JP6529141B2 - ヒト免疫不全ウイルス阻害のための二重ベクター - Google Patents
ヒト免疫不全ウイルス阻害のための二重ベクター Download PDFInfo
- Publication number
- JP6529141B2 JP6529141B2 JP2017220978A JP2017220978A JP6529141B2 JP 6529141 B2 JP6529141 B2 JP 6529141B2 JP 2017220978 A JP2017220978 A JP 2017220978A JP 2017220978 A JP2017220978 A JP 2017220978A JP 6529141 B2 JP6529141 B2 JP 6529141B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- hiv
- cells
- nucleic acid
- expression vector
- promoter
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 239000013598 vector Substances 0.000 title claims description 133
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 title description 220
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 title description 34
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 title description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 290
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 claims description 198
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 135
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 127
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 108
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 93
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 78
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 claims description 72
- 108091027967 Small hairpin RNA Proteins 0.000 claims description 69
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 69
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 56
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 claims description 53
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 claims description 42
- 230000004927 fusion Effects 0.000 claims description 41
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 40
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 claims description 37
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 claims description 37
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 37
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 37
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 claims description 33
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 claims description 27
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 claims description 23
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 22
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 18
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 claims description 18
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 17
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 15
- 229940125777 fusion inhibitor Drugs 0.000 claims description 12
- 102100035875 C-C chemokine receptor type 5 Human genes 0.000 claims description 7
- 102000014450 RNA Polymerase III Human genes 0.000 claims description 7
- 108010078067 RNA Polymerase III Proteins 0.000 claims description 7
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 7
- 230000002463 transducing effect Effects 0.000 claims description 7
- 101710177611 DNA polymerase II large subunit Proteins 0.000 claims description 6
- 101710184669 DNA polymerase II small subunit Proteins 0.000 claims description 6
- 102100037935 Polyubiquitin-C Human genes 0.000 claims description 5
- 108010056354 Ubiquitin C Proteins 0.000 claims description 5
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- 239000002835 hiv fusion inhibitor Substances 0.000 claims description 5
- 108091006086 inhibitor proteins Proteins 0.000 claims description 5
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 claims description 4
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 2
- 101710149870 C-C chemokine receptor type 5 Proteins 0.000 claims 2
- 102100031650 C-X-C chemokine receptor type 4 Human genes 0.000 claims 2
- 101000922348 Homo sapiens C-X-C chemokine receptor type 4 Proteins 0.000 claims 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 68
- 108010048367 enhanced green fluorescent protein Proteins 0.000 description 57
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 50
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 45
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 45
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 44
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 39
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 36
- 102000012000 CXCR4 Receptors Human genes 0.000 description 34
- 108010061299 CXCR4 Receptors Proteins 0.000 description 34
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 description 33
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 description 33
- 102100022405 Tripartite motif-containing protein 5 Human genes 0.000 description 28
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 28
- 101710130650 Tripartite motif-containing protein 5 Proteins 0.000 description 27
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 21
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 20
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 19
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 18
- 101000680666 Homo sapiens Tripartite motif-containing protein 5 Proteins 0.000 description 17
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 16
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 16
- 102000052612 human TRIM5 Human genes 0.000 description 15
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 14
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 14
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 14
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 14
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 13
- 101710205625 Capsid protein p24 Proteins 0.000 description 13
- 101710177166 Phosphoprotein Proteins 0.000 description 13
- 101710149279 Small delta antigen Proteins 0.000 description 13
- 102100022563 Tubulin polymerization-promoting protein Human genes 0.000 description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 13
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 13
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 description 12
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 12
- 239000007760 Iscove's Modified Dulbecco's Medium Substances 0.000 description 11
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 11
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 11
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 11
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 11
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 11
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 10
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 10
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 10
- PEASPLKKXBYDKL-FXEVSJAOSA-N enfuvirtide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(C)=O)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)C1=CN=CN1 PEASPLKKXBYDKL-FXEVSJAOSA-N 0.000 description 10
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 10
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 9
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 9
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 9
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 9
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 9
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 9
- 108700035909 rhesus monkey TRIM5 Proteins 0.000 description 9
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 8
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 8
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 8
- 238000011225 antiretroviral therapy Methods 0.000 description 8
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 8
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 8
- 230000036316 preload Effects 0.000 description 8
- 108010047620 Phytohemagglutinins Proteins 0.000 description 7
- 102000009572 RNA Polymerase II Human genes 0.000 description 7
- 108010009460 RNA Polymerase II Proteins 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 description 7
- 102000044159 Ubiquitin Human genes 0.000 description 7
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 7
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 7
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 7
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 7
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 7
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 7
- 230000001885 phytohemagglutinin Effects 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 7
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 7
- 102100037904 CD9 antigen Human genes 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 6
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 6
- 241000713704 Bovine immunodeficiency virus Species 0.000 description 5
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 5
- 101710094648 Coat protein Proteins 0.000 description 5
- 241000713800 Feline immunodeficiency virus Species 0.000 description 5
- 102100021181 Golgi phosphoprotein 3 Human genes 0.000 description 5
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 5
- 101710125418 Major capsid protein Proteins 0.000 description 5
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 5
- 101710141454 Nucleoprotein Proteins 0.000 description 5
- 101710083689 Probable capsid protein Proteins 0.000 description 5
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 5
- 102000011408 Tripartite Motif Proteins Human genes 0.000 description 5
- 108010023649 Tripartite Motif Proteins Proteins 0.000 description 5
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 5
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 5
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 5
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 5
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 5
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 5
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 5
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 5
- 108010051118 Bone Marrow Stromal Antigen 2 Proteins 0.000 description 4
- 102100037086 Bone marrow stromal antigen 2 Human genes 0.000 description 4
- 108010068682 Cyclophilins Proteins 0.000 description 4
- 102000001493 Cyclophilins Human genes 0.000 description 4
- 108010032976 Enfuvirtide Proteins 0.000 description 4
- 102000004269 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 4
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 4
- 241000713311 Simian immunodeficiency virus Species 0.000 description 4
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 4
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 4
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 4
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 4
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 4
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 4
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 4
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 4
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 4
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 4
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 description 4
- 229960002062 enfuvirtide Drugs 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 238000011577 humanized mouse model Methods 0.000 description 4
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 4
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 4
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 4
- 210000005210 lymphoid organ Anatomy 0.000 description 4
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 4
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 4
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- 101100005713 Homo sapiens CD4 gene Proteins 0.000 description 3
- 101001067833 Homo sapiens Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase A Proteins 0.000 description 3
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 3
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 3
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 3
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 3
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091081021 Sense strand Proteins 0.000 description 3
- 241000711975 Vesicular stomatitis virus Species 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 3
- 230000002222 downregulating effect Effects 0.000 description 3
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 3
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 3
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 3
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 3
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 3
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 3
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 3
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 3
- 230000010415 tropism Effects 0.000 description 3
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 3
- 230000007502 viral entry Effects 0.000 description 3
- 108010004483 APOBEC-3G Deaminase Proteins 0.000 description 2
- 108020000948 Antisense Oligonucleotides Proteins 0.000 description 2
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 2
- 208000014644 Brain disease Diseases 0.000 description 2
- GSNHKUDZZFZSJB-QUMGSSFMSA-N CC(C)c1nnc(C)n1[C@H]2C[C@H]3CC[C@@H](C2)N3CC[C@H](NC(=O)C4CCC(F)(F)CC4)c5ccccc5 Chemical compound CC(C)c1nnc(C)n1[C@H]2C[C@H]3CC[C@@H](C2)N3CC[C@H](NC(=O)C4CCC(F)(F)CC4)c5ccccc5 GSNHKUDZZFZSJB-QUMGSSFMSA-N 0.000 description 2
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 description 2
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 102100038076 DNA dC->dU-editing enzyme APOBEC-3G Human genes 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- 208000032274 Encephalopathy Diseases 0.000 description 2
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 2
- 102100020715 Fms-related tyrosine kinase 3 ligand protein Human genes 0.000 description 2
- 101710162577 Fms-related tyrosine kinase 3 ligand protein Proteins 0.000 description 2
- 229920000209 Hexadimethrine bromide Polymers 0.000 description 2
- 101000634846 Homo sapiens T-cell receptor-associated transmembrane adapter 1 Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100034349 Integrase Human genes 0.000 description 2
- 241000581650 Ivesia Species 0.000 description 2
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000036693 Thrombopoietin Human genes 0.000 description 2
- 108010041111 Thrombopoietin Proteins 0.000 description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 2
- 229940123627 Viral replication inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 2
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 2
- 238000002617 apheresis Methods 0.000 description 2
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 2
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 2
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 2
- 108700004025 env Genes Proteins 0.000 description 2
- 238000013401 experimental design Methods 0.000 description 2
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 2
- 108091006047 fluorescent proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000034287 fluorescent proteins Human genes 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 108700004026 gag Genes Proteins 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 102000054602 human TRAT1 Human genes 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 2
- 229960004710 maraviroc Drugs 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 2
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 2
- 229940042402 non-nucleoside reverse transcriptase inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 239000002726 nonnucleoside reverse transcriptase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 2
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 2
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 2
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 108700004029 pol Genes Proteins 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 230000012743 protein tagging Effects 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 description 2
- 239000003419 rna directed dna polymerase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 2
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 2
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical compound CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 2
- QBYIENPQHBMVBV-HFEGYEGKSA-N (2R)-2-hydroxy-2-phenylacetic acid Chemical compound O[C@@H](C(O)=O)c1ccccc1.O[C@@H](C(O)=O)c1ccccc1 QBYIENPQHBMVBV-HFEGYEGKSA-N 0.000 description 1
- WHTVZRBIWZFKQO-AWEZNQCLSA-N (S)-chloroquine Chemical compound ClC1=CC=C2C(N[C@@H](C)CCCN(CC)CC)=CC=NC2=C1 WHTVZRBIWZFKQO-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxybenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- 101100096476 Bacillus subtilis (strain 168) splB gene Proteins 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 101100478849 Bifidobacterium adolescentis (strain ATCC 15703 / DSM 20083 / NCTC 11814 / E194a) sucP gene Proteins 0.000 description 1
- 102000018348 CC chemokine receptor 5 Human genes 0.000 description 1
- 108010017088 CCR5 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 101150017501 CCR5 gene Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000909256 Caldicellulosiruptor bescii (strain ATCC BAA-1888 / DSM 6725 / Z-1320) DNA polymerase I Proteins 0.000 description 1
- 208000014912 Central Nervous System Infections Diseases 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 241000557626 Corvus corax Species 0.000 description 1
- 108010017826 DNA Polymerase I Proteins 0.000 description 1
- 102000004594 DNA Polymerase I Human genes 0.000 description 1
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 1
- 230000004568 DNA-binding Effects 0.000 description 1
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 1
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 101100421425 Drosophila melanogaster Sply gene Proteins 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 101710091045 Envelope protein Proteins 0.000 description 1
- 241000713730 Equine infectious anemia virus Species 0.000 description 1
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 230000005154 HIV tropism Effects 0.000 description 1
- 208000035186 Hemolytic Autoimmune Anemia Diseases 0.000 description 1
- 241001272567 Hominoidea Species 0.000 description 1
- 101100220044 Homo sapiens CD34 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000980898 Homo sapiens Cell division cycle-associated protein 4 Proteins 0.000 description 1
- 241000713340 Human immunodeficiency virus 2 Species 0.000 description 1
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 208000008771 Lymphadenopathy Diseases 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 206010025327 Lymphopenia Diseases 0.000 description 1
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 1
- 102100021285 Macrophage-expressed gene 1 protein Human genes 0.000 description 1
- 101710157392 Macrophage-expressed gene 1 protein Proteins 0.000 description 1
- 102000003792 Metallothionein Human genes 0.000 description 1
- 108090000157 Metallothionein Proteins 0.000 description 1
- 241000713333 Mouse mammary tumor virus Species 0.000 description 1
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 1
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 description 1
- 208000001388 Opportunistic Infections Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 241000009328 Perro Species 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710188315 Protein X Proteins 0.000 description 1
- 101000902592 Pyrococcus furiosus (strain ATCC 43587 / DSM 3638 / JCM 8422 / Vc1) DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N R-2-phenyl-2-hydroxyacetic acid Natural products OC(=O)C(O)C1=CC=CC=C1 IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000017143 RNA Polymerase I Human genes 0.000 description 1
- 108010013845 RNA Polymerase I Proteins 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 108091030071 RNAI Proteins 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 241001068295 Replication defective viruses Species 0.000 description 1
- 108091027981 Response element Proteins 0.000 description 1
- 101150099060 SGPL1 gene Proteins 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108700026226 TATA Box Proteins 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- AUYYCJSJGJYCDS-LBPRGKRZSA-N Thyrolar Chemical class IC1=CC(C[C@H](N)C(O)=O)=CC(I)=C1OC1=CC=C(O)C(I)=C1 AUYYCJSJGJYCDS-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 101800001690 Transmembrane protein gp41 Proteins 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 1
- 208000010094 Visna Diseases 0.000 description 1
- 208000023940 X-Linked Combined Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003070 absorption delaying agent Substances 0.000 description 1
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N all-trans-retinoic acid Chemical compound OC(=O)\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000798 anti-retroviral effect Effects 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 201000000448 autoimmune hemolytic anemia Diseases 0.000 description 1
- 208000036556 autosomal recessive T cell-negative B cell-negative NK cell-negative due to adenosine deaminase deficiency severe combined immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940087373 calcium oxide Drugs 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000006727 cell loss Effects 0.000 description 1
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 1
- 239000002458 cell surface marker Substances 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- 229960003677 chloroquine Drugs 0.000 description 1
- WHTVZRBIWZFKQO-UHFFFAOYSA-N chloroquine Natural products ClC1=CC=C2C(NC(C)CCCN(CC)CC)=CC=NC2=C1 WHTVZRBIWZFKQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000004186 co-expression Effects 0.000 description 1
- 238000000975 co-precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 description 1
- 239000004148 curcumin Substances 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- -1 devices Substances 0.000 description 1
- 239000010432 diamond Substances 0.000 description 1
- UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K dihydroxy(stearato)aluminium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[Al](O)O UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 101150030339 env gene Proteins 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 1
- 229960004887 ferric hydroxide Drugs 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 101150098622 gag gene Proteins 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000009368 gene silencing by RNA Effects 0.000 description 1
- 238000010363 gene targeting Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 210000004837 gut-associated lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000005802 health problem Effects 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 1
- 102000044493 human CDCA4 Human genes 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000003978 infusion fluid Substances 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- IEECXTSVVFWGSE-UHFFFAOYSA-M iron(3+);oxygen(2-);hydroxide Chemical compound [OH-].[O-2].[Fe+3] IEECXTSVVFWGSE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N isopropylamine Chemical compound CC(C)N JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 238000001638 lipofection Methods 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 208000018555 lymphatic system disease Diseases 0.000 description 1
- 210000003563 lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000007885 magnetic separation Methods 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960002510 mandelic acid Drugs 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 239000011325 microbead Substances 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 238000002515 oligonucleotide synthesis Methods 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 238000009520 phase I clinical trial Methods 0.000 description 1
- 229960003742 phenol Drugs 0.000 description 1
- 101150088264 pol gene Proteins 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 229920000768 polyamine Polymers 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 229940121649 protein inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000012268 protein inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000018883 protein targeting Effects 0.000 description 1
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000007115 recruitment Effects 0.000 description 1
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 229930002330 retinoic acid Natural products 0.000 description 1
- 108010056030 retronectin Proteins 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000009168 stem cell therapy Methods 0.000 description 1
- 238000009580 stem-cell therapy Methods 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 239000003270 steroid hormone Substances 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 208000010648 susceptibility to HIV infection Diseases 0.000 description 1
- 208000034996 susceptibility to West Nile virus Diseases 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 1
- 230000002992 thymic effect Effects 0.000 description 1
- 239000005495 thyroid hormone Substances 0.000 description 1
- 229940036555 thyroid hormone Drugs 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 230000005026 transcription initiation Effects 0.000 description 1
- 239000012096 transfection reagent Substances 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 238000003146 transient transfection Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- 229960001727 tretinoin Drugs 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 108700001624 vesicular stomatitis virus G Proteins 0.000 description 1
- 230000008478 viral entry into host cell Effects 0.000 description 1
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 1
- 238000003260 vortexing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/28—Bone marrow; Haematopoietic stem cells; Mesenchymal stem cells of any origin, e.g. adipose-derived stem cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
- A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
- A01K67/0271—Chimeric vertebrates, e.g. comprising exogenous cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/713—Double-stranded nucleic acids or oligonucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/162—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
- A61K48/005—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'active' part of the composition delivered, i.e. the nucleic acid delivered
- A61K48/0058—Nucleic acids adapted for tissue specific expression, e.g. having tissue specific promoters as part of a contruct
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4702—Regulators; Modulating activity
- C07K14/4703—Inhibitors; Suppressors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
- C12N15/1138—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against receptors or cell surface proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/86—Viral vectors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0647—Haematopoietic stem cells; Uncommitted or multipotent progenitors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/90—Isomerases (5.)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2207/00—Modified animals
- A01K2207/12—Animals modified by administration of exogenous cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2227/00—Animals characterised by species
- A01K2227/10—Mammal
- A01K2227/105—Murine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2267/00—Animals characterised by purpose
- A01K2267/03—Animal model, e.g. for test or diseases
- A01K2267/0337—Animal models for infectious diseases
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K2035/124—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells the cells being hematopoietic, bone marrow derived or blood cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/03—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a transmembrane segment
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/14—Type of nucleic acid interfering N.A.
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/50—Physical structure
- C12N2310/53—Physical structure partially self-complementary or closed
- C12N2310/531—Stem-loop; Hairpin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2320/00—Applications; Uses
- C12N2320/30—Special therapeutic applications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2320/00—Applications; Uses
- C12N2320/30—Special therapeutic applications
- C12N2320/31—Combination therapy
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2510/00—Genetically modified cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
- C12N2740/16021—Viruses as such, e.g. new isolates, mutants or their genomic sequences
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
- C12N2740/16033—Use of viral protein as therapeutic agent other than vaccine, e.g. apoptosis inducing or anti-inflammatory
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
- C12N2740/16041—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2740/16043—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
- C12N2740/16071—Demonstrated in vivo effect
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
- C12N2740/16111—Human Immunodeficiency Virus, HIV concerning HIV env
- C12N2740/16171—Demonstrated in vivo effect
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
- C12N2740/16211—Human Immunodeficiency Virus, HIV concerning HIV gagpol
- C12N2740/16222—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
- C12N2740/16211—Human Immunodeficiency Virus, HIV concerning HIV gagpol
- C12N2740/16234—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
- C12N2830/008—Vector systems having a special element relevant for transcription cell type or tissue specific enhancer/promoter combination
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
- C12N2830/80—Vector systems having a special element relevant for transcription from vertebrates
- C12N2830/85—Vector systems having a special element relevant for transcription from vertebrates mammalian
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Virology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
Description
本出願は、2009年12月17日に出願された米国仮特許出願第61/287,599号、および2009年7月15日に出願された米国仮特許出願第61/225,687号に対する優先権の利益を主張するものであり、これらは両方とも、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本明細書に添えて電子提出したテキストファイルの内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる:配列リストのコンピュータ可読式複写(ファイル名:CALI_004_01WO_SeqList_ST25.txt、記録日:2010年5月26日、ファイルサイズ9キロバイト)。
本発明は、一般に分子生物学およびウイルス学の分野に関する。特に、本発明は、HIV感染の治療および予防に有用な発現ベクターに関する。
ヒト免疫不全ウイルス(HIV)は、ヒトにおける後天性免疫不全症候群(AIDS)の原因因子であり、これは免疫不全および日和見感染に起因する致死率を上昇させる。HIV感染は、世界保健機関により流行病として指定されていることからも明らかなように重大な国際健康問題である。ほとんどのHIV感染者は最終的にAIDSを発現し、毎年百万人を超える命が奪われている。
HIV共受容体の阻害物質をコードする第1の核酸配列、ならびに標的細胞へのHIV融合もしくはHIV複製を阻害するタンパク質をコードする第2の核酸配列を含む、発現ベクター。
[本発明1002]
ウイルスベクターである、本発明1001の発現ベクター。
[本発明1003]
ウイルスベクターがレンチウイルスベクターまたはレトロウイルスベクターである、本発明1002の発現ベクター。
[本発明1004]
レンチウイルスベクターが自己不活性化する、本発明1003の発現ベクター。
[本発明1005]
宿主細胞内で発現時にX4向性HIV株およびR5向性HIV株による感染に対する耐性を付与する、本発明1001の発現ベクター。
[本発明1006]
宿主細胞内で発現時に高活性抗レトロウイルス剤療法(HAART)耐性HIV株による感染に対する耐性を付与する、本発明1001の発現ベクター。
[本発明1007]
HIVウイルス結合、標的細胞膜へのHIVウイルス融合またはHIVウイルス複製阻害物質をコードする第3の核酸配列をさらに含む、本発明1001の発現ベクター。
[本発明1008]
HIV共受容体の阻害物質が二重鎖領域を有するsiRNAまたはshRNAであり、前記二重鎖領域が前記HIV共受容体の配列と実質的に同一および相補性の配列を含む、本発明1001の発現ベクター。
[本発明1009]
前記HIV共受容体がCCR5またはCXCR4である、本発明1008の発現ベクター。
[本発明1010]
shRNAが配列番号1の配列を有する、本発明1009の発現ベクター。
[本発明1011]
阻害物質が、前記ベクターが宿主細胞内で発現時にHIV共受容体の発現を低減できる、本発明1001の発現ベクター。
[本発明1012]
標的細胞へのHIV融合を阻害するタンパク質がC46タンパク質、T20タンパク質、エンフビルチド、CP 32 M、およびシフビルチドである、本発明1001の発現ベクター。
[本発明1013]
HIV複製を阻害するタンパク質がヒトTRIM5α、アカゲザルTRIM5α、キメラTRIM5α、ヒトTRIM5−シクロフィリン融合タンパク質、シクロフィリン、E3ユビキチン、APOBEC3G、および骨髄間質細胞抗原2(BST−2)からなる群から選択される、本発明1001の発現ベクター。
[本発明1014]
キメラTRIM5αがヒトTRIM5αタンパク質由来のアミノ末端ドメインおよびアカゲザルTRIM5αタンパク質由来のカルボキシ末端PRYSPRYドメインを含む、本発明1013の発現ベクター。
[本発明1015]
前記第1の核酸配列と第2の核酸配列がプロモーターと機能的に連結されている、本発明1001の発現ベクター。
[本発明1016]
前記プロモーターがRNAポリメラーゼIIまたはRNAポリメラーゼIIIプロモーターである、本発明1015の発現ベクター。
[本発明1017]
前記第1の核酸配列が第1のプロモーターと機能的に連結されており、前記第2の核酸配列が第2のプロモーターと機能的に連結されている、本発明1001の発現ベクター。
[本発明1018]
前記第1のプロモーターと第2のプロモーターが同じである、本発明1017の発現ベクター。
[本発明1019]
前記第1のプロモーターと第2のプロモーターが異なる、本発明1017の発現ベクター。
[本発明1020]
前記第1のプロモーターがRNAポリメラーゼIIIプロモーターであり、前記第2のプロモーターがRNAポリメラーゼIIプロモーターである、本発明1019の発現ベクター。
[本発明1021]
前記第3の核酸配列が第3のプロモーターと機能的に連結されている、本発明1007の発現ベクター。
[本発明1022]
前記第3のプロモーターが第1のプロモーターおよび第2のプロモーターと同じまたは異なる、本発明1021の発現ベクター。
[本発明1023]
前記RNAポリメラーゼIIIプロモーターがH1 pol IIIプロモーターである、本発明1016の発現ベクター。
[本発明1024]
前記RNAポリメラーゼIIプロモーターがユビキチンC pol IIプロモーターである、本発明1016の発現ベクター。
[本発明1025]
本発明1001の発現ベクターを含む宿主細胞。
[本発明1026]
X4向性HIV株またはR5向性HIV株による感染に対して耐性である、本発明1025の宿主細胞。
[本発明1027]
HAART耐性HIV株による感染に対して耐性である、本発明1026の宿主細胞。
[本発明1028]
造血前駆/幹細胞、単球、マクロファージ、末梢血単核球、CD4+Tリンパ球、CD8+Tリンパ球、または樹状細胞である、本発明1025の宿主細胞。
[本発明1029]
配列番号1の配列を有するshRNAをコードする第1の核酸配列およびC46タンパク質をコードする第2の核酸配列を含み、前記第1の核酸配列がH1 pol IIIプロモーターと機能的に連結されており、前記第2の核酸配列がユビキチンC pol IIプロモーターと機能的に連結されている、発現ベクター。
[本発明1030]
第1のshRNAをコードする第1の核酸配列、第2のshRNAをコードする第2の核酸配列、および標的細胞へのHIVウイルス融合もしくはHIV複製阻害物質をコードする第3の核酸配列を含む、発現ベクター。
[本発明1031]
前記第1の核酸配列が第1のプロモーターと機能的に連結されており、前記第2の核酸配列が第2のプロモーターと機能的に連結されており、前記第3の核酸配列が第3のプロモーターと機能的に連結されている、本発明1030の発現ベクター。
[本発明1032]
前記第1のshRNAがCCR5を標的とし、前記第2のshRNAがCXCR4を標的とする、本発明1030の発現ベクター。
[本発明1033]
本発明1001の発現ベクターを造血細胞に形質導入する工程、および患者への前記形質導入された造血細胞を移植する工程を含み、前記形質導入された造血細胞がHIV感染に対して耐性である、患者におけるHIV感染の治療または予防の方法。
[本発明1034]
前記造血細胞が造血前駆/幹細胞(HPSC)、CD4+Tリンパ球、CD8+Tリンパ球、単球/マクロファージ、またはそれらの組み合わせである、本発明1033の方法。
[本発明1035]
前記移植されたHPSCがHIV感染に対して耐性である顆粒球、単球/マクロファージ、およびリンパ球を生成する、本発明1034の方法。
[本発明1036]
前記造血細胞が自家性または同種異系間である、本発明1033の方法。
[本発明1037]
前記第1の核酸配列が二重鎖領域を有するsiRNAまたはshRNAをコードし、前記二重鎖領域が、CCR5配列と実質的に同一および相補性の配列を含む、本発明1033の方法。
[本発明1038]
shRNAが配列番号1の配列を有する、本発明1037の方法。
[本発明1039]
前記形質導入された造血細胞が、形質導入されていない造血細胞と比較して低いレベルのCCR5タンパク質を発現する、本発明1037の方法。
[本発明1040]
前記第2の核酸配列がヒトTRIM5α、アカゲザルTRIM5α、キメラTRIM5α、ヒトTRIM5−シクロフィリン融合タンパク質およびC46タンパク質からなる群から選択されるタンパク質をコードする、本発明1033の方法。
[本発明1041]
キメラTRIM5αがヒトTRIM5αタンパク質由来のアミノ末端ドメインおよびアカゲザルTRIM5αタンパク質由来のカルボキシ末端PRYSPRYドメインを含む、本発明1040の方法。
[本発明1042]
前記形質導入された造血細胞が、形質導入されていない造血細胞と比較して高いレベルの前記タンパク質を発現する、本発明1040の方法。
[本発明1043]
前記顆粒球、単球/マクロファージ、およびリンパ球がR5向性HIV株およびX4向性HIV株による感染に対して耐性である、本発明1035の方法。
[本発明1044]
前記顆粒球、単球/マクロファージ、およびリンパ球がHAART耐性HIV株による感染に対して耐性である、本発明1043の方法。
[本発明1045]
患者がHAART未施行である、本発明1033の方法。
[本発明1046]
患者がHAARTレジメンを受けている、本発明1033の方法。
[本発明1047]
患者にHAARTレジメンが奏効していないか奏効しなかった、本発明1033の方法。
[本発明1048]
有効量の本発明1001の発現ベクターおよび薬学的に許容可能な担体を含む薬学的組成物。
[本発明1049]
HIV感染患者の治療のための薬の製造における、本発明1048の薬学的組成物の使用。
[本発明1050]
本発明1048の薬学的組成物を患者に投与することを含む、患者におけるHIV感染の治療または予防方法。
[本発明1051]
組成物の投与後、患者がR5向性HIV株およびX4向性HIV株による感染に対して耐性である、本発明1050の方法。
[本発明1052]
組成物の投与後、患者がHAART耐性HIV株による感染に対して耐性である、本発明1051の方法。
[本発明1053]
患者がHAART未施行である、本発明1050の方法。
[本発明1054]
患者がHAARTレジメンを受けている、本発明1050の方法。
[本発明1055]
患者にHAARTレジメンが奏効していないか奏効しなかった、本発明1050の方法。
[本発明1056]
患者にHIV感染リスクがある、本発明1050の方法。
[本発明1057]
HIV感染患者の治療のための薬の製造における、本発明1001のウイルス発現ベクターの使用。
[本発明1058]
細胞に存在時、細胞へのHIV結合を阻害でき、かつ細胞内へのHIV融合またはHIV複製を防止できるウイルス発現ベクターの産生方法であって、以下の工程を含む産生方法:
細胞内へのHIV融合もしくはHIV複製を防止できるタンパク質を発現する遺伝子のcDNAを合成する段階;
ウイルスベクターの制限部位へ、合成したcDNAをクローニングする工程;ならびに
HIV共受容体の発現を下方制御できる発現単位をベクターの制限部位へ挿入する工程。
[本発明1059]
cDNAがC46 cDNAまたはTRIM5α cDNAであり、発現単位がCCR5を標的とするshRNAである、本発明1058の方法。
[本発明1060]
shRNAが配列番号1の配列を有する、本発明1059の方法。
[本発明1061]
ウイルスベクターがFG11Fレンチウイルスベクターである、本発明1059の方法。
[本発明1062]
C46またはTRIM5α cDNAがFG11FベクターのBamHIおよびEcoRI制限部位へクローニングされている、本発明1061の方法。
[本発明1063]
shRNAがFG11FベクターのXbal/Xhol制限部位間に挿入されている、本発明1062の方法。
本発明がより明確に理解され得るように、以下の図面の簡単な説明および実施例に関連して好ましい実施形態を記載する。
本発明は、非HIV遺伝子および/またはタンパク質(すなわち宿主細胞遺伝子および/またはタンパク質)を標的とする治療アプローチが新規HIV株の阻害物質耐性が出現する可能性を低下させるという認識に部分的に基づく。特に、本発明は、HIVライフサイクルの異なる段階に影響を与える細胞タンパク質を標的化または使用することによりHIV感染を予防または治療するベクターおよびかかるベクターの使用方法を提供する。例えば、一実施形態では、このベクターは、ウイルス侵入(結合)の阻害物質および細胞膜へのウイルス融合阻害物質を発現できる。別の実施形態では、このベクターは、ウイルス侵入の阻害物質およびウイルス複製阻害物質を発現できる。したがって、本発明は、HIV共受容体の阻害物質をコードする第1の核酸配列、および標的細胞へのHIVウイルス融合またはHIV複製を阻害するタンパク質をコードする第2の核酸配列を含む発現ベクターを提供する。
の配列を含むshRNAをコードする。
の配列を含むC46タンパク質をコードする。
別の実施形態では、第2の核酸は、
の配列を含む。標的細胞へのHIV融合を阻害し本発明の発現ベクター内の第2の核酸配列によりコードできる他の適切なタンパク質としては、T20およびT20関連タンパク質、エンフビルチド、CP32M、およびシフビルチドが挙げられる。
の配列を含むヒトTRIM5αタンパク質をコードする。
別の実施形態では、第2の核酸配列は、
の配列を含む。
A.ベクタープラスミド構築物
様々な構築物を設計して、プラスミドとしてDNA形態で加工した。構築物を表1に要約し、図1〜4に図示説明する。これらの構築物はすべてパッケージング細胞系内へトランスフェクション時にレンチウイルスベクターを生じさせる(以下の項目B参照)。
水疱性口内炎ウイルス(VSV)−G偽型レンチウイルスベクターストックをすべてHEK−293 T細胞のリン酸カルシウム媒介性一過性トランスフェクションにより産生した。HEK−293 T細胞を日常的にDMEM(GIBCO Invitrogen)内で培養し、トランスフェクションのためにイスコフ改変ダルベッコ培地(IMDM)に変更した。すべての培養物は10%FCS(HyClone)、100単位のペニシリン、および100μg/mlストレプトマイシンを含有した。細胞を適量のベクタープラスミド、HIV−1レンチウイルスのパッケージング構築物であるpRSV−RevおよびpMDLg/pRRE、およびVSV−G発現プラスミドであるpCMV−VSV−Gと共トランスフェクトした(表2)。トランスフェクション後2日目および3日目に、ウイルスを培養上清から採取して濃縮した。濃縮ウイルスストックをGFP発現に基づきHEK−293 T細胞上で滴定した。shRNA発現EGFP構築物の力価は親EGFPベクターと比較してわずかにのみ低下した。産生に使用したプラスミドを図5に図式的に示す。
1. トランスフェクション前日、HEK 293T細胞を1.5×107細胞/T175でフラスコのDMEM+10%FBSおよび抗生剤内に播種する。
2. トランスフェクション日、培地を10%FBS、抗生剤およびクロロキン(10mMの100μl)含有IMDM25mLに変更する。
3. DNAマスター混合物を調製する
a. pMDLg/pRRE 10μg
b. pRSV−Rev 2.5μg
c. pCMV−VSV−G 3.2μg
d. ベクター(例えば図1〜4の構築物のうちの1つ)10μg
e. 水を添加して総容量980μLに調節する
4. 133μLの2M CaCl2を添加し、混合して、氷上で10分間インキュベートする。
5. 手で管を撹拌しながら、1110μLの2×HBS(1g Hepes、1.6g NaCl、0.72mlの0.25M Na2HPO4、1mlの1M KCl)を滴下する。
6. 氷上で20分間インキュベートする。
7. 細胞のT175フラスコを逆さに傾け、DNA混合物を培地に添加し、フラスコを2〜3回混合し、フラスコを右上方向にフリップする。
8. 培養を6〜8時間インキュベートする
9. 培地を除去して、新規の42mLのIMDM+10%FBSおよび抗生剤と交換する。
10. 形質導入後48時間目、培地を回収して、0.22または0.45μMフィルターを介してろ過し、新規の42mlのIMDM+10%FBSおよび抗生剤と交換する。
11. 形質導入後72時間目、培地を回収して、0.22または0.45μMフィルターを介してろ過する。
12. 両回収物をプールする
13. ウイルス含有培地(VCM)を超遠心分離によりSW28またはSW32管内で濃縮する。
a. 33〜38mLのVCMをショ糖緩衝液と共に管内に負荷する。
b. 管を20,000rpm、4℃で90分間遠心分離する。
c. 上清を除去して、250〜500μLのPBSまたはHBSをペレットに添加する。
d. VCMを4℃で一晩保存する。
e. VCMをピペットで取って混合し、アリコートして、−70℃で保存する。
方法2:Clontech CalPhosキットを用いた塩化カルシウムトランスフェクションによるレンチウイルス産生。
1. トランスフェクションの前日に、HEK 293T細胞を2.1×107細胞/T225で30mLのIMDM+10%FBS溶液に播種する。
2. トランスフェクション日、DNAマスター混合物を15mL管内で調製する:
a. pMDLg/pRRE 13μg
b. pRSV−Rev 3.25μg
c. pCMV−VSV−G 4.16μg
d. ベクター(例えば図1〜4の構築物のうちの1つ)13μg
e. 水を添加して総容量1500μLに調節する
3. 186μLの2M CaCl2を添加して、混合する。
4. 管をボルテックスしながら、1500μLの2×HBSを滴下する。
5. 室温で20分間インキュベートする。
6. 30mLのIMDM+2%FBSを50mL管に添加する。
7. DNA溶液を50mL管内のIMDMに添加する。
8. 前日回収した細胞から培地を吸引する。
9. 細胞単層をかき乱さないように、フラスコ中にDNA/IMDM溶液を穏やかにそそぐ。
10. フラスコを左右に穏やかに攪拌して細胞を混合物で覆う。
11. 培養を4時間インキュベートする。
12. 培地を除去し、細胞をPBSですすぎ、新規の30mLのIMDM+2%FBSと交換する。
13. 形質導入後24時間目、培地を回収して、新規の30mLのIMDM+2%FBSと交換する。
14. 回収したVCMを0.22μMフィルターを介してろ過し、4℃で一晩保存する。
15. 形質導入後48時間目、培地を回収して、0.22μMフィルターを介してろ過する。
16. 両VCM回収物をプールおよびアリコートして、−70℃で保存する。
17. 必要に応じて、Vivaspin20(Sartorius)カラムを用いてVCMを濃縮する:
a. 10mLの70%エタノールを添加することによりVivaspin20 MWCO 100000を調製する
b. 1000gで10分間回転させる。
c. 残りのエタノールを廃棄して、PBSを15mL添加する。
d. 1000gで10分間回転させる。
e. 残りのPBSを廃棄して、VCMを18mL添加する。
f. 1000gで30分間または全VCMがカラムを通過するまで回転させる。
実施例1に記載の各種レンチウイルスベクターを用いてCEM.NKR.CCR5およびMolt4/CCR5細胞(NIH AIDS試薬プログラム)細胞に感染させた。10%FBSおよび8μg/mLのポリブレンと共に1mLの未濃縮ウイルス含有培地(VCM)で2×105細胞を再懸濁した。培養物を37℃で1時間半インキュベートして、さらに1mLの増殖培地を添加した(RPMI+10%FBS)。形質導入後4日目、細胞のC46発現(2F5抗体染色による)、CCR5ノックダウン(CD195抗体染色による)、およびGFP発現についてFACS分析により分析した。細胞を連続培養させ続け、週2回最大8週間継代させた。
実施例1に記載の各種レンチウイルスベクターを用いて、オーストラリア赤十字輸血施設から得たヒト末梢血単核球(PBMC)を感染させた。Ficoll−plaque PLUS(GE Healthcare)を用いてPBMCを軟膜から単離してから、CD8+マイクロビーズ(Miltenyi Biotec)およびVarioMACS磁気単位を用いてCD8を枯渇させた。CD8+枯渇PBMCを20%FBSおよび5μg/mLのフィトヘマグルチニン(PHA)(Sigma)で補充したRPMI 1640培地内で2×106細胞/mLで48時間培養した。PHAで2日間刺激後、懸濁液中の細胞を回収し、200gで5分間遠心分離して、形質導入前、2×106細胞/mLでRPMI+20%FBS+10U/mLの組換えヒトインターロイキン−2(rhIL−2;Roche)で4時間再懸濁した。
sh5/C46レンチウイルスベクター(LV)を用いて、大量ドナー末梢血単核球から得たCD34+造血前駆/幹細胞(HPSC)を形質導入した。ドナーに顆粒球コロニー刺激因子(G−CSF)を注射してHPSCおよび末梢血単核球を動員した。G−CSF注射後、アフェレーシスにより細胞を回収し、動員したHPSCを含む大量単核球集団を凍結した。この実施例に用いた単核球試料は、これらの凍結ストックから得た。凍結時点で推定3.7×107 CD34+HPSCを含んだ50mL幹細胞回収バッグを融解した。融解時、総33.6×108生存細胞(73%生存能)を含むことが分かり、MACS(磁気抗体細胞分離)を用いて単離されたCD34+HPSC数は約3.3×107、すなわち約1%総単核球数(98%CD34陽性)であり、これは予測範囲内であった(図14の上パネルの分離分析前後を参照されたい)。
1. 幹細胞因子(SCF)、トロンボポエチン(TPO)およびFlt3リガンド(Flt3L)(各50ng/mL)を含むXビボ血清非含有培地内で6×106細胞を24時間、前刺激した。
2. 次いでウイルス含有培地(VCM)で6時間、前負荷した12ウェルプレートに4×105細胞のアリコートを移した。細胞を一晩(GFP対照、sh5、sh5/EGFP、C46、またはsh5/C46と)形質導入するかまたは形質導入しないままにしてから新規培地に72時間移した。
3. 形質導入後72時間目に実施したFACS分析により、GFPによる25〜30%形質導入が示された(図14、下パネル)。この実施例において、C46は2F5染色により検出不能であった。これは明らかにこれらの細胞がフローサイトメトリー感受性を欠くためである。残りの細胞をCAMEO−4(Hemogenix)メチルセルロース培養に入れ、複製で100細胞/ウェルでプレート化した。コロニーをスコア時、11日目の培養間に有意差は見られなかった(表8)。
sh5/C46二重レンチウイルス構築物で形質導入したT細胞系(Molt4/CCR5)(実施例1のベクター説明を参照されたい)をHIVの各種株:HIVBal(CCR5向性)、HIVIIIB(CXCR4向性)、およびHIVSF2(CCR5およびCXCR4向性)に曝露させた。曝露アッセイにおいて、1×106形質導入Molt4/CCR5細胞を15mL管に添加し、遠心分離した。上清を廃棄した。HIVウイルス含有培地(VCM)を添加して各管の最終濃度を感染効率(MOI)0.2〜0.002にした。次いでポリブレンを添加して最終濃度を8μg/mLにし、各管を穏やかに軽く叩いた。細胞およびウイルスを37℃で2時間インキュベートし、30分毎に穏やかに撹拌した。2時間インキュベーション後、培地(RPMI+10%FBS)内で細胞を洗浄し、T25フラスコ内培地3〜4mLで再懸濁した。細胞試料を採取して、11日目までに3〜4日毎に供給した。上清150μlを2回反復除去し、4℃で保存した。製造業者のプロトコルに従い、一般に値が標準曲線上に乗ることを確実にするために1/105〜1/106希釈を用いてP24タンパク質レベル(HIV感染の測定値)をアッセイした。
フィトヘマグルチニン(PHA)/IL2刺激末梢血単核球(PBMC)を実施例3に記載のレンチウイルスベクターで形質導入した。CCR5に対するshRNAとC46タンパク質を発現する二重構築物(LVsh5C46)の図式を図19Aに示す。形質導入後4日目、適切なモノクローナル抗体(例えば、CD195または2F5抗体)で細胞を着色し、CCR5、C46、およびGFP発現をフローサイトメトリーにより分析した(図19B)。レンチウイルス(LV)形質導入後16日目、LV形質導入PBMCをR5向性HIV株またはX4向性HIV株に曝露させた。HIV感染後4日目、培養上清を回収してp24タンパク質をELISAによりアッセイした(図19C)。
マトリゲルと胸腺切片との組み合わせで固化したsh5レンチウイルス形質導入CD34+造血前駆/幹細胞(HPSC)をヒト化骨髄/肝臓/胸腺(BLT)マウスモデルの腎臓莢膜下で移植した(Melkus et al. (2006) Nat Med, Vol. 12:1316−1322; Shimizu et al. (2010) Blood, Vol. 115:1534−1544を参照されたい)。NOD/SCID−hu BLTヒト化マウスでは、ヒト胸腺様小器官(thy/liv)における形質導入ヒトHPSC分化、およびHIV複製の主要部位である腸関連リンパ組織を含む全身性リンパ器官内の分化したヒトTリンパ球移動の評価が可能である。
sh5ベクター(Shimizu et al. (2010) Blood, Vol. 115: 1534−1544)について実施例7に記載のように、ヒト化BLTマウスモデルにおいてsh5/C46二重レンチウイルスベクターを試験する。このヒト化マウスモデルにおいてsh5/C46二重ベクターを評価するため、マトリゲルと胸腺切片で固化したベクター形質導入胎児肝由来のCD34+細胞およびCD34−細胞を腎臓莢膜下で移植してベクター形質導入thy/liv組織を生成する。3週間後、ベクター形質導入自家CD34+HPSC(1×106細胞)を亜致死照射したマウス尾に静脈内注射する。動物内のCCR5低下およびC46発現の影響を評価するため、二重sh5/C46ベクター(EGFP+)と対照(空レンチウイルス)ベクター(mCherry+)形質導入した等量混合のCD34+HPSC(5×105細胞)を共移植する。他の対照、例えば別の蛍光タンパク質(例えばYFP)を含むsh5単独ベクター、およびさらに別の蛍光タンパク質(例えばCFP)を含むC46単独ベクターがCD34+HPSCを形質導入するために使用され、移植のための混合物に存在する。この実験設計は、各種構築物の形質導入細胞間におけるCCR5低下およびC46発現の安定性および特異性レベルに関する相違を評価することを可能にする;マウス間の変動を制御するために、ベクターはすべて同じ動物に存在する。
sh5/C46二重ベクター、sh5/TRIM5α二重ベクター、またはsh5/TRIM5α−シクロフィリン二重ベクターを含む二重レンチウイルス構築物を自家ヒト細胞内に導入し、続いて患者に投与する。二重レンチウイルス構築物を再移植予定の患者から単離されたCD34+HPSC細胞、CD4+T細胞、CD8+T細胞、単球/マクロファージ(例えば自家細胞)の1つまたは複数内に導入する。あるいは、別の個人由来の(同種異系間の)細胞を使用する。あるいは、本明細書に記載の三重ベクターを使用する。
H1プロモーターの管理下でCCR5を標的とするshRNA、およびユビキチンプロモーターの管理下でTRIM5αタンパク質をコードする核酸を含む二重レンチウイルスベクターを、実施例1に記載の主鎖ベクターを用いて構築する。例えば、U−EGFPカセットは、制限酵素を用いてsh1005およびユビキチンプロモーターにより駆動されたEGFPを含むプラスミド構築物であるpFG12−H1−R5−U−EGFP(図3参照)から除去してpFG12−H1−R5を産生する。
図24Bに示すとおり、βアクチンプロモーター−TRIM5αを多クローニング部位へクローニングすることにより二重ベクターpFG11F−H1−R5−U−C46から三重ベクターを産生する。
Claims (16)
- 第1のプロモーターと機能的に連結された第1の核酸配列と、第2のプロモーターと機能的に連結された第2の核酸配列と、を含むレンチウイルス発現ベクターであって、該第1の核酸配列は、HIV共受容体を阻害する核酸分子をコードし、該第2の核酸配列は、HIV融合阻害物質タンパク質をコードし、該第2のプロモーターは、ユビキチンC pol IIプロモーターであり、かつ、該HIV融合阻害物質タンパク質は、C46タンパク質である、レンチウイルス発現ベクター。
- 前記レンチウイルス発現ベクターが自己不活性化する、請求項1記載のレンチウイルス発現ベクター。
- 前記HIV共受容体を阻害する核酸分子が、二重鎖領域を有するsiRNAまたはshRNAであり、かつ、該二重鎖領域が、該HIV共受容体の配列と実質的に同一および相補的な配列を含む、請求項1記載のレンチウイルス発現ベクター。
- 前記shRNAが、配列番号1の配列を有する、請求項3記載のレンチウイルス発現ベクター。
- 前記HIV共受容体を阻害する核酸分子が、該HIV共受容体の発現を低減することができ、かつ、前記ベクターが宿主細胞内で発現される、請求項1記載のレンチウイルス発現ベクター。
- 前記第1のプロモーターが、RNAポリメラーゼIIIプロモーターである、請求項1記載のレンチウイルス発現ベクター。
- 前記RNAポリメラーゼIIIプロモーターが、H1 pol IIIプロモーターである、請求項6記載のレンチウイルス発現ベクター。
- 前記レンチウイルス発現ベクターが、HIVウイルス結合、標的細胞膜へのHIVウイルス融合、またはHIVウイルス複製の阻害物質をコードする第3の核酸配列をさらに含む、請求項1記載のレンチウイルス発現ベクター。
- 患者においてHIV感染を治療または予防するための薬学的組成物であって、請求項1〜8のいずれか一項記載のレンチウイルス発現ベクターが形質導入された造血細胞を含む、薬学的組成物。
- 患者においてHIV感染を治療または予防するための薬学的組成物であって、有効量の請求項1〜8のいずれか一項記載のレンチウイルス発現ベクターと、薬学的に許容可能な担体と、を含む、薬学的組成物。
- レンチウイルス発現ベクターを造血細胞に形質導入することにより調製された宿主細胞であって、該レンチウイルス発現ベクターが、HIV CCR5またはCXCR4共受容体の発現を低減することができる阻害核酸をコードする第1の核酸配列と、HIV融合阻害物質タンパク質をコードする第2の核酸配列と、を含み、該阻害核酸が、二重鎖領域を有する低分子干渉RNA(siRNA)または短ヘアピンRNA(shRNA)であり、該二重鎖領域が、該HIV共受容体の配列と実質的に同一および相補的な配列を含む、宿主細胞。
- 前記宿主細胞が、形質導入されていない造血細胞と比較して、CCR5またはCXCR4発現の低減を含む、請求項11記載の宿主細胞。
- 前記宿主細胞が、融合阻害物質タンパク質を発現する、請求項11記載の宿主細胞。
- 前記第2の核酸が、C46をコードし、かつ、前記宿主細胞が、膜アンカーC46タンパク質を発現する、請求項11記載の宿主細胞。
- 前記宿主細胞が、HIV感染に対して耐性である、請求項11記載の宿主細胞。
- 前記造血細胞が、造血前駆/幹細胞(HPSC)、CD4+Tリンパ球、CD8+Tリンパ球、単球/マクロファージ、またはこれらの組み合わせである、請求項11記載の宿主細胞。
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US22568709P | 2009-07-15 | 2009-07-15 | |
US61/225,687 | 2009-07-15 | ||
US28759909P | 2009-12-17 | 2009-12-17 | |
US61/287,599 | 2009-12-17 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015163281A Division JP6247259B2 (ja) | 2009-07-15 | 2015-08-21 | ヒト免疫不全ウイルス阻害のための二重ベクター |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019089588A Division JP6840189B2 (ja) | 2009-07-15 | 2019-05-10 | ヒト免疫不全ウイルス阻害のための二重ベクター |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2018050633A JP2018050633A (ja) | 2018-04-05 |
JP6529141B2 true JP6529141B2 (ja) | 2019-06-12 |
Family
ID=42797105
Family Applications (4)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012520638A Expired - Fee Related JP5828838B2 (ja) | 2009-07-15 | 2010-05-26 | ヒト免疫不全ウイルス阻害のための二重ベクター |
JP2015163281A Expired - Fee Related JP6247259B2 (ja) | 2009-07-15 | 2015-08-21 | ヒト免疫不全ウイルス阻害のための二重ベクター |
JP2017220978A Expired - Fee Related JP6529141B2 (ja) | 2009-07-15 | 2017-11-16 | ヒト免疫不全ウイルス阻害のための二重ベクター |
JP2019089588A Active JP6840189B2 (ja) | 2009-07-15 | 2019-05-10 | ヒト免疫不全ウイルス阻害のための二重ベクター |
Family Applications Before (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012520638A Expired - Fee Related JP5828838B2 (ja) | 2009-07-15 | 2010-05-26 | ヒト免疫不全ウイルス阻害のための二重ベクター |
JP2015163281A Expired - Fee Related JP6247259B2 (ja) | 2009-07-15 | 2015-08-21 | ヒト免疫不全ウイルス阻害のための二重ベクター |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019089588A Active JP6840189B2 (ja) | 2009-07-15 | 2019-05-10 | ヒト免疫不全ウイルス阻害のための二重ベクター |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US20120201794A1 (ja) |
EP (4) | EP3329772B1 (ja) |
JP (4) | JP5828838B2 (ja) |
AU (1) | AU2010274031B2 (ja) |
CA (1) | CA2767972A1 (ja) |
DK (2) | DK3329772T3 (ja) |
ES (3) | ES2546663T3 (ja) |
HK (1) | HK1168509A1 (ja) |
RU (2) | RU2562868C2 (ja) |
WO (1) | WO2011008348A2 (ja) |
Families Citing this family (38)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2010045659A1 (en) | 2008-10-17 | 2010-04-22 | American Gene Technologies International Inc. | Safe lentiviral vectors for targeted delivery of multiple therapeutic molecules |
GB201012410D0 (en) * | 2010-07-23 | 2010-09-08 | Medical Res Council | Intracellular immunity |
WO2013003410A2 (en) * | 2011-06-29 | 2013-01-03 | Ronilu Development Corporation | Prevention and treatment of hiv infection |
WO2015017755A1 (en) * | 2013-08-02 | 2015-02-05 | The Regents Of The University Of California | Engineering antiviral t cell immunity through stem cells and chimeric antigen receptors |
WO2016014837A1 (en) * | 2014-07-25 | 2016-01-28 | Sangamo Biosciences, Inc. | Gene editing for hiv gene therapy |
KR102599909B1 (ko) | 2014-11-14 | 2023-11-09 | 보이저 테라퓨틱스, 인크. | 근위축성 측삭 경화증(als)을 치료하는 조성물 및 방법 |
JP6975643B2 (ja) * | 2015-05-13 | 2021-12-01 | シーエスエル ベーリング ジーン セラピー インコーポレイテッド | レンチウイルスベクターのバイオ生産法 |
CA2986469A1 (en) | 2015-05-18 | 2016-11-24 | Calimmune, Inc. | Gene therapeutic for the treatment of hiv and uses thereof |
CN108026593A (zh) * | 2015-05-18 | 2018-05-11 | 卡琳缪恩股份有限公司 | 区分hiv-1与慢病毒载体的方法 |
WO2017007994A1 (en) | 2015-07-08 | 2017-01-12 | American Gene Technologies International Inc. | Hiv pre-immunization and immunotherapy |
US10137144B2 (en) | 2016-01-15 | 2018-11-27 | American Gene Technologies International Inc. | Methods and compositions for the activation of gamma-delta T-cells |
CN108883100B (zh) | 2016-01-15 | 2022-11-25 | 美国基因技术国际有限公司 | 用于活化γ-δT细胞的方法和组合物 |
JP7153332B2 (ja) * | 2016-02-08 | 2022-10-14 | アメリカン ジーン テクノロジーズ インターナショナル インコーポレイテッド | Hivワクチン接種および免疫療法 |
EP4036231A1 (en) | 2016-03-09 | 2022-08-03 | American Gene Technologies International Inc. | Combination vectors and methods for treating cancer |
CN105861559B (zh) * | 2016-04-11 | 2018-05-01 | 苏州奥特铭医药科技有限公司 | 一种能直接反应i型干扰素应答的慢病毒载体及其制备方法与应用 |
SG11201809643UA (en) | 2016-05-18 | 2018-12-28 | Voyager Therapeutics Inc | Compositions and methods of treating huntington's disease |
IL302748A (en) | 2016-05-18 | 2023-07-01 | Voyager Therapeutics Inc | modulatory polynucleotides |
US11976292B2 (en) | 2016-06-08 | 2024-05-07 | American Gene Technologies International Inc. | Non-integrating viral delivery system and methods related thereto |
CN106086075B (zh) * | 2016-06-23 | 2019-08-06 | 福建医科大学 | CXCR4RNAi慢病毒载体的构建方法 |
AU2017292582C1 (en) | 2016-07-08 | 2021-11-11 | American Gene Technologies International Inc. | HIV pre-immunization and immunotherapy |
WO2018017882A1 (en) | 2016-07-21 | 2018-01-25 | American Gene Technologies International Inc. | Viral vectors for treating parkinson's disease |
WO2018129540A1 (en) * | 2017-01-09 | 2018-07-12 | American Gene Technologies International Inc. | Hiv immunotherapy with no pre-immunization step |
CN110446785B (zh) | 2017-01-23 | 2024-04-26 | 瑞泽恩制药公司 | Hsd17b13变体及其应用 |
WO2018187231A2 (en) | 2017-04-03 | 2018-10-11 | American Gene Technologies International Inc. | Compositions and methods for treating phenylketonuria |
SG11201909453RA (en) | 2017-04-11 | 2019-11-28 | Regeneron Pharma | Assays for screening activity of modulators of members of the hydroxysteroid (17-beta) dehydrogenase (hsd17b) family |
WO2018204786A1 (en) | 2017-05-05 | 2018-11-08 | Voyager Therapeutics, Inc. | Compositions and methods of treating amyotrophic lateral sclerosis (als) |
MX2019013172A (es) | 2017-05-05 | 2020-09-07 | Voyager Therapeutics Inc | Composiciones y metodos para tratar la enfermedad de huntington. |
CA3070242A1 (en) | 2017-07-18 | 2019-01-24 | Calimmune, Inc. | Compositions and methods for treating beta-hemoglobinopathies |
JP7434151B2 (ja) | 2017-10-11 | 2024-02-20 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | Pnpla3 i148mの変異を発現している患者の肝疾患の治療におけるhsd17b13の阻害 |
EP3697908A1 (en) | 2017-10-16 | 2020-08-26 | Voyager Therapeutics, Inc. | Treatment of amyotrophic lateral sclerosis (als) |
TWI804518B (zh) | 2017-10-16 | 2023-06-11 | 美商航海家醫療公司 | 肌萎縮性脊髓側索硬化症(als)之治療 |
WO2019099619A1 (en) * | 2017-11-15 | 2019-05-23 | Weird Science Llc | Methods and compositions for non-myeloablative bone marrow reconstitution |
BR112021000620A2 (pt) | 2018-07-15 | 2021-04-20 | Enochian BioPharma, Inc. | métodos e composições com uso de células dendríticas recombinantes para terapia contra câncer |
US11352646B2 (en) | 2018-11-05 | 2022-06-07 | American Gene Technologies International Inc. | Vector system for expressing regulatory RNA |
IL303847A (en) * | 2021-01-28 | 2023-08-01 | Allogene Therapeutics Inc | Methods for transferring immune cells |
RU2769125C1 (ru) * | 2021-09-02 | 2022-03-28 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора) | Генетическая конструкция для экспрессии генов mNG_CD4-CCR5, рекомбинантная плазмида rVSV_mNG_CD4-CCR5 и рекомбинантный штамм вируса везикулярного стоматита rVSV_mNG_CD4-CCR5, обеспечивающий таргетный виролизис клеток, экспонирующих на своей поверхности белки gp120/gp41 ВИЧ-1 тропности R5 |
RU2768032C1 (ru) * | 2021-09-02 | 2022-03-23 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора) | Генетическая конструкция для экспрессии генов mNG_CD4-CXCR4, рекомбинантная плазмида rVSV_mNG_CD4-CXCR4 и рекомбинантный штамм вируса везикулярного стоматита rVSV_mNG_CD4-CXCR4, обеспечивающий таргетный виролизис клеток, экспонирующих на своей поверхности белки gp120/gp 41 ВИЧ-1 тропности X4 |
WO2023245011A2 (en) * | 2022-06-15 | 2023-12-21 | Cedars-Sinai Medical Center | Noncoding rna agents (bcyrn1 and derivatives thereof) to treat diseases of immunity |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4965204A (en) | 1984-02-06 | 1990-10-23 | The Johns Hopkins University | Human stem cells and monoclonal antibodies |
US4714680B1 (en) | 1984-02-06 | 1995-06-27 | Univ Johns Hopkins | Human stem cells |
US5061620A (en) | 1990-03-30 | 1991-10-29 | Systemix, Inc. | Human hematopoietic stem cell |
US5409813A (en) | 1993-09-30 | 1995-04-25 | Systemix, Inc. | Method for mammalian cell separation from a mixture of cell populations |
US5677136A (en) | 1994-11-14 | 1997-10-14 | Systemix, Inc. | Methods of obtaining compositions enriched for hematopoietic stem cells, compositions derived therefrom and methods of use thereof |
US6013516A (en) | 1995-10-06 | 2000-01-11 | The Salk Institute For Biological Studies | Vector and method of use for nucleic acid delivery to non-dividing cells |
US7737124B2 (en) * | 2001-09-13 | 2010-06-15 | California Institute Of Technology | Method for expression of small antiviral RNA molecules with reduced cytotoxicity within a cell |
US7850990B2 (en) * | 2001-10-03 | 2010-12-14 | Celator Pharmaceuticals, Inc. | Compositions for delivery of drug combinations |
RU2324738C2 (ru) * | 2006-06-16 | 2008-05-20 | Федеральное государственное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФГУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора) | ГЕНЕТИЧЕСКАЯ КОНСТРУКЦИЯ НА ОСНОВЕ ВЕКТОРНОЙ ПЛАЗМИДЫ pEGFP-N1, ПРОДУЦИРУЮЩАЯ siPHK-ИНГИБИТОРЫ РЕПРОДУКЦИИ ВИРУСА ИММУНОДЕФИЦИТА ЧЕЛОВЕКА 1 ТИПА (ЕЕ ВАРИАНТЫ) |
CN101841399B (zh) * | 2009-03-16 | 2013-08-07 | 上海贝尔股份有限公司 | 多基站协作接收网络中实现同步上行harq进程的方法和装置 |
PT2456786E (pt) * | 2009-07-24 | 2014-03-25 | Immune Design Corp | Vetores lentivirais pseudotipados com uma glicoproteína do envelope do vírus sindbis |
-
2010
- 2010-05-26 WO PCT/US2010/036247 patent/WO2011008348A2/en active Application Filing
- 2010-05-26 DK DK17197440.5T patent/DK3329772T3/da active
- 2010-05-26 RU RU2012105281/10A patent/RU2562868C2/ru active
- 2010-05-26 EP EP17197440.5A patent/EP3329772B1/en active Active
- 2010-05-26 EP EP10720980.1A patent/EP2453735B1/en not_active Not-in-force
- 2010-05-26 DK DK15166660.9T patent/DK2949208T3/en active
- 2010-05-26 ES ES10720980.1T patent/ES2546663T3/es active Active
- 2010-05-26 EP EP15166660.9A patent/EP2949208B1/en not_active Not-in-force
- 2010-05-26 RU RU2015133046A patent/RU2015133046A/ru not_active Application Discontinuation
- 2010-05-26 JP JP2012520638A patent/JP5828838B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2010-05-26 CA CA2767972A patent/CA2767972A1/en not_active Abandoned
- 2010-05-26 AU AU2010274031A patent/AU2010274031B2/en not_active Ceased
- 2010-05-26 US US13/384,206 patent/US20120201794A1/en not_active Abandoned
- 2010-05-26 EP EP19198486.3A patent/EP3659435A1/en not_active Withdrawn
- 2010-05-26 ES ES17197440T patent/ES2770627T3/es active Active
- 2010-05-26 ES ES15166660.9T patent/ES2657737T3/es active Active
-
2012
- 2012-09-25 HK HK12109456.4A patent/HK1168509A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2015
- 2015-08-21 JP JP2015163281A patent/JP6247259B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
2016
- 2016-05-09 US US15/150,373 patent/US20160243169A1/en not_active Abandoned
-
2017
- 2017-11-16 JP JP2017220978A patent/JP6529141B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
2019
- 2019-05-10 JP JP2019089588A patent/JP6840189B2/ja active Active
-
2021
- 2021-07-07 US US17/368,947 patent/US20220016176A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP2453735B1 (en) | 2015-07-08 |
RU2012105281A (ru) | 2013-08-20 |
JP6840189B2 (ja) | 2021-03-10 |
EP3329772B1 (en) | 2019-10-16 |
RU2015133046A (ru) | 2018-12-24 |
AU2010274031A1 (en) | 2012-02-02 |
DK2949208T3 (en) | 2018-01-22 |
JP2016013128A (ja) | 2016-01-28 |
JP6247259B2 (ja) | 2017-12-13 |
DK3329772T3 (da) | 2020-01-27 |
RU2562868C2 (ru) | 2015-09-10 |
US20120201794A1 (en) | 2012-08-09 |
CA2767972A1 (en) | 2011-01-20 |
JP2018050633A (ja) | 2018-04-05 |
US20220016176A1 (en) | 2022-01-20 |
EP2949208A1 (en) | 2015-12-02 |
EP3659435A1 (en) | 2020-06-03 |
US20160243169A1 (en) | 2016-08-25 |
JP2019122413A (ja) | 2019-07-25 |
AU2010274031B2 (en) | 2015-07-16 |
EP3329772A1 (en) | 2018-06-06 |
WO2011008348A2 (en) | 2011-01-20 |
ES2546663T3 (es) | 2015-09-25 |
HK1168509A1 (en) | 2013-01-04 |
WO2011008348A3 (en) | 2011-03-10 |
JP5828838B2 (ja) | 2015-12-09 |
ES2770627T3 (es) | 2020-07-02 |
EP2949208B1 (en) | 2017-11-15 |
ES2657737T3 (es) | 2018-03-06 |
EP2453735A2 (en) | 2012-05-23 |
JP2012533299A (ja) | 2012-12-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6529141B2 (ja) | ヒト免疫不全ウイルス阻害のための二重ベクター | |
EP3027755B1 (en) | Engineering antiviral t cell immunity through stem cells and chimeric antigen receptors | |
US9309535B2 (en) | Combination anti-HIV vectors, targeting vectors, and methods of use | |
US20210032627A1 (en) | Gene therapeutic for the treatment of hiv and uses thereof | |
US20140227236A1 (en) | Hiv-resistant stem cells and uses thereof | |
US20210139932A1 (en) | Improved lentiviruses for transduction of hematopoietic stem cells | |
AU2017254831B2 (en) | Dual vector for inhibition of human immunodeficiency virus | |
WO2021070956A1 (ja) | siRNA発現ベクター | |
Poluri et al. | Genetic therapy for HIV/AIDS | |
Engel et al. | Gene therapy for inborn and acquired immune deficiency disorders | |
TW202321456A (zh) | 反轉錄病毒載體製造用之核酸 | |
Trobridge et al. | Protection of Stem Cell-Derived Lymphocytes in a Primate AIDS Gene Therapy Model |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20181025 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190121 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20190318 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20190417 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20190424 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20190510 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20190424 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6529141 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
S531 | Written request for registration of change of domicile |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313531 |
|
S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |