JP6963240B2 - 細胞観察装置及びプログラム - Google Patents
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Description
図2〜図8を参照して、細胞観察処理を説明する。なお、以下の各処理は、CPUが実行するプログラムによって実現されてもよいし、制御部14に搭載されたハードウェア回路によって実現されてもよいし、これらを組み合わせて実現されてもよい。
上記の実施形態のように、波長が異なる2つ光を用いて撮影した第1写真及び第2写真を画像処理することによって、細胞領域の面積を算出し、細胞30の細胞数をカウントすることができる。その結果、熟練した作業者でなくても当該細胞30の状態を定量的に評価することができるので、例えば、継代のタイミングや当該培地の倍加時間を適切に判断することができる。なお、上記の実施形態では、面積の算出及び細胞数のカウントの両方を実行する例を説明したが、いずれか一方のみが実行されてもよい。細胞数のカウントを省略する場合、ステップS17〜S21の処理が省略される。
11・・・照射部
12A,12B・・・偏光板
13・・・撮影部
14・・・制御部
15・・・表示部
Claims (10)
- 培養細胞を含む培地に向けて400nm以上900nm以下の波長を有する白色光を照射する照射部と、
上記培地を透過した上記白色光のうち400nm以上700nm以下の第1波長の光を通過させる第1偏光板と、
上記培地を透過した上記白色光のうち700nm以上900nm以下で且つ上記第1波長より長い第2波長の光を通過させる第2偏光板と、
写真を撮影する撮影部と、
制御部と、を備えており、
上記制御部は、
上記第1偏光板を通過した上記第1波長の光で撮影する第1撮影条件に従って上記培地を上記撮影部に撮影させることによって、第1写真を取得する第1撮影処理と、
上記第2偏光板を通過した上記第2波長の光で撮影する第2撮影条件に従って上記培地を上記撮影部に撮影させることによって、第2写真を取得する第2撮影処理と、
上記第1写真内において、上記培養細胞が存在する領域と推定される細胞領域を特定する第1特定処理と、
上記第2写真内において、上記培養細胞の細胞核の位置と推定される細胞位置を特定する第2特定処理と、
上記第2特定処理で特定された上記細胞位置のうち、上記第1特定処理で特定された上記細胞領域内に位置する上記細胞位置の数を、上記培養細胞の細胞数としてカウントするカウント処理と、を実行する細胞観察装置。 - 上記制御部は、上記第1特定処理において、
上記第1写真を示す第1写真データのうち、第1閾値未満の画素値を第1値に置換し、上記第1閾値以上の画素値を第2値に置換した二値画像データを生成する生成処理と、
上記二値画像データで示される二値画像のうち、上記第1値の画素の領域を上記細胞領域として特定する領域特定処理と、を実行する請求項1に記載の細胞観察装置。 - 上記制御部は、上記領域特定処理において、上記第1値の画素が閾値数以上連続する領域を上記細胞領域として特定する請求項2に記載の細胞観察装置。
- 上記制御部は、上記第2特定処理において、
上記第2写真を示す第2写真データから特定周波数成分を抽出する抽出処理と、
上記特定周波数成分が抽出された上記第2写真の画素値を走査したときに、画素値の変化が減少及び増加の一方から他方に転じる境界の画素位置を上記細胞位置として特定する位置特定処理と、を実行する請求項1から3のいずれかに記載の細胞観察装置。 - 上記制御部は、上記抽出処理において、
上記第2写真データをFFT変換する変換処理と、
上記変換処理後の上記第2写真データに上記特定周波数成分を通過させるフィルタを適用するフィルタ処理と、
上記フィルタ処理後の上記第2写真データをFFT逆変換する逆変換処理と、を実行する請求項4に記載の細胞観察装置。 - 上記制御部は、上記第1特定処理で特定された上記細胞領域の面積を算出する算出処理を実行する請求項1から5のいずれかに記載の細胞観察装置。
- 出力部をさらに備えており、
上記制御部は、上記カウント処理でカウントされた細胞数を上記出力部に出力させる出力処理を実行する請求項1から6のいずれかに記載の細胞観察装置。 - 上記撮影部は、焦点の位置を調整する調整手段を備えており、
上記第1撮影条件は、上記培養細胞の輪郭に焦点を合わせた状態で上記第1写真を撮影することを示し、
上記第2撮影条件は、上記第1撮影条件より上記撮影部に近い位置に焦点を合わせた状態で第3写真を撮影し、且つ上記第1撮影条件より上記撮影部から離れた位置に焦点を合わせた状態で第4写真を撮影することを示し、
上記制御部は、上記第2撮影処理において、上記第3写真及び上記第4写真の画素値の差を、上記第2写真として取得する請求項1から7のいずれかに記載の細胞観察装置。 - 培養細胞を含む培地に向けて400nm以上900nm以下の波長を有する白色光を照射する照射部と、
上記培地を透過した上記白色光のうち400nm以上700nm以下の第1波長の光を通過させる第1偏光板と、
上記培地を透過した上記白色光のうち700nm以上900nm以下で且つ上記第1波長より長い第2波長の光を通過させる第2偏光板と、
写真を撮影する撮影部と、
制御部と、を備えており、
上記制御部は、
上記第1偏光板を通過した上記第1波長の光で撮影する第1撮影条件に従って上記培地を上記撮影部に撮影させることによって、第1写真を取得する第1撮影処理と、
上記第2偏光板を通過した上記第2波長の光で撮影する第2撮影条件に従って上記培地を上記撮影部に撮影させることによって、第2写真を取得する第2撮影処理と、
上記第1写真内において、上記培養細胞が存在する領域と推定される細胞領域を特定する第1特定処理と、
上記第1特定処理で特定された上記細胞領域の面積を算出する算出処理と、を実行する細胞観察装置。 - コンピュータによって実行可能なプログラムであって、
照射部から照射されて培養細胞を含む培地を透過した400nm以上900nm以下の波長を有する白色光のうち第1偏光板を通過した400nm以上700nm以下の第1波長の光で上記培地を撮影する第1撮影条件に従って撮影した第1写真、及び上記照射部から照射されて上記培地を通過した光のうち第2偏光板を通過した700nm以上900nm以下で且つ上記第1波長より長い第2波長の光で上記培地を撮影する第2撮影条件に従って撮影した第2写真を示す写真データを取得する取得処理と、
上記第1写真内において、上記培養細胞が存在する領域と推定される細胞領域を特定する第1特定処理と、
上記第2写真内において、上記培養細胞の細胞核の位置と推定される細胞位置を特定する第2特定処理と、
上記第1特定処理で特定された上記細胞領域及び上記第2特定処理で特定された上記細胞位置の少なくとも一方に基づいて、上記培養細胞の細胞数或いは上記細胞領域の面積を算出する算出処理と、を上記コンピュータに実行させるプログラム。
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