JP6299030B2 - Prsv抵抗性キュウリ植物、ならびにprsv抵抗性およびzymv抵抗性を示すキュウリ植物の製造方法 - Google Patents
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Description
(A1)配列番号1の塩基配列
(A2)配列番号1の塩基配列における25番目のAが保存され、前記塩基配列との同一性が80%以上の塩基配列であり、PRSV抵抗性を示す塩基配列
(A3)配列番号1の塩基配列における25番目のAが保存され、前記塩基配列における1もしくは数個の塩基が欠失、置換、挿入および/または付加された塩基配列であり、PRSV抵抗性を示す塩基配列
(a)前記本発明のPRSV抵抗性キュウリ植物と、ZYMV抵抗性キュウリ植物とを交雑する工程、
(b)前記(a)工程より得られたキュウリ植物またその後代系統から、PRSV抵抗性およびZYMV抵抗性を備えるキュウリ植物を選抜する工程
本発明のPRSV抵抗性キュウリ植物は、前述のように、第6染色体上にPRSV抵抗性遺伝子座を有し、前記PRSV抵抗性遺伝子座が、下記(A1)、(A2)または(A3)の塩基配列を有することを特徴とする。
(A1)配列番号1の塩基配列
(A2)配列番号1の塩基配列における25番目のAが保存され、前記塩基配列との同一性が80%以上の塩基配列であり、PRSV抵抗性を示す塩基配列
(A3)配列番号1の塩基配列における25番目のAが保存され、前記塩基配列における1もしくは数個の塩基が欠失、置換、挿入および/または付加された塩基配列であり、PRSV抵抗性を示す塩基配列
寄託の種類:国際寄託
寄託機関名:独立行政法人製品評価技術基盤機構 特許生物寄託センター
受託番号:FERM BP−11523
識別のための表示:Takii2
受領日:2012年12月27日
(B1)配列番号2の塩基配列
(B2)配列番号2の塩基配列における93番目のAおよび307番目のAが保存され、前記塩基配列との同一性が80%以上の塩基配列であり、ZYMV抵抗性を示す塩基配列
(B3)配列番号2の塩基配列における93番目のAおよび307番目のAが保存され、前記塩基配列における1もしくは数個の塩基が欠失、置換、挿入および/または付加された塩基配列であり、ZYMV抵抗性を示す塩基配列
(C1)配列番号3の塩基配列
(C2)配列番号3の塩基配列における93番目のAが保存され、前記塩基配列との同一性が80%以上の塩基配列であり、ZYMV抵抗性を示す塩基配列
(C3)配列番号3の塩基配列における93番目のAが保存され、前記塩基配列における1もしくは数個の塩基が欠失、置換、挿入および/または付加された塩基配列であり、ZYMV抵抗性を示す塩基配列
つぎに、本発明のPRSV抵抗性およびZYMV抵抗性を示すキュウリ植物(PRSV抵抗性/ZYMV抵抗性キュウリ植物)の製造方法について説明する。なお、以下の方法は、例示であって、本発明は、これらの方法に制限されない。本発明において、製造方法は、例えば、育成方法ということもできる。
(a)前記本発明のPRSV抵抗性キュウリ植物と、ZYMV抵抗性キュウリ植物とを交雑する工程、
(b)前記(a)工程より得られたキュウリ植物またその後代系統から、PRSV抵抗性およびZYMV抵抗性を備えるキュウリ植物を選抜する工程
(x)前記本発明のPRSV抵抗性キュウリ植物を選抜する工程
(x1)被検キュウリ植物の染色体上における、前記PRSV抵抗性遺伝子座の有無を検出する検出工程
(x2)前記PRSV抵抗性遺伝子座の存在により、前記被検キュウリ植物を、PRSV抵抗性キュウリ植物として選抜する選抜工程
(b1)前記(a)工程より得られたキュウリ植物またはその後代系統について、染色体上における、PRSV抵抗性遺伝子座およびZYMV抵抗性遺伝子座の有無を検出する検出工程
(b2)前記PRSV抵抗性遺伝子座およびZYMV抵抗性遺伝子座の存在により、前記(a)工程により得られたキュウリ植物またはその後代系統を、PRSV抵抗性およびZYMV抵抗性を備えるキュウリ植物として選抜する選抜工程
新規なPRSV抵抗性キュウリ植物について、PRSV抵抗性遺伝子座の解析を行った。
発病度0
抵抗性:無病徴
発病度1
抵抗性:下位葉に軽微な葉脈透過が見られる、
発病度2
中程度抵抗性:若い葉と生長点付近は無病徴であるが、下位葉に、明瞭な縮葉、モザイク症状および葉脈透化が見られる
発病度3
罹病性:植物体全体に、縮葉および葉脈透化が見られる
発病度4
罹病性:植物体全体に、激しい縮葉および葉脈透化が見られる
公知のZYMV抵抗性キュウリ植物について、ZYMV抵抗性遺伝子座の解析を行った。
PRSV抵抗性遺伝子座およびZYMV抵抗性遺伝子座の特定を行った。
前記実施例1で得られた前記F2分離集団のPRSV抵抗性系統のキュウリ植物5個体、および実施例2で得られた前記F2分離集団のPRSV抵抗性系統のキュウリ植物5個体について、第6染色体上の2つのSSR(単純反復配列)マーカーの周辺領域約200kbpについて、シーケンスを行った。その結果、前記PRSV抵抗性系統のキュウリ植物は、配列番号1で示す領域の25番目(A)、80番目(T)、118番目(T)、130番目(C)および317番目(G)に、特異的なSNPが検出された。
フォワードプライマー(配列番号5)
AGCAATTTCAAGGAGCAAGC
リバースプライマー(配列番号6)
CTCTCCAATCCAGCAACAT
前記実施例2で得られた前記F2分離集団である、I型集団の100個体、およびII型集団の100個体について、前記(1)と同様にして、PCRを行い、得られた増幅産物のシーケンスを解析した。
PRSV抵抗性およびZYMV抵抗性を備えるキュウリ植物を作成した。
Claims (14)
- 第6染色体上に、受託番号FERM BP−11523で特定されるキュウリ植物のPRSV抵抗性遺伝子座を有するPRSV抵抗性キュウリ植物であり、
前記PRSV抵抗性遺伝子座が、下記(A1)、(A2)または(A3)の塩基配列を有し、
前記PRSV抵抗性キュウリ植物が、受託番号FERM BP−11523で特定されるキュウリ植物またはその後代系統であることを特徴とするPRSV抵抗性キュウリ植物。
(A1)配列番号1の塩基配列
(A2)配列番号1の塩基配列における25番目のAが保存され、前記塩基配列との同一性が95%以上の塩基配列であり、前記キュウリ植物がPRSV抵抗性を示す塩基配列
(A3)配列番号1の塩基配列における25番目のAが保存され、前記塩基配列における1〜20個の塩基が欠失、置換、挿入および/または付加された塩基配列であり、前記キュウリ植物がPRSV抵抗性を示す塩基配列 - 受託番号FERM BP−11523で特定されるキュウリ植物またはその後代系統であることを特徴とするPRSV抵抗性キュウリ植物。
- 前記PRSV抵抗性キュウリ植物が、植物体またはその部分である、請求項1または2記載のPRSV抵抗性キュウリ植物。
- 前記PRSV抵抗性キュウリ植物が種子である、請求項1から3のいずれか一項に記載のPRSV抵抗性キュウリ植物。
- 前記PRSV抵抗性キュウリ植物が、さらに、ZYMV抵抗性遺伝子座によって供与されるZYMV抵抗性を有する、請求項1から4のいずれか一項に記載のPRSV抵抗性キュウリ植物。
- 第6染色体上に、前記PRSV抵抗性遺伝子座および前記ZYMV抵抗性遺伝子座を有する、請求項1から5のいずれか一項に記載のPRSV抵抗性キュウリ植物。
- 前記PRSV抵抗性遺伝子座および前記ZYMV抵抗性遺伝子座が、ヘテロ接合体である、請求項5または6記載のPRSV抵抗性キュウリ植物。
- 前記ZYMV抵抗性遺伝子座が、下記(B1)、(B2)または(B3)の塩基配列を有する、請求項5から7のいずれか一項に記載のPRSV抵抗性キュウリ植物。
(B1)配列番号2の塩基配列
(B2)配列番号2の塩基配列における93番目のAおよび307番目のAが保存され、前記塩基配列との同一性が95%以上の塩基配列であり、前記キュウリ植物がZYMV抵抗性を示す塩基配列
(B3)配列番号2の塩基配列における93番目のAおよび307番目のAが保存され、前記塩基配列における1〜20個の塩基が欠失、置換、挿入および/または付加された塩基配列であり、前記キュウリ植物がZYMV抵抗性を示す塩基配列 - 前記ZYMV抵抗性遺伝子座が、下記(C1)、(C2)または(C3)の塩基配列を有する、請求項5から7のいずれか一項に記載のPRSV抵抗性キュウリ植物。
(C1)配列番号3の塩基配列
(C2)配列番号3の塩基配列における93番目のAが保存され、前記塩基配列との同一性が95%以上の塩基配列であり、前記キュウリ植物がZYMV抵抗性を示す塩基配列
(C3)配列番号3の塩基配列における93番目のAが保存され、前記塩基配列における1〜20の塩基が欠失、置換、挿入および/または付加された塩基配列であり、前記キュウリ植物がZYMV抵抗性を示す塩基配列 - 下記(a)および(b)工程を含むことを特徴とするPRSV抵抗性およびZYMV抵抗性を示すキュウリ植物の製造方法。
(a)請求項1から4のいずれか一項に記載のPRSV抵抗性キュウリ植物と、ZYMV抵抗性キュウリ植物とを交雑する工程、
(b)前記(a)工程より得られたキュウリ植物またその後代系統から、PRSV抵抗性およびZYMV抵抗性を備えるキュウリ植物を選抜する工程 - 前記(a)工程に先立って、下記(x)工程を有する、請求項10記載のPRSV抵抗性およびZYMV抵抗性キュウリ植物の製造方法。
(x)請求項1から4のいずれか一項に記載のPRSV抵抗性キュウリ植物を選抜する工程 - 前記(x)工程における前記選抜が、下記(A1)、(A2)または(A3)の塩基配列を有するPRSV抵抗性キュウリ植物の選抜である、請求項11記載の製造方法。
(A1)配列番号1の塩基配列
(A2)配列番号1の塩基配列における25番目のAが保存され、前記塩基配列との同一性が95%以上の塩基配列であり、前記キュウリ植物がPRSV抵抗性を示す塩基配列
(A3)配列番号1の塩基配列における25番目のAが保存され、前記塩基配列における1〜20個の塩基が欠失、置換、挿入および/または付加された塩基配列であり、前記キュウリ植物がPRSV抵抗性を示す塩基配列 - 前記(b)工程における前記選抜が、下記(A1)、(A2)または(A3)の塩基配列を有するPRSV抵抗性キュウリ植物の選抜である、請求項10から12のいずれか一項に記載の製造方法。
(A1)配列番号1の塩基配列
(A2)配列番号1の塩基配列における25番目のAが保存され、前記塩基配列との同一性が95%以上の塩基配列であり、前記キュウリ植物がPRSV抵抗性を示す塩基配列
(A3)配列番号1の塩基配列における25番目のAが保存され、前記塩基配列における1〜20個の塩基が欠失、置換、挿入および/または付加された塩基配列であり、前記キュウリ植物がPRSV抵抗性を示す塩基配列 - 前記(b)工程における前記選抜が、前記(A1)、(A2)または(A3)の塩基配列と、下記(B1)、(B2)もしくは(B3)の塩基配列または下記(C1)、(C2)もしくは(C3)の塩基配列とを有するPRSV抵抗性およびZYMV抵抗性キュウリ植物の選抜である、請求項13記載の製造方法。
(B1)配列番号2の塩基配列
(B2)配列番号2の塩基配列における93番目のAおよび307番目のAが保存され、前記塩基配列との同一性が95%以上の塩基配列であり、前記キュウリ植物がZYMV抵抗性を示す塩基配列
(B3)配列番号2の塩基配列における93番目のAおよび307番目のAが保存され、前記塩基配列における1〜20個の塩基が欠失、置換、挿入および/または付加された塩基配列であり、前記キュウリ植物がZYMV抵抗性を示す塩基配列
(C1)配列番号3の塩基配列
(C2)配列番号3の塩基配列における93番目のAが保存され、前記塩基配列との同一性が95%以上の塩基配列であり、前記キュウリ植物がZYMV抵抗性を示す塩基配列
(C3)配列番号3の塩基配列における93番目のAが保存され、前記塩基配列における1〜20個の塩基が欠失、置換、挿入および/または付加された塩基配列であり、前記キュウリ植物がZYMV抵抗性を示す塩基配列
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