JP6479329B2 - 食品組成物及び骨芽細胞分化促進剤 - Google Patents
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Description
項2.ローヤルゼリー1重量部に対して、グルコサミンが1〜20重量部、コンドロイチン硫酸が0.01〜10重量部含まれる、項1に記載の食品組成物。
項3.ローヤルゼリー1重量部に対して、グルコサミンが4〜20重量部、コンドロイチン硫酸が0.2〜10重量部含まれる、項1又は項2に記載の食品組成物。
項4.ローヤルゼリー1重量部に対して、グルコサミンが1〜12重量部、コンドロイチン硫酸が0.01〜2重量部含まれる、項1又は項2に記載の食品組成物。
項5.ローヤルゼリー、グルコサミン及びコンドロイチン硫酸を含む骨芽細胞への分化促進剤。
項6.ローヤルゼリー1重量部に対して、グルコサミンが1〜20重量部(好ましくは、4〜20重量部又は1〜12重量部)、コンドロイチン硫酸が0.01〜10重量部(好ましくは、0.2〜10重量部又は0.01〜2重量部)含まれる、項5に記載の骨芽細胞への分化促進剤。
項7.ローヤルゼリー、グルコサミン及びコンドロイチン硫酸を含む骨形成促進剤。
項8.ローヤルゼリー1重量部に対して、グルコサミンが1〜20重量部(好ましくは、4〜20重量部又は1〜12重量部)、コンドロイチン硫酸が0.01〜10重量部(好ましくは、0.2〜10重量部又は0.01〜2重量部)含まれる、項7に記載の骨形成促進剤。
項9.ローヤルゼリー、グルコサミン及びコンドロイチン硫酸を含む医薬組成物。
項10.ローヤルゼリー1重量部に対して、グルコサミンが1〜20重量部(好ましくは、4〜20重量部又は1〜12重量部)、コンドロイチン硫酸が0.01〜10重量部(好ましくは、0.2〜10重量部又は0.01〜2重量部)含まれる、項9に記載の医薬組成物。
項11.骨重量低下疾患の治療及び/又は予防用である、項9又は10に記載の医薬組成物。
ローヤルゼリー、グルコサミン、コンドロイチン硫酸の混合物:
ローヤルゼリーの凍結乾燥粉末、グルコサミン、コンドロイチン硫酸の終濃度が、各々100μg/mL、1149μg/mL、135μg/mLとなるようにフェノールレッドフリーの10% FBS添加α-MEM培地(Invitrogen, Cat. No. 41061-029)に溶解し、Millex-HV Filter Unit PVDF 0.45μm (ミリポア、SLHV033RS)でフィルター滅菌した。
被験物質を含まない上記10% FBS添加α-MEM培地を用意した。
被験物質としてローヤルゼリーのみを含む組成物:
ローヤルゼリー凍結乾燥粉末の終濃度が100μg/mLとなるように上記10% FBS添加α-MEM培地に溶解し、フィルター滅菌した。
グルコサミンとコンドロイチン硫酸の混合物:
グルコサミン、コンドロイチン硫酸の終濃度が、各々1149μg/mL、135μg/mLとなるように上記10% FBSα-MEM培地に溶解し、フィルター滅菌した。
(1)試験方法
骨芽細胞MC3T3-E1 (理研セルバンク、RCB1126)を2.5×105 cells/mLの濃度となるよう10% FBS添加α-MEM培地にて細胞を懸濁し、48ウェルプレートに500μl播種した。翌日、実施例1及び比較例1〜3の培地200μlに交換した。細胞は21日間培養し、その間、3〜4日間隔で実施例1及び比較例1〜3の培地に交換した。21日間培養後、骨芽細胞の分化マーカーであるオステオカルシン量をELISAで測定することにより、骨芽細胞の分化を評価した。
各被験試料をMC3T3-E1に添加して21日間培養後のオステオカルシン量について、図1に示す。これから分かるように、ローヤルゼリーとグルコサミン及びコンドロイチン硫酸を添加すると、何も添加しない場合と比べて有意にオステオカルシン量が増加した。さらに、ローヤルゼリーとグルコサミン及びコンドロイチン硫酸を添加すると、ローヤルゼリーのみ、グルコサミン及びコンドロイチン硫酸のみを添加した場合と比べて、有意にオステオカルシン量が増加した。以上の結果から、ローヤルゼリーのみ、グルコサミン及びコンドロイチン硫酸のみを添加する場合と比べて、ローヤルゼリーとグルコサミン及びコンドロイチン硫酸を同時に添加するとオステオカルシン量が相乗的に増加することが判明した。
(1)試験方法
破骨細胞RAW264.7 (理研セルバンク、RCB0535)を1×104個/mlとなるよう10% FBS添加α-MEM培地(Invitrogen, Cat. No. 41061-029)に懸濁し、200μlを96ウェルプレートに分注した。翌日、RANK Ligand (RANKL)を終濃度50 ng/mlとなるように添加した実施例1及び比較例1の培地200μlに交換した。3日間培養後、RANKLを添加した実施例1及び比較例1の培地200μlに交換し、更に2日間培養した。培養プレートをPBSで洗浄後、10%ホルマリン溶液にて細胞を固定し、TRAP染色(酒石酸耐性酸性フォスファターゼ染色)を行い、赤色に染まった3核以上のTRAP陽性の破骨細胞数を計測することにより、破骨細胞の分化を評価した。
各被験試料をRAW264.7に添加して培養後にTRAP染色し計測した3核以上のTRAP陽性細胞数について、図2に示す。これから分かるように、ローヤルゼリーとグルコサミン及びコンドロイチン硫酸を添加すると、何も添加しない場合と比べて有意にTRAP陽性細胞数の増加が抑制されることが判明した。
以下、本発明の食品組成物の処方例を示す。
乾燥ローヤルゼリー粉末:25重量%、サメ軟骨抽出物(コンドロイチン硫酸含有):6重量%、グルコサミン塩酸塩:58重量%、MSM、セルロース、ショ糖脂肪酸エステル、微粒二酸化ケイ素、ヒアルロン酸、鶏軟骨抽出物、ヒハツエキス末及び増粘剤をあわせて10重量%を混合・打錠し、錠剤を得た後、ゼイン:1重量%、グリセリン、水及びアルコールを適量加えた混合液でコーティングする。
グルコサミン塩酸塩:61重量%、サメ軟骨抽出物(コンドロイチン硫酸含有):7重量%、乾燥ローヤルゼリー粉末:5重量%、ヒアルロン酸、鶏軟骨抽出物、セルロース、微粒二酸化ケイ素、ショ糖脂肪酸エステル、増粘剤及びビタミンD3をあわせて16重量%を混合・打錠し、錠剤を得た後、酵母細胞壁、サンゴカルシウム、グリセリン、水、アルコール及び増粘剤をあわせた混合液11重量%でコーティングする。
Claims (10)
- ローヤルゼリー、グルコサミン及びコンドロイチン硫酸を含む骨重量低下疾患の改善及び/又は予防用食品組成物。
- ローヤルゼリー、グルコサミン及びコンドロイチン硫酸を含む骨重量低下疾患の改善及び/又は予防用食品組成物であって、ローヤルゼリー1重量部に対して、グルコサミンが1〜20重量部、コンドロイチン硫酸が0.01〜10重量部含まれる、食品組成物。
- ローヤルゼリー1重量部に対して、グルコサミンが4〜20重量部、コンドロイチン硫酸が0.2〜10重量部含まれる、請求項2に記載の食品組成物。
- ローヤルゼリー1重量部に対して、グルコサミンが1〜12重量部、コンドロイチン硫酸が0.01〜2重量部含まれる、請求項2に記載の食品組成物。
- ローヤルゼリー、グルコサミン及びコンドロイチン硫酸を含む骨芽細胞様細胞から骨芽細胞への分化促進剤。
- ローヤルゼリー、グルコサミン及びコンドロイチン硫酸を含む骨形成促進剤。
- ローヤルゼリー、グルコサミン及びコンドロイチン硫酸を含む骨重量低下疾患の治療及び/又は予防用医薬組成物。
- ローヤルゼリー、グルコサミン及びコンドロイチン硫酸を含む骨重量低下疾患の治療及び/又は予防用医薬組成物であって、ローヤルゼリー1重量部に対して、グルコサミンが1〜20重量部、コンドロイチン硫酸が0.01〜10重量部含まれる、医薬組成物。
- ローヤルゼリー1重量部に対して、グルコサミンが4〜20重量部、コンドロイチン硫酸が0.2〜10重量部含まれる、請求項8に記載の医薬組成物。
- ローヤルゼリー1重量部に対して、グルコサミンが1〜12重量部、コンドロイチン硫酸が0.01〜2重量部含まれる、請求項8に記載の医薬組成物。
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