JP6887464B2 - 皺を改善する皮膚外用組成物、皺を改善する皮膚外用組成物の製造方法、及び化粧品 - Google Patents
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Description
本発明は、上記の問題を鑑みてなされたものである。
本出願は、化粧品を提供することを第2目的とする。前記皺を改善する皮膚外用組成物を活性成分として化粧品に適用することによって、幅広く適用できるようになる。
本発明の上記目的を実現するために、下記の技術案を採用する。
アノゲイスス属抽出物は、MMPsの活性の抑制、フリーラジカルの生成の抑制等の作用を有しており、これらの効果は、主にアノゲイスス属抽出物に含有された3,3′−O−ジメチルエラグ酸、エラグ酸等の有効成分により得られるものである。さらに、出願人は、以下のことを発見した。アノゲイスス属抽出物を使用する場合に、抽出物の有効成分の水溶性に問題があるために、製品への抽出物の添加が制限されており、活性成分が良い役割を果たすことができない。しかし、アノゲイスス属抽出物がザクロ属抽出物と一緒に使用される場合、アノゲイスス属抽出物の水溶性を向上させ、より広く適用することができ、効果がより優れるようになる。また、ヤシ科抽出物を組成物に添加した場合、アノゲイスス属抽出物との相乗効果を果たすことができ、コラーゲンの分解を防ぐことができる。さらに、アマドコロ抽出物を組成物に添加した場合、アノゲイスス属抽出物の抗フリーラジカル作用を強化する作用も有する。
前記アノゲイスス属抽出物は、アノゲイススレイオカルプス樹皮抽出物(ANOGEISSUS LEIOCARPUS BARK EXTRACT)であり、前記ザクロ属抽出物は、ザクロ果皮抽出物(PUNICA GRANATUM EXTRACT)であり、前記ヤシ科抽出物は、アサイヤシ果実抽出物(EUTERPE OLERACEA FRUIT EXTRACT)であることが好ましい。
アノゲイスス属の樹皮を粉砕し、スクリーニングしてから、第1溶媒を添加して浸漬し、浸漬された混合物に対して超音波抽出を行って、抽出液を得るステップと、
前記抽出液を濾過して濾液を得て、前記濾液に第2溶媒を添加し、攪拌しながら降温させ、結晶が析出してから沈殿物を得た後、乾燥して前記アノゲイスス属抽出物を得るステップを含むことが好ましい。
抽出温度、超音波パワー及び抽出時間は、超音波で溶媒から有効成分を抽出する際の溶出速度及び溶解度を考慮するとともに、有効成分の構造を損傷しないようにその温度での安定性を考慮して選択されたものである。
第2溶媒は、主に有効成分の溶解度及び降温結晶際の操作性を考慮して選択されたものである。
降温速度及び結晶の析出温度の制御は、主に抽出物の純度を確保するためである。
(1)アノゲイスス属抽出物、ザクロ属抽出物、ヤシ科抽出物、アマドコロ抽出物などの4つの成分の協働作用によって、活性酸素フリーラジカルの生成の抑制、MMPs活性の抑制、コラーゲン合成の向上等の3つの手段の相乗効果を実現し、多手段で肌の皺を改善でき、老化防止の効果は顕著になる。
(2)アノゲイスス属抽出物とザクロ属抽出物とを組み合わせて使用することによって、アノゲイスス属抽出物のエラグ酸の水溶性を向上させ、組成物の効果をよりよくなり、より広く適用できる。
(3)皺を改善する皮膚外用組成物を化粧品に適用することによって、多様な適用が実現可能である。
なお、本出願で使用されるアサイヤシ果実抽出物、ザクロ果皮抽出物は、広州瑞誉化工科技有限公司から購入されるものであり、アマドコロ抽出物は、莱博薬粧技術(上海)股▲フン▼有限公司から購入されるものであり、キヌガサタケ抽出物は、▲ミィアォ▼森股▲フン▼有限公司から購入されるものである。アノゲイスス属抽出物は、自分で製造されたもの以外、広州市奥雪化工有限公司から購入されるものである。
アノゲイスス属抽出物14重量部、ザクロ属抽出物11重量部、ヤシ科抽出物4重量部及びアマドコロ抽出物6重量部を用いて、皺を改善する皮膚外用組成物を製造して得る。
アノゲイススレイオカルプス樹皮抽出物18重量部、ザクロ果皮抽出物9重量部、アサイヤシ果実抽出物8重量部及びアマドコロ抽出物3重量部を用いて、皺を改善する皮膚外用組成物を製造して得る。
アノゲイススレイオカルプス樹皮抽出物23重量部、ザクロ果皮抽出物15重量部、アサイヤシ果実抽出物5重量部及びアマドコロ抽出物4重量部を用いて、皺を改善する皮膚外用組成物を製造して得る。
アノゲイススレイオカルプス樹皮抽出物18重量部、ザクロ果皮抽出物11重量部、アサイヤシ果実抽出物7重量部、アマドコロ抽出物5重量部及びキヌガサタケ抽出物1重量部を用いて、皺を改善する皮膚外用組成物を製造して得る。
アノゲイススレイオカルプス樹皮抽出物20重量部、ザクロ果皮抽出物14重量部、アサイヤシ果実抽出物6重量部、アマドコロ抽出物4重量部及びキヌガサタケ抽出物5重量部を用いて、皺を改善する皮膚外用組成物を製造して得る。
アノゲイススレイオカルプス樹皮抽出物19重量部、ザクロ果皮抽出物12重量部、アサイヤシ果実抽出物6重量部、アマドコロ抽出物4.5重量部及びキヌガサタケ抽出物3重量部を用いて、皺を改善する皮膚外用組成物を製造して得る。
アノゲイススレイオカルプス樹皮を粉砕してから、70メッシュのスクリーンを使用してスクリーニングし、次に1:10g/mLの固液比で第1溶媒であるジメチルスルホキシドを添加して1h浸漬するステップと、
浸漬された混合物に対して、70℃の抽出温度、250Wの超音波パワー、15minの抽出時間で、超音波抽出を行って抽出液を得るステップと、
抽出液を濾過して濾液を得て、濾液に第2溶媒であるメタノールを添加し、第2溶媒と濾液の体積比は1:2であるステップと、
2℃/sの降温速度で攪拌しながら降温させ、結晶の析出温度を20℃に制御し、結晶が析出してから濾過し、さらに遠心分離によって沈殿物を得た後、体積分率が40%であるエタノール水溶液で沈殿物を2回洗浄し、そして真空乾燥を行って、アノゲイススレイオカルプス樹皮抽出物を得るステップと、を含む。
アノゲイススレイオカルプス樹皮抽出物18.5重量部、ザクロ果皮抽出物13部、アサイヤシ果実抽出物6.5部、アマドコロ抽出物4部及びキヌガサタケ抽出物2重量部を用いて、皺を改善する皮膚外用組成物を製造して得る。
アノゲイススレイオカルプス樹皮抽出物の製造方法は、
アノゲイススレイオカルプス樹皮を粉砕してから、80メッシュのスクリーンを使用してスクリーニングし、次に1:12g/mLの固液比で第1溶媒であるジメチルスルホキシドを添加して2h浸漬するステップと、
浸漬された混合物に対して、80℃の抽出温度、300Wの超音波パワー、25minの抽出時間で、超音波抽出を行って抽出液を得るステップと、
抽出液を濾過して濾液を得て、濾液に第2溶媒である水を添加し、第2溶媒と濾液の体積比は1:4であるステップと、
3℃/sの降温速度で攪拌しながら降温させ、結晶の析出温度を15℃に制御し、結晶が析出してから濾過し、さらに遠心分離によって沈殿物を得た後、体積分率が40%であるエタノール水溶液で沈殿物を2回洗浄し、そして真空乾燥を行って、アノゲイススレイオカルプス樹皮抽出物を得るステップと、を含む。
組成物は、実施例3と同じであり、相違点は、アノゲイススレイオカルプス樹皮抽出物の製造方法である。
アノゲイススレイオカルプス樹皮抽出物の製造方法は、
アノゲイススレイオカルプス樹皮を洗浄、乾燥、粉砕してから、100メッシュのスクリーンを使用してスクリーニングし、次に1:15g/mLの固液比で第1溶媒であるN−メチルピロリドンを添加して2.5h浸漬するステップと、
浸漬された混合物に対して、90℃の抽出温度、450Wの超音波パワー、35minの抽出時間で、超音波抽出を行って抽出液を得るステップと、
抽出液を濾過して濾液を得て、濾液に第2溶媒であるエタノールを添加し、第2溶媒と濾液の体積比は1:5であるステップと、
4℃/sの降温速度で攪拌しながら降温させ、結晶の析出温度を10℃に制御し、結晶が析出してから濾過し、さらに遠心分離によって沈殿物を得た後、体積分率が40%であるエタノール水溶液で沈殿物を3回洗浄し、そして真空乾燥を行って、アノゲイススレイオカルプス樹皮抽出物を得るステップと、を含む。
組成物は、主に、アノゲイススレイオカルプス樹皮抽出物14重量部、アサイヤシ果実抽出物4重量部、アマドコロ抽出物6重量部を含む。
組成物は、主に、アノゲイススレイオカルプス樹皮抽出物14重量部、ザクロ果皮抽出物11重量部、アマドコロ抽出物6重量部を含む。
組成物は、主に、アノゲイススレイオカルプス樹皮抽出物14重量部、ザクロ果皮抽出物11重量部、アサイヤシ果実抽出物4重量部を含む。
測定1:活性酸素の生成の抑制
蛍光測定のために、96ウェルブラックプレートの各ウェルに100μLの人間角化細胞であるHaCat細胞株を添加し、2.0×105細胞/mLの密度で、37℃、5%の二酸化炭素のインキュベータにおいて24h培養する。次に、実施例1〜8及び比較例1〜3の組成物で細胞を処理する。組成物は、総重量の0.05%を占める。各実施例及び比較例の組成物とともに細胞を24h培養してから、HCSS(HEPES−緩衝液)で各ウェルを洗浄して残留な媒体を除去し、そして100μLの20μMのDCFH−DA(2',7'−ジクロロジヒドロフルオレセインジアセテート)のHCSS溶液を各ウェルに添加する。次に、細胞を、37℃で、5%の二酸化炭素のインキュベータで20min培養し、さらにHCSSで洗浄する。次に、実施例及び比較例と異なる組成物が含まれる100μLのHCSS溶液を各ウェルに添加し、UV−B光(30mJ/cm2)で各ウェルを照射する。3h後、フルオロメータ(Ex=485nm、Em=530nm)で各ウェルの蛍光強度を計測し、そして6回計測して平均値を取る。ここで、対照群は、実施例及び比較例の組成物で処理されていない群である。
計測の結果は、下記の表1に示す。
組成物の皺を改善する効果を評価するために、実験を通じて、組成物がMMP−1の作用を抑制できることを証明する。人間の繊維細胞(HS68細胞、ATCC(Rockville、 MD、米国)から購入)を7.5×104細胞/ウェルの密度でウェルプレートに入れ、10%のFBSが含まれるDMEMで24h培養してから、PBS(リン酸緩衝液)で洗浄し、さらに、その中に0.5mlのPBSを添加し、培養して得られた細胞に紫外線(UVB30mJ/cm2)を照射してMMP−1の作用を誘導する。また、無血清のDMEMに交換された後、実施例及び比較例の組成物(質量濃度1%)によって、得られたものに対して処理する。MMP−1のELISAキットで48h培養されて得た上澄液の量を計測する。紫外線で人間の真皮繊維芽細胞HS68を処理してMMP−1の作用を増加させてから、各サンプルのそれぞれで、得られたHS68細胞を処理して、MMP−1の作用が低減されたか否かを研究する。ここで、レチノイン酸(RA、5μM、MMP−1の抑制作用を有する)を陽性対照群とする。測定結果は、表2に示す。
24ウェル微量培養プレートで人間繊維芽細胞を培養し、これらの培養基を質量分率が1.5%である実施例及び比較例の組成物が含まれる培養基に変換する。3日間培養してから、各ウェルに10%ウシ胎児血清(FBS)が含まれる0.5mLのDMEM培養基を添加し、さらに10μCiのL[2,3,4,5−3H]−プロリンを添加する。24h後、培養基と細胞が含まれる培養プレートを傾斜させ、5%トリクロロ酢酸を添加する。次に、各サンプルをそれぞれ二つの試験管に注入し、対をなす試験管のうちの一つ試験管に1単位/μLのI型コラゲナーゼを添加し、37℃で90min培養し、他の一つは4℃で保存される。そして、各試験管にそれぞれ0.05mlの50%TCAを添加し、4℃で20min放置されてから、12000回転/分(rpm)で、各試験管のそれぞれに対して10minの遠心分離を行う。さらに、液体シンチレーションカウンタを用いて各組の上澄液と沈殿物を処理してCPM値を得てから、以下の数式1に基づいて実施例及び比較例のコラーゲン生合成値(RCB)を求める。得られた結果は、相対値であり、組成物が含まれない培養基である対照群の値を100に設定する。測定結果は、表3に示す。
実施例1〜8及び比較例1〜3による組成物を用いてアイクリームを製造し、当該アイクリームの主な成分(重量百分率)は、下記の表4に示す。
1)実験方法:年齢が30〜45歳、皮膚が健康で損傷がない女性ボランティアを40名、男性ボランティアを20名選択する。ボランティア全体を5名ずつ、12組にランダムに分けて、それぞれ、実施例1〜8及び比較例1〜3の組成物が含まれるアイクリーム(表4ご参照)を使用する。また、実施例及び比較例の組成物が含まれていないアイクリームの対照群を設ける。被験者は、朝と夕方に洗顔をしてから、適量(大豆の大きさほど)のアイクリームを目の周りに均一に塗りつけて、さらに4週間継続使用する。実験期間内に、被験者の実験部位には他の化粧品を塗ってはならない。
皮膚弾性測定装置Cutometer MPA580 本体、Reviscometer RV600弾性繊維組織検査プローブ(ドイツCK会社)
Claims (9)
- アノゲイスス属抽出物14〜23重量部、ザクロ属抽出物9〜15重量部、ヤシ科抽出物4〜8重量部、及びアマドコロ抽出物3〜6重量部を含み、
前記アノゲイスス属抽出物は、アノゲイススレイオカルプス樹皮抽出物であり、前記ザクロ属抽出物は、ザクロ果皮抽出物であり、前記ヤシ科抽出物は、アサイヤシ果実抽出物である
ことを特徴とする皺を改善する皮膚外用組成物。 - キヌガサタケ抽出物1〜5重量部を更に含むことを特徴とする請求項1に記載の皺を改善する皮膚外用組成物。
- 前記アノゲイススレイオカルプス樹皮抽出物18〜20重量部、前記ザクロ果皮抽出物11〜14重量部、前記アサイヤシ果実抽出物5〜7重量部、前記アマドコロ抽出物4〜5重量部、及びキヌガサタケ抽出物2〜4重量部を含むことを特徴とする請求項2に記載の皺を改善する皮膚外用組成物。
- アノゲイススレイオカルプス樹皮抽出物14〜23重量部、ザクロ果皮抽出物9〜15重量部、アサイヤシ果実抽出物4〜8重量部、及びアマドコロ抽出物3〜6重量部を混合させ、
前記アノゲイススレイオカルプス樹皮抽出物の製造方法は、
アノゲイススレイオカルプス樹皮を粉砕し、スクリーニングしてから、第1溶媒を添加して浸漬し、浸漬された混合物に対して超音波抽出を行って、抽出液を得るステップと、
前記抽出液を濾過して濾液を得て、前記濾液に第2溶媒を添加し、攪拌しながら降温させ、結晶が析出してから沈殿物を得た後、乾燥して前記アノゲイスス属抽出物を得るステップと、
を含むことを特徴とする皺を改善する皮膚外用組成物の製造方法。 - 前記スクリーニングに使用されるスクリーンのメッシュ数は、70〜100メッシュであり、前記第1溶媒は、ジメチルスルホキシド又はN−メチルピロリドンであり、浸漬時間は、1〜2.5hであり、固液比は、1:10〜15g/mLであることを特徴とする請求項4に記載の皺を改善する皮膚外用組成物の製造方法。
- 前記超音波抽出の抽出温度は、70〜90℃であり、超音波パワーは、250〜450Wであり、抽出時間は、15〜35minであることを特徴とする請求項4に記載の皺を改善する皮膚外用組成物の製造方法。
- 前記第2溶媒は、メタノール、エタノール及び水のうちの1つであり、前記第2溶媒と前記濾液との体積比は、1:2〜5であることを特徴とする請求項4に記載の皺を改善する皮膚外用組成物の製造方法。
- 前記降温速度は、2〜4℃/sであり、前記結晶の析出温度は、10〜20℃であることを特徴とする請求項4〜7のいずれか1項に記載の皺を改善する皮膚外用組成物の製造方法。
- 請求項1〜3のいずれか1項に記載の前記皺を改善する皮膚外用組成物を含むことを特徴とする化粧品。
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