JP7120927B2 - フェニルプロパンアミド誘導体ならびにそれらの製造方法および医薬用途 - Google Patents
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Description
Mは無機酸または有機酸、好ましくは有機酸、より好ましくはトリフルオロ酢酸であり;
GはO、-NR4および-CR5R6から成る群から選択され;
R1は水素、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、ヒドロキシ、シアノ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-OR7、-C(O)R7、-C(O)OR7、-S(O)mR7および-NR8R9から成る群から選択され、ここでアルキル、ハロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールはそれぞれ、アルキル、ハロアルキル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、アルコキシ、ハロアルコキシ、ヒドロキシアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールから成る群から選択される1以上の基により場合により置換されていてよく;
R2は水素、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、-OR7、-C(O)R7および-C(O)OR7から成る群から選択され、ここでアルキル、ハロアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールアルキルはそれぞれ、アルキル、ハロアルキル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、アルコキシ、ハロアルコキシ、ヒドロキシアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールから成る群から選択される1以上の基により場合により置換されていてよく;
R3は水素、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、-OR7、-C(O)R7および-C(O)OR7から成る群から選択され、ここでアルキル、ハロアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールアルキルはそれぞれ、アルキル、ハロアルキル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、アルコキシ、ハロアルコキシ、ヒドロキシアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールから成る群から選択される1以上の基により場合により置換されていてよく;
R4は水素、アルキル、ハロアルキル、シクロアルキル、アルコキシ、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシカルボニル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-OR7、-C(O)R7、-C(O)OR7、-S(O)mR7、-NR8R9および-NHC(O)NR8R9から成る群から選択され、ここでアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールはそれぞれ、アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシカルボニル、ニトロ、シアノ、アルコキシ、ヒドロキシアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールから成る群から選択される1以上の基により場合により置換されていてよく;
R5およびR6はそれぞれ独立して、水素、アルキル、アルコキシ、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシカルボニル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、-OR7、-C(O)R7、-C(O)OR7、-S(O)mR7、-NR8R9および-NHC(O)NR8R9から成る群から選択され、ここでアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールはそれぞれ、アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシカルボニル、ニトロ、シアノ、アルコキシ、ヒドロキシアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールから成る群から選択される1以上の基により場合により置換されていてよく;
R7は水素、アルキル、アミノ、アルコキシ、ヒドロキシアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールから成る群から選択され、ここでアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールはそれぞれ、アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、アルコキシ、ヒドロキシアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールから成る群から選択される1以上の基により場合により置換されていてよく;
R8およびR9は水素、アルキル、アルコキシ、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシカルボニル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールから成る群から選択され、ここでアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールはそれぞれ、アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシカルボニル、ニトロ、シアノ、アルコキシ、ヒドロキシアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールから成る群から選択される1以上の基により場合により置換されていてよく;
zは0、1、2、3または4であり;そして
mは0、1または2である〕
の化合物またはその互変異性体、メソ体、ラセミ体、エナンチオマー、ジアステレオマーもしくはその混合物、またはその薬学的に許容される塩に関する。
M、G、R2、R3およびzは式(I)で定義されるとおりである〕
の化合物またはその互変異性体、メソ体、ラセミ体、エナンチオマー、ジアステレオマーもしくはその混合物、またはその薬学的に許容される塩である。
M、G、R2およびzは式(I)で定義されるとおりである〕
の化合物またはその互変異性体、メソ体、ラセミ体、エナンチオマー、ジアステレオマーもしくはその混合物、またはその薬学的に許容される塩である。
M、R2およびzは式(I)で定義されるとおりである〕
の化合物またはその互変異性体、メソ体、ラセミ体、エナンチオマー、ジアステレオマーもしくはその混合物、またはその薬学的に許容される塩である。
GはOまたはCR5R6、好ましくはCR5R6であり;
R10は水素、アルキル、ハロアルキル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、アルコキシ、ハロアルコキシ、ヒドロキシアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールから成る群から選択され;
R11およびR12は同一であるかまたは異なり、各々は独立して、水素、アルキル、ハロアルキル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、アルコキシ、ハロアルコキシ、ヒドロキシアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールから成る群から選択され;
またはR10およびR11は一体となってシクロアルキルを形成し;
またはR11およびR12は一体となってシクロアルキルを形成し;
R13は水素、アルキル、ハロアルキル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、アルコキシ、ハロアルコキシ、ヒドロキシアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールから成る群から選択され;
sは0、1または2であり;そして
R5~R6、Mおよびzは式(I)で定義されるとおりである〕
の化合物またはその互変異性体、メソ体、ラセミ体、エナンチオマー、ジアステレオマーもしくはその混合物、またはその薬学的に許容される塩である。
R10~R13、M、zおよびsは式(III-A)で定義されるとおりである〕
の化合物またはその互変異性体、メソ体、ラセミ体、エナンチオマー、ジアステレオマーもしくはその混合物、またはその薬学的に許容される塩である。
R10~R11、R13、M、zおよびsは式(III-A)で定義されるとおりである〕
の化合物またはその互変異性体、メソ体、ラセミ体、エナンチオマー、ジアステレオマーもしくはその混合物、またはその薬学的に許容される塩である。
Raはアミノ保護基、好ましくはt-ブトキシカルボニル、9-フルオレニルメトキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、トリクロロエトキシカルボニル、トリメチルシリルエトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、p-メチルベンゼンスルホニル、p-ニトロベンゼンスルホニルまたはtert-ブチル(すなわち、Boc、Fmoc、Alloc、Troc、Teoc、CBz、Tosyl、Nosylおよびt-Bu)であり;そして
G、R2およびR3は式(II)で定義されるとおりである〕
の化合物またはその互変異性体、メソ体、ラセミ体、エナンチオマー、ジアステレオマーもしくはその混合物、またはその薬学的に許容される塩に関する。
M、G、z、R2およびR3は式(II)で定義されるとおりであり、Raは式(V)で定義されるとおりである〕
を含む、式(II)の化合物の製造方法に関する。
Raはアミノ保護基、好ましくはt-ブトキシカルボニル、9-フルオレニルメトキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、トリクロロエトキシカルボニル、トリメチルシリルエトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、p-メチルベンゼンスルホニル、p-ニトロベンゼンスルホニルまたはtert-ブチルであり;そして
GおよびR2は式(III)で定義されるとおりである〕
の化合物またはその互変異性体、メソ体、ラセミ体、エナンチオマー、ジアステレオマーもしくはその混合物、またはその薬学的に許容される塩に関する。
M、G、zおよびR2は式(III)で定義されるとおりであり、Raは式(VI)で定義されるとおりである〕
を含む、式(III)の化合物の製造方法に関する。
特に断らない限り、本明細書および特許請求の範囲において使用される用語は、以下に記載の意義を有する。
本発明の目的を達成するために、本発明は以下の技術的解決策を使用する。
Raはアミノ保護基、好ましくはt-ブトキシカルボニル、9-フルオレニルメトキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、トリクロロエトキシカルボニル、トリメチルシリルオキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、p-メチルベンゼンスルホニル、p-ニトロベンゼンスルホニルおよびtert-ブチルであり;
Rbはカルボキシル保護基、好ましくはDMB、Bn、Allyl、PfP、Me、PMB、MEMおよびt-Buであり;そして
M、G、z、R2およびR3は式(II)で定義されるとおりである。
Raはアミノ保護基、好ましくはt-ブトキシカルボニル、9-フルオレニルメトキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、トリクロロエトキシカルボニル、トリメチルシリルオキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、p-メチルベンゼンスルホニル、p-ニトロベンゼンスルホニルおよびtert-ブチルであり;
Rbはカルボキシル保護基、好ましくはDMB、Bn、Allyl、PfP、Me、PMB、MEMおよびt-Buであり;そして
M、G、zおよびR2は式(III)で定義されるとおりである。
Raはアミノ保護基、好ましくはt-ブトキシカルボニル、9-フルオレニルメトキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、トリクロロエトキシカルボニル、トリメチルシリルオキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、p-メチルベンゼンスルホニル、p-ニトロベンゼンスルホニルおよびtert-ブチルであり;
Rbはカルボキシル保護基、好ましくはMB、Bn、Allyl、PfP、Me、PMB、MEMおよびt-Buであり;そして
R10~R13、M、Gおよびzは式(III-A)で定義されるとおりである。
Raはアミノ保護基、好ましくはt-ブトキシカルボニル、9-フルオレニルメトキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、トリクロロエトキシカルボニル、トリメチルシリルオキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、p-メチルベンゼンスルホニル、p-ニトロベンゼンスルホニルおよびtert-ブチルであり;
Rbはカルボキシル保護基、好ましくはMB、Bn、Allyl、PfP、Me、PMB、MEMおよびt-Buであり;
Rcはアミノ保護基、好ましくはベンジルオキシカルボニル、t-ブトキシカルボニル、9-フルオレニルメトキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、トリクロロエトキシカルボニル、トリメチルシリルオキシカルボニル、p-メチルベンゼンスルホニル、p-ニトロベンゼンスルホニルまたはtert-ブチルであり;そして
R10~R13、Mおよびzは式(IV-A)で定義されるとおりである。
本発明は以下の実施例を参照してさらに説明されるが、実施例は本発明の範囲を限定するものであると考えられるべきではない。
化合物の構造は核磁気共鳴(NMR)および/または質量スペクトロメトリー(MS)により特定する。NMR化学シフト(δ)は10-6(ppm)で与えられる。NMRはBruker AVANCE-400機器により決定される。決定のための溶媒は重水素化-ジメチルスルホキシド(DMSO-d6)、重水素化クロロホルム(CDCl3)および重水素化メタノール(CD3OD)であり、内部標準はテトラメチルシラン(TMS)である。
4-アミノ-1-((6R,9R,12R)-12-(4-アミノブチル)-6-ベンジル-9-イソブチル-4,7,10-トリオキソ-1-(1-フェニルシクロプロピル)-2,5,8,11-テトラアザトリデカン-13-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸 1
4-ベンジル 1-tert-ブチル 4-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)ピペリジン-1,4-ジカルボキシレート 1b
4-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピペリジン-4-カルボン酸1a(1.2g、0.0032mol、"Bioorganic Medicinal Chemistry Letters, 2007, 7(9), 2448-2451"に開示される既知の方法により製造)、臭化ベンジル(0.65g、0.0038mol)および炭酸セシウム(2.1g、0.0064mol)を20mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解し、室温12時間撹拌した。反応溶液を水に注ぎ、酢酸エチル(30mL×3)で抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、得られた残渣を、溶出系Bを用いた薄層クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物1b(800mg、収率:53%)を得た。
ベンジル 4-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)ピペリジン-4-カルボキシレート塩酸塩 1c
1b(800mg、1.71mmol)を2mLのジクロロメタンに溶解し、2mLの塩酸(4M 1,4-ジオキサン溶液)を添加した。室温で4時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮して粗製の表題化合物1c(800mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
(R)-ベンジル 1-(2-((((9H-フルオレン-9-イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)-6-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ヘキサノイル)-4-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)ピペリジン-4-カルボキシレート 1e
粗製の化合物1c(800mg、1.97mmol)および(R)-2-((((9H-フルオレン-9-イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)-6-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ヘキサン酸1d(926mg、1.97mmol、"ChemMedChem, 2015, 10(7), 1232-1239"に開示される既知の方法により製造)を20mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解した。2-(7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(1.12g、3.0mmol)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.7mL、3.94mmol)を添加した。室温で12時間撹拌後、反応溶液を2Nクエン酸溶液に注ぎ、酢酸エチル(30mL×3)で抽出した。有機相を合わせ、飽和重炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物1e(1.6g)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
(R)-ベンジル 1-(2-アミノ-6-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ヘキサノイル)-4-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)ピペリジン-4-カルボキシレート 1f
粗製の化合物1e(1.6g、0.002mol)の10mLのジクロロメタンに溶解し、その後10mLのピペリジンを添加した。室温で2時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、溶出系Aを用いた薄層クロマトグラフィーで精製し、表題化合物1f(900mg、収率:77%)を得た。
(R)-ベンジル 2-((R)-2-(2-クロロアセトアミド)-3-フェニルプロピオンアミド)-4-メチルペンタノエート 1i
(R)-ベンジル 2-((R)-2-アミノ-3-フェニルプロパンアミド)-4-メチルペンタノエート1g(500mg、1.36mmol、米国特許第20110212882A1号に開示される方法により製造)およびトリエチルアミン(275mg、2.72mmol)を10mLのジクロロメタンに溶解し、その後クロロアセチルクロライド(230mg、2mmol)を滴下添加した。室温で12時間撹拌後、反応溶液を水に注ぎ、飽和塩化アンモニウム溶液で洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物1i(500mg)を得て、これを精製することなくすることなく、次の工程で直接使用した。
(R)-ベンジル 4-メチル-2-((R)-3-フェニル-2-(2-(((1-フェニルシクロプロピル)メチル)アミノ)アセトアミド)プロパンアミド)ペンタノエート 1k
粗製の化合物1i(150mg、0.33mmol)および(1-フェニルシクロプロピル)メタンアミン塩酸塩1j(74mg、0.4mmol、"Journal of American Chemical Society, 2015, 137(5), 2042- 2046"に開示される既知の方法により製造)を10mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解し、その後ヨウ化カリウム(110mg、0.67mmol)および炭酸カリウム(139mg、1mmol)を添加した。反応溶液を60℃まで昇温させ、5時間撹拌し、その後減圧下で濃縮した。得られた残渣に水を添加し、ジクロロメタン(30mL×3)で抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物1k(187mg)を得て、これを精製することなくすることなく、次の工程で直接使用した。
(9R,12R)-ベンジル 9-ベンジル-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10-トリオキソ-5-((1-フェニルシクロプロピル)メチル)-3-オキサ-5,8,11-トリアザトリデカン-13-オエート 1l
粗製の化合物1k(187mg、0.337mmol)をジクロロメタンに溶解し、その後二炭酸ジ-tert-ブチル(147mg、0.67mmol)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(130mg、1.01mmol)を添加した。室温で12時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、溶出系Aを用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物1l(100mg、収率:45.5%)を得た。
(9R,12R)-9-ベンジル-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10-トリオキソ-5-((1-フェニルシクロプロピル)メチル)-3-オキサ-5,8,11-トリアザトリデカン-13-酸 1m
1l(100mg、0.152mmol)を10mLのエタノールに溶解し、その後パラジウム炭素(100mg、触媒量)を添加した。添加完了後、反応系を水素で3回パージし、室温で5時間撹拌した。反応溶液をセライトろ過し、ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物1m(86mg)を得て、これを精製することなくすることなく、次の工程で直接使用した。
ベンジル 1-((9R,12R,15R)-9-ベンジル-15-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ブチル)-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10,13-テトラオキソ-5-((1-フェニルシクロプロピル)メチル)-3-オキサ-5,8,11,14-テトラアザヘキサデカン-16-オイル)-4-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)ピペリジン-4-カルボキシレート 1n
粗製の化合物1m(86mg、0.152mmol)、1f(91mg、0.152mmol)および2-(7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(115mg、0.3mmol)を10mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解した。室温で5時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、溶出系Aを用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物1n(100mg、収率:57.5%)を得た。
4-アミノ-1-((9R,12R,15R)-9-ベンジル-15-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ブチル)-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10,13-テトラオキソ-5-((1-フェニルシクロプロピル)メチル)-3-オキサ-5,8,11,14-テトラアザヘキサデカン-16-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸 1o
1n(100mg、0.087mmol)を10mLのエタノールに溶解し、その後パラジウム炭素(100mg、触媒量)を添加した。添加完了後、反応系を水素で3回パージし、室温で12時間撹拌した。反応溶液をセライトろ過し、ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物1o(80mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
4-アミノ-1-((6R,9R,12R)-12-(4-アミノブチル)-6-ベンジル-9-イソブチル-4,7,10-トリオキソ-1-(1-フェニルシクロプロピル)-2,5,8,11-テトラアザトリデカン-13-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸 トリフルオロアセテート 1p
粗製の化合物1o(80mg、0.087mmol)を10mLのジクロロメタンに溶解し、2mLのトリフルオロ酢酸を添加した。室温で5時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を高速液体クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物1p(10mg、収率:15.9%)を得た。
MS m/z(ESI):720.4[M+1]
1H NMR(400MHz、CD3OD)δ 8.47-8.40(m、2H)、7.42-7.27(m、11H)、4.84-4.81(m、1H)、4.70-4.67(m、1H)、4.40-4.38(m、1H)、4.25-4.10(m、1H)、3.95-3.85(m、2H)、3.78-3.70(m、2H)、3.61-3.52(m、1H)、3.5-3.41(m、1H)、3.25-3.10(m、3H)、3.10-2.95(m、2H)、2.95-2.89(m、2H)、2.89-2.75(m、2H)、2.31-2.24(m、2H)、1.95-1.45(m、13H)、1.1-0.9(m、6H)、0.9-0.86(m、4H)。
4-アミノ-1-((6R,9R,12R)-12-(4-アミノブチル)-6-ベンジル-9-イソブチル-4,7,10-トリオキソ-1-(1-フェニルシクロプロピル)-2,5,8,11-テトラアザトリデカン-13-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸 1
1p(10mg、0.012mmol)をジクロロメタンおよびメタノール(V/V=10:1)の混合液に溶解し、その後飽和炭酸ナトリウム水溶液を滴下添加し、pHを約7に調整した。反応溶液を室温で30分環撹拌し、静置して分離させた。有機相を回収し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、表題化合物1(8.6mg、収率:100%)を得た。
MS m/z(ESI):720.4[M+1]
4-アミノ-1-((2R,5R,8R,14S)-2-(4-アミノブチル)-8-ベンジル-5-イソブチル-4,7,10-トリオキソ-14-フェニル-3,6,9,12-テトラアザペンタデカン-1-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸 2
(R)-ベンジル 4-メチル-2-((R)-3-フェニル-2-(2-(((S)-2-フェニルプロピル)アミノ)アセトアミド)プロパンアミド)ペンタノエート 2b
1i(500mg、1.12mmol)および(S)-2-フェニルプロパン-1-アミン 2a(228mg、1.68mmol、"Advanced Synthesis & Catalysis, 2015, 357(18), 3875-3879"に開示される既知の方法により製造)を10mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解し、その後ヨウ化カリウム(372mg、2.24mmol)および炭酸カリウム(309mg、2.24mmol)を添加した。反応溶液を60℃まで昇温させ、12時間撹拌した。反応溶液を室温まで冷却し、水を添加し、ジクロロメタン(30mL×3)で抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物2b(600mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
(9R,12R)-ベンジル 9-ベンジル-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10-トリオキソ-5-((S)-2-フェニルプロピル)-3-オキサ-5,8,11-トリアザトリデカン-13-オエート 2c
粗製の化合物2b(600mg、1.1mmol)を10mLのジクロロメタンに溶解し、その後二炭酸ジ-tert-ブチル(360mg、1.65mmol)およびトリエチルアミン(222mg、2.2mmol)を添加した。12時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、溶出系Aを用いた薄層クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物2c(380mg、収率:54%)を得た。
(9R,12R)-9-ベンジル-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10-トリオキソ-5-((S)-2-フェニルプロピル)-3-オキサ-5,8,11-トリアザトリデカン-13-酸 2d
2c(380mg、0.59mmol)を15mLのメタノールに溶解し、その後パラジウム炭素(40mg、触媒量)を添加した。添加完了後、反応系を水素で3回パージし、室温で12時間撹拌した。反応溶液をセライトろ過し、ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物2d(300mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
ベンジル 1-((9R,12R,15R)-9-ベンジル-15-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ブチル)-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10,13-テトラオキソ-5-((S)-2-フェニルプロピル)-3-オキサ-5,8,11,14-テトラアザヘキサデカン-16-オイル)-4-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)ピペリジン-4-カルボキシレート 2e
粗製の化合物2d(300mg、0.54mmol)、1f(356mg、0.6mmol)、2-(7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(308mg、0.81mmol)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(104mg、0.81mmol)を10mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解した。室温で1.5時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、溶出系Aを用いた薄層クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物2e(500mg、収率:81.8%)を得た。
4-アミノ-1-((9R,12R,15R)-9-ベンジル-15-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ブチル)-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10,13-テトラオキソ-5-((S)-2-フェニルプロピル)-3-オキサ-5,8,11,14-テトラアザヘキサデカン-16-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸 2f
2e(500mg、0.44mmol)を10mLのメタノールに溶解し、その後パラジウム炭素(50mg、触媒量)を添加した。添加完了後、反応系を水素で3回パージし、室温で12時間撹拌した。反応溶液をセライトろ過し、ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物2f(400mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
4-アミノ-1-((2R,5R,8R,14S)-2-(4-アミノブチル)-8-ベンジル-5-イソブチル-4,7,10-トリオキソ-14-フェニル-3,6,9,12-テトラアザペンタデカン-1-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸 トリフルオロアセテート 2g
粗製の化合物2f(400mg、0.44mmol)5mLのジクロロメタンに溶解し、その後2mLの塩酸(4M 1,4-ジオキサン溶液)aを添加した。室温で2時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、高速液体クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物2g(150mg、収率:48%)を得た。
MS m/z(ESI):708.6[M+1]
1H NMR(400MHz、CD3OD)δ 7.40-7.17(m、11H)、4.89-4.82(m、1H)、4.79-4.74(m、1H)、4.40-4.39(m、1H)、4.22-4.15(m、1H)、4.01-3.95(m、1H)、3.85-3.60(m、5H)、3.49-3.36(m、1H)、3.21-3.09(m、5H)、2.96-2.92(m、4H)、2.27-2.25(m、3H)、1.83-1.45(m、14H)、1.34-1.33(m、3H)、1.01-0.92(m、6H)
4-アミノ-1-((2R,5R,8R,14S)-2-(4-アミノブチル)-8-ベンジル-5-イソブチル-4,7,10-トリオキソ-14-フェニル-3,6,9,12-テトラアザペンタデカン-1-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸 2
2g(150mg、0.182mmol)を1mLのジクロロメタンおよびメタノール(V/V=10:1)の混合溶液に溶解し、その後飽和炭酸ナトリウム水溶液を滴下添加し、pHを約7に調整した。反応溶液を室温で30分間撹拌し、静置して分離させた。有機相を回収し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、表題化合物2(129mg、収率:100%)を得た。
MS m/z(ESI):708.6[M+1]
4-アミノ-1-((2R,5R,8R)-2-(4-アミノブチル)-8-ベンジル-5-イソブチル-14-メチル-4,7,10-トリオキソ-14-フェニル-3,6,9,12-テトラアザペンタデカン-1-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸 3
(9R,12R)-ベンジル 9-ベンジル-12-イソブチル-2,2-ジメチル-5-(2-メチル-2-フェニルプロピル)-4,7,10-トリオキソ-3-オキサ-5,8,11-トリアザトリデカン-13-オエート 3b
粗製の化合物1i(130mg、0.293mmol)および2-メチル-2-フェニルプロパン-1-アミン3a(130mg、0.878mmol、特許出願国際公開第2007030582号に開示される既知の方法により製造)を2mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解し、その後ヨウ化カリウム(73mg、0.44mmol)および炭酸カリウム(121mg、0.878mmol)を添加した。反応溶液を80℃まで昇温させ、12時間撹拌した。反応溶液を室温まで冷却し、その後1mLのテトラヒドロフランおよび1mLの水を添加した。均一に撹拌した後、二炭酸ジ-tert-ブチル(96mg、0.439mmol)を添加した。反応溶液を室温で2時間撹拌し、その後減圧下で濃縮した。残渣に水を添加し、酢酸エチル(30mL×3)で抽出した。有機相を合わせ、飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、溶出系Bを用いた薄層クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物3b(110mg、収率:57%)を得た。
(9R,12R)-9-ベンジル-12-イソブチル-2,2-ジメチル-5-(2-メチル-2-フェニルプロピル)-4,7,10-トリオキソ-3-オキサ-5,8,11-トリアザトリデカン-13-酸 3c
3b(110mg、0.162mmol)をメタノールに溶解し、その後パラジウム炭素(20mg、触媒量)を添加した。添加完了後、反応系を水素で3回パージし、30℃まで昇温させ、12時間撹拌した。反応溶液をセライトろ過し、ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物3c(74mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
メチル 1-((9R,12R,15R)-9-ベンジル-15-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ブチル)-12-イソブチル-2,2-ジメチル-5-(2-メチル-2-フェニルプロピル)-4,7,10,13-テトラオキソ-3-オキサ-5,8,11,14-テトラアザヘキサデカン-16-オイル)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ピペリジン-4-カルボキシレート 3e
粗製の化合物3c(74mg、0.13mmol)、(R)-メチル 1-(2-アミノ-6-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ヘキサノイル)-4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ピペリジン-4-カルボキシレート3d(70mg、0.143mmol、特許出願日本国特許第5807140B1号に開示される既知の方法により製造)、2-(7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(74mg、0.195mmol)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(50mg、0.39mmol)を2mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解し、0℃で2時間撹拌した。反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣に水を添加し、酢酸エチル(30mL×3)で抽出した。有機相を合わせ、飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物3e(134mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
4-アミノ-1-((2R,5R,8R)-2-(4-アミノブチル)-8-ベンジル-5-イソブチル-14-メチル-4,7,10-トリオキソ-14-フェニル-3,6,9,12-テトラアザペンタデカン-1-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸 トリフルオロアセテート 3f
粗製の化合物3e(134mg、0.13mmol)を2mLのテトラヒドロフランおよびメタノール(V/V=3:1)の混合溶媒に溶解し、その後0.65mLの1M 水酸化リチウムを添加した。室温で2時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を高速液体クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物3f(40mg、収率:30%)を得た。
MS m/z(ESI):722.6[M+1]
1H NMR(400MHz、CD3OD)δ 7.90-7.759(m、2H)、7.45-7.15(m、10H)、4.80-4.71(m、1H)、4.45-4.37(m、1H)、4.17-4.10(m、1H)、4.02-3.85(m、2H)、3.80-3.72(m、3H)、3.65-3.50(m、1H)、3.48-3.40(m、1H)、3.25-3.15(m、3H)、3.05-2.80(m、5H)、2.38-2.20(m、3H)、2.02-1.40(m、20H)、1.05-0.92(m、6H)。
4-アミノ-1-((2R,5R,8R)-2-(4-アミノブチル)-8-ベンジル-5-イソブチル-14-メチル-4,7,10-トリオキソ-14-フェニル-3,6,9,12-テトラアザペンタデカン-1-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸 3
3f(40mg、0.048mmol)をジクロロメタンおよびメタノール(V/V=10:1)の混合溶液に溶解した。飽和炭酸ナトリウム水溶液を滴下添加し、pHを約7に調整した。反応溶液を室温で30分間撹拌し、静置して分離させた。有機相を回収し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、表題化合物3(34.6mg、収率:100%)を得た。
MS m/z(ESI):722.6[M+1]
4-アミノ-1-((2R,5R,8R,14R)-2-(4-アミノブチル)-8-ベンジル-5-イソブチル-15-メチル-4,7,10-トリオキソ-14-フェニル-3,6,9,12-テトラアザヘキサデカン-1-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸 4
(R)-ベンジル 4-メチル-2-((R)-2-(2-(((R)-3-メチル-2-フェニルブチル)アミノ)アセトアミド)-3-フェニルプロパンアミド)ペンタノエート 4b
粗製の化合物1i(1g、2.45mmol)および(R)-3-メチル-2-フェニルブタン-1-アミン4a(500mg、3mmol、"Tetrahedron:Asymmetry, 2003, 14(16), 2401-2406"に開示される既知の方法により製造)を10mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解し、その後ヨウ化カリウム(1g、6mmol)および炭酸カリウム(1.3g、9.2mmol)を添加した。反応溶液を60℃まで昇温させ、12時間撹拌し、その後減圧下で濃縮した。得られた残渣に水を添加し、ジクロロメタン(30mL×3)で抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物4b(500mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
(9R,12R)-ベンジル 9-ベンジル-12-イソブチル-2,2-ジメチル-5-((R)-3-メチル-2-フェニルブチル)-4,7,10-トリオキソ-3-オキサ-5,8,11-トリアザトリデカン-13-オエート 4c
粗製の化合物4b(500mg、0.875mmol)をジクロロメタンに溶解し、その後二炭酸ジ-tert-ブチル(380mg、1.75mmol)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(340mg、2.62mmol)を添加した。室温で12時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、溶出系Aを用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物4c(300mg、収率:51.1%)を得た。
(9R,12R)-9-ベンジル-12-イソブチル-2,2-ジメチル-5-((R)-3-メチル-2-フェニルブチル)-4,7,10-トリオキソ-3-オキサ-5,8,11-トリアザトリデカン-13-酸 4d
4c(300mg、0.447mmol)を10mLのエタノールに溶解し、その後パラジウム炭素(100mg、触媒量)を添加した。添加完了後、反応系を水素で3回パージし、室温で12時間撹拌した。反応溶液をセライトろ過し、ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物4d(260mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
ベンジル 1-((9R,12R,15R)-9-ベンジル-15-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ブチル)-12-イソブチル-2,2-ジメチル-5-((R)-3-メチル-2-フェニルブチル)-4,7,10,13-テトラオキソ-3-オキサ-5,8,11,14-テトラアザヘキサデカン-16-オイル)-4-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)ピペリジン-4-カルボキシレート 4e
粗製の化合物4d(260mg、0.447mmol)、1f(270mg、0.447mmol)、2-(7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(500mg、1.34mmol)および3mLのトリエチルアミンを10mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解した。室温で2時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、溶出系Aを用いた薄層クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物4e(100mg、収率:19.2%)を得た。
4-アミノ-1-((9R,12R,15R)-9-ベンジル-15-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ブチル)-12-イソブチル-2,2-ジメチル-5-((R)-3-メチル-2-フェニルブチル)-4,7,10,13-テトラオキソ-3-オキサ-5,8,11,14-テトラアザヘキサデカン-16-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸 4f
4e(100mg、0.086mmol)を20mLのエタノールに溶解し、パラジウム炭素(100mg、触媒量)を添加した。添加完了後、反応系を水素で3回パージし、室温で12時間撹拌した。反応溶液をセライトろ過し、ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物4f(81mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
4-アミノ-1-((2R,5R,8R,14R)-2-(4-アミノブチル)-8-ベンジル-5-イソブチル-15-メチル-4,7,10-トリオキソ-14-フェニル-3,6,9,12-テトラアザヘキサデカン-1-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸 トリフルオロアセテート 4g
粗製の化合物4f(81mg、0.086mmol)を10mLのジクロロメタンに溶解し、その後3mLのトリフルオロ酢酸を添加した。室温で2時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を高速液体クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物4g(8mg、収率:12.7%)を得た。
MS m/z(ESI):736.4[M+1]
1H NMR(400MHz、CD3OD)δ 7.45-7.15(m、10H)、4.9-4.8(m、1H)、4.8-4.62(m、1H)、4.41-4.28(m、1H)、4.1-4.0(m、1H)、3.98-3.85(m、1H)、3.85-3.65(m、3H)、3.65-3.55(m、1H)、3.55-3.45(m、1H)、3.38-3.28(m、2H)、3.25-3.08(m、2H)、3.25-3.05(m、2H)、2.95-2.87(m、2H)、2.85-2.75(m、1H)、2.75-2.65(m、2H)、2.4-2.15(m、3H)、2-1.35(m、14H)、1.2-0.83(m、9H)、0.71-0.62(d、3H)。
4-アミノ-1-((2R,5R,8R,14R)-2-(4-アミノブチル)-8-ベンジル-5-イソブチル-15-メチル-4,7,10-トリオキソ-14-フェニル-3,6,9,12-テトラアザヘキサデカン-1-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸 4
4g(8mg、0.009mmol)を1mLのジクロロメタンおよびメタノール(V/V=10:1)の混合溶媒に溶解した。飽和炭酸ナトリウム水溶液を添加し、pHを約7に調整した。反応溶液を室温で30分撹拌し、静置して分離させた。有機相を回収し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、表題化合物4(6.9mg、収率:100%)を得た。
MS m/z(ESI):736.4[M+1]
4-アミノ-1-((2R,5R,8R,14R)-2-(4-アミノブチル)-8-ベンジル-5-イソブチル-4,7,10-トリオキソ-14-フェニル-3,6,9,12-テトラアザペンタデカン-1-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸 5
(R)-ベンジル 4-メチル-2-((R)-3-フェニル-2-(2-(((R)-2-フェニルプロピル)アミノ)アセトアミド)プロパンアミド)ペンタノエート 5b
1i(500mg、1.12mmol)および(R)-2-フェニルプロパン-1-アミン5a(228mg、1.68mmol、"Angewandte Chemie,International Edition, 2003, 42(39), 4793-4795"に開示される既知の方法により製造)を10mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解し、その後ヨウ化カリウム(372mg、2.24mmol)および炭酸カリウム(309mg、2.24mmol)を添加した。反応溶液を60℃まで昇温させ12時間撹拌した。反応溶液を室温で冷却し、水を添加し、ジクロロメタン(30mL×3)で抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物5b(600mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
(9R,12R)-ベンジル 9-ベンジル-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10-トリオキソ-5-((R)-2-フェニルプロピル)-3-オキサ-5,8,11-トリアザトリデカン-13-オエート 5c
粗製の化合物5b(600mg、1.1mmol)を20mLのジクロロメタンに溶解し、その後二炭酸ジ-tert-ブチル(361mg、1.66mmol)およびトリエチルアミン(222mg、2.2mmol)を添加した。室温で12時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、溶出系Aを用いた薄層クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物5c(580mg、収率:82%)を得た。
(9R,12R)-9-ベンジル-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10-トリオキソ-5-((R)-2-フェニルプロピル)-3-オキサ-5,8,11-トリアザトリデカン-13-酸 5d
5c(580mg、0.9mmol)10mLのメタノールに溶解し、その後パラジウム炭素(60mg、触媒量)を添加した。添加完了後、反応系を水素で3回パージし、室温で12時間撹拌した。反応溶液をセライトろ過し、ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物5d(500mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
ベンジル 1-((9R,12R,15R)-9-ベンジル-15-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ブチル)-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10,13-テトラオキソ-5-((R)-2-フェニルプロピル)-3-オキサ-5,8,11,14-テトラアザヘキサデカン-16-オイル)-4-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)ピペリジン-4-カルボキシレート 5e
粗製の化合物5d(365mg、0.66mmol)、1f(393mg、0.66mmol)、2-(7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(376mg、0.99mmol)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.16mL、0.99mmol)を10mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解した。室温で2時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、溶出系Aを用いた薄層クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物5e(170mg、収率:23%)を得た。
4-アミノ-1-((9R,12R,15R)-9-ベンジル-15-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ブチル)-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10,13-テトラオキソ-5-((R)-2-フェニルプロピル)-3-オキサ-5,8,11,14-テトラアザヘキサデカン-16-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸 5f
5e(80mg、0.0706mmol)を10mLのメタノールに溶解し、その後パラジウム炭素(10mg、触媒量)を添加した。添加完了後、反応系を水素で3回パージし、室温で12時間撹拌した。反応溶液をセライトろ過し、ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物5f(60mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
4-アミノ-1-((2R,5R,8R,14R)-2-(4-アミノブチル)-8-ベンジル-5-イソブチル-4,7,10-トリオキソ-14-フェニル-3,6,9,12-テトラアザペンタデカン-1-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸トリフルオロアセテート 5g
粗製の生成物5f(60mg、0.066mmol)を2mLのジクロロメタンに溶解し、その後、1mLの塩酸(4M 1,4-ジオキサン)溶液を添加した、室温で2時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を高速液体クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物5g(30mg、収率:55.6%)を得た。
MS m/z(ESI):708.6[M+1]
4-アミノ-1-((2R,5R,8R,14R)-2-(4-アミノブチル)-8-ベンジル-5-イソブチル-4,7,10-トリオキソ-14-フェニル-3,6,9,12-テトラアザペンタデカン-1-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸 5
5g(30mg、0.028mmol)を5mLのメタノール/水混合溶媒に溶解し、その後固形重炭酸ナトリウム(10mg)を添加し、pHを7に調整した。反応溶液を30分間撹拌し、その後減圧下で濃縮した。得られた残渣を10mLのジクロロメタンで溶解し、30分間撹拌し、ろ過した。ろ物を10mLのジクロロメタンで洗浄し、ろ液を減圧下で濃縮し、表題化合物5(17mg、収率:85.9%)を得た。
MS m/z(ESI):708.6[M+1]
1H NMR(400MHz、CD3OD):δ 7.33-7.19(m、10H)、4.90-4.84(m、2H)、4.64-4.61(m、2H)、4.42-4.39(m、1H)、3.86-3.74(m、5H)、3.20-3.12(m、4H)、2.94-2.84(m、4H)、2.61-2.54(m、2H)、2.20-2.15(m、3H)、1.79-1.70(m、2H)、1.68-1.60(m、8H)、1.45-1.40(m、3H)、1.30-1.20(m、5H)、0.99-0.76(m、6H)。
(R)-N-((R)-6-アミノ-1-モルホリノ-1-オキソヘキサン-2-イル)-4-メチル-2-((R)-3-フェニル-2-(2-(((1S,2R)-2-フェニルシクロプロピル)アミノ)アセトアミド)プロパンアミド)ペンタンアミド 6
(R)-ベンジル tert-ブチル(6-モルホリノ-6-オキソヘキサン-1,5-ジイル)ジカルバメート 6b
(R)-2-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)-6-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ヘキサン酸6a(1.14g、3mmol、"African Journal of pure and Applied Chemistry, 2009, 3(6), 108-115"に開示される既知の方法により製造)、モルホリン(0.31mL、3.6mmol)、2-(7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(1.73g、4.5mmol)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.8mL、4.5mmol)を10mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解し室温で2時間撹拌した。反応溶液に50mLの酢酸エチルを添加し、飽和塩化アンモニウム溶液、飽和重炭酸ナトリウム溶液および飽和塩化ナトリウム溶液で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物6b(1.3g)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
(R)-tert-ブチル(5-アミノ-6-モルホリノ-6-オキソヘキシル)カルバメート 6c
粗製の化合物6b(1.3g、2.9mmol)15mLのメタノールに溶解し、その後パラジウム炭素(350mg、触媒量)を添加した。添加完了後、反応系を水素で3回パージし、室温で12時間撹拌した。反応溶液をセライトろ過し、ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物6c(914mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
(R)-ベンジル 4-メチル-2-((R)-3-フェニル-2-(2-(((1S,2R)-2-フェニルシクロプロピル)アミノ)アセトアミド)プロパンアミド)ペンタノエート 6e
粗製の化合物1i(300mg、0.675mmol)および(1S,2S)-2-フェニルシクロプロパンアミン6d(120mg、0.68mmol、特許出願、米国特許第20060116370A1号に開示される既知の方法により製造)を10mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解し、その後ヨウ化カリウム(560mg、3.375mmol)および炭酸カリウム(465mg、3.375mmol)を添加した。反応溶液を60℃まで昇温させ、5時間撹拌し、その後減圧下で濃縮した。得られた残渣に水を添加し、ジクロロメタン(30mL×3)で抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、表題化合物6e(200mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
(9R,12R)-ベンジル 9-ベンジル-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10-トリオキソ-5-((1S,2R)-2-フェニルシクロプロピル)-3-オキサ-5,8,11-トリアザトリデカン-13-オエート 6f
粗製の化合物6e(200mg、0.35mmol)をジクロロメタンに溶解し、その後二炭酸ジ-tert-ブチル(100mg、0.525mmol)およびトリエチルアミン(110mg、1.05mmol)を添加した。室温で12時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、溶出系Aを用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物6f(140mg、収率:62.5%)を得た。
(9R,12R)-9-ベンジル-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10-トリオキソ-5-((1S,2R)-2-フェニルシクロプロピル)-3-オキサ-5,8,11-トリアザトリデカン-13-酸 6g
6f(140mg、0.218mmol)を4.5mLのテトラヒドロフラン、メタノールおよび水(V/V/V=4:4:1)の混合溶媒に溶解し、その後水酸化リチウム一水和物(55mg、1.31mmol)を添加した。室温で12時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮してメタノールおよびテトラヒドロフラン溶媒を除去した。水を添加し、1M塩酸を滴下添加し、pHを6に調整した。反応溶液をジクロロメタン(30mL×3)で抽出した。有機相を合わせ、飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し粗製の表題化合物6g(130mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
tert-ブチル((10R,13R,16R)-16-フェニル-13-イソブチル-2,2-ジメチル-10-(モルホリン-4-カルボニル)-4,12,15,18-テトラオキソ-3-オキサ-5,11,14,17-テトラアザノナデカン-19-イル)((1S,2R)-2-フェニルシクロプロピル)カルバメート 6h
粗製の化合物6g(130mg、0.218mmol)、粗製の化合物6c(85mg、0.26mmol)、2-(7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(125mg、0.327mmol)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(85mg、0.654mmol)を5mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解し、室温で12時間撹拌した。反応溶液に30mLのアセチルアセテートを添加し、飽和塩化アンモニウム溶液、飽和重炭酸ナトリウム溶液および飽和塩化ナトリウム溶液で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、溶出系Aを用いた薄層クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物6h(130mg、収率:70%)を得た。
(R)-N-((R)-6-アミノ-1-モルホリノ-1-オキソヘキサン-2-イル)-4-メチル-2-((R)-3-フェニル-2-(2-(((1S,2R)-2-フェニルシクロプロピル)アミノ)アセトアミド)プロパンアミド)ペンタンアミド 6
6h(60mg、0.071mmol)を3mLのジクロロメタンに溶解し、その後0.8mLの塩酸(4M 1,4-ジオキサン溶液)を添加した。室温で2時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、メタノールおよび水(V:V=20:1)の混合溶媒に溶解した。炭酸ナトリウムを添加し、pHを8以上に調整した。溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣に10mLのジクロロメタンを添加し、10分間撹拌し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、表題化合物6(19mg、収率:43.5%)を得た。
MS m/z(ESI):649.3 [M+1]
1H NMR(400MHz、CD3OD)δ 7.26-7.23(m、10H)、4.95-4.93(m、1H)、4.80-4.78(m、1H)、4.70-4.68(m、1H)、3.66-3.60(m、8H)、3.32-3.30(m、6H)、3.28-3.26(m、1H)、3.18-3.16(m、1H)、2.94-2.91(m、1H)、2.65-2.63(m、1H)、2.26-2.23(m、1H)、1.71-1.68(m、5H)、1.48-1.42(m、6H)、0.95-0.93(dd、6H)。
4-アミノ-1-((2R,5R,8R)-2-(4-アミノブチル)-8-ベンジル-5-イソブチル-4,7,10-トリオキソ-14-フェニル-3,6,9,12-テトラアザヘキサデカン-1-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸 7
(9R,12R)-9-ベンジル-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10-トリオキソ-5-(2-フェニルブチル)-3-オキサ-5,8,11-トリアザトリデカン-13-酸 7a
1l(300mg、0.458mmol)を10mLのメタノールに溶解し、その後触媒量のパラジウム炭素を添加した。添加完了後、反応系を水素で3回パージし、室温で12時間撹拌した。反応溶液をセライトろ過し、ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物7a(189mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
ベンジル 1-((9R,12R,15R)-9-ベンジル-15-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ブチル)-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10,13-テトラオキソ-5-(2-フェニルブチル)-3-オキサ-5,8,11,14-テトラアザヘキサデカン-16-オイル)-4-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)ピペリジン-4-カルボキシレート 7b
粗製の化合物7a(189mg、0.34mmol)、1f(200mg、0.34mmol)、2-(7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(194mg、0.51mmol)およびトリエチルアミン(67mg、0.68mmol)を10mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解した。室温で12時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、溶出系Aを用いた薄層クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物7b(80mg、収率:20%)を得た。
4-アミノ-1-((9R,12R,15R)-9-ベンジル-15-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ブチル)-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10,13-テトラオキソ-5-(2-フェニルブチル)-3-オキサ-5,8,11,14-テトラアザヘキサデカン-16-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸 7c
7b(80mg、0.07mmol)を10mLのメタノールに溶解し、その後パラジウム炭素(10mg、触媒量)を添加した。添加完了後、反応系を水素で3回パージし、室温で12時間撹拌した。反応溶液をセライトろ過し、ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物7c(50mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
4-アミノ-1-((2R,5R,8R)-2-(4-アミノブチル)-8-ベンジル-5-イソブチル-4,7,10-トリオキソ-14-フェニル-3,6,9,12-テトラアザヘキサデカン-1-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸トリフルオロアセテート 7d
粗製の化合物7c(50mg、0.054mmol)を10mLのジクロロメタンに溶解し、その後2mLの塩酸(4M 1,4-ジオキサン溶液)を添加した。室温で1時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を高速液体カラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物7d(10mg、収率:25.6%)を得た。
MS m/z(ESI):722.6[M+1]
1H NMR(400MHz、CD3OD)δ 7.42-7.25(m、10H)、4.84-4.69(m、3H)、4.39-4.38(m、2H)、3.90-3.73(m、8H)、3.22-3.19(m、4H)、2.94-2.67(m、5H)、2.24-2.19(m、3H)、1.79-1.58(m、15H)、0.99-0.93(m、6H)、0.78(t、3H)
4-アミノ-1-((2R,5R,8R)-2-(4-アミノブチル)-8-ベンジル-5-イソブチル-4,7,10-トリオキソ-14-フェニル-3,6,9,12-テトラアザヘキサデカン-1-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸 7
7d(10mg、0.012mmol)を1mLのジクロロメタンおよびメタノール(V/V=10:1)の混合溶媒に溶解し、その後飽和炭酸ナトリウム水溶液を添加し、pHを約7に調整した。反応溶液を室温で30分間撹拌し静置して分離させた。有機相を回収し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ液を減圧下で濃縮し、表題化合物7(8.6mg、収率:100%)を得た。
MS m/z(ESI):722.6[M+1]
4-アミノ-1-((2R,5R,8R)-2-(4-アミノブチル)-8-ベンジル-5-イソブチル-4,7,10-トリオキソ-14-フェニル-3,6,9,12-テトラアザテトラデカン-1-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸 8
(R)-メチル 2-アミノ-6-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)ヘキサノエート塩酸塩 8b
1.3mLのジクロロスルホキシドを20mLのメタノールに溶解し、氷浴中で0℃に冷却した。(R)-2-アミノ-6-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)ヘキサン酸8a(2g、7.1mmol)を添加した。室温で12時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮し、表題化合物8b(2.09g)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
(9R,12R)-ベンジル 9-ベンジル-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10-トリオキソ-5-フェニルエチル-3-オキサ-5,8,11-トリアザトリデカン-13-オエート 8d
2-((tert-ブトキシカルボニル)(フェニルエチル)アミノ)酢酸8c(332mg、1.19mmol、米国特許第6245746B1号に開示される方法により製造)および1g(439mg、1.19mmol)を6.6mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解し、その後2-(7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(679mg、1.785mmol)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(615mg、4.76mmol)を添加した。溶液を0℃で2時間撹拌し、その後減圧下で濃縮した。得られた残渣を水で希釈し、酢酸エチル(30mL×3)で抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、溶出系Bを用いた薄層クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物8d(410mg、収率:55%)を得た。
(9R,12R)-9-ベンジル-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10-トリオキソ-5-フェニルエチル-3-オキサ-5,8,11-トリアザトリデカン-13-酸 8e
8d(410mg、0.65mmol)を20mLのメタノールに溶解し、その後パラジウム炭素(60mg、触媒量)を添加した。添加完了後、反応系を水素で3回パージし、室温で12時間撹拌した。反応溶液をセライトろ過し、ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物8e(313mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した
(9R,12R,15R)-メチル 9-ベンジル-15-(4-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)ブチル)-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10,13-テトラオキソ-5-フェニルエチル-3-オキサ-5,8,11,14-テトラアザヘキサデカン-16-オエート
粗製の化合物8e(100mg、0.125mmol)および粗製の化合物8b(85mg、0.231mmol)を5mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解し、その後2-(7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(105mg、0.277mmol)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(72mg、0.555mmol)を添加した。室温で2時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣に水を添加し、酢酸エチル(30mL×3)で抽出した。有機相を合わせ、飽和塩化アンモニウム溶液(30mL×3)、飽和重炭酸ナトリウム溶液(30mL×3)および飽和塩化ナトリウム溶液(30mL×3)で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物8f(140mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
(9R,12R,15R)-9-ベンジル-15-(4-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)ブチル)-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10,13-テトラオキソ-5-フェニルエチル-3-オキサ-5,8,11,14-テトラアザヘキサデカン-16-酸 8g
粗製の化合物8f(140mg、0.17mmol)を7mLのテトラヒドロフラン、メタノールおよび水(V/V/V=3:3:1)の混合溶媒に溶解し、その後水酸化リチウム一水和物(40mg、0.85mmol)を添加した。室温で0.5時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮してメタノールおよびテトラヒドロフラン溶媒を除去した。水を添加し、その後1M塩酸を滴下添加し、pHを6に調整した。反応溶液をジクロロメタン(30mL×3)で抽出した。有機相を合わせ、飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物8g(220mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
ベンジル 1-((9R,12R,15R)-9-ベンジル-15-(4-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)ブチル)-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10,13-テトラオキソ-5-フェニルエチル-3-オキサ-5,8,11,14-テトラアザヘキサデカン-16-オイル)-4-(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)ピペリジン-4-カルボキシレート 8h
粗製の化合物8g(220mg、0.17mmol)および粗製の化合物1c(130mg、0.26mmol)を5mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解し、その後2-(7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(100mg、0.26mmol)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(66mg、0.51mmol)を添加した。室温で3時間撹拌後、、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣に水を添加し酢酸エチル(30mL×3)で抽出した。有機相を合わせ、飽和塩化アンモニウム溶液(30mL×3)、飽和重炭酸ナトリウム溶液(30mL×3)および飽和塩化ナトリウム溶液(30mL×3)で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、溶出系Aを用いた薄層クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物8h(170mg、収率:87%)を得た。
1-((9R,12R,15R)-15-(4-アミノブチル)-9-ベンジル-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10,13-テトラオキソ-5-フェニルエチル-3-オキサ-5,8,11,14-テトラアザヘキサデカン-16-オイル)-4-(カルボキシアミノ)ピペリジン-4-カルボン酸 8i
8h(170mg、0.147mmol)を5mLのメタノールに溶解し、その後パラジウム炭素(50mg、触媒量)を添加した。添加完了後、反応系を水素で3回パージし、室温で12時間撹拌した。反応溶液をセライトろ過し、ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物8i(140mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
4-アミノ-1-((2R,5R,8R)-2-(4-アミノブチル)-8-ベンジル-5-イソブチル-4,7,10-トリオキソ-14-フェニル-3,6,9,12-テトラアザテトラデカン-1-オイル)ピペリジン-4-カルボン酸 8
粗製の化合物8i(140mg、0.167mmol)を3mLのジクロロメタンに溶解し、その後0.5mLの塩酸(4M 1,4-ジオキサン溶液)を添加した。室温で1時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣をメタノールおよび水(V/V=20:1)の混合溶媒に溶解し、その炭酸ナトリウムを添加してpHを8以上に調整した8。反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣に10mLのジクロロメタンを添加し、10分間撹拌してろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、表題化合物8(19mg、収率:17.4%)を得た。
MS m/z(ESI):694.4[M+1]
1H NMR(400MHz、CD3OD)δ 7.32-7.01(m、10H)、4.68-4.66(m、1H)、4.44-4.42(m、1H)、3.75-3.65(m、6H)、3.35(s、2H)、3.32-3.28(m、6H)、3.20-3.18(m、2H)、3.00(s、2H)、2.70-2.58(m、5H)、2.10-1.98(m、3H)、1.55-1.50(m、6H)、0.95-0.93(dd、6H)。
(R)-N-((R)-6-アミノ-1-(4-(3-メチルウレイド)ピペリジン-1-イル)-1-オキソヘキサン-2-イル)-4-メチル-2-((R)-3-フェニル-2-(2-(((R)-2-フェニルプロピル)アミノ)アセトアミド)プロパンアミド)ペンタンアミド 9
tert-ブチル 4-(3-メチルウレイド)ピペリジン-1-カルボキシレート 9c
9a(8.11g、40mmol、特許出願国際公開第2006115353号に開示される方法により製造)を130mLのジクロロメタンに溶解し、その後N,N-ジイソプロピルエチルアミン(15.51g、120mmol)を添加した。0℃に冷却後、反応溶液に9b(3.74g、40mmol)を添加し、室温で2時間撹拌した。反応溶液に200mLの飽和重炭酸ナトリウム溶液を添加し、ジクロロメタン(200mL×3)で抽出した。有機相を合わせ、飽和塩化ナトリウム溶液(200mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物9c(9.3g)を得て、これをさらに精製することなく、次の工程で直接使用した。
1-メチル-3-(ピペリジン-4-イル)尿素塩酸塩 9d
粗製の化合物9c(1g、4mmol)を10mLのジクロロメタンに溶解し、その後2mLの塩酸(4M 1,4-ジオキサン溶液)を添加した。2時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮して粗製の表題化合物9d(1g、白色固体)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
(R)-(9H-フルオレン-9-イル)メチル tert-ブチル(6-(4-(3-メチルウレイド)ピペリジン-1-イル)-6-オキソヘキサン-1,5-ジイル)ジカルバメート 9e
粗製の化合物9d(1g、5.16mmol)および1d(2.42g、5.16mmol)を20mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解し、その後2-(7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(2.94g、7.74mmol)およびトリエチルアミン(1.03g、10.32mmol)を添加した。室温で4時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、溶出系Aを用いた薄層クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物9e(1g、収率:32%)を得た。
(R)-tert-ブチル(5-アミノ-6-(4-(3-メチルウレイド)ピペリジン-1-イル)-6-オキソヘキシル)カルバメート 9f
9e(304mg、0.5mmol)を2mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解し、その後6mLのトリエチルアミンを添加した。反応溶液を12時間撹拌し、その後精製することなく、次の工程で直接使用した。
tert-ブチル((10R,13R,16R)-16-ベンジル-13-イソブチル-2,2-ジメチル-10-(4-(3-メチルウレイド)ピペリジン-1-カルボニル)-4,12,15,18-テトラオキソ-3-オキサ-5,11,14,17-テトラアザノナデカン-19-イル)((R)-2-フェニルプロピル)カルバメート 9g
粗製の化合物9f(193mg、0.5mmol)、粗製の化合物5d(277mg、0.5mmol)、2-(7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(380mg、1mmol)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(129mg、1mmol)を30mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解し、室温で12時間撹拌した。反応溶液に10mLの飽和クエン酸溶液および20mLの水を添加し、酢酸エチル(30mL×3)で抽出した。有機相を合わせ、飽和重炭酸ナトリウム溶液(20mL)および飽和塩化ナトリウム溶液(20mL)で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物9g(500mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した
(R)-N-((R)-6-アミノ-1-(4-(3-メチルウレイド)ピペリジン-1-イル)-1-オキソヘキサン-2-イル)-4-メチル-2-((R)-3-フェニル-2-(2-(((R)-2-フェニルプロピル)アミノ)アセトアミド)プロパンアミド)ペンタンアミド トリフルオロアセテート 9
粗製の化合物9g(184mg、0.2mmol)を10mLのジクロロメタンに溶解し、その後2mLの塩酸(4M 1,4-ジオキサン溶液)を添加した。室温で12時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を高速液体クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物9(20mg、収率:14%)を得た。
MS m/z(ESI):721.6[M+1]
1H NMR(400MHz、CD3OD)δ 8.37-8.25(m、1H)、7.73-7.65(m、1H)、7.41-7.37(m、2H)、7.39-7.29(m、7H)、7.18-7.16(m、2H)、4.93-4.90(m、1H)、4.83-4.82(m、1H)、4.54-4.50(m、2H)、4.00-3.92(m、1H)、3.88-3.60(m、6H)、3.15-3.08(m、5H)、3.05-2.98(m、4H)、2.70(s、3H)、2.15-1.88(m、3H)、1.79-1.61(m、15H)、1.01-0.96(m、6H)。
(R)-N-((R)-6-アミノ-1-(4-(3-メチルウレイド)ピペリジン-1-イル)-1-オキソヘキサン-2-イル)-4-メチル-2-((R)-3-フェニル-2-(2-(((R)-2-フェニルプロピル)アミノ)アセトアミド)プロパンアミド)ペンタンアミド 9
9h(20mg、0.024mmol)を1mLのジクロロメタンおよびメタノール(V/V=10:1)の混合溶媒に溶解し、その後飽和炭酸ナトリウム水溶液を滴下添加し、pHを約7に調整した。反応溶液を室温で30分間撹拌し、静置して分離させた。有機相を回収し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、表題化合物9(17mg、収率:100%)を得た。
MS m/z(ESI):721.6[M+1]
(R)-N-((R)-6-アミノ-1-モルホリノ-1-オキソヘキサン-2-イル)-2-((R)-2-(2-((2,3-ジヒドロ-1H-インデン-2-イル)アミノ)アセトアミド)-3-フェニルプロパンアミド)-4-メチルペンタンアミド 10
(R)-(9H-フルオレン-9-イル)メチル(6-((1-(4,4-ジメチル-2,6-ジオキソシクロヘキシリデン)エチル)アミノ)-1-モルホリノ-1-オキソヘキサン-2-イル)カルバメート 10b
(R)-2-((((9H-フルオレン-9-イル)メトキシ)カルボニル)アミノ)-6-((1-(4,4-ジメチル-2,6-ジオキソシクロヘキシリデン)エチル)アミノ)ヘキサン酸10a(1.06g、2mmol、Accela ChemBio Inc.から購入)およびモルホリン(200mg、2.4mmol)を10mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解し、その後2-(7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(1.51g、4mmol)およびトリエチルアミン(400mg、4mmol)を添加した。室温で3時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣に5mLの飽和クエン酸溶液および50mLの水を添加し、酢酸エチル(100mL×3)で抽出した。有機相を合わせ、水(100mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物10b(1.3g)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
(R)-2-(1-((5-アミノ-6-モルホリノ-6-オキソヘキシル)アミノ)エチリデン)-5,5-ジメチルシクロヘキサン-1,3-ジオン 10c
粗製の化合物10b(1.3g、2mmol)を5mLのジクロロメタンに溶解し、その後2mLのピペリジンを添加した。室温で12時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、溶出系Aを用いた薄層クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物10c(500mg、収率:75%)を得た。
(R)-ベンジル 2-((R)-2-(2-((2,3-ジヒドロ-1H-インデン-2-イル)アミノ)アセトアミド)-3-フェニルプロパンアミド)-4-メチルペンタノエート 10e
粗製の化合物1i(222mg、0.5mmol)および2,3-ジヒドロ-1H-インデン-2-アミン塩酸塩10d(127mg、0.4mmol、"Tetrahedron, 2005, 61(28), 6801-6807"に開示される既知の方法により製造)を5mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解し、その後ヨウ化カリウム(415mg、2.5mmol)および炭酸カリウム(345、2.5mmol)を添加した。反応溶液を60℃まで昇温させ、12時間撹拌し、その後減圧下で濃縮した。得られた残渣を、溶出系Aを用いた薄層クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物10e(300mg、収率:100%)を得た。
(9R,12R)-ベンジル 9-ベンジル-5-(2,3-ジヒドロ-1H-インデン-2-イル)-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10-トリオキソ-3-オキサ-5,8,11-トリアザトリデカン-13-オエート 10f
10e(300mg、0.55mmol)を10mLのジクロロメタンに溶解し、その後二炭酸ジ-tert-ブチル(181mg、083mmol)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.3mL、1.65mmol)を添加した。室温で12時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、溶出系Aを用いた薄層クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物10f(170mg、収率:48%)を得た。
(9R,12R)-9-ベンジル-5-(2,3-ジヒドロ-1H-インデン-2-イル)-12-イソブチル-2,2-ジメチル-4,7,10-トリオキソ-3-オキサ-5,8,11-トリアザトリデカン-13-酸 10g
10f(170mg、0.26mmol)を10mLのメタノールに溶解し、その後パラジウム炭素(50mg、10%)を添加した。反応系を水素で3回パージし、室温で12時間撹拌した。反応溶液をろ過し、ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物10g(112mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
tert-ブチル((4R,7R,10R)-4-ベンジル-16-(4,4-ジメチル-2,6-ジオキソシクロヘキシリデン)-7-イソブチル-10-(モルホリン-4-カルボニル)-2,5,8-トリオキソ-3,6,9,15-テトラアザヘプタデシル)(2,3-ジヒドロ-1H-インデン-2-イル)カルバメート 10h
粗製の化合物 10g(112mg、0.2mmol)、10c(78mg、0.2mmol)、2-(7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(114mg、0.3mmol)およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.1mL、0.6mmol)を15mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解し、室温で2時間撹拌した。反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣に100mLの酢酸エチルを添加し、水(50mL×3)および飽和塩化アンモニウム溶液(50mL×3)で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物10h(183mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
tert-ブチル(2-(((R)-1-(((R)-1-(((R)-6-アミノ-1-モルホリノ-1-オキソヘキサン-2-イル)アミノ)-4-メチル-1-オキソペンタn-2-イル)アミノ)-1-オキソ-3-フェニルプロパン-2-イル)アミノ)-2-オキソエチル)(2,3-ジヒドロ-1H-インデン-2-イル)カルバメート 10i
粗製の化合物10h(183mg、0.2mmol)を10mLのメタノールに溶解し、その後0.5mLのヒドラジン水和物を添加した。室温で1時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮し、粗製の表題化合物10i(150mg)を得て、これを精製することなく、次の工程で直接使用した。
(R)-N-((R)-6-アミノ-1-モルホリノ-1-オキソヘキサン-2-イル)-2-((R)-2-(2-((2,3-ジヒドロ-1H-インデン-2-イル)アミノ)アセトアミド)-3-フェニルプロパンアミド)-4-メチルペンタンアミド トリフルオロアセテート 10j
粗製の化合物10i(150mg、1.31mmol)を5mLのジクロロメタンに溶解し、その後1mLのトリフルオロ酢酸を添加した。室温で1時間撹拌後、反応溶液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を高速液体クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物10j(5mg、収率:4%)を得た。
MS m/z(ESI):649.4[M+1]
1H NMR(400MHz、DMSO-d6)δ 8.36(d、1H)、7.88(d、2H)、7.21-7.33(m、9H)、4.61-4.64(m、1H)、4.36-4.47(m、1H)、4.02-4.15(m、2H)、3.60-3.70(m、3H)、3.45-3.59(m、5H)、3.35-3.44(m、3H)、2.90-3.25(m、9H)、1.55-1.80(m、6H)、1.30-1.45(m、4H)、0.98(d、3H)、0.92(d、3H)。
(R)-N-((R)-6-アミノ-1-モルホリノ-1-オキソヘキサン-2-イル)-2-((R)-2-(2-((2,3-ジヒドロ-1H-インデン-2-イル)アミノ)アセトアミド)-3-フェニルプロパンアミド)-4-メチルペンタンアミド 10
10j(5mg、0.0057mmol)を2mLのジクロロメタンおよびメタノール(V/V=10:1)の混合溶媒に溶解し、その後飽和炭酸ナトリウムを滴下添加してpHを約7に調整した。反応溶液を室温で30分間撹拌し、静置して分離させた。有機相を回収し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、表題化合物10(4mg、収率:100%)を得た。
MS m/z(ESI):649.4[M+1]
本発明は以下の試験例を参照してさらに説明されるが、この試験例は本発明の範囲を限定するものと考えられるべきではない。
1.試験目的
本試験の目的は、ヒトKOR(h-KOR)受容体に対する本発明の化合物のアゴニスト効果を決定することおよびEC50の値により化合物のインビトロ活性を評価することである。
2.1 試験目的
本発明の化合物はh-KOR受容体を活性し、それにより細胞内cAMP量を減少させ得る。第二メッセンジャーcAMPは核に移行し、DNAのCREと結合し、それにより下流ルシフェラーゼの発現を開始する。ルシフェラーゼはその基質と反応して蛍光を放出し、測定された蛍光シグナルは化合物のアゴニスト活性を反映する。
アゴナイズh-KOR対する試験例化合物の効果および下流cAMP量への影響を、以下の方法により試験した。
1)HEK293/KOR/CREモノクローナル細胞株の取得
KOR/pcDNA3.1(+)およびCRE/pGL4.29をHEK293細胞に転移させた。G418およびハイグロマイシンを培地に添加し、HEK293/KOR/CREモノクローナル細胞株を96ウェル細胞培養プレートでスクリーニングした。
HEK293/h-KOR/CREモノクローナル細胞をDMEM/高グルコース培地(10%FBS、1mg/ml G418、200μg/ml ハイグロマイシン、均一に混合)で培養し、3日ごとに継代した。試験日に、新たな細胞培地を用いて細胞懸濁液を調製し、20,000細胞/ウェルと共に96ウェルプレート(BD、#356692)に添加し、5%CO2、37℃でインキュベートした。2日目に、化合物を純粋なDMSOに20mMの濃度に溶解し、DMSOを用いて200nMの初期濃度に製剤し、3倍濃度勾配で8濃度まで希釈した。90μlのDMSOをブランクおよび対照ウェルに添加した。化合物溶液を、10μMフォルスコリンを含むDMEM/高グルコース(SH30243.01B、Hyclone)培地を用いて希釈した。初日に播種した細胞培養プレートを取り出し、10μlの希釈した薬剤または対照(0.5%DMSO)を各ウェルに添加した。プレートを穏やかに振盪させ、37℃で4時間放置した。96ウェル細胞培養プレートで、100μlのルシフェラーゼアッセイ溶液(Promega、#E6110)を各ウェルに添加した。プレートを室温で5分間放置した。Victor 3.0を用いて化学発光値を測定した。化合物の濃度および対応するシグナル値に基づいて、化合物のEC50値を計算した。
本発明の化合物のh-KORをアゴナイズし、かつ下流cAMP量に影響を与える活性を上記試験により決定し、EC50値を表1.1に示す。
試験例2.ラットにおける本発明の実施例2、5および8の化合物の薬物動態アッセイ
1.要約
試験動物としてラットを使用した。実施例2、5および8の化合物のラットへの静脈内投与後、種々の時点での血漿における薬物濃度をLC/MS/MSにより決定した。SDラットにおいて本発明の化合物の薬物動態を試験し、評価した。
2.1 試験化合物
実施例2、5および8の化合物
12匹のSprague-Dawley(SD)ラット(半数が雄性であり、半数が雌性)を、ライセンス番号:SCXK(上海)2008-0016を有するSINO-BRITSH SIPPR/BK LAB. ANIMAL LTD., COから購入した。
適切な量の試験化合物を計量し、5%DMSO+5%PEG400+90%生理食塩水を順次添加した。
一晩絶食後、12匹のSDラット(半数が雄性であり、半数が雌性)、を3つの群に均等に分け、5mL/kgの投与体積の用量で静脈内投与した。
静脈群において、投与前および投与0.25時間後、0.5時間後、1.0時間後、2.0時間後、4.0時間後、8.0時間後、11.0時間後および24.0時間後に眼窩静脈叢から血液(0.2mL)を採取した。サンプルを、ヘパリンを添加したチューブで保存し、3,500rpmで10分間遠心分離し、血液血漿を分離させた。血漿サンプルを-20℃で保存した。
静脈内投与後のSDラット血漿における試験化合物の濃度をLC-MS/MSにより決定した。
1.要約
ビーグル犬を試験動物として使用した。実施例5の化合物のビーグル犬への静脈内投与後、種々の時点での血漿における薬物濃度をLC/MS/MSにより決定した。ビーグル犬における化合物の薬物動態を試験し、評価した。
2.1 試験化合物
実施例5の化合物
2.2 試験動物
1つの群で3匹の雄性ビーグル犬を、Medicilon Pharmaceutical Technology Co.,Ltd. (上海)から購入した
適切な量の試験化合物を計量し、100%生理食塩水を添加した。
一晩絶食後、1つの群の3匹の雄性ビーグル犬に、2mL/kgの投与体積の用量で静脈内投与した。
静脈群において、投与前および投与5分後、15分後、0.5時間後、1.0時間後、2.0時間後、4.0時間後、8.0時間後、12.0時間後および24.0時間後に頸静脈から血液(1mL)を採取した。サンプルを、ヘパリンを添加したチューブで保存し、3,500rpmで10分間遠心分離し、血液血漿を分離させた。血漿サンプルを-80℃で保存した。
静脈内投与後のビーグル犬血漿における試験化合物の濃度をLC-MS/MSにより決定した。
1.試験目的
ラットにおける炎症性疼痛に対するKORアゴニストの治療効果を評価するために、ラットにおけるカラギーナン炎症性疼痛モデルを確立した。
2.1.試験動物および飼育条件
雄性WistarラットをShanghai Slac Laboratory Animal Co., Ltd. (中国、上海、証明書番号2015000513408、ライセンス番号SCXK(上海) 2012-0002)から購入した。ラットは150~180gであり、および5匹/ケージで、12/12時間の明/暗サイクル調整、23±1℃の一定温度、湿度50~60%、食料および水の自由摂取の条件で飼育した。購入後、試験開始前に、動物を7日間本条件に順応させた。
実施例5の化合物;
λ-カラギーナン、バッチ番号BCBP8978V、sigmaから購入。
0.9%塩化ナトリウム溶液(500mL、4.5g)
1%λ-カラギーナンを生理食塩水に入れて、一晩撹拌し、ゼリー状の懸濁液を形成させた。
基準に基づいて化合物用量を計算した。
文献1(ナカオ カズナリら)の方法により、試験方法を変更した。炎症性疼痛試験の前に、ラットを体重に応じて以下の群:ブランク対照群、モデル群、実施例5-0.1mg/kg群および実施例5-0.3mg/kgに無作為に分類した。各群に8匹のマウスが存在した。1%カラギーナン(100μl)を皮下注射したWistarラットの足蹠に炎症性疼痛モデルを設置した。4時間後、機械的な疼痛閾値を評価するために、ラットを足底圧痛試験に供した。薬物の単回尾静脈投与(1mL/kg)を検出前に30分間実施し、対照群およびモデル群は対応する溶媒を与えた。
注記:文献1、CJ-023,423, a Novel, Potent and Selective Prostaglandin KOR Receptor Antagonist with Anti-hyperalgesic Properties[J]. The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 2007, 322(2):686-694.
Electronic Von Frey:UGO BASILE、型式38450。
試験データを平均±標準偏差(S.D.)として表した。エクセルソフトウェアt検定を使用して統計処理を行った。モデル群と対照群の間のデータを解析し、顕著な統計的有意差があるかどうかを比較した*P<0.05はモデル群と対照群の間に顕著な差異があることを示し、**P<0.01はモデル群と対照群の間に極めて顕著な差異があることを示し、#P<0.05はモデル群と投与群の間に顕著な差異があることを示し、##P<0.01はモデル群と投与群の間に極めて顕著な差異があることを示す
ラットにおける試験結果は、ブランク対照群における感受性の閾値は約20gであり、モデル群における圧痛の閾値は7.6gであることを示した。ブランク対照群と比較して、モデル群における圧痛の閾値は顕著に減少した(P<0.01)。モデル群と比較して、全ての薬物は炎症性ラットの圧痛に対する閾値を顕著に増大させ得る(P<0.01)。実施例5-0.1mg/kgおよび実施例5-0.3mg/kgの圧痛に対する閾値は、それぞれ13.7gおよび23.2gであった。この増大はそれぞれ79.5%および204.5%であり、顕著な用量依存性を有した(図1を参照)。
λ-カラギーナンは、水生植物から抽出されるコロイド状物質であり、アレルギー性刺激効果を有する。カラギーナン自体は炎症を誘発し、疼痛を引き起こし得る。試験において、カラギーナン炎症性疼痛のモデルを確立し、ラットにおけるKORアゴニスト投与後の圧痛に対する閾値変化を観察し、亜急性炎症性疼痛およびその強度に対する薬物の鎮痛効果を評価した。試験では、感受性に対するラットの応答を測定するために電気触覚測定機器を使用した。Ugo Basileオリジナルデザインを使用して電気触覚測定機器(e-VF)を設計し、ラットおよびマウスアレルギーおよび異痛を評価した。機器は自動的に動物の刺激時間および刺激強度を記録する。独特のプリズム設計により、試験中の試験動物の足底領域を観察することが容易になる。検出の間、機器は、試験動物が試験する足を引っ込めるのを感知することができ、またはそれは足を踏み変えることによって判断することができる。局所疼痛および神経障害性疼痛の測定については、より集約的な位置調整がより適切である。
試験化合物はラットにおける炎症性疼痛を用量依存的に改善することができた。
Claims (20)
- 式(I):
Mは無機酸または有機酸であり;
GはO、および-CR5R6から成る群から選択され;
R2は6~10員アリールC1~C6アルキル、3~6員シクロアルキルC1~C6アルキルおよび3~6員シクロアルキルから成る群から選択され、ここで6~10員アリールC1~C6アルキル、3~6員シクロアルキルC1~C6アルキルおよび3~6員シクロアルキルはそれぞれ、C1~C6アルキル、3~6員シクロアルキルおよび6~10員アリールから成る群から選択される1以上の基により、場合により置換されていてよく;
R3は水素、C1~C6アルキル、C1~C6ハロアルキルおよび3~6員シクロアルキルから成る群から選択され;
R5およびR6はそれぞれ、独立して、水素、C1~C6アルキル、C1~C6アルコキシ、C1~C6ヒドロキシアルキル、ヒドロキシ、-C(O)OR7、-NR8R9および-NHC(O)NR8R9から成る群から選択され;
R7は水素およびC1~C6アルキルから成る群から選択され;
R8およびR9はそれぞれ、独立して、水素およびC1~C6アルキルから成る群から選択され;そして
zは0または1である〕
の化合物またはその互変異性体、メソ体、もしくはラセミ体、またはその薬学的に許容される塩。 - GがCR5R6であり、R5およびR6が請求項4で定義されるとおりである、請求項4に記載の化合物。
- Mが有機酸である、請求項1に記載の化合物。
- Mがトリフルオロ酢酸である、請求項1に記載の化合物。
- Raがt-ブトキシカルボニル、9-フルオレニルメトキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、トリクロロエトキシカルボニル、トリメチルシリルオキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、p-メチルベンゼンスルホニル、p-ニトロベンゼンスルホニルおよびtert-ブチルから成る群から選択される、請求項11に記載の化合物。
- 治療有効量の請求項1~10のいずれか一項に記載の化合物および1以上の薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤を含む、医薬組成物。
- κオピオイド受容体アゴニスト介在性および関連性疾患を予防および/または処置するための医薬の製造における、請求項1~10のいずれか一項に記載の化合物、または請求項14に記載の医薬組成物の使用。
- κオピオイド受容体アゴニスト介在性および関連性疾患が疼痛、炎症、そう痒、浮腫、低ナトリウム血症、低カリウム血症、腸閉塞、咳嗽および緑内障から成る群から選択される、請求項15に記載の使用。
- κオピオイド受容体アゴニスト介在性および関連性疾患が疼痛である、請求項15または16に記載の使用。
- 疼痛および疼痛に関連する疾患を予防および/または処置するための医薬の製造における、請求項1~10のいずれか一項に記載の化合物、または請求項14に記載の医薬組成物の使用。
- 疼痛が神経障害性疼痛、体幹痛、内臓痛、皮膚痛、関節炎痛、腎臓結石痛、子宮痙攣、月経困難症、子宮内膜症、消化不良、術後痛、医療処置後の疼痛、眼痛、耳炎痛、劇症癌痛およびGI障害に関連する疼痛から成る群から選択される、請求項16~18のいずれか一項に記載の使用。
- アゴナイズκオピオイド受容体に対する医薬の製造における、請求項1~10のいずれか一項に記載の化合物、または請求項14に記載の医薬組成物の使用。
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