）を９６ウエルプレートに播種（１×１０^４細胞／ウエル）し、１０％ＦＢＳ含有Ｄ－ＭＥＭ／Ｆ１２培地で１日培養した。翌日、培地を点眼液７、点眼液８、点眼液９または点眼液１０に交換した後、前記角膜上皮細胞を１５分間培養した。ＣｅｌｌＰｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎＡｓｓａｙＫｉｔ）（Ｐｒｏｍｅｇａ社製、カタログ番号：Ｇ３５８０）を用いて、生細胞活性（４９０ｎｍの吸光度に相当する）を測定した。

（結果）
試験結果を図１に示す。

図１から明らかなように、クロルヘキシジングルコン酸塩を含有するジクアホソル点眼液（点眼液７）が、ＢＡＫを含有する点眼液（点眼液９、点眼液１０）およびジクアホソルまたはその塩を含まないクロルヘキシジン類を含有する点眼液（点眼液８）よりも、培養した不死化ヒト角膜上皮細胞において高い生細胞活性を示した。

（考察）
本点眼液は、培養した不死化ヒト角膜上皮細胞において高い生細胞活性を示すことから、生体、特に角結膜上皮に対する安全性がより高く、ドライアイのような角結膜上皮が不安定な疾患に用いるのに有用である。

試験例４．ＮＩＢＵＴ上昇作用の評価試験１
ソフトコンタクトレンズ装用により、涙液層の安定性が低下した眼における、ジクアホソル点眼液のＮＩＢＵＴを検討した。

（試験方法）
ソフトコンタクトレンズ（製品名：メニコンソフトＭＡ^{（登録商標）}）を装用したカニクイザルの眼に、点眼液４（２０μＬ／眼）を点眼する前、および点眼１５、３０、４５、６０分後のＮＩＢＵＴをドライアイ観察装置（ＤＲ－１、コーワ）で測定した。対照薬として人工涙液（製品名：ソフトサンティア^{（登録商標）}）を用いた（Ｎ＝１０～１１眼）。

（結果）
試験結果を図２に示す。図２から明らかなように、ソフトコンタクトレンズ装用眼に点眼液４を点眼すると、点眼６０分後までの全測定ポイントで、点眼前と比較して顕著なＮＩＢＵＴの上昇が認められた。一方、人工涙液点眼ではＮＩＢＵＴの上昇が認められなかった。

（考察）
上記の結果から、本点眼液は、ソフトコンタクトレンズ装用による涙液層の安定性の低下を改善することが示された。本点眼液のこのような効果は、一般にドライアイ治療に用いられる人工涙液と比較しても、顕著なものであった。よって、本点眼液は、ソフトコンタクトレンズ装用眼における、ドライアイの予防および／または治療に有用である。また、本点眼液は、ソフトコンタクトレンズ装用眼における、眼乾燥感および／または眼不快感の予防および／または治療にも有用である。

試験例５．ＮＩＢＵＴ上昇作用の評価試験２
ソフトコンタクトレンズ装用により、涙液層の安定性が低下した眼における、ジクアホソル点眼液のＮＩＢＵＴを検討した。

（試験方法）
ソフトコンタクトレンズ（製品名：メニコンソフトＭＡ^{（登録商標）}）を装用したカニクイザルの眼に、点眼液４（２０μＬ／眼）を点眼する前、および点眼５、１５、３０、４５、６０分後のＮＩＢＵＴをドライアイ観察装置（ＤＲ－１、コーワ）で測定した。対照薬として人工涙液（製品名：ソフトサンティア^{（登録商標）}）、ヒアルロン酸ナトリウム（製品名：ヒアレイン^{（登録商標）}ミニ点眼液０．１％）を用いた（Ｎ＝１１眼）。

（結果）
試験結果を図３に示す。図３から明らかなように、ソフトコンタクトレンズ装用眼に点眼液４を点眼すると、点眼６０分後までの全測定ポイントで、点眼前と比較して顕著なＮＩＢＵＴの上昇が認められた。一方、人工涙液点眼ではＮＩＢＵＴの上昇が認められなかった。また、ヒアルロン酸ナトリウム点眼では点眼５分後ＮＩＢＵＴの上昇が認められたものの、その上昇作用は点眼液４より低く、点眼１５分後以降はＮＩＢＵＴの上昇が認められなかった。

（考察）
上記の結果から、本点眼液は、ソフトコンタクトレンズ装用による涙液層の安定性の低下を改善することが示された。本点眼液のこのような効果は、一般にドライアイ治療に用いられる人工涙液およびヒアルロン酸ナトリウム点眼液と比較しても、顕著なものであった。よって、本点眼液は、ソフトコンタクトレンズ装用眼における、ドライアイの予防および／または治療に有用である。また、本点眼液は、ソフトコンタクトレンズ装用眼における、眼乾燥感および／または眼不快感の予防および／または治療にも有用である。

試験例６．ＮＩＢＵＴ上昇作用の比較試験
ソフトコンタクトレンズ装用により、涙液層の安定性が低下した眼における、本点眼液とＢＡＫ含有点眼液（ジクアホソルナトリウムおよびＢＡＫを含有する点眼液）のＮＩＢＵＴを比較検討した。

（試料調製）
表１に示す処方に従って、点眼液１と同様に点眼液４を調製した。
また、比較例として、点眼液４のクロルヘキシジングルコン酸塩の代わりにＢＡＫを含有する点眼液１１を調製した。具体的には、ジクアホソルナトリウム（３ｇ）、リン酸水素ナトリウム水和物（０．２ｇ）、塩化ナトリウム（０．４１ｇ）、塩化カリウム（０．１５ｇ）およびＢＡＫ（０．００７５ｇ）を水に溶解して１００ｍＬとし、ｐＨ調節剤を添加して、ｐＨ７．５とした。点眼液４と点眼液１１は、共に同一濃度の有効成分（ジクアホソルナトリウム）を含有する点眼液である。また、点眼液４と点眼液１１は、共に日本薬局方の保存効力試験基準に適合し、同等の保存効力を有する点眼液である。

（試験方法）
ソフトコンタクトレンズ（製品名：メニコンソフトＭＡ^{（登録商標）}）を装用したカニクイザルの眼に、点眼液４、点眼液１１（２０μＬ／眼）を点眼する前、および点眼３０分後のＮＩＢＵＴをドライアイ観察装置（ＤＲ－１、コーワ）で測定した（Ｎ＝１１眼）。

（結果）
試験結果を表７に示す。

日本薬局方の保存効力試験基準に適合し、同等の保存効力を有する、本点眼液（点眼液４）とＢＡＫ含有点眼液（点眼液１１）の点眼３０分後におけるＮＩＢＵＴを測定し、比較検討した結果、本点眼液はＢＡＫ含有点眼液よりも高いＮＩＢＵＴ上昇作用を有することが示された。

（考察）
上記の結果から、本点眼液はＢＡＫ含有点眼液よりもソフトコンタクトレンズ装用による涙液層の安定性の低下を改善することが示された。

試験例７．クロルヘキシジングルコン酸塩の残存率測定試験
クロルヘキシジングルコン酸塩の濃度が、ジクアホソル点眼液調製後におけるクロルヘキシジングルコン酸塩の残存率に与える影響を検討した。

（試料調製）
点眼液１２：
表８に示す処方に従って、点眼液１２を調製した。具体的には、以下のように調製した。
１）０．５％（ｗ／ｖ）クロルヘキシジングルコン酸塩溶液を調製した。
２）０．４％（ｗ／ｖ）リン酸水素ナトリウム水和物、０．７８％（ｗ／ｖ）塩化ナトリウム、０．３％（ｗ／ｖ）塩化カリウムおよび０．０２％（ｗ／ｖ）エデト酸ナトリウム水和物を含有する水溶液（２倍濃厚液）を調製した。
３）水に１）で調製した溶液を加え、さらに２）で調製した溶液を加えた。
４）マグネチックスターラ―を用いて撹拌後、ジクアホソルナトリウム、さらにｐＨ調節剤（水酸化ナトリウムまたは塩酸）を加え、ｐＨを７．５に調節した。
４）表８に示す濃度になるように水で全量を調整した。
５）０．２２μｍフィルターを用いてろ過し、点眼液１２を調製した。
点眼液１３、点眼液１４：
点眼液１２と同様に点眼液１３、点眼液１４を調製した。

（試験方法）
上記点眼液１２～１４中のクロルヘキシジングルコン酸塩の含有量を測定し、その残存率を算出した。

（結果）
試験結果を表９に示す。

（考察）
表９に示すように、０．０１％（ｗ／ｖ）の濃度のクロルヘキシジングルコン酸塩を用いた点眼液１４では、点眼液調製後、クロルヘキシジングルコン酸塩の残存率が低下することが明らかになった。一方、０．００２５％（ｗ／ｖ）、０．００５％（ｗ／ｖ）の濃度のクロルヘキシジングルコン酸塩を用いた点眼液１２および点眼液１３では、点眼液調製後においても高いクロルヘキシジングルコン酸塩の残存率を維持した。以上より、クロルヘキシジングルコン酸塩を含有するジクアホソル点眼液の調製には、０．００５％（ｗ／ｖ）以下の濃度のクロルヘキシジングルコン酸塩を用いることが好ましいことが示された。

試験例８．クロルヘキシジングルコン酸塩の長期安定性試験
ジクアホソル点眼液におけるクロルヘキシジングルコン酸塩の長期安定性を検討した。

（試料調製）
試験例７と同様に、表１０に示す処方に従って、点眼液１５～１７を調製した。

（試験方法）
点眼液１５～１７を４０℃／２０％ＲＨで、それぞれ６か月まで保存したときの、クロルヘキシジングルコン酸塩の含有量を高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いて定量し、その残存率（％）を算出した。

（結果）
試験結果を表１１に示す。

（考察）
０．００２５％（ｗ／ｖ）、０．０１％（ｗ／ｖ）の濃度のクロルヘキシジングルコン酸塩を含有する点眼液１６、点眼液１７は、０．００１％（ｗ／ｖ）の濃度のクロルヘキシジングルコン酸塩を含有する点眼液１５よりも、４０℃／２０％ＲＨで、６か月間高いクロルヘキシジングルコン酸塩の残存率を維持し、優れた長期安定性を有することが示された。すなわち、ジクアホソル点眼液中のクロルヘキシジングルコン酸塩を安定化するには、該クロルヘキシジングルコン酸塩の濃度が０．００１％（ｗ／ｖ）超であることが好ましいことが示された。

以上、試験例７、８の結果から、特定の濃度範囲、すなわち０．００１～０．００５％（ｗ／ｖ）の濃度のクロルヘキシジン類を含有するジクアホソル点眼液は、点眼液調製時に高いクロルヘキシジン類の残存率を維持し、かつ該点眼液中のクロルヘキシジン類が優れた長期安定性を有することが示された。よって、該点眼液は、試験例１に示すように、長期間優れた保存効力を有することも期待される。

［製剤例］
製剤例を挙げて本発明の薬剤をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの製剤例にのみ限定されるものではない。

（処方例１：点眼剤（３％（ｗ／ｖ）））
１００ｍＬ中
ジクアホソルナトリウム３ｇ
リン酸水素ナトリウム水和物０．１～０．５ｇ
塩化ナトリウム０．０１～１ｇ
塩化カリウム０．０１～１ｇ
エデト酸ナトリウム水和物０．０００１～０．１ｇ
クロルヘキシジングルコン酸塩０．０００１～０．１ｇ
滅菌精製水適量
滅菌精製水にジクアホソルナトリウムおよびそれ以外の上記成分を加え、これらを十分に混合することで上記点眼剤を調製できる。

（処方例２：点眼剤（３％（ｗ／ｖ）））
１００ｍＬ中
ジクアホソルナトリウム３ｇ
リン酸水素ナトリウム水和物０．１～０．５ｇ
塩化ナトリウム０．０１～１ｇ
塩化カリウム０．０１～１ｇ
エデト酸ナトリウム水和物０．０００１～０．１ｇ
クロルヘキシジングルコン酸塩０．０００１～０．１ｇ
ポリソルベート８００．０００１～０．１ｇ
滅菌精製水適量
滅菌精製水にジクアホソルナトリウムおよびそれ以外の上記成分を加え、これらを十分に混合することで上記点眼剤を調製できる。

本点眼液は、優れた保存効力を有する。さらに、本点眼液が、ソフトコンタクトレンズの変形を抑制することから、ソフトコンタクトレンズ用として使用することができる。また、本点眼液は、ＢＡＫを含有する点眼液およびジクアホソルまたはその塩を含まないクロルヘキシジン類を含有する点眼液よりも、培養した不死化ヒト角膜上皮細胞において高い生細胞活性を示す。よって、本点眼液は、生体、特に角結膜上皮に対する安全性がより高く、ドライアイのような角結膜上皮が不安定な疾患に用いるのに有用である。また、本点眼液は、ソフトコンタクトレンズ装用眼において顕著にＮＩＢＵＴを上昇させる。一方、人工涙液ではそのような効果は認められない。すなわち、本点眼液は、ソフトコンタクトレンズ装用眼において涙液層を安定化させる。ソフトコンタクトレンズ装用によるドライアイ症状の発生／悪化は、涙液層の安定性の低下に起因するものであることから、本点眼液による涙液層の安定化はソフトコンタクトレンズ装用眼における、ドライアイの予防および／または治療に有用である。また、本点眼液は、ソフトコンタクトレンズ装用眼における、眼乾燥感および／または眼不快感の予防および／または治療にも有用である。さらに、特定の濃度範囲、すなわち０．００１～０．００５％（ｗ／ｖ）の濃度のクロルヘキシジン類を含有するジクアホソル点眼液は、点眼液調製時に高いクロルヘキシジン類の残存率を維持し、かつ該点眼液中のクロルヘキシジン類が優れた長期安定性を有する。

Claims

０．１～１０％（ｗ／ｖ）の濃度のジクアホソルまたはその塩を唯一の有効成分として含有し、およびクロルヘキシジングルコン酸塩を含有する水性点眼液中のクロルヘキシジングルコン酸塩を安定化する方法であって、該クロルヘキシジングルコン酸塩の濃度が０．００１％（ｗ／ｖ）超乃至０．０１％（ｗ／ｖ）以下である、方法（但し、該水性点眼液は、薬剤学的に許容し得る式Ｉ：
ＨＯＯＣ－（ＣＲ _ｉ１Ｒ _ｉ２）ｎ－ＣＯＯＨ（Ｉ）
〔式中、ｎは０～３の整数、ｉはｎ以下の正の整数であり、ｎ＝１のときＲ _１１及びＲ _１２は各々独立してＨ，－ＯＨ又は－ＣＯＯＨであり、ｎ＝２のときＲ _１１，Ｒ _１２，Ｒ _２１及びＲ _２２は各々Ｈ，－ＯＨ又は－ＣＯＯＨであるが全て同時にはＨでなく、ｎ＝３のときＲ _１１，Ｒ _１２，Ｒ _２１，Ｒ _２２，Ｒ _３１及びＲ _３２は各々Ｈ，－ＯＨ又は－ＣＯＯＨであるが隣接する２個の炭素原子に合計４個の水素原子が結合していることがない。〕で示される多価カルボン酸及びその薬剤学的に許容される塩を含有しない）。