JP6959250B2 - 癌治療用の2−シアノイソインドリン誘導体 - Google Patents
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Description
本明細書における先行技術文献のリスト又は議論は、必ずしも、その文書が最先端技術の一部であることを又は一般的な知識であることを認めるものではない。
R1a、R1b、R1c、及びR1dは、それぞれ独立して、水素若しくは場合により置換されたC1〜C6アルキルを表すか、又はR1aとR1bは一緒に、場合により置換されたC3〜C6シクロアルキル環を形成するか、又はR1cとR1dは一緒に、場合により置換されC3〜C6シクロアルキル環を形成し;
X1、X3、及びX4は、それぞれ独立して、N、C−Q1−R2、又はC−Q2−(R6)nを表し、X2はN又はCHを表し、ここで、X1、X3、及びX4の1つはC−Q1−R2を表し、X1、X2、X3、及びX4の2つ以下はNを表し;
Q1は、共有結合、酸素原子、硫黄原子、−OR5−、−SO−、−SO2−、−C(O)−、−C(O)O−、−C0〜C3アルキレン−C(O)NR3−C0〜C3アルキレン、−C0〜C3アルキレン−NR3−C0〜C3アルキレン、−C0〜C3アルキレン−NR3CO−C0〜C3アルキレン、−NR3C(O)NR4−、−SO2NR3−、NR3SO2−、−NR3SO2NR4−、−NR3C(O)O−、−NR3C(O)OR5−、場合により置換されたC1〜C6アルキレン、又は場合により置換されたC2〜C6アルケニレンを表し;
R2は、場合により置換された3〜10員の単環式若しくは二環式ヘテロアリール、アリール、又はヘテロシクリル環を表し;
R3及びR4は、それぞれ独立して、水素、又は場合により置換されたC1〜C6アルキルを表し;
R5は、場合により置換されたC1〜C6アルキレン又は場合により置換されたC3〜C4シクロアルキレンを表し;
nは、0又は1であり;
R6は、場合により置換された3〜10員の単環式若しくは二環式ヘテロアリール、アリール、ヘテロシクリル、又はシクロアルキル環を表し;
R7、R8、及びR8aは、それぞれ独立して、水素、又は場合により置換されたC1〜C6アルキルを表し;
R9は、場合により置換されたC1〜C6アルキレンを表す。
R10、R11、及びR11aは、それぞれ独立して、水素、又は場合により置換されたC1〜C6アルキルを表し;及び
R12は、場合により置換されたヘテロシクリル、場合により置換されたヘテロアリール、場合により置換されたアリール、又は場合により置換されたシクロアルキルを表す。
R13、R14、及びR14aは、それぞれ独立して、水素、又は場合により置換されたC1〜C6アルキルを表し;及び
R15は、場合により置換されたヘテロシクリル、場合により置換されたヘテロアリール、場合により置換されたアリール、又は場合により置換されたシクロアルキルを表す。
以下の定義及び説明は、本明細書及び請求項の両方を含む全文書を通じて使用される用語に関するものである。本明細書に記載された化合物(例えば式Iの化合物)への参照は、その下位グループの実施態様を含む式Iへの参照を含む。
本明細書に記載の化合物は、1つ以上の同位体置換を含んでよく、特定の元素への言及は、その範囲内の元素の全ての同位体を含む。例えば水素への言及は、その範囲内で1H、2H(D)、及び3H(T)を含む。同様に、炭素及び酸素への言及は、それらの範囲内で、それぞれ12C、13C、及び14C、及び16O、及び18Oを含む。同位体の例は、2H、3H、11C、13C、14C、36Cl、18F、123I、125I、13N、15N、15O、17O、18O、32P、及び35Sを含む。
式(I)の化合物は、結晶又は非晶質形態で存在することができ、結晶形態の一部は多形として存在することができ、これは本発明の範囲に含まれる。式(I)の化合物の多形形態は、特に限定されるものではないが、赤外線スペクトル、ラマンスペクトル、X線粉末回折、示差走査熱量測定、熱重量分析、及び固体核磁気共鳴を含む多くの従来の分析技術を使用して、特性決定し識別することができる。
R1a、R1b、R1c、及びR1dは、それぞれ独立して、水素、又は場合により置換されたC1〜C6アルキルを表すか、又はR1a及びR1bは一緒に、場合により置換されたC3〜C6シクロアルキル環を形成するか、又はR1c及びR1dは一緒に、場合により置換されたC3〜C6シクロアルキル環を形成し;
X1、X3、及びX4は、それぞれ独立して、N、C−Q1−R2又はC−Q2−(R6)n-を表し、X2 はN又はCHを表し、及びX1、X3、及びX4の1つはC−Q1−R2を表し、及びX1、X2、X3、及びX4 の2つ以下は、Nを表し;
R3及びR4は、それぞれ独立して、水素、又は場合により置換されたC1〜C6アルキルを表し;
R5は、場合により置換されたC1〜C6アルキレン、又は場合により置換されたC3〜C4シクロアルキレンを表し;
nは、0又は1であり;
R7、R8、及びR8aは、それぞれ独立して、水素、又は場合により置換されたC1〜C6アルキルを表し;
R9は、場合により置換されたC1〜C6アルキレンを表す。
X1、X3、及びX4は、それぞれ独立して、N、C−Q1−R2又はC−Q2−(R6)nを表し、X2はN又はCHを表し、ここで、X1、X3、及びX4の1つはC−Q1−R2を表し、X1、X2、X3、及びX4の2つ以下はNを表し;
R2は、場合により置換された3〜10員の単環式若しくは二環式ヘテロアリール、アリール、又はヘテロシクリル環であり;
R3及びR4は、それぞれ独立して、水素、又は場合により置換されたC1〜C6アルキルを表し;
R5は、場合により置換されたC1〜C6アルキレン、又は場合により置換されたC3〜C4シクロアルキレンを表し;
nは0又は1であり;
R7、R8、及びR8aは、それぞれ独立して、水素、又は場合により置換されたC1〜C6アルキルを表し;
R9は、場合により置換されたC1〜C6アルキレンを表す。
特にQ3bは、共有結合又は場合により置換されたC1〜C3アルキレンから選択される。例えばQ3bは、共有結合、C1〜C3アルキレン、又はC1〜C2アルキレン(例えばメチレン又はエチレン)から選択される。アルキレンは、ハロゲン、ヒドロキシル、チオール、シアノ、アミノ、アミド、ニトロ、及びSF5で場合により置換されてよい。
代替的にR6は、場合により置換された9員又は10員の二環式ヘテロシクリル、ヘテロアリール、又はアリール環を表してもよい。
特に、Q4aは共有結合である。
R1a、R1b、R1c、及びR1dは、それぞれ独立して、水素、又は場合により置換されたC1〜C6アルキルを表し;
X1及びX3は、それぞれ独立して、C−Q1−R2又はC−Q2−(R6)nを表し、X2及びX4は、いずれもNであるか又はいずれもCHであり、ここで、X1及びX3の1つは、C−Q1−R2を表し;
nは0又は1であり;そして
Q1、Q2、R2、及びR6は本明細書で定義される通りである。
R1a、R1b、R1c、及びR1dは、それぞれ独立して水素を表し;
X1及びX3は、それぞれ独立して、C−Q1−R2又はC−Q2−(R6)nを表し、X2及びX4は、いずれもNであるか又はいずれもCHであり、ここで、X1及びX3の1つは、C−Q1−R2を表し;
Q1は共有結合を表し;
R2は、場合により置換された5〜10員の単環式若しくは二環式ヘテロシクリル、ヘテロアリール、又はアリール環であり;
nは0又は1であり;そして
Q2、及びR6は本明細書で定義される通りである。
R1a、R1b、R1c、及びR1dは、それぞれ独立して水素を表し;
X1はC−Q1−R2を表し、X3はC−Q2−(R6)nを表し、X2及びX4は、いずれもNであるか又はいずれもCHであり;
Q1は共有結合を表し;
R2は、フェニル、ベンゾオキサゾリル、及びピペリジニルから選択される、場合により置換された5〜10員の単環式若しくは二環式ヘテロシクリル、ヘテロアリール、又はアリール環であり;
nは0又は1であり;
Q2、及びR6は本明細書で定義される通りである。
5−シアノ−2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
5−クロロ−2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−5−メチルベンズアミド;
4−(2−(アゼチジン−1−カルボニル)−4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
6−((1−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)アミノ)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボニトリル;
4−フェニルイソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(1−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(キノリン−3−イル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(1H−ピロロ[2,3−b]ピリジン−5−イル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(1−メチル−1,2,3,6−テトラヒドロピリジン−4−イル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(2−メチル−2H−インダゾール−5−イル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(o−トリル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(1−メチルピペリジン−4−イル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−クロロフェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−6−カルボニトリル;
4−(4−メトキシフェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−6−カルボニトリル;
4−(3−クロロフェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−6−カルボニトリル;
4−フェニル−1,3−ジヒドロ−2H−ピロロ[3,4−c]ピリジン−2−カルボニトリル;
6−(5−メチル−1,2,4−オキサジアゾール−3−イル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(キナゾリン−2−イルアミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
3−((2−シアノイソインドリン−4−イル)アミノ)−N−メチルイソキノリン−6−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)ニコチンアミド;
2−(6−アセトアミド−2−シアノイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
(R)−N−(2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(R)−N−(2−シアノ−7−(3−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(R)−N−(2−シアノ−7−(4−フルオロフェニル)イソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(R)−N−(2−シアノ−7−(4−(メチルカルバモイル)フェニル)イソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(R)−N−(2−シアノ−7−(3−(メチルカルバモイル)フェニル)イソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(R)−N−(2−シアノ−7−(3−メトキシフェニル)イソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(R)−N−(2−シアノ−7−(4−メトキシフェニル)イソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(R)−N−(7−(4−クロロフェニル)−2−シアノイソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(R)−N−(7−(3−クロロフェニル)−2−シアノイソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(R)−N−(2−シアノ−7−(2−メチルベンゾ[d]オキサゾール−6−イル)イソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(S)−N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(R)−N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
4−ベンジル−N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)モルホリン−2−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−3−(ピリジン−3−イル)プロパンアミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−5−オキソピロリジン−3−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−1−メチルピロリジン−3−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−1−メチル−6−オキソピペリジン−3−カルボキサミド;
1−アセチル−N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)ピペリジン−3−カルボキサミド;
N1−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−N4,N4−ジメチルスクシンアミド;
1−アセチル−N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)ピペリジン−4−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−2−(ジメチルアミノ)アセトアミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)テトラヒドロ−2H−ピラン−4−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)テトラヒドロ−2H−チオピラン−4−カルボキサミド1,1−ジオキシド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−1−メチル−5−オキソピロリジン−3−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−4−メチルモルホリン−2−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−4−エチルモルホリン−2−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−4−イソプロピルモルホリン−2−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)アセトアミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−N−メチルアセトアミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−N,1−ジメチルピペリジン−3−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−4−メチルピペラジン−1−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)メタンスルホンアミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)ピペリジン−3−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)ピペリジン−4−カルボキサミド;
4−(2−クロロ−4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノ−2−メチルフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノ−2,6−ジメチルフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
3−オキソ−[4,4'−ビイソインドリン]−2'−カルボニトリル;
4−(1−オキソ−1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン−8−イル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
(R)−4−(2−(1−ヒドロキシエチル)フェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
(S)−4−(2−(1−ヒドロキシエチル)フェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(2−シアノイソインドリン−4−イル)イソフタロニトリル;
N−ベンジル−3−(2−シアノイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
3−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−N−(1−フェニルエチル)ベンズアミド;
3−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−N−フェニルベンズアミド;
(R)−3−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−N−(1−フェニルエチル)ベンズアミド;
4−(2−(ピペラジン−1−カルボニル)フェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
N−ベンジル−4−(2−シアノイソインドリン−4−イル)ピコリンアミド;
N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−3−(シクロプロパンカルボキサミド)ベンズアミド;
N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−4−(ピリジン−3−イル)ベンズアミド;
N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−4−(ピリジン−4−イル)ベンズアミド;
N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−3−(o−トリル)−1H−ピラゾール−5−カルボキサミド;
N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−2−フェニルチアゾール−4−カルボキサミド;
N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−5−メトキシ−1H−ピロロ[2,3−c]ピリジン−2−カルボキサミド;
N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−5−(ピラジン−2−イル)−1H−ピラゾール−3−カルボキサミド;
1−ベンジル−N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−カルボキサミド
N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−4−(メトキシメチル)ベンズアミド;
3−ベンズアミド−N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
(4−((2−シアノイソインドリン−4−イル)カルバモイル)ベンジル)カルバミン酸ベンジル;
N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−4−(N−フェニルスルファモイル)ベンズアミド;
N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−5−モルホリノチオフェン−2−カルボキサミド;
N−(2−シアノイソインドリン−5−イル)−1−メチルピロリジン−3−カルボキサミド;
N−ベンジル−2−シアノイソインドリン−4−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−4−フェニルイソインドリン−5−イル)アセトアミド;
1−(1−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリダジン−6−カルボニトリル;
2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−カルボン酸メチル;
4−(イソインドリン−2−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(4−(ピリジン−3−イルオキシ)ピペリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(4−(3−メトキシフェノキシ)ピペリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−((1−(6−シアノ−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−4−イル)ピペリジン−4−イル)オキシ)ベンズアミド;
N−(6−シアノ−4−フェニル−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−イル)アセトアミド;
N−(6−シアノ−4−(3−シアノフェニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−イル)アセトアミド;
N−(6−シアノ−4−(3−(トリフルオロメトキシ)フェニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−イル)アセトアミド;
N−(6−シアノ−4−(1−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−イル)アセトアミド;
N−(3−(2−アセトアミド−6−シアノ−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−4−イル)フェニル)アセトアミド;
N−(6−シアノ−4−(3−(メチルスルホンアミド)フェニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−イル)アセトアミド;
4−フェニル−2−(((テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−((1−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−フェニル−2−((ピリミジン−2−イルメチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−フェニル−2−((2−(ピリジン−2−イル)エチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−フェニル−2−((1,2,3,4−テトラヒドロナフタレン−1−イル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−フェニル−2−(フェニルアミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−フェニル−2−((ピリジン−2−イルメチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−フェニル−2−((ピリジン−3−イルメチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−フェニル−2−((チアゾール−5−イルメチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−((フラン−2−イルメチル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−((3−(1H−イミダゾール−1−イル)プロピル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(6−シアノ−2−(エチルアミノ)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−4−イル)ベンズアミド;
2−(((4−メチルモルホリン−2−イル)メチル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(((1−メチルピペリジン−3−イル)メチル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(((1−メチル−1H−ピラゾール−5−イル)メチル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(((1−メチルピロリジン−3−イル)メチル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
N−(6−シアノ−4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−イル)アセトアミド;
N−(6−シアノ−4−フェニル−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−イル)−5−オキソピロリジン−3−カルボキサミド;
1−(6−シアノ−2−フェニル−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−4−イル)ピロリジン−2−カルボキサミド;
2−((6−シアノ−2−フェニル−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−4−イル)アミノ)アセトアミド;
1−(6−シアノ−2−フェニル−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−4−イル)−N−メチルピロリジン−2−カルボキサミド;
2−(5−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)−4−(ピロリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(2−メトキシフェニル)−4−(ピロリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(3−メトキシフェニル)−4−(ピロリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(ピリジン−3−イル)−4−(ピロリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(6−シアノ−4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−イル)ベンズアミド;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(2−メトキシフェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(3−シアノフェニル)−4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(1−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
1−(6−シアノ−2−(o−トリル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−4−イル)ピロリジン−2−カルボキサミド;
1−(6−シアノ−2−(5−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−4−イル)ピロリジン−2−カルボキサミド;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(1H−ピラゾール−4−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(1−(2−メトキシエチル)−1H−ピラゾール−4−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(5,8−ジヒドロ−1,7−ナフチリジン−7(6H)−イル)−2−(5−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−クロロ−4−(4−フルオロフェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−クロロ−4−(2−フルオロフェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(4−フルオロフェニル)−2−メチル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
(R)−2−(((4−メチルモルホリン−2−イル)メチル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
(S)−2−(((4−メチルモルホリン−2−イル)メチル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−クロロ−6−(2−シアノイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
4−(2−(ピロリジン−1−カルボニル)フェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
5−シアノ−2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−4−メチルベンズアミド;
2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−5−フルオロベンズアミド;
4−(2−アセチルフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−N−メチルベンゼンスルホンアミド;
2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)ベンゼンスルホンアミド;
4−(2−(メチルスルホニル)フェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
(R)−N−(2−シアノ−7−(ピリジン−4−イル)イソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(R)−N−(2−シアノ−7−(ピリジン−3−イル)イソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
4−(2−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(2−シアノ−4−フルオロフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(2−シアノ−6−フルオロフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−クロロ−2−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(2−シアノ−3−メトキシフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(2−シアノ−4−メトキシフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(2−シアノ−5−メトキシフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(3−シアノ−6−メトキシピリジン−2−イル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−N,N−ジメチルベンゼンスルホンアミド;
2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−N−エチルベンゼンスルホンアミド;
4−(7−シアノ−3−オキソ−2,3−ジヒドロ−1H−インデ−4−ニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノ−2−(トリフルオロメチル)フェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(2−(アゼチジン−1−イルスルホニル)フェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−N−(2−(6−オキソピリミジン−1(6H)−イル)エチル)ベンズアミド;
4−(2−シアノ−4−(1H−イミダゾール−1−イル)フェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
1−(3−メトキシフェニル)−4−(1−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリダジン−6−カルボニトリル;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(4−(o−トリルオキシ)ピペリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(4−(ベンジルオキシ)ピペリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(4−(2−メトキシフェノキシ)ピペリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
N−(6−シアノ−4−(4−フルオロフェニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−イル)アセトアミド;
4−フェニル−2−((テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−((2−ヒドロキシエチル)(メチル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(メチル((4−メチルモルホリン−2−イル)メチル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(((4−メチルモルホリン−2−イル)メチル)アミノ)−4−(ピリジン−3−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(3−フルオロフェニル)−2−(((4−メチルモルホリン−2−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(4−フルオロフェニル)−2−(((4−メチルモルホリン−2−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
N−(3−(6−シアノ−2−(((4−メチルモルホリン−2−イル)メチル)アミノ)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−4−イル)フェニル)アセトアミド;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(((4−メチルモルホリン−2−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(((1−メチル−1H−ピラゾール−5−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−((トランス)−4−ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(((テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(((1−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(メチル((4−メチルモルホリン−2−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(ジメチルアミノ)−4−(4−フェノキシピペリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)−4−(4−フェノキシピペリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−アミノ−4−(4−フェノキシピペリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−2−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(3,4−ジフルオロフェニル)−2−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
N−(3−(6−シアノ−2−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−4−イル)フェニル)アセトアミド;
2−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)−4−(4−メトキシフェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)−4−(4−(4−メチルピペラジン−1−イル)フェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
6−((ジメチルアミノ)メチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボニトリル;
N−((2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)メチル)アセトアミド;
6−(2−メトキシエチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−((メチルスルホニル)メチル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
N−((2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)−N−メチルアセトアミド;
N−((2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)テトラヒドロ−2H−ピラン−4−カルボキサミド;
N−((2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)テトラヒドロ−2H−チオピラン−4−カルボキサミド−1,1−ジオキシド;
N−((2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)−1−メチル−1H−ピラゾール−4−カルボキサミド;
N−((2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)メタンスルホンアミド;
3−((2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)−1,1−ジメチル尿素;
((2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)カルバミン酸イソプロピル;
N−((2−シアノ−7−(2−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)アセトアミド;
N−((2−シアノ−7−(2,4−ジシアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)アセトアミド;
1−((2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)−3−メチル尿素;
1−((2−シアノ−7−(2,4−ジシアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)−3−メチル尿素;
1−((2−シアノ−7−(2−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)−3−メチル尿素;
2−(2,6−ジシアノイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)−N,N−ジメチルイソインドリン−5−カルボキサミド;
2−シアノ−7−(2,4−ジシアノフェニル)イソインドリン−5−カルボキサミド;
2−シアノ−7−(2−シアノ−5−メトキシフェニル)イソインドリン−5−カルボキサミド;
2−シアノ−7−(2−シアノ−4−フルオロフェニル)イソインドリン−5−カルボキサミド;
4−(4−シアノフェニル)−6−(1,1−ジオキシドチオモルホリン−4−カルボニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)−N−メチルイソインドリン−5−カルボキサミド;
2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)−N−(テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)イソインドリン−5−カルボキサミド;
2−シアノ−7−(2,4−ジシアノフェニル)−N−メチルイソインドリン−5−カルボキサミド;
2−シアノ−7−(4−フルオロフェニル)−N−メチルイソインドリン−5−カルボキサミド;
2−シアノ−7−(2−シアノフェニル)イソインドリン−5−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−(2,4−ジシアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メタンスルホンアミド;
N−(2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メタンスルホンアミド;
N−(2−シアノ−7−(2−シアノ−5−メトキシフェニル)イソインドリン−5−イル)メタンスルホンアミド;
4−(4−フルオロフェニル)−2−(((テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−6−カルボニトリル;
4−(4−フルオロフェニル)−2−((ピリジン−2−イルメチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−6−カルボニトリル;
4−(4−フルオロフェニル)−2−(((1−メチル−1H−ピラゾール−5−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−6−カルボニトリル;
N−(6−シアノ−4−(4−フルオロフェニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−2−イル)アセトアミド;
2−((2,3−ジヒドロキシプロピル)アミノ)−4−(4−フルオロフェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−6−カルボニトリル;
2−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−N,N−ジメチルアセトアミド;
6−(2−(メチルスルホニル)エチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボニトリル;
6−((メチルスルホニル)メチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−(2−メトキシエチル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
2−(2−シアノ−6−(2−メトキシエチル)イソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
6−(2−(1−アセチルピペリジン−4−イル)エチル)−4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
5−クロロ−2−(2−シアノ−1−メチルイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
5−シアノ−2−(2−シアノ−1−メチルイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
5−シアノ−2−(2−シアノ−5−フルオロイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
5−シアノ−2−(2−シアノ−7−フルオロイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
6−(1−メチル−6−オキソピペリジン−3−イル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボニトリル;
6−(1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボニトリル;
N−(2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)テトラヒドロ−2H−ピラン−4−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)−1−メチル−5−オキソピロリジン−3−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)−1−メチル−6−オキソピペリジン−3−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)−2−(ジメチルアミノ)アセトアミド;
4−(4−シアノフェニル)−6−(メチルアミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−(ジメチルアミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−(イソプロピルアミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−((1,1−ジオキシドテトラヒドロ−2H−チオピラン−4−イル)アミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−((テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)アミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−(((テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)メチル)アミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−(((1−メチル−1H−ピラゾール−5−イル)メチル)アミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−(エチルアミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−(1,1−ジオキシドチオモルホリノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−(ジエチルアミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−((2,3−ジヒドロキシプロピル)アミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
(S)−6−((2,3−ジヒドロキシプロピル)アミノ)−4−(4−フルオロフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
(S)−4−(2−シアノフェニル)−6−((2,3−ジヒドロキシプロピル)アミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−((3−ヒドロキシ−2−メトキシプロピル)アミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
5−シアノ−2−(2−シアノ−6−(ジメチルアミノ)イソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
4−(4−シアノフェニル)−6−((2−ヒドロキシプロピル)アミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−((2−ヒドロキシ−2−メチルプロピル)アミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−((2−ヒドロキシ−3−メトキシプロピル)アミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
2−メチル−4−(3−(2−オキソピロリジン−1−イル)フェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(((1−メチル−1H−ピラゾール−5−イル)メチル)アミノ)−4−(3−(2−オキソピロリジン−1−イル)フェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)−4−(3−(2−オキソオキサゾリジン−3−イル)フェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−シアノ−7−(2−シアノ−5−メトキシピリジン−3−イル)−N−メチルイソインドリン−5−カルボキサミド;
4−(2−シアノ−4−(1H−ピラゾール−4−イル)フェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(5,8−ジヒドロ−1,7−ナフチリジン−7(6H)−イル)−2−(メチル((1−メチルピペリジン−3−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(2,6−ジシアノイソインドリン−4−イル)−5−フルオロベンズアミド;
5−シアノ−2−(2,6−ジシアノイソインドリン−4−イル)−3−フルオロベンズアミド;
4−(2−シアノ−5−(2−オキソオキサゾリジン−3−イル)フェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(2−シアノ−5−(2−オキソピロリジン−1−イル)フェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(3−(2−オキソイミダゾリジン−1−イル)フェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;及び
5−シアノ−2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−3−フルオロベンズアミド。
本発明の化合物は、DUB又は脱SUMO化阻害、特にUSP7に関連する障害及び疾患の治療に使用することができる。
本発明の医薬組成物は、経口、非経口、又は粘膜経路投与用に設計することができ、組成物の選択又は具体的な形態は投与経路に依存する。従って経口投与のために組成物は、例えば、錠剤、トローチ、糖衣錠、フィルム、粉末、エリキシル、シロップ、分散液を含む液体調製物、懸濁液、エマルジョン、溶液、噴霧剤、カシェ剤、顆粒剤、カプセル剤などの形態であってもよい。粘膜への投与のために組成物は、噴霧剤、吸入剤、分散液、懸濁液、エマルジョン、溶液、ゲル、パッチ、フィルム、軟膏、クリーム、ローション、坐薬などの形態であってもよい。非経口投与のために組成物は、溶液、分散液、エマルジョン、又はリポソーム組成物を含む懸濁液などの液体調製物の形態である。
本発明の化合物は、種々の合成経路によって調製することができる。本発明の特定の化合物への例示的経路を以下に示す。本発明の代表的な化合物は、以下に記載され以下のスキームでより詳しく例示される一般的な合成方法に従って合成することができる。スキームは例示でり、本発明は、示される化学反応及び条件によって制限されると解釈されるべきではない。スキームで使用される種々の出発物質の調製は、当業者の技術の範囲内である。当業者であれば、適切な場合には、スキーム内の個々の変換を異なる順序で完了することができることを理解する。以下のスキームは、本発明の中間体や標的化合物が調製される一般的合成法を記載する。追加の代表的な化合物、及びその立体異性体、ラセミ混合物、ジアステレオ異性体及びその鏡像異性体は、一般的なスキームで調製された中間体、及び当業者に公知の他の物質、化合物、及び試薬を使用して合成することができる。全てのそのような化合物、立体異性体、ラセミ混合物、ジアステレオ異性体、及び鏡像異性体は、本発明の範囲に包含されることが意図される。
略語:
AcOH 酢酸
AIBN アゾビスイソブチロニトリル
Ar アリール
BEH エチレン架橋ハイブリッド
Boc tert−ブトキシカルボニル
br ブロード(NMRシグナル)
d 二重項(NMRシグナル)
dba ジベンジリデンアセトン
DCE 1,2−ジクロロエタン
DCM ジクロロメタン
DIPEA ジイソプロピルエチルアミン
DMAP 4−ジメチルアミノピリジン
DMF N,N−ジメチルホルムアミド
DMS ジメチルスルフィド
DMSO ジメチルスルホキシド
Dppf 1,1'−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン
EDC 1−エチル−3−(3−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド
ES エレクトロスプレー
EtOAc 酢酸エチル
EtOH エタノール
Fmoc フルオレニルメチルオキシカルボニル
g グラム
h 時間
HATU 1−[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]−1H−1,2,3−トリアゾロ[4,5−b]ピリジニウム3−オキシドヘキサフルオロホスフェート
HOBt ヒドロキシベンゾトリアゾール
IPA イソプロパノール
m 多重項(NMRシグナル)
M モル
m−CPHA メタ−クロロペルオキシ安息香酸
MeCN アセトニトリル
MeOH メタノール
min 分
NBS N−ブロットスクシンイミド
NMP N−メチル−2−ピロリドン
PE 石油エーテル
RT 保持時間
rt 室温
s 一重項(NMRシグナル)
SFC 超臨界液体クロマトグラフィー
t 三重項(NMRシグナル)
TEA トリエチルアミン
TFA トリフルオロ酢酸
TFAA トリフルオロ無水酢酸
THF テトラヒドロフラン
TLC 薄層クロマトグラフィー
キサントホス 4,5−ビス(ジフェニルホスフィノ)−9,9−ジメチルキサンテン
DCM(300ml)中の1,2−ジメチル−4−ニトロベンゼン(CAS番号99−51−4、TCI chemicalsから入手可能)(25g、165.4mmol)の撹拌溶液に、AlCl3(55.13g、413.4mmol)を0℃で少しずつ加えた。反応混合液を0℃で50分間撹拌した。臭素(31.72g、198.4mmol)を0℃で反応混合液に滴加した。反応混合液を40℃で48時間撹拌した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、同じ方法により同じスケールで調製した1つの他のバッチと合わせた。反応混合液を、中和されるまで飽和NaS2O3・5H2O溶液を注意深くゆっくり加えてクエンチし、DCM(3×500ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(500ml)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー(100%ヘキサン)により精製して、1−ブロモ−2,3−ジメチル−5−ニトロベンゼン(56.0g、243.4mmol)を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.23 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 7.99 (d, J=1.6 Hz, 1 H), 2.44 (s, 3 H), 2.42 (s, 3 H)。
CCl4(270ml)中の1−ブロモ−2,3−ジメチル−5−ニトロベンゼン(27g、117.4mmol)の撹拌溶液に、室温でAIBN(0.674g、4.11mmol)を加えた。反応混合液を室温で10分間撹拌した。NBS(52.22g、293.4mmol)を、室温で反応混合液に少しずつ加えた。反応混合液を75℃で18時間撹拌した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、同じ方法により同じスケールで調製した1つの他のバッチと合わせた。反応混合液を濾過し、残留物をCCl4(3×100ml)で洗浄した。濾液を減圧下で濃縮して、1−ブロモ−2,3−ビス(ブロモメチル)−5−ニトロベンゼン(100.5g、定量的)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に使用した。
THF(500ml)中のベンジルアミン(13.81g、128.9mmol)の撹拌溶液に、KHCO3(32.26g、322.3mmol)を室温で加えた。反応混合液を室温で15分間撹拌した。THF中の1−ブロモ−2,3−ビス(ブロモメチル)−5−ニトロベンゼン(50g、128.9mmol)の溶液を、室温で反応混合液に加えた。得られた反応混合液を室温で18時間撹拌した。反応混合液を、同じ方法により同じスケールで調製した別のバッチと合わせた。得られた反応混合液を水(500ml)に注ぎ、EtOAc(3×500ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(200ml)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中の2.5%EtOAc)により精製して、得られた残留物を別のクロマトグラフィー処理で再精製して、これにより、カラムに100%DCMを充填し、同じ移動相で好ましくない不純物を溶出し、次に必要な生成物をDCM中5%MeOHで溶出した。このプロセスにより、2−ベンジル−4−ブロモ−6−ニトロイソインドリン(17.5g、52.5mmol)が得られた。LCMS:方法A、2.007分、MS: ES+ 333.2, 335.2; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.27 (s, 1 H), 8.17 (s, 1 H), 7.38 (s, 4 H), 7.27 - 7.31 (m, 1 H), 4.07 (s, 2 H), 3.93 (s, 2 H), 3.91 (s, 2 H)。
クロロベンゼン(42.5ml)中の2−ベンジル−4−ブロモ−6−ニトロイソインドリン(8.5g、25.5mmol)の撹拌溶液に、室温で4Åのモレキュラーシーブ(オーブン乾燥)(4.25g、0.5w/w)を加えた。反応混合液を室温で45分間撹拌した。反応混合液に、クロロ蟻酸1−クロロエチル(CAS番号50893−53−3、Alfa Aesarから入手可能)(7.29g、51.02mmol)を室温で滴加した。得られた反応混合液を90℃で6時間撹拌した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、濾過した。残留物をMeOH(34ml)及びクロロベンゼン(10ml)で洗浄した。得られた濾液を70℃で2時間撹拌し、次に室温まで冷却し、さらに18時間撹拌した。反応混合液を、同じ方法により同じスケールで調製した1つの他のバッチと合わせた。得られた固体を濾過して回収し、ヘキサン(3×100ml)で洗浄した。得られた固体を真空乾燥して、4−ブロモ−6−ニトロイソインドリン塩酸塩(10.1g、36.1mmol)を得た。LCMS:方法A、1.507分、MS: ES+ 243.03, 245.03; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.32 (s, 2 H), 8.42 (s, 1 H), 8.34 (s, 1 H), 4.72 (2, H), 4.59 (s, 2 H)。
THF(100ml)中の4−ブロモ−6−ニトロイソインドリン塩酸塩(5.0g、17.89mmol)の撹拌溶液に、TEA(3.62g、35.77mmol)を室温で加えた。反応混合液を室温で10分間撹拌した。Boc無水物(5.86g、26.83mmol)を室温で反応混合液に少しずつ加えた。反応混合液を室温で3時間撹拌した。反応混合液を、同じ方法により同じスケールで調製した別のバッチと合わせた。得られた反応混合液を水(100ml)に注ぎ、EtOAc(3×100ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(100ml)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中5%EtOAc)により精製して、4−ブロモ−6−ニトロイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(12.1g、35.38mmol)を得た。LCMS:方法E、5.256分、MS: ES+ 286.99 (M-56); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.34 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 8.27 (d, J=6.0 Hz, 1 H), 4.78 (d, J=10.0 Hz, 2 H), 4.62 (d, J=8.8 Hz, 2 H), 1.47 (s, 9 H)。
1,4−ジオキサン:水(8:2、10ml)中の4−ブロモ−6−ニトロイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(中間体3、0.4g、1.165mmol)、Cs2CO3(0.76g、2.331mmol)の溶液を、室温で撹拌した。反応混合液を窒素を使用して20分間脱気した後、Pd(PPh3)4(0.13g、0.116mmol)、及びフェニルボロン酸(0.21g、1.748mmol)を加えた。得られた反応混合液を90℃(外部温度)で3時間加熱した。得られた混合液を室温まで冷却し、水(50ml)に注ぎ、EtOAc(3×50ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(20ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中5.5%EtOAc)により精製して、6−ニトロ−4−フェニル−イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.385g、1.13)を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.26 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 8.10 (d, J=10.0 Hz, 1 H), 7.47 - 7.63 (m, 5 H), 7.74 - 7.76 (m, 4 H), 1.44 (d, J=14.8 Hz, 9 H)。
THF:水(1:1、10ml)中の6−ニトロ−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.38g、1.116mmol)の撹拌溶液に、Fe粉末(0.31g、5.58mmol)及びNH4Cl(0.29g、5.58mmol)を室温で加えた。反応混合液を60℃で18時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却した。反応混合液を濾過し、真空下で蒸発乾固した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中25%EtOAc)により精製して、6−アミノ−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.21g、0.767mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に使用した。LCMS:方法A、2.314分、MS: ES+ 311.52; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.34 - 7.44 (m, 5 H), 6.49 - 6.53 (m, 2 H), 5.20 (s, 2 H), 4.46 - 4.51 (m, 4 H), 1.25 (d, J=11.2 Hz, 9 H)。
DCM(20ml)中の6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン二塩酸塩(CAS番号147739−88−6、Tyger Scientificから入手可能)(2.0g、10.38mmol)の溶液を−10℃で撹拌した。DIPEA(4.02g、31.15mmol)及び塩化メタンスルホニル(1.43g、12.46mmol)を、−10℃で反応混合液に加えた。反応混合液を室温で18時間撹拌した。得られた反応混合液を飽和NaHCO3溶液(50ml)に注ぎ、EtOAc(3×50ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(50ml)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン(2g、10.07mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に使用した。LCMS:方法A、1.479分、MS: ES+ 199.24; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.48 (dd, J=0.8 Hz, 4.4 Hz, 1 H), 7.79 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 7.34 (dd, J=5.2 Hz, 8.0 Hz, 1 H), 4.69 (d, J=1.2 Hz, 2 H), 4.63 (d, J= 1.2 Hz, 2 H), 3.03 (s, 3 H)。
DCM(20ml)中の6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン(2g、10.07mmol)の撹拌溶液に、メタ−クロロペルオキシ安息香酸(2.6g、15.10mmol)を0℃で少しずつ加えた。反応混合液を室温で4時間撹拌した。過剰の溶媒を真空下で蒸発乾固した。残留物をジエチルエーテル(3×50ml)で洗浄した。得られた残留物を真空下で乾燥して、6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン1−オキシド(1.9g、8.87mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に使用した。LCMS:方法A、0.581分、MS: ES+ 214.9; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.21 (d, J=6.4 Hz, 1 H), 7.383 - 7.419 (m, 1 H), 7.33 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 4.76 (s, 2 H), 4.68 (s, 2 H), 3.07 (s, 3 H)。
LiHMDS(ヘキサン中1M)(18ml、18mmol)を、THF(40ml)中の6−ブロモイソキノリン−3−アミン(2.00g、9.01mmol)の撹拌溶液に−40℃で滴加した。得られた反応混合液を0℃で30分間撹拌した。THF(10ml)中のBoc無水物(1.96g、9.01mmol)の溶液を、0℃で反応混合液に滴加した。反応混合液を室温で1時間撹拌し、次にNH4Cl溶液(80ml)に注ぎ、EtOAc(3×80ml)で抽出した。合わせた有機相を集め、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、(6−ブロモイソキノリン−3−イル)カルバミン酸tert−ブチル(2.87g、8.91mmol)を得た。LCMS:方法A、2.64分、MS: ES+ 323.19。
MeOH(60ml)中の(6−ブロモイソキノリン−3−イル)カルバミン酸tert−ブチル(2.80g、8.69mmol)、酢酸ナトリウム(3.56g、43.48mmol)、及びPd(dppf)Cl2・DCM錯体(3.55g、4.35mmol)の混合液を、圧力容器に入れた。得られた反応混合液をCO(25kg/cm2)の圧力下で、85℃で48時間撹拌した。得られた反応混合液を濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物をDCMに懸濁し、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、得られた残留物をクロマトグラフィー(DCM中1%MeOH)により精製して、3−((tert−ブトキシカルボニル)アミノ)イソキノリン−6−カルボン酸メチル(2.40g、7.95mmol)を得た。LCMS:方法A、2.43分、MS: ES+ 303。
50mlの水中のNaOH(0.70g、17.38mmol)の溶液を、MeOH(50ml)中の3−((tert−ブトキシカルボニル)アミノ)イソキノリン−6−カルボン酸メチル(1.75g、5.79mmol)の溶液に室温で加えた。反応混合液を70℃で4時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、連続的に撹拌しながらクエン酸溶液をゆっくり加えて酸性化した。得られた混合液をEtOAc(3×100ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、3−((tert−ブトキシカルボニル)アミノ)−イソキノリン−6−カルボン酸(1.80g、定量的)を得た。LCMS:方法A、2.12分、MS: ES+ 289.33。
THF(50ml)中の3−((tert−ブトキシカルボニル)アミノ)イソキノリン−6−カルボン酸(1.80g、6.25mmol)、HATU(3.56g、9.37mmol)、及びDIPEA(2.15ml、12.5mmol)の混合液を0℃で調製した。反応混合液を室温で0.5時間撹拌した。反応混合液に室温でメチルアミン(THF中2M)(6.25ml、12.5mmol)を加えた。反応混合液を室温で18時間撹拌した。得られた反応混合液を飽和NaHCO3溶液(100ml)に注ぎ、EtOAc(3×100ml)で抽出した。合わせた有機相を集め、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー(DCM中3%MeOH)により精製して、(6−(メチルカルバモイル)イソキノリン−3−イル)カルバミン酸tert−ブチル(1.35g、4.48mmol)を得た。LCMS:方法A、2.01分、MS: ES+ 302.38。
DCM(50ml)中の(6−(メチルカルバモイル)イソキノリン−3−イル)カルバミン酸tert−ブチル(1.30g、4.32mmol)の溶液に、0℃でTFA(13ml)を加えた。反応混合液を室温で2時間撹拌した。得られた反応混合液を減圧下で濃縮して、3−アミノ−N−メチルイソキノリン−6−カルボキサミドTFA塩(2.0g、定量的)を得た。LCMS:方法A、0.89分、MS: ES+ 202.13。
CCl4(40ml)中の2,3−ジメチル安息香酸メチル(CAS番号15012−36−9、Accela Chembioから入手可能)(5g、30.48mmol)の溶液に、NBS(10.8g、61mmol)及びAIBN(0.2g、0.91mmol)を室温で加えた。反応混合液を80℃で16時間加熱した。反応混合液を濾過し、溶媒を留去して、2,3−ビス(ブロモメチル)安息香酸メチル(10.1g、定量的)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。
THF(30ml)中の2,3−ビス(ブロモメチル)安息香酸メチル(5g、15.6mmol)の溶液に、0℃でTEA(4.57ml、32.9mmol)及びベンジルアミン(1.67g、15.6mmol)を加えた。反応混合液を室温で4時間撹拌した。得られた混合液を水(200ml)に注ぎ、50%HCl水溶液で酸性化した。得られた混合液をEtOAc(150ml)で抽出した。水層を飽和NaHCO3水溶液でさらに塩基性化し、EtOAc(2×200ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(100ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、2−ベンジルイソインドリン−4−カルボン酸メチル(2.1g、7.86mmol)を得た。LCMS:方法A、1.693分、MS: ES+ 268.48。
EtOH(20ml)中の2−ベンジルイソインドリン−4−カルボン酸メチル(2.1g、7.86mmol)の溶液に、0℃でポリメチルヒドロキシシラン(7ml)及びBoc無水物(9ml、43mmol)を加えた。20%Pd(OH)2担持活性炭(0.5g)を室温で反応混合液に加えた。反応混合液を室温で1時間撹拌した。得られた混合液を濾過し、減圧下で溶媒を留去して、4−メチルイソインドリン−2,4−ジカルボン酸2−(tert−ブチル)(2.6g、9.38mmol)を得た。LCMS:方法B、7.038分、MS: ES+ 222.03(M-56)。
THF:水(1:1、20ml)中の4−メチルイソインドリン−2,4−ジカルボン酸2−(tert−ブチル)(2.5g、9.02mmol)の溶液に、室温でNaOH(0.9g、22.56mmol)を加えた。反応混合液を4時間還流した。反応混合液を室温まで冷却し、氷水(50ml)に注いだ。得られた混合液を50%HCl水溶液で酸性化した。得られた混合液をEtOAc(2×300ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、2−(tert−ブトキシカルボニル)イソインドリン−4−カルボン酸(1.67g、6.34mmol)を得た。LCMS:方法A、2.036分、MS: ES+ 262.43。
DMF(8ml)中の4−ブロモ−7−ヒドロキシインダノン(0.95g、4mmol)及びシアン化銅(I)(0.47g、5.2mmol)の溶液を、150℃で5時間加熱した。さらにシアン化銅(I)(0.5g、5.5mmol)及びヨウ化銅(I)(0.1g、0.5mmol)を加え、150℃で一晩加熱を続けた。反応混合液を室温まで冷却し、水及びEtOAcを加えた。混合液を濾過し、相を分離した。水相をEtOAcで2回抽出し、合わせた有機物を食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮して、7−ヒドロキシ−1−オキソ−2,3−ジヒドロ−1H−インデン−4−カルボニトリルを褐色固体(246mg、35%)として得た。LCMS(方法P):保持時間2.3〜3.0分、m/z 172 [M-H]; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 9.47 (brs, 1H), 7.75 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 3.34-3.24 (m, 2H), 2.87-2.79 (m, 2H)。
DCM(7ml)中の7−ヒドロキシ−1−オキソ−2,3−ジヒドロ−1H−インデン−4−カルボニトリル(246mg、1.42mmol)及びDIPEA(0.37ml、2.13mmol)の0°Cの溶液に、トリフルオロメタンスルホン酸無水物(0.29ml、1.70mmol)を滴加した。得られた混合液を0℃で30分間撹拌した後、室温に温めた。反応混合液をDCMで希釈し、飽和NaHCO3水溶液、水及び食塩水で順次洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮して油状物とした。ヘキサン中0〜20%EtOAcで溶離するシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、7−シアノ−3−オキソ−2,3−ジヒドロ−1H−インデン−4−イルトリフルオロメタンスルホネートを褐色固体として得た(283mg、65%)。LCMS(方法P):保持時間3.58分、m/z 306 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.96 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.41-3.35 (m, 2H), 2.92-2.86 (m, 2H)。
; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.88 (br s, 1H), 7.72 (d, 1H), 7.66 (d, 1H), 7.59 (dd, 1H), 7.25-7.30 (m, 2H)。
1,4−ジオキサン:水(9:1、10ml)中の中間体11(4.600g、14.153mmol)の撹拌溶液に、K3PO4(9.000g、6.462mmol)及び4−シアノフェニルボロン酸(2.479g、16.98mmol)を室温で加えた。反応混合液をN2ガスで30分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.220g、0.305mmol)を加えた。得られた反応混合液を90℃で5時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(250ml)に注ぎ、EtOAc(3×70ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水溶液(2×100ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中25%EtOAc)により精製して、4−(4−シアノフェニル)−6−ホルミルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(4.700g、13.505mmol)を得た。LCMS:方法C、6.930分、MS: ES- 347.10。
MeOH(25ml)中の4−(4−シアノフェニル)−6−ホルミルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.600g、1.724mmol)の撹拌溶液に、室温でNH2OH・HCl(1.198g、17.24mmol)を室温で加えた。反応混合液を室温で4時間撹拌した。減圧下で反応混合液から溶媒を留去し、飽和NaHCO3溶液(50ml)に注ぎ、EtOAc(3×50ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。次に、得られた残留物をAcOH(25ml)に溶解し、0℃に冷却した。0℃で亜鉛粉末(0.788g、12.060mmol)を反応混合液に加えた。反応混合液を室温で40時間撹拌した。得られた反応混合液を飽和NaHCO3溶液(150ml)に注ぎ、EtOAc(3×25ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、6−(アミノメチル)−4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.400g、定量的)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、1.627分、MS: ES+ 350.49。
DMF(200ml)中の7−ブロモイソインドリン−5−カルボン酸メチルHCl塩(実施例98の工程eと同様にして調製、20.00g、68.4mmol)の溶液に、0℃でTEA(28.6ml、205mmol)を加えた。Boc無水物(17.39g、82.05mmol)を、0℃で混合液に加えた。反応混合液を室温で4時間撹拌した。得られた反応混合液を氷冷水(200ml)に注ぎ、EtOAc(3×200ml)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をn−ヘキサン(2×5ml)で粉砕して、7−ブロモイソインドリン−2,5−ジカルボン酸2−(tert−ブチル)5−メチル(21.00g、58.95mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、2.647分、MS: ES+ 341.36, 343.36 (M-15); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.99 (s, 1 H), 7.93 (d, J=9.2 Hz, 1 H), 4.74 (d, J=9.6 Hz, 2 H), 4.58 (d, J=9.2 Hz, 2 H), 3.87 (s, 3 H), 1.46 (s, 9 H)。
DMF:水(8.5:1.5)(3.5ml)中の2−ブロモ−5−シアノ安息香酸メチル(CAS番号1031927−03−3、Combi blocksから入手可能)(0.30g、1.250mmol)、4−(4,4,5,5−テトラメチル−1、3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(中間体2、0.86g、2.500mmol)、及びNaHCO3(0.21g、2.500mmol)の溶液を、窒素を使用して室温で20分間脱気した。PdCl2(dppf)(0.091g、0.125mmol)を室温で反応混合液に加えた。反応混合液を100℃で5時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、同じ方法により同じスケールで調製した3つの他のバッチと合わせた。得られた反応混合液を水(100ml)に注ぎ、EtOAc(2×100ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(50ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中10%EtOAc)により精製して、4−(4−シアノ−2−(メトキシカルボニル)フェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.80g、2.115mmol)を得た。LCMS:方法A、2.583分、MS: ES+ 323.18 (M-56); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.31 (s, 1H), 8.12 (d, J=8 Hz, 1H), 7.65 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.34 - 7.40 (m, 2H), 7.052 (t, J=8 Hz, 1H), 4.67 (d, J=9.2 Hz, 2H), 4.33 (d, J=17.2 Hz, 2H), 3.60 (s, 3H)1.42 (d, J=18 Hz, 9H)。
THF(5ml)中の4−(4−シアノ−2−(メトキシカルボニル)フェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.8g、2.115mmol)の溶液に、水(5ml)中のLiOH・H2O(0.36g、8.462mmol)の溶液を室温で加えた。反応混合液を室温で15時間撹拌した。得られた反応混合液を水で希釈し、EtOAc(3×30ml)で抽出して、望ましくない不純物を分離した。得られた水層を1M HCl(40ml)で酸性化し、EtOAc(3×50ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(50ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、2−(2−(tert−ブトキシカルボニル)イソインドリン−4−イル)−5−シアノ安息香酸(0.65g、1.785mmol)を得た。LCMS:方法A、2.279分、MS: ES- 363.23; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13.27 (br s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.06 (d, J=8 Hz, 1H), 7.59 (t, J=8 Hz, 1H), 7.33 - 7.37 (m, 2H), 7.07 - 7.11 (m, 1H), 4.65 (d, J=8.8 Hz, 2H), 4.34 (d, J=18 Hz, 2H), 1.41 (d, J=18 Hz, 9H)。
THF(8ml)中の2−(2−(tert−ブトキシカルボニル)イソインドリン−4−イル)−5−シアノ安息香酸(0.65g、1.785mmol)の溶液に、EDC・HCl(0.68g、3.571mmol)、HOBT(0.27g、1.785mmol)、及びDIPEA(0.91ml、5.357mmol)を室温で加えた。反応混合液を15分間撹拌し、次にNH4Cl(0.48g、8.928mmol)を室温で反応混合液に加えた。反応混合液を室温で15時間撹拌した。得られた反応混合液をNaHCO3溶液(50ml)に注ぎ、EtOAc(3×50ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(50ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中2%MeOH)により精製して、4−(2−カルバモイル−4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.51g、1.404mmol)を得た。LCMS:方法A、2.131分、MS: ES- 362.13; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.94 - 7.98 (m, 2H), 7.78 (d, J=9.6 Hz, 1H), 7.58 (t, J=7.2 Hz, 1H), 7.42 (d, J=12.4 Hz, 1H), 7.31 - 7.37 (m, 2H), 7.11 - 7.15 (m, 1H), 4.65 (d, J=9.6 Hz, 2H), 4.46 (d, J=13.6 Hz, 2H), 1.42 (d, J=14 Hz, 9H)。
DCM(10ml)中の4−(2−カルバモイル−4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.51g、1.404mmol)の溶液に、室温でTFA(3.0ml)を加えた。反応混合液を室温で1時間撹拌した。得られた反応混合液を減圧下で濃縮した。得られた残留物をDCM(5ml)で共沸蒸留し、ジエチルエーテル(3ml)で粉砕し、最後に高真空下で乾燥して、5−シアノ−2−(イソインドリン−4−イル)ベンズアミドTFA塩(0.46g、1.22ミリモル)を得た。LCMS:方法A、1.390分、MS: ES+ 264.13。
THF(8ml)中の5−シアノ−2−(イソインドリン−4−イル)ベンズアミドTFA塩(0.46g、1.22mmol)の溶液に、室温でK2CO3(0.42g、3.050mmol)を加えた。臭化シアン(0.13g、1.220mmol)を室温で反応混合液に加えた。反応混合液を室温で30分間撹拌した。得られた反応混合液を水(75ml)に注ぎ、EtOAc(3×50ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中1.5%MeOH)により精製して、標題化合物(0.32g、1.111mmol)を得た。LCMS:方法D、3.432分、MS: ES+ 288.97; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.98 (d, J=1.2 Hz, 1H), 7.93 - 7.96 (m, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.56 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.34 - 7.40 (m, 2H), 7.17 (d, J=6.8 Hz, 1H), 4.85 (s, 2H), 4.66 (s, 2H)。
MeCN(10ml)中の6−アミノ−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(中間体4、0.25g、0.806mmol)の溶液に、臭化銅(II)(0.27g、1.200mmol)を室温で加えた。亜硝酸イソアミル(0.142g、1.200mmol)を室温で加えた。反応混合液を50℃で1時間加熱した。得られた反応混合液を2M HCl(15ml)に注ぎ、EtOAc(3×10ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中2%EtOAc)により精製して、6−ブロモ−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.26g、0.696mmol)を得た。LCMS:方法A、3.012分、MS: ES+ 318.1(M-56)。
1,4−ジオキサン(10ml)中の6−ブロモ−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.25g、0.670mmol)の溶液に、1−メチル−1H−ピラゾール−4−アミン(CAS番号69843−13−6、Combi blocksから入手可能)(0.20g、2.010mmol)及びCs2CO3(0.44g、1.34mmol)を室温で加えた。反応混合液を、窒素を用いて室温で10分間脱気した。反応混合液にキサントホス(0.02g、0.033mmol)及びPd2(dba)3(0.03g、0.033mmol)を室温で加えた。反応混合液を95℃で6時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、水(30ml)に注ぎ、EtOAc(3×15ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中70%EtOAc)により精製して、6−((1−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)アミノ)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.085g、0.217mmol)を得た。LCMS:方法A、2.417分、MS: ES+ 391.5。
標題化合物を、実施例1の工程d及びeについて記載された手順と同様の手順を使用して、上記中間体から合成した。LCMS:方法D4.190分、MS: ES+ 316.05; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.71 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.35 - 7.43 (m, 6H), 6.71 (s, 1H), 6.67 (s, 1H), 4.70 (s, 4H), 3.80 (s, 3H)。
1,4−ジオキサン:水(5:1、6ml)中の4−ブロモイソインドリン塩酸塩(CAS番号923590−95−8;0.1g、0.426mmol)の撹拌溶液に、フェニルボロン酸(0.078g、0.64mmol)及びK2CO3(0.176g、1.279mmol)を室温で加えた。反応混合液を、窒素を用いて10分間脱気した。Pd(PPh3)4(0.024g、0.021mmol)を混合液に加え、反応混合液を100℃で16時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、同じ方法により同じスケールで調製した2つの他のバッチと合わせた。反応混合液を水(100ml)に注ぎ、EtOAc(2×20ml)で抽出した。合わせた有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、蒸発乾固した。残留物をEtOAc(2ml)に再溶解し、0℃で1,4−ジオキサン(0.3ml)中の4M HClを加えた。混合液を室温で30分間撹拌した。過剰の溶媒を真空下で蒸留し、残留物をジエチルエーテル(10ml)及びEtOAc(10ml)で粉砕して、4−フェニルイソインドリン塩酸塩(0.1g、0.512mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に使用した。LCMS:方法A、1.731分、MS: ES+ 196.44; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.84 (br, s, 1 H), 7.42 - 7.60 (m, 8 H), 4.49 - 4.63 (m, 4 H)。
THF(5ml)中の4−フェニルイソインドリン塩酸塩(0.09g、0.461mmol)の撹拌溶液に、室温でK2CO3(0.254g、1.844mmol)及び臭化シアン(0.058g、0.553mmol)を加えた。反応混合液を室温で16時間撹拌した。反応混合液をセライト床に通して濾過し、濾液を蒸発乾固した。得られた粗物質をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中20%EtOAc)により精製して、4−フェニルイソインドリン−2−カルボニトリル(0.02g、0.091mmol)を得た。LCMS:方法C 7.083分、MS: ES+ 221.10; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.41 - 7.55 (m, 6 H), 7.31 - 7.39 (m, 2 H), 4.86 (d, J=12.8 Hz, 4 H)。
1,4−ジオキサン:水(4:1、5ml)中の4−ブロモイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(中間体1、0.2g、0.671mmol)の撹拌溶液に、Cs2CO3(0.44g、1.342mmol)及び1−メチル−1H−ピラゾール−4−ボロン酸ピナコールエステル(CAS番号761446−44−0;Combi Blocksから入手可能)(0.17g、0.805mmol)を室温で加えた。反応混合液を20分間脱気した。Pd(PPh3)4(0.077g、0.067mmol)を室温で反応混合液に加えた。反応混合液を85℃で30分間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、水(100ml)で希釈し、EtOAc(3×80ml)で抽出した。合わせた有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた粗物質をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中30%EtOAc)により精製して、4−(1−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.121g、0.404mmol)を得た。LCMS:方法A、2.335分、MS: ES+ 300.53; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.03 (d, J=11.2 Hz, 1 H), 7.78 (d, J=20.4 Hz, 1 H), 7.43 - 7.49 (m, 1 H), 7.31 (t, J=7.2 Hz, 1 H), 7.19 (t, J=7.6 Hz, 1 H), 4.69 (s, 2 H), 4.62 (d, J=11.2 Hz, 2 H), 3.90 (s, 3 H), 1.48 (s, 9 H)。
標題化合物を、実施例1の工程d及びeについて記載された手順と同様の手順を使用して、上記中間体から合成した。LCMS:方法B、5.102分、MS: ES+ 225.05; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.06 (s, 1 H), 7.81 (s, 1 H), 7.50 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 7.32 (t, J=7.6 Hz, 1 H), 7.15 (J=7.6 Hz, 1 H), 4.89 (s, 2 H), 4.79 (2 H), 3.86 (s, 3 H)。
実施例7の工程aについて記載された手順と同様の手順を使用して実施して、4−(1−メチル−1,2,3,6−テトラヒドロピリジン−4−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを得た。
MeOH(20ml)中の4−(1−メチル−1,2,3,6−テトラヒドロピリジン−4−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.35g、1.111mmol)の溶液に、10%乾燥Pd/C(0.18g)を室温で加えた。反応混合液を室温で7時間、水素ガスでパージした。得られた反応混合液をセライトハイフローで注意深く濾過し、セライト床をMeOH(20ml)で洗浄した。得られた濾液を減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中2%MeOH)により精製して、4−(1−メチルピペリジン−4−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.29g、0.917mmol)を得た。LCMS:方法A、1.816分、MS: ES+ 317.37。
標題化合物を、実施例1の工程d及びeについて記載された手順と同様の手順を使用して、上記中間体から合成した。LCMS:方法D、3.883分、MS: ES+ 242.06。
DMF(80ml)中の6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン1−オキシド(中間体5、0.9g、4.2mmol)の撹拌溶液に、塩化オキサリル(1.06g、8.399mmol)を0℃で滴加した。反応混合液を室温で48時間撹拌した。反応混合液を、同じ方法により同じスケールで調製した1つの他のバッチと合わせた。得られた反応混合液を水(50ml)に注ぎ、DCM(3×100ml)で抽出した。合わせた有機相を冷水(3×100ml)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、4−クロロ−6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン及び2−クロロ−6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジンの位置異性体混合液を得た。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中16.5%EtOAc)により精製して、所望の4−クロロ−6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン(0.6g、2.586mmol)を得た。LCMS:方法A、1.664分、MS: ES+ 233.18; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.45 (d, J= 5.2 Hz, 1 H), 7.28 (s, 1 H), 4.81 (s, 4 H), 2.98 (s, 3 H)。
1,4−ジオキサン:水(4:1、5ml)中の4−クロロ−6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン(0.15g、0.646mmol)の撹拌溶液に、室温でCs2CO3(0.42g、1.292mmol)を加えた。反応混合液を窒素で10分間脱気した。反応混合液に、Pd(PPh3)4(0.07g、0.064mmol)及び3−(N−ベンジルアミノカルボニル)フェニルボロン酸(CAS番号625470−96−4;Combi Blocksから入手可能)(0.25g、0.969mmol)を室温で加えた。反応混合液を90℃で18時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、水(5ml)に注ぎ、EtOAc(3×20ml)で抽出した。合わせた有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中1.8%MeOH)により精製して、N−ベンジル−3−(6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−4−イル)ベンズアミド(0.13g、0.319mmol)を得た。LCMS:方法A、1.893分、MS: ES+ 408.28; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.21 (t, J=6.4 Hz, 1 H), 8.61 (d, J=5.2 Hz, 1 H), 8.12 (s, 1 H), 8.02 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 7.83 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 7.66 (t, J=7.6 Hz, 1 H), 7.52 (d, J=3.9 Hz, 1 H), 7.34 - 7.35 (m, 4 H), 7.23 - 7.27 (m, 1 H), 4.877 (s, 2 H), 4.71 (s, 2 H), 4.53 (d, J=6.0 Hz, 2 H), 3.08 (s, 3 H)。
AcOH(1ml)中のN−ベンジル−3−(6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−4−イル)ベンズアミド(0.12g、0.295mmol)の撹拌溶液に、室温でAcOH(1ml)中のHBrをゆっくり加えた。反応混合液を90℃で18時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(10ml)に注ぎ、EtOAc(3×10ml)で抽出した。水相を飽和NaHCO3溶液で塩基性化し、EtOAc(3×50ml)で再抽出した。合わせた有機相を食塩水(20ml)で洗浄し、分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過した。濾液に1,4−ジオキサン中の4M HCl(1ml)を室温で加え、10分間撹拌した。濾液を減圧下で濃縮して、N−ベンジル−3−(6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−4−イル)ベンズアミド塩酸塩(0.07g、0.192mmol)を得た。LCMS:方法A、1560分、MS: ES+ 330.6; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.07 (br s, 1 H), 9.30 (t, J=6.0 Hz, 1 H), 8.65 (d, J=5.2 Hz, 1 H), 8.12 (s, 1 H), 8.05 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 7.78 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 7.68 (t, J=7.6 Hz, 1 H), 7.63 (d, J=5.2 Hz, 1 H), 7 32 - 7.35 (m, 3 H), 7.25 - 7.29 (m, 1 H), 4.78 (t, J=5.2 Hz, 2 H), 4.57 (t, J=5.6 Hz, 2 H), 4.53 (d, J=6.0 Hz, 2 H)。
THF:DMF(5:1、6ml)中のN−ベンジル−3−(6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−4−イル)ベンズアミド塩酸塩(0.06g、0.016mmol)の撹拌溶液に、室温でK2CO3(0.068g、0.049mmol)を加えた。臭化シアン(0.026g、0.0246mmol)を室温で反応混合液に加えた。反応混合液を室温で4時間撹拌した。得られた反応混合液を水(5ml)に注ぎ、EtOAc(3×10ml)で抽出した。合わせた有機相を冷水(2×10ml)及び食塩水(10ml)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中1.5%MeOH)により精製して、N−ベンジル−3−(6−シアノ−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−4−イル)ベンズアミド(0.02g、0.056mmol)を得た。LCMS:方法D、3.405分、MS: ES+ 355.49; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.20 (t, J=6.0 Hz, 1 H), 8.60 (d, J=5.2 Hz, 1 H), 8.09 (s, 1 H), 8.02 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 7.79 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 7.65 (t, J=7.6 Hz, 1 H), 7.53 (d, J=5.2 Hz, 1 H), 7.34 - 7.35 (m, 4 H), 7.23 - 7.30 (m, 1 H), 5.06 (s, 2 H), 4.85 (s, 2 H), 4.53 (d, J=5.6 Hz, 2 H)。
DMF(7ml)中の6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン1−オキシド(中間体5、0.5g、2.336mmol)の撹拌溶液に、塩化オキサリル(1ml)を室温で加えた。反応混合液を室温で15時間撹拌した。反応混合液を、同じ方法により同じスケールで調製した4つの他のバッチと合わせた。得られた反応混合液を冷飽和NaHCO3溶液(100ml)に注ぎ、EtOAc(5×20ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(2×40ml)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、4−クロロ−6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジンと2−クロロ−6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン(1.6g、6.896mmol)を得た。LCMS:方法A、1.786分、MS: ES+ 233.35; 1.825分、MS: ES+ 233.35。この物質を、精製することなく次の工程に直接使用した。
1,4−ジオキサン:水(9:1、18ml)中の4−クロロ−6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン及び2−クロロ−6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジンの混合液(0.4g、1.724mmol)ンの撹拌溶液に、4−クロロフェニルボロン酸(0.35g、2.586mmol)及びK2CO3(0.713g、5.172mmol)を室温で加えた。反応混合液を、窒素を用いて30分間脱気した後、Pd(PPh3)4(0.199g、0.172mmol)を加えた。反応混合液を100℃で6時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、水(40ml)に注ぎ、EtOAc(3×15ml)で抽出した。合わせた有機相を分離し、食塩水(2×20ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中2%MeOH)により精製して、4−(4−クロロフェニル)−6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン(0.1g、0.324mmol)を得た。LCMS:方法A、2.173分、MS: ES+ 309.58; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.58 (d, J=5.2 Hz, 1H), 7.58 - 7.68 (m, 4H), 7.46 (d, J=5.2 Hz, 1H), 4.84 (d, 2H), 4.69 (d, 2H), 3.08 (s, 3H)。
AcOH(5ml)中の4−(4−クロロフェニル)−6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン(0.1g、0.324mmol)の溶液に、室温でAcOH(3ml)中のHBrをゆっくり加えた。反応混合液を90℃で4時間加熱した。得られた反応混合液を減圧下で濃縮した。得られた残留物をMeOH(4×30ml)で共沸蒸留し、高真空下で乾燥して、4−(4−クロロフェニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジンHBr塩(0.12g、定量的)を得た。LCMS:方法A、1.678分、MS: ES+ 231.3。
THF(15ml)中の4−(4−クロロフェニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジンHBr塩(0.12g、0.387mmol)の撹拌溶液に、K2CO3(0.16g、1.161mmol)を室温で加えた。臭化シアン(0.049g、0.464mmol)を室温で反応混合液に加えた。反応混合液を室温で30分間撹拌した。得られた反応混合液を飽和NaHCO3溶液(30ml)に注ぎ、EtOAc(3×15ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(2×20ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(n−ヘキサン中55〜60%EtOAc)により精製して、4−(4−クロロフェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−6−カルボニトリルを得た。LCMS:方法D、4.288分、MS: ES+ 255.99; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.57 (d, J=5.2 Hz, 1H), 7.58 - 7.66 (m, 4H), 7.46 (d, J=5.2 Hz, 1H), 5.09 (s, 2H), 4.83 (s, 2H)。
DCM(10ml)中の4,6−ジクロロピリミジン−5−カルボン酸(CAS番号87600−98−4;Combi Blocksから入手可能)(2.0g、10.36mmol)の撹拌溶液に、DMF(0.2ml)を室温で加えた。反応混合液に塩化オキサリル(2.63g、20.72mmol)を、窒素下で0℃で滴加した。反応混合液を室温で1時間撹拌した。反応混合液を、DCM(10ml)中のあらかじめ撹拌したプロパルギルアミン(0.57g、10.362mmol)及びTEA(5.23g、51.813mmol)の溶液に、−78℃で窒素下で滴加した。反応混合液を−78℃で1時間撹拌した。得られた反応混合液を水(50ml)に注ぎ、DCM(4×30ml)で抽出した。合わせた有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中25%EtOAc)により精製して、4,6−ジクロロ−N−(プロプ−2−イン−1−イル)ピリミジン−5−カルボキサミド(1.55g、6.768mmol)を得た。LCMS:方法A、1.689分、MS: ES+ 229.98; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.31 (t, J=5.2 Hz, 1 H), 9.02 (s, 1 H), 4.11 (dd, J=2.8 Hz, 5.6 Hz, 2 H), 3.27 (t, J=2.4 Hz, 1 H)。
ニトロベンゼン(5ml)中の4,6−ジクロロ−N−(プロプ−2−イン−1−イル)ピリミジン−5−カルボキサミド(0.5g、2.183mmol)の溶液を室温で30分間脱気した。反応混合液を250℃でマイクロ波で2.5分間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、同じ方法で調製した同じスケールの2つの他のバッチと合わせた。反応混合液を中性シリカに注ぎ、フラッシュクロマトグラフィー(DCM中3%MeOH)に付して、4−クロロ−1,2−ジヒドロ−3H−ピロロ[3,4−c]ピリジン−3−オン(0.4g、2.381mmol)を得た。LCMS:方法A、1.086分、MS: ES+ 169.03。
DMF:水(2:1、12ml)中の4−クロロ−1,2−ジヒドロ−3H−ピロロ[3,4−c]ピリジン−3−オン(0.39g、2.321mmol)の撹拌溶液に、フェニルボロン酸(0.34g、2.786mmol)及びNa2CO3(0.62g、5.803mmol)を室温で加えた。反応混合液を30分間脱気した。Pd(dppf)Cl2(0.17g、0.232mmol)を室温で反応混合液に加えた。反応混合液を120℃で3時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、水:EtOAc(1:1、60ml)の混合液に注ぎ、セライト床を通して濾過した。濾液をEtOAc(3×30ml)、次にDCM(10ml×2)中の10%MeOHで抽出した。合わせた有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(中性シリカ;DCM中1%MeOH)により精製して、4−フェニル−1,2−ジヒドロ−3H−ピロロ[3,4−c]ピリジン−3−オン(0.27g、1.286mmol)を得た。LCMS:方法A、1.564分、MS: ES+ 211.13。
THF(5ml)中の4−フェニル−1,2−ジヒドロ−3H−ピロロ[3,4−c]ピリジン−3−オン(0.086g、0.409mmol)の撹拌溶液に、水素化ホウ素ナトリウム(0.16g、4.279mmol)を室温で少しずつ加えた。三フッ化ホウ素エーテル化合物(0.68g、4.775mmol)を、−10℃で反応混合液に滴加した。反応混合液を70℃で1時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、同じ方法で0.05gのスケールで調製した別のバッチと合わせた。反応混合液をMeOH(5ml)中でクエンチし、真空下で蒸発乾固した。残留物を水(20ml)で希釈し、EtOAc(2×20ml)で抽出した。水相をNaOH水溶液で処理してpH10に調整し、EtOAc(2×20ml)で再抽出した。合わせた有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、4−フェニル−2,3−ジヒドロ−1H−ピロロ[3,4−c]ピリジン(0.075g、0.383mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に使用した。LCMS:方法D、3.549分、MS: ES+ 197.03; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.50 (s, 1 H), 7.78 (d, J=5.6 Hz, 2 H), 7.45 - 7.50 (m, 3 H), 7.25 - 7.33 (m, 2 H), 4.27 (s, 2 H), 4.11 (m, 2 H)。
THF(3ml)中の4−フェニル−2,3−ジヒドロ−1H−ピロロ[3,4−c]ピリジン(0.073g、0.372mmol)の撹拌溶液に、K2CO3(0.26g、1.862mmol)を室温で加えた。臭化シアン(0.04g、0.372mmol)を室温で反応混合液に加えた。反応混合液を室温で5分間撹拌した。得られた反応混合液を水(10ml)に注ぎ、EtOAc(2×10ml)で抽出した。合わせた有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中18〜20%EtOAc)により精製して、4−フェニル−1,3−ジヒドロ−2H−ピロロ[3,4−c]ピリジン−2−カルボニトリル(0.008g、0.036mmol)を得た。LCMS:方法E、3.129分、MS: ES+ 222.30; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.64 (d, J=4.8 Hz, 1 H), 7.80 (d, J=6.8 Hz, 2 H), 7.47 - 7.53 (m, 3 H), 7.40 (d, J=4.8 Hz, 1 H), 5.07 (s, 2 H), 4.88 (s, 2 H)。
DCM(90ml)中の3,4−ジメチル安息香酸(5.0g、33.29mmol)及びAlCl3(11.1g、83.23mmol)の混合液を、0℃で30分間撹拌した。DCM(10ml)中の臭素(5.85g、36.623mmol)の溶液を、0℃で反応混合液に10分間かけてゆっくりと加えた。反応混合液を室温で4時間撹拌した。得られた反応混合液を慎重に飽和チオ硫酸ナトリウム溶液(500ml)でクエンチし、DCM(2×500ml)で抽出した。合わせた有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、3−ブロモ−4,5−ジメチル安息香酸(9.0g、定量的)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に使用した。LCMS:方法A、2.259分、MS: ES+ 227.1, 229.0。
DMF(70ml)中の3−ブロモ−4,5−ジメチル安息香酸(9.0g、39.30mmol)の撹拌溶液に、室温でEDC HCl(8.26g、43.23mmol)及びHOBt(3.0g、19.65mmol)を加えた。反応混合液を室温で20分間撹拌した。反応混合液に塩化アンモニウム(4.24g、78.602mmol)を室温で加え、5時間撹拌した。得られた反応混合液を飽和NaHCO3溶液(500ml)に注ぎ、EtOAc(2×400ml)で抽出した。合わせた有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中40%EtOAc)により精製して、3−ブロモ−4,5−ジメチルベンズアミド(2.6g、11.45mmol)を得た。LCMS:方法A、1.982分、MS: ES+ 228.1, 230.1; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.98 (br s, 1 H), 7.93 (d, J=1.6 Hz, 1 H), 7.69 (d, J=1.6 Hz, 1 H), 7.39 (br s, 1 H), 2.35 (s, 6 H)。
1,4−ジオキサン:水(4:1、25ml)中の3−ブロモ−4,5−ジメチルベンズアミド(2.5g、11.013mmol)の撹拌溶液に、Cs2CO3(7.18g、22.026mmol)及びフェニルボロン酸(1.61g、13.216mmol)を室温で加えた。反応混合液を窒素を用いて10分間脱気した。Pd(PPh3)4(0.63g、0.551mmol)を室温で反応混合液に加えた。反応混合液を80℃で16時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、水(500ml)に注ぎ、EtOAc(2×200ml)で抽出した。合わせた有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中25%EtOAc)により精製して、5,6−ジメチル−[1,1’−ビフェニル]−3−カルボキサミド(2.5g、定量的)を得た。LCMS:方法A、2.031分、MS: ES+ 226.19。
THF(30ml)中の5,6−ジメチル−[1,1’−ビフェニル]−3−カルボキサミド(2.5g、11.11mmol)の撹拌溶液に、0℃で塩化チオニル(1.98g、16.67mmol)を加えた。反応混合液を80℃で16時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、水(500ml)に注ぎ、固体NaHCO3で塩基性にし、EtOAc(2×300ml)で抽出した。合わせた有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、5,6−ジメチル−[1,1’−ビフェニル]−3−カルボニトリル(2.9g、定量的)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に使用した。MS: ES+ 208.3。
CCl4(6ml)中の5,6−ジメチル−[1,1’−ビフェニル]−3−カルボニトリル(0.5g、2.40mmol)、AIBN(0.02g、0.12mmol)、及びNBS(1.7g、9.61mmol)の混合液を、80℃で16時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、濾過した。濾液を蒸発乾固して、5,6−ビス(ブロモメチル)−[1,1’−ビフェニル]−3−カルボニトリル(0.77g、2.13mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に使用した。
THF(6ml)中の5,6−ビス(ブロモメチル)−[1,1’−ビフェニル]−3−カルボニトリル(0.77g、2.13mmol)の撹拌溶液に、TEA(0.47g、4.68mmol)を0℃で加えた。反応混合液を0℃で5分間撹拌した。ベンジルアミン(0.25g、2.34mmol)を0℃で反応混合液に加えた。反応混合液を室温で16時間撹拌した。反応混合液を水(170ml)に注ぎ、EtOAc(2×100ml)で抽出した。合わせた有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、2−ベンジル−7−フェニルイソインドリン−5−カルボニトリル(0.7g、定量的)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に使用した。LCMS:方法A、1.974分、MS: ES+ 311.3。
MeOH(7ml)中の2−ベンジル−7−フェニルイソインドリン−5−カルボニトリル(0.5g、1.61mmol)の撹拌溶液に、塩酸ヒドロキシルアミン(0.13g、1.93mmol)及びDIPEA(0.31g、2.42mmol)を室温で加えた。反応混合液を80℃で16時間加熱した。得られた混合液を水(150ml)に注ぎ、固体クエン酸で酸性化し、EtOAc(100ml)で抽出した。水相を分離し、飽和NaHCO3溶液を使用して塩基性化し、EtOAc(2×100ml)で再抽出した。合わせた有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、2−ベンジル−N’−ヒドロキシ−7−フェニルイソインドリン−5−カルボキシミドアミド(0.36g、1.06mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に使用した。LCMS:方法A、1.635分、1.645分、MS: ES+ 344.3。
AcOH(2ml)中の2−ベンジル−N’−ヒドロキシ−7−フェニルイソインドリン−5−カルボキシミドアミド(0.05g、0.145mmol)及び無水酢酸(1ml)の混合液を、80℃で12時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、同じ方法により同じスケールで調製した3つの他のバッチと合わせた。得られた反応混合液を水(70ml)に注ぎ、固体NaHCO3を使用して塩基性化し、EtOAc(2×70ml)で抽出した。合わせた有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中20%EtOAc)により精製して、3−(2−ベンジル−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−5−メチル−1,2,4−オキサジアゾール(0.04g、0.109mmol)を得た。LCMS:方法A、1.948分、MS: ES+ 368.35; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.88 (s, 2 H), 7.48 (d, J=4.4 Hz, 4 H), 7.31 - 7.44 (m, 5 H), 7.23 - 7.27 (m,1 H), 3.98 (d, J=2.0 Hz, 4 H), 3.91 (s, 2 H), 2.67 (s, 3 H)。
THF(5ml)中の3−(2−ベンジル−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−5−メチル−1,2,4−オキサジアゾール(0.04g、0.109mmol)の撹拌溶液に、K2CO3(0.022g、0.163mmol)を室温で加えた。反応混合液を室温で5分間撹拌した。反応混合液に、THF中の臭化シアン(0.014g、0.131mmol)を0℃で滴加した。反応混合液を室温で4時間撹拌した。得られた反応混合液を濾過し、蒸発乾固した。得られた残留物を分取TLC(ヘキサン中30%EtOAc)により精製して、6−(5−メチル−1,2,4−オキサジアゾール−3−イル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボニトリル(0.014g、0.046mmol)を得た。LCMS:方法C、7.242分、MS: ES+ 303.15; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.97 (s, 1 H), 7.93 (s, 1 H), 7.46 - 7.58 (m, 5 H), 4.94 (d, J=10.8 Hz, 4 H), 2.68 (s, 3 H)。
n−ブタノール(5ml)中の4−アミノイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(CAS番号871013−98−8,0.1g、0.427mmol)の撹拌溶液に、触媒性TFA及び2−クロロキナゾリン(CAS番号6141−13−5;0.07g、0.427mmol)を室温で加えた。反応混合液を120℃で4時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、過剰の溶媒を留去した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中15〜18%EtOAc)により精製して、4−(キナゾリン−2−イルアミノ)−イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.108g、0.298mmol)を得た。LCMS:方法A、2.699分、MS: ES+ 363.60; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.76 (s, 1 H), 8.88 (s, 1 H), 8.26 (t, J=8.8 Hz, 1 H), 7.28 - 7.34 (m, 3 H), 7.00 (d, J=5.2 Hz, 2 H), 6.94 (t, J=7.6 Hz, 1 H), 4.62 (d, J=8.4 Hz, 4 H), 1.48 (s, 9 H)。
DCM(5ml)中の4−(キナゾリン−2−イルアミノ)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.1g、0.276mmol)の撹拌溶液に、0℃でTFA(2ml)を加えた。反応混合液を40℃で30分間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、真空下で蒸発乾固した。得られた残留物をDCM(3×10ml)と共沸させて、N−(イソインドリン−4−イル)キナゾリン−2−アミンTFA塩(0.115g、0.306mmol)を得た。LCMS:方法A、1.647分、MS: ES+ 263.36。
THF(5ml)中のN−(イソインドリン−4−イル)キナゾリン−2−アミンTFA塩(0.11g、0.292mmol)の撹拌溶液に、TEA(0.12g、1.17mmol)、及び臭化シアン(0.031g、0.292mmol)を−78℃で加えた。反応混合液を−78℃で0.5時間撹拌した。得られた反応混合液をEtOAc:水(1:3、40ml)の混合液で希釈し、EtOAc(3×20ml)で抽出した。合わせた有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた粗物質を分取HPLC精製に付した:(A)10mM酢酸アンモニウム水溶液(B)100%MeCN、カラム:Phenomenex Luna C8(250×21.2)mm、5ミクロン、流速15.0ml/分。これは、4−(キナゾリン−2−イルアミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル(0.017g、0.059mmol)を与えた。LCMS:方法E、4.051分、MS: ES+ 288.44; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.45 (s, 1 H), 9.33 (s, 1 H), 7.93 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 7.78 - 7.86 (m, 2 H), 7.60 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.33 - 7.41 (m, 2 H), 7.06 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 4.83 (s, 4 H)。
トルエン(10ml)中の3−アミノ−N−メチルイソキノリン−6−カルボキサミドTFA塩(中間体6、0.40g、1.262mmol)、4−ブロモイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(中間体1、0.15g、0.505mmol)、及びカリウムtert−ブトキシド(0.28g、2.525mmol)の懸濁液を、窒素を用いて室温で10分間脱気した。反応混合液にBINAP(0.047g、0.050mmol)及びPd2(dba)3(0.032g、0.050mmol)を室温で加えた。反応混合液を105℃で2時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、水(20ml)に注ぎ、EtOAc(2×40ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中4%MeOH)により精製して、4−((6−(メチルカルバモイル)イソキノリン−3−イル)アミノ)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.135g、0.322mmol)を得た。LCMS:方法A、2.278分、MS: ES+ 419.5。
標題化合物を、実施例1の工程d及びeについて記載された手順と同様の手順を使用して、上記中間体から合成した。LCMS:方法E、3.469分、MS: ES+ 344.43。
THFと水(1:1、4ml)中の4−ブロモ−6−ニトロイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(中間体3、0.15g、0.437mmol)の撹拌溶液に、Fe粉末(0.12g、2.185mmol)及び塩化アンモニウム(0.12g、2.185mmol)を室温で加えた。反応混合液を90℃で18時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、セライトハイフローを通して濾過し、EtOAc(15ml)で洗浄し、蒸発乾固した。得られた残留物をEtOAc(100ml)に再溶解し、水(20ml)、食塩水(20ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、6−アミノ−4−ブロモイソインドリン−3−カルボン酸tert−ブチル(0.15g、定量的)を得た。LCMS:方法A、2.351分、MS: ES+ 313.2, 315.2。
DMF(3ml)中のピリジン−3−カルボン酸(0.07g、0.574)の撹拌溶液に、室温でDIPEA(0.1g、0.766mmol)及びHATU(0.22g、0.574mmol)を加えた。反応混合液を室温で10分間撹拌した。反応混合液に、DMF中の6−アミノ−4−ブロモイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.12g、0.383mmol)の溶液を加えた。反応混合液を室温で2時間撹拌した。得られた反応混合液を水(10ml)に注ぎ、EtOAc(3×30ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(50ml)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた粗物質をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中1.5%MeOH)により精製して、4−ブロモ−6−(ニコチンアミド)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.135g、0.322mmol)を得た。LCMS:方法A、2.375分、MS: ES+ 418.6, 420.6; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.62 (d, J=4.8 Hz, 1 H), 9.10 (d, J=2.4 Hz, 1 H), 8.78 (dd, J=2.0 Hz, 5.2 Hz, 1 H), 8.28 - 8.32 (m, 1 H), 7.98 (s, 1 H), 7.75 (d, J=18.0 Hz, 1 H), 7.59 (dd, J=5.2 Hz, 8.0 Hz, 1 H), 4.72 (d, 8.8 Hz, 2 H), 4.51 (d, J=9.6 Hz, 2 H), 1.47 (s, 9 H)。
1,4−ジオキサン:水(4:1、10ml)中の4−ブロモ−6−(ニコチンアミド)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.12g、0.787mmol)、Cs2CO3(0.14g、0.43mmol)を、室温で撹拌した。反応混合液を窒素を使用して15分間脱気した後、Pd(PPh3)4(0.033g、0.0.29mmol)及びフェニルボロン酸(0.052g、0.43mmol)を加えた。得られた反応混合液を90℃で8時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、水(20ml)に注ぎ、EtOAc(3×20ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(20ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中2%MeOH)により精製して、6−(ニコチンアミド)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.11g、0.265mmol)を得た。LCMS:方法A、2.785分、ES- 414.5; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.56 (d, J=3.6 Hz, 1 H), 9.13 (d, J=1.6 Hz, 1 H), 8.77 (dd, J=1.6 Hz, 4.8 Hz, 1 H), 8.30 - 8.33 (m, 1 H), 7.82 (d, J=18.4 Hz, 1 H), 7.73 (d, J=14.4 Hz, 1 H), 7.57 - 7.61 (m, 1 H), 7.50 - 7.52 (m, 4 H), 7.43 - 7.45 (m, 1 H), 4.63 - 4.69 (m, 4 H), 1.45 (d, J=13.6 Hz, 9 H)。
DCM(5ml)中の6−(ニコチンアミド)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.1g、0.241mmol)の撹拌溶液に、室温でTFA(0.2ml)を加えた。反応混合液を室温で4時間撹拌した。反応混合液を蒸発乾固した。残留物をDCM(2×10ml)、ジエチルエーテル(20ml)で共沸蒸留し、真空下で乾燥して、N−(7−フェニルイソインドリン−5−イル)ニコチンアミドTFA塩(0.165g、定量的)を得た。LCMS:方法A、1.453分、MS: ES+ 336.59。
THF(5ml)中のN−(7−フェニルイソインドリン−5−イル)ニコチンアミドTFA塩(0.15g、0.349mmol)の撹拌溶液に、K2CO3(0.14g、1.048mmol)及び臭化シアン(0.05g、0.524mmol)を室温で加えた。反応混合液を室温で30分間撹拌した。得られた反応混合液を濾過し、蒸発乾固した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中2.1%MeOH)により精製して、N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)ニコチンアミド(g、mmol)を得た。LCMS:方法D、4.028分、ES+ 340.99; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.62 (s, 1 H), 9.13 (s, 1 H), 8.77 (d, J=3.6 Hz, 1 H), 8.31 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 7.85 (s, 1 H), 7.76 (s, 1 H), 7.59 (dd, J=4.8 Hz, 8.0 Hz, 1 H), 7.48 - 7.52 (m, 4 H), 7.43 - 7.44 (m, 1 H), 4.87 (s, 4 H)。
中間体4の工程a〜bに記載のように行った。
THF(5ml)中の1−メチルピペリジン−3−カルボン酸(CAS番号5657−70−5;Apollo Scientificから入手可能)(0.069g、0.483mmol)の撹拌溶液に、DIPEA(0.083g、0.644mmol)及びHATU(0.18g、0.0483mmol)を室温で加えた。反応混合液を室温で30分間撹拌した。反応混合液に6−アミノ−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(中間体4、0.1g、0.322mmol)を室温で加えた。反応混合液を室温で18時間撹拌し、次に80℃で1時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、同じ方法により同じスケールで調製した1つの他のバッチと合わせた。反応混合液を水(20ml)に注ぎ、EtOAc(2×30ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(20ml)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中20%EtOAc)により精製して、6−(1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.11g、0.252mmol)を得た。LCMS:方法A、2.024分、MS: ES+ 436.8; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.31 (s, 1 H), 7.56 - 7.62 (m, 2 H), 7.39 - 7.49 (m, 5 H), 4.63 (d, J=7.6 Hz, 2 H), 4.59 (s, 2 H), 3.38 - 3.41 (m, 4 H), 2.79 - 2.85 (m, 2 H), 2.74 (s, 3 H), 1.95 - 2.03 (m, 1 H), 1.71 - 1.78 (m, 1 H), 1.62 - 1.75 (m, 1 H), 1.43 (d, J=14.4 Hz, 9 H)。
DCM(5ml)中の6−(1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.09g、0.206mmol)の撹拌溶液に、室温でTFA(0.45ml)を加えた。反応混合液を室温で3時間撹拌した。反応混合液を蒸発乾固し、残留物をDCM(3×10ml)で共沸蒸留した。得られた残留物をジエチルエーテル(20ml)で粉砕し、真空下で乾燥して、1−メチル−N−(7−フェニルイソインドリン−5−イル)ピペリジン−3−カルボキサミドTFA塩(0.13g、定量的)を得た。LCMS:方法A、1.453分、MS: ES+ 336.59。
THF:DMF(1:0.1、5.5ml)中の1−メチル−N−(7−フェニルイソインドリン−5−イル)ピペリジン−3−カルボキサミドTFA塩(0.1g、0.222mmol)の撹拌溶液に、TEA(0.07g、0.668mmol)及び臭化シアン(0.026g、0.244mmol)を−78℃で加えた。反応混合液を−78℃で10分間撹拌した。反応混合液を水(10ml)を用いて−78℃でクエンチし、室温に温めた。反応混合液をEtOAc(3×20ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(20ml)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(中性シリカ;DCM中2%MeOH)により精製して、N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド(0.03g、0.083mmol)を得た。LCMS:方法D、4.282分、MS: ES+ 361.09; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.14 (s, 1 H), 7.64 (d, 1.6 Hz, 1 H), 7.55 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 7.45 - 7.48 (m, 4 H), 7.39 - 7.43 (m, 1 H), 4.81 (s, 4 H), 2.84 (d, J=10.4 Hz, 1 H), 2.68 - 2.71 (m, 1 H), 2.56 - 2.61 (m, 1 H), 2.18 (s, 3 H), 2.01 (t, J=10.8 Hz, 1 H), 1.79 - 1.88 (m, 2 H), 1.65 - 1.68 (m, 1 H), 1.36 - 1.51 (m, 2 H)。
DCM(2ml)中の6−アミノ−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(中間体4、0.055g、0.177mmol)の溶液に、0℃でTEA(0.049ml、0.354mmol)を加えた。反応混合液に0℃で塩化アセチル(0.016ml、0.224mmol)を加えた。反応混合液を0℃で30分間撹拌した。得られた反応混合液を水(5ml)に注ぎ、DCM(2×5ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、6−アセトアミド−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.040g、0.113mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、2.307分、MS: ES+ 297.33 (M-56)。
これは、実施例36の工程dとeについて記載された手順と同様の手順を使用して、上記中間体から合成した。LCMS:方法C、6.498分、MS: ES- 276.15; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.13 (s, 1 H), 7.18 - 7.47 (m, 7 H), 4.81 (s, 4 H), 2.06 (s, 3 H)。
6−アセトアミド−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを、実施例57の工程aに記載のように調製した。
NaH(鉱油中60%分散液、17mg、0.43mmol)を、無水THF(5ml)中の6−アセトアミド−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(100mg、0.28mmol)の溶液に、0℃でN2下で加え、混合液をこの温度で30分間撹拌した。ヨウ化メチル(20μl、0.31mmol)を滴加し、室温に加温した。反応混合液を室温で18時間撹拌した。反応が完了した後、反応混合液を水(10ml)に注ぎ、EtOAc(2×20ml)で抽出した。有機層を集め、食塩水(20ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、減圧下で濃縮した。残留物(145mg)をDCMに溶解し、12gのTelosシリカカラムでのフラッシュクロマトグラフィーにより、DCM/MeOH(100:0)〜(94:6)の勾配で精製して、6−(N−メチルアセトアミド)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(95mg、92%)を黄色固体として得た。LCMS:方法I、3.5分、MS: ES+ 367; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.39-7.48 (m, 5H), 7.04-7.12 (m, 2H), 4.70-4.76 (m, 4H), 3.30 (s, 3H), 1.94 (s, 3H), 1.50 (s, 9H)。
標題化合物を、実施例36の工程d及びeについて記載された手順と同様の手順を使用して、上記中間体から合成した。LCMS:方法I、3.29分、ES+292。
これは、実施例36と同様の方法で、1−メチルピペリジン−3−カルボン酸(CAS番号5657−70−5)を使用して行った。
工程b〜d
これは、実施例58の工程b〜dと同様の方法を使用して行った。LCMS:方法I、2.97分、MS: ES+ 375。
ピリジン(5ml)中の6−アミノ−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(中間体4、65mg、0.21mmol)の撹拌溶液に、塩化4−メチルピペラジン−1−カルボニル(CAS番号55112−42−0,42mg、0.21mmol)を加えた。反応混合液を室温で1時間撹拌した後、塩化4−メチルピペラジン−1−カルボニル(84mg、0.42mmol)を反応液に加え、室温で18時間撹拌した。次に、DMAP(26mg、0.21mmol)及び塩化4−メチルピペラジン−1−カルボニル(84mg、0.42mmol)を反応液に加え、これを室温で48時間撹拌した。次に溶媒を除去し、残留物に水(20ml)を加え、次に混合液をDCM(3×20ml)で抽出した。合わせた有機抽出液を食塩水(30ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、減圧下で溶媒を留去した。残留物をDCMに溶解し、12gのTelosシリカカラムでのフラッシュクロマトグラフィーによりDCM/MeOH(100:0)〜(80:20)の勾配を使用して精製して、6−(4−メチルピペラジン−1−イル)4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(45mg、50%)を黄色の油状物として得た。LCMS:方法I、3.67分、MS: ES+ 437。
実施例36の工程d及びeと同様の方法で行った。LCMS:方法I、3.52分、MS: ES+ 362。
DCM(5ml)中の6−アミノ−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(中間体4、100mg、0.323mmol)及びピリジン(39μl、0.484mmol)の撹拌溶液に、0℃、窒素下で塩化メタンスルホニル(25μl、0.323mmol)をゆっくり加えた。反応溶液を0℃で1時間撹拌し、次に室温まで加温した。反応液を水(10ml)に注ぎ、DCM(3×20ml)で抽出した。合わせた有機抽出液を食塩水(10ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で溶媒を留去した。残留物(132mg)をDCMに溶解し、12gのTelosシリカカラムでのフラッシュクロマトグラフィーによりDCM/MeOH(100:0)〜(95:5)の勾配を使用して精製して、6−(メチルスルホンアミド)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(106mg、85%)を黄色油状物として得た。LCMS:方法I、3.42分、MS: ES+ 389。
標題化合物を、実施例36の工程d及びeについて記載された手順と同様の手順を使用して、上記中間体から合成した。LCMS:方法I、3.66分、MS: ES+ 314。
これらは、スキームEに従って、実施例36に記載された手順と同様の手順を使用して、工程cで1−(((9H−フルオレン−9−イル)メトキシ)カルボニル)ピペリジン−3−カルボン酸(CAS番号158922−07−7;Combi Blockから入手可能)を使用して、3−((2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)カルバモイル)ピペリジン−1−カルボン酸(9−フルオレン−9−イル)メチルを得た。
DMF(10ml)中の3−((2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)カルバモイル)ピペリジン−1−カルボン酸(9H−フルオレン−9−イル)メチル(0.21g、0.369mmol)の撹拌溶液に、0℃でピペリジン(0.094g、1.107mmol)を加えた。反応混合液を0℃で1時間撹拌した。反応混合液を氷冷水(150ml)に注ぎ、EtOAc(3×70ml)で抽出した。合わせた有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた粗物質をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中13%MeOH)により精製した。得られた物質を分取HPLC精製に付した;移動相:(A)水中0.1%蟻酸、(B)MeCN:MeOH(1:1、v/v)、カラム:PhenomenexLuna C8(250×21.2)mm、5μm、流速10.0ml/分。これは、N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)ピペリジン−3−カルボキサミド(0.02g、0.058mmol)を与えた。LCMS:方法D、4.252分、MS: ES+ 347.11; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.27 (s, 1 H), 7.64 (s, 1 H), 7.56 (d, J=1.6 Hz, 1 H), 7.46 - 7.50 (m, 4 H), 7.40 - 7.43 (m, 1 H), 4.81 (s, 4 H), 3.45 - 3.50 (m, 1 H), 3.16 (d, J=12.0 Hz, 1 H), 3.01 (d, J=12.4, 1 H), 2.77 - 2.83 (m, 1 H), 2.64 - 2.67 (m, 2 H), 1.95 (d, J=12.0 Hz, 1 H), 1.70 - 1.73 (m, 1 H), 1.51 - 1.65 (m, 2 H)。
DCM(10ml)中の(1−メチルピペリジン−3−イル)メタノール(CAS番号7583−53−1;Ark Pharmから入手可能)(0.5g、3.876mmol)の撹拌溶液に、TEA(0.78g、7.752mmol)及び塩化メタンスルホニル(0.66g、5.804mmol)を0℃で加えた。反応混合液を室温で5時間撹拌した。反応混合液を水(20ml)及び飽和NaHCO3溶液(10ml)に注ぎ、EtOAc(3×50ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水溶液(20ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中5%MeOH)により精製して、メタンスルホン酸(1−メチルピペリジン−3−イル)メチル(0.65g、3.136mmol)を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 4.04 - 4.13 (m, 2 H), 3.17 (s, 3 H), 2.68 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 2.57 (d, J=10.4 Hz, 1 H), 2.15 (s, 3 H), 1.87 - 1.92 (m, 2 H), 1.76 (t, J=10 Hz, 1 H), 1.59 - 1.63 (m, 2 H), 1.41 - 1.50 (m, 1 H), 0.97 - 1.05 (m, 1 H)。
トルエン(3ml)中の6−アミノ−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(中間体4、0.18g、0.58mmol)の撹拌溶液に、メタンスルホン酸(1−メチルピペリジン−3−イル)メチル(0.42g、2.029mmol)を室温で加えた。反応混合液を160℃で48時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、蒸発乾固した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中5.5%MeOH)により精製して、6−(((1−メチルピペリジン−3−イル)メチル)アミノ)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.05g、0.118mmol)を得た。LCMS:方法A、2.146分、ES+ 422.63。
DCM(3ml)中の6−(((1−メチルピペリジン−3−イル)メチル)アミノ)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.045g、0.107mmol)の撹拌溶液に、0℃で1,4−ジオキサン(0.23ml)中の4M HClを滴加した。反応混合液を室温で3時間撹拌した。溶媒を真空下で蒸留し、得られた残留物をn−ペンタン(10ml)で洗浄し、最後に真空下で乾燥して、N−((1−メチルピペリジン−3−イル)メチル)−7−フェニルイソインドリン−5−アミンHCl(0.037g、0.103mmol)を得た。LCMS:方法A、1.444分、ES+ 322.5。
THF:DMF(2:0.5,2.5ml)中のN−((1−メチルピペリジン−3−イル)メチル)−7−フェニルイソインドリン−5−アミン塩酸塩(0.035g、0.097mmol)の撹拌溶液に、TEA(0.029g、0.29mmol)を−40℃で加えた。反応混合液を−40℃で10分間撹拌した。臭化シアン(0.012g、0.117mmol)を−40℃で反応混合液に加え、30分間撹拌した。得られた反応混合液を水(20ml)に注ぎ、10%DCM/MeOH(3×30ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(10ml)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー(DCM中5%MeOH)により精製した。得られた物質を、分取TLCにより移動相としてDCM中の13%MeOHを使用して再精製して、6−(((1−メチルピペリジン−3−イル)メチル)アミノ)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボニトリル(0.002.4g、mmol)を得た。LCMS:方法E、3.444分、ES+ 347.31, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.35 - 7.47 (m, 5 H), 6.55 (s, 1 H), 6.49 (s, 1 H), 5.93 - 5.96 (m, 1 H), 4.69 (d, J=5.6 Hz, 4 H), 2.88 - 2.93 (m, 3 H), 2.69 - 2.78 (m, 1 H), 2.18 - 2.28 (m, 3 H), 1.94 - 2.13 (m, 1 H), 1.80 - 1.94 (m, 2 H), 1.65 - 1.76 (m, 2 H), 1.48 - 1.55 (m, 1 H), 0.96 - 0.98 (m, 1 H)。
1,4−ジオキサン(5.4ml)及び水(0.6ml)中の4−ブロモ−3−クロロベンゾニトリル(150mg、0.69mmol)、4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(中間体2、287mg、0.83mmol)及びK2CO3(238mg、1.73mmol)の混合液を、窒素バブリングにより5分間脱気した。次にPd(PPh3)4(79mg、0.069mmol)を加えた。混合液を18時間加熱還流し、次に室温まで冷却した。混合液をシリカパッドを通して濾過し、EtOAc(200ml)で洗浄した。濾液から減圧下で溶媒を留去した。残留物(500mg)をDCMに溶解し、シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーによりヘキサン/EtOAc(90:10)を用いて精製して、4−(2−クロロ−4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(242mg、99%)を明るい黄色の固体として得た。LCMS:方法I、3.66分、MS: ES+ 355, 357; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.80 (m, 1 H), 7.63 (m, 1 H), 7.33-7.41 (m, 3 H), 7.14 (m, 1 H), 4.77 (m, 2 H), 4.56 (m, 2 H), 1.49 (m, 9 H)。
DCM(9ml)中の4−(2−クロロ−4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(232mg、0.65mmol)の溶液にTFA(1ml)を加え、得られた溶液を室温18時間撹拌した。混合液から減圧下で溶媒を留去し、トルエン(20ml)及びMeCN(2×20ml)と連続的に共沸させて3−クロロ−4−(イソインドリン−4−イル)ベンゾニトリルTFA塩(260mg、0.40mmol、定量的)を暗い黄色のガム状物として得た。LCMS:方法I、2.81分、MS: ES+ 255, 257; 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 8.02 (d, J = 1.6 Hz, 1 H), 7.81 (dd, J = 7.9, 1.6 Hz, 1 H), 7.53-7.58 (m, 3 H), 7.32-7.36 (m, 1 H), 4.72 (s, 2 H), 4.46 (s, 2 H).。
THF(7ml)中の3−クロロ−4−(イソインドリン−4−イル)ベンゾニトリルTFA塩(252mg、0.65mmol)及びTEA(0.30ml、2.13mmol)の溶液を、窒素雰囲気下で0℃に冷却し、次に臭化シアン(MeCN中5M、0.19ml、0.93mmol)を加えた。混合液を0℃で2時間撹拌した。混合液を水(40ml)に注ぎ、EtOAc(3×40ml)で抽出した。合わせた有機抽出液をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で溶媒を留去した。残留物をDCMに溶解し、12gのTelosシリカカラムでフラッシュクロマトグラフィーにより、ヘキサン/EtOAc(90:10)〜(60:40)の勾配を使用して精製して、4−(2−クロロ−4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル(140mg、2工程で77%)を白色固体として得た。LCMS:方法J、4.17分、MS: ES+ 280, 282; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.81 (d, J = 1.6 Hz, 1 H), 7.65 (dd, J = 7.8, 1.6 Hz, 1 H), 7.45 (t, J = 7.6 Hz, 1 H), 7.38 (J = 7.8 Hz, 1 H), 7.35 (dd, J = 7.6, 0.8 Hz, 1 H), 7.19 (dd, J = 7.6, 0.8 Hz, 1 H) 4.88 (s, 2 H), 4.60 (br s, 2 H)。
1,4−ジオキサン:水(4:1、20ml)中の4−ブロモイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(中間体1、0.35g、1.185mmol)の撹拌溶液に、Cs2CO3(0.77g、2.371mmol)を窒素下で室温で加えた。混合液を窒素を用いて15分間パージした。Pd(PPh3)4(0.14g、0.118mmol)を反応混合液に加え、窒素を用いて10分間パージした。反応混合液に3−(メトキシカルボニル)フェニルボロン酸(CAS番号99769−19−4;Combi Blocksから入手可能)(0.26g、1.422mmol)を加えた。反応混合液を80℃で24時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、水(20ml)に注ぎ、EtOAc(3×50)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(80ml)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた粗物質をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中5%EtOAc)により精製して、4−(3−(メトキシカルボニル)フェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.33g、0.932mmol)を得た。LCMS:方法A、2.782分、MS: ES+ 298.4 (M-56); 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.04 - 8.11 (m, 2 H), 7.62 (d, J=7.2 Hz, 1 H), 7.49 - 7.58 (m, 2 H), 7.40 (t, J=7.2 Hz, 1 H), 7.31 - 7.33 (m, 1 H), 4.69 - 4.79 (m, 4 H), 3.95 (s, 3 H), 1.53 (s, 9 H)。
THF:水(4:1、10ml)中の4−(3−(メトキシカルボニル)フェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.32g、0.903mmol)の撹拌溶液に、NaOH(0.072g、1.806mmol)を室温で加えた。反応混合液を80℃で18時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、EtOAc(50ml)で抽出した。水相を1M HClを使用して酸性化し、EtOAc(3×50ml)で再抽出した。合わせた有機相を分離し、食塩水(20ml)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、3−(2−(tert−ブトキシカルボニル)イソインドリン−4−イル)安息香酸(0.25g、0.737mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に使用した。LCMS:方法A、2.413分、MS: ES- 338.58; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13.09 (br s 1 H), 7.98 (t, J=7.2 Hz, 2 H), 7.77 - 7.64 (m, 1 H), 7.62 (t, J=8.0 Hz, 1 H), 7.33 - 7.46 (m, 3 H), 4.66 (d, J=10.8 Hz, 4 H), 1.43 (d, J=15.2 Hz, 9 H)。
THF(5ml)中の3−(2−(tert−ブトキシカルボニル)イソインドリン−4−イル)安息香酸(0.1g、0.295mmol)の撹拌溶液に、EDC・HCl(0.113g、0.589mmol)、HOBt(0.054g、0.353mmol)、及びベンジルアミン(0.038g、0.353mmol)を室温で加えた。反応混合液を室温で4時間撹拌した。得られた反応混合液を水(10ml)に注ぎ、EtOAc(3×20ml)で抽出した。合わせた有機層を分離し、飽和NaHCO3溶液(5ml)及び食塩水(5ml)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた粗物質をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中35%EtOAc)により精製して、4−(3−(ベンジルカルバモイル)フェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.11g、0.257mmol)を得た。LCMS:方法A、2.664分、MS: ES+ 373.58 (M-56); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.13 - 9.18 (m, 1 H), 8.01 (d, J=4.4 Hz, 1 H), 7.94 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 7.69 (t, J=7.2 Hz, 1 H), 7.59 (t, J=7.6 Hz, 1 H), 7.37 - 7.41 (m, 3 H), 7.33 - 7.34 (m, 4 H), 7.24 - 7.27 (m, 1 H), 4.67 (d, J=8.0 Hz, 4 H), 4.51 (d, J=5.6 Hz, 2 H), 1.43 (d, J=18.0 Hz, 9 H)。
標題化合物を、実施例1の工程d及びeについて記載された手順と同様の手順を使用して、上記中間体から合成した。LCMS:方法A、3.977分、MS: ES+ 354.53; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.15 (t, 4.8 Hz, 1 H), 7.98 (s, 1 H), 7.93 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 7.68 (d, J=7.2 Hz, 1 H), 7.58 (t, J=7.6 Hz, 1 H), 7.44 - 7.49 (m, 2 H), 7.33 - 7.42 (m, 5 H), 7.25 - 7.27 (m, 1 H), 4.88 (d, J=18.0 Hz, 4 H), 4.51 (d, J=5.6 Hz, 2 H)。
実施例73について記載された手順と同様の手順を使用して、工程aにおいて2−(エトキシカルボニル)フェニルボロン酸(CAS番号380430−53−5)及び工程dにおいてN−[(9−フルオレニル)−メトキシカルボニル]−1,2−エチレンジアミン(CAS番号166410−32−8)をを使用して行った。
THF(6ml)中の(2−(2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−ベンズアミド)エチル)カルバミン酸(9H−フルオレン−9−イル)メチル(0.08g、0.515mmol)の撹拌溶液に、ピペリジン(0.039g、0.454mmol)を0℃で加えた。反応混合液を室温で16時間撹拌した。得られた反応混合液を水(70ml)に注ぎ、DCM(2×50ml)で抽出した。得られた粗物質をフラッシュクロマトグラフィー(中性の酸化アルミニウム;DCM中15%MeOH)により精製して、粗N−(2−アミノエチル)−2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)ベンズアミド(0.04g、0.131mmol)を得た。得られた物質を分取HPLC[移動相:(A)10mM重炭酸アンモニウム(B)100%MeCN、カラム:Phenomenex Gemini C18I(250x21.2)mm、15.0μm、流速15.0ml/分]によりさらに精製して、N−(2−アミノエチル)−2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)ベンズアミド(0.02g、0.065mmol)を得た。得られた物質をDCM(5ml)に懸濁し、DCM層を注意深くデカントし、このプロセスを2回繰り返した。合わせたDCM相を濾過し、真空下で溶媒を留去して、N−(2−アミノエチル)−2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)ベンズアミド(0.0018g、0.0058mmol)を得た。LCMS:方法D、3.225分、MS: ES+ 307.03。
DMF(3ml)中の4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(中間体2、0.3g、0.804mmol)の撹拌溶液に、室温でCs2CO3(0.52g、1.608mmol)を加えた。反応混合液を10分間脱気した。反応混合液にPd(PPh3)4(0.018g、0.016mmol)及び4−ブロモピコリン酸メチル(CAS番号29681−42−3;0.17g、0.804mmol)を室温で加えた。反応混合液をさらに5分間脱気した。反応混合液を120℃で8時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、水(100ml)で希釈し、EtOAc(2×100ml)で抽出した。合わせた有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、4−(2−(メトキシカルボニル)ピリジン−4−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.45g、定量的)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に使用した。LCMS:方法A、2.234分、MS: ES+ 355.28。
THF(2ml)中の4−(2−(メトキシカルボニル)ピリジン−4−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.43g、1.215mmol)の撹拌溶液に、DIPEA(0.08g、0.607mmol)及びトリメチルアルミニウム溶液(トルエン中2M)(3.03ml、6.073mmol)を室温で加えた。ベンジルアミン(0.16g、1.458mmol)を室温で反応混合液に加えた。反応混合液を80℃で1時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、水(100ml)で希釈し、EtOAc(2×100ml)で抽出した。合わせた有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、4−(2−(ベンジルカルバモイル)ピリジン−4−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.47g、1.095mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に使用した。LCMS:方法A、2.600分、MS: ES+ 430.33。
標題化合物を、実施例1の工程d及びeについて記載された手順と同様の手順を使用して、上記中間体から合成した。得られた粗製物質を分取HPLC精製[移動相:(A)水中の0.1%蟻酸(B)MeCN中の0.1%蟻酸、カラム:Phenomenex Luna C8(250x21.2)mm、5μm、流速20.0ml/分]に付して、N−ベンジル−4−(2−シアノイソインドリン−4−イル)ピコリンアミドを得た。LCMS:方法E、4.307分、MS: ES+ 355.28; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.46 (t, J=6.8 Hz, 1 H), 8.73 (d, J=3.9 Hz, 1 H), 8.09 (d, J=1.2 Hz, 1 H), 7.78 (dd, J=1.6 Hz, 4.8 Hz, 1 H), 7.52 - 7.55 (m, 2 H), 7.44 - 7.47 (m, 1 H), 7.31 - 7.37 (m, 4 H), 7.23 - 7.26 (m, 1 H), 4.95 (s, 2 H), 4.86 (s, 2 H), 4.52 (d, J=6.4 Hz, 2 H)。
DCM(1ml)中の化合物1(0.2mmol)の溶液に、HATU(0.2mmol)を加えた。反応混合液を0℃で20分間撹拌した。反応混合液に、4−アミノイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(CAS番号871013−98−8)(0.2mmol)及びDIPEA(0.6mmol)を室温で加えた。反応混合液を室温で16時間撹拌した。得られた混合液を減圧下で濃縮した。得られた残留物を分取TLC(PE/EtOAc=1:1)により精製して、化合物2を得た。
EtOAc(1ml)中の化合物2の溶液に、HCl/EtOAc(4M、1ml)を加えた。反応混合液を室温で2時間撹拌した。得られた混合液を減圧下で濃縮した。残留物3をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。
EtOH(2ml)中の化合物3の溶液に、臭化シアン(0.2mmol)及びNaHCO3(0.6mmol)を加えた。反応混合液を室温で16時間撹拌した。得られた混合液を減圧下で濃縮した。粗製物を分取逆相HPLC(A:水中0.078%CH3COONH4、B:MeCN)により精製して、化合物4を得た。
THF(3ml)中の2−(tert−ブトキシカルボニル)イソインドリン−4−カルボン酸(中間体7、0.3g、1.14mmol)の溶液に、EDC(0.12g、1.254mmol)及びHOBt(0.088g、0.57mmol)mmol)を室温で窒素雰囲気下で加えた。ベンジルアミン(0.11g、1.02mmol)を加え、反応混合液を室温で40分間撹拌した。得られた反応混合液を水(100ml)に注ぎ、固体NaHCO3で塩基性化した。得られた混合液をEtOAc(2×100ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、4−(ベンジルカルバモイル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.4g、1.13mmol)を得た。LCMS:方法A、2.340分、MS: ES+ 370.48 (M+18)。
EtOAc(5ml)中の4−(ベンジルカルバモイル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.4g、1.13mmol)の溶液に、0℃でTFA(1ml、11.36mmol)を加えた。反応混合液を80℃で3時間撹拌した。反応混合液を室温まで冷却し、減圧下で濃縮して、N−ベンジルイソインドリン−4−カルボキサミドTFA塩(0.513g、1.40mmol)を得た。LCMS:方法A、1.583分、MS: ES+ 253.43。
THF(3ml)中のN−ベンジルイソインドリン−4−カルボキサミドTFA塩(0.513g、1.39mmol)の溶液に、室温でK2CO3(0.55g、4.02mmol)を加え、5分間撹拌した。臭化シアン(0.23g、2.21mmol)を加え、反応混合液を室温で1時間撹拌した。得られた反応混合液を真空下で濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中70%EtOAc)により精製して、N−ベンジル−2−シアノイソインドリン−4−カルボキサミド(0.114g、0.41mmol)を得た。LCMS:方法B、5.531分、MS: ES+ 278.1; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.12 (t, J = 4 Hz, 1 H), 7.81 (d, J = 7.2 Hz, 1 H), 7.44 - 7.55 (m, 2 H), 7.30 - 7.40 (m, 4 H), 7.23 - 7.28 (m, 1 H), 4.99 (s, 2 H), 4.78 (s, 2 H), 4.47 (d, J = 6 Hz, 2 H)。
MeCN(120ml)中の2,3−ジメチル−6−ニトロアニリン(CAS番号59146−96−2、Alfa aesarから入手可能)(4.5g、27.1mmol)の溶液に、亜硝酸tert−ブチル(4.96ml、40.6mmol)を0℃で滴加した。反応混合液を0℃で45分間撹拌した。臭化銅(II)(4.23g、10.83mmol)を0℃で反応混合液に少しずつ加えた。反応混合液を室温に温め、20時間撹拌した。得られた反応混合液を、同じ方法により同じスケールで調製した1つの他のバッチと合わせた。反応混合液を飽和NaHCO3溶液(250ml)に注いだ。得られた反応混合液をEtOAc(3×70ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(2×50ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中の2.4%EtOAc)により精製して、2−ブロモ−3,4−ジメチル−1−ニトロベンゼン(10.5g、45.857mmol)を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.68 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.41(d, J=8.4 Hz, 1H), 2.47 (s, 6H)。
水(132ml)及びピリジン(52.5ml)の混合液に、2−ブロモ−3,4−ジメチル−1−ニトロベンゼン(5.25g、22.83mmol)を室温で加えた。反応混合液を60℃で加熱した。KMnO4(56.49g、376.6mmol)を、60℃で反応混合液に15分かけて少しずつ加えた。反応混合液を90℃で4時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、同じ方法により同じスケールで調製した1つの他のバッチと合わせた。反応混合液をセライト床を通して濾過し、熱水(50ml)で洗浄した。得られた濾液を0℃に冷却し、1M HClを使用してpH4に酸性化した。得られた混合液をジエチルエーテル(3×50ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(2×50ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、3−ブロモ−4−ニトロフタル酸(7.2g、24.920mmol)を得た。LCMS:方法A、1.577分、MS: ES- 288。
o−キシレン(50ml)中の3−ブロモ−5−ニトロフタル酸(7.2g、24.920mmol)の溶液に、室温で尿素(4.48g、74.76mmol)を加えた。反応混合液を150℃で8時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却した。得られた反応混合液を水(70ml)に注ぎ、EtOAc(3×35ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(2×40ml)で洗浄した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中20〜25%EtOAc)により精製して、4−ブロモ−5−ニトロイソインドリン−1,3−ジオン(3.5g、12.962mmol)を得た。LCMS:方法A、1.832分、MS: ES- 269; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 11.88 (s, 1H), 8.34 (d, J=8.0 Hz, 1H) 8.01(d, J=8.0 Hz, 1H)。
THF(5ml)中の4−ブロモ−6−ニトロイソインドリン−1,3−ジオン(0.15g、0.555mmol)の溶液に、NaBH4(0.314g、8.332mmol)を室温で加えた。BF3・Et2O(1.03ml、8.332mmol)を、0℃で反応混合液に滴加した。反応混合液を0℃で20分間撹拌した。次に、反応混合液を70℃で70時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却した。追加のBF3・Et2O(0.35ml、2.775mmol)を、0℃で反応混合液に加えた。次に、反応混合液を70℃で16時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、同じ方法により同じスケールで調製した19個の他のバッチと合わせた。反応混合液を1M HCl(40ml)に注ぎ、100℃で30分間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、飽和NaOH溶液(250ml)を使用して塩基性化した。合わせた有機相を食塩水(2×70ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、4−ブロモイソインドリン−5−アミン(1.0g、4.716mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に使用した。LCMS:方法I、3.240分、MS: ES+ 212.85, 214.8; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 6.93 (d, J=8 6.93 Hz, 1H), 6.65 (d, J=8 Hz, 1H), 5.18 (br s, 2H), 4.09 (s, 2H), 4.01(s, 2H)。
THF(20ml)中の4−ブロモイソインドリン−5−アミン(1.0g、4.716mmol)の溶液に、0℃でTEA(1.9ml、14.148mmol)を加えた。Boc無水物(0.82g、3.772mmol)を0℃で反応混合液に加えた。反応混合液を室温で1時間撹拌した。得られた反応混合液を水(50ml)に注ぎ、EtOAc(3×30ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(2×50ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中30%EtOAc)により精製して、5−アミノ−4−ブロモイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.5g、1.602mmol)を得た。LCMS:方法A、2.337分、MS: ES+ 313.1, 315.1; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.00 (t, J=7.6 Hz, 1H), 6.72 (d, J=8.4 Hz, 1H), 5.30 (br s, 2H), 4.53(d, J=10.4 Hz, 2H), 4.43(d, J=10.4 Hz, 2H), 1.45 (d, J=4 Hz, 9H)。
THF(15ml)中の5−アミノ−4−ブロモイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.2g、0.641mmol)の溶液に、0℃でK2CO3(0.26g、1.923mmol)を加えた。反応混合液に0℃で塩化アセチル(0.05ml、0.769mmol)を滴加した。反応混合液を室温で2時間撹拌した。得られた反応混合液を飽和NaHCO3溶液(30ml)に注ぎ、EtOAc(3×10ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(2×15ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、5−アセトアミド−4−ブロモイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.14g、0.395mmol)を得た。LCMS:方法A、2.132分、MS ES- 353.09。
1,4−ジオキサン:水(8:2)(15ml)中の5−アセトアミド−4−ブロモイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.14g、0.395mmol)、フェニルボロン酸(0.096g、0.790mmol)、及びNa2CO3(0.083g、0.790mmol)を、室温で30分間脱気した。PdCl2(dppf)(0.029g、0.039mmol)を室温で反応混合液に加えた。反応混合液を80℃で4時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却した。得られた反応混合液を飽和NaHCO3溶液(30ml)に注ぎ、EtOAc(3×10ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(2×15ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中25〜30%EtOAc)により精製して、5−アセトアミド−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.11g、0.312mmol)を得た。LCMS:方法A、2.275分、MS: ES+ 353.3。
DCM(20ml)中の5−アセトアミド−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.1g、0.273mmol)の溶液に、室温でTFA(0.7ml)を加えた。反応混合液を室温で1時間撹拌した。得られた反応混合液を減圧下で濃縮した。得られた残留物をDCM(3×25ml)で共沸蒸留し、最後に高真空下で乾燥して、N−(4−フェニルイソインドリン−5−イル)アセトアミドTFA塩(0.12g、0.327mmol)を得た。LCMS:方法I、2.550分、MS: ES+ 252.96。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。
THF(20ml)中のN−(4−フェニルイソインドリン−5−イル)アセトアミドTFA塩(0.12g、0.327mmol)の溶液に、室温でK2CO3(0.145g、0.983mmol)を加えた。臭化シアン(0.04g、0.393mmol)を室温で反応混合液に加えた。反応混合液を室温で10分間撹拌した。得られた反応混合液を飽和NaHCO3溶液(30ml)に注ぎ、EtOAc(3×10ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(2×50ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中2%MeOH)により精製して、標題化合物(0.05g、0.180mmol)を得た。LCMS:方法D、3.585分、MS: ES+ 277.89; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.10 (s, 1H), 7.32 - 7.46 (m, 4H), 7.27 - 7.29 (m, 3H), 4.82 (s, 2H), 4.56 (s, 2H), 1.80 (s, 3H)。
CCl4(150ml)中の3,6−ジクロロ−4,5−ジメチルピリダジン(CAS番号34584−69−5、Accela chembioから入手可能)(6g、33.9mmol)の溶液に、NBS(18.08g、101.6mmol)及びAIBN(0.055g、0.33mmol)を室温で加えた。反応混合液を80℃で16時間加熱した。得られた反応混合液を濾過し、溶媒を留去して、4,5−ビス(ブロモメチル)−3,6−ジクロロピリダジン(11g、32.8mmol)を得た。LCMS:方法A、2.102分、MS: ES+ 335.18。
DMF中のトリチルアミン(CAS番号5824−40−8;8.5g、32.93mmol)の溶液に、室温でDIPEA(17.6ml、98.8mmol)を加えた。反応混合液に4,5−ビス(ブロモメチル)−3,6−ジクロロピリダジン(11g、32.85mmol)を室温で加えた。反応混合液を60℃で2時間撹拌した。得られた混合液を水(300ml)に注ぎ、EtOAc(2×200ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた粗物質をカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中2%EtOAc)により精製して、1,4−ジクロロ−6−トリチル−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリダジン(1.5g、3.46mmol)を得た。LCMS:方法A、3.023分、MS: ES+ 243.33。
1,4−ジオキサン(14ml)中の1,4−ジクロロ−6−トリチル−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリダジン(1.4g、3.24mmol)の溶液に、フェニルボロン酸(0.395g、3.24mmol)を室温で加えた。水(0.5ml)中のNa2CO3(1.05g、9.721mmol)の溶液を、室温で反応混合液に加えた。反応混合液をN2で15分間脱気した。Pd(PPh3)4(0.375g、0.324mmol)を室温で反応混合液に加えた。反応混合液を80℃で4時間加熱した。得られた混合液を室温まで冷却し、水(25ml)に注いだ。得られた混合液をEtOAc(3×15ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中5%EtOAc)により精製して、1−クロロ−4−フェニル−6−トリチル−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリダジン(0.38g、0.80mmol)を得た。LCMS:方法A、3.076分、MS: ES+ 474.5。
DMF(8ml)中の1−クロロ−4−フェニル−6−トリチル−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリダジン(0.3g、0.63mmol)の溶液に、1−メチル−1H−ピラゾール−4−ボロン酸ピナコールエステル(CAS番号761446−44−0)(0.131g、0.634mmol)及びK2CO3(0.262g、1.902mmol)を室温で加えた。反応混合液をN2で15分間脱気した。Pd(PPh3)4(0.073g、0.063mmol)を室温で反応混合液に加えた。反応混合液をマイクロ波中110℃で30分間加熱した。得られた混合液を水(30ml)に注ぎ、EtOAc(3×10ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、1−(1−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)−4−フェニル−6−トリチル−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[[3,4−d]ピリダジン(0.4g、0.77mmol)を得た。LCMS:方法A、2.742分、MS: ES+ 520.58。
DCM(5ml)中の1−(1−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)−4−フェニル−6−トリチル−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリダジン(0.35g、0.674mmol)に、0℃でTFA(0.153g、1.34mmol)を加えた。反応混合液を室温で1時間撹拌した。得られた反応混合液を減圧下で濃縮して、1−(1−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)−4−フェニル−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリダジンTFA塩(0.3g、0.562mmol)を得た。LCMS:方法A、1.401分、MS: ES+ 278.53。
THF(6ml)中の1−(1−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)−4−フェニル−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリダジンTFA塩(0.3g、0.562mmol)の溶液に、室温でK2CO3(0.44g、3.18mmol)を加え、10分間撹拌した。臭化シアン(0.11g、1.08mmol)を室温で反応混合液に加え、1時間撹拌した。得られた混合液を水(10ml)に注ぎ、EtOAc(3×5ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた粗物質を、分取HPLCによりWaters Sunfire C18(250×19)mm、5μmカラムを使用し、移動相として35〜100%MeCN/水を流速16.0ml/mで使用して、1−(1−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリダジン−6−カルボニトリル(0.016g、0.052mmol)を得た。LCMS:方法E、3.302分、MS: ES+ 373.53; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.45 (s, 1 H), 8.14 (s, 1 H), 7.89 (dd, J = 1.6, 7.6 Hz, 2 H), 7.54 - 7.60 (m, 3 H), 5.18 (s, 2 H), 5.12 (s, 2 H), 3.96 (s, 3 H)。
DCM(30ml)中の3,4−ジメチル安息香酸(5.000g、33.3mmol)の溶液に、0℃でAlCl3(6.6g、49.624mmol)を加えた。反応混合液を室温で30分間撹拌した。DCM(10ml)中の臭素(3.500g、22.01mmol)の溶液を加え、反応混合液を室温で1時間撹拌した。得られた反応混合液を、同じ方法により同じスケールで調製した2つの他のバッチと合わせ、減圧下で溶媒を留去した。得られた混合液を氷冷水(120ml)に注ぎ、EtOAc(2×200ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、3−ブロモ−4,5−ジメチル安息香酸(22.00g、96.49mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法E、4.151分、MS: ES+ 229.03。
MeOH(200ml)中の3−ブロモ−4,5−ジメチル安息香酸(22.00g、96.49mmol)の溶液に、室温で濃H2SO4(5ml)を加えた。反応混合液を12時間還流した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、減圧下で濃縮した。得られた混合液を水(300ml)に注ぎ、EtOAc(3×200ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、3−ブロモ−4,5−ジメチル安息香酸メチル(15.00g、61.73mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.92 (d, J=1.6 Hz, 1 H), 7.75 (d, J=1.6 Hz, 1 H), 3.84 (s, 3 H), 2.37 (s, 6 H)。
CCl4(250ml)中の安息香酸3−ブロモ−4,5−ジメチル(25.00g、102.88mmol)の溶液に、室温でNBS(36.6g、205.62mmol)を加えた。得られた反応混合液をUV光源に暴露して温度を上げ、このようにして反応混合液を80℃で15分間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却した。得られた反応混合液をセライト床を通して濾過し、CCl4(2×50ml)で洗浄した。合わせた濾液を減圧下で濃縮して、3−ブロモ−4,5−ビス(ブロモメチル)安息香酸メチル(46.0g、定量的)を得た。LCMS:方法E、5.174分;1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.83 - 8.11 (m, 2 H), 4.79 - 4.95 (m, 2 H), 3.86 - 3.88 (m, 2 H), 2.57 (s, 3 H).。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。
THF(200ml)中の3−ブロモ−4,5−ビス(ブロモメチル)安息香酸メチル(46.00g、114.71mmol)の溶液に、0℃でTEA(24.2ml、174.2mmol)を加えた。ベンジルアミン(12.40g、115.9mmol)を0℃で反応混合液に加えた。得られた反応混合液を室温で5時間撹拌した。得られた反応混合液を水(200ml)に注ぎ、EtOAc(2×300ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中20%EtOAc)により精製して、2−ベンジル−7−ブロモイソインドリン−5−カルボン酸メチル(6.00g、17.34mmol)を得た。LCMS:方法E、3.337分、MS: ES+ 346.02。
クロロベンゼン(12.4ml)中の2−ベンジル−7−ブロモイソインドリン−5−カルボキシレート(2.000g、5.797mmol)の溶液に、4Åのモレキュラーシーブ(1.1g)を室温で加えた。得られた反応混合液を室温で30分間撹拌した。クロロ蟻酸1−クロロエチル(1.650g、11.546mmol)を室温で反応混合液に加えた。得られた反応混合液を90℃で2時間加熱した。得られた反応混合液をセライト床を通して濾過し、クロロベンゼン:MeOH(1:1、10ml)で洗浄した。合わせた濾液を70℃で2時間加熱した。得られた反応混合液を室温で12時間撹拌した。得られた沈殿物を真空下で濾別し、n−ヘキサン(30ml)で洗浄し、真空下で乾燥して、7−ブロモイソインドリン−5−カルボン酸メチルHCl塩(1.500g、5.128mmol)を得た。LCMS:方法A、1.432分、MS: ES+ 256.18。
DMF(30ml)中の7−ブロモイソインドリン−5−カルボン酸メチルHCl塩(1.500g、5.128mmol)の溶液に、0℃でTEA(0.710g、7.029mmol)を加えた。Boc無水物(1.270g、5.825mmol)を0℃で反応液に加えた。反応混合液を室温で3時間撹拌した。得られた反応混合液を氷冷水(100ml)に注ぎ、EtOAc(3×80ml)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をn−ヘキサン(2×5ml)で粉砕して、7−ブロモイソインドリン−2,5−ジカルボン酸2−(tert−ブチル)5−メチル(1.700g、4.775mmol)を得た。LCMS:方法C、8.421分、MS: ES+ 300 (M-56); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.99 (s, 1 H), 7.93 (d, J=9.2 Hz, 1 H), 4.74 (d, J=9.6 Hz, 2 H), 4.58 (d, J=9.2 Hz, 2 H), 3.87 (s, 3 H), 1.46 (s, 9 H)。
マイクロ波管中で調製した、1,4−ジオキサン:水(2:1、10ml)中の7−ブロモイソインドリン−2,5−ジカルボン酸2−(tert−ブチル)5−メチル(0.250g、0.702mmol)の溶液に、フェニルボロン酸(0.101g、0.843mmol)を室温で加えた。得られた反応混合液を15分間脱気した。反応混合液に、Na2CO3(0.221g、2.100mmol)及びPd(PPh3)4(0.040g、0.034mmol)を加えた。反応混合液を密閉し、マイクロ波中80℃で3時間加熱した。得られた混合液を水(30ml)に注ぎ、EtOAc(3×20ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中15%EtOAc)により精製して、7−フェニルイソインドリン−2,5−ジカルボン酸2−(tert−ブチル)5−メチル(0.190g、0.538mmol)を得た。LCMS:方法E、5.371分、MS: ES+ 339.28 (M-15); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.95 (d, J=10.0 Hz, 1 H), 7.85 (d, J=11.2 Hz, 1 H), 7.51 - 7.54 (m, 5 H), 4.70 - 4.72 (m, 4 H), 3.88 (s, 3 H), 1.44 (d, J=15.2 Hz, 9 H)。
DCM(10ml)中の7−フェニルイソインドリン−2,5−ジカルボン酸2−(tert−ブチル)5−メチル(0.185g、0.524mmol)の溶液に、0℃でTFA(1ml)を加えた。反応混合液を40℃で1時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、減圧下で溶媒を留去した。得られた残留物をDCM(2×10ml)と共溶媒を留去した。得られた残留物をジエチルエーテル(2×10ml)で粉砕し、真空下で乾燥して、7−フェニルイソインドリン−5−カルボン酸メチルTFA塩(0.148g、定量的)を得た。LCMS:方法E、2.944分、MS: ES+ 254.17; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.49 (br s, 1 H), 8.05 (s, 1 H), 7.97 (s, 1 H), 7.49 - 7.55 (m, 5 H), 4.64 - 4.67 (m, 4 H), 3.90 (s, 3 H)。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。
THF(10ml)中の7−フェニルイソインドリン−5−カルボン酸メチルTFA塩(0.140g、0.550mmol)の溶液に、0℃でK2CO3(0.229g、1.659mmol)を加えた。臭化シアン(0.070g、0.663mmol)を0℃で反応混合液に加えた。反応混合液を0℃で1時間撹拌した。得られた反応混合液を水(20ml)に注ぎ、EtOAc(2×20ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー(DCM中1%MeOH)により精製して、標題化合物(0.052g、0.187mmol)を得た。LCMS:方法E、4.384分、MS: ES+ 279.33; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.93 (s, 1 H), 7.89 (s, 1 H), 7.43-7.55 (m, 5 H), 4.95 (s, 2 H), 4.90 (s, 2 H), 3.88 (s, 3 H)。
IPA(1ml)中の4−クロロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6(7H)−カルボン酸tert−ブチル(0.2mmol)及び1−(2,4−ジフルオロフェニル)ピペラジン(0.6mmol)の溶液に、DIPEA(0.6mmol)を加えた。反応混合液を100℃で16時間撹拌した。得られた混合液を減圧下で濃縮した。得られた残留物を分取TLC(PE/EtOAc=1:2)により精製して、4−(4−(2,4−ジフルオロフェニル)ピペラジン−1−イル)−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6(7H)−カルボン酸tert−ブチルを得た。MS: ES+ 418.4。
EtOAc(1ml)中の4−(4−(2,4−ジフルオロフェニル)ピペラジン−1−イル)−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6(7H)−カルボン酸tert−ブチルの溶液に、HCl/EtOAc(4M、1ml)を加えた。反応混合液を室温で2時間撹拌した。得られた混合液を減圧下で濃縮した。残留物4−(4−(2,4−ジフルオロフェニル)ピペラジン−1−イル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジンを、さらに精製することなく次の工程に直接使用した。MS: ES+ 318.3。
EtOH(2ml)中の4−(4−(2,4−ジフルオロフェニル)ピペラジン−1−イル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジンの溶液に、臭化シアン(0.2mmol)及びNaHCO3(0.6mmol)を加えた。反応混合液を室温で16時間撹拌した。得られた混合液を減圧下で濃縮した。粗製物を分取逆相HPLC(A:水中0.078%CH3COONH4、B:MeCN)により精製して(17.3mg、0.050mmol)を得た。LCMS:方法G、2.307分、MS: ES+ 343.0。
DCM(6ml)中の6−Boc−4−クロロ−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン(CAS番号1053657−15−0、Advanced ChemBlocksから入手可能)(0.300g、1.173mmol)の溶液に、室温でTFA(1.5ml)を加えた。得られた反応混合液を室温で4時間撹拌した。得られた反応混合液から減圧下で溶媒を留去した。得られた残留物をジエチルエーテル(2×5ml)と共に溶媒を留去し、真空下で乾燥して、4−クロロ−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジンTFA塩(0.330g、定量的)を得た。LCMS:方法I、2.211分、MS: ES+ 155.90。この物質をさらに精製することなく次の工程に使用した。
THF(10ml)中の4−クロロ−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジンTFA塩(0.330g、1.226mmol)の溶液に、K2CO3(0.680g、4.927mmol)を室温で加えた。臭化シアン(0.160g、1.510mmol)を室温で反応混合液に加えた。得られた反応混合液を室温で30分間撹拌した。得られた反応混合液を水(50ml)に注ぎ、EtOAc(3×25ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水溶液(25ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮して、4−クロロ−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル(0.180g、0.001mmol)を得た。LCMS:方法A、1.579分、MS: ES+ 180.80; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.01 (s, 1 H), 4.91 (s, 4 H)。この物質をさらに精製することなく次の工程に使用した。
MeCN(2ml)中の4−クロロ−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル(0.050g、0.277mmol)の溶液に、TEA(0.2ml、1.437mmol)を0℃で加えた。反応混合液を室温で5分間撹拌した。3−(ピペリジン−4−イルオキシ)ピリジン二塩酸塩(CAS番号310880−81−0、Chembridgeから入手可能)(0.049g、0.197mmol)を加えた。反応混合液を室温で16時間撹拌した。反応混合液を水(10ml)に注ぎ、EtOAc(3×10ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水溶液(25ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中40〜50%EtOAc)により精製して、4−(4−(ピリジン−3−イルオキシ)ピペリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル(0.025g、0.077mmol)を得た。LCMS:方法D、3.981分、MS: ES+ 322.96; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.44 (s, 1 H), 8.33 (d, J=2.8 Hz, 1 H), 8.18 (dd, J=4.8, 1.2 Hz, 1 H), 7.46 - 7.48 (m, 1 H), 7.32 - 7.35 (m, 1 H), 4.99 (s, 2 H), 4.77 - 4.80 (m, 1 H), 4.59 (s, 2 H), 3.94 - 3.97 (m, 2 H), 3.47 - 3.51 (m, 2 H), 2.01 -2.04 (m, 2 H), 1.61 - 1.69 (m, 2 H)。
1,4−ジオキサン(13.5ml)中の2,4−ジクロロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6(7H)−カルボン酸tert−ブチル(CAS番号903129−71−5、Advance chem blockから入手可能)(0.4g、1.378mmol)及びフェニルボロン酸(0.17g、1.378mmol)の溶液を、室温で調製した。水(1.5ml)中のNa2CO3(0.29g、2.757mmol)の溶液を室温で反応混合液に加えた。反応混合液を窒素を用いて室温で15分間脱気した。PdCl2(dppf)(0.10g、0.137mmol)を室温で反応混合液に加えた。反応混合液を90℃で2時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、水(30ml)に注ぎ、DCM(3×30ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中10%EtOAc)により精製して、2−クロロ−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.35g、1.057mmol)を得た。LCMS:方法A、2.767分、MS: ES+ 332.59; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.91 - 7.97 (m, 2H), 7.59 - 7.63 (m, 3H), 4.91 (s, 2H), 4.64 (d, J=8 Hz, 2H), 1.47 (s, 9H)。
オートクレーブ中のTHF(20ml)中の2−クロロ−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.35g、1.057mmol)の溶液を、アンモニアガスで−78℃で5分間パージした。反応混合液を密閉し、100psiのアンモニアガス圧を加え、反応混合液を50℃で15時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、注意深く圧力を解放した。得られた反応混合液を減圧下で濃縮し、得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(n−ヘキサン中20〜40%EtOAc)により精製して、2−アミノ−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.091g、0.292mmol)を得た。LCMS:方法A、2.168分、MS: ES+ 313.58。
Ac2O(2ml)中の2−アミノ−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.08g、0.256mmol)の溶液に、室温でTEA(0.05g、0.512mmol)及びDMAP(0.015g、0.128mmol)を加えた。反応混合液を70℃で1時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、冷水(30ml)で希釈した。得られた混合液のpHを、連続的に撹拌しながら、固体Na2CO3をゆっくりと添加して9に調整した。得られた混合液をEtOAc(2×30ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中72%EtOAc)により精製して、2−アセトアミド−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.07g、0.197mmol)を得た。LCMS:方法A、2.218分、MS: ES+ 355.65; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.67 (d, J=6 Hz, 1H), 7.93 - 7.99 (m, 2H), 7.57 - 7.59 (m, 3H), 4.86 (s, 2H), 4.56 (d, J=8.4 Hz, 2H), 2.24 (s, 3H), 1.47 (s, 9H)。
標題化合物を、実施例1の工程d及びeについて記載された手順と同様の手順を使用して、上記中間体から合成した。LCMS:方法D、3.322分、MS: ES+ 280.0; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.72 (s, 1H), 7.95 - 7.97 (m, 2H), 7.56 - 7.60 (m, 3H), 5.13 (s, 2H), 4.78 (s, 2H), 2.24 (s, 3H)。
実施例104の工程aに記載のように行った。
1,4−ジオキサン(5ml)中の2−クロロ−4−(3−シアノフェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.350g、0.983mmol)の溶液に、室温でアセトアミド(0.069g、1.169mmol)を加えた。K2CO3(0.271g、1.963mmol)を室温で反応混合液に加えた。得られた反応混合液を15分間脱気した。キサントホス(0.056g、0.096mmol)を室温で反応混合液に加えた。Pd2(dba)3(0.089g、0.098mmol)を室温で反応混合液に加えた。反応混合液を100℃で1時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、氷冷水(50ml)に注いだ。得られた混合液をEtOAc(3×40ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中55%EtOAc)により精製して、2−アセトアミド−4−(3−シアノフェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.300g、0.791mmol)を得た。LCMS:方法A、2.036分、MS: ES+ 380.44; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.76 (d, J=5.6 Hz, 1 H), 8.38 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 8.23 (dd, J=8.0, 3.6 Hz, 1 H), 8.05 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 7.90 - 7.83 (m, 1 H), 4.91 (s, 2 H), 4.58 (d, J=8.4 Hz, 2 H), 2.22 (s, 3 H), 2.47 (s, 9 H)。
実施例1の工程d及びeについて記載された手順と同様の手順を使用して行った。LCMS:方法D、3.261分、MS: ES+ 305.00; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.82 (s, 1 H), 8.36 (s, 1 H), 8.24 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 8.06 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 7.79 (t, J=8.0 Hz, 1 H), 5.18 (s, 2 H), 4.81 (s, 2 H), 2.22 (s, 3 H)。
1,4−ジオキサン(250ml)及び水(50ml)中の2,4−ジクロロ−5,7−ジヒドロピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(20g、68.9mmol)、フェニルボロン酸(8.40g、68.9mmol)、K2CO3(28.58g、206.8mmol)、及びPd(PPh3)4(7.97g、6.89mmol)の混合液を脱気し、N2で3回パージし、次に混合液を、N2雰囲気下で105℃で16時間撹拌した。反応混合液を減圧下で濃縮して、1,4−ジオキサンを除去した。残留物を水(400ml)で希釈し、DCM(300ml×3)で抽出した。合わせた有機層を食塩水(600ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して残留物を得た。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー(PE/EtOAc=14/1〜12/1)により精製した。2−クロロ−4−フェニル−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6(7H)−カルボン酸tert−ブチル(14g、純度80%)を無色の油として得て、これを次の工程で直接使用した。
IPA(1ml)中の2−クロロ−4−フェニル−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6(7H)−カルボン酸tert−ブチル(0.2mmol)及び(1R,4R)−4−アミノシクロヘキサノール(0.6mmol)の溶液に、DIPEA(0.6mmol)を加えた。反応混合液を100℃で16時間撹拌した。得られた混合液を減圧下で濃縮した。残留物を分取TLC(PE/EtOAc=1:2)により精製して、2−(((1R,4R)−4−ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ)−4−フェニル−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6(7H)−カルボン酸tert−ブチルを得た。MS: ES+ 411.5。
EtOAc(1ml)中の2−(((1R,4R)−4−ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ)−4−フェニル−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6(7H)−カルボン酸tert−ブチルの溶液に、HCl/EtOAc(4M、1ml)を加えた。反応混合液を室温で2時間撹拌した。得られた混合液を減圧下で濃縮した。残留物(1R,4R)−4−((4−フェニル−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−イル)アミノ)シクロヘキサノールを得て、これをさらに精製することなく次の工程で直接使用した、MS: ES+ 311.3。
EtOH(2ml)中の(1R,4R)−4−((4−フェニル−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−イル)アミノ)シクロヘキサノールの溶液に、臭化シアン(0.2mmol)及びNaHCO3(0.6mmol)を加えた。反応混合液を室温で16時間撹拌した。得られた混合液を減圧下で濃縮した。粗製物を分取逆相HPLC(A:水中0.078%CH3COONH4、B:MeCN)により精製して、(49.4mg、0.146mmol)を得た。LCMS:方法G、2.786分、MS: ES+ 336.1。
THF(10ml)中の2−クロロ−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(実施例104の工程aに記載)(0.3g、0.906mml)の溶液に、(4−メチルモルホリン−2−イル)メタンアミン(CAS番号141814−57−5、Enamineから入手可能)(0.16g、1.177mmol)を室温で加えた。反応混合液を100℃で15時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、水(50ml)に注ぎ、EtOAc(3×25ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中7%MeOH)により精製して、2−(((4−メチルモルホリン−2−イル)メチル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.29g、0.698mmol)を得た。LCMS:方法A、1.890分、MS: ES+ 426.67; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.83 - 7.92 (m, 2H),7.52 - 7.55 (m, 3H), 7.27 - 7.30 (m, 1H), 4.71 (s, 2H), 4.40 (d, J=10.8 Hz, 2H), 3.77 (d, J=11.2 Hz, 1H), 3.65 - 3.66 (m, 1H), 3.41 - 3.50 (m, 3H), 2.74 (d, J=11.2 HZ, 1H), 2.51 - 2.57 (m, 1H), 2.15 (s, 3H), 1.93 - 1.99 (m, 1H), 1.74 (t, J=10 Hz, 1H), 1.46 (s, 9H)。
標題化合物を、実施例1の工程d及びeについて記載された手順と同様の手順を使用して上記中間体から合成した。LCMS:方法D、3.764分、MS: ES+ 352.10。
MeCN(20ml)中の2,4−ジクロロ−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(CAS番号903129−71−5、Advanced Chem-blocksから入手可能)(2.000g、6.896mmol)の溶液に、0℃で1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン(CAS番号91−21−4、Alfa Aesarから入手可能)(0.917g、6.895mmol)を加えた。TEA(2.94ml、21.25mmol)を0℃で反応混合液に加えた。反応混合液を室温で1時間撹拌した。得られた反応混合液を水(100ml)に注ぎ、EtOAc(4×20ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中20%EtOAc)により精製して、2−クロロ−4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(2.300g、5.96mmol)を得た。LCMS:方法A、2.674分、MS: ES+ 387.54; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.21 - 7.28 (m, 4 H), 4.82 - 4.86 (m, 4 H), 4.36 - 4.38 (m,2 H), 3.82 - 3.87 (m, 2 H), 2.92 - 2.95 (m, 2 H), 1.46 - 1.47 (m, 9 H)。
これらは、実施例105の工程d〜fについて記載された手順と同様の手順を使用して行った。LCMS:方法E、3.315分、ES+ 335.17。
DCM(5ml)中の2−アミノ−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(実施例104の工程a及びbと同様にして調製、0.05g、0.160mmol)及び5−オキソピロリジン−3−カルボン酸(CAS番号7268−43−1、Enamineから入手可能)(0.022g、0.176mmol)の溶液に、ピリジン(0.14g、1.762mmol)を0℃で加えた。オキシ塩化リン(0.24g、1.602mmol)を0℃で反応混合液に加えた。得られた反応混合液を0℃で30分間撹拌した。得られた反応混合液を水(20ml)に注ぎ、得られた混合液のpHを、固体Na2CO3をゆっくりと添加することによって、ほぼ7に調整した。得られた混合液をEtOAc(3×30ml)で抽出した。合わせた有機相を集め、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中3%MeOH)により精製して、2−(5−オキソピロリジン−3−カルボキサミド)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.095g、0.224mmol)を得た。LCMS:方法A、2.009分、MS: ES+ 424.7。
標題化合物を、実施例1の工程d及びeについて記載された手順と同様の手順を使用して、上記中間体から合成した。LCMS:方法E、2.993分、MS: ES+ 349.52。
MeCN(15ml)中の2,4−ジクロロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6(7H)−カルボン酸tert−ブチル(CAS番号903129−71−5、Advance chem blockから入手可能)(0.5g、1.723mmol)の溶液に、0℃でTEA(0.36ml、2.58mmol)を加えた。ピロリジン(0.11g、1.55mmol)を0℃で加えた。反応混合液を室温で1.5時間撹拌した。反応混合液を減圧下で濃縮し、水(70ml)に注いだ。残留物をEtOAc(3×30ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(30ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、2−クロロ−4−(ピロリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.6g、1.851mmol)を得た。LCMS:方法A、2.346分、MS: ES+ 325.59。
1,4−ジオキサン:水(9:1、10ml)中の2−クロロ−4−(ピロリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.100g、0.308mmol)の溶液に、4−メトキシフェニルボロン酸(0.056g、0.368mmol)を室温で加えた。炭酸ナトリウム(0.065g、0.613mmol)を室温で反応混合液に加えた。得られた反応混合液を15分間脱気した。Pd(PPh3)4(0.035g、0.026mmol)を室温で反応混合液に加えた。得られた反応混合液を130℃で16時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(20ml)に注いだ。得られた混合液をEtOAc(3×10ml)を使用して抽出した。合わせた有機相を食塩水溶液(2×10ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中25%EtOAc)により精製して、2−(4−メトキシフェニル)−4−(ピロリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.048g、0.121mmol)を得た。LCMS:方法A、2.446分、MS: ES+ 397.38。
標題化合物を、実施例1の工程d及びeについて記載された手順と同様の手順を使用して、上記中間体から合成した。LCMS:方法D、2.202分、MS: ES+ 322.00; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.31 - 8.35(m, 2 H), 6.95 - 6.98 (m, 2 H), 5.05 (t, J=2.8 Hz, 2 H), 4.66 (t, J=2.4 Hz, 2 H), 3.88 (s, 3 H), 3.71 - 3.75 (m, 4 H), 2.03 - 2.06 (m, 4 H)。
MeCN(20ml)中の2,4−ジクロロ−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(CAS番号903129−71−5、Advanced Chem-blocksから入手可能)の溶液に、1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン(CAS番号91−21−4、Alfa Aesarから入手可能)(0.917g、6.895mmol)及びTEA(2.94ml、21.25mmol)を0℃で加えた。反応混合液を室温で1時間撹拌した。得られた反応混合液を水(100ml)に注ぎ、EtOAc(4×20ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中20%EtOAc)により精製して、2−クロロ−4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(2.300g、5.958mmol)を得た。LCMS:方法A、2.674分、MS: ES+ 387.54; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.21 - 7.28 (m, 4 H), 4.82 - 4.86 (m, 4 H), 4.36 - 4.38 (m,2 H), 3.82 - 3.87 (m, 2 H), 2.92 - 2.95 (m, 2 H), 1.46 - 1.47 (m, 9 H)。
マイクロ波管中で調製したDMF:水(9:1、5ml)中の2−クロロ−4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.300g、0.777mmol)の溶液に、ピラゾール−4−ボロン酸ピナコールエステル(CAS番号269410−08−4;0.176g、0.926mmol)及びNa2CO3(0.164g、1.547mmol)を室温で加えた。得られた反応混合液を15分間脱気した後、PdCl2(dppf)DCM錯体(0.063g、0.077mmol)を加えた。反応混合液を密閉し、マイクロ波中140℃で40分間加熱した。反応混合液を室温まで冷却した。得られた反応混合液を水(20ml)に注ぎ、EtOAc(3×10ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水溶液(10ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中8%MeOH)により精製して、4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(1H−ピラゾール−4−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.182g、0.434mmol)を得た。LCMS:方法A、2.220分、MS: ES+ 419.38; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13.07 (s, 1 H), 8.32 (s, 1 H), 8.04 (s, 1 H), 7.19 - 7.24 (m, 4 H), 4.93 (s, 2 H), 4.85 (s, 2 H), 4.38 - 4.41 (m, 2 H), 3.90 - 3.94 (m, 2 H), 2.93 - 2.96 (m, 2 H), 1.47 - 1.49 (m, 9 H)。
DCM(10ml)中の4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(1H−ピラゾール−4−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.122g、0.291mmol)の溶液に、0℃でTFA(1.0ml)を加えた。得られた反応混合液を0℃で0.5時間、次に室温で1時間撹拌した。得られた反応混合液から減圧下で溶媒を留去した。得られた残留物をn−ペンタン(2×2ml)、ジエチルエーテル(2×2ml)で粉砕し、真空下で乾燥して、2−(2−(1H−ピラゾール−4−イル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−4−イル)−1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリンTFA塩(0.125g、定量的)を得た。LCMS:方法A、1.680分、MS: ES+ 319.18。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。
THF(2ml)中の2−(2−(1H−ピラゾール−4−イル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−4−イル)−1,2,3,4−テトラヒドロ−テトラヒドロイソキノリンTFA塩(0.125g、0.300mmol)の溶液に、0℃でK2CO3(0.083g、0.601mmol)を加えた。臭化シアン(0.035g、0.331mmol)を0℃で反応混合液に加えた。得られた反応混合液を0℃で0.5時間撹拌した。得られた反応混合液を水(20ml)に注ぎ、EtOAc(3×10ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水溶液(20ml)で洗浄した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物を分取TLC(DCM中5%MeOH)により精製して、標題化合物(0.021g、0.061mmol)を得た。LCMS:方法A、1.989分、MS: ES+ 344.13; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13.12 (s, 1 H), 8.33 (s, 1 H), 8.06 (s, 1 H), 7.33 (d, J= 5.6 Hz, 1 H), 7.20 - 7.24 (m, 3 H), 5.11 (s, 2 H), 4.90 (s, 2 H), 4.62 (s, 2 H), 3.90 (t, J= 6 Hz, 2 H) 2.93 (t, J= 5.6 Hz, 2 H)。
実施例145の工程a、bに記載のように行った。
DMF(2ml)中の4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(1H−ピラゾール−4−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.100g、0.238mmol)の溶液に、室温でK2CO3(0.131g、0.949mmol)を加えた。反応混合液を室温で15分間撹拌した後、1−ブロモ−2−メトキシエタン(CAS番号6482−24−2;0.066g、0.474mmol)を加えた。反応混合液を80℃で16時間加熱した。得られた反応混合液を水(20ml)に注ぎ、EtOAc(2×10ml)で抽出した。合わせた有機層を食塩水溶液(10ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中10%MeOH)により精製して、4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(1−(2−メトキシエチル)−1H−ピラゾール−4−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチルエチル(0.058g、0.121mmol)を得た。LCMS:方法A、2.444分、MS: ES+ 477.23。
標題化合物を、実施例145の工程c及びdについて記載された手順と同様の手順を使用して、上記中間体から合成した。LCMS:方法A、2.131分、MS: ES+ 402.23; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.32 (s, 1 H), 8.01 (s, 1 H), 7.32 (d, J= 5.6 Hz, 1 H), 7.20 - 7.23 (m, 3 H), 5.11 (s, 2 H), 4.89 (s, 2 H), 4.61 (s, 2 H), 4.31 (t, J= 5.6 Hz, 2 H), 3.90 (t, J= 5.6 Hz, 2 H), 3.72 (t, J= 5.2 Hz, 2 H), 3.24 (s, 3 H), 2.93 (t, J= 6 Hz, 2 H)。
4−(5,8−ジヒドロ−1,7−ナフチリジン−7(6H)−イル)−2−(5−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル
2,4−ジメチルベンジルアミン(2ml)中の2−クロロ−4−(ピロリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(実施例130の工程aに記載のように調製した)(0.2g、0.616mmol)、K2CO3(0.17g、1.233mmol)、及びDMAP(0.15g、1.233mmol)の懸濁液を、130℃で2時間、マイクロ波で加熱した。得られた混合液を室温まで冷却し、同じ方法により同じスケールで調製した1つの他のバッチと合わせた。得られた反応混合液を10%クエン酸溶液(50ml)に注ぎ、EtOAc(3×40ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(30ml)で洗浄し、Na2SO4上で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中4%MeOH)により精製した。得られた物質をジエチルエーテル(5ml)次にn−ペンタン(10ml)で粉砕し、充分乾燥して、標題化合物2−((2,4−ジメトキシベンジル)アミノ)−4−(ピロリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.35g、0.768mmol)を得た。LCMS:方法A、2.190分、MS: ES+ 456.95; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.65 (br s, 1H), 7.12 (d, J=6.8 Hz, 1H), 6.54 (d, J=2 Hz, 1H), 6.47 (dd, J=2 Hz, 8.4 Hz, 1H), 4.67 (s, 2H), 4.38 (s, 2H), 4.32 (s, 2H), 3.79 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.51 (s, 4H), 1.87 (s, 4H), 1.44 (s, 9H)。
2−((2,4−ジメトキシベンジル)アミノ)−4−(ピロリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.19g、0.417mmol)にTFA(1ml)を0℃で加えた。得られた反応混合液を室温で30分間撹拌した。得られた反応混合液を減圧下で濃縮した。得られた残留物をDCM(2×10ml)で共沸蒸留し、ジエチルエーテル(2×7ml)で粉砕して、4−(ピロリジン−1−イル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−アミンTFA塩(0.17g、0.392mmol)を得た。LCMS:方法D、2.564分、MS: ES+ 206.07。
DCM(5ml)中の4−(ピロリジン−1−イル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−アミンTFA塩(0.18g、0.415mmol)の溶液に、0℃でTEA(0.11ml、0.830mmol)を加えた。得られた反応混合液を0℃で5分間撹拌した。Boc無水物(0.1g、0.456mmol)を0℃で反応混合液に加えた。反応混合液を室温で30分間撹拌した。得られた反応混合液を、同じ方法により0.07gのスケールで調製した別のバッチと合わせた。得られた反応混合液を水(30ml)に注ぎ、EtOAc(3×20ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をジエチルエーテル(5ml)で粉砕し、真空下で乾燥して、2−アミノ−4−(ピロリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.14g、0.458mmol)を得た。LCMS:方法A、1.772分、MS: ES+ 306.68; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 6.87 (br s, 2H), 4.68 (s, 2H), 4.28 (d, J=8.8 Hz, 2H), 3.74 (s, 4H), 1.91 (s, 4H), 1.47 (s, 9H)。
Ac2O(1ml)中の2−アミノ−4−(ピロリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.13g、0.425mmol)の溶液に、DMAP(0.0025g、0.021mmol)及びTEA(0.12ml、0.850mmol)を0℃で加えた。反応混合液を50℃で2時間加熱した。得られた反応混合液を水(20ml)に注ぎ、固体Na2CO3の添加により塩基性化した。得られた塩基性混合液をEtOAc(3×20ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(30ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中3.6%MeOH)により精製した。得られた物質をジエチルエーテル(3ml)で粉砕し、充分充分乾燥して、2−アセトアミド−4−(ピロリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−4−カルボン酸tert−ブチル(0.06g、0.172mmol)を得た。LCMS:方法A、1.681分、MS: ES+ 348.45。
DCM(3ml)中の2−アセトアミド−4−(ピロリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.06g、0.172mmol)の溶液に、0℃でTFA(0.6ml)を加えた。反応混合液を40℃で3時間加熱した。得られた反応混合液を減圧下で濃縮した。得られた残留物をDCM(2×10ml)で共沸蒸留し、最後に高真空下で乾燥して、N−(4−(ピロリジン−1−イル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−イル)アセトアミドTFA塩(0.06g、0.165mmol)を加えた。MS: ES+ 248.27。
THF(3ml)中のN−(4−(ピロリジン−1−イル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−イル)アセトアミドTFA塩(0.06g、0.165mmol)の溶液に、0℃でK2CO3(0.09g、0.663mmol)を加えた。反応混合液を5分間撹拌した。臭化シアン(0.021g、0.199mmol)を0℃で反応混合液に加えた。反応混合液を室温で1時間撹拌した。得られた反応混合液を水(20ml)に注ぎ、EtOAc(3×10ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中4%MeOH)により精製した。得られた物質をジエチルエーテル(2ml)で粉砕し、充分乾燥して、標題化合物(0.012g、0.044mmol)を得た。LCMS:方法D、2.930分、MS: ES+ 273.01; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.96 (s, 1H), 5.01 (s, 2H), 4.51 (s, 2H), 3.57 (s, 4H), 2.24 (s, 3H), 1.87 (s, 4H)。
EtOH(150ml)中の3−シアノ−4−オキソピロリジン−1−カルボン酸tert−ブチル(CAS番号175463−32−8;10.0g、47.59mmol)の溶液に、蟻酸アンモニウム(4.42g、71.29mmol)を室温で加えた。反応混合液を70℃で16時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、減圧下で濃縮した。残留物をEtOAc(3×150ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(100ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物を溶媒n−ヘキサンを使用して粉砕することにより精製して、3−アミノ−4−シアノ−2,5−ジヒドロ−1H−ピロール−1−カルボン酸tert−ブチル(9.0g、43.06mmol)を得た。LCMS:方法E、3.464分、MS: ES- 208.3。
1−ブタノール(15ml)中の3−アミノ−4−シアノ−2,5−ジヒドロ−1H−ピロール−1−カルボン酸tert−ブチル(1.3g、7.17mmol)の溶液に、アセトアミドHCl(5.00g、52.88mmol)を室温で加えた。反応混合液を100℃で96時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、減圧下で濃縮した。得られた残留物を水(40ml)に注ぎ、EtOAc(3×40ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた粗物質をカラムクロマトグラフィー(DCM中6%MeOH)により精製して、4−アミノ−2−メチル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(1.30g、5.20mmol)を加えた。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。
MeCN(20ml)中の4−アミノ−2−メチル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(1.3g、5.20mmol)の溶液に、臭化銅(II)(2.32g、10.4mmol)を0℃で加え、15分間撹拌した。反応混合液に0℃で亜硝酸tert−ブチル(0.804g、7.8mmol)を加えた。反応混合液を室温で16時間撹拌した。得られた反応混合液を水(100ml)に注ぎ、EtOAc(3×50ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー(DCM中3%MeOH)により精製して、4−ブロモ−2−メチル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.088g、0.28mmol)を得た。LCMS:方法A、2.146分、MS: ES+ 314, 316。
トルエン:EtOH(9:1、20ml)中の4−ブロモ−2−メチル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.08g、0.254mmol)中の溶液に、4−フルオロフェニルボロン酸(0.042g、0.305mmol)及びK2CO3(0.087g、0.636mmol)を室温で加えた。反応混合液を15分間脱気した。Pd(PPh3)4(0.029g、0.025mmol)を反応混合液に加え、110℃で2時間撹拌した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、水(50ml)に注いだ。得られた混合液をEtOAc(2×50ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して粗物質を得た。粗物質をフラッシュクロマトグラフィー(n−ヘキサン中の20%EtOAc)により精製して、4−(4−フルオロフェニル)−2−メチル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(1.67g、6.34mmol)を加えた。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。
実施例97の工程e及びfについて記載された手順と同様の手順を使用して、標題化合物を合成した。LCMS:方法E、3.662分、MS: ES+ 255.28, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.00-8.036 (m, 2 H), 7.383-7.427 (m, 2 H), 5.164 (s, 2 H), 4.815 (s, 2 H), 2.69 (s, 3H)。
2−(((4−メチルモルホリン−2−イル)メチル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル:鏡像異性体1
実施例153
2−(((4−メチルモルホリン−2−イル)メチル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル:鏡像異性体2
1,4−ジオキサン(150ml)中の7−ブロモイソインドリン−5−カルボン酸メチルHCl塩(実施例98の工程eと同様にして調製、4.200g、14.35mmol)の撹拌溶液に、K2CO3(5.600g、40.539mmol)を0℃で加えた。反応混合液にクロロ蟻酸ベンジル(3.60g、21.2mmol)を0℃で滴加した。反応混合液を室温で3時間撹拌した。得られた混合液から減圧下で溶媒を留去し、氷冷水(150ml)で希釈し、EtOAc(3×200ml)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をジエチルエーテル:ヘキサン(7:3,4x50ml)で粉砕し、得られた固体物質を高真空下で乾燥して、7−ブロモイソインドリン−2,5−ジカルボン酸2−ベンジル5−メチル(4.80g、12.31mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、2.753分、MS: ES+ 390.00; 392.00。
THF(100ml)中の7−ブロモイソインドリン−2,5−ジカルボン酸2−ベンジル5−メチル(4.000g、10.28mmol)の撹拌溶液に、水素化リチウムアルミニウム(THF中1M)(24ml、24mmol)を−78℃で加えた。反応混合液を−78℃で4時間撹拌した。得られた反応混合液を飽和NH4Cl溶液(100ml)でクエンチし、EtOAc(3×80ml)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をn−ヘキサン(2×15ml)を使用して粉砕し、高真空下で乾燥して、4−ブロモ−6−(ヒドロキシメチル)イソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(3.600g、9.972mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、2.205分、MS: ES+ 362.25; 364.25。
DCM(60ml)中の4−ブロモ−6−(ヒドロキシメチル)イソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(3.600g、9.972mmol)の溶液に、デスマーチンペルヨージナン(5.500g、12.94mmol)を0℃で加えた。反応混合液を0℃〜10℃で60分間撹拌した。得られた混合液を飽和NaHCO3溶液(150ml)に注ぎ、EtOAc(3×150ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中15%EtOAc)により精製して、4−ブロモ−6−ホルミル−イソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(3.150g、8.750mmol)を得た。LCMS:方法A、2.38分、MS: ES+ 360.13; 362.00。
1,4−ジオキサン:水(9:1、50ml)中の4−ブロモ−6−ホルミルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(3.100g、8.635mmol)の撹拌溶液に、K3PO4(3.66g、17.26mmol)及びフェニルボロン酸(1.580g、12.95mmol)を室温で加えた。反応混合液をN2ガスで15分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.630g、0.864mmol)を加えた。得られた反応混合液を75℃で6時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(100ml)に注ぎ、EtOAc(3×100ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中15%EtOAc)により精製して、標題化合物6−ホルミル−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(2.600g、7.262mmol)を得た。LCMS:方法A、2.54分、MS: ES+ 358.34。
MeOH(10ml)中の6−ホルミル−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(0.200g、0.560mmol)の撹拌溶液に、ジメチルアミン(40%水溶液)(2ml、3.36mmol)を室温で加えた。反応混合液を室温で2時間撹拌した。次に、反応混合液を0℃に冷却し、AcOH(0.4ml、5.60mmol)を加えた。反応混合液を0℃で5分間撹拌した。NaCNBH3(0.065g、0.840mmol)を0℃で反応混合液に加えた。得られた反応混合液を0℃で2時間撹拌した。得られた反応混合液を、同じ方法により同じスケールで調製した1つの他のバッチと合わせた。反応混合液から減圧下で溶媒を留去し、飽和NaHCO3(60ml)に注ぎ、EtOAc(3×60ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(DCM中3%MeOH)により精製して、6−((ジメチルアミノ)メチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(0.4g、1.033mmol)を得た。LCMS:方法A、1.982分、MS: ES+ 387.51。
AcOH(10ml)中の6−((ジメチルアミノ)メチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(0.400g、1.033mmol)の溶液に、10%乾燥Pd/C(0.2g)を室温で加えた。反応混合液を大気圧の水素ガスで4時間パージした。得られた反応混合液をセライトパッドを通して濾過し、AcOH(2×10ml)及びDCM(20ml)で洗浄した。合わせた濾液から高真空下で溶媒を留去し、ヘキサン:ジエチルエーテル(1:1、2x10ml)で粉砕した。得られた残留物を高真空下で乾燥し、N,N−ジメチル−1−(7−フェニルイソインドリン−5−イル)メタンアミン酢酸塩(0.300g)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法D、4.192分、MS: ES+ 253.10。
MeOH(10ml)中の6−ホルミル−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(実施例213の工程dと同様にして調製、0.500g、1.400mmol)の撹拌溶液に、NH2OH・HCl(0.485g、7.00mmol)を室温で加えた。反応混合液を室温で4時間撹拌した。反応混合液から減圧下で溶媒を留去し、飽和NaHCO3(70ml)に注ぎ、EtOAc(3×70ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。次に、得られた残留物をAcOH(5ml)に溶解し、0℃に冷却した。反応混合液に0℃で亜鉛粉末(0.448g、7.00mmol)を加えた。反応混合液を室温で40時間撹拌した。得られた混合液をセライトパッドを通して濾過し、AcOH(2×10ml)及びDCM(20ml)で洗浄した。合わせた濾液から高真空下で溶媒を留去し、ジエチルエーテル(2×15ml)で粉砕して、6−(アミノメチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(0.400g)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、1.925分、MS: ES+ 359.23。
THF(10ml)中の6−(アミノメチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(0.400g、1.12mmol)の撹拌溶液に、K2CO3(0.463g、3.356mmol)、続いて塩化アセチル(0.17ml、2.24mmol)を0℃で加えた。反応混合液を室温で4時間撹拌した。得られた混合液を水(50ml)に注ぎ、EtOAc(3×40ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(DCM中2%MeOH)により精製して、6−(アセトアミドメチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(0.160g、0.400mmol)を得た。LCMS:方法A、2.236分、MS: ES+ 401.32。
THF(30ml)中の塩化メトキシメチルトリフェニルホスホニウム(9.592g、27.98mmol)の溶液に、−78℃でNaHMDS(THF中1M)(28ml、28mmol)を滴加した。反応混合液を−78℃で45分間撹拌した。THF(20ml)中の6−ホルミル−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(実施例213の工程dと同様にして調製、2.5g、7.0mmol)の溶液を、−78℃で反応混合液に滴加した。得られた反応混合液を0℃で1時間撹拌した。得られた反応混合液を、同じ方法により同じスケールで調製した1つの他のバッチと合わせた。得られた混合液を水(250ml)でクエンチし、EtOAc(3×100ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(40ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中18%EtOAc)により精製して、6−(2−メトキシビニル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(0.750g、1.948mmol)を得た。LCMS:方法E、5.657+5.694分、MS: ES+ 386.31。
THF(30ml)中の中間体13(2.000g、5.633mmol)の撹拌溶液に、−78℃で水素化アルミニウムリチウム(THF中1M)(16.9ml、16.9mmol)を加えた。反応混合液を−78℃で4時間撹拌した。得られた反応混合液を飽和NH4Cl溶液(50ml)でクエンチし、EtOAc(3×40ml)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をn−ヘキサン(2×15ml)で粉砕し、高真空下で乾燥して、4−ブロモ−6−(ヒドロキシメチル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(1.700g、5.197mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、2.058分、MS: ES+ 272.29, 274.29 [M-56]; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.42 (s, 1 H), 7.25 - 7.28 (m, 1 H), 5.34 (t, J= 6.4 Hz, 1 H), 4.66 - 4.68 (d, J= 8.4 Hz, 2 H), 4.48 - 4.51 (m, 4 H), 1.46 (s, 9 H)。
1,4−ジオキサン:水(9:1、10ml)中の4−ブロモ−6−(ヒドロキシメチル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(1.000g、3.058mmol)の撹拌溶液に、K3PO4(1.29g、6.12mmol)及び4−シアノフェニルボロン酸(0.673g、4.59mmol)を室温で加えた。反応混合液をN2ガスで30分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.220g、0.305mmol)を加えた。得られた反応混合液を80℃で8時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(50ml)に注ぎ、EtOAc(3×50ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中30%EtOAc)により精製して、4−(4−シアノフェニル)−6−(ヒドロキシメチル)−イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.850g、2.428mmol)を得た。LCMS:方法A、2.111分、MS: ES+ 336.38[M-15]。
トルエン(10ml)中の4−(4−シアノフェニル)−6−(ヒドロキシメチル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.300g、0.854mmol)の撹拌溶液に、PBr3(0.341g、1.282mmol)を0℃で加えた。反応混合液を0℃で4時間撹拌した。次に、反応混合液から減圧下で溶媒を留去して、4−(6−(ブロモメチル)イソインドリン−4−イル)ベンゾニトリル臭化水素酸塩(0.255g、定量的)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、1.90分、MS: ES+ 313.00。
THF(10ml)中の4−(6−(ブロモメチル)イソインドリン−4−イル)ベンゾニトリル臭化水素酸塩(0.250g、0.639mmol)の溶液に、K2CO3(0.176g、1.278mmol)を0℃で加えた。Boc無水物(0.557g、2.556mmol)を0℃で反応混合液に加えた。反応混合液を室温で4時間撹拌した。得られた混合液を氷冷水(30ml)に注ぎ、EtOAc(3×30ml)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、6−(ブロモメチル)−4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.300g、0.726mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、2.625分、MS: ES+ 398.54 (M-15)。
THF(10ml)中の6−(ブロモメチル)−4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.300g、0.726mmol)の溶液に、ナトリウムチオメトキシド(0.076g、1.098mmol)を0℃で加えた。反応混合液を室温で5時間撹拌した。得られた混合液を氷冷水(30ml)に注ぎ、EtOAc(3×30ml)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、4−(4−シアノフェニル)−6−((メチルチオ)メチル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.220g、0.579mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、2.66分、MS: ES+ 366.40 [M-15]。
DCM(5ml)中の4−(4−シアノフェニル)−6−((メチルチオ)メチル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.210g、0.552mmol)の溶液に、m−CPBA(0.190g、1.105mmol)を0℃で加えた。反応混合液を室温で4時間撹拌した。得られた混合液を飽和NaHCO3(20ml)に注ぎ、EtOAc(3×20ml)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、4−(4−シアノフェニル)−6−((メチルスルホニル)メチル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.125g、0.303mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、2.034分、MS: ES- 411.59。
中間体12を使用して、実施例214の工程bと同様の方法で行った。
DMF(5ml)中の6−(アセトアミドメチル)−4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(実施例217の工程aと同様の方法で調製、0.250g、0.639mmol)の溶液に、NaH(油中60%)(0.076g、1.917mmol)を0℃で加えた。反応混合液を0℃で30分間撹拌した。CH3I(0.050ml、0.767mmol)を0℃で反応混合液に加えた。反応混合液を室温で2時間撹拌した。反応混合液を冷水(50ml)に注ぎ、EtOAc(3×20ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中22%EtOAc)により精製して、4−(4−シアノフェニル)−6−((N−メチルアセトアミド)メチル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.200g、0.493mmol)を得た。LCMS:方法A、2.039分、MS: ES+ 406.53。
THF(5ml)中のテトラヒドロピラン−4−イル−カルボン酸(CAS番号5337−03−1;0.071g、0.554mmol)の溶液に、DIPEA(0.150ml、0.916mmol)及びHATU(0.260g、0.687mmol)を室温で加えた。反応混合液を室温で30分間撹拌した。反応混合液に0℃で中間体12(0.160g、0.458mmol)を加えた。反応混合液を室温で6時間撹拌した。得られた混合液を水(30ml)に注ぎ、EtOAc(3×30ml)で抽出した。合わせた有機相を集め、食塩水(20ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中80%EtOAc)により精製して、4−(4−シアノフェニル)−6−((テトラヒドロ−2H−ピラン−4−カルボキサミド)メチル)−イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.100g、0.216mmol)を得た。LCMS:方法A、2.022分、MS: ES+ 406.58 [M-56]。
実施例1の工程d及びeと同様の方法で行った。LCMS:方法D、3.602分、MS: ES+ 386.96; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.40 (t, J= 5.6Hz, 1 H), 7.96 (d, J= 8Hz, 2 H), 7.69 (d, J= 8.0 Hz, 2 H), 7.25 (s, 1 H), 7.29 (s, 1 H), 4.83 - 4.87 (m, 4 H), 4.32 - 4.34 (d, J= 5.6 Hz, 2 H), 3.84 - 3.87 (m, 2 H), 3.26 - 3.30 (m, 2 H), 3.38 - 3.46 (m, 1 H), 1.56 - 1.62 (m, 4 H)。
THF(25ml)中の中間体12(0.150g、0.429mmol)の撹拌溶液に、0℃でK2CO3(0.177g、1.29mmol)を加えた。0℃で塩化メシル(0.059g、0.515mmol)を反応混合液に加えた。反応混合液を室温で2時間撹拌した。反応混合液を飽和NaHCO3溶液(50ml)に注ぎ、EtOAc(3×20ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中30%EtOAc)により精製して、6−(アセトアミドメチル)−4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.100g、0.234mmol)を得た。LCMS:方法A、2.103分、MS: ES- 426.00。
THF(5ml)中の中間体12(0.160g、0.458mmol)の撹拌溶液に、0℃でK2CO3(0.189g、1.38mmol)を加えた。塩化ジメチルカルバモイル(0.058g、0.556mmol)を0℃で反応混合液に加えた。反応混合液を室温で6時間撹拌した。反応混合液を水(30ml)に注ぎ、EtOAc(2×30ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(DCM中3%MeOH)により精製して、4−(4−シアノフェニル)−6−((3,3−ジメチルウレイド)メチル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.120g、0.285mmol)を得た。LCMS:方法A、2.412分、MS: ES+ 365.22 [M-56]。
実施例223と同様の方法を使用して、工程aにおいてトルエン中のクロロ蟻酸イソプロピル(CAS番号108−23−6)溶液を使用して行った。LCMS:方法D、4.218分、MS: ES+ 361.13; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.95 (d, J=8.0 Hz, 2 H), 7.70 (d, J=8.4 Hz, 2 H), 7.65 (t, J=6.0 Hz, 1 H), 7.30 (s, 1 H), 7.26 (s, 1 H), 4.87 (s, 2 H), 4.83 (s, 2 H), 4.74 - 4.78 (m, 1 H), 4.24 (d, J=6.4 Hz, 2 H), 1.16 (d, J=6.4 Hz, 6 H)。
MeOH(30ml)中の中間体11(2.450g、7.515mmol)の撹拌溶液に、室温でNH2OH・HCl(6.260g、90.2mmol)を加えた。反応混合液を室温で2時間撹拌した。反応混合液から減圧下で溶媒を留去した。得られた残留物をAcOH(24.5ml)に溶解し、亜鉛粉末(3.430g、52.6mmol)を室温で加えた。反応混合液を室温で4時間撹拌した。反応混合液を飽和NaHCO3溶液(150ml)で希釈した。得られた混合液をEtOAc(3×50ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、6−(アミノメチル)−4−ブロモイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(1.2g、3.680mmol)を得た。LCMS:方法A、1.521分、MS: ES+ 327.20, 329.20。
THF(12ml)中の6−(アミノメチル)−4−ブロモイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(1.200g、3.67mmol)の撹拌溶液に、0℃でK2CO3(1.510g、11.01mmol)を加えた。混合液に0℃で塩化アセチル(0.31ml、4.40mmol)を加えた。反応混合液を室温で16時間撹拌した。反応混合液を飽和NaHCO3溶液(50ml)に注ぎ、EtOAc(3×50ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(DCM中3%MeOH)により精製して、6−(アセトアミドメチル)−4−ブロモイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.900g、2.445mmol)を得た。LCMS:方法A、1.872分、MS: ES+ 369.03, 371.04。
1,4−ジオキサン:水(9:1、5ml)中の6−(アセトアミドメチル)−4−ブロモイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.300g、0.813mmol)の撹拌溶液に、K2CO3(0.223g、1.626mmol)及び2−シアノフェニルボロン酸(0.179g、1.219mmol)を室温で加えた。反応混合液を20分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.089g、0.081mmol)を加えた。得られた反応混合液を85℃で16時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(25ml)に注ぎ、EtOAc(3×25ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中70%EtOAc)により精製して、6−(アセトアミドメチル)−4−(2−シアノフェニル)−イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.110g、0.281mmol)を得た。LCMS:方法A、1.879分、MS: ES+ 409.80[M+18]。
1,4−ジオキサン(10ml)中の6−(アセトアミドメチル)−4−ブロモイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(実施例225の工程bと同様にして調製、0.600g、1.626mmol)の撹拌溶液に、KOAc(0.313g、3.252mmol)及びビスピナコラトジボロン(0.495g、1.95mmol)を室温で加えた。反応混合液をN2ガスで20分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.117g、0.162mmol)を加えた。得られた反応混合液を85℃で4時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、セライト床を通して濾過し、EtOAc(3×50ml)で洗浄した。合わせた濾液を減圧下で濃縮した。得られた残留物をヘキサン(50ml)で粉砕し、高真空下で乾燥して、6−(アセトアミドメチル)−4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.850g)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、2.132分、MS: ES+ 361.80 [M-56]。
1,4−ジオキサン:水(9:1、4.4ml)中の6−(アセトアミドメチル)−4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(1.000g、2.415mmol)の溶液に、室温でK2CO3(0.330g、2.40mmol)及び4−ブロモイソフタロニトリル(CAS番号22433−89−2;0.250g、1.208mmol)を加えた。反応混合液を20分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.080g、0.120mmol)を加えた。得られた反応混合液を85℃で4時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(100ml)に注ぎ、EtOAc(3×100ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中70%EtOAc)により精製して、6−(アセトアミドメチル)−4−(2,4−ジシアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.120g、0.288mmol)を得た。LCMS:方法A、1.853分、MS: ES+ 361.58 [M-56]。
THF(10ml)中の中間体12(0.900g、2.58mmol)の撹拌溶液に、0℃でTEA(0.43ml、3.09mmol)及びCDI(0.627g、3.87mmol)を加えた。反応混合液を0℃で30分間撹拌した。反応混合液に0℃でメチルアミン(THF中2M)(3.86ml、7.72mmol)を加えた。反応混合液を室温で15時間撹拌した。得られた混合液を水(100ml)に注ぎ、EtOAc(2×100ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中21%EtOAc)により精製して、4−(4−シアノフェニル)−6−((3−メチルウレイド)−メチル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.270g、4.70mmol)を得た。LCMS:方法A、1.908分、MS: ES+ 407.60; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.97 - 7.94 (m, 2 H), 7.69 (t, J= 7.6 Hz, 2 H), 7.28 - 7.22 (m, 2 H), 6.49 (t, J= 5.6 Hz, 1 H), 5.85 - 5.81 (m, 2 H), 4.62 (s, 4 H), 4.26 (d, J= 6.0 Hz, 2 H), 2.56 (d, J= 4.8 Hz, 3 H), 1.44 (d, J= 12.4 Hz, 9 H)。
MeOH(10ml)中の中間体11(2.500g、7.668mmol)の撹拌溶液に、室温でNH2OH・HCl(5.99g、92.0mmol)を加えた。反応混合液を室温で8時間撹拌した。反応混合液から減圧下で溶媒を留去し、水(100ml)に注ぎ、EtOAc(2×100ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。次に、得られた残留物を室温でAcOH(35ml)に溶解した。反応混合液に亜鉛粉末(0.460g、7.19mmol)を室温で加えた。反応混合液を室温で24時間撹拌した。得られた反応混合液を飽和NaHCO3溶液(150ml)で希釈し、EtOAc(3×200ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、6−(アミノメチル)−4−ブロモイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(2.500g)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、1.527分、MS: ES+ 327.43, 329.43。
THF(25ml)中の6−(アミノメチル)−4−ブロモイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(2.500g、7.69mmol)の撹拌溶液に、TEA(1.28ml、9.23mmol)及びCDI(1.870g、11.538mmol)を0℃で加えた。反応混合液を0℃で30分間撹拌した。0℃でメチルアミン(THF中2M)(11.5ml、23mmol)を加えた。反応混合液を室温で15時間撹拌した。反応混合液を水(100ml)に注ぎ、EtOAc(2×100ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中21%EtOAc)により精製して、4−ブロモ−6−((3−メチルウレイド)メチル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(1.80g、4.70mmol)を得た。LCMS:方法A、1.923分、MS: ES+ 328.33, 330.33 [M-56]; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.35 (s, 1 H), 7.19 (d, J= 8.0 Hz, 1 H), 6.46 (t, J= 6.0 Hz, 1 H), 5.86 - 5.85 (m, 1 H), 4.66 (d, J= 8.8 Hz, 2 H), 4.66 (d, J= 8.8 Hz, 2 H), 4.49 (d, J= 8.8 Hz, 2 H), 4.19 (d, J= 10.4 Hz, 2 H), 1.46 (s, 9 H)。
IPA(5ml)中の6−(ブロモメチル)−4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(実施例216の工程dと同様にして調製、0.255g、0.833mmol)と1H−ピラゾール−5−アミン(0.345g、0.833mmol)の混合液に、K2CO3(0.459g、3.333mmol)を室温で加えた。反応混合液を100℃で16時間加熱した。反応混合液を減圧下で濃縮した。得られた粗物質を水(50ml)に注ぎ、EtOAc(3×50ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(DCM中4%MeOH)により精製して、6−(((1H−ピラゾール−5−イル)アミノ)メチル)−4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.100g、0.240mmol)を得た。LCMS:方法A、1.913分、MS: ES+ 416.57。
THF:水:MeOH(1:1:0.1、16.5ml)中の中間体13(4.000g、11.33mmol)の溶液に、室温でLiOH・H2O(1.40g、34.0mmol)を加えた。反応混合液を室温で16時間撹拌した。得られた反応混合液を水(35ml)で希釈し、1N HCl(40ml)で酸性化した。得られた沈殿物を濾過により集めた。固体物質をヘキサン(2×15ml)で洗浄し、高真空下で乾燥して、7−ブロモ−2−(tert−ブトキシカルボニル)イソインドリン−5−カルボン酸(3.500g、10.26mmol)を得た。LCMS:方法A、2.063分、: ES- 340.53, 342.50; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13.42 (br s, 1 H), 7.96 (s, 1 H), 7.89 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 4.73 (d, J=8.8 Hz, 2 H), 4.57 (d, J=9.2 Hz, 2 H), 1.47 (d, 9 H)。
THF(15ml)中の7−ブロモ−2−(tert−ブトキシカルボニル)イソインドリン−5−カルボン酸(1.500g、4.397mmol)の溶液に、EDC・HCl(1.680g、8.795mmol)、HOBT(0.810g、5.28mmol)、及びDIPEA(2.25ml、13.19mmol)を室温で加えた。反応混合液を30分間撹拌した後、NH4Br(2.150g、21.99mmol)を加えた。反応混合液を室温で1時間撹拌した。得られた混合液を水(70ml)に注ぎ、EtOAc(3×25ml)で抽出した。合わせた有機相を飽和NaHCO3溶液(2×50ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中3.4%MeOH)により精製して、4−ブロモ−6−カルバモイルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(1.100g、3.235mmol)を得た。LCMS:方法A、1.811分、MS: ES+ 341.40, 343.40; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.08 (s, 1 H), 7.99 (s, 1 H), 7.82 (d, J=14.8 Hz, 1 H), 7.52 (s, 1 H), 4.72 (d, J=6.4 Hz, 2 H), 4.56 (d, J=10.4 Hz, 2 H), 1.47 (s, 9 H)。
DMF(5ml)中の4−ブロモ−6−カルバモイルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.500g、1.470mmol)の混合液に、0℃でPOCl3(0.134ml、1.47mmol)を加えた。反応混合液を0℃で30分間撹拌した。得られた混合液を氷冷水(50ml)に注ぎ、ジエチルエーテル(2×40ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、高真空下で乾燥して、4−ブロモ−6−シアノイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.500g)を得た。LCMS:方法A、2.307分、MS: ES+ 267.24, 269.24 [M-56]; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.11 (s, 1 H), 7.87 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 4.72 (d, J= 9.6 Hz, 2H), 4.59 (d, J= 9.2 Hz, 2H), 1.46 (s, 9 H)。
1,4−ジオキサン:水(9:1、5ml)中の4−ブロモ−6−シアノイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.500g、1.552mmol)の撹拌溶液に、K2CO3(0.430g、3.105mmol)及び2−アミノカルボニルフェニルボロン酸(CAS番号380430−54−6;1.020g、6.211mmol)を室温で加えた。反応混合液を20分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.110g、0.155mmol)を加えた。得られた反応混合液を90℃で15時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(50ml)に注ぎ、EtOAc(2×50ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(40ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中35〜40%EtOAc)により精製して、4−(2−カルバモイルフェニル)−6−シアノイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.150g、0.413mmol)を得た。LCMS:方法A、1.875分、: ES+ 364.70; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.82 (d, J= 6.0 Hz, 1 H), 7.71 (d, J= 5.2 Hz, 1 H), 7.58-7.49 (m, 4 H), 7.39-7.30 (m, 2 H), 4.69 (d, J= 8.8 Hz, 2 H), 4.48 (d, J= 16.0 Hz, 2 H),1.42 (d, J= 16.4 Hz, 9 H)。
DMF:水(9:1、10ml)中の中間体13(0.900g、2.535mmol)の撹拌溶液に、室温でNaHCO3(0.638g、7.60mmol)及び4−シアノフェニルボロン酸(0.447g、3.04mmol)を加えた。反応混合液を20分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.185g、0.253mmol)を加えた。得られた反応混合液を100℃で15時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(100ml)に注ぎ、EtOAc(2×100ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中10%EtOAc)により精製して、7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2,5−ジカルボン酸2−(tert−ブチル)5−メチル(0.840g、2.222mmol)を得た。LCMS:方法A、2.511分、MS: ES+ 364.38 [M-15]。
THF:水(1:1、10ml)中の7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2,5−ジカルボン酸2−(tert−ブチル)5−メチル(0.800g、2.115mmol)の溶液に、LiOH・H2O(0.266g、6.345mmol)を室温で加えた。反応混合液を室温で6時間撹拌した。得られた反応混合液を飽和NaHCO3溶液(90ml)で希釈し、EtOAc(100ml)で抽出した。得られた水層を1M HCl(50ml)で酸性化し、EtOAc(2×100ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、2−(tert−ブトキシカルボニル)−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−カルボン酸(0.400g、1.098mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、2.130分、MS: ES- 363.38。
THF(7ml)中の2−(tert−ブトキシカルボニル)−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−カルボン酸(0.150g、0.411mmol)の溶液に、DIPEA(0.211ml、1.233mmol)及びHATU(0.234g、0.616mmol)を室温で加えた。反応混合液を室温で15分間撹拌した。0℃でジメチルアミン(THF中2M溶液)(0.31ml、0.62mmol)を反応混合液に加えた。反応混合液を室温で15時間撹拌した。得られた混合液を飽和NaHCO3(50ml)に注ぎ、EtOAc(2×50ml)で抽出した。合わせた有機相を集め、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー(MDC中3%MeOH)により精製して、4−(4−シアノフェニル)−6−(ジメチルカルバモイル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.110g、0.281mmol)を得た。LCMS:方法A、2.006分、MS: ES+ 392.51。
実施例226の工程aと同様の方法で、中間体13を使用して行った。
DMF:水(9:1、15ml)中の7−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2,5−ジカルボン酸2−(tert−ブチル)5−メチル(0.500g、1.240mmol)の溶液に、室温でNaHCO3(0.260g、3.10mmol)及び4−ブロモイソフタロニトリル(CAS番号22433−89−2;0.214g、1.003mmol)を加えた。反応混合液を20分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.075g、0.124mmol)を加えた。得られた反応混合液を90℃で4時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(50ml)に注ぎ、EtOAc(3×15ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中40%EtOAc)により精製して、7−(2,4−ジシアノフェニル)イソインドリン−2,5−ジカルボン酸2−(tert−ブチル)5−メチル(0.350g、0.868mmol)を得た。LCMS:方法A、2.299分、MS: ES+ 421.70 [M+18]。
実施例232の工程bと同様の方法で、メチルアミン(THF中の2M溶液)を使用して行った。
実施例73の工程aと同様の方法で、4−フルオロフェニルボロン酸を使用して行った。
実施例226の工程aと同様の方法で、4−ブロモ−6−カルバモイルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(実施例231の工程bと同様に調製した)を使用して、6−カルバモイル−4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを得た。LCMS:方法A、2.072分、MS: ES+ 389.70。
DMF:水(9:1、5ml)中の6−カルバモイル−4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.383g、0.987mmol)の撹拌溶液に、室温でK2CO3(0.227g、1.65mmol)及び2−ブロモベンゾニトリル(0.150g、0.824mmol)を加えた。反応混合液を20分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.060g、0.082mmol)を加えた。得られた反応混合液を95℃で6時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(80ml)に注ぎ、EtOAc(3×80ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(DCM中2.3%MeOH)により精製して、6−カルバモイル−4−(2−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.188g、0.518mmol)を得た。LCMS:方法A、1.818分、MS: ES+ 381.78 [M+18]。
DCM(9ml)中の6−アミノ−4−ブロモイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(実施例23の工程aと同様にして調製、0.900g、2.884mmol)の溶液に、ピリジン(9.000ml)及び塩化メシル(0.650g、5.77mmol)を0℃で加えた。反応混合液を室温で2時間撹拌した。得られた混合液を飽和クエン酸溶液(50ml)に注ぎ、EtOAc(2×50ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中35%EtOAc)により精製して、4−ブロモ−6−(メチルスルホンアミド)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.800g、2.051mmol)を得た。LCMS:方法A、2.128分、MS: ES+ 376.33, 378.33 [M-15]。
1,4−ジオキサン:水(9:1、10ml)中の6−(メチルスルホンアミド)−4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.360g、0.821mmol)の撹拌溶液に、室温でK2CO3(0.220g、1.640mmol)及び2−ブロモベンゾニトリル(0.150g、8.82mmol)を加えた。反応混合液を20分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.060g、0.082mmol)を加えた。得られた反応混合液を80℃で2時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(30ml)に注ぎ、EtOAc(2×30ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中22%EtOAc)により精製して、4−(2−シアノフェニル)−6−(メチルスルホンアミド)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.150g、0.363mmol)を得た。LCMS:方法A、2.037分、MS: ES+ 431.48 [M+18]。
工程bは、実施例216の工程bと同様の方法を使用して行った。
1,4−ジオキサン:水(9:1、5ml)中の6−(メチルスルホンアミド)−4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(1.030g、2.37mmolの撹拌溶液に、K2CO3(0.300g、2.37mmol)及び2−ブロモ−4−メトキシベンゾニトリル(CAS番号140860−51−1;0.250g、1.185mmol)を室温で加えた。反応混合液を20分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.087g、0.118mmol)を加えた。得られた反応混合液を90℃で2時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(50ml)に注ぎ、EtOAc(2×50ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(40ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中8%EtOAc)により精製して、4−(2−シアノ−5−メトキシフェニル)−6−(メチルスルホンアミド)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.150g、0.338mmol)を得た。LCMS:方法A、2.038分、MS: ES+ 444.6; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.99 (s, 1 H), 7.89 (t, J= 6.0 Hz, 1 H), 7.23 - 7.10 (m, 4 H), 4.64 (d, J=11.2, 2 H), 4.42 (d, J=10.4, 2 H), 3.85 (s, 3 H), 3.02 (s, 3 H), 1.40 (d, J=15.6 Hz, 9 H)。
DCM(120ml)中の6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン2HCl(CAS番号147740−02−1;10.0g、51.8mmol)の撹拌溶液に、DIPEA(26.0ml、155.4mmol)を0℃で加えた。得られた反応混合液を0℃で5分間撹拌した。0℃で塩化メシル(4.89ml、62.2mmol)を反応混合液に滴加した。得られた反応混合液を室温で6時間撹拌した。反応混合液を室温まで冷却し、飽和NaHCO3溶液(150ml)に注ぎ、EtOAc(3×50ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(2×100ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン(8.000g、40.404mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、1.332分、MS: ES+ 199.19。
DCM(200ml)中の6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン(8.000g、40.404mmol)の撹拌溶液に、m−CPBA(10.00g、60.61mmol)を室温で少しずつ加えた。反応混合液を室温で2時間撹拌した。得られた混合液を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物をメチルtert−ブチルエーテル(3×100ml)及びジエチルエーテル(2×50ml)で粉砕した。得られた固体を高真空下で乾燥して、6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン1−オキシド(8.500g、39.719mmol)を得た。MS: ES+ 215.02; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.21 (d, J= 6.4 Hz, 1 H), 7.55 (t, J= 8.0 Hz, 1 H), 7.33 (d, J= 7.6 Hz, 1 H), 4.75 (d, J=1.2 Hz, 2 H), 4.67 (d, J=1.2 Hz, 2 H), 3.09 (s, 3 H)。
DMF(10ml)中の6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン1−オキシド(0.500g、2.336mmol)の撹拌溶液に、(COCl)2(2容量 (vol)、1.000ml)を室温で加えた。得られた反応混合液を室温で15時間撹拌した。得られた反応混合液を、同じ方法により同じスケールで調製した16個の他のバッチと合わせた。得られた残留物を飽和NaHCO3溶液(400ml)に注ぎ、EtOAc(5×70ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(2×150ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、4−クロロ−6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジンと2−クロロ−6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジンの混合液(7.500g、32.327mmol)を加えた。粗物質をさらに精製することなく次の工程で使用した。LCMS:方法A、1.529,1.563分、MS: ES+ 233.28。
1,4−ジオキサン:水(9:1、70ml)中の4−クロロ−6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン及び2−クロロ−6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン(7.000g、30.172mmol)の溶液に、K2CO3(12.50g、90.52mmol)及び4−フルオロフェニルボロン酸(5.070g、36.21mmol)を室温で加えた。反応混合液を30分間脱気した後、PdCl2(dppf)(2.200g、3.017mmol)を加えた。得られた反応混合液を100℃で4時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、飽和NaHCO3溶液(200ml)に注いだ。得られた混合液をEtOAc(3×40ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(2×100ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー(n−ヘキサン中40〜55%EtOAc)により精製して、4−(4−フルオロフェニル)−6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン(3.00g、10.3mmol)を得た。LCMS:方法A、2.139分、MS: ES+ 293.10; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.57 (d, J= 4.8 Hz, 1 H), 7.73 - 7.70 (m, 2 H), 7.45 - 7.36 (m, 3 H), 4.83 (s, 2 H), 4.69 (s, 2 H), 3.08 (s, 3 H)。
MeCN(20ml)中の4−(4−フルオロフェニル)−6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン(0.500g、1.712mmol)の溶液に、尿素−過酸化水素(0.643g、6.848mmol)を0℃で加えた。反応混合液を室温で5分間撹拌した。TFAA(0.5ml、1容量)を0℃で反応混合液に加えた。反応混合液を室温で2時間撹拌した。得られた反応混合液を、同じ方法により同じスケールで調製した5つの他のバッチと合わせた。反応混合液を室温まで冷却し、水(200ml)に注ぎ、EtOAc(3×50ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(2×50ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(DCM中3〜5%MeOH)により精製して、4−(4−フルオロフェニル)−6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−1−オキシド(1.600g、5.194mmol)を得た。LCMS:方法A、1.498分、MS: ES+ 309.44。
DMF(8ml)中の4−(4−フルオロフェニル)−6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン1−オキシド(0.400g、1.298mmol)の撹拌溶液に、室温で(COCl)2(0.80ml、2容量)を加えた。得られた反応混合液を室温で24時間撹拌した。得られた反応混合液に、室温で(COCl)2(0.40ml、1容量)を加えた。得られた反応混合液を再び室温で24時間撹拌した。得られた反応混合液を、同じ方法により同じスケールで調製した3つの他のバッチと合わせた。得られた混合液を飽和NaHCO3溶液(200ml)に注ぎ、EtOAc(3×50ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(2×30ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(n−ヘキサン中30〜40%EtOAc)により精製して、2−クロロ−4−(4−フルオロフェニル)−6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン(0.600g、1.840mmol)を得た。LCMS:方法A、2.018分、MS: ES+ 327.28。
1,4−ジオキサン(15ml)中の2−クロロ−4−(4−フルオロフェニル)−6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン(0.200g、0.613mmol)の混合液に、室温でCs2CO3(0.598g、1.840mmol)及び4−アミノメチルテトラヒドロピラン(CAS番号130290−79−8;0.084g、0.736mmol)を加えた。反応混合液を30分間脱気した後、Pd2(dba)3(0.112g、0.122mmol)及びキサントホス(0.070g、0.122mmol)を加えた。得られた反応混合液を100℃で3時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、飽和NaHCO3溶液(30ml)に注ぎ、EtOAc(3×15ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(2×20ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー(n−ヘキサン中40〜50%EtOAc)により精製して、4−(4−フルオロフェニル)−6−(メチルスルホニル)−N−((テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)メチル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−2−アミン(0.140g、0.345mmol)を得た。LCMS:方法A、1.767分、MS: ES+ 406.53。
AcOH(10ml)中の4−(4−フルオロフェニル)−6−(メチルスルホニル)−N−((テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)メチル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−2−アミン(0.140g、0.345mmol)の溶液に、室温でAcOH(1.4ml)中の33%HBrを加えた。得られた反応混合液を100℃で2時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、減圧下で濃縮した。得られた粗物質をDCM(3×20ml)、続いてMeOH(2×10ml)で共沸蒸留した。得られた残留物をMeOH:ジエチルエーテル中で結晶化させて精製した。得られた固体をジエチルエーテル(3×20ml)で粉砕し、高真空下で乾燥して、4−(4−フルオロフェニル)−N−((テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)メチル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−2−アミンHBr塩(0.080g、0.196mmol)を得た。LCMS:方法A、1.428分、MS: ES+ 328.48。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。
THF(20ml)中の2−ブロモ−4−(4−フルオロフェニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジンHBr塩(0.160g、0.430mmol)の撹拌溶液に、K2CO3(0.178g、1.290mmol)を室温で加えた。Boc無水物(0.187g、0.860mmol)を0℃で反応混合液に加えた。反応混合液を室温で2時間撹拌した。混合液を飽和NaHCO3溶液(30ml)に注ぎ、EtOAc(3×20ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(2×15ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー(DCM中2〜3%MeOH)により精製して、2−ブロモ−4−(4−フルオロフェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.130g、0.331mmol)を得た。LCMS:方法A、2.586分、MS: ES+ 393.28, 395.28。
1,4−ジオキサン(15ml)中の2−ブロモ−4−(4−フルオロフェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.130g、0.331mmol)の混合液に、Cs2CO3(0.323g、0.994mmol)及びCH3CONH2(0.039g、0.663mmol)を室温で加えた。反応混合液を30分間脱気した後、Pd2(dba)3(0.060g、0.066mmol)及びキサントホス(0.038g、0.066mmol)を加えた。得られた反応混合液を100℃で3時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、飽和NaHCO3溶液(25ml)に注いだ。得られた混合液をEtOAc(3×10ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(2×10ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー(n−ヘキサン中30〜40%EtOAc)により精製して、2−アセトアミド−4−(4−フルオロフェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.060g、0.161mmol)を得た。LCMS:方法A、2.083分、MS: ES+ 372.68; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.19 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 7.95 - 7.87 (m, 1 H), 7.49 - 7.46 (m, 2 H), 7.20 - 7.11 (m, 2 H), 4.75 - 4.59 (m, 4 H), 2.22 (s, 3 H), 1.50 (d, , J=5.6 Hz, 9 H)。
DMSO:水(1:1、5ml)中の2−クロロ−4−(4−フルオロフェニル)−6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン(実施例246の工程fと同様にして調製、0.400g、1.226mmol)の混合液に、3−アミノ−1,2−プロパンジオール(CAS番号616−30−8;2.23g、24.5mmol)を室温で加えた。得られた反応混合液を140℃で16時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(30ml)に注ぎ、EtOAc(3×15ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(2×20ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー(DCM中2〜4%MeOH)により精製して、3−((4−フルオロフェニル)−6−(メチルスルホニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−2−イル)−アミノ)プロパン−1,2−ジオール(0.200g、0.524mmol)を得た。LCMS:方法A、1.522分、MS: ES+ 382.43。
THF(5ml)中の塩化(メトキシメチル)トリフェニルホスホニウム(CAS番号4009−98−7;2.88g、8.40mmol)の混合液に、NaHMDS(THF中1M)(8.4ml、8.4mmol)を−78℃で滴加した。反応混合液を−78℃で45分間撹拌した。THF(5ml)中の6−ホルミル−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(実施例213の工程dど同様にして調製、0.750g、2.100mmol)の溶液を、−78℃で反応混合液に滴加した。得られた反応混合液を−78℃〜0℃で1時間撹拌した。得られた反応混合液を、同じ方法で調製した同じスケールの1つの他のバッチと合わせた。得られた混合液を水(100ml)に注ぎ、EtOAc(2×100ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(40ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中20〜25%EtOAc)により精製して、6−(2−メトキシビニル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(0.750g、1.95mmol)を得た。LCMS:方法E、5.381,5.417分、MS: ES+ 386.40。
THF(5ml)中の6−(2−メトキシビニル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(0.750g、1.948mmol)の溶液に、室温で6M HCl(5ml)を加えた。得られた反応混合液を室温で8時間撹拌した。得られた沈殿物を濾過により集めた。得られた残留物を高真空下で乾燥して、6−(2−オキソエチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(0.700g、1.886mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、2.688分、MS: ES+ 372.30; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.72 (s, 1 H), 7.52 - 7.21 (m, 12 H), 5.14 (d, J=6.4 Hz, 2 H), 4.76 (s, 2 H), 4.71 (s, 2 H), 3.85 (s, 2 H)。
CrO3(1g)を5℃〜10℃で水(3ml)に溶解した。濃H2SO4(1ml)を0℃〜10℃で滴加し、ジョーンズ試薬を得た。アセトン(7ml)中の6−(2−オキソエチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(0.700g、1.89mmol)の溶液に、このジョーンズ試薬(1ml)を加えた。得られた反応混合液を0℃〜10℃で1時間撹拌した。得られた混合液を水(60ml)に注ぎ、EtOAc(2×70ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(60ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をジエチルエーテル(2×4ml)で粉砕し、高真空下で乾燥して、2−(2−((ベンジルオキシ)カルボニル)−7−フェニルイソインドリン−5−イル)酢酸(0.450g、1.162mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、2.406分、MS: ES+ 388.12。
THF(5ml)中の2−(2−((ベンジルオキシ)カルボニル)−7−フェニルイソインドリン−5−イル)酢酸(0.450g、1.162mmol)の溶液に、HATU(0.660g、1.743mmol)及びDIPEA(0.400ml、2.324mmol)を室温で加えた。反応混合液を室温で25分間撹拌した。反応混合液に室温でジメチルアミン(THF中2M)(0.87ml、1.74mmol)を加えた。反応混合液を室温で15時間撹拌した。得られた反応混合液を水(80ml)に注ぎ、EtOAc(2×80ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(80ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中3%MeOH)により精製して、6−(2−(ジメチルアミノ)−2−オキソエチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(0.250g、0.603mmol)を得た。LCMS:方法A、2.336分、MS: ES+ 415.50。
THF:MeOH(1:1、10ml)中の6−(2−オキソエチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(実施例251の工程bと同様にして調製、0.800g、2.156mmol)の溶液に、NaBH4(0.244g、6.469mmol)を0℃で少しずつ加えた。得られた反応混合液を室温で2時間撹拌した。得られた混合液を水(100ml)に注ぎ、EtOAc(2×100ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、6−(2−ヒドロキシエチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(0.800g、2.144mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に使用した。LCMS:方法A、2.417分、MS: ES+ 374.44。
DCM(10ml)中の6−(2−ヒドロキシエチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(0.270g、0.723mmol)の溶液に、ピリジン(0.291ml、3.619mmol)、続いて塩化p−トルエンスルホニル(0.344g、1.81mmol)を0℃で加えた。反応混合液を室温で36時間撹拌した。得られた反応混合液を飽和クエン酸溶液(75ml)に注ぎ、EtOAc(2×75ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中21%EtOAc)により精製して、4−フェニル−6−(2−(トシルオキシ)エチル)イソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(0.200g、0.379mmol)を得た。LCMS:方法A、2.851分、MS: ES+ 545.50 [M+18]。
THF(2ml)中の4−フェニル−6−(2−(トシルオキシ)エチル)イソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(0.200g、0.379mmol)の撹拌溶液に、NMP(1ml)、続いてナトリウムメタンチオレート(0.053g、0.758mmol)を室温で加えた。反応混合液を70℃で15時間加熱した。反応混合液を飽和NaHCO3溶液(100ml)に注ぎ、EtOAc(2×100ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中23%EtOAc)により精製して、6−(2−(メチルチオ)エチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(0.100g、0.248mmol)を得た。LCMS:方法A、2.926分、MS: ES+ 404.40。
DCM(5ml)中の6−(2−(メチルチオ)エチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(0.100g、0.248mmol)の溶液に、m−CPBA(0.120g、0.744mmol)を0℃で少しずつ加えた。反応混合液を室温で5時間撹拌した。得られた混合液を飽和NaHCO3溶液(100ml)に注ぎ、EtOAc(2×100ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、6−(2−(メチルスルホニル)エチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(0.100g、0.229mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程で使用した。LCMS:方法A、2.334分、MS: ES+ 453.38 [M+18]。
THF(22ml)中の6−ホルミル−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(実施例213の工程dと同様にして調製、1.200g、3.361mmol)のTHF(22ml)溶液に、NaBH4(0.380g、10.08mmol)続いてMeOH(2ml)を、室温で少しずつ加えた。得られた反応混合液を室温で1時間撹拌した。得られた混合液を水(75ml)に注ぎ、EtOAc(2×100ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、6−(ヒドロキシメチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(1.200g、3.342mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程で使用した。LCMS:方法A、2.476分、MS: ES+ 360.30。
DCM(20ml)中の6−(ヒドロキシメチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(1.000g、2.785mmol)の溶液に、TEA(0.194ml、1.392mmol)及びPBr3(0.753g、2.785mmol)を−78℃で順次加えた。反応混合液を−78℃〜室温で1時間撹拌した。得られた反応混合液を飽和NaHCO3溶液(100ml)に注ぎ、EtOAc(2×100ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、6−(ブロモメチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(0.700g、1.662mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程で使用した。LCMS:方法A、3.023分、MS: ES+ 422.28, 424.28。
MeOH:DCM(1:1、15ml)中の6−(ブロモメチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(0.700g、1.662mmol)の撹拌溶液に、ナトリウムメタンチオレート(0.116g、1.662mmol)を0℃で滴加した。反応混合液を室温で5時間撹拌した。得られた混合液を減圧下で濃縮して、6−((メチルチオ)メチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸ベンジル(0.700g)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程で使用した。LCMS:方法A、3.042分、MS: ES+ 390.33。
THF(320ml)中の塩化(メトキシメチル)トリフェニルホスホニウム(CAS番号4009−98−7,67.50g、196.9mmol)の混合液に、NaHMDS(THF中1M)(197ml、197mmol)を−78℃で加えた。反応混合液を−78℃で45分間撹拌した。THF(50ml)中の中間体11(16.0g、49.23mmol)の溶液を、−78℃で反応混合液に滴加した。得られた反応混合液を−78℃〜0℃で1時間撹拌した。得られた混合液を水(250ml)に注ぎ、EtOAc(2×250ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中15%EtOAc)により精製して、4−ブロモ−6−(2−メトキシビニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(10.0g、28.2mmol)を得た。LCMS:方法A、2.611+2.647分、MS: ES+ 298.40, 300.40 [M-56]。
EtOH(100ml)中の4−ブロモ−6−(2−メトキシビニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(5.000g、14.03mmol)の撹拌溶液に、ウィルキンソン触媒RhCl(PPh3)3(3.930g、4.21mmol)を室温で加えた。得られた反応混合液をH2ガスでパージし、60℃で6時間加熱した。得られた反応混合液を、同じ方法にい同じスケールで調製した1つの他のバッチと合わせた。反応混合液をセライトパッドを通して濾過し、MeOH(3×250ml)で洗浄した。合わせた濾液を減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中16.3%EtOAc)により精製して、4−ブロモ−6−(2−メトキシエチル)−イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(7.600g、21.41mmol)を得た。LCMS:方法A、2.487分、MS: ES+ 356.40, 358.40; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.38 (s, 1 H), 7.21 (s, 1 H), 4.65 (d, J=5.2 Hz, 2 H), 4.48 (d, J= 6.0 Hz, 2 H), 3.52 (t, J= 6.0 Hz, 2 H), 3.22 (s, 3 H), 2.81 (t, J= 6.0 Hz, 2 H), 1.46 (s, 9 H)。
1,4−ジオキサン(5ml)中の4−ブロモ−6−(2−メトキシエチル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.250g、0.704mmol)の撹拌溶液に、K2CO3(0.194g、1.41mmol)及び4−シアノフェニルボロン酸(0.114g、0.774mmol)を室温で加えた。反応混合液を30分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.052g、0.070mmol)を加えた。得られた反応混合液を80℃で2時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(20ml)に注いだ。得られた混合液をEtOAc(3×20ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(n−ヘキサン中50%EtOAc)により精製して、4−(4−シアノフェニル)−6−(2−メトキシエチル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.170g、0.449mmol)を得た。LCMS:方法A、2.415分、MS: ES+ 323.47 [M-56]。
DMF:水(9:1、5ml)中の4−ブロモ−6−(2−メトキシエチル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(実施例254の工程bと同様にして調製、0.500g、1.41mmol)の撹拌溶液に、NaHCO3(0.355g、4.225mmol)及び2−エトキシカルボニルフェニルボロン酸(CAS番号380430−53−5;0.328g、1.686mmol)を室温で加えた。反応混合液を30分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.103g、0.140mmol)を加えた。得られた反応混合液を100℃で6時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(20ml)に注いだ。得られた混合液をEtOAc(3×20ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(DCM中2.5%MeOH)により精製して、4−(2−(エトキシカルボニル)フェニル)−6−(2−メトキシエチル)−イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.500g、1.176mmol)を得た。LCMS:方法A、2.527分、MS: ES+ 426.70。
THF:水(1:1、10ml)中の4−(2−(エトキシカルボニル)フェニル)−6−(2−メトキシエチル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.500g、1.176mmol)の溶液に、室温でNaOH(0.141g、3.53mmol)を加えた。反応混合液を70℃で1時間加熱した。得られた反応混合液を1M HCl溶液(10ml)で希釈し、EtOAc(4×10ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、2−(2−(tert−ブトキシカルボニル)−6−(2−メトキシエチル)イソインドリン−4−イル)安息香酸(0.400g、1.007mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、2.118分、MS: ES- 396.76。
THF(4ml)中の2−(2−(tert−ブトキシカルボニル)−6−(2−メトキシエチル)イソインドリン−4−イル)安息香酸(0.400g、1.007mmol)の溶液に、EDC・HCl(0.386g、2.015mmol)、HOBt(0.185g、1.209mmol)、及びDIPEA(0.390g、3.022mmol)を室温で加えた。反応混合液を10分間撹拌した後、NH4Br(0.493g、5.037mmol)を加えた。得られた反応混合液を室温で16時間撹拌した。反応混合液を水(20ml)に注ぎ、EtOAc(4×20ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中2.1%MeOH)により精製して、4−(2−カルバモイルフェニル)−6−(2−メトキシエチル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.287g、0.724mmol)を得た。LCMS:方法A、1.927分、MS: ES+ 341.63 [M-56]。
THF(5ml)中の塩化トリフェニル(ピリジン−3−イルメチル)ホスホニウム(CAS番号79296−92−7,1.3341g、3.447mmol)の混合液に、NaHMDS(THF中1M)(3.45ml、3.45mmol)を−78℃で加えた。反応混合液を−78℃で45分間撹拌した。THF(5ml)中の4−(4−シアノフェニル)−6−ホルミルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(中間体12の工程aと同様にして調製、0.300g、0.861mmol)の溶液を、−78℃で反応混合液に滴加した。得られた反応混合液を0℃〜室温で1時間撹拌した。得られた混合液を水(50ml)に注ぎ、EtOAc(2×30ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中25%EtOAc)により精製して、4−(4−シアノフェニル)−6−(2−(ピリジン−3−イル)−ビニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.29g、0.68mmol)を得た。LCMS:方法A、2.312分、MS: ES+ 424.63。
MeOH(10ml)中の4−(4−シアノフェニル)−6−(2−(ピリジン−3−イル)ビニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.250g、0.590mmol)の撹拌溶液に、20%Pd(OH)2(0.090g、0.36w/v)を室温で加えた。得られた反応混合液をH2ガスで室温で30分間パージした。反応混合液をセライト床を通して濾過し、MeOH(2×10ml)で洗浄した。合わせた濾液を減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中35%EtOAc)により精製して、4−(4−シアノフェニル)−6−(2−(ピリジン−3−イル)エチル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.115g、0.270mmol)を得た.LCMS:方法A、2.001分、MS: ES+ 426.83。
MeCN(25ml)中の1−(4−(ヨードメチル)ピペリジン−1−イル)エタン−1−オン(CAS番号1353954−96−7;1.500g、5.62mmol)の溶液に、トリフェニルホスフィン(1.910g、7.30mmol)を室温で加えた。反応混合液を100℃で48時間加熱した。混合液を室温まで冷却し、減圧下で濃縮した。残留物をジエチルエーテル(10ml)中の30%DCMで粉砕し、高真空下で乾燥して、ヨウ化((1−アセチルピペリジン−4−イル)メチル)トリフェニルホスホニウム(2.000g、3.78mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程で使用した。LCMS:方法A、1.517分、MS: ES+ 402.58。
THF(2ml)中のヨウ化((1−アセチルピペリジン−4−イル)メチル)トリフェニルホスホニウム(0.606g、1.146mmol)の混合液に、n−BuLi(ヘキサン中15%溶液)(1.00ml、2.3mmol)を−0℃で滴加した。反応混合液を0℃で45分間撹拌した。THF(1ml)中の4−(4−シアノフェニル)−6−ホルミルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(中間体12の工程aと同様にして調製、0.100g、0.286mmol)の溶液を、反応混合液に0℃で滴加した。得られた反応混合液を0℃で1.5時間撹拌した。得られた反応混合液を、同じ方法により同じスケールで調製した2つの他のバッチと合わせた。得られた混合液を飽和NH4Cl溶液(200ml)でクエンチし、EtOAc(3×50ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(2×50ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中70%EtOAc)により精製して、6−(2−(1−アセチルピペリジン−4−イル)ビニル)−4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.200g、0.424mmol)を得た。LCMS:方法A、2.392分、MS: ES+ 472.83。
DCM(150ml)中の4−ブロモイソインドリン−1,3−ジオン(CAS番号70478−63−6,15.00g、66.4mmol)の溶液に、臭化メチルマグネシウム(THF中1M)(199ml、199mmol)を0℃でN2雰囲気下で滴加した。反応混合液を室温で2時間撹拌した。反応混合液を、同じ方法により同じスケールで調製した3つの他のバッチと合わせた。得られた反応混合液をNH4Cl溶液(500ml)に注ぎ、DCM(3×1L)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中30〜32%EtOAc)により精製して、7−ブロモ−3−ヒドロキシ−3−メチルイソインドリン−1−オンと4−ブロモ−3−ヒドロキシ−3−メチルイソインドリン−1−オンの混合液(37.00g、153.6mmol)を得た。LCMS:方法A、1.435分、MS: ES+ 242.33, 244.33。
DCM(100ml)中の7−ブロモ−3−ヒドロキシ−3−メチルイソインドリン−1−オン及び4−ブロモ−3−ヒドロキシ−3−メチルイソインドリン−1−オン(12.00g、49.8mmol)の混合液を、−40℃に冷却した。トリエチルシラン(80.4ml、498mmol)を−40℃でN2雰囲気下で反応混合液に加えた。三フッ化ホウ素ジエチルエーテル(18.7ml、149.4mmol)をN2雰囲気下、−40℃で反応混合液に加えた。反応混合液を0℃で1時間撹拌した。得られた反応混合液を、同じ方法により同じスケールで調製した2つの他のバッチと合わせた。得られた反応混合液をNaHCO3溶液(500ml)に注ぎ、DCM(3×1000ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた粗物質をカラムクロマトグラフィー(DCM中3%EtOAc)により精製して、7−ブロモ−3−メチルイソインドリン−1−オン(9.200g、40.9mmol)を得た。LCMS:方法A、1.521分、MS: ES+ 226.11, 228.11; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.61 (dd, J=7.2, 1.2 Hz, 1 H), 7.43 - 7.38 (m, 3 H), 7.68 - 7.63 (m, 1 H), 1.52 (d, J=6.8 Hz, 3 H)。
無水THF(10ml)中の水素化ホウ素ナトリウム(0.672g、17.8mmol)の溶液に、N2雰囲気下0℃でヨウ素(3.380g、13.3mmol)を加えた。反応混合液を0℃でN2雰囲気下で30分間撹拌した。無水THF(2ml)中の7−ブロモ−3−メチルイソインドリン−1−オン(1.0g、4.444mmol)の溶液を、0℃で反応混合液に加えた。反応混合液を室温で2時間及び還流下でさらに2時間撹拌した。得られた反応混合液を、同じ方法により同じスケールで調製した8つの他のバッチと合わせた。反応混合液を1M HCl溶液(200ml)に注ぎ、EtOAc(2×250ml)で抽出した。水層をNa2CO3を用いてpH8まで中和し、さらにEtOAc(2×500ml)で抽出した。有機相を集め、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、4−ブロモ−1−メチルイソインドリン(5.89g、27.91mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、1.387分、MS: ES+ 212.13, 214.13。
THF(50ml)中の4−ブロモ−1−メチルイソインドリン(5.89g、27.914mmol)の溶液に、TEA(7.800ml、55.828mmol)及びBoc無水物(7.260g、93.04mmol)を0℃で加えた。反応混合液を室温で1時間撹拌した。反応混合液を水(250ml)に注ぎ、EtOAc(3×250ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。粗物質をカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中5%EtOAc)により精製して、4−ブロモ−1−メチルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(5.4g、17.307mmol)を得た。LCMS:方法A、2.631分、MS: ES+ 256.28, 258.28 [M-56]。
1,4−ジオキサン:水(9:1、8.8ml)中の1−メチル−4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(1.430g、4.01mmol)の撹拌溶液に、K2CO3(1.100g、8.016mmol)及び2−ブロモ−5−クロロ安息香酸メチル(CAS番号27007−53−0;1.00g、4.01mmol)を室温で加えた。反応混合液を15分間脱気した後、PdCl2(dppf)DCM錯体(0.327g、0.040mmol)を加えた。得られた反応混合液を90℃で1時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(100ml)に注いだ。得られた混合液をEtOAc(3×100ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(n−ヘキサン中5%EtOAc)により精製して、4−(4−クロロ−2−(メトキシカルボニル)フェニル)−1−メチルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.890g、2.215mmol)を得た。LCMS:方法A、2.854分、MS: ES+ 402.50。
THF:水(1:1、10ml)中の4−(4−クロロ−2−(メトキシカルボニル)フェニル)−1−メチルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.890g、2.215mmol)の溶液に、LiOH・H2O(0.278g、6.645mmol)を室温で加えた。反応混合液を70℃で3時間撹拌した。得られた反応混合液を水(100ml)で希釈し、DCM(50ml)で抽出した。得られた水層を1NHCl(50ml)で酸性化し、EtOAc(3×50ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、2−(2−(tert−ブトキシカルボニル)−1−メチルイソインドリン−4−イル)−5−クロロ安息香酸(0.601g、1.552mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、2.473分、MS: ES+ 332.38 [M-56]。
THF(5ml)中の2−(2−(tert−ブトキシカルボニル)−1−メチルイソインドリン−4−イル)−5−クロロ安息香酸(0.300g、0.775mmol)の溶液に、EDC・HCl(0.296g、1.550mmol)、HOBt(0.118g、0.775mmol)、及びDIPEA(0.299ml、2.325mmol)を室温で加えた。反応混合液を室温で20分間撹拌した。NH4Cl(0.207g、23.560mmol)を室温で反応混合液に加えた。反応混合液を室温で3時間撹拌した。得られた反応混合液を飽和NaHCO3溶液(100ml)に注ぎ、EtOAc(3×100ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中0.1%MeOH)により精製して、4−(2−カルバモイル−4−クロロフェニル)−1−メチルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.230g、0.595mmol)を得た。LCMS:方法A、2.248分、MS: ES+ 387.50。
DMF(225ml)中の5−フルオロ−2−メチル安息香酸(CAS番号33184−16−6;19.2g、124.675mmol)の撹拌溶液に、N−ヨードスクシンイミド(30.86g、137.1mmol)及び酢酸パラジウム(II)(2.8g、12.5mmol)を室温で加えた。得られた反応混合液を110℃で15時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(500ml)に注いだ。得られた混合液をEtOAc(2×200ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(150ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、3−フルオロ−2−ヨード−6−メチル安息香酸(25.0g、89.285mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、1.779分、MS: ES- 279.12。
DMF(50ml)中の3−フルオロ−2−ヨード−6−メチル安息香酸(25.0g、89.285mmol)の撹拌溶液に、室温でK2CO3(24.65g、178.570mmol)を加えた。反応混合液を室温で20分間撹拌した後、ヨウ化エチル(10.9g、133.9mmol)を加えた。反応混合液を室温で2時間撹拌した。得られた混合液を水(350ml)に注ぎ、EtOAc(3×200ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(150ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー(DCM中2.5%MeOH)により精製して、3−フルオロ−2−ヨード−6−メチル安息香酸エチル(27.0g、87.662mmol)を得た。LCMS:方法A、2.330分、MS: ES+ 309.20。
CCl4(270ml)中の3−フルオロ−2−ヨード−6−メチル安息香酸エチル(27.00g、87.66mmol)の撹拌溶液に、NBS(23.4g、131.5mmol)及びAIBN(1.44g、8.77mmol)を室温で加えた。得られた反応混合液を90℃で15時間加熱した。反応混合液を10℃に冷却した。反応混合液を濾過し、CCl4(20ml)で洗浄した。得られた濾液を減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(n−ヘキサン中23%EtOAc)により精製して、6−(ブロモメチル)−3−フルオロ−2−ヨード安息香酸エチル(31.000g、80.310mmol)を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.68 - 7.59 (m, 1 H), 7.39 (d, J= 8.0 Hz, 1 H), 4.65 (s, 2 H), 4.35 - 4.46 (m, 2 H), 1.32 - 1.38 (m, 3 H)。
EtOH(210ml)中の6−(ブロモメチル)−3−フルオロ−2−ヨード安息香酸エチル(31.000g、80.310mmol)の溶液に、K2CO3(44.330g、321.240mmol)及び4−メトキシベンジルアミン(13.20g、96.4mmol)を室温で加えた。反応混合液を80℃で15時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、減圧下で濃縮した。反応混合液を飽和NaHCO3溶液(200ml)に注ぎ、EtOAc(3×100ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(n−ヘキサン中35%EtOAc)により精製して、6−フルオロ−7−ヨード−2−(4−メトキシベンジル)イソインドリン−1−オン(22.0g、55.4mmol)を得た。LCMS:方法A、2.082分、MS: ES+ 398.48; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.56 - 7.52 (m, 1 H), 7.45 (t, J= 8.4 Hz, 1H), 7.23 (d, J= 8.4 Hz, 2 H), 6.91 (d, J= 8.4 Hz, 2 H), 4.64 (s, 2 H), 4.23 (s, 2 H), 3.73 (s, 3 H)。
THF(220ml)中の6−フルオロ−7−ヨード−2−(4−メトキシベンジル)イソインドリン−1−オン(22.0g、55.4mmol)の溶液に、BH3−DMS(42.060ml、443.320mmol)を0℃で滴加した。反応混合液を室温で15時間撹拌し、次に反応混合液を75℃で24時間撹拌した。反応混合液を再び0℃に冷却した。第2のロットのBH3−DMS(42.060ml、443.320mmol)を0℃で反応混合液に加えた。反応混合液を再び室温で15時間撹拌し、次に75℃で24時間加熱した。反応混合液を0℃に冷却し、MeOH(50ml)をゆっくり加えてクエンチした。得られた混合液を75℃で2時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(DCM中2%MeOH)により精製して、5−フルオロ−4−ヨード−2−(4−メトキシベンジル)イソインドリン(15.00g、39.16mmol)を得た。LCMS:方法A、1.509分、MS: ES+ 384.38。
クロロベンゼン(80ml)中の5−フルオロ−4−ヨード−2−(4−メトキシベンジル)イソインドリン(10.00g、26.11mmol)の溶液に、4Åのモレキュラーシーブ(5g)を室温で加えた。得られた反応混合液を室温で30分間撹拌した。クロロ蟻酸1−クロロエチル(7.500g、52.22mmol)を0℃で反応混合液に加えた。得られた反応混合液を室温で15分間撹拌し、次に90℃で5時間加熱した。得られた混合液をセライト床を通して濾過し、MeOH(35ml)で洗浄した。合わせた濾液を90℃で2時間加熱した。反応混合液を0℃に冷却し、n−ヘキサン(40ml)でゆっくりと希釈した。得られた混合液を0℃で30分間撹拌した。得られた沈殿物を真空下で濾別し、n−ヘキサン(20ml)で洗浄し、真空下で乾燥して、5−フルオロ−4−ヨードイソインドリンHCl塩(6.000g、20.03mmol)を得た。この物質をさらに精製せずにそのまま次の工程で使用した。LCMS:方法A、1.325分、MS: ES+ 264.29; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.14(s, 2 H), 7.44 - 7.40 (m, 1 H), 7.24 (t, J= 8.4 Hz, 1 H), 4.62 (s, 2 H), 4.42 (s, 2 H)。
THF(60ml)中の5−フルオロ−4−ヨードイソインドリンHCl塩(6.000g、20.03mmol)の溶液に、TEA(7.0ml、50.1mmol)を室温で加えた。反応混合液を室温で10分間撹拌した。Boc無水物(8.730g、40.07mmol)を室温で反応混合液に加えた。反応混合液を室温で3時間撹拌した。反応混合液を水(200ml)に注ぎ、EtOAc(2×150ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(n−ヘキサン中10%EtOAc)により精製して、5−フルオロ−4−ヨードイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(6.000g、16.53mmol)を得た。LCMS:方法A、2.653分、MS: ES+ 308.10 [M-56]; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.36 - 7.32 (m, 1 H), 7.16 (t, J= 8.4 Hz, 1 H), 4.69 (d, J=10.8 Hz, 2 H), 4.46 (d, J=8.8 Hz, 2 H), 1.47 (d, J=5.2 Hz, 9 H)。
1,4−ジオキサン:水(9:1、20ml)中の5−フルオロ−4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(3.630g、10.00mmol)の撹拌溶液に、K2CO3(2.300g、16.67mmol)及び2−ブロモ−5−シアノ安息香酸メチル(CAS番号1031927−03−3;2.00g、8.33mmol)を室温で加えた。反応混合液を20分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.610g、0.833mmol)を加えた。反応混合液を110℃で15時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(100ml)に注いだ。得られた混合液をEtOAc(2×100ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(100ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(n−ヘキサン中25%EtOAc)により精製して、4−(4−シアノ−2−(メトキシカルボニル)−フェニル)−5−フルオロイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(2.20g、5.55mmol)を得た。LCMS:方法A、2.539分、MS: ES+ 341.27 [M-56]。
THF:水(1:1、30ml)中の4−(4−シアノ−2−(メトキシカルボニル)フェニル)−5−フルオロイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(2.200g、5.555mmol)の溶液に、LiOH・H2O(0.710g、16.725mmol)を室温で加えた。反応混合液を室温で15時間撹拌した。得られた反応混合液を飽和NaHCO3溶液(30ml)で希釈し、EtOAc(30ml)で抽出して不要な不純物を分離した。得られた水層を1M HCl(50ml)で酸性化し、EtOAc(3×50ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、2−(2−(tert−ブトキシカルボニル)−5−フルオロイソインドリン−4−イル)−5−シアノ安息香酸(1.800g、4.71mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、2.018分、MS: ES- 381.60。
THF(20ml)中の2−(2−(tert−ブトキシカルボニル)−5−フルオロイソインドリン−4−イル)−5−シアノ安息香酸(1.800g、4.712mmol)の溶液に、EDC・HCl(1.360g、7.068mmol)、HOBt(0.870g、5.654mmol)、及びDIPEA(1.62ml、9.424mmol)を室温で加えた。反応混合液を20分間撹拌した後、NH4Br(2.300g、23.56mmol)を加えた。反応混合液を室温で3時間撹拌した。追加のNH4Br(2.300g、23.56mmol)を反応混合液に加え、さらに15時間撹拌した。得られた反応混合液を水(100ml)に注ぎ、EtOAc(2×80ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(50ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中2.3%MeOH)により精製して、4−(2−カルバモイル−4−シアノフェニル)−5−フルオロイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.500g、1.312mmol)を得た。LCMS:方法A、1.889分、MS: ES+ 382.50。
CCl4(45ml)中の3−ブロモ−6−フルオロ−o−キシレン(CAS番号52548−00−2;3.00g、14.8mmol)の溶液に、室温でNBS(5.780g、32.51mmol)を加えた。反応混合液をUV光源に暴露して温度を上昇させ、こうして反応混合液を85℃で2時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、飽和NaHCO3溶液(100ml)に注いだ。得られた混合液をEtOAc(3×100ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(100ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、1−ブロモ−2,3−ビス(ブロモメチル)−4−フルオロベンゼン(5.80g、16.25mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、2.489分。
EtOH(50ml)中の1−ブロモ−2,3−ビス(ブロモメチル)−4−フルオロベンゼン(5.00g、13.97mmol)の溶液に、K2CO3(7.71g、55.9mmol)及び4−メトキシベンジルアミン(2.300g、16.77mmol)を室温で加えた。反応混合液を80℃で2時間加熱した。反応混合液を飽和NaHCO3溶液(200ml)に注ぎ、EtOAc(3×150ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(200ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー(n−ヘキサン中2%EtOAc)により精製して、4−ブロモ−7−フルオロ−2−(4−メトキシベンジル)イソインドリン(1.60g、4.77mmol)を得た。LCMS:方法A、1.600分、MS: ES+ 336.40, 338.38; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.46 - 7.43 (m, 1 H), 7.30 - 7.27 (m, 2 H), 7.06 (t, J= 8.8 Hz, 1 H), 6.93 - 6.90 (m, 2 H), 4.01 (s, 2 H), 3.82 (s, 4 H), 3.75 (s, 3 H)。
クロロベンゼン(15ml)中の4−ブロモ−7−フルオロ−2−(4−メトキシベンジル)イソインドリン(1.60g、4.77mmol)の溶液に、4Åモレキュラーシーブ(0.800g)を室温で加えた。反応混合液にクロロ蟻酸1−クロロエチル(1.550g、14.33mmol)を室温で加え、混合液を110℃で3時間加熱した。反応混合液をセライト床を通して濾過し、MeOH:DCM(1:1、35ml)で洗浄した。合わせた濾液を減圧下で濃縮した。粗生成物をn−ヘキサン(2×10ml)で粉砕し、真空下で乾燥して、4−ブロモ−7−フルオロイソインドリンHCl塩(0.800g、3.19mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、1.277分、MS: ES+ 216.23, 218.23。
THF(10ml)中の4−ブロモ−7−フルオロイソインドリンHCl塩(0.800g、3.19mmol)の溶液に、TEA(0.86ml、6.37mmol)及びBoc無水物(0.830g、3.824mmol)を0℃で加えた。反応混合液を室温で1時間撹拌した。得られた反応混合液を水(50ml)に注ぎ、EtOAc(2×50ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(DCM中1%MeOH)により精製して、4−ブロモ−7−フルオロイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.600g、1.90mmol)を得た。LCMS:方法A、2.652分、MS: ES+ 316.38、 318.38。
1,4−ジオキサン:水(9:1、5ml)中の4−フルオロ−7−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.246g、0.677mmol)の撹拌溶液に、K2CO3(0.189g、1.375mmol)及び2−ブロモ−5−シアノ安息香酸メチル(CAS番号1031927−03−3;0.165g、0.687mmol)を室温で加えた。反応混合液を20分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.050g、0.068mmol)を加えた。得られた反応混合液を90℃で15時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(50ml)に注いだ。得られた混合液をEtOAc(2×50ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(n−ヘキサン中14%EtOAc)により精製して、4−(4−シアノ−2−(メトキシカルボニル)フェニル)−7−フルオロイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.200g、0.505mmol)を得た。LCMS:方法A、2.419分、MS: ES+ 341.32 [M-56]。
THF:水:MeOH(1:1:0.1、6.3ml)中の4−(4−シアノ−2−(メトキシカルボニル)フェニル)−7−フルオロイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.200g、0.505mmol)の溶液に、0℃でLiOH・H2O(0.063g、1.515mmol)を加えた。反応混合液を室温で2時間撹拌した。得られた反応混合液を1M HCl(15ml)で酸性化し、EtOAc(3×20ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、2−(2−(tert−ブトキシカルボニル)−7−フルオロイソインドリン−4−イル)−5−シアノ安息香酸(0.160g、0.418mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、2.116分、MS: ES+ 327.40 [M-56]。
1,4−ジオキサン:水(9:1、5ml)中の6−ブロモ−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(実施例5の工程aと同様にして調製、0.200g、0.536mmol)の撹拌溶液に、Na2CO3(0.113g、1.072mmol)及び1−メチル−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン(CAS番号1002309−52−5;0.189g)を、室温でマイクロ波管に入れた。反応混合液を30分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.039g、0.053mmol)を加えた。得られた反応混合液をマイクロ波で120℃で2時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(30ml)に注いだ。得られた混合液をEtOAc(3×10ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(DCM中3.1%MeOH)により精製して、6−(1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.070g、0.173mmol)を得た。LCMS:方法A、2.505分、MS: ES+ 403.4 [M+H]。
MeOH(10ml)中の6−(1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)−4−フェニル−イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.07g、0.173mmol)の撹拌溶液に、オートクレーブ中で室温で10%Pd/C(100%乾燥)(0.050g)を加えた。得られた反応混合液をH2ガスで最大20kgの大気圧まで加圧し、80℃で72時間加熱した。反応混合液をセライト床を通して濾過し、MeOH(30ml)で洗浄した。得られた濾液を減圧下で濃縮して、6−(1−メチル−6−オキソピペリジン−3−イル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル及び6−(1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルの混合液(80:20)(0.077g)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、2.378分、MS: ES+ 407.47、及び方法A、2.349分、MS: ES+ 403.41。
1,4−ジオキサンと水(25ml)との4:1(v/v)混合液中の4−ブロモ−6−ニトロイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(中間体3、1.0g、2.90mmol)、4−シアノフェニルボロン酸(630mg、4.30mmol)、及び炭酸セシウム(1.9g、5.80mmol)の溶液に、窒素を15分間バブリングした。Pd(Ph3P)4(340mg、0.29mmol)を加え、得られた混合液を90℃で加熱し、LCMSによりモニターした。1時間後、反応混合液を室温まで冷却し、水に注ぎ、EtOAc(3×20ml)で抽出した。合わせた有機抽出液を食塩水(10ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、溶媒を留去した。残留物をEt2O(20ml)で次にヘキサン(30ml)で粉砕し、乾燥した。4−(4−シアノフェニル)−6−ニトロイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(857mg、81%)を淡褐色の固体として得た。LCMS(方法I):保持時間2.82分、m/z 266 [M+H-Boc]+; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.33 (m, 1H), 8.16 (m, 1H), 8.04-7.97 (m, 2H), 7.86-7.79 (m, 2H), 4.80-4.72 (m, 4H), 1.44 (d, 9H)。
4−(4−シアノフェニル)−6−ニトロイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(857mg、2.35mmol)、鉄粉末(655mg、11.72mmol)、NH4Cl(627mg、11.72mmol)、THF(12ml)、及び水(12ml)の混合液を、90℃で18時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、セライト(登録商標)パッドを通して濾過し、続いてEtOAc(3×25ml)で洗浄した。合わせた濾液を食塩水(25ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、溶媒を留去して、6−アミノ−4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを褐色固体として得た(590mg、75%)。LCMS(方法I):保持時間2.63分、m/z 336 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.06-7.50 (m, 6H), 6.55 (m, 1H), 5.29 (s, 1H), 4.81-4.42 (m, 4H), 1.49-1.38 (m, 9H)。
THF(8ml)中のテトラヒドロ−2H−ピラン−4−カルボン酸(80mg、0.60mmol)の溶液に、室温でDIPEA(0.13ml、0.80mmol)及びHATU(228mg、0.60mmol)を加え、得られた混合液を30分間撹拌した。次に6−アミノ−4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(126mg、0.37mmol)を反応液に加え、得られた混合液を18時間撹拌した。反応混合液を水(40ml)に注ぎ、EtOAc(3×30ml)で抽出した。合わせた有機抽出液を食塩水(20ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、溶媒を留去して、褐色の油状物(270mg)を得て、これを逆相HPLC(254nmでのUV検出を伴うAgilent pursuit 5 C18)により、水+0.1%蟻酸中の50〜95%MeCNの勾配で溶出することにより精製して、4−(4−シアノフェニル)−6−(テトラヒドロ−2H−ピラン−4−カルボキサミド)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを白色固体として得た(62mg、38%)を得た。LCMS(方法I):保持時間2.65分、m/z 392 [M-t-Bu+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10.09 (bs, 1H), 7.96 (m, 2H), 7.75-7.54 (m, 4H), 4.70-4.56 (m, 4H), 3.91 (m, 2H), 2.65-2.54 (m, 1H), 1.78-1.58 (m, 4H), 1.44 (d, 9H)。
Reacti-Vial(商標)に4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(中間体2、200mg、0.58mmol)、グルタルイミド(60mg、0.53mmol)、酢酸銅(II)一水和物(43mg、0.21mmol)、DMF(0.6ml)、及びピリジン(0.18ml、2.16mmol)を加え、得られた混合液を90℃で8時間撹拌した。混合液を室温まで冷却し、EtOAc(15ml)と水(5ml)とに分配した。水相をEtOAc(10ml)で抽出し、合わせた有機抽出液を食塩水(10ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、真空下で溶媒を留去した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(DCM中0〜5%MeOH)により精製して、油性固体(150mg)を得て、これをジエチルエーテルで粉砕して、4−(2,6−ジオキソピペリジン−1−イル))イソインドリン−2−カルボン酸エチルを固体として得た(120mg、62%)。LCMS(方法I):保持時間2.57分、m/z 275 (-tBu)/231(-Boc) [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.36-7.28 (m, 1H), 7.15-7.09 (m, 1H), 7.01-6.94 (m, 1H), 4.71 (s, 2H), 4.46 (d, 2H), 2.89 (m, 4H), 1.51 (d, 11H)。
DCM(5ml)中の6−アミノ−4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(実施例264の工程bと同様にして調製、80mg、0.24mmol)及びTEA(0.1ml、0.72mmol)の撹拌溶液に、TFAA(0.07ml、0.48mmol)を室温で滴加し、得られた混合液を30分間撹拌した。反応混合液を真空下で蒸発乾固して残留物を得て、これをDCM(10ml)と飽和NaHCO3溶液(10ml)とに分配した。有機相を集め、Na2SO4で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮乾固して、4−(4−シアノフェニル)−6−(2,2,2−トリフルオロアセトアミド)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを褐色固体として得た(90mg、100%)。LCMS(方法I):保持時間2.81分、m/z 376 [M+H-tBu]+。
MeCN(5ml)中の炭酸カリウム(66mg、0.48mmol)及び4−(4−シアノフェニル)−6−(2,2,2−トリフルオロアセトアミド)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(90mg、0.21mmol)の撹拌懸濁液に、ヨウ化メチル(22μl、0.36mmol)を加え、得られた混合液を密閉管中で40℃で18時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(20ml)に注いだ後、DCM(2×20ml)で抽出した。合わせた有機抽出液を水(20ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、真空下で蒸発乾固して、4−(4−シアノフェニル)−6−(2,2,2−トリフルオロ−N−メチルアセトアミド)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを褐色油状物として得た(74mg、80%)。LCMS(方法I):保持時間2.76分、m/z 350 [M+H-CF3CO]+; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.67-7.61 (m, 2H), 7.38-7.36 (m, 2H), 7.12-7.02 (m, 2H), 4.66-4.54 (m, 4H), 3.27 (s, 3H), 1.37 (s, 9H)。
MeOHとDCMの1:4(v/v)混合液(5ml)中のN−(2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)−2,2,2−トリフルオロ−N−メチル−アセトアミド(44mg、0.12mmol)及び水酸化アンモニウム(35%、2ml)の溶液を、室温で5時間撹拌した。反応混合液を真空下で蒸発乾固して残留物を得て、これを254nmでの検出を備えたAgilent Pursuit5 C18カラムの逆相HPLCにより、水+0.1%蟻酸中のMeCNの勾配(60〜66%)で溶出することにより精製して固体を得た。固体物質をDCM及びヘキサンから再結晶化して、4−(4−シアノフェニル)−6−(メチルアミノ)イソインドリン−2−カルボニトリルをオフホワイトの固体(14mg、83%)として得た。LCMS(方法I):保持時間2.54分、m/z 275 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.70 (d, 2H), 7.45 (d, 2H), 6.48 (m, 2H), 4.74 (m, 2H), 4.66 (m, 2H), 2.86 (s, 3H)。
MeCN(3ml)中の6−アミノ−4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(実施例264の工程bと同様にして調製、160mg、0.48mmol)、パラホルムアルデヒド(29mg、0.96mmol)、AcOH(83μl、1.44mmol)、及びトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム(254mg、1.2mmol)の溶液を110℃で18時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、飽和NaHCO3に注ぎ、EtOAc(3×25ml)で抽出した。合わせた有機抽出液を食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、溶媒を留去した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中0〜40%EtOAc)により精製して、4−(4−シアノフェニル)−6−(ジメチルアミノ)−イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを黄色固体として得た(87mg、53%)。LCMS(方法I):保持時間2.62分、m/z 364 [M+H]+。
DCE(6ml)中の6−アミノ−4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(実施例264の工程bと同様にして調製、155mg、0.46mmol)、2−((tert−ブチルジメチルシリル)オキシ)−アセトアルデヒド(98mg、0.51mmol)、AcOH(40μl、0.69mmol)、及びトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム(196mg、0.93mmol)の溶液を、室温で18時間撹拌した。反応混合液を飽和NaHCO3に注ぎ、DCM(3×50ml)で抽出した。合わせた有機抽出液を食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、溶媒を留去した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中0〜25%EtOAc)により精製して、6−((2−((tert−ブチルジメチルシリル)−オキシ)エチル)アミノ)−4−(4−シアノフェニル)−イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを黄色固体として得た(110mg、49%)。LCMS(方法I):保持時間3.37分、m/z 494 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.62 (dd, 2H), 7.44 (d, 2H), 6.40-6.50 (m, 2H), 4.40-4.60 (m, 4H), 4.78 (s, 2H), 3.76 (t, 2H), 3.16 (t, 2H), 1.41 (d, 9H), 0.83 (s, 9H), 0.00 (s, 6H)。
1,4−ジオキサン(2ml)中の6−((2−((tert−ブチルジメチルシリル)オキシ)エチル)アミノ)−4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(110mg、0.22mmol)及びHCl(1,4−ジオキサン中4M、2.2ml、8.8mmol)の溶液を、室温で3時間撹拌した。さらにHCl(1,4−ジオキサン中4M、2.0ml)を加え、室温でさらに2時間撹拌した。混合液から溶媒を留去して残留物を得て、これをトルエン/MeCN[1:1](3x15ml)で共沸させ、乾燥して、4−(6−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)−イソインドリン−4−イル)ベンゾニトリルビスHCl塩を黄色固体として得た(105mg)。LCMS(方法I):保持時間1.08分、m/z 280 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.90 (d, 2H), 7.72 (d, 2H), 7.60 (d, 1H), 7.54 (d, 1H), 4.78 (s, 2H), 4.74 (s, 2H), 3.80 (t, 2H), 3.56 (t, 2H)。
THF(1ml)中の6−アミノ−4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(80mg、0.24mmol)、アセトン(20μl、0.26mmol)、AcOH(16μl、0.28mmol)、及びトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム(80mg、0.36mmol)の溶液を、70℃で3日間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、飽和NaHCO3に注ぎ、ジエチルエーテルで抽出した。有機抽出液をNa2SO4で乾燥し、濾過し、溶媒を留去して残留物を得て、これをMeOH/ジエチルエーテルにより、続いてEtOAc/ヘキサンにより粉砕して精製して、4−(4−シアノフェニル)−6−(イソプロピルアミノ)−イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを得た(78mg、86%)。LCMS(方法I):保持時間2.77分、m/z 378 [M+H]+。
DMF(3ml)中の6−アミノ−4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(実施例264の工程bと同様にして調製、100mg、0.30mmol)、1−ブロモ−2−(2−ブロモエタンスルホニル)エタン(84mg、0.30mmol)、及びTEA(1.66ml、1.2mmol)の溶液を、100℃で24時間加熱した。1−ブロモ−2−(2−ブロモエタンスルホニル)エタン(170mg、0.60mmol)の追加装入物を反応液に加え、得られた混合液を100℃で24時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、飽和NaHCO3水溶液(10ml)とEtOAc(10ml)とに分配した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、真空下で蒸発乾固して残留物を得た。粗残留物(180mg)を、Agilent Pursuit5 C18カラムでの逆相HPLCにより水+0.1%蟻酸中のMeCNの(50〜70%)勾配で溶出して、254nmでの検出を使用して精製して、4−(4−シアノフェニル)−6−(1,1−ジオキシドチオモルホリノ)イソインドリン−2−カルボン酸エチルを淡黄色固体として得た(21mg、15%)。LCMS(方法I):保持時間2.70分、m/z 454 [M+H]+。
DCE(4.5ml)中の6−アミノ−4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(実施例264の工程bと同様にして調製、150mg、0.45mmol)、AcOH(0.04ml)、アセトアルデヒド(MeCN中5M、0.11ml、0.54mmol)の溶液に、NaBH(OAc)3(191mg、0.90mmol)を加え、得られた混合液を室温で12時間撹拌した。反応混合液を飽和NaHCO3水溶液(20ml)に注ぎ、DCM(3×20ml)で抽出した。合わせた抽出液を食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、真空下で蒸発乾固した。粗残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中10〜50%EtOAc、続いてEtOAc中5%MeOH)により精製して、4−(4−シアノフェニル)−6−(ジエチルアミノ)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを黄色固体として得た(50mg、28%)。LCMS(方法I):保持時間2.68分、m/z 392 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.77-7.66 (m, 2H), 7.53 (d, 2H), 6.64-6.50 (m, 2H), 4.67 (d, 2H), 4.63-4.51 (d, 2H), 3.39 (q, J = 7.1 Hz, 4H), 1.50 (s, 9H), 1.19 (t, J = 7.1Hz, 6H)。
DCE(4.5ml)中の6−アミノ−4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(実施例264の工程bと同様にして調製、150mg、0.45mmol)、AcOH(0.04ml)、(S)−2,2−ジメチル−1,3−ジオキソラン−4−カルボキシアルデヒド(70mg、0.27mmol)と(R)−2,2−ジメチル−1,3−ジオキソラン−4−カルボキシアルデヒド(70mg、0.27mmol)の0℃の懸濁液に、NaBH(OAc)3(191mg、0.90mmol)を加え、得られた混合液を0℃で1時間、次に室温で16時間撹拌した。反応混合液をNaHCO3の飽和水溶液に注ぎ、DCM(3×20ml)で抽出した。合わせたDCM抽出物を食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、真空下で蒸発乾固した。粗残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中20〜50%EtOAc)により精製して、4−(4−シアノフェニル)−6−(((2,2−ジメチル−1,3−ジオキソラン−4−イル)メチル)アミノ)−イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを淡褐色の固体として得た(171mg、85%)。LCMS(方法I):保持時間2.86分、m/z 450 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.77-7.66 (m, 2H), 7.51 (d, 2H), 6.62-6.50 (m, 2H), 4.70-4.51 (m, 4H), 4.44-4.35 (m,1H), 4.12 (dd, J = 8.2, 6.4 Hz, 1H), 3.79 (dd, J = 8.2 Hz, 1H), 3.39-3.31 (m, 1H), 3.26-3.18 (m, 1H), 1.50 (d, 9H), 1.47 (s, 3H), 1.39 (s, 3H)。
MeOH(4ml)中の4−(4−シアノフェニル)−6−(((2,2−ジメチル−1,3−ジオキソラン−4−イル)メチル)アミノ)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(170mg、0.38mmol)の溶液を、1,4−ジオキサン中のHClの4M溶液(2ml、8mmol)で処理し、得られた混合液を室温で16時間撹拌した。混合液を真空下で蒸発乾固して、4−(6−((2,3−ジヒドロキシプロピル)−アミノ)イソインドリン−4−イル)ベンゾニトリルHClを緑色固体として得た(158mg)。LCMS(方法I):保持時間0.55分、m/z 310 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.70 (m, 2H), 7.99-7.92 (m, 2H), 7.68-7.48 (m, 2H), 6.86-6.75 (m, 2H), 4.48-4.38 (m, 4H), 3.42-3.35 (m, 3H), 3.26-3.20 (m, 1H), 3.04-2.94 (m, 1H)。
1,4−ジオキサン(5ml)中の4−ブロモ−6−ニトロイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(中間体3、1.0g、2.91mmol)、ビス(ピナコラト)ジボロン(886mg、3.49mmol)、及び酢酸カリウム(858mg、8.74mmol)の混合液を、窒素を用いて10分間脱気した。Pd(dppf)Cl2・DCM(236mg、0.29mmol)を加え、得られた混合液を18時間加熱還流した。反応混合液を室温まで冷却し、セライト(登録商標)パッドを通して濾過し、次にこれをEt2O(50ml)、続いてEtOAc(50ml)で洗浄した。濾液を真空下で蒸発乾固して黒色残留物を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中0〜10%EtOAc)により精製した。得られた固体をEtOAcとEt2Oの1:1(v/v)混合液で粉砕して、6−ニトロ−4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを黄色固体として得た(878mg、77%)。LCMS(方法I):保持時間3.11分、m/z 335 [M+H-tBu]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.37-8.28 (m, 2H), 4.78-4.63 (m, 4 H), 1.47 (s, 9 H), 1.33 (m, 12 H)。
1,4−ジオキサンと水の9:1(v/v)混合液(9:1、5ml)中の6−ニトロ−4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(830mg、2.13mmol)、メチル−2−ブロモ−5−シアノ安息香酸(425mg、1.77mmol)、及び炭酸カリウム(740mg、5.31mmol)の溶液を、窒素を用いて10分間脱気した。Pd(dppf)Cl2・DCM(140mg、0.17mmol)を溶液に加え、得られた混合液を100℃で1時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、セライト(登録商標)パッドを通して濾過し、これをEtOAc(50ml)及びEt2O(50ml)で洗浄した。濾液を真空下で蒸発乾固した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中0〜10%EtOAc)により精製して、4−(4−シアノ−2−(メトキシカルボニル)−フェニル)−6−ニトロイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを白色固体として得た(373mg、42%)。LCMS(方法I):保持時間2.78分、m/z 324 [M+H-Boc]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.41 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.32-8.27 (m, 1H), 8.21-8.16 (m, 1H), 7.99-7.93 (dd, J = 9.5, 1.6 Hz, 1H), 7.71-7.65 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 4.75 (m, 2H), 4.40-4.28 (m, 2H), 3.63 (s, 3H), 1.40 (d, 9H)。
THF(5ml)及び水(5ml)中の4−(4−シアノ−2−(メトキシカルボニル)フェニル)−6−ニトロイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(373mg、0.88mmol)、鉄粉末(246mg、4.4mmol)、及びNH4Cl(235mg、4.4mmol)の混合液を、90℃で18時間加熱した。混合液を室温まで冷却し、セライト(登録商標)パッドを通して濾過し、EtOAc(3×10ml)で洗浄した。濾液を集め、食塩水(10ml)で洗浄した後、Na2SO4で乾燥し、濾過し、溶媒を留去して、6−アミノ−4−(4−シアノ−2−(メトキシカルボニル)フェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを黄色固体として得た(375mg、34%)。LCMS(方法I):保持時間2.56分、m/z 294 [M+H-Boc]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.21 (m, 1H), 8.08-8.02 (m, 1H), 7.60-7.54 (m, 1H), 6.52-6.47 (m, 1H), 6.27-6.22 (m, 1H), 5.21 (bs, 2H), 4.52 (m, 2H), 4.19-4.10 (m, 2H), 3.63 (d, 3H), 1.40 (d, 9H)。
MeCN(3ml)中の6−アミノ−4−(4−シアノ−2−(メトキシカルボニル)フェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(187mg、0.47mmol)、AcOH(0.08ml)、テトラヒドロピランカルボキシルデヒド(43mg、0.38mmol)、及びNaBH(OAc)3(250mg、1.17mmol)の混合液を、110℃で1時間撹拌した。混合液を室温まで冷却し、飽和NaHCO3水溶液(20ml)に注いだ後、EtOAc(3×20ml)で抽出した。合わせた抽出液を食塩水(25ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、溶媒を留去して残留物を得た。Agilent Pursuit5 C18カラムによる逆相HPLCにより水+0.1%蟻酸中のMeCNの(50〜95%)勾配で溶出し、254nMでの検出により精製して、4−(4−シアノ−2−(メトキシカルボニル)フェニル)−6−(((テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)メチル)アミノ)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを黄色固体として得た(56mg、25%)。LCMS(方法I):保持時間2.67分、m/z 492 [M+H]+; 1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm: 8.23 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 8.09-8.04 (dt, J = 8.0, 2.0 Hz, 1H), 7.63-7.58 (d, J = 8.0, 4.7 Hz, 1H), 6.54 (m, 1H), 6.23 (m, 1H), 5.88-5.82 (m, 1H), 4.57-4.50 (m, 2H), 4.23-4.13 (m, 2H), 3.89-3.81 (m, 2H), 3.64 (d, 3H), 3.30-3.21 (m, 2H), 2.88 (m, 2H), 1.85-1.72 (m, 1H), 1.69-1.601 (m, 2H), 1.41 (d, 9H), 1.26-1.13 (m, 2H)。
THF(0.6ml)中の4−(4−シアノ−2−(メトキシカルボニル)フェニル)−6−(((テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)メチル)アミノ)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(79mg、0.16mmol)の溶液を、室温で水(0.4ml)中のLiOH(34mg、0.80mmol)で処理し、得られた混合液を36時間撹拌した。反応液を真空下で濃縮してTHFを除去し、得られた残留物を水(20ml)で希釈した。反応混合液を1M HClで酸性化し(pH1)、EtOAc(3×20ml)で抽出した。合わせた有機抽出液を食塩水(25ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、真空下で蒸発乾固して、2−(2−(tert−ブトキシカルボニル)−6−(((テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)メチル)アミノ)イソインドリン−4−イル)−5−シアノ安息香酸を褐色固体として得た(60mg、79%)。LCMS(方法I):保持時間2.55分、m/z 478 [M+H]+。
THF(3ml)中の2−(2−(tert−ブトキシカルボニル)−6−(((テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)メチル)アミノ)−イソインドリン−4−イル)−5−シアノ安息香酸(60mg、0.125mmol)の溶液を、TEA((0.02ml、0.15mmol)及びHATU(58mg、0.15mmol)を用いて室温で窒素下で処理し、得られた混合液を30分間撹拌した。1,4−ジオキサン溶液中のアンモニアの0.5M溶液(0.5ml、0.25mmol)を混合液に加え、得られた混合液を18時間撹拌した。反応混合液を水(10ml)に注ぎ、EtOAc(3×5ml)で抽出した。合わせた有機抽出液を食塩水(10ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、真空下で蒸発乾固して、4−(2−カルバモイル−4−シアノフェニル)−6−(((テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)メチル)アミノ)−イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(41mg、70%)を褐色固体として得た。LCMS(方法I):保持時間2.44分、m/z 477 [M+H]+。
1,4−ジオキサンと水の4:1(v/v)混合液(5ml)中の4−ブロモ−6−ニトロイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(中間体3、300mg、0.87mmol)、4−フルオロフェニルボロン酸(145mg、1.04mmol)、及び炭酸セシウム(850mg、2.61mmol)の溶液を、窒素を用いて15分間脱気した。Pd(Ph3P)4(104mg、0.09mmol)を加え、得られた混合液を110℃で3時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(20ml)に注いだ。混合液をEtOAc(2×20ml)で抽出し、合わせた有機抽出液をNa2SO4で乾燥し、濾過し、真空下で蒸発乾固した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中0〜70%EtOAc)により精製して、4−(4−フルオロフェニル)−6−ニトロイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルをオフホワイトの固体として得た(331mg)。LCMS(方法I):保持時間2.86分、m/z 303 [M+H-Boc]+。
EtOH(10ml)中の4−(4−フルオロフェニル)−6−ニトロイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(331mg、0.92mmol)及びPd/C(10%、33mg)の混合液を、室温で水素下(バルーン)で18時間撹拌した。反応混合液をセライト(登録商標)パッドを通して濾過し、続いてEtOHで洗浄し、濾液を真空下で蒸発乾固して、6−アミノ−4−(4−フルオロフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを黄色油状物として得た(269mg、90%)。LCMS(方法I):保持時間2.63分、m/z 329 [M+H]+。
DCE(10ml)中の6−アミノ−4−(4−フルオロフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(269mg、0.82mmol)、AcOH(0.07ml)、(R)−(+)−2,2−ジメチル−1,3−ジオキソラン−4−カルボキシアルデヒド(50%DCM、234mg、0.9mmol)、及びNaBH(OAc)3(348mg、1.64mmol)の懸濁液を、室温で16時間撹拌した。反応混合液をNaHCO3の飽和水溶液(20ml)に注ぎ、DCM(2×20ml)で抽出した。合わせた抽出液をNa2SO4で乾燥し、濾過し、真空下で蒸発乾固した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中0〜25%EtOAc)により精製して、(S)−6−(((2,2−ジメチル−1,3−ジオキソラン−4−イル)メチル)アミノ)−4−(4−フルオロフェニル)−イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを黄色油状物として得た(280mg、77%)。LCMS(方法I):保持時間2.77分、m/z 443 [M+H]+。
MeOH(1ml)及び水(0.5ml)中の(S)−6−(((2,2−ジメチル−1,3−ジオキソラン−4−イル)メチル)アミノ)−4−(4−フルオロフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(280mg、0.63mmol)の溶液を、1,4−ジオキサン(4ml)中のHClの4M溶液で処理し、得られた混合液を室温で2時間撹拌した。混合液を真空下で蒸発乾固して、(S)−3−((7−(4−フルオロフェニル)−イソインドリン−5−イル)アミノ)プロパン−1,2−ジオール塩酸塩を白色固体として得た(157mg、100%)。LCMS(方法I):保持時間0.30分、m/z 303 [M+H]+。
DCM(5ml)中の(S)−3−((7−(4−フルオロフェニル)イソインドリン−5−イル)アミノ)プロパン−1,2−ジオール塩酸塩(140mg、0.62mmol)及びTEA(0.26ml)(5ml)の溶液を、窒素下で0℃に冷却した。冷却した溶液を、DCM(0.19ml)中の臭化シアンの3.0M溶液で処理し、得られた懸濁液を0℃で1時間撹拌した。反応混合液を水(20ml)とDCM(20ml)とに分配した。DCM層を集め、水相をDCM(20ml)で抽出した。合わせた有機抽出液をNa2SO4で乾燥し、濾過し、真空下で蒸発乾固した。粗生成物を、Agilent Pursuit5 C18カラムでのHPLCにより、水+0.1%蟻酸中のMeCNの(35〜60%)の勾配で溶出し、254nMの検出により精製して、(S)−6−((2,3−ジヒドロキシプロピル)アミノ)−4−(4−フルオロフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリルを灰色固体として得た(75mg、37%)。LCMS(方法I):保持時間=1.37分、m/z 328 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.43-7.41 (m, 2H), 7.18-7.13 (m, 2H), 6.62 (m, 1H), 6.59-6.58 (m, 1H), 4.74 (m, 2H), 4.69 (m, 2H), 3.86-3.80 (m, 1H), 3.60-3.57 (m, 2H), 3.33-3.29 (m, 1H), 3.13-3.08 (m, 1H)
6−アミノ−4−ブロモイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(実施例23の工程aと同様にして調製、640mg、2.0mmol)、2,3−ジメトキシ−3−オキソプロパン酸(680mg、4.6mmol)、HATU(935mg、2.4mmol)、及びTEA(1.1ml)の混合液を、室温で24時間撹拌した。反応混合液を真空下で蒸発乾固して残留物を得て、これをEtOAcに溶解し、水、飽和NaHCO3及び食塩水で順次洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、溶媒を留去した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中20〜100%EtOAc)により精製して、4−ブロモ−6−(2,3−ジメトキシ−3−オキソプロパンアミド)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルをオフホワイトの泡状物として得た(850mg、96%)。LCMS(方法I):保持時間2.29分、m/z 387/389 [M+H]+。
THF(22ml)中の4−ブロモ−6−(2,3−ジメトキシ−3−オキソプロパンアミド)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(800mg、1.8mmol)の溶液に水素化ホウ素リチウム(247mg、11.2mmol)を加え、得られた混合液を60℃で1時間加熱した。混合液を室温まで冷却し、水、続いてMeOHの添加によりクエンチした。反応混合液をEtOAc(10ml)と飽和NaHCO3溶液(10ml)とに分配した。有機相を集め、飽和NaHCO3及び食塩水で順次洗浄した後、Na2SO4で乾燥し、濾過し、真空下で蒸発乾固して残留物を得た。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中40〜100%EtOAc)により精製して、4−ブロモ−6−((3−ヒドロキシ−2−メトキシプロピル)アミノ)−イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを白色固体として得た(250mg、34%)。LCMS(方法I):保持時間2.55分、m/z 401/403 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 6.72 (d, 1H), 6.46 (d, 1H), 4.52-4.75 (4s, 4H), 4.10 (bs, 1H), 3.77 (ABq, 2H), 3.55 (quin, 1H), 3.49 (s, 3H), 3.25 (ABq, 2H), 1.88 (bs, 1H), 1.54 (d, 9H)。
1,4−ジオキサンと水の9:1(v/v)混合液(11ml)中の4−ブロモ−6−((3−ヒドロキシ−2−メトキシプロピル)アミノ)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(250mg、0.62mmol)、4−シアノフェニルボロン酸(100mg、0.68mmol)、及び炭酸カリウム(200mg、1.56mmol)の混合液を、窒素を用いて10分間脱気した。Pd(PPh3)4(100mg、0.09mmol)を加え、得られた混合液を18時間加熱還流した。混合液を室温まで冷却し、EtOAcで希釈した後、Na2SO4で乾燥し、濾過し、真空下で蒸発乾固した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中50〜100%EtOAc)により精製して、4−(4−シアノフェニル)−6−((3−ヒドロキシ−2−メトキシプロピル)アミノ)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを褐色の油状ガムとして得た(270mg、100%)。LCMS(方法I):保持時間2.40分、m/z 424 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.75 (d, 1H), 7.71 (d, 1H), 7.53 (d, 2H), 6.55-6.65 (m, 2H), 4.50-4.70 (m, 4H), 3.80 (ABq, 2H), 3.58 (quin, 1H), 3.50 (s, 3H), 3.35 (ABq, 2H), 1.51 (d, 9H)。
DCE(10ml)中の6−アミノ−4−ブロモイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(実施例23の工程aと同様にして調製、300mg、0.96mmol)、AcOH(0.14ml)、パラホルムアルデヒド(60mg、2.0mmol)、及びNaBH(OAc)3(509mg、2.4mmol)の懸濁液を、室温で16時間撹拌した。次に、反応混合液を80℃で20時間加熱した。パラホルムアルデヒド(30mg)及びNaBH(OAc)3(250mg)の追加投入物を混合液に加え、得られた混合液を80℃で4時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(30ml)に注ぎ、DCM(2×30ml)で抽出した。合わせた抽出液をNa2SO4で乾燥し、濾過し、真空下で蒸発乾固した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中0〜20%EtOAc)により精製して、4−ブロモ−6−(ジメチルアミノ)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを黄色固体として得た(406mg、100%)。LCMS(方法I):保持時間2.81分、m/z 341/343 [M+H]+。
1,4−ジオキサン(5ml)中の4−ブロモ−6−(ジメチルアミノ)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(320mg、0.96mmol)、ビス(ピナコラト)ジボロン(292mg、1.15mmol)、及び酢酸カリウム(284mg、2.9mmol)の溶液を、窒素を用いて10分間脱気した。Pd(dppf)Cl2(73mg、0.1mmol)を加え、得られた混合液を100℃で18時間加熱した。次に混合液を室温まで冷却し、セライト(登録商標)パッドを通して濾過し、EtOAc(20ml)で洗浄した。濾液から溶媒を留去して残留物を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中0〜20%EtOAc)により精製して、6−(ジメチルアミノ)−4−(4,4,5,5−テトラメチル−1、3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを黄色固体として得た(299mg、80%)。LCMS(方法I):保持時間2.74分、m/z 389 [M+H]+。
THF(75ml)中の2−ブロモ−5−シアノベンズアミド(CAS番号1261670−21−6,1.85g、8.19mmol)の溶液に、TEA(1.7ml、12.3mmol)及びHATU(3.7g、9.8mmol)を加え、得られた混合液を2時間撹拌した。この混合液に1,4−ジオキサン(82ml、41mmol)中のアンモニアの0.5M溶液を加え、濃厚な懸濁液を得て、これを72時間撹拌した。反応混合液を真空下で蒸発乾固して残留物を得て、これを水(50ml)に入れ、EtOAc(2×100ml)及びDCM(2×100ml)で順次抽出した。合わせた有機抽出液をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で蒸発乾固した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中20〜100%EtOAc)により精製して固体を得て、これをEt2O(2×20ml)で粉砕して、2−ブロモ−5−シアノベンズアミドを白色固体として得た(575mg、31%)。LCMS(方法I):保持時間0.87分、m/z 225/227 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.02 (brs, 1H), 7.93 (dd, J = 2.0 and 0.3 Hz, 1H), 7.91-7.87 (dd, J = 8.3 and 0.3 Hz, 1H), 7.82-7.79 (dd, J = 8.3 and 2.0 Hz, 1H), 7.78 (brs, 1H)。
1,4−ジオキサンと水(4:1−v/v)との混合液(5ml)中の2−ブロモ−5−シアノベンズアミド(189mg、0.84mmol)、6−(ジメチルアミノ)−4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(299mg、0.77mmol)、及び炭酸セシウム(752mg、2.31mmol)の懸濁液を、窒素(バブリング)を用いて10分間脱気した。脱気した溶液にPd(PPh3)4(92mg、0.08mmol)を加え、得られた混合液を16時間加熱還流した。次に、混合液を室温まで冷却し、水(20ml)とEtOAc(20ml)とに分配した。有機相を集め、水(20ml)で洗浄した。合わせた水相をEtOAc(20ml)で抽出した。合わせた有機抽出液をNa2SO4で乾燥し、濾過し、溶媒を留去して残留物を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中5〜20%EtOAc)により精製して、4−(2−カルバモイル−4−シアノフェニル)−6−(ジメチルアミノ)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを黄色固体として得た(260mg、83%)。LCMS(方法I):保持時間1.15分、m/z 407 [M+H]+。
ジエチルエーテル(5ml)中の6−アミノ−4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(実施例264の工程bと同様にして調製、200mg、0.59mmol)の溶液に、プロピレンオキシド(0.05ml、0.71mmol)及びLiClO4(76mg、0.71mmol)を順次加え、反応混合液を室温で16時間撹拌した。反応混合液をEtOAc(30ml)で希釈し、水(30ml)及び食塩水(30ml)で順次洗浄した後、Na2SO4で乾燥し、濾過し、真空下で蒸発乾固して残留物を得た。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中0〜70%EtOAc)により精製して、4−(4−シアノフェニル)−6−((2−ヒドロキシプロピル)アミノ)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを黄色固体として得た(84mg、36%)。LCMS(方法I):保持時間2.52分、m/z 394 [M+H]+。
1,4−ジオキサン(2ml)中の4−(4−シアノフェニル)−6−((2−ヒドロキシプロピル)アミノ)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(84mg、0.21mmol)の溶液に、1,4−ジオキサン(2ml)中のHClの4M溶液を加え、得られた溶液を室温で4時間撹拌した。混合液を真空下で蒸発乾固して、4−(6−((2−ヒドロキシプロピル)アミノ)イソインドリン−4−イル)ベンゾニトリルHClをオフホワイトの固体として得た(69mg、100%)。LCMS(方法I):保持時間0.39分、m/z 294 [M+H]+。
1,4−ジオキサン:水(9:1、10ml)中の1−(3−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)フェニル)ピロリジン−2−オン(CAS番号1185265−61−5;0.595g、2.07mmol)の撹拌溶液に、K2CO3(0.713g、5.17mmol)及び6−Boc−2,4−ジクロロ−5,7−ジヒドロピロロ[3,4−d]ピリミジン(CAS番号903129−71−5;0.500g、1.724mmol)を室温で加えた。反応混合液を10分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.126g、0.172mmol)を加えた。反応混合液を90℃で4時間加熱した。得られた反応混合液を、同じ方法により同じスケールで調製した3つの他のバッチと合わせた。反応混合液を室温まで冷却し、水(60ml)に注いだ。得られた混合液をEtOAc(3×30ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中44%EtOAc)により精製して、2−クロロ−4−(3−(2−オキソピロリジン−1−イル)フェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(1.300g、3.140mmol)を得た。LCMS:方法A、2.306分、MS: ES+ 415.30。
トルエン:EtOH:水(1:1:1、8ml)中の2−クロロ−4−(3−(2−オキソピロリジン−1−イル)フェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.300g、0.724mmol)の溶液に、NaHCO3(0.182g、2.168mmol)及びメチルボロン酸(CAS番号13061−96−6;0.065g、1.086mmol)を室温で加えた。反応混合液を10分間脱気した後、Pd(PPh3)4(0.083g、0.072mmol)を加えた。反応混合液を100℃で16時間加熱した。得られた混合液を室温まで冷却し、水(30ml)に注いだ。得られた混合液をEtOAc(3×20ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(n−ヘキサン中60%EtOAc)により精製して、2−メチル−4−(3−(2−オキソピロリジン−1−イル)フェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.130g、0.329mmol)を得た。LCMS:方法A、1.919分、MS: ES+ 395.40。
標題化合物を、実施例1の工程d及びeについて記載された手順と同様の手順を使用して、上記中間体から合成した。LCMS:方法D、2.786分、MS: ES+ 320.15; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 8.24 (s, 1 H), 7.75 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 7.69 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 7.54 (t, J=16.0 Hz, 1 H), 5.12 (s, 2 H), 4.79 (s, 2 H), 3.89 (t, J=6.8 Hz, 2 H), 2.67 (s, 3H), 2.52 (t, J=8.0 Hz, 2 H), 2.11 - 2.06 (m, 2 H)。
2−(((1−メチル−1H−ピラゾール−5−イル)メチル)アミノ)−4−(3−(2−オキソピロリジン−1−イル)フェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル
1,4−ジオキサン(100ml)中の2−クロロ−4−(3−(2−オキソピロリジン−1−イル)フェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(実施例289の工程aと同様にして調製、0.450g、1.086mmol)及び1−メチル−1H−ピラゾール−5−イル)メチルアミン(CAS番号863548−52−1;0.180g、1.629mmol)の溶液に、室温でK2CO3(0.450g、3.258mmol)を加えた。反応混合液を10分間脱気した後、Pd2(dba)3(0.099g、0.108mmol)及びキサントホス(0.062g、0.108mmol)を加えた。反応混合液を90℃で16時間加熱した。得られた混合液を室温まで冷却し、水(20ml)に注ぎ、EtOAc(3×30ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(DCM中3.2%MeOH)により精製して、2−(((1−メチル−1H−ピラゾール−5−イル)メチル)アミノ)−4−(3−(2−オキソピロリジン−1−イル)フェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.250g、0.511mmol)を得た。LCMS:方法A、1.858分、MS: ES+ 490.41。
標題化合物を、実施例1の工程d及びeについて記載された手順と同様の手順を使用して、上記中間体から合成した。LCMS:方法D、2.927分、MS: ES+ 415.20; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.17 (br s, 1 H), 7.99 - 7.91 (m, 1 H), 7.74 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 7.60 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 7.50 (t, J=8.0 Hz, 1 H), 7.24 (d, J=1.6 Hz, 1 H), 6.15 (s, 1 H), 4.93 (s, 2 H), 4.50 - 4.62 (m, 4 H), 3.87 (t, J=7.2 Hz, 2 H), 3.81 (s, 3H), 2.51 (t, J=8.0 Hz, 2 H), 2.11 - 2.03 (m, 2 H)。
THF(2ml)中の2−クロロ−4−(3−(2−オキソピロリジン−1−イル)フェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(実施例289の工程aと同様にして調製、0.450g、1.086mmol)の溶液に、室温でエタノールアミン(2ml)を加えた。反応混合液を90℃で1時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(10ml)に注いだ。得られた沈殿物を濾過により集め、n−ヘキサン(5ml)で洗浄した。得られた固体をn−ペンタン(3×10ml)で粉砕し、高真空下で乾燥して、2−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)−4−(3−(2−オキソピロリジン−1−イル)フェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.160g、0.364mmol)を得た。LCMS:方法A、1.150分、MS: ES+ 440.42。
標題化合物を、実施例1の工程d及びeについて記載された手順と同様の手順を使用して、上記中間体から合成した。LCMS:方法D、2.590分、MS: ES+ 365.15; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 8.19 (br s, 1 H), 7.75 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 7.63 (br s, 1 H), 7. 52 (t, J=7.6 Hz, 1 H), 7.32 (br s, 2 H), 4.94 (s, 2 H), 4.70 (t, J=5.6 Hz, 1 H), 4.62 (s, 2 H), 3.90 (t, J=7.2 Hz, 2 H), 3.54 - 3.41 (m, 4 H), 2.54 (t, J=8.0 Hz, 2 H), 2.13 - 2.05 (m, 2 H)。
実施例226の工程aと同様の方法で、4−ブロモ−6−(メチルカルバモイル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(実施例240の工程aと同様にして調製した)を使用して、6−(メチルカルバモイル)−4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチルを得た。LCMS:方法A、2.193分、MS: ES+ 403.56。
1,4−ジオキサン:水(9:1、5ml)中の6−(メチルカルバモイル)−4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.540g、1.351mmol)
の撹拌溶液に、K2CO3(0.240g、1.802mmol)及び3−ブロモ−5−メトキシピコリノニトリル(CAS番号717843−46−4;0.200g、0.901mmol)を室温で加えた。反応混合液を15分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.060g、0.090mmol)を加えた。反応混合液を100℃で2.5時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(30ml)に注ぎ、EtOAc(3×10ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(DCM中3%MeOH)により精製して、4−(2−シアノ−5−メトキシピリジン−3−イル)−6−(メチルカルバモイル)−イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.210g、0.514mmol)を得た。LCMS:方法A、2.024分、MS: ES+ 409.40。
標題化合物を、実施例1の工程d及びeについて記載された手順と同様の手順を使用して、上記中間体から合成した。LCMS:方法D、2.775分、MS: ES- 332.10; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.59 (d, J=4.4 Hz, 1 H), 8.53 (d, J=2.8 Hz, 1 H), 7.96 (s, 1 H), 7.92 (s, 1 H), 7.72 (d, J=2.8 Hz, 1 H), 4.95 (s, 2 H), 4.82 (s, 2 H), 3.97 (s, 3 H), 2.81 (d, J=4.4 Hz, 3 H)。
1,4−ジオキサン:水(9:1、6ml)中の4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(中間体2、0.620g、1.786mmol)の撹拌溶液に、室温でK2CO3(0.680g、4.871mmol)及び5−ブロモ−2−ヨードベンゾニトリル(CAS番号121554−10−7;0.500g、1.623mmol)を加えた。反応混合液を15分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.120g、0.162mmol)を加えた。反応混合液を80℃で6時間加熱した。得られた反応混合液を、同じ方法により同じスケールで調製した1つの他のバッチと合わせた。反応混合液を室温まで冷却し、水(100ml)に注いだ。得られた混合液をEtOAc(2×70ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(n−ヘキサン中6%EtOAc)により精製して、4−(4−ブロモ−2−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.620g、1.56mmol)を得た。LCMS:方法A、2.512分、MS: ES+ 343.38, 345.38 [M-56]。
DMF:水(9:1、5ml)中の4−(4−ブロモ−2−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.310g、0.778mmol)の撹拌溶液に、NaHCO3(0.196g、2.336mmol)及びピラゾール−4−ボロン酸ピナコールエステル(CAS番号269410−08−4;0.302g、1.557mmol)を室温で加えた。反応混合液を15分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.060g、0.077mmol)を加えた。反応混合液を130℃で3時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(80ml)に注いだ。得られた混合液をEtOAc(3×50ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中40%EtOAc)により精製して、4−(2−シアノ−4−(1H−ピラゾール−4−イル)フェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.130g、0.336mmol)を得た。LCMS:方法A、2.067分、MS: ES+ 387.40。
標題化合物を、実施例1の工程d及びeについて記載された手順と同様の手順を使用して、上記中間体から合成した。LCMS:方法D、3.412分、MS: ES- 310.10; 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ ppm 13.08 (s, 1 H), 8.40 (s, 1 H), 8.23 (s, 1 H), 8.10 (s, 1 H), 7.98 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 7.58 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 7.49 - 7.36 (m, 3 H), 4.86 (s, 2 H), 4.73 (s, 2 H)。
4−(5,8−ジヒドロ−1,7−ナフチリジン−7(6H)−イル)−2−(メチル((1−メチルピペリジン−3−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル
MeCN(10ml)中の6−Boc−2,4−ジクロロ−5,7−ジヒドロピロロ[3,4−d]ピリミジン(CAS番号903129−71−5;0.420g、1.448mmol)の撹拌溶液に、TEA(0.40ml、2.86mmol)を0℃で加えた。反応混合液を0℃で30分間撹拌した後、5,6,7,8−テトラヒドロ−1,7−ナフチリジン二塩酸塩(CAS番号351038−62−5;0.300g、1.448mmol)を加えた。反応混合液を室温で16時間撹拌した。得られた混合液を水(50ml)に注ぎ、EtOAc(3×30ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中40%EtOAc)により精製して、2−クロロ−4−(5,8−ジヒドロ−1,7−ナフチリジン−7(6H)−イル)5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.350g、0.904mmol)を得た。LCMS:方法A、1.866分、MS: ES+ 388.56。
NMP(5ml)中の2−クロロ−4−(5,8−ジヒドロ−1,7−ナフチリジン−7(6H)−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.350g、0.904mmol)の溶液に、室温でDIPEA(0.350g、2.713mmol)を加えた。反応混合液にN−メチル−1−(1−メチルピペリジン−3−イル)メタンアミン(CAS番号639078−61−8;0.155g、1.084mmol)を室温で加えた。反応混合液を90℃で16時間加熱した。得られた反応混合液を室温まで冷却し、水(30ml)に注ぎ、EtOAc(3×25ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(DCM中12%MeOH)により精製して、4−(5,8−ジヒドロ−1,7−ナフチリジン−7(6H)−イル)−2−(メチル((1−メチルピペリジン−3−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.160g、0.904mmol)を得た。LCMS:方法A、1.442分、MS: ES+ 494.75。
標題化合物を、実施例1の工程d及びeについて記載された手順と同様の手順を使用して、上記中間体から合成した。LCMS:方法D、2.919分、MS: ES+ 419.25; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.39 (d, J=4.4 Hz, 1 H), 8.14 (s, 1 H), 7.60 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 7.25 - 7.21 (m, 1 H), 4.93 (s, 2 H), 4.82 (s, 2 H), 4.43 (s, 2 H), 3.80 (t, J=5.6 Hz, 2 H), 3.46 (s, 2H), 3.05 (s, 3 H), 2.90 (s, 3 H), 2.50 - 2.33 (m, 4 H), 2.24 - 2.02 (m, 2 H), 1.70 - 1.51 (m, 5 H)。
DMF:水(9:1、8ml)中の6−カルバモイル−4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(実施例241の工程aと同様の手順で調製、1.2968g、3.347mmol)の撹拌溶液に、K2CO3(0.769g、5.579mmol)及び2−ブロモ−5−フルオロ安息香酸メチル(CAS番号6942−39−8;0.650g、2.79mmol)を室温で加えた。反応混合液を20分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.203g、0.278mmol)を加えた。反応混合液を95℃で4時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(100ml)に注いだ。得られた混合液をEtOAc(3×100ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(100ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(DCM中2.3%MeOH)により精製して、6−カルバモイル−4−(4−フルオロ−2−(メトキシカルボニル)フェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.605g、1.461mmol)を得た。LCMS:方法A、1.959分、MS: ES+ 341.27 [M-56]。
DCM(7ml)中の6−カルバモイル−4−(4−フルオロ−2−(メトキシカルボニル)フェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.605g、1.461mmol)の溶液に、TEA(0.147g、1.461mmol)を0℃で加えた。反応混合液を0℃で5分間撹拌した後、TFAA(0.613g、2.92mmol)を加えた。反応混合液を室温で8時間撹拌した。得られた反応混合液を水(80ml)に注ぎ、EtOAc(3×80ml)で抽出した。合わせた有機相を食塩水(100ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中0.1%MeOH)により精製して、6−シアノ−4−(4−フルオロ−2−(メトキシカルボニル)フェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.455g、1.148mmol)を得た。LCMS:方法A、2.458分、MS: ES+ 341.27 [M-56]。
THF:水(8:2、6ml)中の6−シアノ−4−(4−フルオロ−2−(メトキシカルボニル)フェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.427g、1.078mmol)の溶液に、室温でLiOH・H2O(0.135g、3.23mmol)を加えた。反応混合液を室温で8時間撹拌した。得られた反応混合液を水(30ml)で希釈し、1M HCl(50ml)を使用して酸性化し、EtOAc(3×60ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、2−(2−(tert−ブトキシカルボニル)−6−シアノイソインドリン−4−イル)−5−フルオロ安息香酸(0.372g、0.973mmol)を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に直接使用した。LCMS:方法A、2.151分、MS: ES- 381.38。
DMF(5ml)中の2−(2−(tert−ブトキシカルボニル)−6−シアノイソインドリン−4−イル)−5−フルオロ安息香酸(0.357g、0.934mmol)の溶液に、EDC・HCl(0.358g、1.869mmol)、HOBt(0.171g、1.121mmol)、及びDIPEA(0.364g、2.803mmol)を室温で加えた。反応混合液を室温で30分間撹拌した後、NH4Br(0.457g、4.67mmol)を加えた。反応混合液を室温で7時間撹拌した。得られた反応混合液を飽和NaHCO3溶液(60ml)に注ぎ、EtOAc(3×80ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中2.7%MeOH)により精製して、4−(2−カルバモイル−4−フルオロフェニル)−6−シアノイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.235g、0.616mmol)を得た。LCMS:方法A、2.005分、MS: ES+ 326.27 [M-56]; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.83 - 7.79 (m, 2 H), 7.52 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 7.46 - 7.39 (m, 4 H), 4.69 (d, J= 8.8 Hz, 2 H), 4.48 (d, J= 14.8 Hz, 2 H), 1.43 (d, J=15.2 Hz, 9 H)。
実施例1の工程d及びeについて記載された手順と同様の手順を使用して、上記中間体から標題化合物を合成した。LCMS:方法D、2.943分、MS: ES- 305.05; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.82 (s, 1 H), 7.77 (s, 1 H), 7.56 (s, 1 H), 7.47 - 7.36 (m, 4 H), 4.89 (s, 2 H), 4.68 (s, 2 H)。
1,4−ジオキサン:水(9:1、10ml)中の4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(中間体2、1.434g、4.157mmol)の撹拌溶液に、K2CO3(0.956g、6.93mmol)及び2−ブロモ−4−クロロベンゾニトリル(CAS番号57381−49−4;0.750g、3.46mmol)を室温で加えた。反応混合液を15分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.253g、0.346mmol)を加えた。反応混合液を90℃で2時間加熱した。得られた反応混合液を、同じ方法により同じスケールで調製した1つの他のバッチと合わせた。反応混合液を室温まで冷却し、水(100ml)に注いだ。得られた混合液をEtOAc(2×100ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(n−ヘキサン中49%EtOAc)により精製して、4−(5−クロロ−2−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(1.600g、4.52mmol)を得た。LCMS:方法A、2.462分、MS: ES+ 299.20 [M-56]。
1,4−ジオキサン(10ml)中の4−(5−クロロ−2−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.500g、1.412mmol)の撹拌溶液に、K2CO3(0.584g、4.237mmol)及び1,3−オキサゾリジン−2−オン(CAS番号497−25−6;0.246g、2.82mmol)を室温でマイクロ波管に入れた。反応混合液を20分間脱気した後、Pd2(dba)3(0.129g、0.141mmol)及びキサントホス(0.080g、0.141mmol)を加えた。反応混合液をマイクロ波刺激下で120℃で2時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(100ml)に注いだ。得られた混合液をEtOAc(3×100ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中43%EtOAc)により精製して、4−(2−シアノ−5−(2−オキソオキサゾリジン−3−イル)フェニル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(0.380g、0.938mmol)を得た。LCMS:方法A、2.144分、MS: ES+ 350.20 [M-56]。
実施例1の工程d及びeについて記載された手順と同様の手順を使用して、上記中間体から標題化合物を合成した。LCMS:方法E、3.664分、MS: ES+ 331.22; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.00 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 7.84 - 7.89 (m, 1 H), 7.68 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 7.54 - 7.46 (m, 2 H), 7.39 (d, J=7.2 Hz, 1 H), 4.90 (s, 2 H), 4.73 (s, 2 H), 4.49 (t, J=7.2 Hz, 2 H), 4.14 (t, J=8.4 Hz, 2 H)。
1,4−ジオキサン:水(9:1、10ml)中の1−(3−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)フェニル)イミダゾリジン−2−オン(0.397g、1.378mmol)の撹拌溶液に、K2CO3(0.570g、4.135mmol)及び6−Boc−2,4−ジクロロ−5,7−ジヒドロピロロ[3,4−d]ピリミジン(CAS番号903129−71−5;0.400g、1.378mmol)を室温で加えた。反応混合液を10分間脱気した後、PdCl2(dppf)(0.100g、0.137mmol)を加えた。得られた反応混合液を80℃で2時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却し、水(30ml)に注いだ。得られた混合液をEtOAc(3×25ml)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(n−ヘキサン中の30%EtOAc)により精製して、2−クロロ−4−(3−(2−オキソイミダゾリジン−1−イル)フェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.350g、0.843mmol)を得た。LCMS:方法A、2.043分、MS: ES+ 360.27 [M-56]; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.27 (s, 1 H), 7.66 (t, J=8.0 Hz, 1 H), 7.60 - 7.50 (m, 2 H), 7.11 (s, 1 H), 4.90 (d, J=14.0 Hz, 2 H), 4.63 (d, J=8.4 Hz, 2 H), 3.92 (t, J=7.2 Hz, 2 H), 3.50 - 3.41 (m, 2 H), 1.47 (s, 9 H)。
MeOH:DCM(1:1、15ml)中の2−クロロ−4−(3−(2−オキソイミダゾリジン−1−イル)フェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.325g、0.783mmol)の撹拌溶液に、TEA(0.540ml、3.915mmol)を室温で加え、続いて10%Pd/C(0.033g)を加えた。反応混合液を室温で5時間H2ガスでパージした。得られた反応混合液をセライト床を通して濾過し、DCM:MeOH(1:1、30ml)で洗浄した。合わせた濾液を減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(n−ヘキサン中40%EtOAc)により精製して、4−(3−(2−オキソイミダゾリジン−1−イル)フェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボン酸tert−ブチル(0.220g、0.577mmol)を得た。LCMS:方法A、1.739分、MS: ES+ 382.40。
実施例1の工程d及びeについて記載された手順と同様の手順を使用して、上記中間体から標題化合物を合成した。LCMS:方法D、2.495分、MS: ES+ 307.15; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.20 (s, 1 H), 8.21 (s, 1 H), 7.69 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 7.58 - 7.48 (m, 2 H), 7.11 (s, 1 H), 5.19 (s, 2 H), 4.86 (s, 2 H), 3.93 (t, J=7.6 Hz, 2 H), 3.44 (t, J=7.6 Hz, 2 H)。
DCM(1000ml)中の2−アミノ−3−フルオロ安息香酸(100g、645mmol)の撹拌した橙色/褐色懸濁液に、NBS(114.8g、645mmol)を室温で1時間かけて少しずつ加え、得られた混合液を室温で2時間撹拌した。次に、混合液を濾過し、得られた固体をDCM(2×250ml)及び水(3×400ml)で順次洗浄した後、55℃で7時間真空乾燥して、所望の生成物をベージュ色の固体(121.4g、80%)として得た。LCMS(方法S):保持時間2.93分、m/z 232/234 [M-H]-; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.64 (m, 1 H), 7.52 (dd, J = 10.9, 2.3 Hz, 1 H)。
MeOH(700ml)中の2−アミノ−5−ブロモ−3−フルオロ安息香酸(120.9g、517mmol)の撹拌懸濁液に、濃H2SO4(42ml、775mmol)を40分かけて滴加し、得られた暗褐色の溶液を18時間加熱還流した。混合液を室温まで冷却し、真空下で蒸発乾固して褐色の油状固体を得て、これを水(50ml)とEtOAc(800ml)とに分配した。次に水相が中性(pH7〜8)になるまで、二相混合液をNaHCO3の飽和水溶液(約1L)で処理した。水相を集め、EtOAc(800ml)で抽出し、合わせた有機抽出液をNa2SO4で乾燥し、真空下で蒸発乾固して、粗生成物を褐色固体(116g)として得た。粗固体をPEとEtOAc(400ml)の20:1(v/v)混合液に懸濁し、得られた混合液を濾過して1時間撹拌した後、濾過した。次に、フィルターケーキをPE(400ml)で洗浄して残留する出発物質を除去し、真空下で室温で乾燥して、所望の生成物を淡褐色固体(96.6g、75%)として得た。LCMS(方法L):保持時間2.77分、m/z 248/250 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.67-7.64 (dd, J = 2.2, 1.6 Hz, 1 H), 7.59-7.54 (dd, J = 11.9, 2.3 Hz, 1 H), 6.71 (bs, 2H), 3.83 (s, 3H)。
DMF(1L)中の2−アミノ−5−ブロモ−3−フルオロ安息香酸メチル(100g、400mmol)の溶液に、シアン化亜鉛(II)(28g、240mmol)を加え、得られた混合液を窒素を用いて20分間脱気した。反応混合液をPd(PPh3)4で処理し、窒素雰囲気下で100℃で6時間加熱した。LCMSで測定して反応が完了後、混合液を室温まで冷却し、水(2L)に注いだ。得られた水性混合液をEtOAc(3×1L)で抽出し、合わせた有機物を食塩水(500ml)で洗浄した後、減圧下で蒸発乾固して固体を得た。粗製の固体をシリカのパッドに通してDCM(5L)で溶出した。所望の生成物を含む画分を合わせ、真空下で蒸発乾固して、粗生成物を固体として得て、これをヘキサン(200ml)及びヘキサンとEt2Oの1:1(v/v)混合液(2×130ml)で順次砕砕した。次に固体を室温で真空乾燥して、所望の生成物を淡色の固体(44g、56%)として得た。LCMS(方法R):保持時間2.44分、m/z 195 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.95-7.91 (m, 1H), 7.81-7.75 (dd, J = 11.5, 1.9 Hz, 1H), 7.43 (bs, 2H), 3.84 (s, 3H)。
MeBN(550ml)中の2−アミノ−5−シアノ−3−フルオロ安息香酸メチル(31.4g、162mmol)の撹拌懸濁液に、CuBr2(46.9g、210mmol)を加えて暗褐色の懸濁液を得て、これを室温で5分間撹拌した。次に反応混合液に、MeCN(50ml)中のtBuNO2(25.6ml、194mmol)の溶液を50分かけて滴加し(穏やかなガス発生及び20〜30℃の温度上昇をもたらした)、得られた黒色の懸濁液を室温で4時間撹拌した。LCMSで測定して反応が完了後、混合液を水(400ml)で希釈すると、濃い沈殿物が生成した。EtOAc(500ml)を加えて二相性混合液を得て、これを室温で12時間撹拌した。混合液を静置させて、水層を集め、EtOAc(2×500ml)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮乾固して、固体(41.4g)を得た。この粗固体をDCM(100ml)に溶解し、シリカパッドを通過させDCMで溶出して、所望の生成物をオフホワイトの固体(37g、88%)として得た。LCMS(方法R):保持時間2.57分、m/z 258 [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.27-8.22 (dd, J = 8.5, 1.9 Hz, 1H), 8.12-8.10 (dd, J = 1.9, 1.2 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H)。
THF(700ml)中の4−ブロモイソインドリンHCl(100g、430mmol)の撹拌懸濁液に、TEA(126ml、903mmol)を5分かけて滴加し、混合液を10℃に冷却した。次に冷却した混合液を、温度を20℃未満に維持しながら、THF(300ml)中の二炭酸ジ−tert−ブチル(122g、559mmol)の溶液で15分かけて処理し、得られた混合液を室温で12時間撹拌した。反応液を真空下で濃縮して油状物を得て、これをEtOAc(600ml)と水(600ml)とに分配した。水相を集め、EtOAc(2×500ml)で抽出し、合わせた有機抽出液を食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、真空下で蒸発乾固して、粗生成物を固体(161g)として得た。粗固体をヘキサン(150ml)中でスラリー化し、濾過し、得られた固体をヘキサン(60ml)で洗浄した後、真空下で室温で乾燥して、所望の生成物を固体(95.7g、75%)として得た。LCMS(方法R):保持時間3.02分、m/z 242 (-tBu)/198(-Boc) [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.51-7.46 (dd, J = 7.8, 0.6 Hz, 1H), 7.38-730 (m, 1H), 7.29-7.21 (m, 1H), 4.73-4.63 (d, 2H), 4.56-4.47 (d, 2H), 1.50-1.42 (d, 9H)。
1,4−ジオキサン(850ml)中の4−ブロモイソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(85.6g、287mmol)の溶液に、ビス(ピナコラト)ジボロン(87.5g、344mmol)を加え、続いて酢酸カリウム(56.2g、574mmol)を加え、得られた混合液を窒素を用いて15分間脱気した。Pd(dppf)Cl2(21g、28.7mmol)を反応フラスコに加え、得られた混合液を100℃で6時間加熱した。LCMSで測定して反応が完了後、混合液を室温まで冷却し、セライト(登録商標)パッドを通して濾過し、EtOAc(2×50ml)で洗浄した。濾液を真空下で蒸発乾固して黒色の油状残留物を得て、これをDCMに溶解し、シリカパッドに通してDCMで溶出した。続いて溶媒を真空下で除去して固体を得て、これをヘキサン(200ml)で粉砕し、真空下で室温で乾燥して、所望の生成物を白色固体(88g、89%)として得た。LCMS(方法R):保持時間3.36分、m/z 346, 290 (-tBu), 246 (-Boc) [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.62-7.54 (m, 1 H), 7.48-7.41 (m, 1H), 7.33-7.25 (m, 1 H), 4.70-4.62 (m, 2H), 4.60-4.53 (m, 2H), 1.49-1.43 (m, 9 H), 1.33-1.27 (m, 12 H)。
1,4−ジオキサンと水の9:1(v/v)混合液(1L)中の2−ブロモ−5−シアノ−3−フルオロ安息香酸メチル(70g、271mmol)、4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(中間体2、103g、298mmol)、及びK2CO3(75g、542mmol)の撹拌懸濁液を、窒素を用いて20分間脱気した。Pd(dppf)Cl2(19.8g、27mmol)を反応フラスコに加え、得られた混合液を窒素を用いて20分間脱気した。次に混合液を窒素雰囲気下で100℃で6時間加熱した後、12時間撹拌しながら室温まで冷却した。水(500ml)を混合液に加えて濃い懸濁液を形成し、これをセライト(登録商標)パッドを通して濾過し、EtOAc(1L)で洗浄した。2相性の濾液を分離し、水層をEtOAc(2×800ml)で抽出した。合わせた有機層を食塩水(500ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、真空下で蒸発乾固して、粗生成物を粘稠な褐色油状物(180g)として得た。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中0〜20%EtOAc)により精製した。所望の生成物を含む画分を合わせ、真空下で蒸発乾固して油状物を得て、これをMeCN(500ml)で粉砕して、所望の生成物をオフホワイトの固体(87.8g、82%)として得た。LCMS(方法R):保持時間2.81分、m/z 397/341 (-tBu)/297 (-Boc) [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.32-8.24 (m, 1H), 8.23-8.19 (m, 1H), 7.47-7.34 (m, 2H), 7.15-7.06 (m, 1H), 4.74-4.63 (m, 2H), 4.37-4.15 (m, 2H), 3.60 (s, 3H), 1.47-1.36 (d, 9H)。
THFと水(800ml)の1:1(v/v)混合液中の4−(4−シアノ−2−フルオロ−6−(メトキシカルボニル)フェニル)−イソインドリン−2−カルボン酸tert−ブチル(80g、202mmol)の曇った溶液に、LiOH・H2O(8.64g、206mmol)を一度に加え、室温で4.5時間撹拌した。反応混合液を水(400ml)で希釈し、20℃で真空下で溶媒を留去してTHFを除去した。残りの水溶液をヘキサン(3×400ml)で洗浄し、1M HCl水溶液を慎重に加えてpH4〜5に酸性化した。酸性化した混合液をDCM(3×400ml)で抽出し、合わせた有機抽出液をNa2SO4で乾燥し、真空下で蒸発乾固して、所望の生成物を黄色泡状物(88.4g、100%)として得た。LCMS(方法R):保持時間2.61分、m/z 383/ 327 (-tBu)/ 283 (-Boc) [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.23-8.12 (m, 2H), 7.46-7.33 (m, 2H), 7.19-7.08 (m, 1H), 4.72-4.63 (m, 2H), 4.36-4.23 (m, 2H), 1.48-1.36 (d, 9H)。
THF(880ml)中の2−(2−(tert−ブトキシカルボニル)イソインドリン−4−イル)−5−シアノ−3−フルオロ安息香酸(78g、202mmol)、HATU(92.2g、242mmol)、及びNH4Cl(54g、1mol)の撹拌黄色懸濁液に、TEA(56.3ml、404mmol)を15分かけて滴加し、得られた混合液を室温で24時間撹拌した。次に反応液を水(1L)で処理し、得られた混合液をEtOAc(1L)で抽出した。有機層をNaHCO3の飽和水溶液(250ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、濾過し、真空下で蒸発乾固して黄色固体を得て、これをEt2O(700ml)中で粉砕した。粉砕した固体をDCMに溶解し、フラッシュカラムクロマトグラフィー(ヘキサン中0〜80%EtOAc)により精製した。所望の生成物を含む画分から溶媒を留去して黄色泡状物を得て、これをMeCN(2×100ml)と共沸させて、所望の生成物を淡黄色固体(68.6g、87%)として得た。LCMS(方法R):保持時間2.54分、m/z 382/326 (-tBu)/282 (-Boc) [M+H]+; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.11-8.02 (m, 1H), 7.93-7.79 (m, 2H), 7.54-7.44 (m, 1H), 7.43-7.33 (m, 2H), 7.21-7.11 (m, 1H), 4.74-4.59 (m, 2H), 4.52-4.21 (m, 2H), 1.47-1.38 (m, 9H)。
略語:
TAMRA カルボキシテトラメチルローダミン
PCR ポリメラーゼ連鎖反応
PBS リン酸緩衝化生理食塩水
EDTA エチレンジアミン四酢酸
トリス 2−アミノ−2−(ヒドロキシメチル)−1,3−プロパンジオール
NP40 ノニデットP−40、オクチルフェノキシポリエトキシエタノール
BSA ウシ血清アルブミン
USP7の発現及び精製
USP7構築物をPCR増幅し、N末端FLAGタグを有するpFLAG−CMV−6aベクター(Sigma-Aldrich)にクローニングした。HEK293T細胞を、TransIT−LT1トランスフェクション試薬(Mirus)を製造業者の説明書に従って使用して、FLAG−USP7でトランスフェクトした。トランスフェクションの40時間後に細胞を採取した。細胞をPBSで1回洗浄し、溶解緩衝液(50mMトリス、pH7.5、150mM NaCl、3mM EDTA、0.5% NP40、10%グリセロール、5mMベータメルカプトエタノール、プロテアーゼ阻害剤(コンプリートミニ、Roche)及びホスファターゼ阻害剤(PhosSTOPミニ、Roche)に掻き取った。溶解物を氷上で30分間インキュベートし、4℃で4000rpmで10分間遠心分離した。可溶性上清を、低塩緩衝液(20mMトリス、pH7.5、150mM NaCl、0.5mM EDTA、5mMベータメルカプトエタノール)で平衡化したFLAG親和性樹脂(EZView Red ANTI-FLAGM2親和性ゲル、Sigma-Aldrich)に加え、4℃で3時間、回転しながらインキュベートした。樹脂を2000rpmで2分間遠心分離し、上清を除去した。樹脂を低塩緩衝液+プロテアーゼ阻害剤(コンプリートミニ、Roche)及びホスファターゼ阻害剤(PhosSTOPミニ、Roche)で2回洗浄し、高塩緩衝液(20mMトリス、pH7.5、500mM NaCl、0.5mM EDTA、5mMベータメルカプトエタノール、プロテアーゼ阻害剤(コンプリートミニ、Roche)及びホスファターゼ阻害剤(PhosSTOPミニ、Roche))で1回洗浄した。結合したUSP7を溶出するために、溶出緩衝液(10mMトリス、pH7.5、150mM NaCl、0.5mM EDTA、10%グリセロール、0.5% NP40、5mMベータメルカプトエタノール、0.15mg/ml 3×FLAGペプチド(Sigma-Aldrich))を樹脂に加え、4℃で回転しながら2.5時間インキュベートした。樹脂を4000rpmで30秒間遠心分離し、精製FLAG−USP7を含む上清を取り出し、−80℃で保存した。
反応は、二重測定で黒色の384ウェルプレート(小容量、Greiner 784076)中で、最終反応容量21μlで行った。USP7を反応緩衝液(20mMトリス、pH7.5、100mM NaCl、0.005%ツイーン20、0.5mg/ml BSA、5mMベータメルカプトエタノール)で、0、0.0005、0.001、0.0025、及び0.005μl/ウェル相当に希釈した。緩衝液は、最適温度、pH、還元剤、塩、インキュベーション時間、及び界面活性剤について最適化された。反応は、イソペプチド結合を介してユビキチンに結合したTAMRA標識ペプチド50nMを蛍光偏光基質として添加することにより開始した。反応物を室温でインキュベートし、2分毎に120分間読み取った。読み取りは、Pherastar Plus(BMG Labtech)で行った。λ励起540nm;λ発光590nm。
希釈プレートは、96ウェルポリプロピレンV底プレート(Greiner #651201)中で50% DMSOで最終濃度の21倍で調製した(100μMの最終濃度については2100μM)。典型的な8点希釈系列は、最終濃度が100、30、10、3、1、0.3、0.1、0.03μMである。反応は、二重測定で黒色の384ウェルプレート(小容量、Greiner 784076)中で、最終反応容量21μlで行った。1μlの50%DMSO又は希釈化合物のいずれかをプレートに加えた。USP7を反応緩衝液(20mMトリス、pH7.5、100mM NaCl、0.05%ツイーン20、0.5mg/ml BSA、5mMベータメルカプトエタノール)で、0.0025μL/ウェル相当に希釈し、10μlの希釈USP7を化合物に加えた。酵素及び化合物を室温で30分間インキュベートした。反応は、イソペプチド結合を介してユビキチンに結合したTAMRA標識ペプチドの50nMを蛍光偏光基質として添加することにより開始した。基質の添加直後、及び室温で2時間のインキュベーション後に、反応を読み取った。読み取りは、Pherastar Plus(BMG Labtech)で行った。λ励起540nm;λ発光590nm。
Claims (20)
- 式I:
R1a、R1b、R1c、及びR1dは、それぞれ独立して、水素;又は、ハロゲン、ヒドロキシル又はシアノにより場合により置換されたC1〜C6アルキルを表し;
X1、X3、及びX4は、それぞれ独立して、N、C−Q1−R2又はC−Q2−(R6)nを表し、X2はN又はCHを表し、ここで、X1、X3、及びX4の1つはC−Q1−R2を表し、X1、X2、X3、及びX4の2つ以下はNを表し;
Q1は、共有結合、酸素原子、硫黄原子、−OR5−、−SO−、−SO2−、−C(O)−、−C(O)O−、−C0〜C3アルキレン−C(O)NR3−C0〜C3アルキレン、−C0〜C3アルキレン−NR3−C0〜C3アルキレン、−C0〜C3アルキレン−NR3CO−C0〜C3アルキレン、−NR3C(O)NR4−、−SO2NR3−、NR3SO2−、−NR3SO2NR4−、−NR3C(O)O−、−NR3C(O)OR5−、場合により置換されたC1〜C6アルキレン、又は場合により置換されたC2〜C6アルケニレンを表し、Q1において、C1〜C6アルキレン及びC2〜C6アルケニレンを置換する置換基は、ハロゲン、オキソ、ヒドロキシル、チオール、シアノ、アミノ、アミド、ニトロ及びSF5から選択され;
R2は、場合により置換された3〜10員の単環式若しくは二環式ヘテロアリール、アリール、又はヘテロシクリル環を表し;
R3及びR4は、それぞれ独立して、水素、又は場合により置換されたC1〜C6アルキルを表し;
R5は、場合により置換されたC1〜C6アルキレンを表し、
nは、0又は1であり;
R 3 、R 4 及びR 5 において、C 1 〜C 6 アルキレン及びC 1 〜C 6 アルキレンのための任意の置換基は、ハロゲン、オキソ、ヒドロキシル、チオール、シアノ、アミノ、アミド、ニトロ及びSF5から選択され;
R2は、置換されていないか、又はハロゲン、シアノ、オキソ、ニトロ、ヒドロキシル、−CF3、−SR10、−C1〜C6アルキル、−C1〜C6アルコキシ,−C2〜C6アルケニル、−C2〜C6アルキニル、−Q3a−R12、−Q3a−O−Q3b−R12、−Q3a−S−Q3b−R12、−Q3a−SO−Q3b−R12、−Q3a−NR10CONR11R11a、−Q3a−NR10CONR11−Q3b−R12、−Q3a−NR10R11、−Q3a−NR10−Q3b−R12、−Q3a−COR10、−Q3a−CO−Q3b−R12、−Q3a−NR10COR11、−Q3a−NR10CO−Q3b−R12、−Q3a−NR10C(O)OR11、−Q3a−NR10C(O)O−Q3a−R12、−Q3a−SO2R10、−Q3a−SO2−Q3b−R12、−Q3a−CONR10R11、−Q3a−CONR10−Q3b−R12、−Q3a−CO2R10、−Q3a−CO2−Q3c−R12、−Q3a−SO2NR10R11、−Q3a−SO2NR10−Q3b−R12、−Q3a−NR10SO2R11、−Q3a−NR10SO2−Q3b−R12、−Q3a−NR10SO2NR11R11a、及び−Q3a−NR10SO2NR11−Q3b−R12で置換されており;ここで、
Q3a及びQ3bは、独立して、共有結合、場合により置換されたC1〜C6アルキレン、又は場合により置換されたC2〜C6アルケニレンを表し;
R10、R11、及びR11aは、それぞれ独立して、水素、又は場合により置換されたC1〜C6アルキルを表し;及び
R12は、3〜10員の、場合により置換されたヘテロシクリル、場合により置換されたヘテロアリール、場合により置換されたアリール、又は場合により置換されたシクロアルキルを表し;
Q2は、水素、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシル、−SR7、−NR7R8、−CONR7R8、−NR7COR8、−NR7CONR8R8a、−COR7、−C(O)OR7、−SO2R7、−SO2NR7R8、−NR7SO2R8、−NR7SO2NR8R8a、−NR7C(O)OR8、場合により置換されたC1〜C6アルキル、場合により置換されたC1〜C6アルコキシ、場合により置換されたC2〜C6アルケニル、−C0〜C3アルキレン−NR7CONR8R8a、−C0〜C3アルキレン−NR7C(O)OR8a、共有結合、酸素原子、硫黄原子、−OR9−、−SO−、−SO2−、−CO−、−C(O)O−、−C0〜C3アルキレン−C(O)NR7−C0〜C3アルキレン、−C0〜C3アルキレン−NR7−C0〜C3アルキレン、−C0〜C3アルキレン−NR7CO−C0〜C3アルキレン、−NR7CONR8−、−SO2NR7−、−NR7SO2−、−NR7SO2NR8−、−NR7C(O)O−、−NR7C(O)OR9−、場合により場合により置換されたC1〜C6アルキレン、又は場合により置換されたC2〜C6アルケニレンを表し;
Q2について、C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシ、C2〜C6アルケニル、−C1〜C3アルキレン及びC2〜C6アルケニレンのための任意の置換基は、ハロゲン、ヒドロキシル、チオール、シアノ、アミノ、アミド、ニトロ、SF5、−NHC(O)C1−C6アルキル、−C1−C6アルコキシ、−SO2 C1−C6アルキル、−N(C1−C6アルキル)C(O) C1−C6アルキル、−NHSO2 C1−C6アルキル、及び−C(O)N(C1−C6アルキル)2から選択され;
R6は、場合により置換された3〜10員の単環式若しくは二環式ヘテロアリール、アリール、ヘテロシクリル、又はシクロアルキル環を表し;
R7、R8、及びR8aは、それぞれ独立して、水素、又は場合により置換されたC1〜C6アルキルを表し;
R9は、場合により置換されたC1〜C6アルキレンを表し;
R7、R8及びR9について、C1〜C6アルキル及びC1〜C6アルキレンのための任意の置換基は、ハロゲン、ヒドロキシル、チオール、シアノ、アミノ、アミド、ニトロ、SF5、−SO2 C1〜C6アルキル及び−C1〜C6アルコキシから選択され;
R6は、置換されていないか、又はハロゲン、シアノ、オキソ、ニトロ、ヒドロキシル、−SR13、−C1〜C6アルキル、−C1〜C6アルコキシ,-C2〜C6アルケニル、−C2〜C6アルキニル、−Q4a−R15、−Q4a−O−Q4b−R15、−Q4a−S−Q4b−R15、−Q4a−SO−Q4b−R15、−Q4a−NR13CONR14R14b、−Q4a−NR13CONR14−Q4b−R15、−Q4a−NR13R14、−Q4a−NR13−Q4b−R15−、−Q4a−COR13、−Q4a−CO−Q4b−R15−、−Q4a−NR13COR14、−Q4a−NR13CO−Q4b−R15、−Q4a−NR13C(O)OR14、−Q4a−NR13C(O)O−Q4b−R14−、−Q4a−SO2R13、−Q4a−SO2−Q4b−R15、−Q4a−CONR13R14、−Q4a−CONR13−Q4b−R15、−Q4a−CO2R13、−Q4a−CO2−Q4b−R15、−Q4a−SO2NR13R14、−Q4a−SO2NR13−Q4b−R15、-Q4a−NR13SO2R14、-Q4a−NR13SO2−Q4b−R15,-Q4a−NR13SO2NR14R14b、及び-Q4a−NR13SO2NR14−Q4b−R15から選択される1つ以上の置換基で置換されており;ここで、
Q4a及びQ4bは、独立して、共有結合、場合により置換されたC1〜C6アルキレン、又は場合により置換されたC2〜C6アルケニレンを表し;
R13、R14、及びR14aは、それぞれ独立して、水素、又は場合により置換されたC1〜C6アルキルを表し;及び
R15は、3〜10員の、場合により置換されたヘテロシクリル、場合により置換されたヘテロアリール、場合により置換されたアリール、又は場合により置換されたシクロアルキルを表し;
Q3a、Q3b、Q4a、Q4b、R8a、R10、R11、R11a、R13、R14及びR14aについて、C1〜C6アルキル、C1〜C6アルキレン、及びC2〜C6アルケニレンのための任意の置換基は、ハロゲン、ヒドロキシル、チオール、シアノ、アミノ、アミド、ニトロ、及びSF5から選択され;
R12及びR15の定義内の、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、アリール及びシクロアルキルのための任意の置換基は、ハロゲン、シアノ、オキソ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、アミド、C1〜C6アルキル、及びC1〜C6アルコキシから選択される。ただし、アルキレンは介在するヘテロ原子を含まない。]
の化合物もしくはその互変異性体、又は当該化合物もしくは当該互変異性体の医薬的に許容し得る塩。 - X4はN又はCHである、請求項1に記載の化合物。
- X1は、C−Q1−R2、X3はC−Q2−(R6)n、X2及びX4はいずれもNであるか又はいずれもCHである、請求項1又は2に記載の化合物。
- Q1は、共有結合、−C0〜C3アルキレン−CONR3−C0〜C3アルキレン−、−C0〜C3アルキレン−NR3C(O)−C0〜C3アルキレン、及び−C0〜C3アルキレン−NR3−C0〜C3アルキレンから選択され、ここで、R 3 は、水素及びC1〜C3アルキルから選択される、請求項1〜3のいずれか1項に記載の化合物。
- Q1は共有結合である、請求項4に記載の化合物。
- Q2の各存在は、ハロゲン、場合により置換されたC1〜C6アルキル、−C(O)OR7、NR7COR8、−NR7SO2R8、−NR7R8、共有結合、−C0〜C3アルキレン−NR7−C0〜C3アルキレン、−C0〜C3アルキレン−NR7CO−C0〜C3アルキレン、−C0〜C3アルキレン−NR7CONR8R8a、及び−C0〜C3アルキレン−NR7C(O)OR8aから独立して選択され、ここで、R7及びR8は、それぞれ独立して水素又は場合により置換されたC1〜C6アルキルを表す、請求項1〜5のいずれか1項に記載の化合物。
- R2は、場合により置換された、ピロリジニル、フェニル、キナゾリニル、ピラゾリル、キノリニル、ピロロピリジニル、オキサジアゾリル、イソキノリニル、ジヒドロイソキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、ピリジニル、ピリミジニル、イソキサゾリル、インダゾリル、チアゾリル、ジヒドロナフチリジニル、チオフェニル、ピペラジニル、イソインドリル、テトラヒドロナフタレニル、ベンゾオキサゾリル、モルホリニル、テトラヒドロピラニル、フラニル、イミダゾリル、ピペリジニル、インドリニル、ジヒドロインデニル、テトラヒドロイソキノリニル、及びテトラヒドロナフチリジニルから選択される、請求項1〜6のいずれか1項に記載の化合物。
- R12は、場合により置換された、フェニル、ピラジニル、ピリジニル、シクロプロピル、ピペラジニル、アゼチジニル、モルホリニル、ピリミジニル、イミダゾリル、ピロリジニル、オキサゾリジニル、ピラゾリル、及びイミダゾリジニルから選択される、請求項1〜7のいずれか1項に記載の化合物。
- R6の各存在は、場合により置換された、フェニル、オキサジアゾリル、ピラゾリル、ピペリジニル、モルホリニル、ピリジニル、ピロリジニル、テトラヒドロピラニル、チオフェニル、テトラヒドロイソキノリニル、ジヒドロナフチリジニル、イソキサゾリル、イソキノリニル、ピリミジニル、テトラヒドロナフタレニル、チアゾリル、シクロヘキシル、フラニル、イミダゾリル、テトラヒドロチオピラニル、チオモルホリニル、及びジヒドロピリジニルから独立して選択される、請求項1〜8のいずれか1項に記載の化合物。
- R6は、ハロゲン、シアノ、オキソ、ヒドロキシル、C1〜C6アルキル、C1〜C6アルコキシ、−Q4a−CONR13R14、−Q4a−COR13、及び−Q4a−R15から選ばれる1つ以上の置換基で場合により置換されてよく、
ここで、Q4aは共有結合であり;R13及びR14はそれぞれ独立して水素又はC1〜C3アルキルを表し;R15はフェニルである、請求項1〜9のいずれか1項に記載の化合物。 - R1a、R1b、R1c、及びR1dは、それぞれ独立して、水素又はC1〜C6アルキルを表す、請求項1〜10のいずれか1項記載の化合物。
- R1a、R1b、R1c、及びR1dはそれぞれ水素を表す、請求項1〜11のいずれか1項に記載の化合物。
- X1はC−Q1−R2を表し、ここで、Q1は共有結合を表し、かつR2は場合により置換されたフェニルであり、ここでX2、X3、及びX4はNではない、請求項1に記載の化合物。
- 以下:
5−シアノ−2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
5−クロロ−2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−5−メチルベンズアミド;
4−(2−(アゼチジン−1−カルボニル)−4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
6−((1−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)アミノ)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボニトリル;
4−フェニルイソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(1−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(キノリン−3−イル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(1H−ピロロ[2,3−b]ピリジン−5−イル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(1−メチル−1,2,3,6−テトラヒドロピリジン−4−イル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(2−メチル−2H−インダゾール−5−イル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(o−トリル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(1−メチルピペリジン−4−イル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
N−ベンジル−3−(6−シアノ−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−4−イル)ベンズアミド;
4−(4−クロロフェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−6−カルボニトリル;
4−(4−メトキシフェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−6−カルボニトリル;
4−(3−クロロフェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−6−カルボニトリル;
4−フェニル−1,3−ジヒドロ−2H−ピロロ[3,4−c]ピリジン−2−カルボニトリル;
6−(5−メチル−1,2,4−オキサジアゾール−3−イル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(キナゾリン−2−イルアミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
3−((2−シアノイソインドリン−4−イル)アミノ)−N−メチルイソキノリン−6−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)ニコチンアミド;
2−(6−アセトアミド−2−シアノイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
(R)−N−(2−シアノ−7−(3−フルオロフェニル)イソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(R)−N−(2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(R)−N−(2−シアノ−7−(3−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(R)−N−(2−シアノ−7−(4−フルオロフェニル)イソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(R)−N−(2−シアノ−7−(4−(メチルカルバモイル)フェニル)イソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(R)−N−(2−シアノ−7−(3−(メチルカルバモイル)フェニル)イソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(R)−N−(2−シアノ−7−(3−メトキシフェニル)イソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(R)−N−(2−シアノ−7−(4−メトキシフェニル)イソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(R)−N−(7−(4−クロロフェニル)−2−シアノイソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(R)−N−(7−(3−クロロフェニル)−2−シアノイソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(R)−N−(2−シアノ−7−(2−メチルベンゾ[d]オキサゾール−6−イル)イソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(S)−N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(R)−N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−1−メチル−1H−ピラゾール−5−カルボキサミド;
4−ベンジル−N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)モルホリン−2−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−3−(ピリジン−3−イル)プロパンアミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−5−オキソピロリジン−3−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−1−メチルピロリジン−3−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−1−メチル−6−オキソピペリジン−3−カルボキサミド;
1−アセチル−N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)ピペリジン−3−カルボキサミド;
N1−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−N4,N4−ジメチルスクシンアミド;
1−アセチル−N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)ピペリジン−4−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−4−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−2−(ジメチルアミノ)アセトアミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)テトラヒドロ−2H−ピラン−4−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)テトラヒドロ−2H−チオピラン−4−カルボキサミド1,1−ジオキシド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−1−メチル−5−オキソピロリジン−3−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−4−メチルモルホリン−2−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−4−エチルモルホリン−2−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−4−イソプロピルモルホリン−2−カルボキサミド;
N−(7−(2−カルバモイルフェニル)−2−シアノイソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)アセトアミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−N−メチルアセトアミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−N,1−ジメチルピペリジン−3−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−4−メチルピペラジン−1−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)メタンスルホンアミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)ピペリジン−3−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)ピペリジン−4−カルボキサミド;
6−(((1−メチルピペリジン−3−イル)メチル)アミノ)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(2−クロロ−4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノ−2−メチルフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノ−2,6−ジメチルフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
3−オキソ−[4,4'−ビイソインドリン]−2'−カルボニトリル;
4−(1−オキソ−1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン−8−イル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
(R)−4−(2−(1−ヒドロキシエチル)フェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
(S)−4−(2−(1−ヒドロキシエチル)フェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(2−シアノイソインドリン−4−イル)イソフタロニトリル;
N−ベンジル−3−(2−シアノイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
3−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−N−(1−フェニルエチル)ベンズアミド;
3−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−N−フェニルベンズアミド;
(R)−3−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−N−(1−フェニルエチル)ベンズアミド;
N−(2−アミノエチル)−2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
4−(2−(ピペラジン−1−カルボニル)フェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
N−ベンジル−4−(2−シアノイソインドリン−4−イル)ピコリンアミド;
N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−3−(シクロプロパンカルボキサミド)ベンズアミド;
N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−4−(ピリジン−3−イル)ベンズアミド;
N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−4−(ピリジン−4−イル)ベンズアミド;
N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−3−(o−トリル)−1H−ピラゾール−5−カルボキサミド;
N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−2−フェニルチアゾール−4−カルボキサミド;
N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−5−メトキシ−1H−ピロロ[2,3−c]ピリジン−2−カルボキサミド;
N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−5−(ピラジン−2−イル)−1H−ピラゾール−3−カルボキサミド;
1−ベンジル−N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−カルボキサミド
N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−4−(メトキシメチル)ベンズアミド;
(3−((2−シアノイソインドリン−4−イル)カルバモイル)フェニル)カルバミン酸メチル;
3−ベンズアミド−N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
(4−((2−シアノイソインドリン−4−イル)カルバモイル)ベンジル)カルバミン酸ベンジル;
N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−4−(N−フェニルスルファモイル)ベンズアミド;
N−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−5−モルホリノチオフェン−2−カルボキサミド;
N−(2−シアノイソインドリン−5−イル)−1−メチルピロリジン−3−カルボキサミド;
N−ベンジル−2−シアノイソインドリン−4−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−4−フェニルイソインドリン−5−イル)アセトアミド;
1−(1−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリダジン−6−カルボニトリル;
2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−カルボン酸メチル;
4−(4−(2,4−ジフルオロフェニル)ピペラジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(イソインドリン−2−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(4−(ピリジン−3−イルオキシ)ピペリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(4−(3−メトキシフェノキシ)ピペリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−((1−(6−シアノ−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−4−イル)ピペリジン−4−イル)オキシ)ベンズアミド;
N−(6−シアノ−4−フェニル−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−イル)アセトアミド;
N−(6−シアノ−4−(3−シアノフェニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−イル)アセトアミド;
N−(6−シアノ−4−(3−(トリフルオロメトキシ)フェニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−イル)アセトアミド;
N−(6−シアノ−4−(1−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−イル)アセトアミド;
N−(3−(2−アセトアミド−6−シアノ−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−4−イル)フェニル)アセトアミド;
N−(6−シアノ−4−(3−(メチルスルホンアミド)フェニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−イル)アセトアミド;
2−(((1r,4r)−4−ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−フェニル−2−(((テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−((1−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−フェニル−2−((ピリミジン−2−イルメチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−フェニル−2−((2−(ピリジン−2−イル)エチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−フェニル−2−((1,2,3,4−テトラヒドロナフタレン−1−イル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−フェニル−2−(フェニルアミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−フェニル−2−((ピリジン−2−イルメチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−フェニル−2−((ピリジン−3−イルメチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−フェニル−2−((チアゾール−5−イルメチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−((フラン−2−イルメチル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−((3−(1H−イミダゾール−1−イル)プロピル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(6−シアノ−2−(エチルアミノ)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−4−イル)ベンズアミド;
2−(((4−メチルモルホリン−2−イル)メチル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(((1−メチルピペリジン−3−イル)メチル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(((1−メチル−1H−ピラゾール−5−イル)メチル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(((1−メチルピロリジン−3−イル)メチル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
N−(6−シアノ−4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−イル)アセトアミド;
N−(6−シアノ−4−フェニル−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−イル)−5−オキソピロリジン−3−カルボキサミド;
2−(4−メトキシフェニル)−4−(ピロリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
1−(6−シアノ−2−フェニル−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−4−イル)ピロリジン−2−カルボキサミド;
2−((6−シアノ−2−フェニル−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−4−イル)アミノ)アセトアミド;
1−(6−シアノ−2−フェニル−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−4−イル)−N−メチルピロリジン−2−カルボキサミド;
2−(5−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)−4−(ピロリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(2−メトキシフェニル)−4−(ピロリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(3−メトキシフェニル)−4−(ピロリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(ピリジン−3−イル)−4−(ピロリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(6−シアノ−4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−イル)ベンズアミド;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(5−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(2−メトキシフェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(3−シアノフェニル)−4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(1−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
1−(6−シアノ−2−(o−トリル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−4−イル)ピロリジン−2−カルボキサミド;
1−(6−シアノ−2−(5−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−4−イル)ピロリジン−2−カルボキサミド;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(1H−ピラゾール−4−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(1−(2−メトキシエチル)−1H−ピラゾール−4−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(5,8−ジヒドロ−1,7−ナフチリジン−7(6H)−イル)−2−(5−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
N−(6−シアノ−4−(ピロリジン−1−イル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−イル)アセトアミド;
2−クロロ−4−(4−フルオロフェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−クロロ−4−(2−フルオロフェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(4−フルオロフェニル)−2−メチル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
(R)−2−(((4−メチルモルホリン−2−イル)メチル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
(S)−2−(((4−メチルモルホリン−2−イル)メチル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−クロロ−6−(2−シアノイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
4−(2−(ピロリジン−1−カルボニル)フェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
5−シアノ−2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−4−メチルベンズアミド;
2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−5−フルオロベンズアミド;
4−(2−アセチルフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−N−メチルベンゼンスルホンアミド;
2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)ベンゼンスルホンアミド;
4−(2−(メチルスルホニル)フェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
(R)−N−(2−シアノ−7−(ピリジン−4−イル)イソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
(R)−N−(2−シアノ−7−(ピリジン−3−イル)イソインドリン−5−イル)−1−メチルピペリジン−3−カルボキサミド;
4−(2−オキソインドリン−7−イル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(2−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(2−シアノ−4−フルオロフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(2−シアノ−6−フルオロフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−クロロ−2−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(2−シアノ−3−メトキシフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(2−シアノ−4−メトキシフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(2−シアノ−5−メトキシフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(3−シアノ−6−メトキシピリジン−2−イル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−N,N−ジメチルベンゼンスルホンアミド;
2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−N−エチルベンゼンスルホンアミド;
4−(7−シアノ−3−オキソ−2,3−ジヒドロ−1H−インデ−4−ニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノ−2−(トリフルオロメチル)フェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(2−(アゼチジン−1−イルスルホニル)フェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−N−(2−ヒドロキシエチル)ベンゼンスルホンアミド;
2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−N−(2−(6−オキソピリミジン−1(6H)−イル)エチル)ベンズアミド;
4−(2−シアノ−4−(1H−イミダゾール−1−イル)フェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
1−(3−メトキシフェニル)−4−(1−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリダジン−6−カルボニトリル;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(4−(o−トリルオキシ)ピペリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(4−(ベンジルオキシ)ピペリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(4−(2−メトキシフェノキシ)ピペリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
N−(6−シアノ−4−(4−フルオロフェニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−2−イル)アセトアミド;
2−((2−(メチルスルホニル)エチル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−フェニル−2−((テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−((2−ヒドロキシエチル)(メチル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(メチル((4−メチルモルホリン−2−イル)メチル)アミノ)−4−フェニル−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(((4−メチルモルホリン−2−イル)メチル)アミノ)−4−(ピリジン−3−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(3−フルオロフェニル)−2−(((4−メチルモルホリン−2−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(4−フルオロフェニル)−2−(((4−メチルモルホリン−2−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
N−(3−(6−シアノ−2−(((4−メチルモルホリン−2−イル)メチル)アミノ)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−4−イル)フェニル)アセトアミド;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(((1−メチルピペリジン−3−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(((4−メチルモルホリン−2−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(((1−メチル−1H−ピラゾール−5−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−((トランス)−4−ヒドロキシシクロヘキシル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(((テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(((1−メチル−1H−ピラゾール−4−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(3,4−ジヒドロイソキノリン−2(1H)−イル)−2−(メチル((4−メチルモルホリン−2−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(メチルアミノ)−4−(4−フェノキシピペリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(ジメチルアミノ)−4−(4−フェノキシピペリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)−4−(4−フェノキシピペリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−アミノ−4−(4−フェノキシピペリジン−1−イル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−2−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
4−(3,4−ジフルオロフェニル)−2−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
N−(3−(6−シアノ−2−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−4−イル)フェニル)アセトアミド;
2−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)−4−(4−メトキシフェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)−4−(4−(4−メチルピペラジン−1−イル)フェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
6−((ジメチルアミノ)メチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボニトリル;
N−((2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)メチル)アセトアミド;
6−(2−メトキシエチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−((メチルスルホニル)メチル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
N−((2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)アセトアミド;
N−((2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)−N−メチルアセトアミド;
N−((2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)テトラヒドロ−2H−ピラン−4−カルボキサミド;
N−((2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)テトラヒドロ−2H−チオピラン−4−カルボキサミド−1,1−ジオキシド;
N−((2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)−1−メチル−1H−ピラゾール−4−カルボキサミド;
N−((2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)メタンスルホンアミド;
3−((2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)−1,1−ジメチル尿素;
((2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)カルバミン酸イソプロピル;
N−((2−シアノ−7−(2−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)アセトアミド;
N−((2−シアノ−7−(2,4−ジシアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)アセトアミド;
1−((2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)−3−メチル尿素;
1−((2−シアノ−7−(2,4−ジシアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)−3−メチル尿素;
1−((2−シアノ−7−(2−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メチル)−3−メチル尿素;
6−(((1H−ピラゾール−5−イル)アミノ)メチル)−4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
2−(2,6−ジシアノイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)−N,N−ジメチルイソインドリン−5−カルボキサミド;
2−シアノ−7−(2,4−ジシアノフェニル)イソインドリン−5−カルボキサミド;
2−シアノ−7−(2−シアノ−5−メトキシフェニル)イソインドリン−5−カルボキサミド;
2−シアノ−7−(2−シアノ−4−フルオロフェニル)イソインドリン−5−カルボキサミド;
4−(4−シアノフェニル)−6−(1,1−ジオキシドチオモルホリン−4−カルボニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)−N−メチルイソインドリン−5−カルボキサミド;
2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)−N−(テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)イソインドリン−5−カルボキサミド;
2−シアノ−7−(2,4−ジシアノフェニル)−N−メチルイソインドリン−5−カルボキサミド;
2−シアノ−7−(4−フルオロフェニル)−N−メチルイソインドリン−5−カルボキサミド;
2−シアノ−7−(2−シアノフェニル)イソインドリン−5−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−(2−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メタンスルホンアミド;
N−(2−シアノ−7−(2,4−ジシアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メタンスルホンアミド;
N−(2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)メタンスルホンアミド;
N−(2−シアノ−7−(2−シアノ−5−メトキシフェニル)イソインドリン−5−イル)メタンスルホンアミド;
4−(4−フルオロフェニル)−2−(((テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−6−カルボニトリル;
4−(4−フルオロフェニル)−2−((ピリジン−2−イルメチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−6−カルボニトリル;
4−(4−フルオロフェニル)−2−(((1−メチル−1H−ピラゾール−5−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−6−カルボニトリル;
N−(6−シアノ−4−(4−フルオロフェニル)−6,7−ジヒドロ−5H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−2−イル)アセトアミド;
2−((2,3−ジヒドロキシプロピル)アミノ)−4−(4−フルオロフェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−b]ピリジン−6−カルボニトリル;
2−(2−シアノ−7−フェニルイソインドリン−5−イル)−N,N−ジメチルアセトアミド;
6−(2−(メチルスルホニル)エチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボニトリル;
6−((メチルスルホニル)メチル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−(2−メトキシエチル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
2−(2−シアノ−6−(2−メトキシエチル)イソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
4−(4−シアノフェニル)−6−(2−(ピリジン−3−イル)エチル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
6−(2−(1−アセチルピペリジン−4−イル)エチル)−4−(4−シアノフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
5−クロロ−2−(2−シアノ−1−メチルイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
5−シアノ−2−(2−シアノ−1−メチルイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
5−シアノ−2−(2−シアノ−5−フルオロイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
5−シアノ−2−(2−シアノ−7−フルオロイソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
6−(1−メチル−6−オキソピペリジン−3−イル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボニトリル;
6−(1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)−4−フェニルイソインドリン−2−カルボニトリル;
N−(2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)テトラヒドロ−2H−ピラン−4−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)−1−メチル−5−オキソピロリジン−3−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)−1−メチル−6−オキソピペリジン−3−カルボキサミド;
N−(2−シアノ−7−(4−シアノフェニル)イソインドリン−5−イル)−2−(ジメチルアミノ)アセトアミド;
4−(2,6−ジオキソピペリジン−1−イル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−(メチルアミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−(ジメチルアミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−(イソプロピルアミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−((1,1−ジオキシドテトラヒドロ−2H−チオピラン−4−イル)アミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−((テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)アミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−(((テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)メチル)アミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−(((1−メチル−1H−ピラゾール−5−イル)メチル)アミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−(エチルアミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−(1,1−ジオキシドチオモルホリノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−(ジエチルアミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−((2,3−ジヒドロキシプロピル)アミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
5−シアノ−2−(2−シアノ−6−(((テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)メチル)アミノ)イソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
(S)−6−((2,3−ジヒドロキシプロピル)アミノ)−4−(4−フルオロフェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
(S)−4−(2−シアノフェニル)−6−((2,3−ジヒドロキシプロピル)アミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−((3−ヒドロキシ−2−メトキシプロピル)アミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
5−シアノ−2−(2−シアノ−6−(ジメチルアミノ)イソインドリン−4−イル)ベンズアミド;
4−(4−シアノフェニル)−6−((2−ヒドロキシプロピル)アミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−((2−ヒドロキシ−2−メチルプロピル)アミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(4−シアノフェニル)−6−((2−ヒドロキシ−3−メトキシプロピル)アミノ)イソインドリン−2−カルボニトリル;
2−メチル−4−(3−(2−オキソピロリジン−1−イル)フェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(((1−メチル−1H−ピラゾール−5−イル)メチル)アミノ)−4−(3−(2−オキソピロリジン−1−イル)フェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)−4−(3−(2−オキソピロリジン−1−イル)フェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)−4−(3−(2−オキソオキサゾリジン−3−イル)フェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−シアノ−7−(2−シアノ−5−メトキシピリジン−3−イル)−N−メチルイソインドリン−5−カルボキサミド;
4−(2−シアノ−4−(1H−ピラゾール−4−イル)フェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(5,8−ジヒドロ−1,7−ナフチリジン−7(6H)−イル)−2−(メチル((1−メチルピペリジン−3−イル)メチル)アミノ)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;
2−(2,6−ジシアノイソインドリン−4−イル)−5−フルオロベンズアミド;
5−シアノ−2−(2,6−ジシアノイソインドリン−4−イル)−3−フルオロベンズアミド;
4−(2−シアノ−5−(2−オキソオキサゾリジン−3−イル)フェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(2−シアノ−5−(2−オキソピロリジン−1−イル)フェニル)イソインドリン−2−カルボニトリル;
4−(3−(2−オキソイミダゾリジン−1−イル)フェニル)−5,7−ジヒドロ−6H−ピロロ[3,4−d]ピリミジン−6−カルボニトリル;及び
5−シアノ−2−(2−シアノイソインドリン−4−イル)−3−フルオロベンズアミド
から成る群より選択される請求項1で定義される式Iの化合物もしくはその互変異性体、又は当該化合物もしくは当該互変異性体の医薬的に許容し得る塩。 - 請求項1〜14のいずれか1項に記載の化合物もしくはその互変異性体、又は当該化合物もしくは当該互変異性体の医薬的に許容し得る塩を含む医薬組成物。
- 癌を治療するための、請求項15に記載の医薬組成物。
- 癌が、胸部、卵巣、前立腺、肺、腎臓、胃、結腸、精巣、頭部および頸部、膵臓、脳、黒色腫、骨、組織臓器の癌、血液細胞の癌、リンパ腫、白血病、多発性骨髄腫、慢性骨髄性白血病(CML)、急性骨髄性白血病(AML)、マントル細胞リンパ腫、神経芽腫、結腸直腸癌、軟部組織肉腫、脂肪肉腫、線維芽肉腫、平滑筋肉腫、肝細胞癌、骨肉腫、食道癌、および非小細胞肺癌から選ばれる、請求項16記載の医薬組成物。
- 神経変性疾患;多発性硬化症(MS)、ミトコンドリアミオパシー、脳症、乳酸アシドーシスおよび脳卒中様発作(MELAS)症候群;Leber遺伝性視神経症(LHON);癌;神経障害、運動失調、色素性網膜炎−母体遺伝Leigh症候群(NARP-MILS);ダノン病;糖尿病;糖尿病性腎症;代謝障害;心不全;心筋梗塞を引き起こす虚血性心臓病;精神医学疾患、統合失調症;多発性スルファターゼ欠損症(MSD);ムコ脂質症II型(ML II)、ムコ脂質症III型(ML III)、ムコ脂質症IV型(ML IV);GMI-ガングリオシド蓄積症(GMI);神経セロイドリポフスチン症(NCL1);アルパーズ(Alpers)病;Barth症候群;β−酸化欠損症;カルニチン−アシル−カルニチン欠損症;カルニチン欠損症;クレアチン欠損症候群;補酵素Q10欠損症;複合体I欠損症、複合体II欠損症;複合体III欠損症;複合体V欠損症;COX欠損症;慢性進行性外眼筋麻痺症候群(CPEO);CPT 1欠損症;CPT II欠損症;グルタル酸尿症II型;カーンズ・セイヤー(Kearns-Sayre)症候群;乳酸アシドーシス;長鎖アシルCoAデヒドロゲナーゼ欠損症(LCHAD);リー(Leigh)病または症候群;致死的小児心筋症(LIC);Luft病;グルタル酸尿症II型;中鎖アシル-CoAデヒドロゲナーゼ欠損症(MCAD);ミオクロニー性てんかんおよび赤色ぼろ線維症(MERRF)症候群;ミトコンドリア細胞症;ミトコンドリア劣性運動失調症候群;ミトコンドリアDNA枯渇症候群;筋神経胃腸障害および脳症;ピアソン症候群;ピルビン酸デヒドロゲナーゼ欠損症;ピルビン酸カルボキシラーゼ欠損症;POLG突然変異;中鎖/単鎖3−ヒドロキシアシルCoAデヒドロゲナーゼ(M/SCHAD)欠損症;および、長鎖アシルCoAデヒドロゲナーゼ(VLCAD)欠損症から選ばれる、ミトコンドリア機能障害を伴う状態を治療するための、請求項15に記載の医薬組成物。
- 神経変性疾患が、パーキンソン病;アルツハイマー病;筋委縮性側索硬化症(ALS);ハンチントン病;虚血;発作;レビー小体を有する認知症;および、前頭側頭型認知症から選ばれる、請求項18記載の医薬組成物。
- 1つ以上の医薬的に許容し得る賦形剤を更に含む、請求項15に記載の医薬組成物。
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AU2001292670A1 (en) * | 2000-09-15 | 2002-03-26 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors |
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EP2938610A2 (en) * | 2012-12-28 | 2015-11-04 | The U.S.A. as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services | Inhibitors of the usp1/uaf1 deubiquitinase complex and uses thereof |
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