JP6654702B2 - 経口製剤およびその製造方法 - Google Patents

Description

本開示は、医薬分野に属し、具体的には経口製剤およびその製造方法に関する。

ＫＸ２−３６１は、細胞増殖性疾患（特に、がん）の治療能を有する、Kinex Pharmaceuticals LLC（USA）によって開発された小型分子の化合物である。該化合物はチロシンキナーゼ阻害により細胞増殖性疾患を治療することができる（特許文献のＷＯ２００６／０７１９６０を参照のこと）。ＫＸ２−３６１は、化学名がＮ−（３−フルオロベンジル）−２−（５−（４−モルホリノフェニル）ピリジン−２−イル）アセトアミドであり、分子式がＣ_２４Ｈ_２４ＦＮ_３Ｏ_２であり、分子量が４０５.４６ｇ／モルであって、式１：
の構造式で示される。

ＫＸ２−３６１は遊離塩基の形態であり、その医薬としての塩はベンゼンスルホン酸塩、塩酸塩、リン酸塩等であってもよい。ＫＸ２−３６１は難水溶性であり、その医薬としての塩も望ましい水溶性を有しておらず、難水溶性である。薬物の活性分子が難水溶性である場合、経口投与は薬物の生物学的利用能が低く、その吸収能が乏しいなどの問題を引き起こすかもしれない。それを適切な注射剤として調製しなければならない場合、その溶解性を向上させて静脈内投与の要求に合致させる必要がある。従って、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩を患者に効果的に投与させるために、該化合物を可溶化する方法を見出すことが急務とされている。

難溶性の薬物の場合、当該分野にて一般に使用される可溶化の方法として、界面活性型の可溶化剤を添加すること、共溶媒を加えること、混合溶媒を用いること、可溶性の塩を調製すること、親水基を主薬物の分子構造に導入すること、固溶体を調製すること、シクロデキストリン包接複合体を調製すること、ブロック共重合体可溶化剤を添加すること、リポソームを調製すること、マイクロエマルジョンを調製すること、マイクロスフェアおよびミリマイクロカプセルを調製すること、および樹枝状高分子の可溶化剤を添加すること等が挙げられる（Sci-Tech Document：Wu Peiyingら、「不溶性薬物の可溶化の向上（Progress in solubilization of insoluble drugs）」、Chinese Traditional Patent Medicine、2005年9月、第27巻、第9号、1126-1129頁を参照のこと）。

種々のシクロデキストリンおよびその誘導体が、薬物のシクロデキストリン包接複合体を調製するように選択され得ることは周知である。既知のシクロデキストリンとして、３種の型、すなわち、α、βおよびγ型が挙げられ、それぞれ、６、７および８個のグルコースからなる。Ｘ線回折および核磁気共鳴の研究により、該シクロデキストリンは上部が広く、底部が狭い、両端が開口している、環状の中空バレルの３次元構造を有し、そこで封入物質の分子がそのバレルに入り、包接複合体を形成することが明らかにされた。典型的には、シクロデキストリンと薬物とによって形成される包接複合体において、薬物のシクロデキストリンに対する結合モル比は、一般に、１：１であるが、他の比率もよく知られている。最近になって、上記のシクロデキストリンを基礎とて、一連の誘導体が形成され、医薬的に適切な誘導体として、例えば、メチル化−β−シクロデキストリン（ＲＭ−β−ＣＤ）およびヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−β−ＣＤ）、マルトース−β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリン（ＨＰ−γ−ＣＤ）等が挙げられる。世界中で販売されているシクロデキストリンを含有する製剤のいくつかが、Sci-Tech document：Loftsson T、Brewster ME、「シクロデキストリンの薬学的応用：基礎科学および商品開発（Pharmaceutical applications of cyclodextrins： basic science and product development）」，J.Pharm.Pharmacol. 2010 Nov；62(11）：1607-21に列挙されており、例えば、アルプロスタジル注射剤および塩酸セフォチアム錠剤は、各々、α−シクロデキストリンを含有し；セファロスポリン錠剤および塩酸ベネキサートカプセル剤は、各々、β−シクロデキストリンを含有し；Ｔｃ−９９ｍ注射剤はγ−シクロデキストリンを含有し；ボリコナゾール注射剤およびメシル酸ジプラシドン注射剤は、各々、ＳＢＥ−β−ＣＤを含有し；ならびに、イトラコナゾール経口液剤および注射剤、およびマイトマイシン注射剤は、各々、ＨＰ−β−ＣＤを含有する。しかしながら、異なるシクロデキストリンおよびその誘導体が違う薬物に適しており、現在のところ、所定の化合物の特定の構造に基づいて、どのシクロデキストリンまたはその誘導体が可溶化能において適しているかを推測することは困難である。

上記の特許文献のＷＯ ２００６／０７１９６０は、経口投与、注射投与、直腸投与、肺投与、鼻腔内投与、一過性投与、変動放出投与等などの種々の方法で投与され得る、ＫＸ２−３６１等などの一連の特定の化合物を含む、一般式で示される化合物を開示する。該特許文献は、固形剤形、液体剤形等の異なる形態が異なる投与方法に使用され得ることをさらに開示する。該特許文献はまた、注射可能な液体の薬剤が、例えば、ゴマまたはピーナッツ油、および水性プロピレングリコールを含む、溶媒を用いて調製され得ること；あるいは注射可能な液体の薬剤が、ＫＸ２−３６１の水可溶化の医薬としての塩の水溶液を用いて調製され得ることを開示する。具体的な例では、分散相は油中グリセロール、液体ポリエチレングリコール、およびその混合液であってもよい。該特許文献はまた、環状または脂肪族のカプセル材料または溶媒を含む剤形（液体剤形など）を開示しており、その環状または脂肪族のカプセル材料または溶媒は、例えば、シクロデキストリン、ポリエーテルおよび多糖であり；具体的には好ましい例として、メチルセルロースまたはCAPTISOL（登録商標）（すなわち、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン）が挙げられる。すなわち、この特許文献は、難溶性の薬物についての分野にて一般的に使用されるいくつかの可溶化方法および可溶化試剤を開示する。

しかしながら、本開示の発明者らは、特許文献のＷＯ２００６／０７１９６０に開示される特定の可溶化方法および可溶化試剤が、ＫＸ２−３６１薬物の開発において望ましくなく、ＫＸ２−３６１を患者に効果的に投与し得る費用効率の高い薬物製剤としてさらに開発するのに適しないことを見出した。従って、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩について、より医薬的に適する可溶化方法および可溶化試剤を見出すことがなおも急務とされている。

上記の従来技術における課題を解決するために、本開示は経口製剤およびその製造方法を提供する。

具体的には、本開示は、
（１）ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンと、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩である活性成分とを含み、該ＫＸ２−３６１が次式１：
で示される、細胞増殖性疾患の治療用の経口製剤；

（２）活性成分の、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンに対するモル比が１：（４〜５９）である、（１）の経口製剤；

（３）活性成分がＫＸ２−３６１、ＫＸ２−３６１・モノフェニルスルホン酸塩、ＫＸ２−３６１・ジ塩酸塩、ＫＸ２−３６１・モノリン酸塩、および／またはＫＸ２−３６１・ジリン酸塩である、（１）の経口製剤；

（４）活性成分の少なくとも一部分がヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの少なくとも一部分により封入され、薬物包接複合体を形成する、（１）の経口製剤；

（５）医薬用賦形剤をさらに含む、（１）の経口製剤；

（６）医薬用賦形剤が充填剤、崩壊剤および潤滑剤からなる群より１または複数で選択される、（５）の経口製剤；

（７）充填剤が、微結晶セルロース、ラクトース、澱粉およびマンニトールからなる群より１または複数で選択され、その充填剤の量が経口製剤の総重量に基づき０％〜６９％（ｗ／ｗ）である、（６）の経口製剤；

（８）崩壊剤が、クロスカルメロースナトリウム、架橋ポビドン、およびカルボキシメチル澱粉ナトリウムからなる群より１または複数で選択され、その崩壊剤の含量が経口製剤の総重量に基づき０％〜５％（ｗ／ｗ）である、（６）の経口製剤；

（９）潤滑剤が、ステアリン酸マグネシウム、シリカゲル微粉末、タルク粉からなる群より１または複数で選択され、潤滑剤の含量が経口製剤の総重量に基づき０.５％（ｗ／ｗ）〜３％（ｗ／ｗ）である、（６）の経口製剤；

（１０）経口製剤が錠剤の形態であり、ここで錠剤の単回投与における活性成分の含量が０.５％（ｗ／ｗ）〜６.５％（ｗ／ｗ）である、（１）の経口製剤；

（１１）（１）〜（１０）のいずれか１つの経口製剤の製造方法であって、次の工程：
Ａ）ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを溶かし、そのｐＨ値を１〜２とした、第１溶液を供する工程；
Ｂ）ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩と、該第１溶液とを混合し、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩を溶かした、第２溶液を調製する工程；
Ｃ）該第２溶液を乾燥させて乾燥生成物を得る工程
を含む、製造方法；

（１２）第１溶液中の、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの濃度が１０％（ｗ／ｖ）〜５０％（ｗ／ｖ）である、（１１）の方法；

（１３）第２溶液中の、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩の濃度が、ＫＸ２−３６１で測定して、０.５ｍｇ／ｍｌ〜１５ｍｇ／ｍｌ、好ましくは０.５ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌである、（１１）の方法；

（１４）第２溶液中の、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩の、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンに対するモル比が１：（４〜５９）である、（１１）の方法；

（１５）さらに、Ｉ）工程Ｃ）の前であって、工程Ｂ）の後に第２溶液のｐＨ値を３〜７に調整することを含む、（１１）の方法；

（１６）さらに、Ｄ）工程Ｃ）の後に乾燥した生成物を錠剤化することを含む、（１１）の方法；

（１７）工程Ｄ）が、乾燥した生成物を充填剤、崩壊剤および潤滑剤からなる群より選択される１または複数の賦形剤と混合し、次に錠剤化を行うことを含む、（１６）の方法；

（１８）充填剤が、微結晶セルロース、ラクトース、澱粉およびマンニトールからなる群より１または複数で選択され、その充填剤の含量が、経口製剤の総重量に基づき、０％〜６９％（ｗ／ｗ）である、（１７）の方法；

（１９）崩壊剤が、クロスカルメロースナトリウム、架橋ポビドン（ＰＶＰＰ）およびカルボキシメチル澱粉ナトリウムからなる群より１または複数で選択され、その崩壊剤の含量が、経口製剤の総重量に基づき、０％〜５％（ｗ／ｗ）である、（１７）の方法；

（２０）潤滑剤が、ステアリン酸マグネシウム、シリカゲル微粉末およびタルク粉からなる群より１または複数で選択され、その潤滑剤の含量が、経口製剤の総重量に基づき、０.５％〜３％（ｗ／ｗ）である、（１７）の方法；

（２１）ＫＸ２−３６１の医薬としての塩が、ＫＸ２−３６１・モノフェニルスルホン酸塩、ＫＸ２−３６１・ジ塩酸塩、ＫＸ２−３６１・モノリン酸塩および／またはＫＸ２−３６１・ジリン酸塩である、（１１）の方法
を提供する。

本開示は、従来技術と比べて、次の利点およびプラス効果を有する：

１．本開示において、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンをＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩と混合することにより、包接複合体を形成し、難溶性の薬物であるＫＸ２−３６１の溶解性は大いに改善され、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンは、他のシクロデキストリンおよびその誘導的アジュバント、注射可能な界面活性剤溶液、注射可能な溶媒または複合溶媒と比べてより大きな可溶化能を示す。

２．本開示において、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンをＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩と混合することにより、包接複合体を形成し、難溶性のＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩は安定した液体製剤に処方され、次にそれから凍結乾燥させた製剤が調製され、それにより臨床的に患者に投与され得る、静脈内製剤（例えば、静脈内注射または点滴静注）、経口製剤（錠剤など）等を含む、種々の薬物製剤が調製され得る。

３．本開示はさらに包接プロセスを最適化し、静脈内製剤および経口製剤用の薬物負荷処方を最適化し、直に静脈内注射され得る薬物製剤および１０倍以内で希釈され得る点滴静注製剤、ならびに経口製剤を得、上記の製剤の各指標（薬物の再溶解性、配置安定性および溶解性を含む）を修飾し、薬物負荷の最大の最適化を達成する。これらの薬物製剤は安定性に優れ、安全性が高く、吸収性が良好であり、生物学的利用能が高く、費用が相対的に低い。

本開示の実施例７に係る処方Ｂ４の錠剤を経口投与した後の、血漿中濃度を時間の関数で示したグラフである。ここでは、横軸が時を時間の単位で表し、縦軸が雄のビーグル犬に５１ｍｇ／イヌ（ＫＸ２−３６１で測定）の用量で経口投与した後の、ＫＸ２−３６１の血漿中濃度をｎｇ／ｍｌの単位で表す。

本開示は、添付図面を参照して具体的な実施態様の記載を通してさらに説明されるが、これは本開示を限定するものではなく、当業者であれば、本開示の基本的理念に従って、本開示の範囲内にあって、ならびに本開示の基本的理念から逸脱しない、種々の修飾または改善を行うことができる。

本明細書で使用されるような「注射」なる語は、体内に注射され得る薬物より調製される滅菌溶液（真溶液、エマルジョンおよび懸濁液を含む）、および使用前にその滅菌溶液（真溶液、エマルジョンおよび懸濁液を含む）に処方され得る凍結乾燥粉末または濃縮溶液をいう。

本明細書で使用されるような「点滴静注」なる語は、注入管を通して、薬物を含む多量の液体を静脈を介して体内に注入する方法をいう。点滴静注はまた、「注入」、「点滴」、「静脈内点滴」および「ハンギング・ウォーター」としても知られる。

本明細書で使用されるような「静脈内製剤」なる語は、「静脈内注射」および「滴定静注」を包含するものとし、静脈内注射液および滴定静注液を処方するのに使用され得る「凍結乾燥粉末」を包含する。

本明細書で使用されるような「経口製剤」なる語は、経口投与される製剤の形態であって、その中の薬物が消化管にある血管に吸収されるものをいい、ここで該経口製剤は錠剤、顆粒、カプセル、経口液等を包含する。

本明細書で使用されるような「細胞増殖性疾患」なる語は、特許文献のＷＯ２００６／０７１９６０に記載の疾患を包含し、そこでは細胞が制御できずに増殖する状態、および／または細胞が異常に成長する状態をいい、がんまたは非がん性疾患を包含する。「がん」は、肺がん、乳がん、結腸がん、子宮がん、脳腫瘍、肝臓がん、膵臓がん、前立腺がん、悪性黒色腫、黒色腫以外の皮膚がんなどの充実性腫瘍、および小児白血病およびリンパ腫などの悪性血液腫瘍、多発性骨髄腫、ホジキン病、リンパ球のリンパ腫および原発性皮膚がん、ならびに急性リンパ芽腫、急性骨髄性または慢性骨髄性白血病などの急性および慢性白血病、血漿細胞新生物、リンパ系新生物およびＡＩＤＳ関連がんを包含する。非がん性疾患として、例えば、乾癬、上皮および皮膚疾患、脂肪腫、腺腫、毛および皮膚の血管腫、リンパ管腫、クモ状血管腫病変、奇形腫、腎腫、筋線維腫、骨形成腫瘍、他の異形成凝集および他の類似する疾患が挙げられる。

本明細書で使用されるような「包接複合体」なる語は、薬物の分子構造が完全にまたは部分的に別の物質の分子空洞に封入されることで形成される複合体の独特な形態をいう。包接複合体は薬物製剤の分野においてその研究が活発である。１９５０年代に、研究者は、包接複合体が薬物の特性に影響を及ぼすこと、例えば、包接複合体が薬物の溶解性および安定性を高め、体内での薬物の吸収、分布および作用発現時間に影響を及ぼすことを認識していた。

本明細書で使用されるような「活性成分」なる語は、細胞増殖性疾患に対して治療的効果を有する薬物分子、例えば、本明細書に記載のＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩をいう。

本明細書に記載のＫＸ２−３６１の医薬としての塩は、例えば、ＫＸ２−３６１のベンゼンスルホン酸塩、ＫＸ２−３６１の塩酸塩、ＫＸ２−３６１のリン酸塩等を包含する。本明細書に記載されるＫＸ２−３６１の医薬としての塩は、例えば、ＫＸ２−３６１・モノフェニルスルホン酸塩、ＫＸ２−３６１・ジ塩酸塩、ＫＸ２−３６１・モノリン酸塩および／またはＫＸ２−３６１・ジリン酸塩を含め、ＫＸ２−３６１のモノ塩またはジ塩の形態であってもよい。

本明細書で使用されるような「包接成分」なる語は、薬物の分子構造の全部または一部を、本明細書に記載されるヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンなどのその分子空洞に封入する物質をいう。

本明細書で使用されるような「ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン」なる語は、ベータ−シクロデキストリンと１,２−オキシランのエーテラートをいい；無水物で測定されるヒドロキシプロポキシ（−ＯＣＨ_２ＣＨＯＨＣＨ_３）の含量は１９.６％〜２６.３％である（中国薬局方 パートＩＶ, 2015版を参照のこと）。

Ｉ．医薬組成物
ＫＸ２−３６１およびその医薬としての塩は難水溶性の特性を有するため、本開示の発明者は、該化合物を臨床的に適用可能な薬物製剤に処方するために、それらを効果的に可溶化する方法を見出したいを思っている。上記されるように、薬物を可溶化する様々な方法が知られており、特許文献のＷＯ２００６／０７１９６０には、具体的にはＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩に対する種々の可溶化方法が列挙されている。しかしながら、本開示の発明者らは、これらの可溶化法がＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩に対して望ましくないことを見出した。現在、所定の化合物の特定の構造に従って、どの可溶化方法またはどの可溶化試剤がその化合物を可溶化するための最適な能力を有するかを推測することは困難である。従って、ＫＸ２−３６１およびその医薬としての塩について、本開示の発明者らは、異なる可溶化方法および異なる可溶化試剤について多くの研究およびスクリーニングの作業を行い、最終的にＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩が包接作用により効果的に可溶化され得ることを見出し、意外にも、最適な包接試剤がヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンであることを見出した。

従って、本開示は、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンと、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩である活性成分とを含む医薬組成物を提供する。ここで、ＫＸ２−３６１は、次式１：
で表される。

好ましくは、医薬組成物中の活性成分の、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンに対するモル比は１：（１〜２５０）、好ましくは１：（４〜５９）であり、例えば、１：（９〜５９）、または１：（４〜１７）である。

好ましくは、医薬組成物中の活性成分に含まれるＫＸ２−３６１のヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンに対する質量比は（０.１〜２９）：１００、より好ましくは（０.５〜５）：１００であり、例えば、（２〜２.５）：１００、（０.５〜１.５）：１００、または（０.５〜０.７）：１００等である。

好ましくは、活性成分はＫＸ２−３６１、ＫＸ２−３６１・モノフェニルスルホン酸塩、ＫＸ２−３６１・ジ塩酸塩、ＫＸ２−３６１・モノリン酸塩および／またはＫＸ２−３６１・ジリン酸塩であり、その中で好ましくはＫＸ２−３６１・モノフェニルスルホン酸塩である。本明細書で使用される場合、特記されない限り、「ＫＸ２−３６１・ベンゼンスルホン酸塩」は、分子量が５６３.６４である、ＫＸ２−３６１・モノフェニルスルホン酸塩をいう。

本開示の医薬組成物において、活性成分の少なくとも一部が、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの少なくとも一部分によって封入され、薬物の包接複合体を形成してもよい。薬物の包接複合体では、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンは、両端が開口している中空のバレル構造を形成することができ、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩はそのバレル構造内に完全にまたは部分的に封入され得る。

好ましくは、本開示の医薬組成物は医薬用賦形剤をさらに含む。

賦形剤は必要とされる剤形に従って選択され得る。例えば、剤形が静脈内製剤である場合、賦形剤は、マンニトール、ラクトース、デキストラン、キシリトール、ソルビトール、グルコース、および塩化ナトリウムからなる群より１または複数で選択されてもよい。加えて、剤形が経口製剤である場合、賦形剤は、充填剤、崩壊剤および潤滑剤からなる群より１または複数で選択されてもよい。充填剤は、微結晶セルロース、ラクトース、澱粉、マンニトール等からなる群より１または複数で選択されてもよく、崩壊剤は、クロスカルメロースナトリウム、架橋ポビドン、カルボキシメチル澱粉ナトリウム等からなる群より１または複数で選択されてもよく、潤滑剤は、ステアリン酸マグネシウム、シリカゲル微粉末およびタルク粉等からなる群より１または複数で選択されてもよい。

本開示は細胞増殖性疾患の治療用の薬物の調製における医薬組成物の使用も提供する。

ＩＩ．医薬包接複合体
もう一つ別の態様において、本開示は、活性成分と、その活性成分を封入する包接成分とを含む、薬物の包接複合体であって、包接成分がヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンであり、活性成分がＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩であり、そのＫＸ２−３６１が次式１：
で示される、薬物の包接複合体も提供する。

薬物の包接複合体において、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンは、両端が開口している中空のバレル構造を形成することができ、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩はそのバレル構造に完全にまたは部分的に封入され得る。

好ましくは、活性成分は、ＫＸ２−３６１、ＫＸ２−３６１・モノフェニルスルホン酸塩、ＫＸ２−３６１・ジ塩酸塩、ＫＸ２−３６１・モノリン酸塩および／またはＫＸ２−３６１・ジリン酸塩であり、その中で該成分はＫＸ２−３６１・モノフェニルスルホン酸塩であることが好ましい。本明細書で使用される場合、特記されない限り、「ＫＸ２−３６１・ベンゼンスルホン酸塩」は、分子量が５６３.６４のＫＸ２−３６１・モノフェニルスルホン酸塩をいう。

ＩＩＩ．静脈内製剤
もう一つ別の態様において、本開示は、細胞増殖性疾患の治療用の静脈内製剤であって、本開示の医薬組成物を含む製剤をも提供する。

静脈内製剤において、活性成分の、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンに対するモル比は、好ましくは１：（１〜２５０）、より好ましくは１：（９〜５９）であり、例えば、１：（９〜１５）、１：（１２〜５９）、１：（１６〜５３）、１：（３１〜５６）等である。

その静脈内製剤において、活性成分に含まれるＫＸ２−３６１のヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンに対する質量比は、好ましくは（０.１〜２９）：１００、より好ましくは（０.５〜２.５）：１００であり、例えば、（２〜２.５）：１００、（０.５〜２）：１００、（０.５〜１.５）：１００、または（０.５〜０.７）：１００等である。

本開示の静脈内製剤は、好ましくは、マンニトール、ラクトース、デキストラン、キシリトール、ソルビトール、グルコース、および塩化ナトリウムからなる群より１または複数で選択される賦形剤を含んでもよい。

静脈内製剤は、凍結乾燥させた粉末の形態であってもよく、あるいは液体製剤の形態であってもよい。静脈内製剤が液体製剤である場合、その液体製剤中のヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの濃度は１００ｍｇ／ｍｌ〜５００ｍｇ／ｍｌ、好ましくは２００ｍｇ／ｍｌ〜４００ｍｇ／ｍｌであり；ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩（ＫＸ２−３６１で計算）の濃度は０.５ｍｇ／ｍｌ〜５ｍｇ／ｍｌ、好ましくは１.４ｍｇ／ｍｌ〜４.３ｍｇ／ｍｌである。

凍結乾燥させた粉末は、注射用溶液で再溶解させて液体製剤を調製してもよい。当該分野にて公知のいずれの注射用溶液も注射のための溶液として使用されてもよく、例えば、該注射用溶液はセイライン緩衝液、グルコース水溶液、塩化ナトリウム水溶液、または乳酸リンゲル液であってもよい。セイライン緩衝液は、例えば、クエン酸緩衝液、酢酸−酢酸ナトリウム緩衝液、リン酸緩衝液等であってもよく；グルコース水溶液は、例えば、５％（ｗ／ｖ）グルコース水溶液であってもよく；塩化ナトリウム水溶液は、例えば、０.９％（ｗ／ｖ）塩化ナトリウム水溶液であってもよい。好ましくは、セイライン緩衝液は、ｐＨ値が４.０のクエン酸緩衝液などの、ｐＨ値が４.０のセイライン緩衝液である。

もう一つ別の態様において、本開示はまた、本開示の静脈内製剤の製造方法であって、以下の工程：
１）ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンが溶けており、ｐＨ値が１〜２の水溶液である、第１溶液を供する工程；
２）ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩を第１溶液と混合し、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩が溶解している第２溶液を調製する工程
を含む、方法を提供する。

ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの第１溶液中での濃度は、好ましくは、１０％（ｗ／ｖ）〜５０％（ｗ／ｖ）、より好ましくは２０％（ｗ／ｖ）〜４０％（ｗ／ｖ）、より好ましくは３０％（ｗ／ｖ）〜４０％（ｗ／ｖ）である。ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの濃度が１０％（ｗ／ｖ）未満であると、包接薬物の量が低すぎ；一方でヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの濃度が５０％（ｗ／ｖ）より大きいと、その場合には処方される溶液は、粘度が高すぎてフリーズドライさせることができなくなるであろう。該第１溶液は塩酸等などの強酸溶液であってもよいｐＨ調節剤を含有してもよい。

ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩の、ＫＸ２−３６１で測定した第２溶液中の濃度は、好ましくは、０.５ｍｇ／ｍｌ〜５ｍｇ／ｍｌ、より好ましくは１.４ｍｇ／ｍｌ〜４.３ｍｇ／ｍｌである。ＫＸ２−３６１の濃度が０.５ｍｇ／ｍｌ未満であると、包接薬物の量が少なすぎ；一方でＫＸ２−３６１の濃度が５ｍｇ／ｍｌより大きいと、その場合、その処方した凍結乾燥させた粉末を再溶解させた後に得られる再溶解溶液、および他の希釈媒体で形成される溶液は安定性が乏しく、薬物が沈殿しやすいであろう。ＫＸ２−３６１の医薬としての塩は、ＫＸ２−３６１・モノフェニルスルホン酸塩、ＫＸ２−３６１・ジ塩酸塩、ＫＸ２−３６１・モノリン酸塩および／またはＫＸ２−３６１・ジリン酸塩であってもよく、ここではＫＸ２−３６１・モノフェニルスルホン酸塩が好ましい。

第２溶液中の、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩の、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンに対するモル比は、好ましくは１：（１〜２５０）、より好ましくは１：（９〜５９）である。

第１溶液のｐＨ値に関して、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩は酸に対して安定性を欠くため、その第１溶液のｐＨ値が１よりも低い場合、そのことは酸分解性不純物を有意に増加させるであろうし；仮に第１溶液のｐＨ値が２よりも高いと、薬物の溶解速度が遅く、溶解時間を有意に増加させるであろう。すなわち、一方では製造に多大な不便性をもたらし、他方では酸分解性不純物の量を増大させる。第１溶液のｐＨ値は、より好ましくは、１.２〜２.０である。

本開示の方法の工程２）において、本開示の薬物包接複合体が得られる。

本開示の方法の工程２）において、混合は攪拌によるか、超音波による混合を包含する。

本開示の方法は、さらに好ましくは、工程３）：第２溶液をフリーズドライさせ、凍結乾燥させた粉末を調製する工程をさらに含む。フリーズドライ操作は当該分野における慣用的方法を用いて実施され得る。

さらに好ましくは、工程３）の前で、そして工程２）の後に、該方法は、工程ｉ）：第２溶液のｐＨ値を３〜７に、より好ましくは４〜６に調整する工程をさらに含む。ｐＨ値を調整するこの工程は、フリーズドライのプロセスをフォローアップする期間が長期に及ぶため、薬物を分解から、凍結乾燥させたサンプル中の酸残渣から防ぐのに効果的である。任意のｐＨ調整剤は、ＮａＯＨ水溶液等などのアルカリ性溶液を包含する。ｐＨ値を調整するこの工程において、該ｐＨ値が７よりも上に調整されるならば、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンは、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩に対して、封入作用が乏しく、従って、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩は沈殿しやすい。ｐＨ値を調整するこの工程において、該ｐＨ値が３未満に調整されるならば、ＫＸ２−３６１構造は、開環に起因して酸中で容易に分解し、分解不純物が有意に増加し、得られる製剤は不安定となろう。

さらに好ましくは、工程３）の前で、工程２）の後に、該方法は、工程ｉｉ）：（第２溶液を）滅菌濾過する工程をさらに含む。滅菌濾過のプロセスは当該分野にて周知であり、例えば、濾過のためにフィルター膜を用いてもよく、例えば、０.２２μｍフィルター膜を用いて微生物を物理的に捕捉する。

滅菌濾過の後に得られる溶液は少量の注射液に直に充填されてもよく、あるいはフリーズドライして凍結乾燥させた粉末を得てもよい。その凍結乾燥させた粉末を再び溶かし、注射投与用の注射液を得てもよく、あるいは凍結乾燥させた粉末を大量の希釈剤で希釈し、点滴投与用の点滴溶液を得てもよい。

さらに好ましくは、工程ｉｉ）の前で、かつ工程ｉ）の後に、該方法は、さらに、ピロゲンを除去する工程を含む。ピロゲンを除去する方法は当該分野にて周知であり、例えば、活性炭を添加してピロゲンを除去し、次に活性炭を濾去する。

本開示の特定の実施態様において、本開示の静脈内製剤を調製する方法は、次の連続工程：
ａ）適量の濃塩酸と、注射用水とを用い、ｐＨ値が１.２〜２.０の塩酸溶液を調製し； ｂ）処方量のヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを工程ａ）にて得られた塩酸溶液に添加し、攪拌して溶解させ、次に指定量のＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩を添加し、攪拌して、または超音波を用いて溶解させ；
ｃ）工程ｂ）にて得られた溶液のｐＨ値を水酸化ナトリウム水溶液で４.０〜６.０に調整し；
ｄ）活性炭を添加し、吸収させてピロゲンを除去し、その活性炭を濾去し；
ｅ）滅菌濾過に付し；
ｆ）フリーズドライさせる
工程を含む。

本開示の好ましい実施態様において、上記した工程ｆ）のフリーズドライのプロセスは、真空度および温度を制御する条件下で実施され、その温度制御のプロセスは、サンプルが乾燥するまで、例えば、−４０℃〜−５０℃で２〜５時間の断熱に供し；−２０℃まで５〜７時間にわたって加温に付し、５〜７時間の断熱に供し；０℃まで５〜７時間にわたって加温に付し、５〜７時間の断熱に供し；１０℃まで５〜７時間にわたって加温に付し、そして５〜８時間の断熱に供してもよい。

本開示のもう一つ別の好ましい実施態様において、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの濃度が１０％（ｗ／ｖ）である場合、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩の、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンに対するモル比は１：（３１〜５６）であり；ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの濃度が２０％（ｗ／ｖ）である場合、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩の、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンに対するモル比は１：（１６〜５３）であり；ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの濃度が３０％（ｗ／ｖ）である場合、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩の、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンに対するモル比は１：（１２〜５９）であり；ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの濃度が４０％（ｗ／ｖ）である場合、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩の、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンに対するモル比は１：（９〜１５）である。

静脈内製剤の液体製剤の調製において、該方法は、凍結乾燥させた粉末を注射用溶液で再溶解させる工程をさらに含む。当該分野にて公知のいずれの注射用溶液を用いてもよく、例えば、セイライン緩衝液、グルコース水溶液、塩化ナトリウム水溶液、または乳酸リンゲル液を用いてもよい。セイライン緩衝液は、例えば、クエン酸緩衝液、酢酸−酢酸ナトリウム緩衝液、リン酸緩衝液等であってもよく；グルコース水溶液は、例えば、５％（ｗ／ｖ）グルコース水溶液であってもよく；塩化ナトリウム水溶液は、例えば、０.９％（ｗ／ｖ）塩化ナトリウム水溶液であってもよい。好ましくは、セイライン緩衝液は、ｐＨ値が４.０のクエン酸緩衝液などの、ｐＨ値が４.０のセイライン緩衝液である。

本開示における静脈内製剤の研究において、包接プロセスは、薬物負荷処方剤を最適化し、最終的には、直に静脈内注射され得る処方剤および１０倍以内に希釈され得る点滴静注処方剤を得、上記の処方剤のすべての指標が修飾されるように最適化される。静脈内注射または静脈内点滴で投与した後、動的および静的シミュレーション試験によって薬物の血管中での挙動を検出することができ、本発明者らは沈殿現象のないことを見出した。従って、本開示は、注射により安全に投与され得る製剤処方を提供する。本開示はまた、凍結乾燥させた粉末に対して予備安定性試験を行い、その試験結果は、４０℃、２５℃の条件下で３ヶ月間放置した後で、該製剤が安定していることを示す。

ＩＶ．経口製剤
もう一つ別の態様におて、本開示はまた、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンと、次式Ｉ：
で示されるＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩の活性成分とを含む、細胞増殖性疾患の治療用の経口製剤を提供する。

経口製剤中の、活性成分の、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンに対するモル比は、好ましくは１：（１〜２５０）、より好ましくは１：（４〜５９）、さらに好ましくは１：（４〜１７）である。

その上、経口製剤中の、活性成分に含まれるＫＸ２−３６１のヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンに対する質量比は、ＫＸ２−３６１により測定して、好ましくは（０.１〜２９）：１００、より好ましくは（０.５〜５）：１００、さらに好ましくは（１.７〜５）：１００である。

好ましくは、活性成分はＫＸ２−３６１、ＫＸ２−３６１・モノフェニルスルホン酸塩、ＫＸ２−３６１・ジ塩酸塩、ＫＸ２−３６１・モノリン酸塩および／またはＫＸ２−３６１・ジリン酸塩であり、ここでＫＸ２−３６１・モノフェニルスルホン酸塩であることが好ましい。本明細書で使用される場合、特記されない限り、「ＫＸ２−３６１・ベンゼンスルホン酸塩」は、分子量が５６３.６４の、ＫＸ２−３６１・モノフェニルスルホン酸塩をいう。

本開示の経口製剤において、活性成分の少なくとも一部が、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの少なくとも一部分によって封入され、薬物の包接複合体を形成し得る。薬物の包接複合体では、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンは、両端が開口している中空のバレル構造を形成することができ、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩はそのバレル構造内に完全にまたは部分的に封入され得る。

好ましくは、本開示の経口製剤は、医薬用賦形剤をさらに含む。医薬用賦形剤は、充填剤、崩壊剤および潤滑剤からなる群より１または複数で選択されてもよい。

充填剤は、微結晶セルロース（ＭＣＣ）、ラクトース、澱粉、マンニトール等からなる群より１または複数で選択されてもよく、ここでラクトースが好ましい；充填剤の含量は、経口製剤の総重量に基づき、好ましくは０％〜６９％（ｗ／ｗ）である。崩壊剤はクロスカルメロースナトリウム（ＣＣ−Ｎａ）、架橋ポビドン（ＰＶＰＰ）、カルボキシメチル澱粉ナトリウム等からなる群より１または複数で選択されてもよく、ここでクロスカルメロースナトリウムが好ましい；崩壊剤の含量は、経口製剤の総重量に基づき、好ましくは０％〜５％（ｗ／ｗ）である。潤滑剤は、ステアリン酸マグネシウム、シリカゲル微粉末、タルク粉等からなる群より１または複数で選択されてもよく、ここでステアリン酸マグネシウムが好ましい；潤滑剤の含量は、経口製剤の総重量に基づき、０.５％〜３％（ｗ／ｗ）である。

好ましくは、経口製剤は錠剤の形態であり、ここで単回錠剤における活性成分の含量は０.５％〜６.５％（ｗ／ｗ）である。

本開示の特定の実施態様において、本開示の錠剤は：約１％（ｗ／ｗ）のＫＸ２−３６１・モノフェニルスルホン酸塩、２８.６％（ｗ／ｗ）より多く、２９％（ｗ／ｗ）未満のヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、約６４％（ｗ／ｗ）のラクトース、約５％（ｗ／ｗ）のクロスカルメロースナトリウム、約１％（ｗ／ｗ）のステアリン酸マグネシウム、ならびに０より多く、０.４％（ｗ／ｗ）未満のＮａＣｌを含有する。

もう一つ別の態様において、本開示は、本開示の経口製剤の製造方法であって、次の工程：
Ａ）ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンが溶け、ｐＨ値が１〜２である、第１溶液を供し；
Ｂ）ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩を、該第１溶液と混合してＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩が溶けている第２溶液を調製し；
Ｃ）該第２溶液を乾燥させて乾燥生成物を得る
工程を含む、製造方法も提供する。

第１溶液中の、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの濃度は、好ましくは、１０％（ｗ／ｖ）〜５０％（ｗ／ｖ）、より好ましくは２０％（ｗ／ｖ）〜４０％（ｗ／ｖ）、さらに好ましくは３０％（ｗ／ｖ）〜４０％（ｗ／ｖ）である。ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの濃度が１０％（ｗ／ｖ）未満であると、包接薬物の量が少なすぎ、５０％（ｗ／ｖ）よりも大きいと、その処方される溶液は高すぎて乾燥（例えば、凍結乾燥）させることができない粘度を有する。該第１溶液は塩酸などの強酸液であってもよいｐＨ調節剤を含有してもよい。

好ましくは、第２溶液中の、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩（ＫＸ２−３６１として測定される）の濃度は０.５ｍｇ／ｍｌ〜１５ｍｇ／ｍｌで、好ましくは３.６ｍｇ／ｍｌ〜１５ｍｇ／ｍｌ、より好ましくは５ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌである。ＫＸ２−３６１の濃度が０.５ｍｇ／ｍｌ未満であると、包接薬物の量が少なすぎ；それが１５ｍｇ／ｍｌより大きいと、その包接系は安定性に乏しく、薬物が沈殿しやすい。ＫＸ２−３６１の医薬としての塩は、ＫＸ２−３６１・モノフェニルスルホン酸塩、ＫＸ２−３６１・ジ塩酸塩、ＫＸ２−３６１・モノリン酸塩および／またはＫＸ２−３６１・ジリン酸塩であってもよく、ここではＫＸ２−３６１・モノフェニルスルホン酸塩が好ましい。

第２溶液中の、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩の、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンに対するモル比は、好ましくは１：（１〜２５０）、より好ましくは１：（９〜５９）、さらに好ましくは１：（４〜１７）である。

第１溶液のｐＨ値に関して、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩は酸に対して安定性を欠くため、その第１溶液のｐＨ値が１よりも低い場合、そのことは酸分解性不純物を有意に増加させるであろうし；仮に第１溶液のｐＨ値が２よりも高いと、薬物は溶解速度が遅く、溶解時間を有意に増加させるであろう。すなわち、一方では製造に多大な不便さをもたらし、他方では酸分解性不純物の量を増大させる。第１溶液のｐＨ値は、より好ましくは、１.２〜２.０である。

本開示の方法の工程Ｂ）において、混合は攪拌によるか、超音波による混合を包含する。

本開示の方法の工程Ｃ）において、乾燥操作の例として、フリーズドライ、噴霧ドライ等が挙げられる。フリーズドライ操作および噴霧ドライ操作は当該分野における慣用的方法を用いて実施され得る。

さらに好ましくは、工程Ｃ）の前で、工程Ｂ）の後に、該方法は、工程Ｉ）：第２溶液のｐＨ値を３〜７、より好ましくは４〜６に調整することをさらに含む。ｐＨ値を調整するこの工程は、フリーズドライのプロセスをフォローアップする期間が長期に及ぶため、薬物を分解から、凍結乾燥させたサンプル中の酸残渣から防ぐのに効果的である。任意のｐＨ調整剤は、ＮａＯＨ水溶液等などのアルカリ性溶液を包含する。ｐＨ値を調整するこの工程において、該ｐＨ値が７よりも上に調整されるならば、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンは、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩に対して、封入作用は乏しく、従って、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩は沈殿しやすい。仮に該ｐＨ値が３未満に調整されるならば、ＫＸ２−３６１構造は、開環に起因して酸中で容易に分解し、分解不純物が有意に増加し、得られる製剤は不安定であろう。

その上に好ましくは、工程Ｃ）の前であって、工程Ｂ）の後に、該方法は、工程ＩＩＩ）：濾過操作をさらに含む。濾過するプロセスは、当該分野にて周知であり、例えば、０.８μｍのフィルター膜などのフィルター膜を用いて濾過し、透明な溶液を得る。

好ましくは、工程Ｃ）の後で、該方法は、工程Ｄ）：乾燥した生成物を錠剤化することをさらに含む。具体的には、工程Ｄは、乾燥した生成物を、充填剤、崩壊剤および潤滑剤からなる群より１または複数で選択される賦形剤と混合し、次に錠剤化操作を行うことをさらに含む。

充填剤は、微結晶セルロース（ＭＣＣ）、ラクトース、澱粉、マンニトール等からなる群より１または複数で選択されてもよく、ここではラクトースが好ましく；該充填剤の含量は、好ましくは、経口製剤の総重量に基づき、０％〜６９％（ｗ／ｗ）である。崩壊剤は、クロスカルメロースナトリウム（ＣＣ−Ｎａ）、架橋ポビドン（ＰＶＰＰ）、カルボキシメチル澱粉ナトリウム等からなる群より１または複数で選択されてもよく、ここではクロスカルメロースナトリウムが好ましく；該崩壊剤の含量は、好ましくは、経口製剤の総重量に基づき、０％〜５％（ｗ／ｗ）である。潤滑剤は、ステアリン酸マグネシウム、シリカゲル微粉末、タルク粉等からなる群より１または複数で選択されてもよく、ここではステアリン酸マグネシウムが好ましく；該潤滑剤の含量は、経口製剤の総重量に基づき、０.５％〜３％（ｗ／ｗ）である。

本開示の特定の実施態様において、本開示に係る経口製剤の製造方法は、次の連続工程：
（ｉ）適量の濃塩酸および注射用水を用い、ｐＨ値が１.２〜２.０の塩酸溶液を調製し；
（ｉｉ）処方された量のヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを、工程（ｉ）にて得られた塩酸溶液に添加し、攪拌して溶解させ；次に処方された量のＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩を添加し、攪拌して、または超音波を用いて溶解させ；
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で得られた溶液のｐＨ値を水酸化ナトリウム水溶液で４.０〜６.０に調整し；
（ｉｖ）濾過し；
（ｖ）フリーズドライ操作に付し；
（ｖｉ）工程（ｖ）で得られた凍結乾燥させた粉末をシーブに付し；
（ｖｉｉ）工程（ｖｉ）で得られたシーブに付した物質を、充填剤、崩壊剤および潤滑剤からなる群より１または複数で選択される賦形剤と混合し；
（ｖｉｉｉ）錠剤化する
工程を含む。

本開示の好ましい実施態様として、上記した工程（ｖ）のフリーズドライのプロセスは、真空度および温度を制御する条件下で実施され、その温度制御のプロセスは、サンプルが乾燥するまで、例えば、−４０℃〜−５０℃で２〜５時間の断熱に供し；−２０℃まで５〜７時間にわたって加温に付し、５〜７時間の断熱に供し；０℃まで５〜７時間にわたって加温に付し、５〜７時間の断熱に供し；１０℃まで５〜７時間にわたって加温に付し、そして５〜８時間の断熱に供してもよい。

本開示の経口製剤の製造方法のもう一つ別の実施態様において、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの濃度が１０％（ｗ／ｖ）〜３０％（ｗ／ｖ）である場合、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩（ＫＸ２−３６１として測定）の濃度は０.５ｍｇ／ｍｌ〜６ｍｇ／ｍｌであり；ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの濃度が４０％（ｗ／ｖ）〜５０％（ｗ／ｖ）である場合、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩（ＫＸ２−３６１として測定）の濃度は０.５ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌである。

本開示の経口製剤は、本開示の凍結乾燥させた粉末を基礎に、さらに開発された錠剤である。本開示において、その包接プロセスを最適化し、薬物負荷の最大の最適化が、薬物負荷処方剤について、評価指標としての配置安定性、関連物質および包接溶液の溶解性で達成される。最終的に、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩（活性成分）をｐＨ＝１〜２の溶液中で封入し、次にそのｐＨ値を調整して戻すプロセスが使用され、フリーズドライ技法を用いて凍結乾燥させた粉末を調製し、ＫＸ２−３６１で測定される活性成分の包接濃度が１０ｍｇ／ｍｌまでとなるようにする。本開示の経口錠剤は高生物学的利用能を達成する。加えて、すべてが修飾される、錠剤の溶解性および関連する物質などの重要な指標も試験する。

実施例
特記されない限り、各試剤のパーセント濃度（％）は、その試剤の重量（ｇ）／容量（１００ｍＬ）のパーセント濃度（％（ｗ／ｖ））をいい、例えば、「ＨＰ−β−ＣＤの濃度が４０％である」とは、「ＨＰ−β−ＣＤの濃度が４０％（ｗ／ｖ）である」ことを意味する。

以下の実施例においてエタノールに言及する場合、特記されない限り、それは９５％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液をいう。

略語は次のとおりである：
ＫＸ２−３６１・ＢＳＡ：ＫＸ２−３６１・ベンゼンスルホン酸塩
ＨＰ−β−ＣＤ： ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン
ＳＢＥ−β−ＣＤ：スルホブチル エーテル−β−シクロデキストリン
ＡＰＩ：医薬品有効成分（以下、特記されない限り、それはＫＸ２−３６１・ＢＳＡをいう）
ＰＴＦＥ：ポリテトラフルオロエチレン

以下の実施例において使用される材料および装置の入手情報は次のとおりである：

実施例１：
凍結乾燥させたＫＸ２−３６１・ベンゼンスルホン酸塩剤および再溶解させた注射用溶液の調製および評価（ＨＰ−β−ＣＤの濃度は３０％であり、薬物負荷は高かった）
次の組成の処方を調製した：

注記：ＨＰ−β−ＣＤの分子量は１４３１〜１８０６である。従って、該分子量の上限および下限を、各々、考慮してそのモル比を計算した。

上記の処方は、次の工程を連続して行うことで調製された：
１）１.８ｍＬの濃塩酸を２００ｍＬ容量のフラスコに入れ、蒸留水で２００ｍＬに希釈し、ｐＨが約１.２の塩酸液を得た（濃度は０.１モル／Ｌ、以下同じ）。
２）ＨＰ−β−ＣＤを上記した処方量に合わせて秤量し、各々、３本の５０ｍＬ容量のフラスコに添加した。１）で得られた溶液を加え、超音波（超音波周波数は５９ＫＨｚである）で溶解させ、上記した塩酸溶液で約４６ｍＬに希釈した。
３）ＡＰＩ（ＫＸ２−３６１・ベンゼンスルホン酸塩）を上記した処方量に合わせて秤量し、上記した各々のＨＰ−β−ＣＤ溶液に添加し、超音波（超音波周波数は５９ＫＨｚである）で溶かした。
４）３）で得られた溶液のｐＨを、各々、５Ｎ ＮａＯＨ水溶液および０.１Ｎ ＮａＯＨ水溶液で約６.０（±０.０５）に調整した。該溶液を蒸留水で５０ｍＬに希釈した。
５）３つの処方溶液を、各々、０.４５μｍのポリエーテルスルホン製のフィルター膜で濾過し、１０ｍＬのペニシリンボトルに分配し（１ボトル当たり２ｍＬを分配し）、次にフリーズドライに付した。

フリーズドライ曲線（freeze-drying curve）は次のとおりであった：

フリーズドライ操作に付した後のサンプルの状態：
サンプルは良好な成形性を有した。凍結乾燥させたサンプルはすべて淡黄色の粘りのない固体であった。

上記した３つの処方（処方Ａ１、Ａ２、Ａ３）の凍結乾燥させたサンプルを再溶解させ、その再溶解状態、不溶性粒子、および希釈安定性を評価した。

１． 水およびセイライン緩衝液での再溶解
再溶解方法：２ｍＬの次の再溶解媒体を凍結乾燥させた各サンプルの各ペニシリンボトルに添加し、次に上下を３０回反転させ、仮に溶けていなければ、溶けるまで震盪させた。セイライン緩衝液を添加してから計時を開始し、２つの反復を同時に行った。

緩衝塩の組成は次のとおりであった：

注記：ｃは処方された溶質の緩衝塩に対するモル濃度を表す。

再溶解時間は次のとおりであった：

注記：各処方の再溶解時間は２回の反復の平均であった。

不溶性粒子（検出方法は、Light Blockage Method, First Method, Insoluble Particle Inspection Method, 0903, Chinese Pharmacopoeia Part IV, 2015 Editionを参照のこと、以下同じ）は次のとおりであった：

注記：不溶性粒子について、結果は２つのサンプルを検出することで得られた結果の平均であり、不溶性粒子を、各々、０時間および４時間後に測定した。

上記の結果から、３０％ＨＰ−β−ＣＤを含有するサンプルをｐＨ値の異なる緩衝塩に再溶解させた場合、その再溶解の時間は、純水に再溶解させた時の約４分から、約２.５分に減少した。３０％ＨＰ−β−ＣＤを含有するサンプルをｐＨ＝４.０の緩衝塩に再溶解させた場合、その不溶性粒子の状態は良好であって、処方Ａ２を各３種の緩衝液に再溶解させた場合もその不溶性粒子の状態は良好であった。

加えて、中国薬局方基準によれば、１００ｍＬ未満のいずれの容器においても＞１０μｍの不溶性粒子の数は６０００個を越えてはならず、＞２５μｍの不溶性粒子の数は６００個を越えてはいけない。上記した表に示される不溶性粒子の試験結果は１ｍＬの溶液の検出値であるため、処方Ａ１〜Ａ３はすべて、容量が増幅された医薬製剤の製品にさらに調製されるのに適し（その有効性および安全性に応じて薬物の仕様を考慮し）、単回用量をより大きくし、中国薬局方基準を満たすことができる。

２． ５％グルコース水溶液および０.９％塩化ナトリウム水溶液での再溶解
再溶解方法：２ｍＬの次の再溶解媒体を凍結乾燥させた各サンプルの各ペニシリンボトルに添加し、次に上下を３０回反転させ、仮に溶けていなければ、溶けるまで震盪させた。再溶解媒体を添加してから計時を開始し、２つの反復を同時に行った。

再溶解時間は次のとおりであった：

注記：各処方の再溶解時間は２回の反復の平均であった。

不溶性粒子は次のとおりであった：

注記：不溶性粒子について、結果は２つのサンプルを検出することで得られたその平均であり、不溶性粒子を、各々、０時間および４時間後に測定した

上記の結果は、ｐＨ４.０のセイライン緩衝液で再溶解させた効果が、５％グルコース水溶液で再溶解および０.９％塩化ナトリウム水溶液で再溶解させた効果よりも優れていることを示す。

実施例２：凍結乾燥させたＫＸ２−３６１・ベンゼンスルホン酸塩剤および注射用の再溶解溶液（ＨＰ−β−ＣＤの濃度は３０％であり、薬物負荷は低かった）

以下の組成の処方を調製した：

注記：ＨＰ−β−ＣＤの分子量は１４３１〜１８０６であった。従って、該分子量の上限および下限を、各々、考慮してそのモル比を計算した。

上記の処方は、次の工程を連続して行うことで調製された：
１）１.８ｍＬの濃塩酸を２００ｍＬ容量のフラスコに入れ、蒸留水で２００ｍＬに希釈し、ｐＨ値が約１.２の塩酸液を得た。
２）ＨＰ−β−ＣＤを処方量に合わせて秤量し、各々、３本の２５ｍＬ容量のフラスコに添加した。１）で得られた溶液を加え、超音波（超音波周波数は５９ＫＨｚである）で溶解させ、塩酸溶液で約２３ｍＬに希釈した。
３）ＡＰＩを上記した処方量に合わせて秤量し、上記した各々のＨＰ−β−ＣＤ溶液に添加した。処方Ａ６では、５０.７ｍｇのクエン酸を添加し、超音波（超音波周波数は５９ＫＨｚである）で溶かした。
４）３）で得られた溶液のｐＨを、各々、５Ｎ ＮａＯＨ水溶液および０.１Ｎ ＮａＯＨ水溶液で上記の表に示されるｐＨ値に調整した。該溶液を蒸留水で２５ｍＬに希釈した。
５）３つの処方溶液を、０.４５μｍのポリエーテルスルホン製のフィルター膜で濾過し、１０ｍＬのペニシリンボトルに（１ボトル当たり２ｍＬずつを）分配し、次にフリーズドライに付した。

フリーズドライに付した後のサンプル状態：サンプルの成形性は良好であった。凍結乾燥させたサンプルはすべてフワフワした雪のような固体であった。

上記した３つの処方（処方Ａ４、Ａ５、Ａ６）の凍結乾燥させたサンプルを再び溶かし、５％グルコース水溶液および生理食塩水でのその再溶解状態および不溶性の粒子の状態を評価した。

再溶解方法：次の２ｍＬの再溶解媒体を凍結乾燥させた各サンプルの各ペニシリンボトルに添加し、次に上下を３０回反転させ、仮に溶けていなければ、溶けるまで震盪させた。再溶解媒体を添加してから計時を開始し、２つのサンプルを繰り返し測定した。再溶解時間は次のように示された：

注記：各処方について、再溶解時間は２つのサンプルの検出結果の平均であった。

不溶性粒子は次のように示された：

注記：不溶性粒子について、結果は、２つのサンプルを、各々、検出することにより得られた結果の平均であった。

上記した３つの処方（処方Ａ４、Ａ５、Ａ６）の凍結乾燥させたサンプルを次の表に示されるような再溶解媒体で再溶解させ、再溶解させた薬物の溶液を特定の割合でその同じ媒体で希釈させ、その希釈比（再溶解させた溶液の容量：希釈媒体の容量）は、各々、１：２、１：５、１：１０であった。不溶性粒子が、０および４時間で、希釈された溶液で検出された。希釈された不溶性粒子は次のように示された：

注記：不溶性粒子について、結果は、２つのサンプルにおいて、その不溶性粒子を、各々、０時間および４時間後に、測定して検出することにより得られた結果の平均であった。

上記したサンプルの希釈から、ＡＰＩが４時間で沈殿しなかったことが分かる。３つの処方はすべて、フィルター処置を付加することにより希釈された後に薬物溶液として静脈内に滴下される可能性がある。

３０％濃度のＨＰ−β−ＣＤを用いる高薬物負荷処方Ａ２および低薬物負荷処方Ａ５を次の試験に選択した。

試験例１：８日間静置した後の不溶性粒子および浸透圧の測定
実施例１および実施例２に記載の方法に従って、処方Ａ２および処方Ａ５を、２００ｍＬのバッチにて新たに調製した。処方Ａ２（３０％ＨＰ−β−ＣＤ＋６ｍｇ／ｍＬのＡＰＩ）および処方Ａ５（３０％ＨＰ−β−ＣＤ＋２ｍｇ／ｍＬのＡＰＩ）の凍結乾燥させたサンプルを４℃で８日間貯蔵した後、不溶性粒子が検出され、結果は次の通りである：

注記：ｎ＝１０は、各処方について、１０個のサンプルが検出され、不溶性粒子の結果が、各々、１０個のサンプルを検出することにより得られた結果の平均であったことを示す。

上記の表の結果は、２つの処方の凍結乾燥させた粉末を４℃で８日間貯蔵した後、不溶性粒子が再溶解の後にまだ修飾されることを示す。

等張液の腎機能および心肺機能の弱い年配および幼児の患者への注入は、電解質の滞留、および浮腫等などの重度の合併症を容易に惹起する可能性があるため、等張液の注入は、小児科では「危険な注入」と言われている。水分は、体表面で蒸発し、呼気などの形態で連続的に喪失しているため、一般に、低張性注入ゾーンの安全性の範囲は相対的に広く、低張性注入容量の安全性の限度は相対的に大きく、低張性注入液の使用範囲は相対的に広い。従って、低張溶液を用いて希釈安定性試験および浸透圧測定を行った。処方Ａ５（３０％ＨＰ−β−ＣＤ＋２ｍｇ／ｍＬのＡＰＩ）の凍結乾燥させたサンプルを取り、各ペニシリンボトルにて２ｍＬの蒸留水で再溶解させた後に、低張溶液（０.４５％塩化ナトリウム水溶液＋２.５％グルコース水溶液）を用いて異なる割合で希釈した。不溶性粒子および浸透圧を測定した。

結果は次のとおりである：

注記：不溶性粒子について、結果は、２つのサンプルにて、その不溶性粒子を、各々、０時間および４時間後に、測定して検出することにより得られた結果の平均であった。

浸透圧測定の結果は次のとおりである：

注記：浸透圧の測定について、結果は、２つのサンプルを検出することにより得られた結果の平均であった。

等張液の浸透圧は、一般に、２８０〜３２０ｍＯｓｍであり、溶液の浸透圧は低く、その不溶性粒子の試験結果は、処方Ａ５を異なる割合で希釈した後に良くなっていることが分かる。

試験例２：３ヶ月の安定性実験
処方Ａ２およびＡ５の凍結乾燥させたサンプルを安定性実験のために２５℃および４０℃で３ヶ月間恒温槽に入れた。各条件について、２個のサンプルを取り、ＡＰＩ含量％、関連物質（すなわち、ＡＰＩの分解によって得られる物質）をＨＰＬＣで調査し、不溶性粒子を調べた。表１および表２を参照のこと。

含量および関連物質についてのＨＰＬＣ測定条件は次のとおりであった：

表１：凍結乾燥された製剤の３ヶ月にわたる安定性実験−含量％および不純物総合％

上記した表から分かるように、２つの凍結乾燥させた粉末の含量は３ヶ月間変わらないままであり、不純物の特性をよれば、３種の新たに分解した不純物が現れ、不純物の総合量はわずかに増加したが、すべて許容される範囲内であった。

２５℃および４０℃に３ヶ月の範囲内で入れられた処方Ａ２および処方Ａ５について表２に示される時点でサンプルを取り、以下の表に詳細に示されるように、不溶性粒子を検出した。

表２：凍結乾燥させた製剤の３ヶ月にわたる不溶性粒子についての安定性調査

注記：ｎ＝２は、各処方について、２個のサンプルが検出され、不溶性粒子の結果が、各々、２個のサンプルを検出することにより得られる結果の平均であることを表す。

両製剤を、各々、２５℃および４０℃に３ヶ月間置き、不溶性粒子の試験結果が良好であることが分かった。

試験例３：動的吸着試験
処方Ａ２および処方Ａ５の凍結乾燥させたサンプルを注射用水を添加することで再溶解させ、処方Ａ２を６ｍｇ／ｍＬの薬物濃度の溶液として処方し、処方Ａ５を２ｍｇ／ｍＬの薬物濃度の溶液として処方し、次に血管への注射の状態をシミュレートし、生理学的条件下での物理的安定性を調査し、静脈内投与後の沈殿の可能性を推測した。

１．試験操作：
蠕動ポンプ（Longerpump, 14#）を用い、内径が１.６ｍｍの可撓管を５ｍｌ／分の流速で通して、５％ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）を製造した。可撓管の端から３０ｃｍ離れた所に針を挿入することにより該可撓管に再溶解させた薬物溶液を注入し、サンプルの注入速度をシリンジポンプにより調節し、ここでその注入速度は０.２〜５ｍｌ／分であった（表３を参照のこと）。薬物溶液および５％ＢＳＡ溶液を特定の速度で混合した後、可撓管の端部で流出液を受けた：
（１）４ｍｌの流出液を取り、ＵＶ分光光度計で５４０ｎｍの吸光度を測定し、沈殿物の存在を検出し、ここでブランク調製物（３０％ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン溶液）と５％ＢＳＡとの混合溶液を対照に供する；
（２）１ｍｌの流出液を取り、そこに９ｍｌのアセトニトリルを添加し、５分間回し、０.４５μｍのナイロン製フィルター膜で濾過し、その後の濾液をＨＰＬＣ検出のための１００％濃度のサンプルとして利用した。

４ｍｌの流出液を取り、０.４５μｍのＰＥＳフィルター膜で濾過し、その後で１ｍｌの流出液を取り、そこに９ｍｌのアセトニトリルを添加し、５分間回し、０.４５μｍのナイロン膜で濾過し、次にその後で１ｍｌの濾液をＨＰＬＣ検出について試験されるサンプルとして利用した。試験されるサンプルの１００％濃度のサンプルに対する割合が、サンプル中の沈殿していないＡＰＩの割合である。

２．試験結果：
表３：動的沈殿試験結果（ｎ＝２）

注記：ｎ＝２は、各処方について、２個のサンプルが検出され、試験結果が２個のサンプルを、各々、検出することで得られた結果の平均であったことを表す。

沈殿物の検出および薬物含量の結果を上記の表に示す。その結果から、各群のＵＶ吸光度は極めて小さいことが分かり、それは５％ＢＳＡを異なる速度で注射した後に３つの製剤で生じる有意な沈殿現象のないことを示す。サンプルの流出液を濾過した後、薬物はほとんどが濾液中に保持され、それは薬物が沈殿していないことを示す。

この試験の結果から、該試験にて調べた処方Ａ２および処方Ａ５はシミュレートした血漿と相溶性が良好であり、静脈内点滴またはボーラスに付した後に沈殿する危険が小さいことが分かる。

試験例４：静的吸着試験
静的吸着実験は動的吸着実験の成果を全体としてさらに実証するために行われた。

希釈液１はＰＢＳ（リン酸緩衝液（ｐＨ７.４）であり、５０ミリモル／ＬのＮａＨ_２ＰＯ_４を含有する）であり、ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）をこの希釈液１で溶かし、５％ＢＳＡ希釈液２を調製した。

処方５（３０％ＨＰ−β−ＣＤ＋２ｍｇ／ｍＬのＡＰＩ、最終ｐＨ＝４.０）および処方２（３０％ＨＰ−β−ＣＤ＋６ｍｇ／ｍＬのＡＰＩ、最終ｐＨ＝６.０）の凍結乾燥させたサンプルを取り、各々、２ｍＬの蒸留水で再溶解させ、次に上記の希釈液１および希釈液２を用いて異なる希釈倍数（容量割合）で希釈し、サンプルが沈殿するかどうかを観察した。希釈試験を各希釈倍数で１回繰り返した。結果は次のとおりであった：

この実験結果は、処方Ａ５をＰＢＳ（ｐＨ７.４）および５％ＢＳＡ含有のＰＢＳ（ｐＨ＝７.４）で異なる割合にて希釈した後に、固体の有意な沈殿は生じないことを示した。この結果はさらに、処方Ａ５が１０倍までの範囲で希釈された後に静脈内点滴により投与され得ることを実証した。

処方Ａ２がＰＢＳ（ｐＨ＝７.４）（希釈液１）で１：５および１：１０の割合にて希釈された場合、１時間半以内に固体が沈殿したが、５％ＢＳＡを含有するＰＢＳ（ｐＨ＝７.４）（希釈液２）で同じ割合にて希釈された場合には、２時間以内に明らかな沈殿は起こらない。１６時間後、希釈液１の希釈群ではより多量の固体が沈殿したが、希釈液２の希釈群では固体の沈殿はそれよりも少なかった。実験結果は、ＢＳＡが薬物の一部と結合することで、薬物の沈殿を防止することを示した。動的吸着試験の結果は、薬物の沈殿が処方Ａ２について異なる点滴速度で起きないことを示した。従って、静脈内ボーラス（２〜３分間で１１.６ｍＬのボーラス）は、この処方が６９.５ｍｇの用量で投与される場合に、実現可能であると考えられる。

実施例３：凍結乾燥させたＫＸ２−３６１・ベンゼンスルホン酸塩剤および再溶解させた注射用溶液の調製および評価（ＨＰ−β−ＣＤの濃度は２０％であり、薬物負荷は高かった）

以下の組成の処方を調製した：

注記：ＨＰ−β−ＣＤの分子量は１４３１〜１８０６であった。従って、該分子量の上限および下限を、各々、モル比を計算するのに利用した。

上記の処方は、次の工程を連続して行うことで調製された：
１）１.８ｍＬの濃塩酸を２００ｍＬ容量のフラスコに入れ、蒸留水で２００ｍＬに希釈し、ｐＨ値が約１.２の塩酸液を得た。
２）ＨＰ−β−ＣＤを上記した処方量に合わせて秤量し、各々、２本の２５ｍＬ容量のフラスコに添加した。１）で得られた溶液を加え、超音波（超音波周波数は５９ＫＨｚであった）で溶解させ、上記した塩酸溶液で約２３ｍＬに希釈した。
３）ＡＰＩを上記した処方量に合わせて秤量し、上記した各々のＨＰ−β−ＣＤ溶液に添加し、超音波（超音波周波数は５９ＫＨｚであった）で溶かした。
４）３）で得られた溶液のｐＨを、５Ｎ ＮａＯＨ水溶液および０.１Ｎ ＮａＯＨ水溶液で、各々、約６.０（±０.０５）に調整した。該溶液を蒸留水で２５ｍＬに希釈した。
５）２つの処方溶液を、０.４５μｍのポリエーテルスルホン製のフィルター膜で濾過し、１０ｍＬのペニシリンボトルに（１ボトル当たり２ｍＬずつを）分配し、次にフリーズドライに付した。

フリーズドライ曲線は次のとおりであった：

フリーズドライ操作に付した後のサンプルの状態：
サンプルは良好な成形性を有した。凍結乾燥させたサンプルはすべて白色のフワフワした雪のような固体であった。

上記した２つの処方（処方Ａ７およびＡ８）の凍結乾燥させたサンプルを再溶解させ、その再溶解状態、および不溶性粒子を評価した。

再溶解方法：２ｍＬの水および次のセイライン緩衝液を凍結乾燥させた各サンプルの各ペニシリンボトルに添加し、次に上下を３０回反転させ、仮に溶けていなければ、溶けるまで震盪させた。再溶解媒体を添加してから計時を開始し、２つの反復を同時に行った。

緩衝塩の組成は次のとおりであった：

再溶解時間は次のように示された：

注記：各処方の再溶解時間は２回の反復の平均であった。

不溶性粒子は次のように示された：

注記：各処方の不溶性粒子は、２つのボトルを合わせ、０時間および４時間後に、各々、測定して行われた。

上記の結果から、２０％ＨＰ−β−ＣＤを含有するサンプルをｐＨ値の異なる緩衝塩に再び溶かした場合、その再溶解の時間は、純水に再溶解させた時の約３分から、約１.５分に減少した。その上、ｐＨ＝４.０およびｐＨ５.０の緩衝塩溶液に再溶解させた処方Ａ８の不溶性粒子の試験結果は、処方Ａ７の結果よりも優れていた。

実施例４：凍結乾燥させたＫＸ２−３６１・ベンゼンスルホン酸塩剤および再溶解させた注射用溶液の調製および評価（ＨＰ−β−ＣＤの濃度は２０％であり、薬物負荷は低く、包接ｐＨ値は１.２であった）

以下の組成の処方を調製した：

注記：ＨＰ−β−ＣＤの分子量は１４３１〜１８０６であった。従って、該分子量の上限および下限を、各々、モル比を計算するのに利用した。

上記の処方は、次の工程を連続して行うことで調製された：
１）１.８ｍＬの濃塩酸を２００ｍＬ容量のフラスコに入れ、蒸留水で２００ｍＬに希釈し、ｐＨ＝１.２１の塩酸液を得た。
２）ＨＰ−β−ＣＤを上記した処方量に合わせて秤量し、２５ｍＬ容量のフラスコに添加した。１）で得られた溶液を加え、超音波（超音波周波数は５９ＫＨｚであった）で溶解させ、上記した塩酸溶液で約２３ｍＬに希釈した。
３）ＡＰＩを上記した処方量に合わせて秤量し、上記したＨＰ−β−ＣＤ溶液に添加し、超音波（超音波周波数は５９ＫＨｚであった）で溶かした。
４）３）で得られた溶液のｐＨ値を５Ｎ ＮａＯＨ水溶液および０.１Ｎ ＮａＯＨ水溶液で約４.０（±０.０５）に調整した。該溶液を蒸留水で２５ｍＬに希釈した。
５）処方溶液を、０.４５μｍのポリエーテルスルホン製のフィルター膜で濾過し、１０ｍＬのペニシリンボトルに（１ボトル当たり２ｍＬを）分配し、次にフリーズドライに付した。

フリーズドライ曲線は次のとおりであった：

フリーズドライ操作に付した後のサンプルの状態：
サンプルは良好な成形性を有した。凍結乾燥させたサンプルは淡黄色のフワフワした雪のような固体であった。

処方Ａ９の凍結乾燥させたサンプルを２本のペニシリンボトルに取り、２ｍＬの生理食塩水（すなわち、０.９％塩化ナトリウム水溶液）および５％グルコース水溶液に再溶解させ、次に対応する溶液で希釈して不溶性粒子を検出し、希釈試験を各希釈倍数で１回繰り返した。結果は次のとおりであった：

注記：不溶性粒子について、結果は、２つのサンプルにて、その不溶性粒子を、０時間および４時間後に、各々、測定して検出することにより得られた結果の平均であった。

上記の表から、処方Ａ９を溶かした後に、同じ溶媒で２倍以内に希釈することによって得られる溶液は安定性が良好であるのに対して、それよりも大きな倍数で得られる系は不安定であり、容易に固体を沈殿させることが分かる。従って、処方Ａ９は再溶解させた直後に投与することができ、再溶解され、容量で２倍以内に希釈された後に投与することもできる。

実施例５：凍結乾燥させたＫＸ２−３６１・ベンゼンスルホン酸塩の注射用製剤の調製および評価（ＨＰ−β−ＣＤの濃度は２０％であり、薬物負荷は低く、包接ｐＨ値は２であった）

以下の組成の処方を調製した：

注記：ＨＰ−β−ＣＤの分子量は１４３１〜１８０６であった。従って、該分子量の上限および下限を、各々、モル比を計算するのに利用した。

上記の処方は、次の工程を連続して行うことで調製された：
１）１.８ｍＬの濃塩酸を２００ｍＬ容量のフラスコに入れ、蒸留水で２００ｍＬに希釈し、ｐＨ＝２.０３の塩酸液を得た。
２）ＨＰ−β−ＣＤを上記した処方量に合わせて秤量し、各々、２５ｍＬ容量のフラスコに添加した。１）で得られた溶液を加え、超音波（超音波周波数は５９ＫＨｚであった）で溶解させ、上記した塩酸液で約２３ｍＬに希釈した。
３）ＡＰＩを上記した処方量に合わせて秤量し、上記した各ＨＰ−β−ＣＤ溶液に添加し、各々、４０℃で１.５時間（処方１０）および１時間（処方１１）で攪拌することにより溶解させた。
４）３）で得られた溶液のｐＨ値を、各々、５Ｎ ＮａＯＨ水溶液および０.１Ｎ ＮａＯＨ水溶液で約４.０（±０.０５）に調整した。該溶液を蒸留水で２５ｍＬに希釈した。
５）２つの処方溶液を、０.４５μｍのポリエーテルスルホン製のフィルター膜で濾過し、１０ｍＬのペニシリンボトルに（１ボトル当たり２ｍＬを）分配し、次にフリーズドライに付した。

フリーズドライ曲線は次のとおりであった：

フリーズドライ操作に付した後のサンプルの状態：
サンプルは良好な成形性を有した。凍結乾燥させたサンプルは淡黄色で、白色に近いフワフワした雪のような固体であった。

試験例５：処方Ａ９〜Ａ１１の特性についての研究
１．不溶性粒子の再溶解性試験および調査
この試験例は、処方Ａ９〜Ａ１１の５％グルコース水溶液、蒸留水および生理食塩水（すなわち、０.９％塩化ナトリウム注射液）での再溶解および不溶性粒子を調べた。

再溶解方法：
次の容量の再溶解媒体を、各々、各凍結乾燥させたサンプルの各ペニシリンボトルに加え、次に上下を３０回反転させ、仮に溶けていなければ、溶けるまで震盪させた。再溶解媒体を添加してから計時を開始した。

再溶解時間は次のように示された：

不溶性粒子は次のように示された：

注記：各処方について、再溶解時間は２本のボトルについての平均であり、不溶性粒子は、２本のボトルを合わせ、０時間および４時間後に、各々、測定してなされた。

該試験の現象および結果から、包接ｐＨ値を２.０３に上げた場合、包接の困難性は上昇し（例えば、４０℃で１時間以上攪拌する必要がある）、凍結乾燥後の再溶解溶液中の不溶性粒子は、包接ｐＨ＝１.２の時と比べて、増加したことが分かる。しかしながら、処方Ａ９〜Ａ１１の不溶性粒子の状況はすべて静脈内注射を調製する要件に適合した。

２．包接サンプルの異なるｐＨ値での安定性：
処方Ａ９〜Ａ１１の凍結乾燥させたサンプルを取り、２本のボトルにて、各々、水を用いて溶液（各々、０.１ｍｇ／ｍＬの濃度）を処方した。関連物質をＨＰＬＣにより測定した（試験例２に記載される含量および関連物質についてのＨＰＬＣ測定条件を参照のこと）。結果は次のように示された：

上記した表から、処方Ａ１０およびＡ１１の全体としての不純物は、処方Ａ９の不純物と比べて有意に減少していないことが分かる。ｐＨ１.２での包接方法と比較して、包接時間が有意に増加していること、包接ｐＨが２である場合に包接方法がより困難であることを考慮して、ｐＨ１.２の条件下で該方法がなされるのが最も好ましい。

実施例６：凍結乾燥させたＫＸ２−３６１・ベンゼンスルホン酸塩剤および注射用の再溶解溶液の調製および評価（ＨＰ−β−ＣＤの濃度は１０％であり、薬物負荷は低かった）

次の組成の処方を調製した：

注記：ＨＰ−β−ＣＤの分子量は１４３１〜１８０６であった。従って、該分子量の上限および下限を、各々、モル比を計算するのに利用した。

上記の処方は、次の工程を連続して行うことで調製された：
１）１.８ｍＬの濃塩酸を２００ｍＬ容量のフラスコに入れ、蒸留水で２００ｍＬに希釈し、ｐＨ値が約１.２の塩酸液を得た。
２）ＨＰ−β−ＣＤを上記した処方量に合わせて秤量し、２つの２５ｍＬ容量のフラスコに添加した。１）で得られた溶液を個々に加え、超音波（超音波周波数は５９ＫＨｚであった）で溶解させ、上記した塩酸液で約２５ｍＬに希釈した。
３）ＡＰＩを上記した処方量に合わせて秤量し、上記した各ＨＰ−β−ＣＤ溶液に個々に添加し、超音波（超音波周波数は５９ＫＨｚであった）で溶解させた。
４）３）で得られた溶液のｐＨ値を、５Ｎ ＮａＯＨ水溶液および０.１Ｎ ＮａＯＨ水溶液で、各々、約４.０（±０.０５）に調整した。該溶液を蒸留水で５０ｍＬに希釈した。
５）０.１ｇの活性炭を注射のために４）にて得られた２つの溶液に添加し、室温で１時間半攪拌し、次に０.４５μｍのポリエーテルスルホン製のフィルター膜で濾過し、その処方溶液を１０ｍＬのペニシリンボトルに（１ボトル当たり２ｍＬを）分配し、次にフリーズドライに付した。

フリーズドライ曲線は次のとおりであった：

フリーズドライ操作に付した後のサンプルの状態：
サンプルは良好な成形性を有した。凍結乾燥させたサンプルは白色の粘りのない固体であった。

上記した２つの処方（処方Ａ１２およびＡ１３）の凍結乾燥させたサンプルを、生理食塩水、蒸留水、および異なるｐＨ値のセイライン緩衝液に再溶解させ（処方方法は実施例３のｐＨ４、５および６でのセイライン緩衝液の方法と同じであった）、その再溶解状態および不溶性粒子を評価した。

再溶解方法：２ｍＬの次の再溶解媒体を凍結乾燥させた各サンプルの各ペニシリンボトルに添加し、次に上下を３０回反転させ、仮に溶けていなければ、溶けるまで震盪させた。再溶解媒体を添加してから計時を開始し、再溶解性試験を各媒体にて一度繰り返した。

両方の処方の再溶解時間は約１分であった：

不溶性粒子は次のように示された：

注記：表中の各値は３回の測定の平均であった。

上記の結果から、Ａ１２とＡ１３の両方が静脈内注射の要件を満たし、処方Ａ１３と比較して、処方Ａ１２は不溶性粒子が少ないが、処方Ａ９（２０％ＨＰ−β−ＣＤ＋２ｍｇ／ｍＬのＡＰＩ）と比べて、処方Ａ１２は不溶性粒子が多かった。それは、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの濃度と薬物の濃度が同じ割合で減少すると、低濃度のシクロデキストリンが薬物を封入する包接能は弱まることを示す。従って、ＫＸ２−３６１注射を行うために、本開示に基づき、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの適切な濃度、および薬物の包接濃度をさらに選択することも重要である。

比較例１：薬物溶解試験
ＫＸ２−３６１およびその塩はすべて難溶性の薬物であり、ＫＸ２−３６１・ベンゼンスルホン酸塩の次の媒体における溶解性がこの比較例にて比較試験された。

（１）界面活性剤含有の水溶液
薬物（ＫＸ２−３６１・ベンゼンスルホン酸塩）（１０ｍｇのＫＸ２−３６１を含有）を、１０％クレモホール（Cremophor）ＥＬ水溶液（５０ｍｌ）、２％ツィーン（Tween）８０水溶液（５０ｍｌ）、８％ソルトール（Solutol）ＨＳ１５水溶液（５０ｍｌ）および０.６％ポロキサマー（Poloxamer）１８８水溶液（５０ｍｌ）の各々に、個々に添加し、１時間磁気攪拌しても薬物は完全には溶解しなかった。

（２）単一の可溶化剤（無水物）
十分な量の可溶化剤だけで薬物を溶解させてもよいが、その溶解性は一般に極めて低く；水で希釈するプロセスの間に沈殿しないこともない。薬物が沈殿する系の各成分の含量を表４にて示した。

表４：各可溶化剤の薬物溶液の水添加による沈殿の臨界点

（３）単一の非水性溶媒または混合溶媒
この実験では、単一の非水性溶媒のエタノールを用いて溶解試験が行われた。ＫＸ２−３６１・ベンゼンスルホン酸塩のエタノール中の溶解度は１.１２〜２.３８ｍｇ／ｍＬであり、すなわち、約５０〜１００ｍｌのエタノールが１００ｍｇの薬物を溶かすのに必要とされることが判明し、静脈内投与で多量のエタノールを用いることができないのは明らかである。

この実験では、ＰＥＧ４００またはＰＥＧ２００と、無水エタノールとを個々に含む混合溶媒を用いて溶解試験が行われた。必要とされる溶媒の容量が大きすぎて、水溶液系で希釈され得ないという問題があることも判明した。

加えて、この実験で、単一の非水性溶媒のプロピレングリコールを用いて、またはプロピレングリコールと、他の非水性溶媒とからなる混合溶液を用いて溶解試験がなされた。５０ｍｇのＫＸ２−３６１（ＫＸ２−３６１・ベンゼンスルホン酸塩）を含有する薬物が、実質的に、２０ｍｌのプロピレングリコールを単独で用いて溶解され得るが、微量の小さな粒子がその清澄な溶液中になおも存在することが判明した。非水性の溶媒であるプロピレングリコールをエタノールおよびＰＥＧ４００などの他の溶媒と組み合わせて用いた場合、その組み合わせは薬物の溶解に実質的に寄与しなかった。

（４）可溶化剤と他の溶媒とからなる混合溶媒
薬物を可溶化剤（クレモホールＥＬまたはソルトロ（Solutolo）ＨＳ１５）および溶媒（水とプロピレングリコールを含む）からなる二成分または三成分系で可溶化させ、薬物を溶解させるために、２種類の次の溶媒系、すなわち、（ｉ）５０ｍｇのＫＸ２−３６１を含有する薬物を溶かし、安定性に優れた溶液を得ることができる、プロピレングリコール：クレモホールＥＬ（５０：５０（ｖ／ｖ）；５ｍｌ）；（ｉｉ）薬物を溶解させることもできる、混合溶媒（１１.５ｍｌ；１０ｍｌのプロピレングリコールと、１ｍｌのクレモホールＥＬと、０.５ｍｌの水とからなる）が選択された。

（５）希釈安定性試験
希釈安定性試験が、溶解して清澄化され得る、上記の薬物含有溶液で行われた。（１）にて記載の異なる界面活性剤を含有する水溶液、０.９％塩化ナトリウム注射液、または５％グルコース注射液を用いて等容量の希釈を行い、該溶液のすべてが混濁し始め、すなわち、薬物が沈殿することが判明した。

上記の試験は、注射に使用され得る、現行の溶媒、可溶化剤、または混合系において、本開示の薬物が、高溶解性を達成できないか、または溶解後にあっても希釈され得ないこと、すなわち、血管に入った後に薬物溶液を沈殿させないようにすることは困難であることを明らかにした。

比較例２：異なる濃度および種類のシクロデキストリンの、ＡＰＩを封入する包接能の測定

異なる種類のシクロデキストリンをｐＨ値が１.２の塩酸水溶液（０.１Ｎ）で溶かし、各シクロデキストリンの飽和濃度を測定した。ＫＸ２−３６１・ベンゼンスルホン酸塩を異なる濃度および種類のシクロデキストリン溶液に溶かし、異なる濃度および種類のシクロデキストリンのＡＰＩを封入する包接能および包接効果を調べた。

（１）特定量のα−、β−およびγ−シクロデキストリンを秤量し、１０ｍＬ容量のフラスコに加え、次にｐＨ１.２の塩酸水溶液を該フラスコのスケールに達するまで徐々に加え、該シクロデキストリンを溶解させるために、該フラスコに超音波で衝撃を与えて処理した。１０ｍＬの溶液に溶かすことのできるシクロデキストリンの最大量が記録された。実験結果は、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、およびγ−シクロデキストリンのｐＨ値が１.２の塩酸水溶液中での最大溶解度が、各々、約８％、約１％、および約２０％であることを示す。

（２）８％α−シクロデキストリン溶液、１％β−シクロデキストリン溶液、２０％γ−シクロデキストリン溶液、２０％、３０％、および４０％スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン溶液、ならびに２０％、３０％、および４０％ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン溶液が、ｐＨ値が１.２の塩酸水溶液を用いて処方された。

特定量のＡＰＩを秤量し、適切な容量のシクロデキストリン溶液に添加した。ＡＰＩが完全に溶解したならば、該溶液を０.４５μｍのＰＴＦＥフィルター膜で濾過し、そのｐＨ値を５Ｎ ＮａＯＨ水溶液および０.１Ｎ ＮａＯＨ水溶液を用いて４.０にゆっくりと調整し、そのｐＨ調整操作の間に観察を行った。ｐＨ値を調整している時に、該溶液が混濁し始めたならば、ＡＰＩの濃度を下げることを試した。ｐＨ調整の後に清澄な溶液を放置して、２時間、４時間、および２４時間経過した後のその溶液の状態を観察した。その実験プロセスおよび結果を以下の表５に示した：

表５：異なる種類および濃度のシクロデキストリンの、ＡＰＩを封入する包接能の検出
／：観察を終了した

実験現象および結果によれば、ＨＰ−β−ＣＤのＡＰＩを封入する包接効果は、ＳＢＥ−β−ＣＤの包接効果よりも有意に優れており、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、およびγ−シクロデキストリンのＡＰＩを封入する包接効果はすべて不十分であった。

実施例７：経口錠剤の調製および評価
（Ｉ）凍結乾燥させた粉末の調製
ｐＨ１.２の塩酸水溶液の調製：
濃塩酸（０.９ｍｌ）を１００ｍｌ容量のフラスコに加え、蒸留水で１００ｍｌに希釈した。

３０％ＨＰ−β−ＣＤ溶液および７ｍｇ／ｍｌの薬物含有溶液（ＨＰ−β−ＣＤ：ＡＰＩのモル比が１３〜１７：１であり、ＨＰ−β−ＣＤ：ＫＸ２−３６１の質量比が１００：１.６８である）を調製した。

ｐＨ１.２の塩酸水溶液（７０ｍｌ）を２５０ｍｌのビーカーに添加した。３０ｇのＨＰ−β−ＣＤを秤量し、すべてのＨＰ−β−ＣＤが溶解するまで、磁気攪拌下にある該塩酸水溶液に加えた。

７００ｍｇのＫＸ２−３６１・ベンゼンスルホン酸塩を秤量し、ＡＰＩを磁気攪拌下にあるその処方したＨＰ−β−ＣＤ溶液に加え、超音波処置により薬物を完全に溶かした（超音波周波数は５９ＫＨｚであった）。薬物溶液のｐＨ値を５Ｎ ＮａＯＨ水溶液および０.１Ｎ ＮａＯＨ水溶液を用いて約４.０に調整し、適量の蒸留水を加えて、最終容量を１００ｍｌに希釈し、その最終ｐＨを４.０として測定した。あるいはｐＨを調整することなく直接希釈した（すなわち、薬物溶液のｐＨは１.２である）。

濾過：薬物の溶液を０.４５μｍのＰＥＳフィルター膜を通して濾過し、その濾液を約０.３ｃｍの液体レベルで、ステンレススチール製トレイに置いた。

フリーズドライ操作：フリーズドライ曲線を表に示した

（Ｂ）処方プロセスおよび打錠プロセス
凍結乾燥させた粉末（ｐＨ１.２）および凍結乾燥した粉末（ｐＨ４.０）を４０メッシュのシーブを通して篩にかけた。

原料を秤量し、処方により提供される割合に従って混合した。

１９ｘ８の特殊な形状のパンチを用いて、１錠に付き１４ｍｇのＡＰＩを含む錠剤を調製した。その打錠プロセスの間に、錠剤の厚みを硬度に応じて調整し、その硬度は５０〜１００Ｎの範囲に調節された。

錠剤の硬度および重量の両方が修飾されたその溶解特性を調べた。

表５：処方デザイン（ＡＰＩの含量は１４ｍｇであった）

（ＩＩＩ）溶解性の評価
錠剤化規模を大きくした後、０.５％ステアリン酸マグネシウムを含有する処方Ｂ１およびＢ２の錠剤化プロセスにて粘着化およびピッキングが起こるであろう。

溶解試験方法：
溶解媒体（ｐＨ４.０、１.０％ＳＤＳを含有）の処方化：
酢酸ナトリウム・三水和物（１.２２ｇ）およびＳＤＳ（１０ｇ）を純水（９５０ｍｌ）に溶かし、酢酸でｐＨ４.０に調整し、最終容量を１Ｌに調整した。

回転バスケット法（該方法は、中国薬局方 パートＩＶ、2015年版、書類0903、the First Method, Dissolution and Release Measurement Methodを参照のこと）を該試験において用い、各錠剤では９００ｍｌの溶解媒体を使用し、回転速度は５０ｒｐｍであり、温度は３７℃であった。サンプリングは、各々、５、１０、１５、２０、３０、４５、６０および９０分の時点で行った。回転速度は６０分後に２５０ｒｐｍに調整し、９０分におけるサンプルの溶解度が各錠剤の最終溶解度として処理された。

ＡＰＩの溶解量はＨＰＬＣにより検出され（該プロセスは試験例２に記載の含量および関連物質のＨＰＬＣ測定条件を参照のこと）、次にその溶解度は外部標準方法を用いて算定された。

上記の方法に従って、処方Ｂ１、Ｂ３およびＢ４の溶解性が、下記の表に示されるように、測定かつ比較された：

表６：溶解結果

処方Ｂ３とＢ４を比較することで、薬物の溶液のｐＨ値を凍結乾燥操作の前に１.２から４.０に調整するかどうかは、溶解結果にほとんど影響しないことが分かる。

処方Ｂ１とＢ４を比較することで、ステアリン酸マグネシウムを０.５％（ｗ／ｗ）から１％（ｗ／ｗ）に増加させた後に、ＡＰＩの溶解速度が１５分以内にわずかに遅くなったが、ＡＰＩの溶解速度はすべて１５分以内に９５％以上に達していることが分かる。

比較例３：錠剤の生物学的利用能の比較試験
実施例７の処方Ｂ４の錠剤をイヌに経口投与し、静脈内投与用の試験物質を比較のために０.５ｍｇ／ｋｇのＫＸ２−３６１を含有する用量でイヌに静脈内注射し、ついで経口錠剤の絶対生物学的利用能を算定した。

操作方法：
１．経口投与：
３匹の健康な雄のビーグル犬（体重は８〜１２ｋｇであり、その番号は、各々、２０１Ｍ／２０１Ｍ／２０３Ｍである）を利用し、各イヌに単回経口用量で５錠を服用させた。イヌは投与前に一夜絶食させており、投与した４時間後に再び餌を与えた；投与の１時間前および１時間後にはイヌが水を摂取することを禁じた。

２．静脈内注射：
静脈内投与用の試験物質の調製：
ＫＸ２−３６１・ベンゼンスルホン酸塩（１９.３４ｍｇ）を正確に秤量し、ガラス瓶に入れ、エタノール（５.５６５ｍＬ）を加え、かき混ぜ、次に２４℃で３分間音波処理に付し、ＰＥＧ４００（３３.３９３ｍＬ）を加え、かき混ぜ、次に２４℃で４分間音波処理に付し、生理食塩水（１６.６９６ｍＬ）を加え、かき混ぜ、次に２４℃で４分間音波処理に付して理論上の濃度が０.２５ｍｇ／ｍＬである無色透明な溶液を得た。

イヌは投与前に一夜絶食させており、投与した４時間後に餌を与えた。試験物質をゆっくりした（約８分間の）静脈内ボーラスで投与し、投与の１時間前および１時間後にはイヌが水を摂取することを禁じた。

３．生物学的利用能の測定：
経口投与群および静脈内投与群について、投与した０.０８３（静脈内投与群に対してのみ）、０.２５、０.５、１、２、４、８、および２４時間後に、前脚橈側皮静脈を穿刺し、５μＬのＥＤＴＡ−Ｋ２（２０％）を含有する抗凝固剤の管に血液（約０.５ｍＬ）をサンプル摂取した。その血液サンプルを１時間以内に８０００ｒｐｍで６分間遠心分離に供した（遠心分離に付す前は氷上に置かれていた）。上澄み、すなわち、血漿を取り、質量分析計を用いるＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析のために冷凍庫にて−２０℃の低温で貯蔵した（内部標体としてトルブタミドを用い、モード：ＡＰＣＩイオン化、ＭＲＭ検出を使用した）。薬物動態パラメーターが以下の表に示されており、経時的な血漿中濃度の曲線を図１に示す。静脈内投与群の曲線下面積_{（０−ｔ）}（ＡＵＣ_{（０−ｔ）}）は１６４.３であった。絶対生物学的利用能（Ｆ％）の計算式は：
Ｆ（％）＝（経口ＡＵＣ_{（０−ｔ）}／経口用量）／（静脈内ＡＵＣ_{（０−ｔ）}／静脈内用量）
ｘ１００％である。

表７

錠剤をイヌに経口投与することで相対的に高い生物学的利用能（平均のＦ％が７５.７％）が達成されることが分かる。

製剤１および２（処方化およびプロセスは下記に示される）などの他の製剤（スキーム）を用いて動物のインビボにおける吸収作用を検出した。イヌに経口投与し、薬力学的作用を研究し（方法は上記と同じである）、絶対生物学的利用能を計算する；結果は次の通りである：

他の２つの製剤（スキーム）と比べて、ＫＸ２−３６１・ベンゼンスルホン酸塩とヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンは包接複合体として製造され、つづいて錠剤化することでより高い吸収作用（約２０倍）を達成することが分かっており、それは、本開示の製剤において、アジュバントのヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンが薬物のインビボでの生物学的利用能を強化するのに有意な作用を有することを示す。

試験例６：安定性の調査
処方Ｂ３（凍結乾燥させた、ｐＨ１.２の粉末を含有する）および処方Ｂ４（凍結乾燥させた、ｐＨ４.０の粉末を含有する）の錠剤を、乾燥剤（変色性シリカゲル）と一緒に高密度ポリエチレン（ＨＤＰＥ）ボトルに充填し、高温加速試験を行うために４０℃／７５％ＲＨでの安定性ボックスに入れ、サンプルを、各々、１ヶ月、２ヶ月、および３ヶ月の終わりに、取り出し、関連物質を測定した（その方法は試験例２に記載の含量および関連物質のＨＰＬＣ測定条件をいう）。

表８：処方Ｂ３およびＢ４の錠剤安定性の調査の結果

注記：ｎ＝２は、２つのサンプルを、各々、採択して測定し、その結果が２つのサンプルの平均であることを表す。

１ヶ月ないし３ヶ月の加速作用の調査プロセスにおいて、処方Ｂ３の不純物が増加しており、それは強酸の環境と関連している可能性があり；処方Ｂ４の不純物がわずかに増加しているが、著しい変化は見られなかった。包接した後にｐＨを元に調整するプロセスが経口錠剤の製剤にとって好ましいことが分かる。

実施例８：錠剤の調製および評価
（Ｉ）凍結乾燥プロセス
ｐＨ１.２の塩酸水溶液の処方化：
濃塩酸（９ｍｌ）を１０００ｍｌの容量のフラスコに加え、蒸留水で最終容量まで希釈した。

３０％ＨＰ−β−ＣＤ溶液の処方化法法：
ｐＨ１.２の濃塩酸水溶液（７００ｍｌ）を１０００ｍｌのビーカーに加えた。ＨＰ−β−ＣＤ（３００ｇ）を秤量し、ｐＨ１.２の該塩酸水溶液に加え、磁気攪拌下にてＨＰ−β−ＣＤを完全に溶解させ、蒸留水を加えて容量を１０００ｍｌとした。特定量を処方して使用した。

（１）約７ｍｇ／ｍｌの薬物含有の製剤（ＨＰ−β−ＣＤ：ＡＰＩのモル比は１３〜１７：１であり、ＨＰ−β−ＣＤ：ＫＸ２−３６１の質量比は１００：１.６８であった）：
ＫＸ２−３６１・ベンゼンスルホン酸塩（１７５０ｍｇ）を秤量し、次に攪拌下で上記のＨＰ−β−ＣＤ溶液（２５０ｍｌ）に加え、超音波（超音波周波数は５９ｋＨｚであった）により完全に溶解させ、ｐＨ値を５Ｎ ＮａＯＨ水溶液および０.１Ｎ ＮａＯＨ水溶液で４.０に調整した。次に該溶液を０.４５μｍのＰＥＳフィルター膜を通して濾過し、濾液を約０.５ｃｍの液体レベルでステンレススチール製トレイに置いた。濾液を凍結乾燥させ、ついで凍結乾燥粉末Ｉと命名した（凍結乾燥方法は実施例７の記載と同じである、以下同様）。

（２）約１４ｍｇ／ｍｌの薬物含有の製剤（ＨＰ−β−ＣＤ：ＡＰＩのモル比は７〜８：１であり、ＨＰ−β−ＣＤ：ＫＸ２−３６１の質量比は１００：３.３６であった）：
ＫＸ２−３６１・ベンゼンスルホン酸塩（４２００ｍｇ）を秤量し、次に上記のＨＰ−β−ＣＤ溶液（３００ｍｌ）に攪拌しながら添加し、超音波（超音波周波数は５９ｋＨｚであった）で完全に溶解させた。該溶液を０.４５μｍのＰＥＳフィルター膜を通して濾過し、濾液を約０.５ｃｍの液体レベルでステンレススチール製トレイに置いた。濾液を凍結乾燥させ、ついで凍結乾燥粉末ＩＩと命名した。

（３）２１ｍｇ／ｍｌの薬物含有の製剤（ＨＰ−β−ＣＤ：ＡＰＩのモル比は４〜６：１であり、ＨＰ−β−ＣＤ：ＫＸ２−３６１の質量比は１００：５.０３であった）：
ＫＸ２−３６１・ベンゼンスルホン酸塩（６３００ｍｇ）を秤量し、次に上記のＨＰ−β−ＣＤ溶液（３００ｍｌ）に攪拌しながら添加し、超音波（超音波周波数は５９ｋＨｚであった）で３０分間では完全には溶解せず、特定量の不溶性粒子がなお存在した。該溶液を０.４５μｍのＰＥＳフィルター膜を通して濾過し、濾液を約０.５ｃｍの液体レベルでステンレススチール製トレイに置いた。２１ｍｇ／ｍｌの薬物の製剤を濾過した後、濃度はＨＰＬＣで測定して２０.６６ｍｇ／ｍｌであった。濾液を凍結乾燥させ、ついで凍結乾燥粉末ＩＩＩと命名した。

（ＩＩ）処方粗製物および錠剤化プロセス
凍結乾燥させた粉末を調製し、各々、４０メッシュのシーブを通して篩にかけた。

原料が次の処方により示される割合に従って秤量された。

１９ｘ８の特殊な形状のパンチを用いて、１錠に付き６００ｍｇのＨＰ−β−ＣＤを含む錠剤を調製した。その打錠プロセスの間に、錠剤の厚みを硬度に応じて調整し、その硬度は５０〜１００Ｎの範囲に調節された。

実施例７に記載の方法に従って、錠剤の硬度および重量を修飾した溶解特性を調べた。表９を参照のこと。

表９：溶解の検討結果（ｎ＝３）

注記：ｎ＝３は、３つのサンプルを取り、個々に測定し、その結果が３つのサンプルの平均であることを表す。

溶解測定の結果は次のとおりである：

処方は、各々、２０分で９５％より多くが溶解できる。

ＡＰＩ含量を増やした後、溶解速度は減少し、処方Ｂ５と処方Ｂ６の間で溶解速度の違いは小さいが、両方共に処方Ｂ４よりも遅かった。

試験例７：
高用量の錠剤で異なる濃度のＳＤＳを含有する溶解媒体の溶解作用に対する研究

溶解媒体が処方を区別する能力をより多く示すことができるように、以下の処方の異なるＳＤＳ濃度での溶解媒体中における溶解行動を調べた。

実施例７の処方Ｂ３、および実施例８の処方Ｂ５およびＢ６の、０.５％ＳＤＳ、０.２％ＳＤＳ、およびＳＤＳ不含の溶解媒体中での溶解性を調べた。データを表１０〜１２に示す。

溶解試験方法：
回転バスケット法にて、溶解媒体は９００ｍｌであり、回転速度は５０ｒｐｍであり、温度は３７℃であった。サンプリングは、各々、５、１０、１５、２０、３０、４５および６０分の時点で行った。ｐＨ４.０の溶解媒体の処方化方法は実施例７に記載の方法と同じであった。違いは、５ｇ、２ｇ、および０ｇのＳＤＳを含有するｐＨ４.０のセイライン緩衝液が、各々、０.５％ＳＤＳ、０.２％ＳＤＳ、および０％ＳＤＳ含有の１Ｌ溶解媒体として使用されたことである。

表１０：３つの処方の、ＳＤＳ不含のｐＨ４.０の溶解媒体における溶解性

表１１：３つの処方の、０.５％ＳＤＳ含有のｐＨ４.０の溶解媒体における溶解性

表１２：３つの処方の、０.２％ＳＤＳ含有のｐＨ４.０の溶解媒体における溶解性

現象を観察し、溶解媒体中にＳＤＳが不在の場合、処方Ｂ５の溶解カップにおいて少量の綿状体が現れ、処方Ｂ６の溶解カップでは多量の綿状体が現れた。０.２％ＳＤＳまたは０.５％ＳＤＳが溶解媒体に含まれると、処方Ｂ６の溶解カップにおいて綿状体が出現し、３０分後には綿状体は減少した。

結論：ＳＤＳの不在がサンプルの溶解性に大きく作用し、その時には３つの処方の溶解性は不十分であった。０.２％ＳＤＳを含有する場合を、０.５％ＳＤＳが含有される溶解媒体と比較すると、処方Ｂ３の溶解速度は、０.５％ＳＤＳ含有の溶解媒体の溶解性と類似していたが、処方Ｂ５およびＢ６では溶解速度はスローダウンし、最終の溶解性は減少し、それは０.２％ＳＤＳ含有の溶解媒体がこれら２つの処方の溶解性に適切でないことを示す。溶解媒体が０.５％ＳＤＳを含有する場合、３つの処方の溶解性は良好であり、１％ＳＤＳが含まれる場合の溶解性と極めて類似しており、処方Ｂ５およびＢ６の溶解特性は著しく異なるものではなかった。

実施例９：錠剤の調製および評価
処方Ｂ１６の錠剤の調製：
１４ｍｇ／ｍｌの薬物が４０％ＨＰ−β−ＣＤによって封入され、凍結乾燥させた粉末の調製プロセスは実施例７のプロセスと同じであった（ｐＨ値を調整して４.０に戻した）。凍結乾燥させた粉末を４０メッシュのシーブを通して篩にかけ、凍結乾燥させた粉末とステアリン酸マグネシウム（ステアリン酸マグネシウムは凍結乾燥させた粉末の１.０％（ｗ／ｗ）の量であった）を秤量し、均質となるように混合した。打錠するのに１９ｘ８の特殊な形状のパンチを用い、錠剤の重量が６００ｍｇで、硬度が５０〜１００Ｎであった。崩壊時間は８分であった。溶解結果は次のとおりである：

表１５：処方Ｂ１６と処方Ｂ３の溶解性結果の比較

結論：処方Ｂ１６の溶解性は処方Ｂ３のそれよりもわずかに小さいが、１５分で８５％以上が溶解していた。処方Ｂ１６での各錠剤の薬物負荷（各錠剤のＡＰＩ含量）は約２０.２９ｍｇであり、それは処方Ｂ３の薬物負荷よりも約４５％高く、薬物負荷を向上させる目的を達成した。

実施例１０：錠剤の調製および評価
試験例６から、ｐＨ１.２の凍結乾燥させた粉末を含有する錠剤の安定性は低く、ｐＨ４.０の凍結乾燥させた粉末を含有する錠剤の安定性は有意に改善されたことがわかる。従って、ｐＨを６.０に調整し、その安定性を確保することを試みる。

（Ｉ）凍結乾燥プロセス
１．ｐＨ１.２の塩酸水溶液の処方化：
濃塩酸（０.９ｍｌ）を１００ｍｌの容量のフラスコに加え、蒸留水で１００ｍｌに希釈した。
２．４０％ＨＰ−β−ＣＤ溶液の処方化：
ＨＰ−β−ＣＤ（１０ｇ）を秤量し、適量の、ｐＨ１.２の塩酸水溶液で溶かし、次に２５ｍｌの容量のフラスコに移し、上記の塩酸水溶液で最終容量に希釈した。
３．薬物含有製剤（約１４ｍｇ／ｍｌ）の処方化：
ＫＸ２−３６１・ベンゼンスルホン酸塩（５６ｍｇ）を秤量し、ついで上記のＨＰ−β−ＣＤ溶液（４ｍｌ）に添加した。薬物を超音波（超音波周波数は５９ｋＨｚであった）により完全に溶解させた。
４．ｐＨ調整：
薬物溶液のｐＨ値を５Ｎ ＮａＯＨ水溶液および０.１Ｎ ＮａＯＨ水溶液で約６.０に調整した。この時点で、該溶液は透明に近かった。３０分間放置しても明らかな混濁および沈殿減少は観察されなかった。一夜放置した後では沈殿はあまり出現せず、液体の部分は溶液であった。
５．凍結乾燥させた粉末の調製：
ｐＨ値を約６.０に調整した後、該溶液を０.２２μｍのＰＥＳフィルター膜を通して濾過し、凍結乾燥させた。白色の凍結乾燥させた粉末が得られた。その凍結乾燥プロセスは実施例７のプロセスと同じであった。

再溶解の研究：
凍結乾燥させた粉末を水に再溶解させ、緩やかに震盪させることにより、明らかな異常状態はなく、約１０分で完了した。

（ＩＩ）処方組成物の錠剤化プロセス
１．凍結乾燥させた粉末および各充填剤を、各々、４０メッシュのシーブを通して篩にかけた。
２．ＡＰＩおよび各充填剤を処方デザインの量（表１６および表１７を参照のこと）に従って秤量して混合し、次に潤滑剤であるステアリン酸マグネシウムを等量で添加することで混合し、ついで４０メッシュのシーブに３回通して篩にかけることで混合した。

３．Φ８ｍｍの大きさのダイスを、錠剤の重量が約２００ｍｇである錠剤（約２ｍｇのＡＰＩを含有する）に用いた。錠剤化プロセスの間に、錠剤の厚みを、５０〜１００Ｎの範囲にて調節される硬度に従って調整した。

実験結果：
各処方の錠剤が連続して得られた。

表１６：処方デザイン１

表１７：処方デザイン２

崩壊時間の制限テスターを用い、上記の各処方錠剤の崩壊時間（方法は、中国薬局方 パートＩＶ、2015版、書類0921を参照のこと）および溶解性を検出した。結果は表１８および表１９に示される。

表１８：各処方錠剤の崩壊時間の結果

この結果から処方Ｂ９および処方Ｂ１３の錠剤の崩壊時間が１０分よりも長く、一方で他の処方の崩壊時間は短く、それは薬物の迅速な溶解に寄与していることが分かる。

表１９：各処方錠剤の溶解の調査結果

この溶解データから、処方Ｂ９、Ｂ１０、Ｂ１３、Ｂ１４、およびＢ１５の溶解速度はすべて遅かったことが分かる。他の処方の溶解性は１５分で９０％以上であり、それは薬物が即時放出性錠剤から迅速に溶解しうることを示した。

各処方の錠剤を、高温（６０℃）、高湿度（９２.５％ＲＨ）、−２０℃などの条件下に置き、特定の時点でサンプリングを行って検出し（方法は、試験例２に記載の含量および関連物質のＨＰＬＣの測定条件を参照のこと）、ＡＰＩの不純物の増加と比較した。結果を表２０に示す。

表２０：各処方錠剤の安定性の調査結果

上記の表から、処方Ｂ１１の安定性が他の処方と比べて悪く、処方Ｂ７とＢ８の安定性も望ましくない。残りの処方においては、各条件下で２０日間放置した後で異常は観察されなかった。要約すれば、溶解データは処方Ｂ１２が好ましい処方であることを示す。

Claims (11)

1. ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンと、次式１：
   で示される、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩である活性成分とを含む、細胞増殖性疾患の治療用の経口製剤の製造方法であって、次の工程：
   Ａ）ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを溶かし、そのｐＨ値を１〜２とした、第１溶液を供する工程；
   Ｂ）ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩と、該第１溶液とを混合し、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩を溶かした、第２溶液を調製する工程；
   Ｃ）該第２溶液を乾燥させて乾燥生成物を得る工程
   を含む、製造方法。
2. 第１溶液中の、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの濃度が１０％（ｗ／ｖ）〜５０％（ｗ／ｖ）である、請求項１に記載の方法。
3. 第２溶液中の、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩の濃度が、ＫＸ２−３６１で測定して、０.５ｍｇ／ｍｌ〜１５ｍｇ／ｍｌ、好ましくは０.５ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌである、請求項１に記載の方法。
4. 第２溶液中の、ＫＸ２−３６１またはその医薬としての塩の、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンに対するモル比が１：（４〜５９）である、請求項１に記載の方法。
5. さらに、Ｉ）工程Ｃ）の前であって、工程Ｂ）の後に第２溶液のｐＨ値を３〜７に調整することを含む、請求項１に記載の方法。
6. さらに、Ｄ）工程Ｃ）の後に乾燥した生成物を錠剤化することを含む、請求項１に記載の方法。
7. 工程Ｄ）が、乾燥した生成物を充填剤、崩壊剤および潤滑剤からなる群より選択される１または複数の賦形剤と混合し、次に錠剤化を行うことを含む、請求項６に記載の方法。
8. 充填剤が、微結晶セルロース、ラクトース、澱粉およびマンニトールからなる群より１または複数で選択され、その充填剤の含量が、経口製剤の総重量に基づき、０％〜６９％（ｗ／ｗ）である、請求項７に記載の方法。
9. 崩壊剤が、クロスカルメロースナトリウム、架橋ポビドン（ＰＶＰＰ）およびカルボキシメチル澱粉ナトリウムからなる群より１または複数で選択され、その崩壊剤の含量が、経口製剤の総重量に基づき、０％〜５％（ｗ／ｗ）である、請求項７に記載の方法。
10. 潤滑剤が、ステアリン酸マグネシウム、シリカゲル微粉末およびタルク粉からなる群より１または複数で選択され、その潤滑剤の含量が、経口製剤の総重量に基づき、０.５％（ｗ／ｗ）〜３％（ｗ／ｗ）である、請求項７に記載の方法。
11. ＫＸ２−３６１の医薬としての塩が、ＫＸ２−３６１・モノフェニルスルホン酸塩、ＫＸ２−３６１・ジ塩酸塩、ＫＸ２−３６１・モノリン酸塩および／またはＫＸ２−３６１・ジリン酸塩である、請求項１に記載の方法。