JP6265858B2 - 観察装置および最終像の鮮明化方法 - Google Patents
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Description
本発明の一態様は、最終像および少なくとも1つの中間像を形成する複数の結像レンズと、該結像レンズにより形成されるいずれかの前記中間像よりも物体側に配置され、前記物体からの光の波面に空間的な乱れを付与する第1の位相変調素子と、該第1の位相変調素子との間に少なくとも1つの中間像を挟む位置に配置され、前記第1の位相変調素子により前記物体からの光の波面に付与された空間的な乱れを打ち消す第2の位相変調素子とを備える結像光学系と、該結像光学系の物体側に配置され、該結像光学系に入射させる照明光を発生する光源と、光軸方向に間隔をあけて配置され、前記光源からの照明光を走査する第1のスキャナおよび第2のスキャナと、前記結像光学系の最終像位置に配置された観察対象物から発せられた光を検出する光検出器とを備え、前記第1の位相変調素子および前記第2の位相変調素子が、前記光源側に配置された前記第1のスキャナと光学的に共役な位置に配置されるとともに、前記第1のスキャナによる照明光の走査方向に一致する方向に変化する一次元的な位相分布特性を有する観察装置を提供する。
また、上記態様においては、前記第1の位相変調素子および前記第2の位相変調素子がプリズムアレイであってもよい。
また、上記態様においては、前記第1の位相変調素子および前記第2の位相変調素子が回折格子であってもよい。
また、上記態様においては、前記第1の位相変調素子および前記第2の位相変調素子がシリンドリカルレンズであってもよい。
本実施形態に係る観察装置1は、例えば、多光子励起顕微鏡である。
観察装置1は、図1に示されるように、観察対象物Aに極短パルスレーザ光(以下、単にレーザ光(照明光)という。)を照射する照明装置2と、該照明装置2によるレーザ光の照射により観察対象物Aにおいて発生する蛍光を光検出器5に導く検出器光学系4と、該検出器光学系4により導かれた蛍光を検出する光検出器5とを備えている。
結像光学系3は、光源6からのレーザ光のビーム径を拡大するビームエキスパンダ7と、該ビームエキスパンダ7を通過したレーザ光を集光して中間像を結像しその結像位置を光軸Sに沿う方向に移動させるZ走査部8と、該Z走査部8を通過して中間像を結像したレーザ光を略平行光にするコリメートレンズ9とを備えている。
光検出器5は、例えば、光電子増倍管であり、入射された蛍光の強度を検出するようになっている。
本実施形態に係る観察装置1を用いて観察対象物Aを観察するには、光源6から発せられたレーザ光を結像光学系3によって観察対象物Aに照射する。レーザ光は、まず、ビームエキスパンダ7によってビーム径が拡大され、Z走査部8、コリメートレンズ9および波面錯乱素子10を通過させられる。
また、レーザ光は、波面錯乱素子10を通過させられることにより、波面に空間的な乱れが付与される。
これによれば、鮮明化された最終像IFとして観察対象物Aに極めて小さいスポットが結像されることにより、極めて小さい領域において光子密度を高めて蛍光を発生させることができ、共焦点ピンホールを通過する蛍光を増加させて明るい共焦点画像を取得することができる。
すなわち、本発明の一実施形態に係る最終像の鮮明化方法は、図1に示される観察装置1から波面錯乱素子10および波面回復素子14を除いた一般的なレーザ走査型多光子励起顕微鏡の最終像IFを鮮明化する方法である。
本実施形態に係る観察装置1は、照明装置2、検出器光学系4、および光検出器5を備えている。
また、対物レンズ15の瞳位置POBから波面回復素子14までの距離aは、式(1)の条件を満足する。
ここで、bは2つのガルバノミラー13a,13bに挟まれて位置する対物レンズ15の瞳位置POBに略共役な位置13cから光源6側のガルバノミラー13aまでの距離、fPLはリレーレンズ対12の光源6側のレンズ12aの焦点距離、fTLはリレーレンズ対12の観察対象物A側のレンズ12bの焦点距離を示している。
c=a−(d+e) (2)
ここで、dは対物レンズ15のねじ突出量、eは対物レンズ15の胴付面から対物レンズ15の瞳位置POBまでの距離を示している。
b=2.7(mm)
fPL=52(mm)
fTL=200(mm)
d=5(mm)
e=28(mm)
となる。
3 結像光学系
5 光検出器
6 極短パルスレーザ光(光源)
10 波面錯乱素子(第1の位相変調素子)
11,12 リレーレンズ対(結像レンズ)
13 XV走査部
13a ガルバノミラー(第1のスキャナ)
13b ガルバノミラー(第2のスキャナ)
14 波面回復素子(第2の位相変調素子)
15 対物レンズ(結像レンズ)
Claims (6)
- 最終像および少なくとも1つの中間像を形成する複数の結像レンズと、該結像レンズにより形成されるいずれかの前記中間像よりも物体側に配置され、前記物体からの光の波面に空間的な乱れを付与する第1の位相変調素子と、該第1の位相変調素子との間に少なくとも1つの中間像を挟む位置に配置され、前記第1の位相変調素子により前記物体からの光の波面に付与された空間的な乱れを打ち消す第2の位相変調素子とを備える結像光学系と、
該結像光学系の物体側に配置され、該結像光学系に入射させる照明光を発生する光源と、
光軸方向に間隔をあけて配置され、前記光源からの照明光を走査する第1のスキャナおよび第2のスキャナと、
前記結像光学系の最終像位置に配置された観察対象物から発せられた光を検出する光検出器とを備え、
前記第1の位相変調素子および前記第2の位相変調素子が、前記光源側に配置された前記第1のスキャナと光学的に共役な位置に配置されるとともに、前記第1のスキャナによる照明光の走査方向に一致する方向に変化する一次元的な位相分布特性を有する観察装置。 - 前記第1の位相変調素子および前記第2の位相変調素子がレンチキュラー素子である請求項1に記載の観察装置。
- 前記第1の位相変調素子および前記第2の位相変調素子がプリズムアレイである請求項1に記載の観察装置。
- 前記第1の位相変調素子および前記第2の位相変調素子が回折格子である請求項1に記載の観察装置。
- 前記第1の位相変調素子および前記第2の位相変調素子がシリンドリカルレンズである請求項1に記載の観察装置。
- 最終像および少なくとも1つの中間像を形成する複数の結像レンズを備える結像光学系と、該結像光学系の物体側に配置され、該結像光学系に入射させる照明光を発生する光源と、光軸方向に間隔をあけて配置され、前記光源からの照明光を走査する第1のスキャナおよび第2のスキャナと、前記結像光学系の最終像位置に配置された観察対象物から発せられた光を検出する光検出器とを備える観察装置における最終像の鮮明化方法であって、
前記結像レンズにより形成されるいずれかの前記中間像よりも物体側の前記第1のスキャナと光学的に共役な位置に、前記光源からの照明光の波面に空間的な乱れを付与する第1の位相変調素子を配置し、該第1の位相変調素子との間に少なくとも1つの中間像を挟んだ前記第1のスキャナと光学的に共役な位置に、前記第1のスキャナによる照明光の走査方向に一致する方向に変化する一次元的な位相分布特性を有し、前記第1の位相変調素子により前記物体からの光の波面に付与された空間的な乱れを打ち消す第2の位相変調素子を配置する最終像の鮮明化方法。
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