JP6462272B2

JP6462272B2 - フコイダン系健康食品

Info

Publication number: JP6462272B2
Application number: JP2014167716A
Authority: JP
Inventors: 中溝　公次; 公次中溝; 義之宮▲崎▼
Original assignee: 株式会社ヴェントゥーノ
Priority date: 2014-08-20
Filing date: 2014-08-20
Publication date: 2019-01-30
Anticipated expiration: 2034-08-20
Also published as: JP2016042804A

Description

本発明は、粉末状、カプセル、錠剤、あるいは、飲みやすくするために調味した溶液に溶解した水などの溶媒に溶解した飲み物として経口投与される、フコイダンを主体とした健康食品に関するものである。

メカブフコイダンとモズクフコイダンの混合物を用いることで、生体防御亢進剤及び免疫賦活性剤として優れた機能を有するとともに、健康食品としての味と風味を向上させる技術が開発されている。

例えば、特許文献１（特開２００４−２４０５４号公報）には、ワカメ芽株より抽出分画したフコイダン画分を１〜９０％と残部が沖縄フトモズクより抽出分画したフコイダン画分からなる混合物にアガリクス粉末を配合した高血糖を抑制し、血糖を低く保つ効果を持つフコイダン系健康食品が開示されている。
そして、その後の研究によりフコイダンは、「抗ガン作用」「コレステロール低下作用」「血圧低下作用」「抗ウイルス作用」など様々な生理機能を有することが解明されてきている。

特開２００４−２４０５４号公報

フコイダンについてさらに研究を進めた結果、由来となる海藻の違いで効果が違うことが明確となったため、その効果の違いに着目し、違う由来のフコイダンを３種類以上掛け合わせて、お互いの機能性の補完と相乗効果を見出すことを課題として開発を進めた。

そして、モズクフコイダン、メカブフコイダン及びガゴメフコイダンの混合比を最適化することにより、抗腫瘍活性の強いフコイダン系健康食品が得られることを突き止めるに至った。
すなわち、本発明は、抗腫瘍活性の強いフコイダン系健康食品の提供を目的とするものである。

請求項１に係る発明は、モズクフコイダンを６５〜７０％、ガゴメフコイダンを５〜１０％、メカブフコイダンをその残部として含有する混合物を有効成分として含むフコイダン系健康食品である。

請求項１に係る発明のフコイダン系健康食品によれば、モズクフコイダン、メカブフコイダン及びガゴメフコイダンのいずれかを有効成分として含むフコイダン系健康食品、並びにモズクフコイダン、メカブフコイダン及びガゴメフコイダンのうちいずれか２つを含有する混合物を有効成分として含むフコイダン系健康食品よりも抗腫瘍活性の非常に強いフコイダン系健康食品を提供することができる。

マウス脾臓細胞を用いて、各種フコイダンのサイトカイン産生に及ぼす影響を示すグラフ。実施例のフコイダン系健康食品のマウスへの投与と体重変化を示すグラフ。実施例のフコイダン系健康食品のマウスへの投与と総摂食量を示すグラフ。実施例のフコイダン系健康食品のマウスへの投与と臓器重量を示すグラフ。実施例のフコイダン系健康食品のマウスへの投与と腫瘍重量を示すグラフ。実施例のフコイダン系健康食品のマウスへの投与とＴＮＦ−α産生量の変化を示すグラフ。実施例のフコイダン系健康食品のマウスへの投与とＩＦＮ−γ産生量の変化を示すグラフ。実施例のフコイダン系健康食品のマウスへの投与とＩＬ−１２産生量の変化を示すグラフ。

以下、実施例によって本発明の実施形態を説明する。

モズクフコイダン、メカブフコイダン及びガゴメフコイダンの混合比（以下「ＭＭＧ混合比」という。）を検討するため、マウス脾臓細胞を用いて、様々なＭＭＧ混合比及び単体フコイダンの細胞増殖に対する効果を以下の手順により検討した。
なお、ＭＭＧ混合比については、表記を簡略化するため、例えば、モズクフコイダンを５０％、メカブフコイダンを３０％及びガゴメフコイダンを２０％混合したものについて、［50:30:20］と記載する。

・フコイダンサンプルの調製
（手順１）各フコイダン粉末を５０ｍｇ／ｍＬとなるように超純水に溶解し、不溶物を遠心分離した後、上清を凍結乾燥する。
（手順２）凍結乾燥物を１０ｍｇ／ｍＬとなるようにリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）に溶解し、フィルター滅菌してフコイダンサンプルとする。
各フコイダンサンプルとしては、単体のモズクフコイダン、メカブフコイダン及びガゴメフコイダン、並びにＭＭＧ混合比［50:50:00］、［50:00:50］、［00:50:50］、［50:25:25］、［25:50:25］、［25:25:50］、［60:35:05］、［60:05:35］、［65:30:05］、［65:05:30］、［70:25:05］、［70:05:25］、［80:15:05］、［80:10:10］、［80:05:15］のものを用いた。

・細胞培養及び機能検定
（手順３）マウス脾臓細胞を、雄Ｂａｌｂ／ｃマウスの脾臓から、３３％パーコールを用いた遠沈により調製し、調製した脾臓細胞を１０の７乗cells／ｍＬに調製して、９６穴プレート（１００μＬ）に播種する。
（手順４）各フコイダンサンプルを終濃度１０μｇ／ｍＬ程度となるように培地に添加し、３日間培養した後、細胞増殖能をＷＳＴ−８法にて測定する。

測定の結果を図１に示す。
その結果から、ＭＭＧ混合比が［60:35:05］、［60:05:35］、［65:30:05］、［65:05:30］、［70:25:05］、［70:05:25］、［80:15:05］、［80:10:10］及び［80:05:15］であれば、各フコイダン単体やＭＭＧ混合比が［50:50:00］、［50:00:50］及び［00:50:50］の２種混合物のいずれよりも細胞増殖に対する効果が大きいことが分かった。
そのうち、ＭＭＧ混合比が［60:35:05］、［65:30:05］、［70:25:05］、［80:15:05］及び［80:10:10］のものについては、吸光度の平均が１．１を超えており、細胞増殖に対する効果が特に大きいことが分かった。

これらの測定結果を総合すると、モズクフコイダンを６０〜８０％、メカブフコイダン及びガゴメフコイダンをその残部として含有する混合物は、フコイダン単体やフコイダンの２種混合物より細胞増殖に対する効果に好影響をもたらし、なかでもモズクフコイダンを６５〜７０％、メカブフコイダン及びガゴメフコイダンをその残部として含有する混合物は、細胞増殖に対する効果が特に大きいことが分かる。
また、モズクフコイダンを６０〜８０％、ガゴメフコイダンを５〜１０％、メカブフコイダンをその残部として含有する混合物は、細胞増殖に対する効果が特に大きいことも分かる。
そして、細胞増殖に対する効果という観点からみると、モズクフコイダンを６５〜７０％、ガゴメフコイダンを５〜１０％、メカブフコイダンをその残部として含有する混合物が最適なものであることが分かる。

そこで、細胞増殖に対する効果が最適なフコイダン混合物（以下「フコイダンコンプレックスＭＭＧ」という。）を２％配合した飼料（以下「フコイダンコンプレックスＭＭＧ飼料」という。）をマウスに投与することにより、抗腫瘍効果が上がるか否かを以下の手順により検討した。

（手順１）実験動物として雄Ｂａｌｂ／ｃマウス５０匹を購入し、個別飼育、自由摂取、自由摂水、２３±２℃、１２時間明暗サイクルの飼育条件で、１週間の予備飼育を行った。
（手順２）上記のマウス５０匹を前飼育０日目に、体重の平均が各群でほぼ等しくなるように次の４群に分け、予備飼育と同条件で２週間の前飼育及び３週間の本飼育を行った。
・コントロール群：サルコーマ１８０を移植せずフコイダンコンプレックスＭＭＧ飼料を与えない群。
・Ｓコントロール群：本飼育０日目にサルコーマ１８０を移植しフコイダンコンプレックスＭＭＧ飼料を与えない群。
・前飼育ＭＭＧ２％群：前飼育０日目以降フコイダンコンプレックスＭＭＧ飼料を与え続け本飼育０日目にサルコーマ１８０を移植する群。
・本飼育ＭＭＧ２％群：本飼育０日目にサルコーマ１８０を移植し、同日以降フコイダンコンプレックスＭＭＧ飼料を与え続ける群。
なお、コントロール群及びＳコントロール群に与える飼料組成は、コーンスターチ４２％、カゼイン２５％、セルロース７％、スクロース１５％、コーン油６％、ビタミンＭｉｘ１％、ミネラルＭｉｘ３．５％、塩化コリン０．２％、ＤＬ−ＭＥＴ０．３％であり、フコイダンコンプレックスＭＭＧ飼料の組成は、上記の飼料組成のうちコーンスターチ４２％をコーンスターチ３４％とサンプル８％に代えたものとなっている。そして、そのサンプルにはＭＭＧ混合比が［65:30:05］のフコイダン混合物が飼料全体の２％分配合されている。
（手順３）前飼育０日目から１週間経過する毎に体重を計測するとともに飼料減少量の測定と補充を行った。
（手順４）飼育期間終了後に解剖を行い、肝臓・腎臓・脾臓・盲腸・腎周辺脂質・睾丸周辺脂質・腫瘍を摘出してその重量を測定した。
（手順５）脾臓からリンパ球を取り出し、ＴＮＦ−α，ＩＦＮ−γ，ＩＬ−１２産生量の測定を行った（Invitrogen社のBiosource ELISAキットを使用）。

測定の結果を、図２〜８に示す。
なお、図２における日数は前飼育０日目からの経過日数を示し、図６〜９における横軸の数字は本飼育０日目からの経過日数、縦軸は産生量（単位はｐｇ／ｍｌ）を示す。
また、図中ではコントロール群及びＳコントロール群を、それぞれコントロール及びＳコントロールと表記し、前飼育ＭＭＧ２％群及び本飼育ＭＭＧ２％群を、それぞれ前ＭＭＧ２％及び本ＭＭＧ２％と表記している。
（１）体重変化（図２参照）：７日目において前飼育ＭＭＧ２％群が他の群よりも有意に体重減少が見られたが、７日目以降どの群においても有意差は認められなかった。
（２）総摂食量（図３参照）：どの群においてもコントロール群と比較して有意差は認められなかった。
なお、各群の総摂食量は、コントロール群が１３８．８ｇ、Ｓコントロール群が１４０．５ｇ、前飼育ＭＭＧ２％群が１４８．１ｇ、本飼育ＭＭＧ２％群が１４０．７ｇであった。
（３）臓器重量（図４参照）：脾臓重量以外の臓器において有意差は認められなかった。
（４）腫瘍重量（図５参照）：Ｓコントロール群と比較して、前飼育ＭＭＧ２％群及び本飼育ＭＭＧ２％群において有意差が認められ、低い値を示した。
前飼育ＭＭＧ２％群と本飼育ＭＭＧ２％群間では有意差は認められない。

各種サイトカイン産生量の変化については、次のとおりとなった。
（５）ＴＮＦ−α（図６参照）：０日目及び３日目の産生量は、他の群と比較して前飼育ＭＭＧ２％群において有意に産生量が増加した。
１４〜２１日目の産生量は、Ｓコントロール群と比較して前飼育ＭＭＧ２％群および本飼育ＭＭＧ２％群において有意に増加した。また、前飼育ＭＭＧ２％群、本飼育ＭＭＧ２％群及びコントロール群間においては有意差が認められなかった。
（６）ＩＦＮ−γ（図７参照）：０日目の産生量は、他の群と比較して前飼育ＭＭＧ２％群において有意に産生量が増加した。
３日目〜１４日目の産生量は、コントロール群及びＳコントロール群と比較して前飼育ＭＭＧ２％群及び本飼育ＭＭＧ２％群において有意に増加した。
２１日目の産生量は、どの群においても有意差は認められなかった。
（７）ＩＬ−１２（図８参照）：０日目の産生量は、他の群と比較して前飼育ＭＭＧ２％群において有意に産生量が増加した。
３日目から２１日の産生量は、どの群においても有意差は認められなかった。

体重変化、総摂食量、臓器重量の結果から、フコイダンコンプレックスＭＭＧ飼料を食べても体重、摂食量及び内臓に悪影響を与えるような有害性は認められなかったため、フコイダンコンプレックスＭＭＧは安全な食品であるといえる。
また、腫瘍重量においては、Ｓコントロール群と比較し、前飼育ＭＭＧ２％群及び本飼育ＭＭＧ２％群ともに有意に低い値を示しているので、フコイダンコンプレックスＭＭＧによって抗腫瘍効果が上がったことが示唆される。

サイトカイン量のうちＴＮＦ−α量では、０日目は前飼育ＭＭＧ２％群において有意に産生量が増加しており、健康なうちからフコイダンコンプレックスＭＭＧ飼料を摂取していたほうが免疫力を高めることがわかる。また、腫瘍を移植して３日目は、前飼育ＭＭＧ２％群において他の群と比較して有意に産生量が増加し、２１日目は、Ｓコントロールと比較して、前飼育ＭＭＧ２％群および、本飼育ＭＭＧ２％群で産生量が有意に増加した。
ＴＮＦ−αは細胞接着分子の発現やアポトーシスの誘導、炎症メディエーター（ＩＬ−１、ＩＬ−６、プロスタグランジンＥ２など）や形質細胞による抗体産生の亢進を行うことにより感染防御や抗腫瘍作用に関与するといわれており、前飼育ＭＭＧ２％群と本飼育ＭＭＧ２％群において腫瘍が有意に小さくなったのは、増加したＴＮＦ−αにより腫瘍細胞を壊死させたことが示唆される。

サイトカイン量のうちＩＦＮ−γ量では、０日目は前飼育ＭＭＧ２％群において有意に産生量が増加した。また、腫瘍を移植して３日目は、前飼育ＭＭＧ２％群及び、本飼育ＭＭＧ２％群において有意に産生量が増加した。２１日目においては、どの群においても有意差は認められなかった。
ＩＦＮ−γは、活性化されたＴ細胞で産生され、免疫系と炎症反応に対して調節作用を有し、リンホカインの一種ともされる。ＩＦＮ−γにも抗ウイルス作用と抗腫瘍作用があるが弱く、その代わりＩＦＮ−αとβの効果を増強する作用がある。
また、ＩＦＮ−αとβはマクロファージとＮＫ細胞をともに刺激し、腫瘍細胞に対しても直接的に増殖抑制作用を示すため、ＩＦＮ−γ量の増加は、腫瘍の増殖抑制作用を間接的にサポートする役割がある。
これらの作用等からみて、０日目、３日目でのＩＦＮ−γ産生量の増加により前飼育ＭＭＧ２％群及び本飼育ＭＭＧ２％群で腫瘍が有意に小さくなったことが示唆される。

サイトカイン量のうちＩＬ−１２では、０日目は前飼育ＭＭＧ２％群において有意に産生量が増加した。その後の３日目、２１日目においてはどの群においても有意差は認められなかった。
ＩＬ−１２はＢ細胞および単球系細胞より産生され、Ｔ細胞やＮＫ細胞に対して細胞増殖の促進、細胞傷害活性誘導、ＩＦＮ−γ産生誘導、ＬＡＫ細胞誘導などの作用を示す。
０日目において前飼育ＭＭＧ２％群において有意に増加していたことから、上記に示した作用により前飼育ＭＭＧ２％群において抗腫瘍効果が上がることが示唆される。

以上の考察から、フコイダンコンプレックスＭＭＧ飼料は、健康なときから摂取していた方が、主にＴＮＦ−α産生量、ＩＦＮ−γ産生量が増加し、免疫力を高めることが分かった。
そのため、健康な状態の時に摂取すると他の病気を防ぐこともできるのではないかと考えられ、疾病予防のためにもお勧めすることができる。
また、癌接種後にフコイダンコンプレックスＭＭＧ飼料を摂取した場合においても、フコイダンコンプレックスＭＭＧ飼料を摂取していない場合と比較してＩＦＮ−γ産生量が有意に増加した。
このことから、癌接種後にフコイダンコンプレックスＭＭＧ飼料を摂取すると、免疫力を高めることができ、抗腫瘍効果を発揮することが考えられる。

Claims

モズクフコイダンを６５〜７０％、ガゴメフコイダンを５〜１０％、メカブフコイダンをその残部として含有する混合物を有効成分として含むフコイダン系健康食品。