JP6339005B2 - 変異酵母の製造方法、変異酵母及びこれらの利用、ならびに微生物変異用uv−led照射装置 - Google Patents
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Description
項1.次の工程を含む変異酵母の製造方法:
(1)酵母にUV−LEDを光源とする紫外線照射を行う工程、
(2)前記照射後の酵母をセルレニン含有培地で培養する工程、及び
(3)前記セルレニン含有培地で生育したセルレニン耐性酵母の中から、前記工程(1)で用いた照射前の酵母と比較して、カプロン酸エチルの生成能が高く、且つ、同等以上の発酵力を有する酵母を得る工程。
項2.前記工程(1)においてUV−LEDのピーク波長が240〜400nmである、項1に記載の方法。
項3.前記工程(1)において酵母が清酒酵母である、項1または2に記載の方法。
項4.更に、前記工程(3)で得た酵母の中から、前記工程(1)で用いた照射前の酵母と比較して、リンゴ酸、コハク酸及び乳酸からなる群より選択される少なくとも1種の生産能が高いかまたは低い酵母を得る工程を含む、項1〜3のいずれかに記載の方法。
項5.項1〜4のいずれかに記載する方法によって得られた変異酵母。
項6.変異前の酵母と比較して、以下の条件でカプロン酸エチルの生成能が高く且つ同等以上の発酵力を有する変異酵母:
カプロン酸エチルの生成能は、該変異酵母を、Brix10%、pH4の麹エキス培地22mlにアルコールで脱水した麹8gを添加したアルコール脱水麹培地で15℃20日間培養し、得られた培地上清についてヘッドスペースガスクロマトグラフを用いて分析したカプロン酸エチル含有量が、変異前の酵母について同様に培養、分析した値と比較して2倍以上高い、
発酵力は、該培養前後のアルコール脱水麹培地の重量を測定し、その差を炭酸ガス減少量とし、変異前の酵母について同様に求めた炭酸ガス減少量と比較して、増加している、または減少している場合でも、変異酵母の炭酸ガス減少量と変異前の酵母の炭酸ガス減少量の差が、親株における炭酸ガス減少量の5重量%以内である。
項7.前記変異酵母が、更に、アルコール飲料小仕込試験に供し、得られたアルコール飲料について、ヘッドスペースガスクロマトグラフを用いて分析したカプロン酸エチル含有量が、変異前の酵母について同様に分析した値と比較して2倍以上高い酵母であり、且つ、アルコール飲料小仕込試験に供した際に目標とするアルコール分に達するまでのもろみ日数が、変異前の酵母について同様に評価したもろみ日数と比較して、短期化している、または長期化している場合でもその差が3日以内の酵母である、項6に記載の変異酵母。
項8.前記変異酵母が、更に、前記小仕込試験で得られたアルコール飲料について、有機酸分析システムを用いて分析したリンゴ酸、コハク酸及び乳酸からなる群より選択される少なくとも1種の有機酸の含有量が、変異前の酵母について同様に分析した値と比較して30%以上高いまたは低い酵母である、項7に記載の変異酵母。
項9.項5〜8のいずれかに記載する変異酵母を用いることを特徴とする、発酵飲食品の製造方法。
項10.発酵飲食品がアルコール飲料である、項9に記載の製造方法。
項11.項9または10に記載する方法により製造された発酵飲食品。
項12.微生物を入れた容器を取り付け可能な容器取付部、及び
光源としてUV−LEDを取り付け可能であり、UV−LEDの波長に応じて光源を自在に可変可能な光源取付部を有し、
該容器取付部に取り付けられた容器中の微生物に対して、該光源取付部に取り付けられたUV−LEDによる紫外線照射が可能である、微生物変異用UV−LED照射装置。
項13.更に、前記容器中の微生物を攪拌可能な攪拌部を有する、項12に記載の装置。
項14.項1〜4のいずれかに記載する方法においてまたは項5〜8のいずれかに記載する変異酵母を製造するために使用される、項12または13に記載の装置。
1.変異酵母の製造方法
本発明の変異酵母の製造方法は、(1)酵母にUV−LED(紫外線LED(Light Emitting Diode))を光源とする紫外線照射を行う工程、(2)前記照射後の酵母をセルレニン含有培地で培養する工程、及び(3)前記セルレニン含有培地で生育したセルレニン耐性酵母の中から、前記工程(1)で用いた照射前の酵母と比較して、カプロン酸エチルの生成能が高く、且つ、同等以上の発酵力を有する酵母を得る工程を含有する。
2.変異酵母
本発明は変異酵母に関する。本発明の変異酵母は、変異前の酵母と比較して、カプロン酸エチルの生成能が高く且つ同等以上の発酵力を有する。
・NBRC110699
1.YPD液体培地中での培養的・形態的性質
(1)栄養細胞の大きさ:5〜10μm
(2)栄養細胞の形状:楕円形
(3)増殖の形式:出芽
2.生理学的・化学分類学的性質
(1)炭素源資化性:グルコース(+)、スクロース(+)、マルトース(±)、ラフィノース(+)
(2)炭素源発酵性:グルコース(+)、スクロース(+)
(3)顕著な有機酸の生成:リンゴ酸生成が少ない
・NBRC110700
1.YPD液体培地中での培養的・形態的性質
(1)栄養細胞の大きさ:5〜10μm
(2)栄養細胞の形状:楕円形
(3)増殖の形式:出芽
2.生理学的・化学分類学的性質
(1)炭素源資化性:グルコース(+)、スクロース(+)、マルトース(+)、ラフィノース(±)
(2)炭素源発酵性:グルコース(+)、スクロース(+)
(3)顕著な有機酸の生成:リンゴ酸生成が多い
・NBRC110701
1.YPD液体培地中での培養的・形態的性質
(1)栄養細胞の大きさ:5〜10μm
(2)栄養細胞の形状:楕円形
(3)増殖の形式:出芽
2.生理学的・化学分類学的性質
(1)炭素源資化性:グルコース(+)、スクロース(+)、マルトース(+)、ラフィノース(+)
(2)炭素源発酵性:グルコース(+)、スクロース(+)
(3)顕著な有機酸の生成:リンゴ酸生成が多い
3.発酵飲食品の製造方法及び発酵飲食品
本発明の発酵飲食品の製造方法は、前述の変異酵母を用いることを特徴とする。本発明において製造される発酵飲食品は制限されず、アルコール飲料、パン、乳飲料、味噌、醤油、漬け物等が例示され、好ましくはアルコール飲料である。
4.微生物変異用UV−LED照射装置
本発明は更に、微生物を入れた容器を取り付け可能な容器取付部、及び光源としてUV−LEDを取り付け可能であり、UV−LEDの波長に応じて光源を自在に可変可能な光源取付部を有し、該容器取付部に取り付けられた容器中の微生物に対して、該光源取付部に取り付けられたUV−LEDによる紫外線照射が可能である、微生物変異用UV−LED照射装置を提供する。
試験例1:変異酵母の製造及び変異酵母
親株としてきょうかい901号酵母を使用した。きょうかい901号酵母を、YPD液体培地(2%ペプトン、1%酵母エキス、2%グルコース)で28℃2日間振盪培養後、集菌洗浄し、生理食塩水(0.85%塩化ナトリウム)に懸濁し、約1×107cells/mlの菌懸濁液を調製した。この菌懸濁液8mlを直径60mmのシャーレに入れ、該菌懸濁液に対して、UV-LEDを光源とする微生物変異用UV-LED照射装置を用いてピーク波長280nmの紫外線を、シャーレの液体表面から40〜60mmの距離で、2〜6分間照射後、ピペットにより回収した菌体を生理食塩水で適宜希釈し、YPD寒天平板培地(2%ペプトン、1%酵母エキス、2%グルコース、1.5%寒天)に塗布し、28℃で4日間培養後、生育した酵母コロニー数をカウントした。照射距離及び時間とコロニー数の関係を図4に示す。前記菌懸濁液における菌数(約1×107cells/ml)を100%とした場合、照射距離40mmでは約4分、50mmでは約6分、60mmでは約8分で約10%の酵母のみがコロニーを形成した(生存率約10%)。
試験例2:微生物変異用UV-LED照射装置
試験例1において、次の微生物変異用UV-LED照射装置を使用した。すなわち、次の微生物変異用UV-LED照射装置を使用して、微生物として試験例1で用いた酵母を変異させた。
Claims (7)
- 次の工程を含む変異酵母の製造方法:
(1)酵母にUV−LEDを光源とする紫外線照射を行う工程、ここで、UV−LEDのピーク波長は240〜300nmである、
(2)前記照射後の酵母をセルレニン含有培地で培養する工程、及び
(3)前記セルレニン含有培地で生育したセルレニン耐性酵母の中から、前記工程(1)で用いた照射前の酵母と比較して、カプロン酸エチルの生成能が高く、且つ、同等以上の発酵力を有する酵母を得る工程。 - 前記工程(1)においてUV−LEDのピーク波長が270〜300nmである、請求項1に記載の方法。
- 前記工程(1)において酵母が清酒酵母である、請求項1または2に記載の方法。
- 更に、前記工程(3)で得た酵母の中から、前記工程(1)で用いた照射前の酵母と比較して、リンゴ酸、コハク酸及び乳酸からなる群より選択される少なくとも1種の生産能が高いかまたは低い酵母を得る工程を含む、請求項1〜3のいずれかに記載の方法。
- 以下の変異酵母、
サッカロマイセス セレビシエ3643株(NBRC110699)
サッカロマイセス セレビシエ3826株(NBRC110700)、または
サッカロマイセス セレビシエ4067株(NBRC110701)。 - 請求項5に記載する変異酵母を用いることを特徴とする、発酵飲食品の製造方法。
- 発酵飲食品がアルコール飲料である、請求項6に記載の製造方法。
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