CN106902358B

CN106902358B - 口服制剂及其制备方法

Info

Publication number: CN106902358B
Application number: CN201510976088.5A
Authority: CN
Inventors: 施水萍; 张庆勇; 赵荣华; 陈惠红; 曾仑; 欧达欣; 刘炎
Original assignee: GUANGZHOU XIANGXUE PHARMACEUTICAL CO Ltd; Hangzhou Converd Co Ltd
Current assignee: GUANGZHOU XIANGXUE PHARMACEUTICAL CO Ltd; Hangzhou Converd Co Ltd
Priority date: 2015-12-21
Filing date: 2015-12-21
Publication date: 2020-07-10
Anticipated expiration: 2035-12-21
Also published as: EP3395346B1; EP3395346A4; WO2017107895A1; JP2019504042A; JP6654702B2; CN106902358A; US11007141B2; EP3395346A1; US20190000756A1

Abstract

本发明提供了口服制剂及其制备方法。本发明所述的口服制剂用于治疗细胞增殖性疾病，包含羟丙基‑β‑环糊精和活性成分，所述活性成分为KX2‑361或其可药用的盐，所述KX2‑361由下式1表示：

Description

口服制剂及其制备方法

技术领域

本发明属于制药领域，具体而言，涉及口服制剂及其制备方法。

背景技术

KX2-361是美国Kinex Pharmaceuticals公司研发的能够用于治疗细胞增殖性疾病(特别是癌症)的小分子化合物，该化合物可能通过酪氨酸激酶抑制作用来治疗细胞增殖性疾病(参见专利文献WO2006/071960)。KX2-361的中文化学名称为N-(3-氟苄基)-2-(5-(4-吗啉苯基)吡啶-2-基)乙酰胺，英文化学名称为N-(3-Fluorobenzyl)-2-(5-(4-Morpholinophenyl)pyridin-2-yl)-acetamide)，分子式为C₂₄H₂₄FN₃O₂，分子量为405.46g/mol，结构式如式1所示：

KX2-361为自由碱形式，其可药用的盐可以是苯磺酸盐、盐酸盐、磷酸盐等。KX2-361具有难溶于水的性质，其可药用的盐的水溶性也不理想，也是难溶于水的。当药物活性分子难溶于水时，口服会造成药物生物利用度低、难以吸收等问题。当要将其制成适合的注射剂时，需要增加其溶解度，以达到静脉给药的需要。因此，为了使KX2-361或其可药用的盐可有效地对患者施用，迫切需要找到能够使其增溶的方式。

针对难溶性药物，本领域常用的增溶方法包括：加表面活性剂类增溶剂、加助溶剂、使用混合溶剂、制成可溶性盐、在主药分子结构上导入亲水基团、制成固体分散体、制成环糊精包合物、加入嵌段共聚物增溶剂、制成脂质体、制成微乳、制成微球和毫微粒、加入树状大分子增溶剂等(参见科技文献：“吴佩颖,徐莲英,陶建生.难溶性药物增溶方法研究进展[J].中成药,2005,09:1126-1129.”)。

将药物制成环糊精包合物时，已知多种可供选择的环糊精及其衍生物。已知的环糊精有α、β、γ三种，分别由6个、7个和8个葡萄糖所组成。经X射线衍射和核磁共振研究证明，环糊精的立体结构是上宽下窄、两端开口的环状中空圆筒形，被包合的物质分子进入圆筒内，形成包合物。通常，在由环糊精和药物形成的包合物中，药物和环糊精的结合摩尔比通常是1:1，但也常见其它比例。目前，在上述环糊精的基础上形成了一系列的衍生物，药学上适用的有例如：甲基化-β-环糊精(RM-β-CD)、羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)、磺丁基醚-β-环糊精(SBE-β-CD)、麦芽糖-β-环糊精、羟丙基-γ-环糊精(HP-γ-CD)等。在科技文献“Loftsson T,Brewster ME.Pharmaceutical applications of cyclodextrins:basicscience and product development.J Pharm Pharmacol.2010 Nov；62(11):1607-21.”中列举了一些包含环糊精的世界范围内的上市制剂，例如包含α-环糊精的前列地尔注射液、盐酸头孢替安酯片；包含β-环糊精的头孢菌素片、盐酸贝奈克酯胶囊；包含γ-环糊精的Tc-99替锝注射液；包含SBE-β-CD的伏立康唑注射液、甲磺酸齐拉西酮注射液；包含HP-β-CD的伊曲康唑口服溶液及注射液、丝裂霉素注射液。然而，不同的环糊精及其衍生物适用于不同的药物，目前针对某种给定化合物的具体结构很难推测出哪种环糊精或其衍生物在增溶能力上是适用的。

在前述专利文献WO2006/071960中公开了包括KX2-361等一系列具体化合物在内的通式化合物，其可以采用多种方式给药，如口服给药、针剂方式给药、直肠给药、肺部给药、鼻内给药、瞬时给药、波动释放给药等。该专利文献进一步公开了针对不同的给药方式，可以采用不同形式的固体剂型、液体剂型等。该专利文献还公开了可注射的药水可利用溶剂制成，这些溶剂包括例如芝麻或花生油、水性丙二醇；或者，可注射的药水可用可溶于水的KX2-361的可药用的盐的水溶液制成，在具体例子中，可分散相可以采用甘油、液体聚乙二醇和它们在油中的混合物。该专利文献还公开了包含环状或脂肪族包封剂或溶解剂的剂型(如液体剂型)，环状或脂肪族包封剂或溶解剂为例如：环糊精、聚醚、多糖；具体优选的例子包括：甲基纤维素或

(即，磺丁基醚-β-环糊精)。即，该专利文献公开了一些本领域针对难溶性药物通常采用的增溶方式和增溶用试剂。

然而，本发明的发明人发现，在KX2-361的药物研发过程中，文献WO2006/071960公开的具体增溶方式和增溶用试剂并不理想，并不适于将KX2-361进一步开发成能有效地施用给患者、成本有效的药物制剂。因此仍然迫切需要针对KX2-361或其可药用的盐找到其在药学上更适合的增溶方式和增溶用试剂。

发明内容

为解决上述现有技术中所存在的问题，本发明提供了口服制剂及其制备方法。

具体而言，本发明提供了：

(1)一种用于治疗细胞增殖性疾病的口服制剂，包含羟丙基-β-环糊精和活性成分，所述活性成分为KX2-361或其可药用的盐，所述KX2-361由下式1表示：

(2)根据(1)所述的口服制剂，其中所述活性成分与羟丙基-β-环糊精的摩尔比为1:(4-59)。

(3)根据(1)所述的口服制剂，其中所述活性成分为KX2-361、KX2-361·单苯磺酸盐、KX2-361·二盐酸盐、KX2-361·单磷酸盐和/或KX2-361·二磷酸盐。

(4)根据(1)所述的口服制剂，其中至少一部分所述羟丙基-β-环糊精包裹至少一部分所述活性成分而形成药物包合物。

(5)根据(1)所述的口服制剂，还包含可药用的赋形剂。

(6)根据(5)所述的口服制剂，其中所述可药用的赋形剂选自填充剂、崩解剂、润滑剂中的一种或多种。

(7)根据(6)所述的口服制剂，其中所述填充剂选自微晶纤维素、乳糖、淀粉、甘露醇中的一种或多种，并且基于所述口服制剂的总重量，所述填充剂的量为0％～69％(w/w)。

(8)根据(6)所述的口服制剂，其中所述崩解剂选自交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、羧甲基淀粉钠中的一种或多种，并且基于所述口服制剂的总重量，所述崩解剂的量为0％～5％(w/w)。

(9)根据(6)所述的口服制剂，其中所述润滑剂选自硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉中的一种或多种，并且基于所述口服制剂的总重量，所述润滑剂的量为0.5％～3％(w/w)。

(10)根据(1)所述的口服制剂，其中所述口服制剂为片剂的形式，其中所述活性成分在单剂片剂中的含量为0.5％～6.5％(w/w)。

(11)一种制备(1)至(10)中任一项所述的口服制剂的方法，包括以下步骤：

A)提供溶解有羟丙基-β-环糊精的第一溶液，该第一溶液的pH为1-2；

B)将KX2-361或其可药用的盐与所述第一溶液混合，制得溶解有KX2-361或其可药用的盐的第二溶液；

C)将所述第二溶液干燥，以得到干燥物。

(12)根据(11)所述的方法，其中，在所述第一溶液中，羟丙基-β-环糊精浓度为10％(w/v)至50％(w/v)。

(13)根据(11)所述的方法，其中，在所述第二溶液中，以KX2-361计，所述KX2-361或其可药用的盐的浓度为0.5mg/ml至15mg/ml，优选为0.5mg/ml至10mg/ml。

(14)根据(11)所述的方法，其中，在所述第二溶液中，所述KX2-361或其可药用的盐与羟丙基-β-环糊精的摩尔比为1:(4-59)。

(15)根据(11)所述的方法，其中，在步骤C)之前且步骤B)之后，还包括I)将所述第二溶液的pH调节至3-7。

(16)根据(11)所述的方法，其中，在步骤C)之后，还包括D)对所述干燥物进行压片。

(17)根据(16)所述的方法，其中，步骤D)包括将所述干燥物与选自填充剂、崩解剂、润滑剂中的一种或多种的赋形剂混合，然后进行所述压片。

(18)根据(17)所述的方法，其中，所述填充剂选自微晶纤维素、乳糖、淀粉、甘露醇中的一种或多种，并且基于所述口服制剂的总重量，所述填充剂的量为0％～69％(w/w)。

(19)根据(17)所述的方法，其中所述崩解剂选自交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、羧甲基淀粉钠中的一种或多种，并且基于所述口服制剂的总重量，所述崩解剂的量为0％～5％(w/w)。

(20)根据(17)所述的方法，其中所述润滑剂选自硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉中的一种或多种，并且基于所述口服制剂的总重量，所述润滑剂的量为0.5％～3％(w/w)。

(21)根据(11)所述的方法，其中，所述KX2-361的可药用的盐为KX2-361·单苯磺酸盐、KX2-361·二盐酸盐、KX2-361·单磷酸盐和/或KX2-361·二磷酸盐。

本发明与现有技术相比具有以下优点和积极效果：

1.本发明将羟丙基-β-环糊精与KX2-361或其可药用的盐混合，从而使其形成包合物，极大地提高了难溶性药物KX2-361的溶解度，并且与其他环糊精及其衍生物辅料、可供注射的表面活性剂溶液、可供注射的溶媒或复合溶媒相比，羟丙基-β-环糊精表现出了更强的增溶能力。

2.本发明通过将羟丙基-β-环糊精与KX2-361或其可药用的盐混合从而使其形成包合物，使得可将难溶的KX2-361或其可药用的盐配制成稳定的液体制剂，进而可由该液体制剂制成冻干制剂，并由此可制成多种可在临床上施用于患者的药物制剂，包括：静脉制剂(如静脉注射剂或静脉滴注剂)、口服制剂(如片剂)等。

3.本发明进一步对包合工艺进行了优化，并且对静脉制剂和口服制剂的载药配方进行了优化，使得可以得到各指标(包括药物复溶、放置稳定性、溶出度)均合格的可供直接静脉注射的药物制剂和可进行10倍以内稀释的静脉滴注制剂、以及口服制剂，并且实现了载药量的最大优化。这些药物制剂的稳定性好、安全性高、可吸收性好、生物利用度高、成本较为经济。

附图说明

图1示出本发明实施例7的处方B4口服片剂的血药浓度随时间变化的曲线图。其中横轴表示时间，单位为小时；纵轴表示对雄性比格犬以51mg/只的剂量(以KX2-361计)口服施用药物后，KX2-361的血浆浓度，单位为ng/ml。

具体实施方式

以下通过具体实施方式的描述并参照附图对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。

在本文中，术语“注射剂”是指：由药物制成的供注入体内的无菌溶液(包括真溶液、乳浊液和混悬液)，以及供临用前配制成所述无菌溶液(包括真溶液、乳浊液和混悬液)的冻干粉末或浓溶液。

在本文中，术语“静脉滴注”是指：通过输液管，将包含药物的大量液体由静脉输入体内的方法。又称“输液”、“点滴”、“静滴”、“挂水”。

在本文中，术语“静脉制剂”旨在涵盖“静脉注射剂”和“静脉滴注剂”，其中包括可用于配置静脉注射溶液和静脉滴注溶液的“冻干粉剂”。

在本文中，术语“口服制剂”是指：经口给予，且药物在胃肠道内吸收入血的制剂形式，包括片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服溶液剂等。

在本文中，术语“细胞增殖性疾病”包括专利文献WO2006/071960中描述的疾病，其是指细胞增殖失去控制和/或异常生长的状态，包括癌症的或非癌疾病。“癌症”包括实体肿瘤，如，肺癌，乳腺癌，结肠癌，卵巢癌，脑癌，肝癌，胰腺癌，前列腺癌，恶性黑素瘤，非-黑素瘤皮肤癌，恶性血液瘤，如，儿童的白血病和淋巴瘤，多样性骨髓瘤，何杰金病，淋巴细胞和原发性皮肤的淋巴瘤，急性和慢性白血病，如，急性成淋巴细胞、急性髓细胞或慢性髓细胞白血病，浆细胞赘生物，淋巴赘生物和跟AIDS相关的癌症。非癌疾病包括(例如)，银屑病，上皮的和皮样的囊肿，脂肪瘤，腺瘤，毛状的和皮肤的血管瘤，淋巴管瘤，蜘蛛痣病变，畸胎瘤，肾瘤，肌纤维瘤，成骨瘤和其他发育异常聚集及其他类似疾病。

在本文中，术语“包合物”是指一种药物分子结构被全部或部分包合入另一种物质的分子腔中而形成独特形式的络合物。包合物在药物制剂研究领域很活跃，在20世纪50年代，研究人员已经认识到包合物对药物的性质有影响，如包合物增加药物溶解度和稳定性、影响药物在体内的吸收、分布及起效时间等。

在本文中，术语“活性成分”是指对细胞增殖性疾病具有治疗作用的药物分子，例如本文所述的KX2-361或其可药用的盐。

本文所述的KX2-361的可药用盐包括(例如)KX2-361的苯磺酸盐、KX2-361的盐酸盐、KX2-361的磷酸盐等。本文所述的KX2-361的可药用盐可以是KX2-361的单盐或二盐形式，包括(例如)KX2-361·单苯磺酸盐、KX2-361·二盐酸盐、KX2-361·单磷酸盐和/或KX2-361·二磷酸盐。

在本文中，术语“包合成分”是指将药物分子的全部或部分结构包裹入其分子腔中的物质，例如本文所述的羟丙基-β-环糊精。

在本文中，术语“羟丙基-β-环糊精”是指倍他环糊精与1,2-环氧乙烷的醚化物；按无水物计算，羟丙氧基(-OCH₂CHOHCH₃)含量为19.6％～26.3％(参见2015年版中国药典第四部)。

一、药物组合物

KX2-361及其可药用的盐具有难溶于水的性质，本发明的发明人希望找到能够有效使其增溶的方法，从而将其制成可供临床使用的药物制剂。如上文所述，已知各种可以使药物增溶的方法，仅针对KX2-361或其可药用的盐而言，专利文献WO2006/071960也列举了多种增溶方式。然而，本发明的发明人发现这些针对KX2-361或其可药用的盐的增溶方式并不理想。并且困难的是，目前针对某种给定化合物的具体结构很难推测出哪种增溶方式或增溶用试剂在增溶能力上是最适用的。因此，针对KX2-361及其可药用的盐，本发明的发明人在药学上针对不同的增溶方式和不同的增溶用试剂进行了大量的研究筛选工作，最终发现采用包合技术能够有效地使KX2-361或其可药用的盐增溶，并且惊奇地发现最为适宜的包合剂为羟丙基-β-环糊精。

因此，本发明提供了一种药物组合物，包含羟丙基-β-环糊精和活性成分，所述活性成分为KX2-361或其可药用的盐，所述KX2-361由下式1表示：

优选地，在所述药物组合物中，所述活性成分与羟丙基-β-环糊精的摩尔比为1:(1-250)，优选为1:(4-59)，例如1:(9-59)，或例如1:(4-17)。

优选地，在所述药物组合物中，所述活性成分中含有的KX2-361与羟丙基-β-环糊精的质量比为(0.1～29):100，更优选为(0.5～5):100，例如：(2～2.5):100，(0.5～1.5):100，或(0.5～0.7):100等。

优选地，所述活性成分为KX2-361、KX2-361·单苯磺酸盐、KX2-361·二盐酸盐、KX2-361·单磷酸盐和/或KX2-361·二磷酸盐，其中优选为KX2-361·单苯磺酸盐。在本文中，除非特别说明，所述的“KX2-361·苯磺酸盐”指KX2-361·单苯磺酸盐，其分子量为563.64。

在本发明的药物组合物中，至少一部分所述羟丙基-β-环糊精可包裹至少一部分所述活性成分而形成药物包合物。其中在该药物包合物中，所述羟丙基-β-环糊精可形成两端开口的中空筒状结构，所述KX2-361或其可药用的盐能被全部或部分包裹在所述筒状结构中。

优选地，本发明的药物组合物还包含可药用的赋形剂。

所述赋形剂可以根据所需剂型进行选择。例如，剂型为静脉制剂时，所述赋形剂可以为选自甘露醇、乳糖、右旋糖苷、木糖醇、山梨醇、葡萄糖和氯化钠中的一种或多种。另外，剂型为口服制剂时，所述赋形剂还可以为选自填充剂、崩解剂、润滑剂中的一种或多种。填充剂可选自微晶纤维素、乳糖、淀粉、甘露醇等中的一种或多种，崩解剂可选自交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、羧甲基淀粉钠等中的一种或多种，润滑剂可选自硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉等中的一种或多种。

本发明还提供了所述的药物组合物在制备用于治疗细胞增殖性疾病的药物中的应用。

二、药物包合物

另一方面，本发明还提供了一种药物包合物，包含活性成分和包裹该活性成分的包合成分，其中，所述包合成分为羟丙基-β-环糊精，所述活性成分为KX2-361或其可药用的盐，所述KX2-361由下式1表示：

在该药物包合物中，所述羟丙基-β-环糊精可形成两端开口的中空筒状结构，所述KX2-361或其可药用的盐能被全部或部分包裹在所述筒状结构中。

三、静脉制剂

另一方面，本发明还提供了一种用于治疗细胞增殖性疾病的静脉制剂，其包含本发明所述的药物组合物。

优选地，在所述静脉制剂中，所述活性成分与羟丙基-β-环糊精的摩尔比为1:(1-250)，更优选为1:(9-59)，例如为1:(9-15)，1:(12-59)，1:(16-53)，1:(31-56)等。

优选地，在所述静脉制剂中，所述活性成分中含有的KX2-361与羟丙基-β-环糊精的质量比为(0.1～29):100，更优选为(0.5～2.5):100，例如：(2～2.5):100，(0.5～2):100，(0.5～1.5):100，或(0.5～0.7):100等。

本发明的静脉制剂可以包含赋形剂，所述赋形剂优选选自甘露醇、乳糖、右旋糖苷、木糖醇、山梨醇、葡萄糖和氯化钠中的一种或多种。

所述静脉制剂可以为冻干粉剂的形式，也可以为液体制剂的形式。当为液体制剂时，在所述液体制剂中，羟丙基-β-环糊精的浓度可以为100mg/ml至500mg/ml，优选为200mg/ml至400mg/ml；以KX2-361计，所述KX2-361或其可药用的盐的浓度可以为0.5mg/ml至5mg/ml，优选为1.4mg/ml至4.3mg/ml。

可以用注射用溶液将所述冻干粉剂复溶以制备液体制剂。注射用溶液可以采用本领域已知的任何注射用溶液，例如可以为缓冲盐水溶液、葡萄糖水溶液、氯化钠水溶液或乳酸林格氏液。缓冲盐水溶液例如可以为枸橼酸盐缓冲液、乙酸-乙酸钠缓冲液、磷酸盐缓冲液等；葡萄糖水溶液例如可以为5％(w/v)葡萄糖水溶液；氯化钠水溶液例如可以为0.9％(w/v)氯化钠水溶液。优选地，所述缓冲盐水溶液为pH4.0的缓冲盐水溶液，例如pH4.0的枸橼酸盐缓冲液。

另一方面，本发明还提供了一种制备本发明所述的静脉制剂的方法，包括以下步骤：

1)提供溶解有羟丙基-β-环糊精的第一溶液，该第一溶液为水溶液，pH为1-2；

2)将KX2-361或其可药用的盐与所述第一溶液混合，制得溶解有KX2-361或其可药用的盐的第二溶液。

优选地，在所述第一溶液中，羟丙基-β-环糊精的浓度为10％(w/v)至50％(w/v)，更优选为20％(w/v)至40％(w/v)，还更优选为30％(w/v)至40％(w/v)。如果羟丙基-β-环糊精浓度低于10％(w/v)，则包合药物的量过低；如果高于50％(w/v)，则配成的溶液粘度过大，无法进行冷冻干燥。所述第一溶液可以含有pH调节剂，所述pH调节剂可以为盐酸等强酸性溶液。

优选地，在所述第二溶液中，以KX2-361计，所述KX2-361或其可药用的盐的浓度为0.5mg/ml至5mg/ml，优选为1.4mg/ml至4.3mg/ml。如果KX2-361的浓度低于0.5mg/ml，则包合药物的量过低；如果高于5mg/ml，则制得的冻干粉在复溶后，所得复溶溶液以及与其他稀释介质形成的溶液的稳定性差，药物易析出。所述KX2-361的可药用的盐可以为KX2-361·单苯磺酸盐、KX2-361·二盐酸盐、KX2-361·单磷酸盐和/或KX2-361·二磷酸盐，其中优选为KX2-361·单苯磺酸盐。

优选地，在所述第二溶液中，所述KX2-361或其可药用的盐与羟丙基-β-环糊精的摩尔比为1:(1-250)，更优选为1:(9-59)。

关于所述第一溶液的pH，由于KX2-361或其可药用的盐对酸不稳定，因此如果其pH值低于1，则会导致酸降解杂质显著增加；如果其pH值高于2，则药物的溶解速度慢，溶解时间明显增加，一方面给生产带来了很多不便，同时也增加了酸降解杂质的量。更优选地，所述第一溶液的pH为1.2-2.0。

在本发明所述方法的第2)步中，即获得了本发明所述的药物包合物。

在本发明所述方法的第2)步中，所述混合包括通过搅拌混合或通过超声混合。

还优选地，本发明所述方法还包括3)冷冻干燥所述第二溶液，以制得冻干粉剂。冷冻干燥可以采用本领域常规的方法进行。

还优选地，在第3)步之前且第2)步之后，还包括i)将所述第二溶液的pH调节至3-7的步骤，更优选调节至4-6。该回调pH的步骤有利于避免由于后续冷冻干燥工艺时间长以及冻干样品中的酸残留而造成的药物降解。可选用的pH调节剂包括如NaOH水溶液等碱溶液。在该调节pH的步骤中，如果将pH调节至超过7，则羟丙基-β-环糊精对KX2-361或其可药用的盐的包裹效果较差，KX2-361或其可药用的盐容易析出。在该调节pH的步骤中，如果将pH调节至低于3，由于KX2-361结构易在酸中开环降解，降解杂质将明显增加，所制得的制剂不稳定。

还优选地，在第3)步之前且第2)步之后，还包括ii)无菌过滤的步骤。无菌过滤的方法是本领域公知的，例如可以用滤膜过滤，例如用0.22μm的滤膜对活微生物进行物理截留。

无菌过滤后得到的溶液可直接灌装成小容量注射剂，也可以进行冷冻干燥，得到冻干粉剂。可将冻干粉剂进行复溶得到注射液，用于注射给药，也可以用大容量稀释剂将冻干粉剂进行稀释，得到滴注液，用于滴注给药。

还优选地，在第ii)步之前且第i)步之后，还包括去除热原的步骤。去除热原的方法是本领域公知的，例如加入活性炭去除热原，并过滤除去活性炭。

在本发明的一个具体实施方案中，所述制备本发明所述的静脉制剂的方法，包括以下依次进行的步骤：

a)取适量浓盐酸加注射用水，制备pH为1.2～2.0的盐酸溶液；

b)向a)所得盐酸溶液中加入处方量的羟丙基-β-环糊精，搅拌使溶解；再加入处方量的KX2-361或其可药用的盐，搅拌或超声使其溶解；

c)用氢氧化钠水溶液调节b)步骤所得溶液的pH值至4.0-6.0；

d)加入活性炭吸附除去热原，过滤除炭；

e)无菌过滤；

f)冷冻干燥。

作为本发明的一个优选实施方案，上述步骤f)中的冷冻干燥工艺是在对真空度和温度进行控制的条件下进行的，温度控制过程可为(例如)：在-40℃至-50℃保温2-5小时；用5-7小时升温至-20℃，并保温5-7小时；用5-7小时升温至0℃，并保温5-7小时；用5-7小时升温至10℃，并保温5-8小时，至样品干燥。

在本发明的又一个优选实施方案中，当羟丙基-β-环糊精的浓度为10％(w/v)时，KX2-361或其可药用的盐与羟丙基-β-环糊精的摩尔比为1:(31-56)；当羟丙基-β-环糊精的浓度为20％(w/v)时，KX2-361或其可药用的盐与羟丙基-β-环糊精的摩尔比为1:(16-53)；当羟丙基-β-环糊精的浓度为30％(w/v)时，KX2-361或其可药用的盐与羟丙基-β-环糊精的摩尔比为1:(12-59)；当羟丙基-β-环糊精的浓度为40％(w/v)时，KX2-361或其可药用的盐与羟丙基-β-环糊精的摩尔比为1:(9-15)。

在制备静脉制剂的液体制剂时，所述方法还包括用注射用溶液将所述冻干粉剂复溶的步骤。可以采用本领域已知的任何注射用溶液，例如可以为缓冲盐水溶液、葡萄糖水溶液、氯化钠水溶液或乳酸林格氏液。缓冲盐水溶液例如可以为枸橼酸盐缓冲液、乙酸-乙酸钠缓冲液、磷酸盐缓冲液等；葡萄糖水溶液例如可以为5％(w/v)葡萄糖水溶液；氯化钠水溶液例如可以为0.9％(w/v)氯化钠水溶液。优选地，所述缓冲盐水溶液为pH4.0的缓冲盐水溶液，例如pH4.0的枸橼酸盐缓冲液。

在本发明在静脉制剂的研究中，对包合工艺进行了优化，从而对载药配方实现了优化，最终得到了各指标均合格的可供直接静脉注射的配方，和可进行10倍以内稀释后静滴的配方。静注或静滴给药后，药物在血管中的行为可通过动态、静态模拟试验检测，并且发明人发现均不存在析出沉淀的现象。因此本发明提供了可以安全注射给药的制剂配方。本发明还对冻干粉剂进行了初步稳定性试验，试验结果显示在40℃、25℃条件下放置3个月后，制剂均稳定。

四、口服制剂

另一方面，本发明还提供了一种用于治疗细胞增殖性疾病的口服制剂，包含羟丙基-β-环糊精和活性成分，所述活性成分为KX2-361或其可药用的盐，所述KX2-361由下式1表示：

优选地，在所述口服制剂中，所述活性成分与羟丙基-β-环糊精的摩尔比为1:(1-250)，更优选为1:(4-59)，还更优选为1:(4-17)。

还优选地，在所述口服制剂中，以KX2-361计，所述活性成分中含有的KX2-361与羟丙基-β-环糊精的质量比为(0.1～29):100，更优选为(0.5～5):100，还更优选为(1.7～5):100。

在本发明的口服制剂中，至少一部分所述羟丙基-β-环糊精可包裹至少一部分所述活性成分而形成药物包合物。其中在该药物包合物中，所述羟丙基-β-环糊精可形成两端开口的中空筒状结构，所述KX2-361或其可药用的盐能被全部或部分包裹在所述筒状结构中。

优选地，本发明的口服制剂还包含可药用的赋形剂。所述可药用的赋形剂可选自填充剂、崩解剂、润滑剂中的一种或多种。

所述填充剂可选自微晶纤维素(MCC)、乳糖、淀粉、甘露醇等中的一种或多种，其中优选为乳糖；基于所述口服制剂的总重量，所述填充剂的量优选为0％～69％(w/w)。崩解剂可选自交联羧甲基纤维素钠(CC-Na)、交联聚维酮(PVPP)、羧甲基淀粉钠等中的一种或多种，其中优选为交联羧甲基纤维素钠；基于所述口服制剂的总重量，所述崩解剂的量优选为0％～5％(w/w)。润滑剂可选自硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉等中的一种或多种，其中优选为硬脂酸镁；基于所述口服制剂的总重量，所述润滑剂的量为0.5％～3％(w/w)。

优选地，所述口服制剂为片剂的形式，其中所述活性成分在单剂片剂中的含量为0.5％～6.5％(w/w)。

在本发明的一个具体实施方案中，本发明的片剂含有：约1％(w/w)的KX2-361·单苯磺酸盐，大于28.6％(w/w)且小于29％(w/w)的羟丙基-β-环糊精，约64％(w/w)的乳糖，约5％(w/w)的交联羧甲基纤维素钠，约1％(w/w)的硬脂酸镁，以及大于0且小于0.4％(w/w)的NaCl。

另一方面，本发明还提供了一种制备本发明所述的口服制剂的方法，包括以下步骤：

C)将所述第二溶液干燥，以得到干燥物。

优选地，在所述第一溶液中，羟丙基-β-环糊精浓度为10％(w/v)至50％(w/v)，更优选为20％(w/v)至40％(w/v)，还更优选为30％(w/v)至40％(w/v)。如果羟丙基-β-环糊精浓度低于10％(w/v)，则包合药物的量过低；如果高于50％(w/v)，则配成的溶液粘度过大，无法进行干燥(例如冷冻干燥)。所述第一溶液可以含有pH调节剂，所述pH调节剂可以为盐酸等强酸性溶液。

优选地，在所述第二溶液中，以KX2-361计，所述KX2-361或其可药用的盐的浓度为0.5mg/ml至15mg/ml，优选为3.6mg/ml至15mg/ml，更优选为5mg/ml至10mg/ml。如果KX2-361的浓度低于0.5mg/ml，则包合药物的量过低；如果高于15mg/ml，则包合体系稳定性差，药物易析出。所述KX2-361的可药用的盐可以为KX2-361·单苯磺酸盐、KX2-361·二盐酸盐、KX2-361·单磷酸盐和/或KX2-361·二磷酸盐，其中优选为KX2-361·单苯磺酸盐。

优选地，在所述第二溶液中，所述KX2-361或其可药用的盐与羟丙基-β-环糊精的摩尔比为1:(1-250)，更优选为1:(4-59)，还更优选为1:(4-17)。

在本发明所述方法的步骤B)中，所述混合包括通过搅拌混合或通过超声混合。

在本发明所述方法的步骤C)中，所述干燥的例子为冷冻干燥和喷雾干燥等。冷冻干燥和喷雾干燥可以采用本领域常规的方法进行。

还优选地，在步骤C)之前且步骤B)之后，还包括I)将所述第二溶液的pH调节至3-7，更优选调节至4-6。该回调pH的步骤有利于避免由于后续冷冻干燥工艺时间长以及冻干样品中的酸残留而造成的药物降解。可选用的pH调节剂包括如NaOH水溶液等碱溶液。在该调节pH的步骤中，如果将pH调节至超过7，则羟丙基-β-环糊精对KX2-361或其可药用的盐的包裹效果较差，KX2-361或其可药用的盐容易析出。如果将pH调节至低于3，由于KX2-361结构易在酸中开环降解，降解杂质将明显增加，所制得的制剂不稳定。

还优选地，在步骤C)之前且步骤B)之后，还包括III)过滤的步骤。过滤的方法是本领域公知的，例如可以用滤膜过滤来获得澄清溶液，例如0.8μm的滤膜。

优选地，在步骤C)之后，还包括D)对所述干燥物进行压片。具体而言，步骤D)包括将所述干燥物与选自填充剂、崩解剂、润滑剂中的一种或多种的赋形剂混合，然后进行所述压片。

在本发明的一个具体实施方案中，所述制备本发明所述的口服制剂的方法包括以下依次进行的步骤：

①取适量浓盐酸加注射用水，制备pH为1.2～2.0的盐酸溶液；

②向步骤①所得盐酸溶液中加入处方量的羟丙基-β-环糊精，搅拌使溶解；再加入处方量的KX2-361或其可药用的盐，搅拌或超声使其溶解；

③用氢氧化钠水溶液调节步骤②所得溶液的pH值至4.0-6.0；

④过滤；

⑤冷冻干燥；

⑥将步骤⑤所得冻干粉过筛；

⑦将步骤⑥所得过筛物与选自填充剂、崩解剂、润滑剂中的一种或多种的赋形剂混合；

⑧压片。

作为本发明的一个优选实施方案，上述步骤⑤中的冷冻干燥工艺是在对真空度和温度进行控制的条件下进行的，温度控制过程可为(例如)：-40℃至-50℃保温2-5小时；用5-7小时升温至-20℃，并保温5-7小时；用5-7小时升温至0℃，并保温5-7小时；用5-7小时升温至10℃，并保温5-8小时，至样品干燥。

在制备本发明所述的口服制剂的方法的又一个优选实施方案中，以KX2-361计，当羟丙基-β-环糊精的浓度为10％(w/v)-30％(w/v)时，KX2-361或其可药用的盐的浓度为0.5mg/ml至6mg/ml；以KX2-361计，当羟丙基-β-环糊精的浓度为40％(w/v)-50％(w/v)时，KX2-361或其可药用的盐的浓度为0.5mg/ml至10mg/ml。

本发明的口服制剂是在本发明的冻干粉剂的基础上进一步开发而来的片剂。本发明对包合工艺进行了优化，以包合溶液的放置稳定性、有关物质、溶出度等作为评价指标，对载药配方实现了载药量的最大优化。最终采用在pH 1-2的溶液中包合KX2-361或其可药用的盐(活性成分)，再回调pH的工艺，并采用冷冻干燥技术制备冻干粉剂，使得活性成分的包合浓度以KX2-361计，可达10mg/ml。本发明的口服片剂取得了较高的生物利用度。另外，对片剂也进行了溶出度、有关物质等关键指标的检测，均合格。

例子

以下除非特别说明，否则各试剂的百分浓度(％)均指该试剂的重量(g)/体积(100mL)百分浓度(％(w/v))，例如，HP-β-CD的浓度为40％是指该HP-β-CD的浓度为40％(w/v)。

以下例子中提及乙醇时，除非特别指明浓度，否则是指95％(v/v)的乙醇水溶液。

缩写如下：

KX2-361·BSA：KX2-361·苯磺酸盐

HP-β-CD：羟丙基-倍他-环糊精

SBE-β-CD：磺丁基醚-倍他-环糊精

API：Active Pharmaceutical Ingredient(活性药物成分)(除非特别说明，下文均指KX2-361·BSA)

PTFE：聚四氟乙烯

以下各例子中所用的材料和设备购买信息如下：

实施例1：注射用KX2-361·苯磺酸盐冻干剂和复溶溶液的制备及评价(HP-β-CD浓度为30％，高载药量)

制备以下组成的处方：

注：HP-β-CD的分子量为1431～1806，因此计算摩尔比时分别取其分子量的上下限来进行计算。

依次按照以下步骤制备上述处方：

1)将1.8mL浓盐酸置于200mL容量瓶中，用蒸馏水定容至200mL，得pH约为1.2的盐酸溶液(浓度为0.1mol/L，下同)。

2)按上述处方量分别称取HP-β-CD，分别加入三个50mL容量瓶。加入1)所得溶液，超声(超声频率59kHz)溶解并用上述盐酸溶液定容至约46mL。

3)按上述处方量分别称取API(KX2-361·苯磺酸盐)，分别加入上述HP-β-CD溶液中，超声(超声频率59kHz)溶解。

4)用5N NaOH水溶液和0.1N NaOH水溶液将3)所得溶液分别调pH至6.0左右(±0.05)。用蒸馏水将溶液定容至50mL。

5)用0.45μm聚醚砜滤膜过滤并将三种处方溶液分别分装于10mL西林瓶中(以2mL体积分装)，进行冷冻干燥。

冻干曲线如下：

阶段	温度(℃)	真空控制(Pa)	时间(分钟)	真空泵状态	冷凝器预冻(℃)
						1	-40	不开启	5	关闭	-40
2	-40	不开启	120	关闭
						3	-40	20±2	360	开启
4	-20	20±2	360	开启
						5	-20	10±2	360	开启
6	0	10±2	360	开启
						7	0	10±2	360	开启
8	10	不控制	360	开启
						9	10	不控制	120	开启

冷冻干燥后样品状态：

样品成型性较好。冻干样品均呈淡黄色疏松固体。

将上述三个处方(处方A1、A2、A3)的冻干样品进行复溶，并评价其复溶情况、不溶性微粒及稀释稳定性。

1、用水及缓冲盐水溶液进行复溶

复溶方法为：向每种冻干样品的每支西林瓶中分别加入2mL的下述复溶介质，加完之后上下颠倒30次，如不溶解则振摇至溶解为止。在加入缓冲盐水溶液后开始计时，同时进行两个重复。

缓冲盐成分组成如下：

注：c表示配制成缓冲盐的溶质的摩尔浓度。

复溶时间如下：

注：各处方复溶时间取2个重复的平均值

不溶性颗粒(检测方法参照中国药典2015版第四部0903不溶性微粒检查法第一法光阻法，以下同)如下：

注：不溶颗粒为取两份样品分别检测所得结果的平均值，分别测量0小时和4小时后的不溶颗粒。

由上述结果可知含30％HP-β-CD的样品用不同pH缓冲盐复溶时，其复溶时间均比用纯水复溶的约4分钟缩短到约2.5分钟。30％HP-β-CD的样品用pH＝4.0缓冲盐复溶时不溶颗粒情况均较好，其中处方A2在三种缓冲盐复溶时不溶颗粒情况均较好。

另外，根据中国药典标准，任何小于100mL的容器中≥10μm的不溶颗粒不得超过6000，≥25μm的不溶颗粒不得超过600。由于上表所示不溶性颗粒的试验结果是1mL溶液的检测值，因此，处方A1-A3均适合进一步研制成体积放大的(从药物的有效性及安全性考虑其规格)、可以达到较大的单次给药剂量且符合中国药典标准的成品药物制剂。

2、用5％葡萄糖水溶液和0.9％氯化钠水溶液进行复溶

复溶方法为：向每种冻干样品的每支西林瓶中分别加入2mL下述复溶介质，加完之后上下颠倒30次，如不溶解则振摇至溶解为止。在加入复溶介质后开始计时，同时进行两个重复。

复溶时间如下：

复溶介质	处方A1	处方A2	处方A3
				5％葡萄糖水溶液	约3分钟	约3分钟	约3分钟
0.9％氯化钠水溶液	约3分钟	约3分钟	约3分钟

注：各处方复溶时间取2个重复的平均值

不溶性颗粒如下：

上述结果说明，与用5％葡萄糖水溶液和0.9％氯化钠水溶液复溶的效果相比，用pH 4.0缓冲盐水溶液复溶的效果更好。

实施例2：注射用KX2-361·苯磺酸盐冻干剂和复溶溶液的制备及评价(HP-β-CD浓度为30％，低载药量)

制备以下组成的处方：

依次按照以下步骤制备上述处方：

1)将1.8mL浓盐酸置于200mL容量瓶中，用蒸馏水定容至200mL，得pH约为1.2的盐酸溶液。

2)按上述处方量分别称取HP-β-CD，分别加入三个25mL容量瓶。加入1)所得溶液，超声(超声频率59kHz)溶解并用上述盐酸溶液定容至约23mL。

3)按上述处方量分别称取API，分别加入上述HP-β-CD溶液中，对于处方A6加入枸橼酸50.7mg，超声(超声频率59kHz)溶解。

4)用5N NaOH水溶液和0.1N NaOH水溶液将3)所得溶液分别调pH至上表所示(±0.05)。用蒸馏水将溶液定容至25mL。

5)用0.45μm聚醚砜滤膜过滤并将三种处方溶液分别分装于10mL西林瓶中(每瓶2mL)，进行冷冻干燥。

冷冻干燥后样品状态：样品成型性较好。冻干样品均呈蓬松雪状固体。

将上述三个处方(处方A4、A5、A6)的冻干样品进行复溶，并评价其在5％葡萄糖水溶液和生理盐水中的复溶情况和不溶性颗粒情况。

复溶方法为：向每种冻干样品的每支西林瓶中分别加入2mL的下述复溶介质，加完之后上下颠倒30次，如不溶解则振摇至溶解为止。在加完复溶介质后开始计时，重复测定两份样品，复溶时间如下：

注：各处方复溶时间取两份样品检测结果的平均值

不溶性颗粒如下：

注：不溶颗粒为两份样品分别检测得到结果的平均值。

将上述三个处方(处方A4、A5、A6)的冻干样品分别用下表中所述复溶介质进行复溶，复溶后药物溶液在相同的介质中按照一定比例进行稀释，稀释比例(复溶后溶液体积:稀释介质体积)分别为1:2,1:5,1:10，对稀释后的溶液检测0时和4小时的不溶性颗粒。稀释后的不溶颗粒如下：

观察上述样品的稀释情况可知，4小时均没有API析出。3种处方均有潜力可以通过加配过滤器进行稀释后药液的静脉滴注。

选取30％HP-β-CD浓度的高载药量配方A2和低载药量配方A5进行如下试验。

试验例1：放置8天后的不溶性微粒及渗透压测定

按照实施例1和实施例2所述的方法，以200mL的批量分别重新制备处方A2和处方A5。处方A2(30％HP-β-CD+6mg/mL API)和处方A5(30％HP-β-CD+2mg/mL API)的冻干样品在4℃保存8天后，检测不溶性微粒，结果如下：

注：n＝10表示针对每种处方检测了10份样品，不溶颗粒为10份样品分别检测得到结果的平均值。

上表结果表明，两个配方的冻干粉在4℃放置8天后，复溶后不溶性微粒仍合格。

对肾及心肺功能差的老年、婴幼儿患者输等渗液容易造成电解质潴留而出现水肿等严重合并症，故儿科临床上把等渗输液称为“危险输液”。由于人体体表蒸发、肺呼出等形式不断失水，一般在低渗输液区的安全范围较宽，低渗输液量的安全幅度较大，低渗输液使用的范围较广。因此，进行了用低渗溶液进行的稀释稳定性试验及渗透压测定。取处方A5(30％HP-β-CD+2mg/mL API)冻干样品，每支西林瓶用2mL蒸馏水复溶后，按不同比例以低渗溶液(0.45％氯化钠水溶液和2.5％葡萄糖水溶液)进行稀释，测不溶性微粒和渗透压。

结果如下：

渗透压测定结果如下：

注：渗透压为取两份样品分别检测所得结果的平均值。

一般等渗溶液的渗透压摩尔浓度为280～320mOsm，可见处方A5经低渗溶液以不同比例稀释后，其溶液的渗透压较低，其不溶性微粒检测结果也较好。

试验例2：3个月稳定性考察

将处方A2和A5的冻干样品于25摄氏度和40摄氏度恒温箱中放置3个月，进行稳定性考察。对于每种条件各取两份样品，利用HPLC考察API含量％、有关物质(即，API降解所得物质)，并且考察不溶性微粒，见表1和表2。

含量及有关物质HPLC测定条件如下：

表1冻干制剂的3个月稳定性考察-含量％及总杂％

从上表可见，两个冻干粉剂的含量在3个月内基本没有变化，从杂质谱上看，出现了3个新增降解杂质，总杂量略有增加，但均在可接受范围内。

取处方A2和处方A5在25℃和40℃放置三个月时间内表2所示时间点的样品，进行不溶性微粒检测，详见下表：

表2冻干制剂的3个月稳定性考察-不溶性微粒

注：n＝2表示针对每种处方检测了2份样品，不溶颗粒为2份样品分别检测得到结果的平均值。

可见，两个处方均分别在25℃和40℃放置3个月，不溶性微粒试验结果均较好。

试验例3：动态吸附试验

将处方A2和处方A5的冻干样品加注射用水复溶，将处方A2配成6mg/mL的药物浓度，将处方A5配成2mg/mL的药物浓度，之后模拟其注射入血管的状态，考察其在生理条件下的物理稳定性，推测其静脉给药后析出沉淀的可能性。

一、试验操作：利用蠕动泵使5％BSA(牛血清蛋白)以5ml/分钟的流速通过1.6mm内径的柔性管(Longerpump，14#)。将复溶后的上述药物溶液通过插入距柔性管末端30cm处的针注入到柔性管中，利用注射器泵来控制样品注入的速率，注入速率为0.2～5ml/分钟(见表3)。待药物溶液、5％BSA溶液以一定速率混匀后，在柔性管末端接取流出液：

(1)取流出液4ml，以紫外分光光度计测定在540nm处的吸光度值，检测沉淀物的出现，以空白制剂(30％羟丙基-β-环糊精水溶液)与5％BSA的混合溶液作为对照；

(2)取流出液1ml，加入乙腈9ml，涡旋5分钟，0.45μm尼龙滤膜过滤，取续滤液作为100％浓度的样品，以HPLC检测。

取流出液4ml，0.45μm聚醚砜滤膜过滤，取续滤液1ml，加入乙腈9ml，涡旋5分钟，0.45μm尼龙滤膜过滤，取续滤液1ml作为待测样品，以HPLC检测。待测样品与100％浓度样品的比值即为样品中未析出的API的比例。

二、试验结果：

表3动态析出试验结果(n＝2)

注：n＝2表示针对每种处方检测了2份样品，试验结果为2份样品分别检测得到结果的平均值。

沉淀物的检测及药物含量检测结果见上表。由结果可见，各组的紫外吸收值均很低，说明3个制剂以不同速率注入5％BSA后，均无明显的沉淀析出。样品流出液过滤后，药物基本全部存在于滤液中，说明其并未析出。

由本试验的结果可以看出，试验所考察的处方A2和处方A5与模拟血浆的相容性良好，其静脉滴注或推注后析出沉淀的风险均较小。

试验例4：静态吸附试验

为了更充分的验证动态吸附实验的结论，又做了一个静态吸附实验。

稀释液1为含50mmol/L NaH₂PO₄的PBS(pH7.4的磷酸盐缓冲液)溶液，以此稀释液1溶解BSA(牛血清白蛋白)制成5％BSA稀释液2。

取处方A5(30％HP-β-CD+2mg/mL API，最终pH＝4.0)和处方A2(30％HP-β-CD+6mg/mL API，最终pH＝6.0)冻干样品，分别用2mL蒸馏水复溶。以上述两种稀释液1和2稀释不同的倍数(体积比)，观察样品是否析出，每个稀释倍数下的稀释试验均重复一次。结果如下：

实验结果表明，处方A5用PBS(pH＝7.4)和含5％BSA的PBS(pH＝7.4)稀释不同比例均未明显析出固体。该结果进一步验证了处方A5可采取以10倍以内稀释后再静脉滴注的方式来给物。

处方A2用PBS(pH＝7.4)(稀释液1)按1:5和1:10稀释时在半小时内均析出固体，而用含5％BSA的PBS(pH＝7.4)(稀释液2)稀释相同比例在2小时内无明显析出。在16小时后，稀释液1稀释组有大量固体析出，稀释液2稀释组析出固体较少。实验结果表明BSA结合了部分药物，阻止了药物的析出。动态吸附试验结果为，处方A2在不同的滴注速度下均没有药物析出，因此认为该处方按69.5mg剂量给药时采用静脉推注(推注11.6mL，可推注2～3分钟)的方式是可行的。

实施例3：注射用KX2-361·苯磺酸盐冻干剂和复溶溶液的制备及评价(HP-β-CD浓度为20％，较高载药量)

制备以下组成的处方：

依次按照以下步骤制备上述处方：

2)按上述处方量分别称取HP-β-CD，分别加入两个25mL容量瓶。加入1)所得溶液，超声(超声频率59kHz)溶解并用上述盐酸溶液定容至约23mL。

3)按上述处方量分别称取API，分别加入上述HP-β-CD溶液中，超声(超声频率59kHz)溶解。

4)用5N NaOH水溶液和0.1N NaOH水溶液将3)所得溶液分别调pH至6.0左右(±0.05)。用蒸馏水将溶液定容至25mL。

5)用0.45μm聚醚砜滤膜过滤并将两种处方溶液分别分装于10mL西林瓶中(按2mL体积分装)，进行冷冻干燥。

冻干曲线如下：

冷冻干燥后样品状态：样品成型性较好。冻干样品均呈白色蓬松雪状固体。

将上述两个处方(处方A7和A8)的冻干样品进行复溶，并评价其复溶情况和不溶性微粒。

复溶方法为：向每种冻干样品的每支西林瓶中分别加入2mL的水及下述缓冲盐水溶液，加完之后上下颠倒30次，如不溶解则振摇至溶解为止。在加完复溶介质后开始计时，同时进行两个重复。

缓冲盐成分组成如下：

pH(理论/实际)	成分	理论称量/实际称量	浓度
				4.0/4.00	一水合枸橼酸	210.14mg/211.4mg	c＝0.01mmol/L
5.0/5.01	三水合乙酸钠	136.08mg/137.4mg	c＝0.01mmol/L
				6.0/6.00	二水合磷酸二氢钠	156.06mg/156.6mg	c＝0.01mmol/L

复溶时间如下：

注：各处方复溶时间取2个重复的平均值

不溶性颗粒如下：

注：各处方不溶颗粒为两瓶合并测量，分别测量0小时和4小时后的不溶颗粒。

由上述结果可知含20％HP-β-CD的样品用不同pH缓冲盐复溶时，其复溶时间均比用纯水复溶的约3分钟缩短到约1.5分钟。而且，处方A8在pH4.0及pH5.0缓冲盐水溶液中复溶后的不溶性颗粒试验的结果较处方A7更优。

实施例4：注射用KX2-361·苯磺酸盐冻干剂和复溶溶液的制备及评价(HP-β-CD浓度为20％，低载药量，包合pH值为1.2)

制备以下组成的处方：

依次按照以下步骤制备上述处方：

1)将1.8mL浓盐酸置于200mL容量瓶中，用蒸馏水定容至200mL，得pH＝1.21的盐酸溶液。

2)按上述处方量称取HP-β-CD，加入25mL容量瓶。加入1)所得溶液，超声(超声频率59kHz)溶解并用上述盐酸溶液定容至约23mL。

3)按上述处方量称取API，加入上述HP-β-CD溶液中，超声(超声频率59kHz)溶解。

4)用5N NaOH水溶液和0.1N NaOH水溶液将3)所得溶液调pH至4.0左右(±0.05)。用蒸馏水将溶液定容至25mL。

5)用0.45μm聚醚砜滤膜过滤并将处方溶液分装于10mL西林瓶中(每瓶2mL)，进行冷冻干燥。

冻干曲线如下：

冷冻干燥后样品状态：样品成型性较好。冻干样品呈淡黄色蓬松雪状固体。

取处方A9冻干样品的两支西林瓶，分别用2mL生理盐水(即0.9％氯化钠水溶液)和5％葡萄糖水溶液复溶，再用对应溶液稀释，检测不溶性微粒，每个稀释倍数下的稀释试验均重复一次。结果如下：

由上表可知，处方A9复溶后，用相同介质进行2倍内稀释得到的溶液稳定性较好，多倍稀释则体系不稳定，容易析出固体。因此，处方A9可采取复溶后直接给予药物的方式，也可以在复溶后进行2倍体积内稀释后再给予药物。

实施例5：注射用KX2-361·苯磺酸盐冻干剂的制备及评价(HP-β-CD浓度为20％，低载药量，包合pH值为2)

制备以下组成的处方：

依次按照以下步骤制备上述处方：

1)将0.18mL浓盐酸置于200mL容量瓶中，用蒸馏水定容至200mL，得pH＝2.03的盐酸溶液。

2)按上述处方量称取HP-β-CD，分别加入25mL容量瓶。加入1)所得溶液，超声(超声频率59kHz)溶解并用上述盐酸溶液定容至约23mL。

3)按上述处方量称取API，分别加入上述HP-β-CD溶液中，在40℃下分别搅拌1.5小时(处方10)和1小时(处方11)左右溶解。

4)用5N NaOH水溶液和0.1N NaOH水溶液将3)所得溶液分别调pH至4.0左右(±0.05)。用蒸馏水将溶液定容至25mL。

5)用0.45μm聚醚砜滤膜过滤并将两种处方溶液分装于10mL西林瓶中(每瓶2mL)，进行冷冻干燥。

冻干曲线如下：

冷冻干燥后样品状态：样品成型性较好。冻干样品呈浅黄色接近白色蓬松雪状固体。

试验例5：处方A9-A11的性质研究

1、复溶试验和不溶性颗粒的检验

本试验例考察了处方A9-A11在5％葡萄糖水溶液、蒸馏水和生理盐水(即0.9％氯化钠注射液)中的复溶情况和不溶性颗粒情况。

复溶方法为：向每种冻干样品的每支西林瓶中分别加入下述体积的复溶介质，加完之后上下颠倒30次，如不溶解则振摇至溶解为止。在加完复溶介质后开始计时。

复溶时间如下：

不溶性颗粒如下：

注：各处方复溶时间取2瓶平均值，不溶颗粒为两瓶合并测量，分别测量0小时和4小时后的不溶颗粒。

由试验中的现象和试验结果可知，当包合pH提高到2.03后，包合难度增加(例如，需要在40℃下搅拌1小时以上)，且冻干后复溶溶液的不溶性微粒较pH＝1.2包合时有所增加。但处方A9-A11的不溶性微粒情况均符合制备静脉注射剂的要求。

2、不同pH包合样品的稳定性：

取处方A9-A11冻干样品，分别用水配制成浓度为0.1mg/mL的溶液各两瓶，用HPLC测其有关物质(方法详见试验例2中所述的含量及有关物质HPLC测定条件)，结果如下。

由上表可见，相对于处方A9而言，处方A10和A11的总杂并没有显著降低。考虑到与pH1.2包合工艺相比，包合pH2时包合时间明显增加，包合难度较大，因此工艺最优选在pH1.2条件下进行包合。

实施例6：注射用KX2-361·苯磺酸盐冻干剂和复溶溶液的制备及评价(HP-β-CD浓度为10％，低载药量)

制备以下组成的处方：

依次按照以下步骤制备上述处方：

2)按上述处方量称取HP-β-CD，分别加入两个25mL容量瓶。分别加入1)所得溶液，超声(超声频率59kHz)溶解并用上述盐酸溶液定容至约25mL。

3)按上述处方量称取API，分别加入上述HP-β-CD溶液中，超声(超声频率59kHz)溶解。

4)用5N NaOH水溶液和0.1N NaOH水溶液将3)所得溶液分别调pH至4.0左右(±0.05)。用蒸馏水将溶液定容至50mL。

5)向4)所得两溶液中加入0.1g注射用活性炭，室温搅拌半小时后用0.45μm聚醚砜滤膜过滤，并将处方溶液分别分装于10mL西林瓶中(每瓶2mL)，进行冷冻干燥。

冻干曲线如下：

冷冻干燥后样品状态：样品成型性较好。冻干样品均呈白色疏松固体。

将上述两个处方(处方A12和A13)的冻干样品进行复溶，并评价其在生理盐水、蒸馏水、和不同pH的缓冲盐水溶液(配制方法与实施例3中pH分别为4、5和6的缓冲盐水溶液相同)中的复溶情况和不溶性微粒。

复溶方法为：向每种冻干样品的每支西林瓶中分别加入2ml的下述复溶介质，加完之后上下颠倒30次，如不溶解则振摇至溶解为止。加完复溶介质后开始计时，每种介质中的复溶试验重复一次。

两处方的复溶时间均为1分钟左右。

不溶性颗粒如下：

注：表中各值均为3次测量平均值。

由上述结果可知，A12和A13均符合静脉注射剂的要求，且与处方A13相比，处方A12的不溶性微粒更少，但是与处方A9(20％HP-β-CD+2mg/mL API)相比较高。说明将羟丙基-β-环糊精及药物浓度等比例降低时，低环糊精浓度对药物包合能力减弱。因此，在本发明的基础上进一步选择合适的羟丙基-β-环糊精浓度及药物的包合浓度对KX2-361注射剂的开发也是重要的。

对比例1：药物溶解度测试

KX2-361及其盐均为难溶性药物，本对比例对比测试了KX2-361·苯磺酸盐在下述介质中的溶解度。

(1)含表面活性剂的水溶液

将药物(KX2-361·苯磺酸盐)(折合含KX2-361的量为10mg)分别加入10％Cremophor EL水溶液、2％Tween80水溶液、8％Solutol HS15水溶液、0.6％Poloxamer 188水溶液各50ml中，磁力搅拌1个小时，药物未能完全溶解。

(2)单一增溶剂(无水)

单独使用足够量的增溶剂可以溶解药物，但溶解度普遍很小；且均无法使药物溶液在用水稀释的过程中不析出。药物析出时，体系各组分的量见表4。

表4各增溶剂的药物溶液的加水析出临界点

(3)单一非水溶剂或复合溶剂

本研究采用单一非水溶剂乙醇进行溶解试验，发现KX2-361·苯磺酸盐在乙醇中的溶解度为1.12-2.38mg/mL，即溶解100mg药物需要乙醇约50～100ml，显然大量的乙醇无法用于静脉给药。

本研究还采用PEG400或PEG200与无水乙醇分别组成的复合溶剂进行溶解试验，发现同样存在所需溶剂体积过大的问题，且无法用水溶液体系进行稀释。

另外本研究还采用了单一非水溶剂丙二醇、或丙二醇与其他非水溶剂组成的复合溶剂进行溶解试验，发现单用丙二醇20ml能基本溶解折合含50mg KX2-361的药物(KX2-361·苯磺酸盐)，但澄清溶液中尚有微量的小颗粒存在。当将非水溶剂丙二醇与其他溶剂如乙醇、PEG400联用时，对药物的溶解基本没有贡献。

(4)增溶剂与其他溶剂组成复合溶剂

以增溶剂(Cremophor EL或Solutolo HS 15)与溶剂(包括水和丙二醇)组成二元或三元体系来增溶药物，筛选出2种溶剂体系可以溶解药物，分别为：①溶剂体系为5ml的丙二醇:Cremophor EL(50:50)(v/v)，可溶解折合含50mg KX2-361的药物，且溶液稳定性较好；②11.5ml复合溶剂(由10ml丙二醇、1ml Cremophor EL和0.5ml水组成)，同样能溶解药物。接下来测试了这两种溶剂体系的稀释稳定性。

(5)稀释稳定性试验

将上述可以溶清的含药溶液进行稀释稳定性试验，用上文(1)中所述的含不同表面活性剂的水溶液、0.9％氯化钠注射液或5％葡萄糖注射液进行等体积稀释，发现溶液均变得浑浊，即药物析出。

以上试验表明，在目前可用于注射的溶剂、增溶剂或混合体系中，本发明所述的药物均无法达到较高的溶解度，或者即使溶解后也无法进行稀释，即难以保证药物溶液进入血管后不析出。

对比例2：不同浓度和种类的环糊精对API包合能力的测定

用pH 1.2的盐酸水溶液(0.1N)溶解不同种类的环糊精，确定每种环糊精的饱和浓度。将KX2-361·苯磺酸盐溶解到不同浓度和种类的环糊精溶液中，考察不同种类和浓度的环糊精对API的包合能力与包合效果。

(1)分别称取一定量的α-、β-和γ-环糊精于10mL的容量瓶中，逐渐加入pH 1.2盐酸水溶液直至刻度，震荡及超声，使环糊精溶解。记录在10mL溶液中能溶解的环糊精的最大量。实验结果显示，α-环糊精在pH 1.2的盐酸水溶液中最大溶解量约为8％，β-环糊精约为1％，γ-环糊精约为20％。

(2)以pH 1.2盐酸水溶液分别配制8％α-环糊精溶液，1％β-环糊精溶液，20％γ-环糊精溶液，20％、30％及40％的磺丁基醚倍他环糊精溶液，和20％、30％及40％的羟丙基倍他环糊精溶液。

称取一定量的API，加入适当体积的上述环糊精溶液，如果API能完全溶解，则该溶液用0.45μm PTFE滤膜过滤，然后用5N NaOH水溶液和0.1N NaOH水溶液缓慢调节pH值至4.0，边调pH边观察。如果在调节pH时，溶液变浑浊，则尝试降低API的浓度。将调节pH后的澄清溶液静置，观察静置2小时、4小时、24小时的状态。实验过程与结果见下表5：

表5不同种类与浓度的环糊精对API包合能力的检测

/：终止观察

由实验现象和结果可知，HP-β-CD对API的包合效果显著优于SBE-β-CD，而α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精对API包合效果均较差。

实施例7：口服片剂的制备和评价

(一)冻干粉制备

pH 1.2盐酸水溶液的配制：将0.9ml浓盐酸置于100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至100ml。

30％HP-β-CD溶液及7mg/ml含药溶液的配制(HP-β-CD:API摩尔比为13～17：1，HP-β-CD:KX2-361质量比为100:1.68)：

将70ml pH1.2的盐酸水溶液加入250ml的烧杯中。称量HP-β-CD 30g，边磁力搅拌边将其加入该盐酸水溶液中，直至全部溶解。

称量KX2-361·苯磺酸盐700mg，边磁力搅拌边将API加入上述配制的HP-β-CD溶液中，超声(超声频率59kHz)使药物溶解完全。用5N NaOH水溶液和0.1N NaOH水溶液将含药溶液的pH调节至约4.0，加适量蒸馏水定容至100ml，测得最终pH值为4.0。或者不调pH直接定容(即，含药溶液pH为1.2)。

过滤：将上述含药溶液用0.45μm PES滤膜过滤，滤液装于不锈钢托盘中，液面高度约为0.3cm。

冷冻干燥：冻干曲线如表所示

阶段	温度(℃)	真空控制(Pa)	时间(分钟)	真空泵状态	冷凝器预冻
						1	-40	不开启	5	关闭	-40
2	-40	不开启	120	关闭	-
						3	-40	20±2	360	开启	-
4	-20	20±2	360	开启	-
						5	-20	10±2	360	开启	-
6	0	10±2	360	开启	-
						7	0	10±2	360	开启	-
8	10	不控制	360	开启	-
						9	10	不控制	60	开启	-

(二)处方工艺及压片工艺

分别将冻干粉(pH 1.2)和冻干粉(pH 4.0)过40目筛。

根据处方设计的比例进行原辅料称量，混匀。

采用19×8异形冲，按每片含API 14mg进行压片。压片过程中，根据硬度对片厚进行调节，控制硬度在50-100N。

考察其硬度和片重均合格的片剂的溶出特性。

表5处方设计(API含量14mg)

(三)溶出度评价

压片规模增加后，含0.5％硬脂酸镁的处方B1、B2在压片过程中发生粘冲。

溶出度试验方法：

溶出介质(pH4.0，含1.0％SDS)的配制：将1.22g三水合乙酸钠、10g SDS溶于950ml纯水中，用乙酸调至pH4.0，定容至1L。

试验采用转篮法(方法参照中国药典2015版第四部0903溶出度与释放度测定法第一法)，每片片剂采用溶出介质900ml，转速为50rpm，温度37℃。取样时间点分别为5、10、15、20、30、45、60和90分钟。60分钟后将转速调至250rpm，90分钟样品作为每个片剂的终极溶出。

溶出API的量采用HPLC检测(方法参照试验例2中所述的含量及有关物质HPLC测定条件)，然后以外标法计算溶出度。

按照上述方法，对处方B1、B3、B4进行溶出度测定并进行比较，如下表所示：

表6溶出度结果

对处方B3、B4进行比较可知，冻干前是否将含药溶液的pH值由1.2调至4.0对溶出度结果几乎没有影响。

对处方B1和处方B4进行比较可知，将处方中的硬脂酸镁由0.5％(w/w)提高至1％(w/w)后，15分钟内API溶出速度略有减慢，但在15分钟时均达到95％以上。

对比例3：片剂的生物利用度对比试验

使犬口服实施例7中的处方B4片剂，并将静脉给药受试物按折合含KX2-361为0.5mg/kg的剂量静脉注射给犬作为对比，计算口服片剂的绝对生物利用度。

操作方法：

1.口服给药：取健康雄性比格犬3只(体重范围为8-12kg，犬的编号分别为201M\201M\203M)，每只犬均单次口服给予5片。给药前禁食过夜，给药后4小时重新给食；给药前1小时及给药后1小时内禁止饮水。

2.静脉注射：

静脉给药用受试物的制备：精确称取19.34mg KX2-361·苯磺酸盐，置于玻璃瓶中，加入5.565mL的乙醇，涡旋后24℃超声3分钟，再加入33.393mL的PEG400，涡旋后24℃超声4分钟，再加入16.696mL生理盐水，涡旋后24℃超声4分钟，得到理论浓度为0.25mg/mL的无色透明溶液。

受试犬给药前禁食过夜，给药后四小时喂食。缓慢静脉推注(约8分钟)给予受试物，给药前及给药后1小时内禁止饮水。

3.生物利用度测定：对于口服给药组和静脉给药组，于给药结束后0.083(仅应用于静脉给药组)、0.25、0.5、1、2、4、8和24小时分别经前肢头静脉穿刺采血(约0.5mL)至含5uL EDTA-K2(20％)的抗凝管中。血液样品1小时内以8000rpm离心6分钟(离心前置于湿冰上)，取上清液即血浆，于-20℃冰箱冷冻保存，以备用质谱仪进行LC-MS/MS(以甲基磺丁脲为内标，模式：APCI电离，MRM检测)分析。药代参数见下表，血药浓度随时间变化的曲线图参见图1。静脉给药组的曲线下面积_(0-t)(AUC_(0-t))为164.3。绝对生物利用度(F％)计算公式：F％＝(口服AUC_(0-t)/口服剂量)÷(静脉AUC_(0-t)/静脉剂量)×100％。

表7

可以看出，该片剂口服给予犬，获得了较高的生物利用度(平均F％为75.7％)。

采用其他制剂方案检测动物体内吸收情况，如制剂1、2(配方及工艺如下表)。对犬口服给药，并进行药效动力学研究(方法同上)，计算绝对生物利用度，结果如下：

可见，与其他两种制剂方案相比，将KX2-361·苯磺酸盐与羟丙基-β-环糊精制成包合物，然后制成片剂，实现了较高的吸收(约20倍)，体现了在本发明的制剂中，辅料羟丙基-β-环糊精在提高药物的体内生物利用度方面的显著效果。

试验例6：稳定性考察

将处方B3(含pH1.2冻干粉)和处方B4(含pH4.0冻干粉)的片剂装入带干燥剂(变色硅胶)的高密度聚乙烯(HDPE)瓶中，放置在40℃/75％RH条件的稳定性箱中进行高温加速试验，分别在1个月末、2个月末、3个月末取样，测定有关物质(方法参照试验例2中所述的含量及有关物质HPLC测定条件)。

表8处方B3、B4的片稳定性考察结果

编号	样品	总杂(％)
			1	处方B3-0天	0.36(n＝2)
2	处方B3-1月	2.28
			3	处方B3-2月	3.88
4	处方B3-3月	9.04
			5	处方B4-0天	0.30(n＝2)
6	处方B4-1月	0.39
			7	处方B4-2月	0.26
8	处方B4-3月	0.65

注：n＝2代表取样2份，分别测定，结果为两份样品的平均值。

加速1月-3月考察过程中，处方B3杂质有所增加，可能与其强酸性环境有关；处方B4杂质虽略有增长，但变化不明显。由此可知，制备口服片剂优选采用包合后再回调pH的工艺。

实施例8：片剂的制备和评价

(一)冻干工艺

pH 1.2盐酸水溶液的配制：将9ml浓盐酸置于1000ml容量瓶中，用蒸馏水定容。

30％HP-β-CD溶液的配制方法：将700ml pH 1.2盐酸水溶液加入1000ml烧杯中。称量HP-β-CD 300g，边磁力搅拌边将其加入该pH 1.2盐酸水溶液中，直至全部溶解，加蒸馏水至1000ml。配制一定量以备用。

(1)约7mg/ml含药制剂的配制(HP-β-CD:API摩尔比为13～17：1，HP-β-CD:KX2-361质量比为100:1.68)：称量KX2-361·苯磺酸盐1750mg，搅拌下加入到250ml上述HP-β-CD溶液中，超声(超声频率59kHz)使其溶解完全，用5N NaOH水溶液和0.1N NaOH水溶液调节pH4.0。然后用0.45μm PES滤膜过滤，滤液装于不锈钢托盘中，液面高度约为0.5cm。冻干后命名为冻干粉I(冻干方法同实施例7，下同)。

(2)约14mg/ml含药制剂的配制(HP-β-CD:API摩尔比为7～8：1，HP-β-CD:KX2-361质量比为100:3.36)；称量KX2-361·苯磺酸盐4200mg，搅拌下加入到300ml上述HP-β-CD溶液中，超声(超声频率59kHz)使其溶解完全。用0.45μm PES滤膜过滤，滤液装于不锈钢托盘中，液面高度约为0.5cm。冻干后命名为冻干粉II。

(3)21mg/ml含药制剂的配制(HP-β-CD:API摩尔比为4～6：1，HP-β-CD:KX2-361质量比为100:5.03)：称量KX2-361·苯磺酸盐6300mg，搅拌下加入到300ml上述HP-β-CD溶液中，超声(超声频率59kHz)30分钟，API未完全溶解，仍可见一定量的不溶颗粒。用0.45μmPES滤膜过滤，滤液装于不锈钢托盘中，液面高度约为0.5cm。该21mg/ml的含药制剂过滤后以HPLC标定浓度，为20.66mg/ml。冻干后命名为冻干粉III。

(二)处方组成及压片工艺

分别将制备得到的冻干粉过40目筛。

根据以下处方设计的比例进行原辅料称量。

采用19×8异形冲，按每片含HP-β-CD 600mg进行压片。压片过程中，根据硬度对片厚进行调节，控制硬度在50-100N。

按照实施例7中所述的方法，考察其硬度和片重均合格的片剂的溶出特性，见表9。

表9溶出度考察结果(n＝3)

注：n＝3代表取样3份，分别测定，结果为3份样品的平均值。

溶出度测定结果如下：

各处方在20分钟内均可溶出95％以上。

API含量增加后，溶出速度有所降低，处方B5与处方B6差异较小，但均慢于处方B4。

试验例7：含不同浓度SDS的溶出介质对高剂量片剂的溶出效果研究

为使溶出介质更能显示其对处方的区分能力，因此，对以下几个处方在不同浓度SDS中的溶出行为进行考察。

考察实施例7的处方B3、实施例8的处方B5和B6在含0.5％SDS，0.2％SDS以及无SDS的溶出介质中的溶出度。数据见表10-12。

溶出度试验方法：转篮法，溶出介质900ml，转速为50rpm，温度37℃。取样时间点分别为5、10、15、20、30、45、60分钟。pH4.0溶出介质的配制方法同实施例7中所述。不同之处在于，含0.5％SDS、0.2％SDS以及无SDS的1L溶出介质分别采用含5g、2g、0gSDS的pH4.0缓冲盐溶液。

表10三种处方在无SDS的pH4.0溶出介质中的溶出度

表11三种处方在含0.5％SDS的pH4.0溶出介质中的溶出度

表12三种处方在含0.2％SDS的pH4.0溶出介质中的溶出度

观察到的现象为：当溶出介质中无SDS时，处方B5的溶出杯内有少量絮状物，处方B6的溶出杯内有大量絮状物。当溶出介质中含0.2％SDS或者0.5％SDS时，处方B6的溶出杯内有絮状物，30分中后絮状物减少。

结论：无SDS时，样品溶出受到较大影响，三个处方的溶出情况均较差。与含0.5％SDS的溶出介质相比，含0.2％SDS时，处方B3的溶出速度与其在含0.5％SDS的溶出介质中类似，但处方B5和B6的溶出速度有所减慢且终极溶出减小，这说明0.2％SDS不适用于这两种处方的溶出。当溶出介质含0.5％SDS时，三种处方溶出良好，且与含1％SDS时的情况十分接近，处方B5和B6的溶出特性无明显差别。

实施例9：片剂的制备和评价

制备处方B16的片剂：以40％HP-β-CD包合14mg/ml药物，冻干粉的制备工艺同实施例7(回调pH至4.0)。将冻干粉过40目筛，称量冻干粉以及硬脂酸镁(硬脂酸镁是冻干粉的1.0％(w/w))，混匀；采用19×8异形冲压片，片重约600mg，硬度50-100N。其崩解时限为8分钟。溶出结果如下：

表15处方B16与处方B3的溶出结果对比

结论：处方B16溶出比处方B3略慢，但在15分钟时溶出了85％以上。处方B16每片载药量(每片API含量)约为20.29mg，与处方B3相比提高了约45％，达到了提高载药量的目的。

实施例10：片剂的制备和评价

由试验例6可知，含pH 1.2冻干粉的片剂的稳定性较差，含pH 4.0冻干粉片剂的稳定性明显改善。因此，尝试将pH调至6.0以确保其稳定性。

(一)冻干工艺

1、pH 1.2盐酸水溶液的配制：将0.9ml浓盐酸置于100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至100ml。

2、40％HP-β-CD溶液的配制：称取HP-β-CD 10g，以适量pH 1.2盐酸水溶液溶解后转移至25ml容量瓶并用上述盐酸水溶液定容。

3、约14mg/ml含药制剂的配制：称量KX2-361·苯磺酸盐56mg，加入到4ml上述HP-β-CD溶液中。超声(超声频率59kHz)使药物溶解完全。

4、pH的调节：用5N NaOH水溶液和0.1N NaOH水溶液将含药溶液的pH调节至约6.0。此时，溶液近乎无色。静置30分钟未见明显浑浊和析出。放置过夜析出少量沉淀，液体部分为溶液。

5、冻干粉制备：在调节pH至约6.0后，以0.22μm PES滤膜过滤，冻干。得白色冻干粉。冻干工艺同实施例7。

复溶考察：用水复溶冻干粉，在轻微振摇下约10分钟完成，无明显异常。

(二)处方组成及压片工艺

1、将冻干粉和各填充剂分别过40目筛。

2、按处方设计量(见表16和表17)称量API及各填充剂，混合后再与润滑剂硬脂酸镁等量递加混合。过40目筛三次混合。

3、采用Φ8mm冲模，按片重约200mg(含API约2mg)进行压片。压片过程中，根据硬度对片厚进行调节，控制硬度在50-100N。

实验结果：成功压制得各处方片。

表16处方设计1

表17处方设计2

处方	处方B11	处方B12	处方B13	处方B14	处方B15
						冻干粉(mg)	60	60	60	60	60
喷雾干燥乳糖(mg)	128	128	134		128
						甘露醇SD200(mg)				134
PVPP XL(mg)	10
						CC-Na(mg)		10			6
硬脂酸镁(mg)	2(1％)	2(1％)	6(3％)	6(3％)	6(3％)

利用崩解时限测定仪检测上述各处方片剂的崩解时限(方法为参照中国药典2015版第四部附录0921崩解时限检查法)和溶出度，结果见表18和表19。

表18各处方片剂的崩解时限结果

处方

B7

B8

B9

B10

B11

B12

B13

B14

B15

崩解时间(分钟)

～0.5

～1

～11

～6

～4

～14

～6

～8

由结果可知，处方B9与处方B13的片剂崩解时间超过10分钟，而其他处方崩解时间则更短，更有利于药物的快速溶出。

表19各处方片剂的溶出度考察结果

由溶出度数据可知，处方B9、B10、B13、B14、B15溶出均较慢。其他处方在15分钟的溶出量均大于90％，显示了药物从速释片剂中的快速溶出能力。

将各片剂处方分别放置于高温(60℃)、高湿(92.5％RH)、-20℃等条件下，在特定时间点取样检测(方法参照试验例2中所述的含量及有关物质HPLC测定条件)，并与API的杂质增长情况进行对比。结果见表20。

表20各处方片剂稳定性考察结果

由上表可知，处方B11稳定性不如其它处方，处方B7、B8亦欠佳。其余处方片在各条件下放置20d(天)均未见异常。综合溶出度数据，处方B12为较优处方。

Claims

1.一种用于治疗细胞增殖性疾病的口服制剂，包含羟丙基-β-环糊精和活性成分，所述活性成分为KX2-361或其可药用的盐，所述KX2-361由下式1表示：

2.根据权利要求1所述的口服制剂，其中所述活性成分与羟丙基-β-环糊精的摩尔比为1:(4-59)。

3.根据权利要求1所述的口服制剂，其中所述活性成分为KX2-361、KX2-361·单苯磺酸盐、KX2-361·二盐酸盐、KX2-361·单磷酸盐和/或KX2-361·二磷酸盐。

4.根据权利要求1所述的口服制剂，其中至少一部分所述羟丙基-β-环糊精包裹至少一部分所述活性成分而形成药物包合物。

5.根据权利要求1所述的口服制剂，还包含可药用的赋形剂。

6.根据权利要求5所述的口服制剂，其中所述可药用的赋形剂选自填充剂、崩解剂、润滑剂中的一种或多种。

7.根据权利要求6所述的口服制剂，其中所述填充剂选自微晶纤维素、乳糖、淀粉、甘露醇中的一种或多种，并且基于所述口服制剂的总重量，所述填充剂的量为0％～69％(w/w)。

8.根据权利要求6所述的口服制剂，其中所述崩解剂选自交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、羧甲基淀粉钠中的一种或多种，并且基于所述口服制剂的总重量，所述崩解剂的量为0％～5％(w/w)。

9.根据权利要求6所述的口服制剂，其中所述润滑剂选自硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉中的一种或多种，并且基于所述口服制剂的总重量，所述润滑剂的量为0.5％～3％(w/w)。

10.根据权利要求1所述的口服制剂，其中所述口服制剂为片剂的形式，其中所述活性成分在单剂片剂中的含量为0.5％～6.5％(w/w)。

11.一种制备权利要求1-10中任一项所述的口服制剂的方法，包括以下步骤：

C)将所述第二溶液干燥，以得到干燥物。

12.根据权利要求11所述的方法，其中，在所述第一溶液中，羟丙基-β-环糊精浓度为10％(w/v)至50％(w/v)。

13.根据权利要求11所述的方法，其中，在所述第二溶液中，以KX2-361计，所述KX2-361或其可药用的盐的浓度为0.5mg/ml至15mg/ml。

14.根据权利要求11所述的方法，其中，在所述第二溶液中，所述KX2-361或其可药用的盐与羟丙基-β-环糊精的摩尔比为1:(4-59)。

15.根据权利要求11所述的方法，其中，在步骤C)之前且步骤B)之后，还包括I)将所述第二溶液的pH调节至3-7。

16.根据权利要求11所述的方法，其中，在步骤C)之后，还包括D)对所述干燥物进行压片。

17.根据权利要求16所述的方法，其中，步骤D)包括将所述干燥物与选自填充剂、崩解剂、润滑剂中的一种或多种的赋形剂混合，然后进行所述压片。

18.根据权利要求17所述的方法，其中，所述填充剂选自微晶纤维素、乳糖、淀粉、甘露醇中的一种或多种，并且基于所述口服制剂的总重量，所述填充剂的量为0％～69％(w/w)。

19.根据权利要求17所述的方法，其中所述崩解剂选自交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、羧甲基淀粉钠中的一种或多种，并且基于所述口服制剂的总重量，所述崩解剂的量为0％～5％(w/w)。

20.根据权利要求17所述的方法，其中所述润滑剂选自硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉中的一种或多种，并且基于所述口服制剂的总重量，所述润滑剂的量为0.5％～3％(w/w)。

21.根据权利要求11所述的方法，其中，所述KX2-361的可药用的盐为KX2-361·单苯磺酸盐、KX2-361·二盐酸盐、KX2-361·单磷酸盐和/或KX2-361·二磷酸盐。

22.根据权利要求13所述的方法，其中，在所述第二溶液中，以KX2-361计，所述KX2-361或其可药用的盐的浓度为0.5mg/ml至10mg/ml。