JP6466774B2 - マイクロチップ - Google Patents

Description

本発明は、注入された試料溶液を試薬と反応させるマイクロチップに関する。

近年、遺伝子検査として、ＰＣＲ（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ）法やＬＡＭＰ（Ｌｏｏｐ−ｍｅｄｉａｔｅｄ Ｉｓｏｔｈｅｒｍａｌ Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ）法などを利用した核酸増幅装置が利用されている。そして、この核酸増幅装置を用いた遺伝子検査において、マイクロチップ内で核酸を増幅させる技術が開発された（例えば、特許文献１，２参照）。このマイクロチップは、互いに重ね合わされた複数の透明な基板層を備える。基板層の間には、大気圧に対して減圧された反応空間が形成される。反応空間は、試料溶液が穿刺注入される導入部（注入空間）と、核酸を増幅させる試薬が封入された複数の反応空間と、導入部と各反応空間とに連通される流路と、に分けられる。このため、試料溶液を注入するニードル（中空管）を導入部に穿刺すると、試料溶液は、反応空間の陰圧により、ニードルから導入部に導入され、更に流路を通って各反応空間に導入される。そして、試料溶液に含まれる核酸は、各反応空間において試薬と混合し、所定の温度でインキュベーションすることにより増幅する。

また、特許文献１に記載されたマイクロチップでは、更に、基板層の間に、反応空間に対して独立するとともに、大気圧に対して減圧された脱気空間が形成される。このマイクロチップでは、ニードルを反応空間の導入部に穿刺する前に、ニードルを脱気空間に穿刺する。すると、脱気空間の陰圧により、ニードル内の空気が脱気空間に排出される。

特開２０１３−１３０３９６号公報 特開２０１１−１６３９８４号公報

ところで、このようなマイクロチップは、反応空間が減圧状態に保持されていることを前提としている。しかしながら、製造上の問題などから、反応空間に空気がリークしてしまい、反応空間の減圧状態が十分に保持されていない場合がある。このような場合、ニードルを導入部に穿刺しても、試料溶液を反応空間内に吸引する力が弱いため、試料溶液が全ての反応空間に導入されない可能性がある。このような場合、検査ミスとなる可能性が高いが、その原因を突き止めることは容易ではない。

また、試料溶液の多くは透明であるため、使用済みのマイクロチップと使用前のマイクロチップとを見間違える可能性がある。その結果、誤って使用済みのマイクロチップを用いて遺伝子検査を行う可能性もある。

そこで、本発明は、反応空間の減圧状態が保たれているかを確認でき、更には使用の有無も確認できるマイクロチップを提供することを目的とする。

本発明に係るマイクロチップは、透明なチップ本体に、互いに独立した反応空間及び確認空間が形成されており、反応空間及び確認空間は、大気圧に対して減圧されており、反応空間には、注入される試料溶液と反応させるための試薬が封入されており、確認空間には、試料溶液が混ざると変色する変色剤が封入されている。

本発明に係るマイクロチップでは、確認空間の減圧状態が十分に保持されている場合、確認空間に注入された試料溶液は、確認空間の陰圧により確認空間全体に行き渡る。そして、変色剤は、試料溶液と混合されて、変色する。一方、確認空間の減圧状態が十分に保持されていない場合、試料溶液を確認空間に吸引する力が弱いため、確認空間に注入した試料溶液は、確認空間全体に行き渡らない。その結果、変色剤は、試料溶液と混合されないため、変色しない。又は、変色剤は、試料溶液と十分に混合されないため、変色しても、確認空間の減圧状態が十分に保持されている場合に比べて変色の程度が小さい。

ここで、反応空間及び確認空間が同じチップ本体に形成されているため、反応空間の減圧状態と確認空間の減圧状態とは略同じであると考えられる。そして、確認空間は、透明なチップ本体に形成されているため、マイクロチップの外側から、確認空間における変色剤の変色状態を観察することができる。ここで、透明とは、色を視認できる程度に透過性を有することをいう。このため、マイクロチップの外側から、確認空間における変色剤の変色状態を観察することで、反応空間の減圧状態が保たれているかを確認することができる。しかも、確認空間における変色剤の変色状態を視覚的に観察することで、マイクロチップの使用の有無も確認することができる。

確認空間は、試料溶液が穿刺注入される第一注入空間と、変色剤が封入された変色剤封入空間と、第一注入空間と変色剤封入空間とを連通する第一流路と、を有してもよい。このマイクロチップでは、試料溶液が穿刺注入される第一注入空間と、変色剤が封入された変色剤封入空間とが、第一流路を介して分けられている。このため、試料溶液を穿刺注入するニードルに変色剤が付着するのを防止することができる。これにより、同じニードルで試料溶液を反応空間に注入しても、反応空間に変色剤が混入されるのを防止することができる。

反応空間は、試料溶液が穿刺注入される第二注入空間と、試薬が封入された複数の試薬封入空間と、第二注入空間と試薬封入空間とを連通する第二流路と、を有してもよい。このマイクロチップでは、試料溶液が穿刺注入される第二注入空間に、第二流路を介して、試薬が封入された複数の試薬封入空間が連通されている。このため、一つのマイクロチップで、試料溶液を複数の試薬に混ぜることができる。これにより、一度に複数項目の検査を行うことができるとともに、検査時間の短縮化を図ることができる。

チップ本体は、反応空間を形成する反応空間用凹部と、確認空間を形成する確認空間用凹部と、が形成された第一板状部と、第一板状部に重ね合わされ、反応空間用凹部を覆うことで反応空間を形成するとともに、確認空間用凹部を覆うことで確認空間を形成する第二板状部と、第二板状部の第一板状部とは反対側に重ね合わされる第三薄膜部と、を備え、第一板状部及び第三薄膜部は、ガス不透過性を有し、第二板状部は、自己封止性を有してもよい。このマイクロチップでは、反応空間及び確認空間がガス不透過性を有する第一板状部及び第三薄膜部に挟まれているため、反応空間及び確認空間の減圧状態を適切に保持することができる。また、第三薄膜部から第二板状部にニードル等を穿刺することで、試料溶液を反応空間及び確認空間に穿刺注入することができる。この場合、第二板状部は、自己封止性を有するため、穿刺により形成された第二板状部の穴を自然に封止することができる。

本発明によれば、マイクロチップの反応空間の減圧状態が保たれているかを確認でき、更には使用の有無も確認できる。

第１実施形態のマイクロチップを示す平面図である。 図１に示すＩＩ−ＩＩ線における概略断面図である。 図１に示すＩＩＩ−ＩＩＩ線における概略断面図である。 確認空間に試料溶液を穿刺注入している状態を示す図である。 反応空間に試料溶液を穿刺注入している状態を示す図である。 第２実施形態のマイクロチップを示す平面図である。 図６に示すＶＩＩ−ＶＩＩ線における概略断面図である。 確認空間に試料溶液を穿刺注入している状態を示す図である。

以下、図面を参照して、本発明に係るマイクロチップの実施形態を説明する。実施形態に係るマイクロチップは、核酸を増幅して遺伝子検査を行うために、ニードル（中空管）により核酸を含む試料溶液が穿刺注入されるマイクロチップである。なお、各図において同一又は相当する要素については同一の符号を付し、重複する説明を省略する。

［第１実施形態］
図１は、第１実施形態のマイクロチップを示す平面図である。図２は、図１に示すＩＩ−ＩＩ線における概略断面図である。図３は、図１に示すＩＩＩ−ＩＩＩ線における概略断面図である。図１〜図３に示すように、本実施形態のマイクロチップ１は、透明なチップ本体２に、互いに独立した反応空間３及び確認空間４が形成されている。本実施形態において透明とは、色を視認できる程度に透過性を有することをいう。このため、チップ本体２は、完全な透明であってもよいが、色を視認できる程度の半透明であってもよい。

反応空間３は、マイクロチップ１の内部に形成された密閉空間である。反応空間３は、大気圧に対して減圧されており、例えば、１／１００気圧以下とすることができる。反応空間３には、注入される試料溶液と反応させるための試薬５が封入されている。本実施形態では、試薬５として、試料溶液に含まれる核酸に対応する試薬を用いる。

反応空間３は、注入空間３ａ（第二注入空間）と、複数の試薬封入空間３ｂと、流路３ｃ（第二流路）と、を有する。

注入空間３ａは、試料溶液が穿刺注入される空間であり、セル、またはウェルとも呼ばれる。注入空間３ａの空間形状は、特に限定されないが、例えば、略円柱状の空間とすることができる。

試薬封入空間３ｂは、試薬５が封入された空間であり、セル、またはウェルとも呼ばれる。試薬封入空間３ｂの数及び配置は、特に限定されないが、例えば、縦方向（図１における上下方向）に５列、横方向（図１における左右方向）に５列の、合計２５個とすることができる。試薬封入空間３ｂが複数である場合、各試薬封入空間３ｂに、それぞれ異なる核酸を増幅反応させる試薬を封入することが好ましい。これにより、注入空間３ａに穿刺注入した試料溶液に含まれる核酸に対応する試薬５が封入された試薬封入空間３ｂにおいてのみ、核酸を増幅反応させることができる。試薬封入空間３ｂの空間形状は、特に限定されないが、例えば、略円柱状の空間とすることができる。

流路３ｃは、注入空間３ａと各試薬封入空間３ｂとを連通する流路であり、ルート、またはチャンネルとも呼ばれる。具体的に説明すると、注入空間３ａから一本の流路３ｃが延び、注入空間３ａから反応空間３に至る途中で流路３ｃが試薬封入空間３ｂの個数に分岐し、分岐した各流路３ｃが各試薬封入空間３ｂに接続される。流路３ｃの断面形状は、特に限定されないが、例えば、半円形とすることができる。

確認空間４は、マイクロチップ１の内部に形成された密閉空間である。確認空間４は、大気圧に対して減圧されており、例えば、１／１００気圧以下とすることができる。確認空間４には、試料溶液が混ざると変色する変色剤６が封入されている。

ここで、変色するとは、色相、明度、彩度などの色の各要素が変わること、無色と有色との間で変わること、などをいう。変色剤６としては、水と反応して変色する化合物や組成物が好ましく、例えば、塩化コバルト(ＩＩ)（無水物）、硫酸銅（ＩＩ）（無水物）、特許第４５３７７６７号公報に記載された水分／湿度インジケータ、特許第４１００７７６号に記載された変色インジケータ、特許第３２９８２１７号公報に記載された水分インジケータ用組成物などを用いることができる。

確認空間４は、変色剤６が封入された空間であり、セル、またはウェルとも呼ばれる。確認空間４の空間形状は、特に限定されないが、例えば、略円柱状の空間とすることができる。

チップ本体２は、薄い略矩形板状に形成されている。チップ本体２は、第一板状部７と、第二板状部８と、第三薄膜部９と、を備える。第一板状部７、第二板状部８及び第三薄膜部９は、この順で重ね合わされて互いに密着している。なお、本実施形態においては、第一板状部７側を下側といい、第三薄膜部９側を上側という。

第一板状部７は、薄い略矩形板状に形成されている。第一板状部７の第二板状部８側の上面には、反応空間用凹部７ａと、確認空間用凹部７ｂと、が形成されている。反応空間用凹部７ａは、反応空間３を形成するための凹部である。反応空間用凹部７ａの形状は、注入空間３ａ、複数の試薬封入空間３ｂ及び流路３ｃのそれぞれの形状に対応する。確認空間用凹部７ｂは、確認空間４を形成するための凹部である。確認空間用凹部７ｂの形状は、確認空間４の形状に対応する。

第一板状部７は、ガス不透過性を有する。第一板状部７の素材としては、特に限定されないが、ガス不透過性を有するガラス、合成樹脂などを用いることができる。合成樹脂としては、ＰＭＭＡ（ポリメチルメタアクリレート：アクリル樹脂）、ＰＣ（ポリカーボネート）、ＰＳ（ポリスチレン）、ＰＥＴ（ポリエチレンテレフタレート）等が挙げられる。

第二板状部８は、薄い略矩形板状に形成されている。第二板状部８は、少なくとも反応空間用凹部７ａ及び確認空間用凹部７ｂを覆っている。この場合、第二板状部８は、第一板状部７の全面を覆うことが好ましい。第二板状部８は、反応空間用凹部７ａを覆うことで、第一板状部７との間に反応空間３の注入空間３ａ、複数の試薬封入空間３ｂ及び流路３ｃを形成する。また、第二板状部８は、確認空間用凹部７ｂを覆うことで、第一板状部７との間に確認空間４を形成する。

第二板状部８は、自己封止性を有する。自己封止性とは、穿刺等により穴が開けられても、自己の弾性変形による復元力により、この穴が自然に封止される性質をいう。第二板状部８に用いる弾性素材としては、シリコーン系エラストマー、アクリル系エラストマー、ウレタン系エラストマー、フッ素系エラストマー等を挙げることができる。第二板状部は、更に、ガス透過性を有することが好ましく、自己封止性及びガス透過性を有する弾性素材であるＰＤＭＳ（ポリジメチルシロキサン）を採用することができる。

第三薄膜部９は、薄い略矩形板状に形成されている。第三薄膜部９は、第二板状部８の第一板状部７とは反対側に重ね合わされて、第一板状部７と対向している。この場合、第三薄膜部９は、第二板状部８の全面に重ね合わされることが好ましい。第三薄膜部としては、公知の合成樹脂フィルムを使用することができる。例えば、ポリオレフィンフィルム、ポリビニルアルコールフィルム、ポリエステルフィルム、およびポリアクリルニトリルフィルムを挙げることができる。この中でも、ポリビニルアルコールフィルム、ポリエステルフィルム、ポリアクリロニトリルフィルムは、ガスバリア性が高いため好ましい。

このように構成されるマイクロチップ１は、次のように製造できる。まず、第一板状部７、第二板状部８及び第三薄膜部９を用意し、反応空間用凹部７ａの試薬封入空間３ｂに対応する凹部に試薬５を封入するとともに、確認空間用凹部７ｂに変色剤６を封入する。そして、減圧雰囲気下（大気圧に対して減圧された状態）において、第一板状部７、第二板状部８及び第三薄膜部９を重ね合せて互いに密着させる。これにより、チップ本体２の内部に、反応空間３及び確認空間４が形成され、反応空間３及び確認空間４は、大気圧に対して減圧された状態となり、反応空間３及び確認空間４は、略同じ気圧となる。

次に、マイクロチップ１を用いた遺伝子検査の方法について説明する。

この遺伝子検査では、確認空間４に試料溶液を穿刺注入する確認工程（Ｓ１）を経た後に、反応空間３に試料溶液を穿刺注入する反応工程（Ｓ２）を行う。

図４は、確認空間に試料溶液を穿刺注入している状態を示す図である。図４に示すように、確認工程（Ｓ１）では、試料溶液が充填された容器（不図示）に接続されたニードルＮを用いて、試料溶液を確認空間４に穿刺注入する。具体的に説明すると、ニードルＮを、確認空間用貫通孔９ｂから第二板状部８に穿刺し、ニードルＮの先端部分を確認空間４に挿入する。

すると、確認空間４の減圧状態が十分に保持されている場合、試料溶液は、確認空間４の陰圧により、ニードルＮから確認空間４に吸引されて、確認空間４全体に行き渡る。そして、変色剤６は、試料溶液と混合されて、変色する。このため、使用済みのマイクロチップ１では、確認空間４における変色剤６が変色した状態となっている。

一方、確認空間４の減圧状態が十分に保持されていない場合、確認空間４の陰圧が弱くなっているため、試料溶液を確認空間４に吸引する力が弱くなる。このため、試料溶液が確認空間４に吸入されないで変色剤６が変色しないか、吸入されたとしても変色剤６と十分混合されず変色むらが生じる。

また、ニードルＮの管内に空気が残っていた場合、ニードルＮの先端部を確認空間４に挿入することで、この空気も試料溶液と一緒に確認空間４に吸引される。これにより、ニードルＮから空気が排出される。このように、確認空間４は、ニードルＮから脱気する脱気空間としても機能する。また、確認空間４への挿入時に、ニードルＮの内壁が試料溶液に触れることで共洗いの効果があり、その後の反応空間３への穿刺時にスムースな液注入をもたらす。但し、ニードルＮの管内に混入されている空気の量は微量であるため、変色剤６の変色状態を観察する上で、この空気の影響は殆ど無視できる。

確認空間４と反応空間３は同一のチップ上に形成されており、各空間の減圧状態も同一である。したがって、上述した確認工程（Ｓ１）で変色剤が変色しないか、変色むらが生じた場合には、確認空間４だけではなく反応空間３も真空度が低下していると考えられる。このため、続く反応工程（Ｓ２）を実施しても、誤った結果をもたらすことになる。確認工程（Ｓ１）を実施して、変色剤６が変色しないか、変色むらが生じた場合には、直ちに検査を中止することにより、真空度が低下したマイクロチップ１による検査ミスを防止することができる。

図５は、反応空間に試料溶液を穿刺注入している状態を示す図である。図５に示すように、反応工程（Ｓ２）では、確認工程（Ｓ１）と同じニードルＮを用いて、試料溶液を反応空間３に穿刺注入する。具体的に説明すると、ニードルＮを、反応空間用貫通孔９ａから第二板状部８に穿刺し、ニードルＮの先端部分を反応空間３の注入空間３ａに挿入する。

すると、反応空間３の減圧状態が十分に保持されている場合、試料溶液は、反応空間３の陰圧により、ニードルＮから注入空間３ａに吸引されて、注入空間３ａから流路３ｃを伝って全ての試薬封入空間３ｂに行き渡る。なお、確認工程（Ｓ１）においてニードルＮ内の空気を除去しているため、ニードルＮからは注入空間３ａに空気が流入しない。そして、試薬５は、各試薬封入空間３ｂにおいて、試料溶液と混合される。その後所定の温度でインキュベーションすることにより核酸が増幅する。

その後、各試薬封入空間３ｂで増幅生成物の有無を検出する。増幅反応により生成された核酸の検出にあたっては、公知の検出方法を適用することができる。また、増幅反応後だけではなく、増幅反応を経時的に観察して増幅生成物を検出することも可能である。さらに各試薬封入空間３ｂに封入するプライマーセットを異なったものにすることで、多項目の核酸増幅反応を実施することも可能である。

なお、確認空間４の観察容易性の観点からは、平面視における確認空間４の面積（図１における確認空間４の面積）は、１ｍｍ^２以上であることが好ましく、２ｍｍ^２以上であることが更に好ましい。一方、省スペース化の観点からは、平面視における確認空間４の面積は、６ｍｍ^２以下であることが好ましく、４ｍｍ^２以下であることが更に好ましい。

このように、本実施形態のマイクロチップ１では、確認空間４における変色剤６の変色状態を視覚的に観察することで、マイクロチップ１の使用の有無も確認することができる。これにより、誤って使用済みのマイクロチップ１を用いて遺伝子検査を行うことを防止することができる。

また、このマイクロチップ１では、反応空間３及び確認空間４がガス不透過性を有する第一板状部７及び第三薄膜部９に挟まれているため、反応空間３及び確認空間４の減圧状態を適切に保持することができる。また、第三薄膜部９側（上側）から第二板状部８にニードルＮを穿刺することで、試料溶液を反応空間３及び確認空間４に穿刺注入することができる。この場合、第二板状部８は、自己封止性を有するため、穿刺により形成された第二板状部８の穴を自然に封止することができる。

［第２実施形態］
次に、第２実施形態について説明する。第２実施形態は、基本的に第１実施形態と同様であり、確認空間の形状のみが第１実施形態と相違する。このため、以下では、第１実施形態と相違する事項のみを説明し、第１実施形態と同様の事項の説明を省略する。

図６は、第２実施形態のマイクロチップを示す平面図である。図７は、図６に示すＶＩＩ−ＶＩＩ線における概略断面図である。図６及び図７に示すように、本実施形態のマイクロチップ１１は、透明なチップ本体１２に、互いに独立した反応空間３及び確認空間４が形成されている。本実施形態において透明とは、色を視認できる程度に透過性を有することをいう。

確認空間１４は、第１実施形態の確認空間４に対応する。確認空間１４は、マイクロチップ１の内部に形成された密閉空間である。確認空間１４は、大気圧に対して減圧されており、例えば、１／１００気圧以下とすることができる。確認空間１４には、試料溶液が混ざると変色する変色剤６が封入されている。

確認空間１４は、注入空間１４ａ（第一注入空間）と、変色剤封入空間１４ｂと、流路１４ｃ（第二流路）と、を有する。

注入空間１４ａは、試料溶液が穿刺注入される空間であり、セル、またはウェルとも呼ばれる。注入空間１４ａの空間形状は、特に限定されないが、例えば、略円柱状の空間とすることができる。

変色剤封入空間１４ｂは、変色剤６が封入された空間であり、セルとも呼ばれる。変色剤封入空間１４ｂは、一つで良いが、場合によっては複数あってもよい。変色剤封入空間１４ｂの空間形状は、特に限定されないが、例えば、略円柱状の空間とすることができる。

流路１４ｃは、注入空間１４ａと変色剤封入空間１４ｂとを連通する流路であり、ルート、またはチャンネルとも呼ばれる。流路１４ｃの断面形状は、特に限定されないが、例えば、半円形とすることができる。流路１４ｃの断面積及び注入空間１４ａから変色剤封入空間１４ｂに至る流路１４ｃの長さは、試料溶液を通過させつつ試料溶液の逆流を防止できる程度に設定されており、更に、大きな気泡が通過できない程度に設定されていることが好ましい。具体的には、流路１４ｃの断面積は、０．０００１ｍｍ^２以上０．０１ｍｍ^２以下であることが好ましく、０．０００５ｍｍ^２以上０．００２５ｍｍ^２以下であることが更に好ましい。また、注入空間１４ａから変色剤封入空間１４ｂに至る流路１４ｃの長さは、１ｍｍ以上１０ｍｍ以下であることが好ましく、２ｍｍ以上５ｍｍ以下であることが更に好ましい。

チップ本体１２は、薄い略矩形板状に形成されている。チップ本体１２は、第一板状部１７と、第二板状部８と、第三薄膜部９と、を備える。第一板状部１７、第二板状部８及び第三薄膜部９は、この順で重ね合わされて互いに密着している。なお、本実施形態においては、第一板状部１７側を下側といい、第三薄膜部９側を上側という。

第一板状部１７は、第１実施形態の第一板状部７に対応する。第一板状部１７は、薄い略矩形板状に形成されている。第一板状部１７の第二板状部８側の上面には、反応空間用凹部７ａと、確認空間用凹部１７ｂと、が形成されている。反応空間用凹部７ａは、第１実施形態の反応空間用凹部７ａと同様である。確認空間用凹部１７ｂは、確認空間４を形成するための凹部である。確認空間用凹部１７ｂの形状は、注入空間１４ａ、変色剤封入空間１４ｂ及び流路１４ｃのそれぞれの形状に対応する。このため、第二板状部８が確認空間用凹部１７ｂを覆うことで、第一板状部１７と第二板状部８との間に、確認空間４の注入空間１４ａ、変色剤封入空間１４ｂ及び流路１４ｃが形成される。なお、第一板状部１７の素材は、第１実施形態の第一板状部７の素材と同様である。

次に、マイクロチップ１１を用いた遺伝子検査の方法について説明する。

この遺伝子検査では、確認空間４に試料溶液を穿刺注入する確認工程（Ｓ１１）を経た後に、反応空間３に試料溶液を穿刺注入する反応工程（Ｓ２）を行う。なお、反応工程（Ｓ２）は、第１実施形態と同様である。

図８は、確認空間に試料溶液を穿刺注入している状態を示す図である。図８に示すように、確認工程（Ｓ１１）では、ニードルＮを用いて、試料溶液を確認空間１４に穿刺注入する。具体的に説明すると、ニードルＮを、確認空間用貫通孔９ｂから第二板状部８に穿刺し、ニードルＮの先端部分を確認空間１４の注入空間に挿入する。

すると、確認空間１４の減圧状態が十分に保持されている場合、試料溶液は、確認空間１４の陰圧により、ニードルＮから注入空間１４ａに吸引されて、注入空間１４ａから流路１４ｃを伝って変色剤封入空間１４ｂ全体に行き渡る。そして、変色剤６は、試料溶液と混合されて、変色する。このため、使用済みのマイクロチップ１では、変色剤封入空間１４ｂにおける変色剤６が変色した状態となっている。

一方、確認空間１４の減圧状態が十分に保持されていない場合、確認空間１４の陰圧が弱くなっているため、試料溶液を確認空間１４に吸引する力が弱くなる。このため、試料溶液が、確認空間４に吸入されないで変色剤６が変色しないか、吸入されたとしても変色剤６と十分混合されず変色むらが生じる。

また、ニードルＮの管内に空気が残っていた場合、ニードルＮの先端部を確認空間１４に挿入することで、この空気も試料溶液と一緒に注入空間１４ａに吸引される。これにより、ニードルＮから空気が排出される。但し、注入空間１４ａと変色剤封入空間１４ｂとが流路１４ｃを介して分けられているため、ニードルＮから排出された空気が注入空間１４ａから変色剤封入空間１４ｂに流れていくのが防止される。

このように、本実施形態のマイクロチップ１１では、試料溶液が穿刺注入される注入空間１４ａと、変色剤６が封入された変色剤封入空間１４ｂとが、第一流路を介して分けられている。このため、試料溶液を穿刺注入するニードルＮに変色剤６が付着するのを防止することができる。これにより、同じニードルＮで試料溶液を反応空間３に注入しても、反応空間３に変色剤６が混入されるのを防止することができる。

以上、本発明の実施形態について説明したが、本発明は上記の各実施形態に限定されるものではない。例えば、核酸を増幅させる遺伝子検査以外の検査に用いるマイクロチップに適用してもよく、また、チップ本体も適宜構成を変更してもよい。

１…マイクロチップ、２…チップ本体、３…反応空間、３ａ…注入空間（第二注入空間）、３ｂ…試薬封入空間、３ｃ…流路（第二流路）、４…確認空間、５…試薬、６…変色剤、７…第一板状部、７ａ…反応空間用凹部、７ｂ…確認空間用凹部、８…第二板状部、９…第三薄膜部、９ａ…反応空間用貫通孔、９ｂ…確認空間用貫通孔、１１…マイクロチップ、１２…チップ本体、１４…確認空間、１４ａ…注入空間（第一注入空間）、１４ｂ…変色剤封入空間、１４ｃ…流路（第一流路）、１７…第一板状部、１７ｂ…確認空間用凹部、Ｎ…ニードル。

Claims (4)

1. 透明なチップ本体に、互いに独立した反応空間及び確認空間が形成されており、
   前記反応空間及び前記確認空間は、大気圧に対して減圧されており、
   前記反応空間には、注入される試料溶液と反応させるための試薬が封入されており、
   前記確認空間には、前記試料溶液が混ざると変色する変色剤が封入されている、
   マイクロチップ。
2. 前記確認空間は、
   前記試料溶液が穿刺注入される第一注入空間と、
   前記変色剤が封入された変色剤封入空間と、
   前記第一注入空間と前記変色剤封入空間とを連通する第一流路と、を有する、
   請求項１に記載されたマイクロチップ。
3. 前記反応空間は、
   前記試料溶液が穿刺注入される第二注入空間と、
   前記試薬が封入された複数の試薬封入空間と、
   前記第二注入空間と前記試薬封入空間とを連通する第二流路と、を有する、
   請求項１又は２に記載されたマイクロチップ。
4. 前記チップ本体は、
   前記反応空間を形成する反応空間用凹部と、前記確認空間を形成する確認空間用凹部と、が形成された第一板状部と、
   前記第一板状部に重ね合わされ、前記反応空間用凹部を覆うことで前記反応空間を形成するとともに、前記確認空間用凹部を覆うことで前記確認空間を形成する第二板状部と、
   前記第二板状部の前記第一板状部とは反対側に重ね合わされる第三薄膜部と、を備え、
   前記第一板状部及び前記第三薄膜部は、ガス不透過性を有し、
   前記第二板状部は、自己封止性を有する、
   請求項１〜３の何れか一項に記載のマイクロチップ。

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