JP7103887B2 - 快感情向上剤の評価又は探索方法 - Google Patents
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Description
したがって、化粧品開発には、保湿等の機能的価値だけでなく、心地良さや幸福感・満足感といった快感情を喚起する情緒的価値が求められ、斯かる価値を付与できる素材の開発が進められている。
1)以下の工程(A)~(D)を含む、触覚刺激によって喚起される快感情向上剤の評価又は探索方法。
(A)試験物質の存在下、動物に触覚刺激を付与する工程
(B)前記刺激付与直後から20分間の間に、当該動物から生体試料を採取する工程
(C)前記採取された生体試料中のオキシトシン量を測定する工程
(D)前記オキシトシン量を基準値と比較し、オキシトシン量を増加させる試験物質を、前記触覚刺激によって喚起される快感情向上剤として評価又は選択する工程
2)以下の工程(A’)~(D’)を含む、触覚刺激によって喚起される快感情の評価方法。
(A’)動物に触覚刺激を付与する工程
(B’)前記刺激付与直後から20分間の間に、当該動物から生体試料を採取する工程
(C’)前記採取された生体試料中のオキシトシン量を測定する工程
(D’)前記オキシトシン量を基準値と比較し、前記触覚刺激によって喚起される快感情の程度を評価する工程
快感情を喚起するような触覚刺激としては、C触覚線維を興奮させる刺激が挙げられ、例えば、スキンケアのための化粧品(乳液やクリーム等)を肌に馴染ませる行為、ボディケアのためのクリームやローション等を肌に馴染ませる行為、顔肌を両手で包み込むようにして軽く押さえる行為等が挙げられる。
尚、閉眼状態で顔肌を両手で包み込むようにして30秒間軽く押さえる行為により幸福・満足感が得られること(前記非特許文献2)が知られている。
この結果は、触覚刺激付与後の所定期間内に採取した生体試料中のオキシトシン量に基づいて、当該触覚刺激によって喚起される快感情の程度の評価や、当該快感情を向上する素材の評価又は探索が可能であることを示す。
(A)試験物質の存在下、動物に触覚刺激を付与する工程
(B)前記刺激付与直後から20分間の間に、当該動物から生体試料を採取する工程
(C)前記採取された生体試料中のオキシトシン量を測定する工程
(D)前記オキシトシン量を基準値と比較し、オキシトシン量を増加させる試験物質を、前記触覚刺激によって喚起される快感情向上剤として評価又は選択する工程
また、試験物質の投与は、触覚刺激を付与する前又は同時に行うのが好ましい。
オキシトシン量の測定は、液体クロマトグラフ(HPLC)、液体クロマトグラフ質量分析計(LC-MS)、液体クロマトグラフタンデム型質量分析計(LC-MS/MS)、ガスクロマトグラフ質量分析計(GC-MS)、あるいは酵素免疫測定法(ELISA)などの免疫学的手法により可能である。これらの測定条件は公知であり、常法に従い容易に定量できる。
前記ELISA法は、例えばOxytocin ELISA kit(Enzo)を使用して実施することができる。
すなわち、オキシトシン量(例えば生体試料中のタンパク質当たりのオキシトシン量)を基準値と比較することにより、オキシトシン量を増加させる試験物質が同定される。基準値としては、異なる濃度の試験物質を投与した(より低濃度の試験物質投与群、プラセボ投与群等)場合に測定されるオキシトシン量や、試験物質投与前に測定されるオキシトシン量の他、触覚刺激を受けていない個体における所定のオキシトシン量等が挙げられる。
具体的には、より高濃度の試験物質投与群とより低濃度の試験物質投与群との間;試験物質投与群とプラセボ投与群との間;又は試験物質投与前後で、触覚刺激前又は触覚刺激後の定常状態で測定されたオキシトシン量と触覚刺激後のオキシトシン量を比較し、試験物質の投与により、若しくはより高濃度の試験物質の投与によりオキシトシン量が上昇する場合にその増加量や増加率に基づいて、又は所定のオキシトシン量を超える場合にその値に基づいて当該試験物質を、当該オキシトシン量を増加させる物質として同定することができる。
例えば、試験物質投与群におけるオキシトシン量が、対照群と比較して50%以上、好ましくは80%以上に増加していれば、当該試験物質を、オキシトシン量を増加させる物質として同定することができる。また、試験物質投与群におけるオキシトシン量が、所定のオキシトシン量(例えば、単位タンパク量当たり5pg)を超える場合に、当該試験物質を、オキシトシン量を増加させる物質として同定することができる。
そして、同定されたオキシトシン量を増加させる試験物質は、当該触覚刺激によって喚起される快感情を向上させる、快感情向上剤として評価又は選択することができる。
(A’)動物に触覚刺激を付与する工程
(B’)前記刺激付与直後から20分間の間に、当該動物から生体試料を採取する工程
(C’)前記採取された生体試料中のオキシトシン量を測定する工程
(D’)前記オキシトシン量を基準値と比較し、前記触覚刺激によって喚起される快感情の程度を評価する工程
尚、快感情の程度とは、快感情の喚起度合い、強さを意味する。
また、例えば、全く良くない~非常に良い、の快感情(気持ち良さ)の程度の判定指標に関し、それらとオキシトシン量を関係づける適当な評価基準を作成し、それに基づいて被験者のオキシトシン量から被験者の快感情の程度を判定することもできる。
<1>以下の工程(A)~(D)を含む、触覚刺激によって喚起される快感情向上剤の評価又は探索方法。
(A)試験物質の存在下、動物に触覚刺激を付与する工程
(B)前記刺激付与直後から20分間の間に、当該動物から生体試料を採取する工程
(C)前記採取された生体試料中のオキシトシン量を測定する工程
(D)前記オキシトシン量を基準値と比較し、オキシトシン量を増加させる試験物質を、前記触覚刺激によって喚起される快感情向上剤として評価又は選択する工程
<2>以下の工程(A)~(D)を含む、触覚刺激によって喚起される快感情向上剤の評価又は探索方法。
(A)試験物質の存在下、動物に触覚刺激を付与する工程
(B)前記触覚刺激前及び、同刺激付与直後から20分間の間に、当該動物から生体試料を採取する工程
(C)前記採取された生体試料中のオキシトシン量を測定する工程
(D)オキシトシン量を増加させる試験物質を、前記触覚刺激によって喚起される快感情向上剤として評価又は選択する工程
<3>以下の工程(A’)~(D’)を含む、触覚刺激によって喚起される快感情の評価方法。
(A’)動物に触覚刺激を付与する工程
(B’)前記刺激付与直後から20分間の間に、当該動物から生体試料を採取する工程
(C’)前記採取された生体試料中のオキシトシン量を測定する工程
(D’)前記オキシトシン量を基準値と比較し、前記触覚刺激によって喚起される快感情の程度を評価する工程
<4>以下の工程(A’)~(D’)を含む、触覚刺激によって喚起される快感情の評価方法。
(A’)動物に触覚刺激を付与する工程
(B’)前記触覚刺激前及び、同刺激付与直後から20分間の間に、当該動物から生体試料を採取する工程
(C’)前記採取された生体試料中のオキシトシン量を測定する工程
(D’)オキシトシン量の変化率に基づいて、前記触覚刺激によって喚起される快感情の程度を評価する工程
<5>刺激直後に行われる試料の採取が、刺激直後から好ましくは15分間、より好ましくは10分間の間に行われる、<1>~<4>のいずれかの方法。
<6>生体試料が唾液又は血液、好ましくは唾液である、<1>~<5>のいずれかの方法。
<7>触覚刺激が、皮膚外用剤を肌に馴染ませる行為による刺激である、<1>~<6>のいずれかの方法。
(1)試験参加者
20-40代の健常女性8名を対象に実施した。
洗浄料を用いて、全顔を洗浄して頂いた。室温23~24℃、湿度約60%の環境下で15分間の馴化を行った後に、閉眼状態で顔肌を両手で包み込むようにして30秒間軽く押さえた後、顔から手を離して開眼状態で30秒間安静にする試行を、全5回繰り返し行った。
触覚刺激前と直後に、快感情(気持ちの良さ)について、10cmのVisual analog scale(VAS; 一定の長さの直線上に感覚量の程度を表す方法。ここでは,直線の左端を「全く良くない」,右端を「非常に良い」とした)により評価し,触覚刺激の前後で評価値の差分を算出した。
触覚刺激前と直後、30分後に、口腔内を水で漱口後、全唾液を遠沈管に10分間吐出して頂いた。唾液は直ちにドライアイスにて凍結し、-80℃にて保管した。
全唾液サンプルは遠心分離(15,000rpm、10min)後の上清を使用し、測定項目に合わせて、下記に示すよう抽出/濃縮した。Bio-rad Protein assay(BIO-RAD)で、ウシ血清アルブミンで作成した検量線を基に、抽出・濃縮前の唾液中のタンパク濃度(mg/mL)を定量し、単位タンパク量当たりの各ホルモン量を算出し、刺激前の量を100とした変化率を算出した。
全唾液の遠心分離後の上清(1.5~3.0mL)と等量の0.1%(v/v)トリフルオロ酢酸(TFA)を混和した。遠心分離(3,000rpm、30min)後の上清を、Sep-pak C18カラム(200mg、3cc、Waters)に供し、下記のように抽出を行った。C18カラムに1mLの100%アセトニトリル(ACN)、次いで10mLの0.1%TFA溶液(v/v)を通し、その後で0.1%TFA溶液(v/v)と混和した全唾液(3.0~6.0mL)を通し、10mLの0.1%TFA溶液(v/v)で洗浄した後、3mLの(95%ACN/5%(0.1%TFA溶液))(v/v)で溶出させた。溶出した溶液のACNをN2ガスで揮発させ、残った水溶液を凍結乾燥に供し、凍結乾燥品をOxytocin ELISA kit(Enzo)中の250μlのAssay Bufferに溶解して、上記キットを用いて定量した。
遠心分離後の全唾液中のコルチゾールを、Cortisol Salivary Immunoassay Kit(Salimetrics)で定量した。
触覚刺激前と直後の快感情の評価値の差分と、触覚刺激直後に採取した唾液中のオキシトシン量の変化率(刺激後(Post)/刺激前(Pre))の関連性を解析した結果、図1に示すように有意な正相関が確認された(r=0.73,p<0.05,Pearsonの相関係数)。しかしながら、触覚刺激30分後に採取した唾液中のオキシトシン量の刺激前からの変化率とは、有意な相関は確認されなかった(r=-0.29,p=0.49,Pearsonの相関係数)。一方、快感情の評価値の差分と唾液中コルチゾール量とは何れの採取時間でも関連性は確認されなかった(刺激直後;r=0.43,p=0.29,刺激30分後;r=0.34,p=0.41,Pearsonの相関係数)。
このことから、触覚に起因する快感情の喚起度合いを客観的、且つ定量的に評価するには、触覚刺激付与直後から10分後までの唾液中のオキシトシン量の、触覚刺激前の値を基準とした変化率(Post/Pre)で評価することが適していることが明らかになった。
Claims (3)
- 以下の工程(A’)~(D’)を含む、触覚刺激によって喚起される快感情の評価方法。
(A’)動物に触覚刺激を付与する工程
(B’)前記刺激付与直後から20分間の間に、当該動物から唾液を採取する工程
(C’)前記採取された唾液中のオキシトシン量を測定する工程
(D’)前記オキシトシン量を基準値と比較し、前記触覚刺激によって喚起される快感情の程度を評価する工程 - 刺激直後に行われる唾液の採取が、刺激直後から10分間の間に行われる、請求項1記載の方法。
- 触覚刺激が、皮膚外用剤を肌に馴染ませる行為による刺激である、請求項1又は2記載の方法。
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手で触れたときにやわらかさ・心地よさを実感するほど唾液中のオキシトシン量が増えることを確認,2020年10月13日,https://www.kao.com/jp/corporate/news/rd/2020/20201013-001/ |
手の平で物に触れる行動と唾液中のオキシトシン量との関連性を確認,花王株式会社 ニュースリリース [オンライン],2019年01月29日,https://www.kao.com/jp/corporate/news/2019/20190129-001/,[検索日2019.08.08],インターネット |
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