JP7075298B2 - External skin preparation - Google Patents
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Description
本発明は、ノグルミ抽出物と特定の成分を併用して含有する皮膚外用剤に関する。 The present invention relates to a skin external preparation containing a nogurumi extract in combination with a specific component.
加水分解ノグルミ抽出物を含有する皮膚外用剤がコラーゲン合成促進作用を有することが知られている（特許文献１特開２０１２－１３６４５２号公報）。
イワベンケイ抽出物を皮膚外用剤に配合することにより、コラーゲンの産生を促進させることが知られている（特許文献２特開２００３－２６５３２号公報）
ツボクサ抽出物をメイラード反応阻害剤として配合する皮膚外用剤が知られている（特許文献３特開２００４－１８９６６３号公報）。
加水分解大豆抽出物を水中油型乳化化粧料に配合することが知られている（特許文献４特開平２－９０９３６号公報）。
ホホバ葉抽出物を含有する皮膚外用剤が活性酸素抑制作用を発揮することが知られている（特許文献５特開２０００－１５４１３５号公報）
ビルベリー抽出物を含有する皮膚外用剤が紫外線照射による皮膚の障害を抑制又は改善することが知られている（特許文献６特開２００５－３０６８５０号公報）。
セイヨウナシ抽出物を含有する皮膚外用剤が美白作用を有することが知られている。（特許文献７特開昭６２－１０００６号公報）。
また、植物抽出物を併用して皮膚外用剤に配合することも数多く検討されている。しかしながら、植物抽出物は単に併用すれば効果が相乗的に向上するものではなく、相加的に効果が向上するもの、効果を相殺するものなど、その併用による効果は、予測不可能な効果であり、より少量で、より高い効果の得られる植物抽出物の併用に関するニーズは非常に高い。
It is known that a skin external preparation containing a hydrolyzed nogurumi extract has a collagen synthesis promoting action (Patent Document 1, Japanese Patent Application Laid-Open No. 2012-136452).
It is known that the production of collagen is promoted by blending the Rhodiola rosea extract into a skin external preparation (Patent Document 2, Japanese Patent Application Laid-Open No. 2003-26532).
A skin external preparation containing a Centella asiatica extract as a Maillard reaction inhibitor is known (Patent Document 3, Japanese Patent Application Laid-Open No. 2004-189663).
It is known that a hydrolyzed soybean extract is blended in an oil-in-water emulsified cosmetic (Patent Document 4, JP-A-2-90936).
It is known that a skin external preparation containing a jojoba leaf extract exerts an active oxygen suppressing effect (Patent Document 5, Japanese Patent Application Laid-Open No. 2000-154135).
It is known that an external skin preparation containing a bilberry extract suppresses or ameliorates skin damage caused by ultraviolet irradiation (Patent Document 6, Japanese Patent Application Laid-Open No. 2005-306850).
It is known that an external skin preparation containing a pear extract has a whitening effect. (Patent Document 7, Japanese Patent Application Laid-Open No. 62-10006).
In addition, many studies have been conducted in which a plant extract is used in combination with an external skin preparation. However, the effects of plant extracts are not synergistically improved when used in combination, but the effects of the combined use are unpredictable, such as those that improve the effect additively and those that offset the effect. There is a great need for a combination of plant extracts that are smaller and more effective.
ノグルミ抽出物と、特定の成分を併用することにより、相乗的に高いシワの予防、改善効果を発揮する皮膚外用剤を提供することを課題とする。 It is an object of the present invention to provide a skin external preparation that synergistically exerts a high wrinkle prevention and improvement effect by using a nogurumi extract in combination with a specific component.
イワベンケイ抽出物、ツボクサ抽出物、ダイズ抽出物、ホホバ抽出物、ビルベリー抽出物、セイヨウナシ抽出物及びレチノール誘導体から選択される１種又は２種以上と、ノグルミ抽出物を含有する皮膚外用剤。 A skin external preparation containing one or more selected from Iwabenkei extract, Tsubokusa extract, Soybean extract, Johoba extract, Bilberry extract, Pear extract and retinol derivative, and Nogurumi extract.
本発明の皮膚外用剤は、ノグルミ抽出物と特定の成分を配合することにより、相乗的に高いシワの予防、改善効果を発揮する。 The external skin preparation of the present invention synergistically exerts a high wrinkle prevention and improvement effect by blending a nogurumi extract and a specific component.
以下本発明を実施するための形態を説明する。 Hereinafter, embodiments for carrying out the present invention will be described.
本発明の皮膚外用剤は、イワベンケイ抽出物、ツボクサ抽出物、ダイズ抽出物、ホホバ抽出物、ビルベリー抽出物及びセイヨウナシ抽出物から選択される１種又は２種以上の植物抽出物と、ノグルミ抽出物を含有する。 The skin external preparation of the present invention comprises one or more plant extracts selected from Iwabenkei extract, Tsubokusa extract, soybean extract, jojoba extract, bilberry extract and pear extract, and nogurumi extract. Contains things.
本発明で使用するノグルミの抽出物を得る際の抽出部位としては特に限定されないが、果実を用いることが好ましい。 The extraction site for obtaining the extract of Nogurumi used in the present invention is not particularly limited, but it is preferable to use fruits.
抽出物を調製する際には、生の植物をそのまま、若しくは乾燥させて用いる。 When preparing the extract, raw plants are used as they are or after being dried.
抽出溶媒としては、メタノール，エタノール，プロパノール，イソプロパノール等の低級アルコール、1,3-ブチレングリコール，プロピレングリコール，ジプロピレングリコール，グリセリン等の多価アルコール、エチルエーテル，プロピルエーテル等のエーテル類、酢酸エチル，酢酸ブチル等のエステル類、アセトン，エチルメチルケトン等のケトン類などの極性有機溶媒を用いることができ、これらより１種又は２種以上を選択して用いる。また、生理食塩水，リン酸緩衝液，リン酸緩衝生理食塩水等を用いてもよい。 Examples of the extraction solvent include lower alcohols such as methanol, ethanol, propanol and isopropanol, polyhydric alcohols such as 1,3-butylene glycol, propylene glycol, dipropylene glycol and glycerin, ethers such as ethyl ether and propyl ether, and ethyl acetate. , Esters such as butyl acetate, and polar organic solvents such as ketones such as acetone and ethyl methyl ketone can be used, and one or more of these can be selected and used. Further, physiological saline, phosphate buffer, phosphate buffered saline or the like may be used.
上記溶媒による抽出物は、そのままでも用いることができるが、濃縮，乾固したものを水や極性溶媒に再度溶解したり、或いはそれらの皮膚生理機能向上作用を損なわない範囲で脱色，脱臭，脱塩等の精製処理を行ったり、カラムクロマトグラフィーによる分画処理を行った後に用いてもよい。また、抽出物を酸、アルカリ、酵素などを用いて加水分解したものを用いてもよい。また保存のため、精製処理の後凍結乾燥し、用時に溶媒に溶解して用いることもできる。また、リポソーム等のベシクルやマイクロカプセル等に内包させて用いることもできる。 The extract with the above solvent can be used as it is, but it is decolorized, deodorized, and deodorized as long as the concentrated and dried product is re-dissolved in water or a polar solvent, or their skin physiological function improving effect is not impaired. It may be used after purifying a salt or the like or performing a fractionation treatment by column chromatography. Further, an extract obtained by hydrolyzing the extract with an acid, an alkali, an enzyme or the like may be used. For storage, it can also be purified, freeze-dried, and dissolved in a solvent before use. It can also be used by encapsulating it in a vesicle such as a liposome or a microcapsule.
本発明においてはノグルミの果実を水、低級アルコール、多価アルコールの１種または２種以上を抽出溶媒として用いて得られる抽出物を、グルコシダーゼ活性を有する酵素を用いて加水分解して得られる、加水分解ノグルミ抽出物を用いることが好ましい。かかる抽出物としては、市販の抽出物を用いることができ、例えばSK Ｂｉｏｌａｎｄ社製ＢＩＯ-ＰＳE(ＶＩ)が例示される。 In the present invention, an extract obtained by using one or more of water, a lower alcohol, and a polyhydric alcohol as an extraction solvent for the fruit of Nogurumi is hydrolyzed with an enzyme having glucosidase activity. It is preferable to use a hydrolyzed nogurumi extract. As such an extract, a commercially available extract can be used, and examples thereof include BIO-PSE (VI) manufactured by SK Bioland.
本発明で使用するイワベンケイ抽出物は、イワベンケイの根を用いる。抽出方法としては、ノグルミ抽出物を得る際と同様である。 The Rhodiola rosea extract used in the present invention uses the root of Rhodiola rosea. The extraction method is the same as when obtaining the Nogurumi extract.
本発明のイワベンケイ抽出物は、５０％エタノール水溶液を抽出溶媒として用いることが好ましい。 The Rhodiola rosea extract of the present invention preferably uses a 50% ethanol aqueous solution as an extraction solvent.
本発明で使用するツボクサの抽出部位は花、花穂、果皮、果実、茎、葉、枝、枝葉、幹、樹皮、根茎、根皮、根、種子又は全草を用いるが、その他、同属種を用いることもできる。抽出方法としては、ノグルミ抽出物を得る際と同様である。本発明においては、ツボクサの葉及び茎を用いたエタノール抽出物を用いることが好ましい。 The extraction site of Tsubokusa used in the present invention uses flowers, spikes, peels, fruits, stems, leaves, branches, branches and leaves, trunks, bark, rhizomes, root bark, roots, seeds or whole plants, but other species of the same genus are used. It can also be used. The extraction method is the same as when obtaining the Nogurumi extract. In the present invention, it is preferable to use an ethanol extract using leaves and stems of Centella asiatica.
本発明で使用する大豆の抽出部位は特に限定されないが、種子を用いることが好ましい。また大豆の品種としては、黒大豆を用いることが好ましい。抽出方法としては、ノグルルミ抽出物を得る際と同様である。本発明においては、乾燥、粉砕した大豆種子を水で抽出、ろ過した溶液をプロテアーゼ処理したものを用いることが好ましい。 The extraction site of soybean used in the present invention is not particularly limited, but it is preferable to use seeds. Further, as the soybean variety, it is preferable to use black soybean. The extraction method is the same as when obtaining the Nogururumi extract. In the present invention, it is preferable to use a solution obtained by extracting dried and crushed soybean seeds with water and filtering them with protease.
本発明で使用するホホバの抽出部位は葉、花、実から選択される１種又は２種以上の部位を用いることが好ましく、さらに好ましくは葉である。抽出溶媒、抽出方法としては、上述のノグルミ抽出物の場合と同様である。好ましい抽出溶媒としてはエタノール水溶液を挙げることができる。 As the extraction site of jojoba used in the present invention, it is preferable to use one or more sites selected from leaves, flowers and fruits, and more preferably leaves. The extraction solvent and extraction method are the same as in the case of the above-mentioned Nogurumi extract. As a preferable extraction solvent, an aqueous ethanol solution can be mentioned.
本発明で使用するビルベリーは、ビルベリー又はその近縁種を用いる。抽出部位は、葉、茎、花、実、根から選択される１種又は２種以上の部位を用いることができ、好ましくは葉を用いる。抽出溶媒、抽出方法としては、上述のノグルミ抽出物の場合と同様である。好ましい抽出溶媒としては１，３－ブチレングリコール水溶液を挙げることができる。 As the bilberry used in the present invention, bilberry or a closely related species thereof is used. As the extraction site, one or more sites selected from leaves, stems, flowers, fruits and roots can be used, and leaves are preferably used. The extraction solvent and extraction method are the same as in the case of the above-mentioned Nogurumi extract. As a preferable extraction solvent, 1,3-butylene glycol aqueous solution can be mentioned.
本発明で使用するセイヨウナシの抽出部位としては特に限定されないが、果汁を用いることが好ましい。抽出溶媒、抽出方法としては、上述のノグルミ抽出物の場合と同様である。本発明においては、セイヨウナシの果汁を乳酸桿菌（Lactobacillus plantarum）を用いて発酵させた後、不溶物をろ過除去したものに、３０質量％となるように１，３－ブチレングリコールを添加したものを用いることが好ましい。 The extraction site of the pear used in the present invention is not particularly limited, but it is preferable to use fruit juice. The extraction solvent and extraction method are the same as in the case of the above-mentioned Nogurumi extract. In the present invention, the fruit juice of pear is fermented with Lactobacillus plantarum, and then the insoluble material is filtered off, and 1,3-butylene glycol is added so as to be 30% by mass. It is preferable to use.
本発明において上記抽出物の配合量はそれぞれ、エキス純分として０．００００１～５質量％が好ましい。 In the present invention, the blending amount of the extract is preferably 0.00001 to 5% by mass as the pure extract content.
本発明で使用するレチノール誘導体は、特に限定されないが、レチノールそのもの、レチノールと脂肪酸とのエステル、レチノールの酸化物、又は当該酸化物のエステル、レチノールの水素添加物等が含まれる。また、レチノイン酸又はそのエステルも包含する。さらに体内で代謝されてレチノールとなるα－カロテン、β－カロテン、γ－カロテン、β－クリプトキサンチン、エキネノンなどのプロビタミンAも包含する。 The retinol derivative used in the present invention is not particularly limited, and includes retinol itself, an ester of retinol and a fatty acid, an oxide of retinol, an ester of the oxide, a hydrogenated additive of retinol, and the like. It also includes retinoic acid or an ester thereof. It also includes provitamin A such as α-carotene, β-carotene, γ-carotene, β-cryptoxanthin, and ekinenone, which are metabolized in the body to become retinol.
レチノールと脂肪酸とのエステルについては、具体例として、酢酸レチノール、プロピオン酸レチノール、酪酸レチノール、オクチル酸レチノールステル、ラウリン酸レチノール、パルミチン酸レチノール、ステアリン酸レチノール、ミリスチン酸レチノール、オレイン酸レチノール、リノレン酸レチノール、リノール酸レチノール等が挙げられる。これらのうち、好ましくはパルミチン酸レチノール、リノール酸レチノール、レチノールである。 Specific examples of the ester of retinol and fatty acid include retinol acetate, retinol propionate, retinol butyrate, retinol octylate, retinol laurate, retinol palmitate, retinol stearate, retinol myristate, retinol oleate, and linolenic acid. Examples thereof include retinol and retinol linoleate. Of these, retinol palmitate, retinol linoleate, and retinol are preferable.
レチノールの酸化物としては、例えば、レチノイン酸（「トレチノイン」とも称する。）、レチナール等が挙げられる。また、レチノールの酸化物のエステルとしては、例えば、レチノイン酸メチル、レチノイン酸エチル、レチノイン酸レチノール、レチノイン酸トコフェロール（トコフェロールは、α、β、γ、δの構造を取り得る）等が挙げられる。これらのうち、レチノイン酸ｄ－δ－トコフェロールを用いることが好ましい。 Examples of the oxide of retinol include retinoic acid (also referred to as "tretinoin"), retinal and the like. Examples of the ester of the oxide of retinol include methyl retinoate, ethyl retinoate, retinol retinoate, tocopherol retinoate (tocopherol can have a structure of α, β, γ, and δ) and the like. Of these, it is preferable to use d-δ-tocopherol retinoate.
レチノールの水素添加物としては、水添レチノールが挙げられる。 Examples of the hydrogenated retinol include hydrogenated retinol.
プロビタミンＡとしては、α－カロテン、β－カロテン、γ－カロテン、β－クリプトキサンチン、エキネノン等が挙げられ、特にα－カロテン、β－カロテンが好ましい。 Examples of provitamin A include α-carotene, β-carotene, γ-carotene, β-cryptoxanthin, echinenone and the like, and α-carotene and β-carotene are particularly preferable.
本発明におけるレチノール誘導体について、その原料、製造方法、精製方法等は特に限定されない。動物等から自ら単離及び精製したものを用いてもよく、或いは市販品を用いてもよい。レチノール誘導体の市販品としては、例えば、理研ビタミン株式会社、ＤＳＭニュートリションジャパン株式会社、小華薬品株式会社、ＢＡＳＦジャパン株式会社、日光ケミカルズ株式会社、Ｗａｃｋｅｒ Ｃｈｅｍｉｅ ＡＧ，東京化成工業株式会社等で製造又は販売されている商品が挙げられる。 The raw material, production method, purification method, etc. of the retinol derivative in the present invention are not particularly limited. Those isolated and purified by themselves from animals and the like may be used, or commercially available products may be used. Commercially available retinol derivatives include, for example, manufactured by RIKEN Vitamin Co., Ltd., DSM Nutrition Japan Co., Ltd., Xiaohua Pharmaceutical Co., Ltd., BASF Japan Co., Ltd., Nikko Chemicals Co., Ltd., Wacker Chemie AG, Tokyo Kasei Kogyo Co., Ltd., etc. Examples are products that are on sale.
本発明の皮膚外用剤におけるレチノール誘導体の含有量は、特に限定されないが、レチノール誘導体の総量として０．０００１～５質量％であり良い好ましくは０．０００１～１質量％である。 The content of the retinol derivative in the external preparation for skin of the present invention is not particularly limited, but the total amount of the retinol derivative is 0.0001 to 5% by mass, preferably 0.0001 to 1% by mass.
本発明の皮膚外用剤は、ノグルミ抽出物と特定の成分を配合することにより、相乗的に高いシワの予防、改善効果を発揮する。 The external skin preparation of the present invention synergistically exerts a high wrinkle prevention and improvement effect by blending a nogurumi extract and a specific component.
ノグルミ抽出物と特定の成分を配合することにより、ＭＭＰ１（matrix metallopeptidase 1）の発現が相乗的に減少し、コラーゲンの分解を抑制することによりシワを改善する効果を発揮する。 By blending the Nogurumi extract and a specific component, the expression of MMP1 (matrix metallopeptidase 1) is synergistically reduced, and the effect of improving wrinkles by suppressing the decomposition of collagen is exhibited.
ノグルミ抽出物と特定の成分を配合することにより、ＨＹＡＬ２（hyaluronoglucosaminidase 2）の発現が相乗的に減少し、ヒアルロン酸の分解を抑制することによりシワを改善する効果を発揮する。 By blending the nogurumi extract and a specific component, the expression of HYAL2 (hyaluronoglucosaminidase 2) is synergistically reduced, and the effect of improving wrinkles is exhibited by suppressing the decomposition of hyaluronic acid.
ノグルミ抽出物と特定の成分を配合することにより、ＭＭＥ（membrane metalloendopeptidase）の発現が相乗的に減少し、エラスチンの分解を抑制することによりシワを改善する効果を発揮する。 By blending the nogurumi extract and a specific component, the expression of MME (membrane metalloendopeptidase) is synergistically reduced, and the effect of improving wrinkles is exhibited by suppressing the decomposition of elastin.
ノグルミ抽出物と特定の成分を配合することにより、ＩＬ１Ｂ（Interleukin 1 Beta）の発現が相乗的に減少し、炎症を抑制することにより、肌荒れの改善及びシワ形成を抑制する効果を発揮する。 By blending the Nogurumi extract and a specific component, the expression of IL1B (Interleukin 1 Beta) is synergistically reduced, and by suppressing inflammation, it exerts an effect of improving rough skin and suppressing wrinkle formation.
本発明の皮膚外用剤は、上述の成分の他に、通常の化粧料、医薬部外品に用いられる任意成分を、本発明の効果を阻害しない程度に配合することができる。具体的には、油剤、界面活性剤、増粘剤、防腐剤、香料、保湿剤、抗酸化剤、抗炎症剤、抗菌剤等を挙げることができる。 In addition to the above-mentioned components, the external skin preparation of the present invention can contain any components used in ordinary cosmetics and quasi-drugs to the extent that the effects of the present invention are not impaired. Specific examples thereof include oil agents, surfactants, thickeners, preservatives, fragrances, moisturizers, antioxidants, anti-inflammatory agents, antibacterial agents and the like.
本発明の皮膚外用剤の剤型は、特に限定されず、水系、油系、乳化型等いずれの剤型でもよい。 The dosage form of the external skin preparation of the present invention is not particularly limited, and may be any of water-based, oil-based, emulsified and the like.
本発明の皮膚外用剤は定法により調製することができる。 The external preparation for skin of the present invention can be prepared by a conventional method.
本発明の皮膚外用剤は、例えば、ローション剤、乳剤、軟膏の剤型で用いることができる。 The external skin preparation of the present invention can be used in, for example, lotions, emulsions, and ointments.
以下、実施例により本発明を具体的に説明するが、これにより本発明の範囲が限定されるものではない。なお、配合量は特に断りのない限り質量％である。 Hereinafter, the present invention will be specifically described with reference to Examples, but this does not limit the scope of the present invention. The blending amount is mass% unless otherwise specified.
まず、実施例等に用いる植物抽出物の調製方法を示す。 First, a method for preparing a plant extract used in Examples and the like will be shown.
［ノグルミ抽出物］
ノグルミ抽出物として、SK Bioland社製ＢＩＯ－ＰＳＥ（ＶＩ）を用いた。
[Nogurumi extract]
BIO-PSE (VI) manufactured by SK Bioland was used as the nogurumi extract.
［イワベンケイ抽出物］
乾燥させたイワベンケイの根を細切した。続いて２０倍量の５０容量％エタノール水溶液に２４時間浸漬した。ろ過後ろ液を採取し、溶媒を留去したエキス末を得た。得られたエキス末を０．５質量％の濃度となるよう５０質量％１，３－ブチレングリコール水溶液に溶解し、イワベンケイ抽出物とした。
[Rhodiola rosea extract]
The roots of dried Rhodiola rosea were chopped. Subsequently, it was immersed in a 20-fold volume of 50% by volume ethanol aqueous solution for 24 hours. The liquid after filtration was collected, and the extract powder from which the solvent was distilled off was obtained. The obtained extract powder was dissolved in a 50% by mass 1,3-butylene glycol aqueous solution so as to have a concentration of 0.5% by mass to obtain a Rhodiola rosea extract.
［ツボクサ抽出物］
乾燥させたツボクサの葉及び茎を細切した。続いて２０倍量の無水エタノールに浸漬し、ろ過後ろ液を採取し、溶媒を留去して得られたエキス末をツボクサ抽出物とした。
[Centella asiatica extract]
Dried Centella asiatica leaves and stems were shredded. Subsequently, the mixture was immersed in 20 times the amount of absolute ethanol, the liquid after filtration was collected, and the solvent was distilled off to obtain the obtained extract powder as a Centella asiatica extract.
［ダイズ抽出物］
乾燥させた黒ダイズの種子を粉砕し、２０倍量の精製水を用いて抽出した、ろ過後ろ液をプロテアーゼで処理し、酵素を失活させた。ろ過後のろ液をダイズ抽出物とした。
[Soybean extract]
Dried black soybean seeds were ground and the back-filter solution extracted with 20 times the amount of purified water was treated with protease to inactivate the enzyme. The filtrate after filtration was used as a soybean extract.
［ホホバ抽出物］
ホホバの葉を乾燥後細切し、１０質量倍量の５０質量％エタノール水溶液に浸漬し、ろ過後ろ液を採取し、溶媒を留去した。得られた抽出物を５０質量％１，３－ブチレングリコール水溶液に溶解後熟成し、再度ろ過したものをホホバ抽出物とした。
[Jojoba extract]
After drying, the jojoba leaves were cut into small pieces, immersed in a 50% by mass ethanol aqueous solution in an amount of 10% by mass, the liquid after filtration was collected, and the solvent was distilled off. The obtained extract was dissolved in a 50% by mass 1,3-butylene glycol aqueous solution, aged, and filtered again to obtain a jojoba extract.
［ビルベリー抽出物］
乾燥させたビルベリーの果実を細切し、５０容量％１，３－ブチレングリコール水溶液に浸漬した。ろ過後ろ液を採取し、ビルベリー抽出物とした。
[Blueberry extract]
The dried blueberry fruits were chopped and immersed in a 50% by volume 1,3-butylene glycol aqueous solution. The liquid after filtration was collected and used as a bilberry extract.
［セイヨウナシ抽出物］
セイヨウナシの果汁を乳酸桿菌（Lactobacillus plantarum）を用いて発酵させた後、不溶物をろ過除去したものに、３０質量％となるように１，３－ブチレングリコールを添加したものをセイヨウナシ抽出物とした。
[Pear extract]
Pear extract is obtained by fermenting pear juice using Lactobacillus plantarum, filtering and removing insoluble matter, and adding 1,3-butylene glycol to a content of 30% by mass. And said.
［関連遺伝子発現促進作用］
ヒト新生児由来皮膚線維芽細胞を５×105個/ウェルとなるように6ウェルプレートに播種し、０．５％のＦＢＳを含有するＤＭＥＭ培地にて一晩培養した。植物抽出物を表２に示す量添加した培地に交換し、３７℃、５％５％ ＣＯ2インキュベーター内で24時間培養した。採取した細胞から、市販のＲＮＡ抽出キット(Ｑｕｉｃｋ Ｇｅｎｅ ＲＮＡ Ｃｕｌｔｕｒｅｄ Ｃｅｌｌ ＨＣ Ｋｉｔ Ｓ)を使用してＲＮＡを抽出し、cDNA合成後に下記のプライマーを使用してサイバーグリーン法によるリアルタイムPCRにより遺伝子発現を確認した。なお内部標準としてＧＡＰＤＨを使用した。プライマー情報を表１に、測定結果を表２～８に示す。測定結果は、植物エキスを添加しなかった場合の遺伝子発現量を１とした場合の相対値で示した。
[Related gene expression promoting action]
Human neonatal skin fibroblasts were seeded in 6-well plates to 5 × 10 5 cells / well and cultured overnight in DMEM medium containing 0.5% FBS. The plant extract was replaced with the medium to which the amounts shown in Table 2 were added, and the cells were cultured at 37 ° C. in a 5% 5% CO 2 incubator for 24 hours. RNA is extracted from the collected cells using a commercially available RNA extraction kit (Quick Gene RNA Cultured Cell HC Kit S), and gene expression is confirmed by real-time PCR by the cyber green method using the following primers after cDNA synthesis. did. GAPDH was used as an internal standard. The primer information is shown in Table 1, and the measurement results are shown in Tables 2 to 8. The measurement results are shown as relative values when the gene expression level when no plant extract is added is 1.
表２～８に示したとおり、ノグルミ抽出物と特定の成分を併用することにより、それぞれの成分を単独で用いた場合と比較して、はるかに低濃度で高い老化関連遺伝子の発現を抑制し、高いシワ改善効果を発揮することが示された。 As shown in Tables 2 to 8, the combined use of the Nogurumi extract and specific components suppresses the expression of high aging-related genes at much lower concentrations than when each component is used alone. It was shown that it exerts a high wrinkle improving effect.
［実施例８～２０］美容液
（１）スクワラン １０．０（質量％）
（２）メチルフェニルポリシロキサン ４．０
（３）水素添加パーム核油 ０．５
（４）水素添加大豆リン脂質 ０．１
（５）モノステアリン酸ポリオキシエチレン
ソルビタン（２０Ｅ．Ｏ．） １．３
（６）モノステアリン酸ソルビタン １．０
（７）グリセリン ４．０
（８）パラオキシ安息香酸メチル ０．１
（９）カルボキシビニルポリマー ０．１５
（１０）精製水 １００とする残部
（１１）アルギニン（１質量％水溶液） ２０．０
（１２）表９、表１０に示す成分、配合量
製法：（１）～（６）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（７）～（１０）の水相成分を８０℃にて加熱溶解する。これに前記油相成分を攪拌しながら加え、ホモジナイザーにより均一に乳化する。冷却後４０℃にて、（１１）～（１２）を順次加え、均一に混合する。
[Examples 8 to 20] Essence (1) Squalene 10.0 (mass%)
(2) Methylphenylpolysiloxane 4.0
(3) Hydrogenated palm kernel oil 0.5
(4) Hydrogenated soybean phospholipid 0.1
(5) Polyoxyethylene monostearate
Sorbitan (20EO) 1.3
(6) Sorbitan monostearate 1.0
(7) Glycerin 4.0
(8) Methyl paraoxybenzoate 0.1
(9) Carboxyvinyl polymer 0.15
(10) The balance of purified water 100 (11) Arginine (1% by mass aqueous solution) 20.0
(12) Ingredients and blending amounts shown in Tables 9 and 10 Production method: The oil phase components of (1) to (6) are heated and dissolved at 80 ° C. On the other hand, the aqueous phase components (7) to (10) are heated and dissolved at 80 ° C. The oil phase component is added thereto with stirring, and the mixture is uniformly emulsified with a homogenizer. After cooling, (11) to (12) are sequentially added at 40 ° C. and mixed uniformly.
実施例８～２０に示した美容液は使用感が良好で、シワ改善効果に優れていた。 The beauty essences shown in Examples 8 to 20 had a good usability and an excellent wrinkle improving effect.
Claims (1)
Priority Applications (1)
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