JP6996680B2 - 細菌菌体の製造方法 - Google Patents
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Description
いずれの分野でも菌体を調製するために細菌の培養を行う必要があるが、コロニー形態に異常を示す変異個体が培養中に出現し、本来の性質を持った個体と比べて優位に増殖することで、培養終了後の菌体においては本来の有用な性質が損なわれてしまっているケースが存在する。
非特許文献2においては、Bacillus subtilis 916株のBacillomycin LとSurfactinの生合成能欠損変異株が、野生型株と異なるコロニー形態を示すことが示されている。Bacillomycin LおよびSurfactinは一部の植物病害に対し防除効果を示すことが知られており、コロニー形態の変異と有用な性質の喪失がリンクしている例と考えられる。
また、非特許文献3においては、Bacillus subtilis G3株の抗菌活性強化のための育種において、親株とコロニー形態が変化した株において、Itulin Aの生産量が増えた例が示されている。
非特許文献4においては、Aneurinibacillus migulanus (旧分類Bacillus brevis)ATCC9999株について、カルチャーコレクション保管株から6タイプのコロニー形態が検出されたこと、およびそれらのGramicidin S生産性が異なることが示されている。
非特許文献5においては、Bacillus subtilis VT30M株およびBacillus licheniformis
VT3株のコロニー形態変異株が、野生型と比べて異なる酵素生産性や抗生物質耐性を示した例が示されている。
したがって、本発明では、細菌の多段階の液体培養工程において、培養後に得られる細
菌におけるコロニー形態に異常を示す変異個体の出現を抑制しつつ、良好な生産性で細菌菌体を製造するための新たな方法を提供することを課題とする。
[1]細菌の多段階の液体培養工程において、最終段よりも前の段で抗生物質を含有する液体培地で細菌を培養し、最終段で抗生物質の濃度を当該前の段よりも低下させて培養する工程を含む、細菌菌体の製造方法。
[2]細菌が芽胞形成細菌である、[1]に記載の方法。
[3]芽胞形成菌がバチルス(Bacillus)属細菌である、[2]に記載の方法。
[4]芽胞形成菌が、バチルス・ズブチリス(Bacillus subtilis)、バチルス・アミロリケファシエンス(Bacillus amyloliquefaciens)、バチルス・プミルス(Bacillus pumilus)、バチルス・シンプレックス(Bacillus simplex)、バチルス レンタス(Bacillus lentus)、バチルス ラテロスポルス(Bacillus laterosporus)、バチルス アルベイ(Bacillus alvei)、バチルス・ポピリエ(Bacillus popilliae)、バチルス・リケニフォルミス(Bacillus licheniformis)、バチルス・ブレビス(Bacillus brevis)、バチルス・ステアロサーモフィラス(Bacillus stearothermophilus)、バチルス・アルカロフィラス(Bacillus alcalophilus)、バチルス・コアグランス(Bacillus coagulans)、バチルス・サーキュランス(Bacillus circulans)、バチルス・サイアメンシス(Bacillus siamensis)、バチルス ロータス(Bacillus lautus)、バチルス クラウジイ(Bacillus clausii)、バチルス・メガテリウム(Bacillus megaterium)、バチルス・チューリンジェンシス(Bacillus thuringiensis)、バチルス・セレウス(Bacillus cereus)、バチルス・ファーマス(Bacillus firmus)、バチルス・ベレゼンシス(Bacillus velezensis)、バチルス・ピチノティ(Bacillus pichinotyi)、バチルス・アシドカルダリウス(Bacillus acidocaldarius)、バチルス・アルカリコラ(Bacillus alkalicola)、バチルス・アゾトフォーマンス(Bacillus azotoformans)、バチルス・アンスラシス(Bacillus anthracis)、バチルス・バディウス(Bacillus badius)、バチルス・バタビエンシス(Bacillus bataviensis)、バチルス・シクロヘプタニカス(Bacillus cycloheptanicus)、バチルス・ アネウリニリティカス(Bacillus aneurinilyticus)、バチルス・ミグラヌス(Bacillus migulanus)、バチルス・アビッサリス(Bacillus abyssalis)、バチルス・アエスツアリイ(Bacillus aestuarii)、バチルス・ポリミグザ(Bacillus polymyxa)およびバチルス・エスピー(Bacillus sp.)からなる群より選択される、[3]に記載の方法。
[5]抗生物質が、ストレプトマイシン、リンコマイシン、エリスロマイシン、リファンピシン、クロラムフェニコール、アクチノマイシン、フシジン酸、リピアマイシン、ピューロマイシン、スペクチノマイシン、テトラサイクリンおよびチオストレプトンからなる群より選択される1種類以上である、[1]~[4]のいずれかに記載の方法。
[6]抗生物質がストレプトマイシンである、[5]に記載の方法。
[7] 前記最終段よりも前の段の液体培地における抗生物質の濃度が0.001ppm~10,000ppmである、[1]~[6]のいずれかに記載の方法。
[8] 前記最終段よりも前の段の液体培地における抗生物質の濃度が1.0~90ppmである、[1]~[6]のいずれかに記載の方法。
[9] 細菌の多段階の液体培養工程において、最終段よりも前の段で抗生物質を含有する液体培地で細菌を培養し、最終段で抗生物質の濃度を当該前の段よりも低下させて培養す
る工程を含む、異常型コロニーを形成する変異個体の出現を低減させた細菌の培養方法。[10] 細菌の多段階の液体培養工程において、最終段よりも前の段で抗生物質を含有する液体培地で細菌を培養し、最終段で抗生物質の濃度を当該前の段よりも低下させて培養する工程を含む、細菌の液体培養中の異常型コロニーを形成する変異個体の出現及び増殖を抑制する方法。
この中では、バチルス属細菌、パエニバチルス属細菌、ジオバチルス属細菌、クロストリジウム属、スポロサルシナ属等の芽胞形成細菌がより好ましい。
ocaldarius)、バチルス・アルカリコラ(Bacillus alkalicola)、バチルス・アゾトフォーマンス(Bacillus azotoformans)、バチルス・アンスラシス(Bacillus anthracis)、バチルス・バディウス(Bacillus badius)、バチルス・バタビエンシス(Bacillus bataviensis)、バチルス・シクロヘプタニカス(Bacillus cycloheptanicus)、バチルス・ アネウリニリティカス(Bacillus aneurinilyticus)、バチルス・ミグラヌス(Bacillus migulanus)、バチルス・アビッサリス(Bacillus abyssalis)、バチルス・アエスツアリイ(Bacillus aestuarii)、バチルス・ポリミグザ(Bacillus polymyxa)、またはバチルス・エスピー(Bacillus sp.)が挙げられる。
また、本発明の方法において培養される細菌は野生型でも変異型でもよいが、後者の場合であっても、抗生物質耐性変異は有しない細菌であることが好ましい。
液体培地は、培養対象の細菌の種類によって適宜選択でき、細菌の培養に適した濃度の、炭素源および窒素源などの培地成分を含んだ一般的な液体培地を使用することができる。
例えば、炭素源としては、糖(でんぷん、グルコース、ラクトース、グリセロール、アラビノース、リボース、キシロース、ガラクトース、フルクトース、マンノース、イノシトール、マンニトール、ソルビトール、グルコサミン、N-アセチルグルコサミン、セロビオース、マルトース、スクロース、トレハロース、キシリトールなど)もしくは糖源原料、アルコール、有機酸、有機酸塩、アルカンまたは他の一般的な炭素源が例示され、窒素源としては、大豆由来成分、酵母由来成分、コーン由来成分、動植物タンパク質およびその分解物、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、酢酸アンモニウム
等のアンモニウム塩、アンモニア、硝酸ナトリウム、硝酸カリウム、グルタミン酸ナトリウム、尿素等が例示される。
炭素源および窒素源以外の培地成分としては、微量金属塩、アミノ酸、ビタミン等が挙げられ、必要に応じて適宜添加することができる。
抗生物質の濃度は、細菌に対する増殖阻害濃度以下であることが好ましく、細菌の種類にもよるが、例えば、1,000ppm以下であることが好ましく、300ppm以下であることがより好ましく、90ppm以下であることがさらに好ましい。一方、抗生物質の濃度の下限は異常型コロニーの出現を抑制できる濃度であればよいが、0.01ppm以上であることが好ましく、0.1ppm以上であることがより好ましく、1ppm以上であることがさらに好ましい。
なお、1段階目は1個の培養容器、2段階目は4個の培養容器、というように後段になるにつれて培養容器の数を増やしてもよい。また1段階は1L、2段階目は10L、というように後段になるにつれて培養容器の容量を増やしてもよい。
多段階培養の培養時間について、例えば、2段階の培養を行う場合、細菌を1段階目の培地に接種して10~40時間、好ましくは20~30時間培養を行い、1段階目の培養で得られた菌体の一部を2段階目の培地に接種し、15~80時間、好ましくは20~50時間培養を行う態様が挙げられ、トータルの培養時間としては好ましくは25~120時間、より好ましくは30~80時間である。
例えば、3段階の培養を行う場合、細菌を1段階目の培地に接種して10~40時間、好ましくは20~30時間培養を行い、1段階目の培養で得られた菌体の一部を2段階目の培地に接種し、5~40時間、好ましくは10~30時間培養を行い、2段階目の培養で得られた菌体の一部を3段階目の培地に接種し、15~80時間、好ましくは20~50時間培養を行う態様が挙げられ、トータルの培養時間としては好ましくは30~160時間、より好ましくは35~110時間である。
例えば、4段階の培養を行う場合、細菌を1段階目の培地に接種して10~40時間、好ましくは20~30時間培養を行い、1段階目の培養で得られた菌体の一部を2段階目の培地に接種し、5~40時間、好ましくは10~30時間培養を行い、2段階目の培養で得られた菌体の一部を3段階目の培地に接種し、5~40時間、好ましくは10~30時間培養を行い、3段階目の培養で得られた菌体の一部を4段階目の培地に接種し、15~80時間、好ましくは20~50時間培養を行う態様が挙げられ、トータルの培養時間としては好ましくは35~200時間、より好ましくは60~140時間である。
例えば、最終段における抗生物質の濃度を、抗生物質を含有させた段階における抗生物質の濃度の1/2以下、1/5以下、1/10以下、1/50以下、または1/100以下とすることができ、最終段における抗生物質の濃度をゼロ(検出限界以下)にしてもよい。
例えば、後述の実施例1のように、培養を3段階で行い、1段階目と2段階目は抗生物質を添加し、3段階目は抗生物質を添加せず、2段階目の培養液を1%植え継ぐことで抗生物質濃度を2段階目の100分の1に低下させるような培養方法とすることもできる。
また、抗生物質の濃度を段階ごとで徐々に減らすこともでき、その場合、最終段における抗生物質の濃度は、最大濃度の1/2以下、1/5以下、1/10以下、1/50以下、または1/100以下とすることができる。
なお、抗生物質を含有する培地を用いて培養する期間はトータルで10時間以上であることが好ましい。
その他の、酸素濃度、pH等の各種条件については、通常の細菌の液体培養に使用される条件であればよいが、例えば、好気条件(例えば、酸素濃度15~50%)で、撹拌しつつ培養する条件が例示される。培地のpHは6.5~8.5が好ましく、7.0~8.0がより好ましい。
異常型コロニーとは、野生型の細菌のコロニー形態とは異なる形態を示すコロニーを意味する。例えば、表3に示すように、正常型コロニーの形態がほぼ円形で、側面がレンズ上で、表面が平滑またはムコイド状であるのに対し、異常型コロニーは、形態が不規則で、側面が扁平で、表面が粗面であるような場合が挙げられる。形態面の異常、側面の異常、表面の異常のうち、1つ以上に該当すれば異常型コロニーということができる。図1は異常型コロニーの形態の一例を示し、丸で囲われているものが異常型コロニーである。
500mL三角フラスコ(バッフル付)を用い、表1に記載の培地成分を含む液体培地をそれぞれ100mLずつ作成し、オートクレーブ滅菌を行った。なおメイラード反応を避けるため、グルコースは別途滅菌の上、無菌的に混合した。
普通寒天培地上に生育させたバチルス・ズブチリスITB105株(NITE BP-01727)のコロニーより1白金耳を取って植菌した後、30℃、150rpmで振とう培養を行った(1段目)。18時間後に、それぞれ1mLを分取して新たな培地に植え継ぎ、同様に振とう培養を行った(2段目)。さらに24時間後に、それぞれ1mLを分取して新たな培地に植え継ぎ、同様に振とう培養を行った(3段目)。3段目の培養液について、30時間後にサンプリングを行った。
した場合には異常型コロニーの出現が見られなかった。また、1段目、2段目、3段目の全てにおいてストレプトマイシンを加えた場合には、異常型コロニーは出現しなかったものの、コロニーの出現数及び正常型コロニーの出現数が低く、試験区番号2~6と比較して、細菌菌体の生産性が低くなった。
Claims (9)
- バチルス(Bacillus)属細菌の多段階の液体培養工程において、最終段よりも前の段で抗生物質を含有する液体培地で細菌を培養し、最終段で抗生物質濃度を当該前の段よりも低下させて培養する工程を含む、バチルス(Bacillus)属細菌菌体の製造方法であって、前記抗生物質が、ストレプトマイシン、リンコマイシン及びクロラムフェニコールからなる群より選択される1種類以上であり、前記最終段よりも前の段の液体培地における抗生物質の濃度が1.0~90ppmであり、最終段における抗生物質の濃度を、抗生物質の最大濃度の1/10以下とする、バチルス(Bacillus)属細菌菌体の製造方法。
- バチルス(Bacillus)属細菌が、バチルス・ズブチリス(Bacillus subtilis)、バチル
ス・アミロリケフ ァシエンス(Bacillus amyloliquefaciens)、バチルス・プミルス(Bacillus pumilus)、バチルス・シンプレックス(Bacillus simplex)、バチルス レンタス(Bacillus lentus)、バチルス ラテロスポルス(Bacillus laterosporus)、バチル
ス アルベイ(Bacillus alvei)、バチルス・ポピリエ(Bacillus popilliae)、バチル
ス・リケニフォルミ ス(Bacillus licheniformis)、バチルス・ブレビス(Bacillus brevis)、バチルス・ステアロサーモフィラス(Bacillus stearothermophilus)、バチル
ス・アルカロフィラ ス(Bacillus alcalophilus)、バチルス・コアグランス(Bacillus
coagulans)、バチ ルス・サーキュランス(Bacillus circulans)、バチルス・サイア
メンシス(Bacillus siamensis)、バチルス ロータス(Bacillus lautus)、バチルス
クラウジイ(Bacillus clausii)、バチルス・メガテリウム(Bacillus megaterium)、
バチルス・チューリンジ ェンシス(Bacillus thuringiensis)、バチルス・セレウス(Bacillus cereus)、バチ ルス・ファーマス(Bacillus firmus)、バチルス・ベレゼンシス(Bacillus velezensis)、バチルス・ピチノティ(Bacillus pichinotyi)、バチルス・アシドカルダリウス(Bacillus acidocaldarius)、バチルス・アルカリコラ(Bacillus alkalicola)、バチル ス・アゾトフォーマンス(Bacillus azotoformans)、バチルス・アンスラシス(Bacillus anthracis)、バチルス・バディウス(Bacillus badius)、
バチルス・バタビエンシス (Bacillus bataviensis)、バチルス・シクロヘプタニカス
(Bacillus cycloheptanicus)、バチルス・アネウリニリティカス(Bacillus aneurinilyticus)、バチルス・ミグ ラヌス(Bacillus migulanus)、バチルス・アビッサリス(Bacillus abyssalis)、バチ ルス・アエスツアリイ(Bacillus aestuarii)、バチルス・ポリミグザ(Bacillus polymyxa)およびバチルス・エスピー(Bacillus sp.)からなる
群より選択されるからなる群より選択される、請求項1に記載の方法。 - バチルス(Bacillus)属細菌が、バチルス・ズブチリス(Bacillus subtilis)である、
請求項1に記載の方法。 - バチルス(Bacillus)属細菌の多段階の液体培養工程において、最終段よりも前の段で抗生物質を含有する液体培地でバチルス(Bacillus)属細菌を培養し、最終段で抗生物質の濃度を当該前の段よりも低下させて培養する工程を含み、前記抗生物質が、ストレプトマイシン、リンコマイシン及びクロラムフェニコールからなる群より選択される1種類以上であり、前記最終段よりも前の段の液体培地における抗生物質の濃度が1.0~90ppmであり、最終段における抗生物質の濃度を、抗生物質の最大濃度の1/10以下とする、異常型コロニーを形成する変異個体の出現を低減させたバチルス(Bacillus)属細菌の培養方法。
- バチルス(Bacillus)属細菌が、バチルス・ズブチリス(Bacillus subtilis)、バチル
ス・アミロリケフ ァシエンス(Bacillus amyloliquefaciens)、バチルス・プミルス(Bacillus pumilus)、バチルス・シンプレックス(Bacillus simplex)、バチルス レンタス(Bacillus lentus)、バチルス ラテロスポルス(Bacillus laterosporus)、バチル
ス アルベイ(Bacillus alvei)、バチルス・ポピリエ(Bacillus popilliae)、バチル
ス・リケニフォルミ ス(Bacillus licheniformis)、バチルス・ブレビス(Bacillus brevis)、バチルス・ステアロサーモフィラス(Bacillus stearothermophilus)、バチル
ス・アルカロフィラ ス(Bacillus alcalophilus)、バチルス・コアグランス(Bacillus
coagulans)、バチ ルス・サーキュランス(Bacillus circulans)、バチルス・サイア
メンシス(Bacillus siamensis)、バチルス ロータス(Bacillus lautus)、バチルス
クラウジイ(Bacillus clausii)、バチルス・メガテリウム(Bacillus megaterium)、
バチルス・チューリンジ ェンシス(Bacillus thuringiensis)、バチルス・セレウス(Bacillus cereus)、バチ ルス・ファーマス(Bacillus firmus)、バチルス・ベレゼンシス(Bacillus velezensis)、バチルス・ピチノティ(Bacillus pichinotyi)、バチルス・アシドカルダリウス(Bacillus acidocaldarius)、バチルス・アルカリコラ(Bacillus alkalicola)、バチル ス・アゾトフォーマンス(Bacillus azotoformans)、バチルス・アンスラシス(Bacillus anthracis)、バチルス・バディウス(Bacillus badius)、
バチルス・バタビエンシス (Bacillus bataviensis)、バチルス・シクロヘプタニカス
(Bacillus cycloheptanicus)、バチルス・アネウリニリティカス(Bacillus aneurinilyticus)、バチルス・ミグ ラヌス(Bacillus migulanus)、バチルス・アビッサリス(Bacillus abyssalis)、バチ ルス・アエスツアリイ(Bacillus aestuarii)、バチルス・ポリミグザ(Bacillus polymyxa)およびバチルス・エスピー(Bacillus sp.)からなる
群より選択されるからなる群より選択される、請求項4に記載の方法。 - バチルス(Bacillus)属細菌が、バチルス・ズブチリス(Bacillus subtilis)である、
請求項4に記載の方法。 - バチルス(Bacillus)属細菌の多段階の液体培養工程において、最終段よりも前の段で抗生物質を含有する液体培地でバチルス(Bacillus)属細菌を培養し、最終段で抗生物質の濃度を当該前の段よりも低下させて培養する工程を含み、前記抗生物質が、ストレプトマイシン、リンコマイシン及びクロラムフェニコールからなる群より選択される1種類以上であり、前記最終段よりも前の段の液体培地における抗生物質の濃度が1.0~90ppmであり、最終段における抗生物質の濃度を、抗生物質の最大濃度の1/10以下とする、バチルス(Bacillus)属細菌の液体培養中の異常型コロニーを形成する変異個体の出現及び増殖を抑制する方法。
- バチルス(Bacillus)属細菌が、バチルス・ズブチリス(Bacillus subtilis)、バチル
ス・アミロリケフ ァシエンス(Bacillus amyloliquefaciens)、バチルス・プミルス(Bacillus pumilus)、バチルス・シンプレックス(Bacillus simplex)、バチルス レンタス(Bacillus lentus)、バチルス ラテロスポルス(Bacillus laterosporus)、バチル
ス アルベイ(Bacillus alvei)、バチルス・ポピリエ(Bacillus popilliae)、バチル
ス・リケニフォルミ ス(Bacillus licheniformis)、バチルス・ブレビス(Bacillus brevis)、バチルス・ステアロサーモフィラス(Bacillus stearothermophilus)、バチル
ス・アルカロフィラ ス(Bacillus alcalophilus)、バチルス・コアグランス(Bacillus
coagulans)、バチ ルス・サーキュランス(Bacillus circulans)、バチルス・サイア
メンシス(Bacillus siamensis)、バチルス ロータス(Bacillus lautus)、バチルス
クラウジイ(Bacillus clausii)、バチルス・メガテリウム(Bacillus megaterium)、
バチルス・チューリンジ ェンシス(Bacillus thuringiensis)、バチルス・セレウス(Bacillus cereus)、バチ ルス・ファーマス(Bacillus firmus)、バチルス・ベレゼンシス(Bacillus velezensis)、バチルス・ピチノティ(Bacillus pichinotyi)、バチルス・アシドカルダリウス(Bacillus acidocaldarius)、バチルス・アルカリコラ(Bacillus alkalicola)、バチル ス・アゾトフォーマンス(Bacillus azotoformans)、バチルス・アンスラシス(Bacillus anthracis)、バチルス・バディウス(Bacillus badius)、
バチルス・バタビエンシス (Bacillus bataviensis)、バチルス・シクロヘプタニカス
(Bacillus cycloheptanicus)、バチルス・アネウリニリティカス(Bacillus aneurinilyticus)、バチルス・ミグ ラヌス(Bacillus migulanus)、バチルス・アビッサリス(Bacillus abyssalis)、バチ ルス・アエスツアリイ(Bacillus aestuarii)、バチルス・ポリミグザ(Bacillus polymyxa)およびバチルス・エスピー(Bacillus sp.)からなる
群より選択されるからなる群より選択される、請求項7に記載の方法。 - バチルス(Bacillus)属細菌が、バチルス・ズブチリス(Bacillus subtilis)である、
請求項7に記載の方法。
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RU2213780C2 (ru) * | 2001-11-13 | 2003-10-10 | Леви Моисей Иосифович | Способ определения бактериостатического и бактерицидного действия антибиотика |
US7455840B2 (en) * | 2003-11-19 | 2008-11-25 | The Scripps Research Institute | Compositions and methods to reduce mutagenesis |
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WO2016163534A1 (ja) | 2015-04-09 | 2016-10-13 | 出光興産株式会社 | バチルス属細菌芽胞の製造方法 |
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WO2018066686A1 (ja) | 2016-10-07 | 2018-04-12 | 出光興産株式会社 | 芽胞形成細菌の培養方法および有用物質の製造方法 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
CARLISLE, G. E. et al.,Enzyme Activities and Antibiotic Susceptibility of Colonial Variants of Bacillus subtilis and Bacillus licheniformis,Applied and Environmental Microbiology,1989年,vol. 55, no. 11,p. 3026-3028 |
Jeewon Lee and Satish J. Parulekar,Enhanced Production of α-Amylase in Fed-Batch Cultures of Bacillus subtilis TN 106[pAT51],Biotechnology and Bioengineering,1993年,Vol.42, No.10,pp.1142-1150 |
OCHI, Kozo and FREESE, Ernst,Effect of Antibiotics on Sporulation Caused by the Stringent Response in Bacillus subtilis,Journal of General Microbiology,1983年,vol. 129,p. 3709-3720 |
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