JP6205095B2 - 疎水性カンプトテシン誘導体の医薬組成物 - Google Patents

Description

関連出願の相互参照
本出願は２０１１年１１月３日付け出願米国出願第６１／５５５，０８４号の優先権を主張し、その開示全体は、参照により本明細書に組み込まれる。

本発明は、１つ又はそれ以上の疎水性カンプトテシン誘導体を含む医薬組成物および癌細胞の増殖の阻害又は抑制におけるそれらの使用方法に関する。

カンプトテシン（（Ｓ）−４−エチル−４−ヒドロキシ−１Ｈ−ピラノ［３’４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４（４Ｈ、１２Ｈ）−ジオン））（"ＣＰＴ"）［Ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ（（Ｓ）−４−ｅｔｈｙｌ−４−ｈｙｄｒｏｘｙｌ−１Ｈ−ｐｙｒａｎｏ−［３’４’：６，７］ｉｎｄｏｌｉｚｉｎｏ［１，２−ｂ］ｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−３，１４（４Ｈ，１２Ｈ）−ｄｉｏｎｅ））（"ＣＰＴ"）］及びその誘導体は、広範囲の抗癌活性を有する強力なトポイソメラーゼＩ阻害剤として知られている。しかしながら、係る化合物は、水溶性が低く、生物学的利用能および貯蔵安定性が減少している。さらに、これらの化合物は、貧血、好中球減少症および／または血小板減少症をもたらし得る骨髄抑制などの重度の有害反応を有する。したがって、ＣＰＴおよびその誘導体の臨床応用が制限されている。

上記で概説した欠点を考慮すると、薬物の溶解性を改善し、貯蔵寿命および安定性を延長し、副作用を低減した、ＣＰＴおよびその誘導体の医薬組成物を提供する必要がある。
この出願の発明に関連する先行技術文献情報としては、以下のものがある（国際出願日以降国際段階で引用された文献及び他国に国内移行した際に引用された文献を含む）。
（先行技術文献）
（特許文献）
（特許文献１） 米国特許出願公開第２００８／０１９３５０９号明細書
（特許文献２） 米国特許出願公開第２００８／０２１３３８５号明細書
（特許文献３） 国際公開第０１／８５１３１号
（特許文献４） 米国特許出願公開第２００４／０２４７６２４号明細書
（特許文献５） 米国特許出願公開第２０１０／０１６６８４３号明細書

本発明は、少なくとも１つのＣＰＴ誘導体又は前記ＣＰＴ誘導体の薬学的に許容される塩と、モル比（リン脂質：ＣＰＴ）約０．４５：１又はそれ以上のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）が抱合（ｃｏｎｊｕｇａｔｅ）したリン脂質とを含む医薬組成物に向けられている。前記ＣＰＴ誘導体またはその薬学的に許容される塩は、前記ＰＥＧ部分が約１，０００〜約２０，０００ダルトンの範囲の分子量を有する、ＰＥＧ抱合型リン脂質体と、ミセルを形成する。

本発明はまた、それを必要とする被験者の癌細胞を阻害する方法であって、該被験者に本明細書記載の医薬組成物の有効量を投与することを含むものである、方法に関する。

本発明のさらなる理解を提供するために含まれ、組み込まれ、本明細書の一部を構成する添付図面は、本発明の実施形態を例示し、当該説明とともに本発明の原理を説明する役を果たす。
図１は、ＣＭ３１５組成物の粒度分布を示す。 図２は、ＣＭ３１６組成物の粒度分布を示す。 図３は、ヒト造血前駆細胞に対する遊離ＴＬＣ３８８ ＨＣｌ、トポテカン（Ｔｏｐｏｔｅｃａｎ）、およびリポテカン（登録商標）（Ｌｉｐｏｔｅｃａｎ（登録商標））の毒性効果を示す。

定義
上記および本開示全体を通して用いられる場合、以下の用語は、特に明記しない限り、以下の意味を有すると理解されるべきである。

本明細書で使用する場合、当該文脈が明確に否定しない限り、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、複数形の意味を含む。

本明細書で使用される場合、「約」という用語は、量、持続時間などのような測定可能な値に言及する場合、断りのない限り、特定した値から、±１０％、好ましくは±５％、より好ましくは±１％，更により好ましくは±０．１％の変動を、係る変動が、ＣＰＴ誘導体の投与量に応じて適切なように、包含することを指す。本明細書で使用する場合、範囲に言及する場合、別に特定されない限り、「約」という用語は、特定した値から、±１０％、好ましくは±５％、より好ましくは±１％，更により好ましくは±０．１％の変動を、係る変動が、投与量に応じて適切なように、包含することを指す。

「ミセル」は、通常、閉鎖された区画を定義する、単一の単分子層で構成された球状の容器として定義される。界面活性剤および脂肪酸のような両親媒性分子は、極性溶媒中で、自然に、ミセル構造を形成する。ミセルは、通常ナノメートル範囲の粒径を持つ球形の形状を有する。ミセルの形成は、水性環境からの疎水性部分の除去と水分子との水素結合ネットワークの再確立により、該システムにおける自由エネルギーを減少させることによって推進される。ミセルでは、極性両親媒性分子の配列があり、該構造の前記親水性部分（すなわち、頭部）が外面を形成し、前記疎水性部分（すなわち、尾部）が媒体から離れて、内部に存在する。ミセルは、二層構造を持たず、小胞（ｖｅｓｉｃｌｅｓ）またはリポソームとは見なされない。本発明の化合物は、ミセルと会合した場合、前記区画内でミセル膜に結合しているか、またはミセルの外側表面に結合しているかのいずれかである。

「薬学的に許容される塩」は、酸付加塩を含む。「薬学的に許容される酸付加塩」は、生物学的有効性および前記遊離塩基の特性を保持し、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸、及び例えば、酢酸、プロピオン酸、ピルビン酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸、トリフルオロ酢酸などの有機酸等と形成される塩を指す。

本明細書で使用する「有効量」は、例えば、塊，痛み、体重減少などの癌の症状および徴候を減少させるのに十分である医薬組成物の投与量を含む。

用語「阻害する」及び「抑制する」は、癌の増殖を遅らせるか又は、止めることを含む。

用語「癌」は、悪性新生物、つまり組織の異常な塊、正常組織の成長を越え、非協調的である、組織の成長であって、その変化を誘発した刺激の停止後に同じ過剰な様式で持続する、成長として、最も広範な一般的な定義で考慮されるべきである。本発明の製剤を投与することによって治療する癌のタイプの例は、肝臓癌、前立腺癌、大腸癌および神経膠腫を包含するが、これらに限定されない。

用語「疎水性」は、水と混ざらないか又は結合しない傾向がある、または水に溶解し得ないことを含む。

ここで使用される用語「治療する」、「治療した」または「治療」は、予防（例えば予防薬）、緩和、および治癒的用途や結果を含む。「被験者」という用語は、癌または他の疾患を有する脊椎動物を含む。好ましくは、前記被験者は哺乳動物、好ましくはヒトを含む、温血動物である。

用語「電離放射線」は、従来のがん治療の治療分野で採用されているもので、例えばＸ線のみならず放射性核からの、例えばアルファ（α）線、ベータ（β）線、ガンマ（γ）線などの、化学結合のイオン化に十分なエネルギーを持つ、光子を含む。前記放射線は、高ＬＥＴ（ｌｉｎｅａｒ ｅｎｅｒｇｙ ｔｒａｎｓｆｅｒ，線エネルギー付与）または低ＬＥＴである。ＬＥＴは、当該距離の単位長さ当たりの伝達されるエネルギーである。高ＬＥＴは、高密度電離放射線と言われ、低ＬＥＴは、低密度電離放射線と言われている。高ＬＥＴの代表的な例は、中性子およびアルファ粒子である。低ＬＥＴの代表的な例は、Ｘ線及びガンマ線である。Ｘ線及びγ線の両方を含む低ＬＥＴ放射線は、最も一般的には、癌患者の放射線療法のために使用される。前記放射線は、通常、外来患者ベースで実施される、外部放射線療法のためか、または、前記腫瘍に非常に近接またはその内側に配置される放射線を使用する内部放射線療法のためかに使用される。内部放射線療法の場合、当該放射源は、通常、インプラントと呼ばれる小さなホルダーに封入されている。インプラントは、細いワイヤ、カテーテルと呼ばれるプラスチックチューブ、リボン、カプセル、又はシーズの形態である。前記インプラントは、体内に直接置かれる。内照射療法は、入院が必要である。前記電離放射線源は、放射線の単位用量として提供され、好ましくはＸ線管であるが、それは、多くの利点を提供するからである、例えば、便利な調節可能な投与量であって、その線源は、容易に、オンとオフし得、廃棄問題が最小限である等である。放射線の単位用量は、グレイ（Ｇｙ）で測定される。前記電離放射線源は、また、放射性同位元素、例えば、固体放射性同位体源（例えば、ワイヤ、ストリップ、ペレット、シード、ビーズなど）、又は液体放射性同位体充填バルーンを含む。後者の場合、前記バルーンは、体管腔または血流中に前記バルーンから放射性同位体物質が漏れるの防止するように特別に構成されている。さらに、電離放射線源は、ペレットまたは液体のような放射性同位体物質を受容するための容器を、カテーテル本体内に含む。放射性同位体物質はα、βおよびγ線を放出するように選択する。通常、αおよびβ放射線は、すぐに周囲の組織によって吸収され、治療中の体管腔の壁を越えて実質的に浸透しないので、好ましい。従って、治療領域に隣接する、心臓および他の器官の偶発的照射は実質的に除外し得る。投与される単位の総数は、電離放射線を用いる治療の当業者によって治療的に有効であると決定された量になるであろう。この量は、前記被験者と、治療中の悪性腫瘍または新生物とのタイプによって異なる。前記量は異なるが、患者は、数週間にわたって約３０〜７５Ｇｙの投与量を受ける。
「アルキル」という用語は、指示された数の炭素原子を有する、１価の飽和脂肪族炭化水素基を指す。例えば、「Ｃ_１〜６アルキル」または「炭素数１〜６のアルキル」または「Ａｌｋ_１〜６」は、その構造中に１〜６個の炭素を含有する任意のアルキル基を指すことになる。「Ｃ_１〜２０アルキル」は、１から２０個の炭素を有する任意のアルキル基を指す。アルキルは、直鎖（すなわち、線状）または分枝鎖である。低級アルキルは、１〜６個の炭素のアルキルを指す。低級アルキル基の代表例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、イソプロピル、イソブチル、イソペンチル、アミル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基等を含む。高級アルキルは、７個及びそれ以上の炭素のアルキルを指す。これらは、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、ｎ−デシル、ｎ−ドデシル、ｎ−テトラデシル、ｎ−ヘキサデシル、ｎ−オクタデシル、ｎ−エイコシルなど及びこれらの分枝変異体を含む。前記の基は、選択的に、本発明の範囲内に入る化合物の製造を有意に妨害せず、前記化合物の有効性を低下させない位置に置換基で置換される。前記アルキルは、選択的に、ハロ、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、フェニル、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、および低級アルキルカルボニルアミノから成る群から独立して選択される１〜５個の置換基で置換される。

用語「アルキレン」は、好ましくは、１〜８個の直鎖状（線状）または分岐した炭素原子を有する２価の飽和脂肪族炭化水素基を指す。この用語は、メチレン（−ＣＨ_２−）、エチレン（−ＣＨ_２ＣＨ_２−）、ｎ−プロピレン（−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−）などの直鎖の基及びイソ−プロピレン（−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）−）又は（−ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２−）などの分枝基によって例示される。

用語「アルコキシ」は、Ｒがアルキルである式ＲＯ−の１価の基を指す。低級アルコキシは、１〜６個の炭素原子のアルコキシ基を指す。高級アルコキシは、７個又はそれ以上の炭素原子のアルコキシである。代表的な低級アルコキシ基は、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｎ−ペンチルオキシ、ｎ−ヘキシルオキシ、イソプロポキシ、イソブトキシ、イソペンチルオキシ、アミルオキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ペンチルオキシなどを含む。高級アルコキシ基は、本明細書に記載された高級アルキル基に対応するものを含む。前記基は、選択的に、本発明の範囲内に入る化合物の製造を有意に妨害せず、前記化合物の有効性を低下させない位置に置換基で置換される。前記アルコキシは、選択的に、ハロ、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、フェニル、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、および低級アルキルカルボニルアミノから成る群から独立して選択される１〜５個の置換基で置換される。

用語「シクロアルキル」は、環を形成する３個又はそれ以上の炭素を有する１価脂環式飽和炭化水素を指す。既知のシクロアルキル化合物は、最大３０個又はそれ以上の炭素原子を有するが、通常、環内に３〜７個の炭素原子が存在するであろう。後者は、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、およびシクロヘプチルを含む。前記基は、選択的に、本発明の範囲内に入る化合物の製造を有意に妨害せず、前記化合物の有効性を低下させない位置に置換基で置換される。前記シクロアルキルは、選択的に、ハロ、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、フェニル、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、および低級アルキルカルボニルアミノから成る群から独立して、選択される１〜５個の置換基で置換される。

用語「ヒドロキシカルボニル」は、式−Ｃ（Ｏ）ＯＨを有する１価の基である。

用語「低級アルコキシカルボニル」は、Ａｌｋが低級アルキルである、−Ｃ（Ｏ）ＯＡｌｋを有する１価の基である。

用語「低級アルコキシカルボニルオキシ」は、Ａｌｋが低級アルキルである、式−Ｃ（Ｏ）ＯＡｌｋを有する１価の基である。

用語「糖」または「糖残基」は、単糖、二糖、オリゴ糖又は多糖の任意のヒドロキシ基から水素を１個除去して形成される１価の基を指す。二糖、オリゴ糖又は多糖の一部である単糖単位は、５員環形態（フラノース）または６員環形態（ピラノース）として存在するＤまたはＬ異性体である。単糖類の代表的な例は、グルコース、フルクトース、マンノース、およびガラクトースを含む。二糖類の代表的な例は、ラクトース、マルトースおよびスクロースを含む。オリゴ糖は、共に連結した３〜２０個の単糖単位、より好ましくは共に連結した３〜１５個の単糖単位を含む。オリゴ糖類の代表的な例は、マルトテトラオースおよびシクロデキストリンを含む。多糖類の代表的な例は、アミロース、デンプンおよびセルロースを含む。

用語「リン糖酸（ｐｈｏｓｐｈｏｓｕｇａｒ）」または「リン糖酸残基」は、単糖又は単糖がエーテル結合を介してリン酸に連結されているリン酸のいずれかのヒドロキシ基から水素の除去により形成される１価の基を指す。前記単糖は五員環形態（フラノース）または６員環形態（ピラノース）として存在するＤまたはＬ異性体である。単糖類の代表的な例は、上記に記載されている。

用語「低級アルコキシカルボニルオキシ」は、Ａｌｋが低級アルキルである、式−Ｃ（Ｏ）ＯＡｌｋを有する１価の基である。

用語「低級アルキルカルボニルアミノ」は、Ａｌｋが低級アルキルである、式−ＮＨＣ（Ｏ）Ａｌｋを有する１価の基である。

用語「置換低級アルキルアミノメチル」はＡｌｋが置換された低級アルキルである、式−ＣＨ_２ＮＨＡｌｋを有する１価である。置換された低級アルキルアミノメチルの代表例は、（トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミノ）メチル、（ビス（ヒドロキシメチル）メチルアミノ）メチル、および（２−ヒドロキシエチルアミノ）メチルを含む。

「ハロ」置換基は、クロロ、ブロモ、ヨード、およびフルオロから選ばれた１価のハロゲン基である。「ハロゲン化」化合物は、一つ又はそれ以上のハロ置換基で置換されたものである。クロロが好ましい。

「１−ナフチル」または「２−ナフチル」は、それぞれナフタレン構造の１−または２−位から水素の除去によって形成された基である。基は、選択的に、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、フェニル、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ホルミル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、および低級アルキルカルボニルアミノからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で置換される。

「フェニル」は、ベンゼン環から水素を除去することによって形成された基である。前記フェニルは、選択的に、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、フェニル、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ホルミル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、および低級アルキルカルボニルアミノからなる群から独立して選択される１〜５個の置換基で置換される。

「環状アミノ」は、１個以下の窒素、酸素、または硫黄のような追加のヘテロ原子を有する、１価の飽和５−、６−、または７員環状アミン環である。代表的な例は、例えば、１−ピロリジノ、１−ピペリジノ、モルホリノ、ピペラジノ等を含む。これらは、置換または非置換である。置換される場合、それらは、低級アルキル、低級シクロアルキル、ヒドロキシ低級アルキル、フェニル（置換または非置換）、ベンジル（置換または非置換）、アミノカルボニルメチル、低級アルキルアミノカルボニルメチル、アミノ、モノ−又はジ低級アルキルアミノ、または環状アミノから選択した、２個以下の置換基を有する。

「１価の基」は単結合を介した基の結合を指す。

「２価の基」は、二重結合を介した基の結合を指す。

「ヘテロ原子」は、窒素、酸素、硫黄、又は、窒素または硫黄の任意の酸化型を指す。

「シアノ」は、１価−ＣＮ基を指す。

「ニトロ」は、１価−ＮＯ_２基を指す。

「アミノ」は、１価−ＮＨ_２基を指す。

「ホルミル」は、１価−ＣＨＯ基を指す。

「トリ低級アルキルシリル」は、低級アルキル基が同一又は異なる３個の低級アルキル基で置換された１価のシリル基を指す。

「低級アルキルカルボニルオキシメチル」は、一価の−ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）（低級アルキル）基である。

「置換ビニル」は、一つ又はそれ以上のＣＨ基が、アルキル、ハロ、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、フェニル、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、および低級アルキルカルボニルアミノ、からなる群から独立して選択される、１〜３個の置換基で置換されている置換−ＣＨ＝ＣＨ_２基を指す。

「ヒドロキシ」は、１価のＯＨを指す。

「炭素環」は、３〜１８員環で、すべての該環原子が炭素で、完全に飽和、部分的に飽和、または不飽和（つまり本質的に、芳香族性）である、１価または２価の基を指す。前記炭素環基は、単結合または二重結合を通して、飽和、部分飽和、または不飽和環を介して結合される。炭素環基は、２，３、または４個の環を含有して縮合し、該縮合環は、独立して、飽和、部分飽和、又は不飽和である。炭素環式基の例は、フェニル、ナフチル、フルオレニル、およびテトラセニルを含む。前記基は、選択的に、本発明の範囲内に入る化合物の製造を有意に妨害せず、前記化合物の有効性を低下させない位置に置換基で置換される。前記基は、選択的に、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ホルミル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、および低級アルキルカルボニルアミノ、糖残基、及びリン糖酸残基からなる群から独立して選択される１〜５個の置換基で置換される。

「カルバモイルオキシ」は、式Ｒ^１３Ｒ^１４ＮＣ（Ｏ）Ｏ−（すなわちアミノカルボニルオキシ）の１価の基であって、Ｒ^１３とＲ^１４は、窒素原子と一緒に環状アミノを形成し、またはＲ^１３およびＲ^１４は、それぞれ独立して水素、低級アルキル、ヒドロキシ低級アルキル、アミノ低級アルキル、低級シクロアルキル、フェニル（置換または非置換）、またはベンジル（置換または非置換）であるものである。例は、アミノカルボニルオキシ、メチルアミノカルボニルオキシ、ジメチルアミノカルボニルオキシ、［４−（１−ピペリジノ）−１−ピペリジノ］カルボニルオキシ、１−モルホリノカルボニルオキシ、１−ピロリジニル、１−ピペラジンカルボニルオキシ、及び当業者によって認識され、または本明細書に記された、他の例を含む。

「複素環式」は、環中に少なくとも１個のヘテロ原子を含む３〜１０員環基の１価または２価の基であり、完全に飽和、又は部分的に飽和または不飽和（すなわち本質的に芳香族性）である。複素環は、単結合または二重結合を介して炭素原子またはヘテロ原子を通して結合される。前記複素環のヘテロ原子、例えばＮは、選択的にＮ−オキシドとして存在し得、又は、Ｓは、選択的にスルホキシドまたはスルホンとして存在し得る。

「５員複素環」は、環中に少なくとも１個のヘテロ原子を含む５員環の１価または２価の基であり、完全に飽和、部分的に飽和、または不飽和（すなわち本質的に芳香族性）である。前記複素環は二つまたはそれ以下のヘテロ原子を含有するであろう。前記複素環は、単結合または二重結合を介して炭素原子またはヘテロ原子を介して結合される。一つだけのヘテロ原子を有する不飽和の５員複素環の代表例は、２−または３−ピロリル、２−又は３−フラニル、および２−または３−チオフェニルを含む。対応する部分飽和または完全飽和基は、３−ピロリン−２−イル、２−又は３−ピロリジニル、２−または３−テトラヒドロフラニル、および２−または３−テトラヒドロチオフェニルを含む。２個のヘテロ原子を有する代表的な不飽和の５員複素環基は、イミダゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリルなどを含む。対応する完全飽和および部分的飽和基も含まれる。前記基は、選択的に、本発明の範囲内に入る化合物の製造を有意に妨害せず、前記化合物の有効性を低下させない位置に置換基で置換される。前記環は、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、フェニル、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、低級アルキルカルボニルアミノ、糖残基、及びリン糖酸残基からなる群から選択される１または２個の置換基で置換される。

「６員複素環」は、少なくとも１個のヘテロ原子を含む１価又は２価の６員環の基であり、完全飽和、部分飽和または不飽和（つまり、本質的に芳香族性）である。前記複素環は二つ以下のヘテロ原子を含有する。前記複素環は、単結合または二重結合を介して炭素原子またはヘテロ原子を通して結合される。一つだけのヘテロ原子を有する不飽和６員複素環の代表例は、２−、３−、または４−ピリジニル、２Ｈ−ピラニル、および４Ｈ−ピラニルを含む。対応する部分飽和または完全飽和基は２−、３−、または４−ピペリジニル、２−、３−、または４−テトラヒドロピラニルなどを含む。２個のヘテロ原子を有する代表的な不飽和６員複素環基は、３−または４―ピリダジニル、２−、４−、または５−ピリミジニル、２−ピラジニル等を含む。前記対応する完全飽和および部分的飽和基も含まれる、例えば、２−ピペラジン。前記基は、選択的に、本発明の範囲内に入る化合物の製造を有意に妨害せず、前記化合物の有効性を低下させない位置に置換基で置換される。前記環は、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、フェニル、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、低級アルキルカルボニルアミノ、糖残基、及びリン糖酸残基からなる群から選択される、１または２個の置換基で置換される。

「縮合２−、３−、または４−環複素環」は、隣接環が１対の原子、炭素原子を共有する点で、多核である１価又は２価の基である。これは、例えば、窒素、酸素または硫黄などの非炭素原子を有する点で、環の少なくとも一つは、複素環式であろう。前記環システムは、９〜１８の炭素原子を含有する。前記複素環は、単結合または二重結合を介して環の一つの炭素原子またはヘテロ原子を通して結合される。２環式複素環システムは、前記環に含まれる９又は１０個の原子を有することになる。係る２−環システムの例は、キノリン、イソキノリン、プリン、インドリジン、４Ｈ−キノリジン、３Ｈ−ピロリジン、クマラン、クマリン、イソクマリン、４−メチルクマリン、３−クロロ−Ｈ−メチルクマリン、クロモン、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、ベンゾチアゾール、インドールなどを含む。３環システムは、１２〜１４原子が環に含まれることになる。係る３環システムの例は、カルバゾール、アクリジンなどを含む。４環縮合システムは１６〜１８個の原子が、前記環に含まれることになる。係る４環システムの例は、イソテバインなどを含む。前記基は、選択的に、本発明の範囲内に入る化合物の製造を有意に妨害せず、前記化合物の有効性を低下させない位置に置換基で置換される。前記基は、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、フェニル、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、低級アルキルカルボニルアミノ、糖残基、及びリン糖酸残基からなる群から独立して選択される、１〜５個の置換基で置換される。

他の化学用語は、標準テキスト及び辞書からの手引きで当業者によって理解されるように、その標準的な意味が与えられる。この開示全体で使用される標準的な命名法の下では、置換基の末端部分を最初に述べ、次いで、その結合点に向かって隣接する官能基を述べる。従って、例えば、「アミノカルボニル」基は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２基を指し、「低級アルコキシメチル」基は−ＣＨ_２（低級アルコキシ）基を指し、「アミノ低級アルコキシ」基は、−（低級アルコキシ）アミノ基を指す、等。

一態様において、本発明は、疎水性ＣＰＴ誘導体又は前記ＣＰＴ誘導体の薬学的に許容される塩と、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を抱合（ｃｏｎｊｕｇａｔｅ）したリン脂質と、を含む医薬組成物を提供する。前記ＰＥＧ部分は、約１，０００〜約２０，０００ダルトンの分子量を有し、リン脂質部分に抱合される。前記ＰＥＧ抱合型リン脂質は、前記ＣＰＴ誘導体と、または，前記誘導体の薬学的に許容される塩とを、約０．４５：１を超えるモル比で混合させてミセルを形成する。本発明のＣＰＴ誘導体の医薬組成物は、均一なミセル粒径、狭い粒径分布、長期保存安定性、改善された溶解性および低減された副作用を有する。

本発明の別の態様は、被験者における癌細胞の増殖を阻害する方法に向けられ、該被験者に本明細書に記載の医薬組成物の有効量を投与することを含み、それによって被験者における癌の症状および徴候が低減される。前記被験者の癌細胞は、選択的に、１種又はそれ以上の、放射線、従来の化学療法、および標的癌治療の一つ又はそれ以上の単位用量を含むが、これらに限定されない抗がん剤に曝露される。

カンプトテシン誘導体
本発明における使用に適したカンプトテシン誘導体は、疎水性カンプトテシン誘導体である。疎水性カンプトテシン誘導体は、例えば、カンプトテシン（（Ｓ）−４−エチル−４−ヒドロキシ−１Ｈ−ピラノ［３’４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４（４Ｈ、１２Ｈ）−ジオン））の一つ又はそれ以上の官能基にポリマーを添加することにより、従来の方法で形成される。前記疎水性カンプトテシン誘導体は、大体カンプトテシントと同程度活性であり得る。前記疎水性ＣＰＴ誘導体の例は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第７８７５６０２号明細書の式（Ｉ）の化合物および（ＩＩ）の化合物を含む。

式（Ｉ）のカンプトテシン誘導体は、次の通りである。

Ｗは、アルキル−Ｃ（Ｏ）−、または、Ｒ^１Ｙ−ＬＣ（Ｏ）であり、但し、Ｗがアルキル−Ｃ（Ｏ）−である場合、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、またはＲ^６のうちの少なくとも一つがニトロであり；
Ｌは結合または直鎖アルキレン（１〜８）基であって、選択的に低級アルキル又は置換された低級アルキルで置換され、前記直鎖状のアルキレン基の、１個または２個のメチレン（−ＣＨ_２−）単位は、選択的にＯ、Ｓ又はＮＨで置換され；
Ｙは＝ＮＯ−、−Ｎ（Ｈ）Ｏ−、＝Ｎ−、−ＮＲ−、Ｏ、Ｓ、または結合であり；
ＲはＨ、アルキル、または置換されたアルキルであり；
Ｒ^１は、選択的に置換された炭素環、複素環、又は縮合２−、３−または４環複素環であり；
Ｒ^２は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、Ｒ^ＱＹ、Ｒ^ＱＹ−Ｌ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、トリ低級アルキルシリル、低級アルキルカルボニルオキシ、低級アルコキシカルボニルオキシ、糖残基、リン糖酸残基、Ｏ−キノン、置換された低級アルキルアミノメチル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルカルボニルオキシメチル、選択的に置換された低級アルキルカルボニルオキシメチル、置換ビニル、１−ヒドロキシ−２−ニトロエチル、アルコキシカルボニルエチル、アミノカルボニル、アルキルカルボニル、ベンゾイルメチル、ベンジルカルボニルオキシメチル、低級アルキルイミノメチル、または低級アルコキシメチルであり；
Ｒ^３は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、Ｒ^ＱＹ−Ｌ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ＣＨ_２ＮＲ^７Ｒ^８（Ｒ^７とＲ^８各々は独立して、Ｈ、１〜６個の炭素数のアルキル、選択的に置換されたフェニル、ヒドロキシ低級アルキル、またはアミノ低級アルキル、またはモノ−またはジアルキルアミノ低級アルキル、またはＲ^７およびＲ^８は−Ｎ−と一緒に環状アミノ−を表す）、ＣＨ_２Ｒ^９（Ｒ^９は、低級アルコキシ、シアノ、アミノ低級アルコキシ、モノ−もしくはジ−低級アルキルアミノ低級アルコキシ、低級アルキルチオ、アミノ低級アルキルチオ、モノ−もしくはジ−低級アルキルアミノ低級アルキルチオ）、ＮＲ^１０Ｒ^１１（Ｒ^１０とＲ^１１の各々は、独立して水素、低級アルキル、フェニル、ヒドロキシ低級アルキル、又はアミノ低級アルキル、又はＲ^１０及びＲ^１１は−Ｎ−と一緒に環状アミノを表す）、トリアルキルシリル、ジアルキルアミノアルキル、低級アルキルカルボニルオキシ、低級アルコキシカルボニルオキシ、糖残基、リン糖酸残基、Ｏ−キノン、置換された低級アルキルアミノメチル又は低級アルキルカルボニルアミノ、又はＲ^３はＲ^４と一緒にフラン、ジヒドロフランまたは１，４−オキサジン−２−オンであり、そして、
Ｒ^４は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、Ｒ^ＱＹ−Ｌ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、シアノ、ニトロ、アミノ、アミノ低級アルキル、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、カルバモイルオキシ、低級アルキルカルボニルオキシ、低級アルコキシカルボニルオキシ、糖残基、リン糖酸残基、Ｏ−キノン、置換された低級アルキルアミノメチル、または低級アルキルカルボニルアミノ、またはＲ^４はＲ^３と一緒にフラン、ジヒドロフランまたは１，４−オキサジン−２−オンであり、Ｒ^４はＲ^５と一緒にメチレンジオキシであり；
Ｒ^５は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、Ｒ^ＱＹ−Ｌ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、シアノ、ニトロ、アミノ、トリアルキルシリル、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、低級アルコキシカルボニルオキシ、糖残基、リン糖酸残基、Ｏ−キノン、置換された低級アルキルアミノメチル、または低級アルキルカルボニルアミノ、または、Ｒ^５はＲ^４と一緒にメチレンジオキシであり；
Ｒ^６は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、Ｒ^ＱＹ−Ｌ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、低級アルコキシカルボニルオキシ、糖残基、リン糖酸残基、Ｏ−キノン、置換された低級アルキルアミノメチル、または低級アルキルカルボニルアミノであり；そして
Ｒ^Ｑは、選択的に置換された炭素環、複素環、または縮合２−、３−または４環複素環である。

いくつかの実施形態では、ＷはＲ^１Ｙ−Ｌ−（Ｏ）−である。

一般式（Ｉ）によって記載されるように、前記活性カンプトテシン誘導体に組み込まれるＲ^１基は、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ホルミル、低級アルキルカルボニル、ヒドロキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、ベンジルオキシ、選択的に置換されたピペラジノ、低級アルコキシカルボニル、および低級アルキルカルボニルアミノから成る群から独立して選択される、１〜５個の置換基で選択的に置換されたフェニル；ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、および低級アルキルカルボニルアミノから成る群から独立して選択される、１〜５個の置換基で選択的に置換された、縮合２−、３−、または４−環複素環システム；ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、および低級アルキルカルボニルアミノから成る群から独立して選択される１〜４個の置換基で選択的に置換された、１−又は２−ナフチル；又は、１または２個の窒素原子を含有する、５または６員複素環であって、その環が、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、および低級アルキルカルボニルアミノからなる群から選択される１または２個の置換基で選択的に置換されている複素環を含む。好ましい実施態様において、Ｒ^１は、少なくとも一個のカルボニル、アミド、トリフルオロメチル、ハロゲン、ニトロ、ニトロソ、スルホニル、スルフィニル、ホスホリル、またはオキソ基で置換される。他の実施形態では、Ｒ^１は、Ｏ−キノン、セミキノン、フルオレン、イミダゾール、トリアゾール、ピリジン、ベンズアミド、ニコチンアミド、ベンゾトリアジンオキシド、フラン、チオフェン、オキサゾール、またはチアゾールであって、上述の基の各々は置換又は非置換である。

他の実施形態では、Ｒ^１は芳香族である。

好ましくは、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、またはＲ^６の少なくとも一つは、電子親和性部分を含み、前記電子親和性部分は、（ｉ）ニトロ、（ｉｉ）１つまたはそれ以上のカルボニル、トリフルオロメチル、ハロゲン、ニトロ、スルホニル、スルフィニル、ホスホリル、オキシドまたはシアノ基を有する炭素環式または複素環式芳香族部分で；（ｉｉｉ）２つまたはそれ以上のヘテロ原子を含有する複素環式芳香族部分；または（ｉｖ）金属錯体；または（ｖ）金属が共有結合で炭素に結合している有機金属基である。

炭素環または複素環芳香族の電子親和性部分は、合計５〜１５個の環原子を有する、１〜３個の環を含む。前記ヘテロ原子はＮ、Ｓ、ＯおよびＰから成る群から選択される。好ましくは、前記炭素環または複素環芳香族の電子親和性部分は、１〜２個の環を含むが、一つの環が現在最も好ましい。代表的な炭素環芳香族電子親和性部分は、１つ又はそれ以上のニトロ、ハロゲン、カルボニルまたはスルホニル置換基を含むフェニル及びナフチル基を含むが、ニトロ置換フェニルが好ましい炭素環式芳香族電子親和性部分である。代表的な複素環式芳香族電子親和性部分は、１つ又はそれ以上のカルボニル、トリフルオロメチル、ハロゲン、ニトロ、スルホニル、スルフィニル、ホスホリル、オキシドまたはシアノ基を有するが、好ましくは、少なくとも一つのニトロ基を有する、イミダゾール、トリアゾール、ピリジン、ベンズアミド、ニコチンアミド、ベンゾトリアジンオキシド、フラン、チオフェン、オキサゾールおよびチアゾールを含む。

金属錯体電子親和性部分は、好ましくはＰｔ^２＋、Ｃｏ^３＋、Ｆｅ^２＋、Ｆｅ^３＋，Ｐｄ^２＋、Ｃｕ^２＋、Ｔｉ^４＋、またはＺｒ^４＋を金属として、２つのサブグループ：（ａ）上記した炭素環式及び複素環式芳香族電子親和性部分の金属錯体及び（ｂ）窒素、炭素、又は硫黄を含む二座配位子の金属錯体に分類される。二座配位子の金属錯体は、式−ＢＭ^ＬＸ_Ｋに対応し、Ｂは、窒素、炭素または硫黄を含む二座配位子であり、Ｍ^Ｌは金属であり、Ｘは、Ｃｌ⁻」又は⁻ＯＡｃのようなアニオン性配位子であり、ｋは１〜４である。

有機金属電子親和性部分は、脂肪族または芳香族水銀基である。水銀を含有する物質を組み込んだ放射線増感剤の調製および使用は、Ｓｈｅｎｏｙｅｔ ａｌ，Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ，１０（６）：５３３−５５１（１９９２）及びＢｒｕｃｅ ｅｔ ａｌ，Ｒａｄｉａｔｉｏｎ Ｒｅｓ．，２４：４７３−４８１（１９６５）に記載されている。

式（Ｉ）の化合物に含めるのに特に適している電子親和性部分は、Ｏ−キノン、セミキノン、フルオレン、イミダゾール、トリアゾール、ピリジン、ベンズアミド、ニコチンアミド、ベンゾトリアジンオキシド、フラン、チオフェン、オキサゾール、及びチアゾールを含むが、上述の基の各々は、置換または非置換である。好ましい実施態様において、Ｒ^１は、この群から選択される。

特に好ましい実施形態において、腫瘍細胞を放射線に感作させる方法は、以下からなる群から選択されるカンプトテシン系化合物を使用している。

他の実施形態では、前記電子親和性部分は、以下の構造を有する２−ニトロイミダゾール−１−イルまたは３−ニトロ−１，２，４−トリアゾール−１−イル基であるＲ^１を含む。

、Ｒ^２０は、ハロ、アルキル、または置換されたアルキルである。

前記電子親和性部分は、直接に、カンプトテシンのＣ５、Ｃ７、Ｃ９、Ｃ１Ｏ、Ｃ１１，Ｃ１２、またはＣ２０位置の炭素の１つに取り付けられるか、または、リンカーを介して間接的に結合される。前記リンカー、Ｌは、選択的に１個又はそれ以上の酸素、硫黄又は窒素原子により中断される、１〜８個の炭素数の任意のアルキレン基であるが、好ましいリンカーは、（ＣＨ_２）_ｍまたは、−（Ｔ）_ｎ−Ｘ−であり、Ｘは、Ｏ、Ｓ、−ＮＲ−、または結合であり；Ｔは独立してＣＲＲ^１、ｍは０〜３の整数；ｎは１〜３の整数であり、ＲおよびＲ^１の各々は、独立して、水素、低級アルキル、及び置換低級アルキルである。

特に好ましい態様では、カンプトテシン誘導体の−２０位の置換に含まれる、ＷＯ−は、以下からなる群から選択される。

式（ＩＩ）のカンプトテシン誘導体は、次の通りである。

Ｘは、Ｏ、Ｓ、−ＮＲ−、または結合であり；
Ｙは、＝ＮＯ−、−Ｎ（Ｈ）Ｏ−、＝Ｎ−、−ＮＲ−、Ｏ、Ｓ；または共有結合であり；
Ｔは独立してＣＲＲ’であり；
ＲおよびＲ’の各々は、独立して、水素、Ｃ_１〜４アルキル、及び置換されたＣ_１〜４アルキルから選択され；
ｎは０〜８の整数であり；
Ｒ^１は、選択的に置換された複素環式、アリール、またはヘテロアリールであり；
但し，Ｘは結合またはＣＨ_２であり、ｎは、１，２または３であるとき、Ｙは、Ｒ^１に結合している場合、酸素ではない；そして
但し、Ｘは結合またはＣＨ_２であり、ｎは、１，２または３であり、そしてＲ^１は、少なくとも１個の窒素原子を含む複素環である場合、Ｙは前記窒素原子に直接結合していなく；
Ｒ^２は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、Ｒ^ＱＹ−Ｌ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル，ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、トリ低級アルキルシリル、低級アルキルカルボニルオキシ、低級アルコキシカルボニルオキシ、糖残基、リン糖酸残基、Ｏ−キノン、置換された低級アルキルアミノメチル、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルカルボニルオキシメチル、選択的に置換された低級アルキルカルボニルオキシメチル、置換ビニル、１−ヒドロキシ−２−ニトロエチル、アルコキシカルボニルエチル、アミノカルボニル、アルキルカルボニル、アルキルカルボニルオキシメチル、ベンゾイルメチル、ベンジルカルボニルオキシメチル、低級アルキルイミノメチル、または低級アルコキシメチルであり、
Ｒ^３は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、Ｒ^ＱＹ−Ｌ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル，ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ＣＨ_２ＮＲ^７Ｒ^８（Ｒ^７およびＲ^８はそれぞれ独立してＨ、１〜６個の炭素のアルキル、選択的に置換されたフェニル、ヒドロキシ低級アルキル、アミノ低級アルキル、またはモノもしくはジアルキルアミノ低級アルキルであり、またはＲ^７およびＲ^８は、それが結合している窒素と一緒に環状アミノを表す）、ＣＨ_２Ｒ^９（Ｒ^９は、低級アルコキシ、ＣＮ、アミノ低級アルコキシ、モノ−もしくはジ−低級アルキルアミノ低級アルコキシ、低級アルキルチオ、アミノ低級アルキルチオ、又はモノ−もしくはジ−低級アルキルアミノ低級アルキルチオである）、ＮＲ^１０Ｒ^１１（Ｒ^１０およびＲ^１１の各々は、独立して、水素、低級アルキル、フェニル、ヒドロキシ低級アルキル、又はアミノ低級アルキルであり、またはＲ^１０及びＲ^１１は、それらが結合している窒素と一緒に環状アミノを表す）、トリアルキルシリル、ジアルキルアミノアルキル、低級アルキルカルボニルオキシ、低級アルコキシカルボニルオキシ、糖残基、リン糖酸残基、Ｏ−キノン、置換された低級アルキルアミノメチル、または低級アルキルカルボニルアミノであり、またはＲ^３はＲ^４一緒に、フラン、ジヒドロフラン、または１，４−オキサジン−２−オンであり、
Ｒ^４は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、Ｒ^ＱＹ−Ｌ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、シアノ、ニトロ、アミノ、アミノ低級アルキル、ハロゲン化低級アルキル，ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、カルバモイルオキシ、低級アルキルカルボニルオキシ、低級アルコキシカルボニルオキシ、糖残基、リン糖酸残基、Ｏ−キノン、置換された低級アルキルアミノメチル、または低級アルキルカルボニルアミノであり、またはＲ^４はＲ^５と一緒にメチレンジオキシであり、
Ｒ^５は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、Ｒ^ＱＹ−Ｌ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル，ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、低級アルコキシカルボニルオキシ、糖残基、リン糖酸残基、Ｏ−キノン、置換された低級アルキルアミノメチル、または低級アルキルカルボニルアミノであり、
Ｒ^６は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、Ｒ^ＱＹ−Ｌ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、シアノ、ニトロ、アミノ、トリアルキルシリル、ハロゲン化低級アルキル，ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、低級アルコキシカルボニルオキシ、糖残基、リン糖酸残基、Ｏ−キノン、置換された低級アルキルアミノメチル、または低級アルキルカルボニルアミノであり、
Ｒ^Ｑは、選択的に置換された複素環、アリール、またはヘテロアリール基であり、またはＲ^ｌＹは一緒にＮＲ^ａＲ^ｂ基を形成し、Ｒ^ａ、Ｒ^ｂ、及びそれらが結合している窒素は環状アミンまたはイミド環を形成する。

一実施形態では、Ｒ^２、Ｒ^４、またはＲ^５の一つが（トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミノ）メチル、（ビス（ヒドロキシメチル）メチルアミノ）メチル、および（２−ヒドロキシエチルアミノ）メチルからなる群から選択される。

好ましい実施形態において、Ｒ^２は、（トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミノ）メチル、（ビス（ヒドロキシメチル）メチルアミノ）メチル、および（２−ヒドロキシエチルアミノ）メチルからなる群から選択される。

別の態様において、Ｒ^２は、（トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミノ）メチル、（ビス（ヒドロキシメチル）メチルアミノ）メチル、および（２−ヒドロキシエチルアミノ）メチルからなる群から選択され；Ｒ^３は、水素、ジメチルアミノ、アミノ、またはニトロであり；Ｒ^４は、水素、ヒドロキシ、または４−（１−ピペリジノ）−１−ピペリジノカルボニルオキシ；または、Ｒ^４はＲ^５と一緒に、メチレンジオキシであり；Ｒ^５は、水素であり；または、Ｒ^４はＲ^５と一緒には、メチレンジオキシでありそしてＲ^６は水素である。別の実施形態において、Ｒ^２は、（トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミノ）メチル、（ビス（ヒドロキシメチル）メチルアミノ）メチル、および（２−ヒドロキシエチルアミノ）メチルからなる群から選択され；Ｒ^３は、水素であり；Ｒ^４はＲ^５と一緒にメチレンジオキシでありそしてＲ^６は水素である。

さらに別の実施形態において、Ｒ^２は、（トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミノ）メチル（ビス（ヒドロキシメチル）メチルアミノ）メチル、および（２−ヒドロキシエチルアミノ）メチルからなる群から選択され、そしてＲ^３、Ｒ^４、Ｒ^５及びＲ^６の各々は水素である。

好ましい実施形態では、Ｒ^１は芳香族である。

好ましい実施形態では、Ｘは共有結合である。さらに、Ｙは、＝ＮＯ−または−Ｎ（Ｈ）０−であることがが好ましく、さらにより好ましくは、ｎは１であり、Ｒ及びＲ‘のそれぞれは独立してメチルまたは水素である。さらに好ましい態様において、Ｒ^１は、好ましくは、１〜４個の芳香環を有する、置換または非置換の炭素環である。置換もしくは非置換の炭素環は、９−フルオレニルであり、好ましくは、少なくとも一つのニトロ基で置換されている。前記化合物の一実施形態では、Ｒ^１は以下である。

好ましい実施形態では、前記疎水性カンプトテシン誘導体は、以下からなる群から選択される。

別の好ましい実施形態において、式（ＩＩ）の化合物は、以下のＲ^１またはＲ^Ｑを含み、

Ｒ^２０はハロ、アルキル、又は置換アルキルである。

更なる式（ＩＩ）の好ましい実施形態において、Ｒ^１Ｙ−（Ｔ）_ｎＸ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−は以下である。

特定のＣＰＴ誘導体が特に好ましく、例えば、式（ＩＩ）の化合物であって、Ｒ^２は水素であり；Ｒ^３はＣＨ_２ＮＲ^７Ｒ^８（Ｒ^７およびＲ^８のそれぞれは、独立してＨ、１〜６個の炭素原子のアルキル、選択的に置換されたフェニル、ヒドロキシ低級アルキル、アミノ低級アルキル、またはモノ−もしくはジアルキルアミノ低級アルキルであるか、またはＲ^７およびＲ^８が−Ｎ−と一緒に、環状アミノ−を表現する）、ＮＲ^１０Ｒ^１１（Ｒ^１０およびＲ^１１の各々はそれぞれ独立して、水素、低級アルキル、フェニル、ヒドロキシ低級アルキル、又はアミノ低級アルキル、又はＲ^１０及びＲ^１１は、−Ｎ−と一緒に環状アミノを表す）、またはジアルキルアミノアルキルであり；Ｒ^４は低級アルコキシ、ヒドロキシ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、カルバモイルオキシ、低級アルキルカルボニルオキシ、低級アルコキシカルボニル、糖残基、リン糖酸残基、又はＲ^４はＲ^５と一緒にメチレンジオキシであり、Ｒ^５は水素であるかまたはＲ^４と一緒にメチレンジオキシであり；そしてＲ^６は水素であるものである。

より好ましくは、Ｒ^３はＣＨ_２ＮＲ^７Ｒ^８であり（Ｒ^７とＲ^８の各々は低級アルキルである）、Ｒ^４は、ヒドロキシ、アルコキシ、またはアルキルカルボニルオキシであり、そしてＲ^５は水素である。この化合物の特に好ましい実施形態では、Ｒ^３はＣＨ_２Ｎ（ＣＨ_３）_２であり、および／またはＲ^４がヒドロキシである。

同様に、式（ＩＩ）の好ましい化合物は、次の特長がある：Ｒ^２は水素、低級アルキルまたはハロゲン化低級アルキルであり；Ｒ^３は、水素又は低級アルキルであり；Ｒ^４は低級アルコキシ、ヒドロキシ、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、カルバモイルオキシ、低級アルキルカルボニルオキシ、低級アルコキシカルボニル、糖残基、リン糖酸残基、又はＲ^４はＲ^５と一緒メチレンジオキシ；Ｒ^５は、水素であるかＲ^４と一緒にメチレンジオキシであり；そしてＲ^６は水素である。

好ましくは、Ｒ^３は、水素であり、Ｒ^４はカルバモイルオキシで、Ｒ^５は水素である。さらにより好ましくは、Ｒ^２は、低級アルキル、特にエチルであり、そしてＲ^４は４−（１−ピペリジノ）−１−ピペリジノカルボニルオキシである。

本発明の他の実施形態では、Ｒ^２は水素であり、Ｒ^４は４−（１−ピペリジノ）−１−ピペリジノカルボニルオキシである。

本発明の他の実施形態において、Ｒ^２は水素であり、Ｒ^３は水素であり。Ｒ^４は、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルオキシである。

本発明のさらに別の好ましい化合物は式（ＩＩ）のものであり、Ｒ^２は低級アルキルである；Ｒ^３は、水素であり；Ｒ^４は、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、低級アルコキシカルボニルオキシ、糖残基、リン糖酸残基、または低級アルキルカルボニルオキシであり、；Ｒ^５は、水素であり；そしてＲ^６は水素である。

好ましくは、Ｒ^２はエチルであり、Ｒ^４はヒドロキシである
本発明のさらに別の好ましい化合物は、式（ＩＩ）のものであり、Ｒ^２、Ｒ^４、Ｒ^５およびＲ^６は、水素であり、Ｒ^３はアミノまたはニトロである。式（ＩＩ）の代替化合物は、以下の置換基を有する：Ｒ^２は、トリ低級アルキルシリルであり；Ｒ^３は、水素であり；Ｒ^４はヒドロキシ、低級アルコキシ、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、低級アルコキシカルボニルオキシ、糖残基、リン糖酸残基、カルバモイルオキシまたは低級アルキルカルボニルオキシ；Ｒ^５は、水素であり；そしてＲ^６は、水素である。
好ましくは、Ｒ^２はｔ−ブチルジメチルシリルであり、Ｒ^４はヒドロキシである。

前記リンカー、Ｌ、は、炭素数１〜８の任意のアルキレン基であって、選択的に１個又はそれ以上の酸素、硫黄又は窒素原子により中断されていて、好ましいリンカーは（ＣＨ_２）ｍ又は−（Ｔ）ｎ−Ｘ−で、Ｘは、Ｏ、Ｓ、−ＮＲ−、または結合であり；Ｔは独立してＣＲＲ‘であり；。ｍは０〜３の整数であり；ｎは１〜３の整数であり、ＲおよびＲ’の各々は、独立して、水素、アルキル、および置換されたアルキルから選択される。

さらに別の好ましい実施形態では、ＴＬＣ３８８ＨＣ１として知られている本発明のカンプトテシン誘導体は、以下の異性体を含む。

ＴＬＣ３８８ＨＣ１はジアステレオマーであり、モル比約２：１の（Ｓ、Ｓ）及び（Ｓ、Ｒ）異性体を含む。本明細書において使用する場合、用語「Ｓ」または「Ｒ」は、Ｒ／Ｓシステムと呼ばれ、参照分子を関与することなく、その立体配置によって、光学異性体に名前を付ける方法である。これは、各キラル中心を、それぞれの原子番号に基づいて、カーン・インゴルド・プレローグ順位則（Ｃａｈｎ Ｉｎｇｏｌｄ Ｐｒｅｌｏｇ ｐｒｉｏｒｉｔｙ ｒｕｌｅｓ）に従い、そのリガンドは優先順位が割り当てられている、システムに従ってＲまたはＳと標識するものである。このシステムは、一分子中の各キラル中心を標識する（また、これは、キラル中心を含まないキラル分子へ拡張する）。該化合物が２つのキラル中心を有する場合、それは、例えば（Ｓ、Ｒ）異性体対（Ｓ、Ｓ）異性体として、標識され得る。

本明細書に開示された疎水性のＣＰＴ誘導体は、遊離ヒドロキシルまたはアミン基を有する既知カンプトテシン系化合物を適切な電子親和性部分と反応させることにより、電子親和性グループを種々の方法を用いてＣＰＴのＣ_５、Ｃ_７、Ｃ_９、Ｃ_１０、Ｃ_１１、Ｃ_１２またはＣ_２０炭素のいずれかにリンクすることで、調製される。本発明のＣＰＴ誘導体の調製方法は、米国特許第７８７５６０２号明細書に記載されており、その全体が本明細書に組み込まれる。

好ましい実施形態では、前記カンプトテシン誘導体はＴＬＣ３８８ＨＣ１、ＴＬＣ１９８８ＨＣｌおよびそれらの混合物からなる群から選択される。

本実施形態の別の群では、前記ＣＰＴ誘導体は、式（Ｖ）の化合物を含むが、これは、米国特許第６３５０７５６号明細書に開示されており、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

ＲはＲ^１−Ｏ−（ＣＨ２）_ｍ−、ｍは１〜１０の整数であり、そして，Ｒ^１は、
ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ホルミル、低級アルキルカルボニル、ヒドロキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、ベンジルオキシ、選択的に置換されたピペラジノ、低級アルコキシカルボニル、および低級アルキルカルボニルアミノからなる群から独立して選択される１〜５個の置換基で選択的に置換されたフェニル；
ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、低級アルキルカルボニル、ヒドロキシカルボニル、低級アルキルカルボニル、および低級アルキルカルボニルアミノからなる群から独立して選択される１〜５個の置換基で選択的に置換された、縮合２−、３−または４−環複素環システムであり、
ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、低級アルキルカルボニル、ヒドロキシカルボニル、低級アルキルカルボニル、および低級アルキルカルボニルアミノからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で選択的に置換された、１−又は２−ナフチルであり；
１または２個の窒素原子を含有し、その環は、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、および低級アルキルカルボニルアミノから選択される、１または２個の置換基で選択的に置換された、５または６員複素環であり；
Ｒ^２は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、ＲＣ（Ｏ）Ｏ（Ｒは上記で定義されている）、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、トリ低級アルキルシリル、低級アルキルカルボニルオキシ、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルカルボニルオキシメチル、置換ビニル、１−ヒドロキシ−２−ニトロエチル、アルコキシカルボニルエチル、アミノカルボニル、アルキルカルボニル、アルキルカルボニルオキシメチル、ベンゾイルメチル、ベンジルカルボニルオキシメチル、または低級アルコキシメチルであり；
Ｒ^３は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、ＲＣ（Ｏ）Ｏ（Ｒは上記で定義の通り）シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ＣＨ_２ＮＲ^７Ｒ^８を（各Ｒ^７およびＲ^８の各々は、独立してＨ−，炭素数１〜６のアルキル、選択的に置換されたフェニル、ヒドロキシ低級アルキル、アミノ低級アルキル、またはモノ−ジアルキルアミノ低級アルキル、またはＲ^７およびＲ^８は−Ｎ−と一緒に環状アミノを表す）、ＣＨ_２Ｒ^９（Ｒ^９は、低級アルコキシ、ＣＮ、アミノ低級アルコキシ、モノ−もしくはジ−低級アルキルアミノ低級アルコキシ、低級アルキルチオ、アミノ低級アルキルチオ、又は、またはモノ−もしくはジ−低級アルキルアミの低級アルキルチオ）、又はＮＲ^１０Ｒ^１１（Ｒ^１０及びＲ^１１の各々は、独立して、水素、低級アルキル、フェニル、ヒドロキシ低級アルキル、又はアミノ低級アルキル、又はＲ^１０及びＲ^１１は、−Ｎ−と一緒に環状アミノを表す）、ジアルキルアミノアルキル、低級アルキルカルボニルオキシ低級アルキルカルボニルアミノであり；そして
Ｒ^４は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、ＲＣ（Ｏ）Ｏ（Ｒは上記で定義の通り）シアノ、ニトロ、アミノ低級アルキル、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、カルバモイルオキシ、低級アルキルカルボニルオキシ、または低級アルキルカルボニルアミノ、又はＲ^４はＲ^５と一緒にメチレンジオキシであり；
Ｒ^５は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、ＲＣ（Ｏ）Ｏ（Ｒは上記で定義されている）、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、またはである低級アルキルカルボニルアミノであり；そして
Ｒ^６は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、ＲＣ（Ｏ）Ｏ（Ｒは上記で定義されている）シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、または低級アルキルカルボニルアミノである。

実施形態のさらに別の群では、前記ＣＰＴ誘導体は、米国特許第６４０３６０４号明細書に開示されており、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、式（ＶＩ）を含む。

ＲはＲ^ａＲ^ｂＮ−（ＣＨ_２）_ｍであり、ｍは、２であり、
Ｒ^ａＲ^ｂはＮと一緒に（ａ）１個以下の追加の窒素、酸素または硫黄原子をその環に有する、５−、６−、７−員環状アミンを形成し、その環は、他の炭素環又は複数の環に縮合し、得られた縮合環システムは、選択的に、２個までの置換基で置換されており、該置換基は、以下、低級アルキル、低級シクロアルキル、ヒドロキシ低級アルキル、フェニル、置換されたフェニル（ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、カルボニル、ヒドロキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、ベンジルオキシ、選択的に置換されたピペリジノ、低級アルコキシカルボニル、および低級アルキルカルボニルアミノからなる群から独立して選択される１〜５個の置換基で置換された）、ベンジル、置換ベンジル（ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、カルボニル、ヒドロキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、ベンジルオキシ、選択的に置換されたピペリジノ、低級アルコキシカルボニル、および低級アルキルカルボニルアミノからなる群から独立して選択される１〜５個の置換基で置換された）、アミノカルボニルメチル、低級アルキルアミのカルボニルメチル、アミノ、モノ−又はジ−低級アルキルアミノ、環状アミノ、又はハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、および低級アルキルカルボニルアミノからなる群から選択された１〜２個の置換基で置換された、５−または６員の複素環から選択されたものである、前記環状アミン又は（ｂ）５−または６員環状イミド環を形成成し；
Ｒ^２は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、ＲＣ（Ｏ）Ｏ（Ｒは上記で定義されている）、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、トリ低級アルキルシリル、低級アルキルカルボニルオキシ、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルキルカルボニルオキシメチル、置換ビニル、１−ヒドロキシ−２−ニトロエチル、アルコキシカルボニルエチル、アミノカルボニル、アルキルカルボニル、アルキルカルボニルオキシメチル、ベンゾイルメチル、ベンジルカルボニルオキシメチル、または低級アルコキシメチルであり、
Ｒ^３は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、ＲＣ（Ｏ）Ｏ（Ｒは上記で定義の通り）シアノ、ニトロ、アミノ、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、ＣＨ_２ＮＲ^７Ｒ^８（Ｒ^７およびＲ^８の各々は、独立してＨ−，炭素数１〜６のアルキル、選択的に置換されているフェニル、ヒドロキシ低級アルキル、アミノ低級アルキル、またはモノ−ジアルキルアミノ低級アルキル、またはＲ^７およびＲ^８は−Ｎ−と一緒に、１個以下の窒素、酸素、硫黄原子を有し、選択的に他の一つ又は複数の炭素環に縮合している、飽和５−、６−、または７員環状アミン環を表す）、ＣＨ_２Ｒ^９（Ｒ^９は、低級アルコキシ、ＣＮ、アミノ低級アルコキシ、モノ−もしくはジ−低級アルキルアミノ低級アルコキシ、低級アルキルチオ、アミノ低級アルキルチオ、または、モノ−もしくはジ−低級アルキルアミの低級アルキルチオ）、又はＮＲ^１０Ｒ^１１（Ｒ^１０及びＲ^１１の各々は、独立して、水素、低級アルキル、フェニル、ヒドロキシ低級アルキル、又はアミノ低級アルキル、又はＲ^１０及びＲ^１１が−Ｎ−と一緒に１個以下の追加の窒素、酸素または硫黄原子を有し、選択的に、他の炭素環又は複数の環に縮合している５−、６−、７−員環状アミン環を表す）、ジアルキルアミノアルキル、低級アルキルカルボニルオキシ、低級アルキルカルボニルアミノであり；そして
Ｒ^４は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、ＲＣ（Ｏ）Ｏ（Ｒは上記で定義の通り）シアノ、ニトロ、アミノ、アミノ低級アルキル、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、カルバモイルオキシ、低級アルキルカルボニルオキシ、又は低級アルキルカルボニルアミノ、又はＲ^４はＲ^５と一緒にメチレンジオキシであり；
Ｒ^５は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、ＲＣ（Ｏ）Ｏ（Ｒは上記で定義の通り）シアノ、ニトロ、アミノ、アミノ低級アルキル、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、又は低級アルキルカルボニルアミノであり；そして
Ｒ^６は、水素、ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、ＲＣ（Ｏ）Ｏ（Ｒは上記で定義の通り）シアノ、ニトロ、アミノ、アミノ低級アルキル、ハロゲン化低級アルキル、ハロゲン化低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、ホルミル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシ、又は低級アルキルカルボニルアミノである。

ＰＥＧ−抱合リン脂質
本発明によれば、ＰＥＧ部分を含み、好ましくは約１，０００〜約２０，０００ダルトンの分子量を有し、リン脂質部分に抱合する、ＰＥＧ−抱合リン脂質は、ミセル形成両親媒性脂質として使用される。前記ＰＥＧ抱合前記リン脂質は、前記ＣＰＴ誘導体と混合され、ミセルを形成し、前記ＣＰＴ誘導体またはその薬学的に許容される前記誘導体の塩を安定化させる。好ましくは、前記ＰＥＧリン脂質抱合体のＰＥＧ部分は、約１，０００〜約１０，０００ダルトンの分子量を有する。より好ましくは、前記ＰＥＧリン脂質抱合体のＰＥＧ部分は、約２，０００〜約５，０００ダルトンの分子量を有する。前記ＰＥＧ部分は、直鎖、分枝（「デンドリマー」又は「スター」を含む）であり、アミノ、カルボキシル、アシル、スルホニル、または低級アルコキシ末端、例えばでメトキシルポリエチレングリコール（ｍＰＥＧ）で誘導体化され得る。ＰＥＧの異なるタイプの組合せも（例えば、分枝ＰＥＧと線状ＰＥＧと）使用される。

本明細書において使用されるＰＥＧ抱合型リン脂質の該リン脂質部分は、天然または合成されたリン脂質、例えば、ホスファチジルエタノールアミン（例えば、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＳＰＥ）、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ）、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、１−パルミトイル−２−オレイルホスファチジルエタノールアミン（ＰＯＰＥ）、およびジミリストイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＭＰＥ）；ホスファチジルコリン（例えば卵黄ホスファチジルコリン、大豆ホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）、およびジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）など）；ホスファチジルセリン；ホスファチジルイノシトール；スフィンゴリン脂質；水素添加リン脂質（例えば水素化ホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）；など；およびそれらの組み合わせを含む。本明細書において使用されるＰＥＧへの抱合用に特に好ましいリン脂質は、ＤＳＰＥ、ＤＰＰＥ、ＤＭＰＥ、ＤＯＰＥ、及びＰＯＰＥおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される。

一実施形態では、前記ＰＥＧ抱合型リン脂質は、ＰＥＧ−ＤＳＰＥ抱合体であり、好ましくは、１，２−ジステアロイル−ホスファチジルエタノールアミン−メチルポリエチレングリコール−２０００、（ｍＰＥＧ２０００−ＤＳＰＥ）等のメトキシルＰＥＧ−ＤＳＰＥである。ｍＰＥＧ２０００−ＤＳＰＥの化学構造を以下に示す。

医薬組成物
本発明の医薬組成物は、少なくとも一つのＣＰＴ誘導体または前記誘導体の薬理学的に許容される塩と；少なくとも一つのＰＥＧ−抱合リン脂質とを含む。前記疎水性カンプトテシン誘導体又は前記疎水性カンプトテシン誘導体の前記薬学的に許容される塩に対する前記ＰＥＧ抱合型リン脂質のモル比は、約０．４５：１より大きい。

ＣＰＴに対するリン脂質のモル比
ＣＰＴ誘導体に対するリン脂質のモル比は、前記医薬組成物中のＣＰＴ誘導体の安定性を向上させる上で重要な役割を果たす。好ましい実施形態では、前記ＰＥＧ抱合型リン脂質は、前記ＣＰＴ誘導体と、約０．４５：１（脂質：ＣＰＴ誘導体）より大きいモル比で混合される。さらにより好ましくは、ＣＰＴ誘導体に対する前記リン脂質のモル比は、約０．６０：１〜約１．００：１で，更に好ましくは、約０．７０：１〜約０．９０：１である。他の実施形態では、ＣＰＴ誘導体に対するリン脂質のモル比は、約０．７５対１より大きく、好ましくは、約０．７５：１〜約１．００：１である。前記リン脂質を前記ＣＰＴ誘導体と、本明細書に記述のモル比で混合することにより、このように形成されたミセルは、平均直径約４０ｎｍ未満、より特に約２０ｎｍ未満、さらにより特に約１５ｎｍを有する。

ｐＨ調節剤
本発明の医薬組成物は、好ましくは酸性である。ＴＬＣ３８８ＨＣ１ような本発明の特定のＣＰＴ誘導体は、アルカリ性環境で不安定である。好ましい実施形態において、本発明の前記医薬組成物は、ｐＨ約４．０未満を有する。より好ましい実施形態において、前記医薬組成物のｐＨは、約３〜約４の間である。前記医薬組成物は、酸性ｐＨを維持し、ＣＰＴ誘導体を安定化するのに、一種又はそれ以上のｐＨ調節剤を含む。前記ｐＨ調節剤は、任意の薬理学的に許容される、緩衝液であり得、以下：シュウ酸、エチレンジアミン四酢酸、マレイン酸、アスパラギン酸、リン酸塩、アスパラギン緩衝液、グリシン、ピルビン酸、ピロリン酸、マロン酸、フタル酸塩、フマル酸、酒石酸、クエン酸塩、フランカルボン酸、β−アラニン緩衝液、β：β‘−ジメチルグルタル酸、ギ酸、乳酸、γ−アミノ酪酸、バルビツール酸、安息香酸、コハク酸、Ｅε−アミノカプロン酸、酢酸、プロピオン酸、リンゴ酸、ピリジン、ヒスチジン、カコジル酸、炭酸、ヒドロキシイミダゾール、グリセロールリン酸、エチレンジアミン、イミダゾール、砒素酸、２，４，６−コリジン、１−、２−、又は４−メチルイミダゾール、Ｎ−エチルモルホリン、ベロナール、バルビタール、２，４−ジメチルイミダゾール、モルホリン、Ｎ−エチルモルホリン、２−アミノ−２−メチル−１，３−プロパンジオール、２−アミノ−２−エチル−１，３−プロパンジオール、ジエタノールアミン、４−アミノピリジン、セリン、ホウ酸、アンモニア、エタノールアミン、エフェドリン、ヒドロキシプロリン、２−アミノ−２−メチル−１−プロパノール、ロイシン、トリメチルα−アラニン、ｎ−プロピルアミン、メチルアミン、エチルアミン、ｎ−ブチルアミン、トリエチルアミン、ジメチルアミン、ヘキサメチレンジアミン、ピペリジン、ｐ−トルエンスルホン酸、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（トリス）、グリシルグリシン、ＧＴＡ緩衝液、グッド（Ｇｏｏｄ）緩衝液、例えばＭＥＳ緩衝液、ビス−トリス緩衝液、ＡＤＡ緩衝液、ＰＩＰＥＳ緩衝液、ＡＣＥＳ緩衝液、ＭＯＰＳＯ緩衝液、ＢＥＳ緩衝液、ＭＯＰＳ緩衝液、ＴＥＳ緩衝液、ＨＥＰＥＳ緩衝液、ＤＩＰＳＯ緩衝液、ＴＡＰＳＯ緩衝液、ＰＯＰＳＯ緩衝液、ＨＥＰＰＳＯ緩衝液、ＥＰＰＳ緩衝液、トリシン緩衝液、ビシン（Ｂｉｃｉｎｅ）緩衝液、ＴＡＰＳ緩衝液、ＣＨＥＳ緩衝液、ＣＡＰＳＯ緩衝液、及びＣＡＰＳ緩衝液の一つ又はそれ以上を含む。好ましくは、前記ｐＨ調節剤は、一つ又はそれ以上の以下：クエン酸塩、フマル酸、ジエタノールアミン、トリス（Ｔｒｉｓ）、グリシン、酢酸、コハク酸、酒石酸、炭酸、イミダゾール、及びマレイン酸を含む。

本発明の医薬組成物は、さらに、マンニトール、グリセリン、ブドウ糖、ショ糖、および／またはトレハロースなどの少なくとも１種の凍結保護剤を含む。一つの好ましい凍結保護剤はマンニトールである。

いくつかの実施形態において、本発明はまた、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤、希釈剤、ビヒクル、前記活性成分用の媒体、またはこれらの組み合わせを含む医薬組成物を提供する。

一実施形態において、前記医薬組成物は、ＴＬＣ３８８ ＨＣ１またはＴＬＣ３８８ ＨＣＬの薬学的に許容される塩と、メトキシルＰＥＧ−ＤＳＰＥ抱合体と、クエン酸とを含んでいて、前記メトキシルＰＥＧ抱合型リン脂質は、ＴＬＣ３８８ＨＣ１またはＴＬＣ３８８ ＨＣＬの薬学的に許容される塩と、モル比約０．４５：１〜約０．９：１で混合される。

ミセルを調製する方法は、例えば、メタノール−蒸発法及び共沈法など、当該技術分野で知られている。前記メタノール蒸発法において、適切なモル比で前記ＣＰＴ誘導体と、ＰＥＧリン脂質抱合体とを、本明細書に記載されるように、メタノールに溶解する。次いで、前記混合物を適切な緩衝液と混合し、前記メタノールを真空蒸発で、またはその逆にして除去する；そして混合物は、選択的に滅菌および／または凍結乾燥される。前記共沈法では、適切なモル比で前記ＣＰＴ誘導体と、ＰＥＧリン脂質抱合体とを、本明細書に記載されるように、適切な有機溶媒に溶解し、次いで、該混合物は、貧溶媒に注入し、沈殿物を形成し、前記有機溶媒を真空乾燥により除去する。このようにして得られた粉末は、適切な緩衝液に溶解し、得られた水性溶液は、選択的に濾過して滅菌され、および／または凍結乾燥される。前記調製の詳細は以下の実施例に記載されている。

本発明の医薬組成物は、癌疾患を患う被験者の癌細胞を阻害する方法で使用する。本発明の医薬組成物は、癌細胞を阻害し、正常な組織または細胞、特に骨髄細胞に対する毒性を減少させることが見出されている。

癌細胞を阻害し、癌を治療する方法
本発明の別の態様は、被験者の癌細胞の増殖を阻害または遅延させる方法であって、被験者に本明細書に記載の医薬組成物の有効量を投与することを含み、それによって被験者における当該癌の症状および徴候が低減される方法に向けられる。前記方法は、選択的に、電離放射線、従来の化学療法又は標的癌治療のような１つ又はそれ以上の抗がん剤に被験者の癌細胞を暴露する工程を含む。

前記医薬組成物は、選択された投与様式に適した任意の形態に構成される。好ましくは、前記医薬組成物は、静脈内、筋肉内、皮下および腹腔内注射などの非経口投与用に調剤する。例えば、本発明の医薬組成物は、凍結乾燥粉末の形態であって、更に、注射用に、滅菌水、生理食塩水又は他の適切な流体等の水溶液中に希釈又は再構成する。他の医学的に許容される投与の経路は、経口、経皮、直腸または吸入等を含む。

前記医薬組成物または本発明の化合物の投与量は、実施形態に従って、当業者によって決定することができる。単位用量または複数用量形態が企図され、それぞれが特定の臨床的状況において利点を提供する。本発明によれば、投与される化合物または医薬組成物の実際の量は、治療中の被験者の年齢、体重、状態および他の併存疾患に応じて変え得、医療専門家の裁量に依存する。

一実施形態では、本発明の方法は、前記医薬組成物を、電離放射線、例えば、ＥＧＦＲ（上皮成長因子受容体）及びＶＥＧＦ（血管内皮増殖因子）拮抗薬等の標的癌療法、又は従来の化学療法などの１つまたはそれ以上の抗癌剤と共に同時投与することを含む。

従来の化学療法の例は、アントラサイクリン抗生物質、ＤＮＡ合成阻害剤、アルキル化剤、抗葉酸剤は、代謝阻害剤等を含むが、これらに限定されない。

アントラサイクリン系抗生物質の例は、ドキソルビシン（ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）、エピルビシン（Ｅｐｉｒｕｂｉｃｉｎ）、ミトキサントロン（Ｍｉｔｏｘａｎｔｈｒｏｎｅ）などを含むが、これらに限定されない。

ＤＮＡ合成阻害剤の例は、マイトマイシン（ｍｉｔｏｍｙｃｉｎ）Ｃ，５−ＦＵ（５−フルオロウラシル）、カペシタビン（ｃａｐｅｃｉｔａｂｉｎｅ）、イリノテカン（ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ）塩酸塩、チミタック（ｔｈｙｍｉｔａｑ）等を含むが、これらに限定されない。

アルキル化剤の例は、シスプラチン（ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）、カルボプラチン（ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ）、オキサリプラチン（ｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎ）、ミトキサントロン（ｍｉｔｏｘａｎｔｒｏｎｅ）などを含むが、これらに限定されない。

代謝阻害剤の例は、エトポシド（ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ）、ロットレリン（ｒｏｔｔｌｅｒｉｎ）などを含むが、これらに限定されない。

葉酸拮抗薬の例は、ノラトレキシド（Ｎｏｌａｔｒｅｘｅｄ）などを含むが、これらに限定されない。

下記の実施例は、更に本発明を説明する。これらの実施例は単に本発明を例示することを意図しており、限定するものとして解釈されるべきではない。

カンプトテシン誘導体の医薬組成物の調製
１．１カンプトテシン誘導体
次の式を有するＴＬＣ３８８ベースを使用して前記医薬組成物を調製した。

前記ＴＬＣ３８８ベースの化学名は、（Ｓ）−１０−［（ジメチルアミノ）メチル］−４−エチル−９−ヒドロキシ−４−Ｏ−［（±）−２−（２’’，４’’，５’’，７’’−テトラニトロ−９’’−フルオレニリデンアミノオキシ）プロピオニル］−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４−（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン（（Ｓ）−１０−［（ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｍｅｔｈｙｌ］−４−ｅｔｈｙｌ−９−ｈｙｄｒｏｘｙ−４−Ｏ−［（±）−２−（２’’，４’’，５’’，７’’−ｔｅｔｒａｎｉｔｒｏ−９’’−ｆｌｕｏｒｅｎｙｌｉｄｅｎｅａｍｉｎｏｏｘｙ）ｐｒｏｐｉｏｎｙｌ］−１Ｈ−ｐｙｒａｎｏ［３’，４’：６，７］ｉｎｄｏｌｉｚｉｎｏ［１，２−ｂ］ｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−３，１４−（４Ｈ，１２Ｈ）−ｄｉｏｎｅ）である。ＴＬＣ３８８ベースは、その固定分子量８５０．７のために前記医薬組成物を調製するのに使用した。これでモルによるＣＰＴ誘導体の正確な定量化が可能になった。

次式を有するＴＬＣ１９８８ ＨＣｌを使用して、ＣＭ１９０１及び１９０３医薬組成物を調製した。

ＴＬＣ１９８８ ＨＣｌの化学名は、（Ｓ）−１０−［（ジメチルアミノ）メチル］−４−エチル−９−ヒドロキシ−４−Ｏ−［２−メチル−２−（２’’，４’’，５’’，７’’−テトラニトロ−９’’−フルオレニリデンアミノオキシ）プロピオニル］−１Ｈ−ピラノ［３’，４’：６，７］ｉインドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４−（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン，１塩酸塩（（Ｓ）−１０−［（ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）ｍｅｔｈｙｌ］−４−ｅｔｈｙｌ−９−ｈｙｄｒｏｘｙ−４−Ｏ−［２−ｍｅｔｈｙｌ−２−（２’’，４’’，５’’，７’’−ｔｅｔｒａｎｉｔｒｏ−９’’−ｆｌｕｏｒｅｎｙｌｉｄｅｎｅａｍｉｎｏｏｘｙ）ｐｒｏｐｉｏｎｙｌ］−１Ｈ−ｐｙｒａｎｏ［３’，４’：６，７］ｉｎｄｏｌｉｚｉｎｏ［１，２−ｂ］ｑｕｉｎｏｌｉｎｅ−３，１４−（４Ｈ，１２Ｈ）−ｄｉｏｎｅ，ｍｏｎｏｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）である。

１．２メタノール−蒸発法
前記医薬組成物は、以下に示すように、メタノール−蒸発法により調製した。
１．種々のモル比でＴＬＣ３８８ベース（又はＴＬＣ１９８８ＨＣｌ）と、ｍＰＥＧ２０００−ＤＳＰＥとを、表１に示すようにメタノールに溶解した；
２．工程１の混合物を１：１の体積比で、マンニトールと、酒石酸とを含有する緩衝液と混合した；
３．工程２の混合物中のメタノールを、５０〜５５℃の水浴でローターボトルを（１１〜２１ｃｍＨｇ圧）を用いて、少なくとも３０分間真空蒸発によって除去した。
４．工程３の混合物は、０．２２μｍの膜を使用して滅菌濾過し、次いでその後の分析用に凍結乾燥した。

別の経路は、次の順序で行われた。
１．種々のモル比でＴＬＣ３８８ベース（又はＴＬＣ１９８８ ＨＣｌ）と、ｍＰＥＧ２０００−ＤＳＰＥとを、メタノールに溶解した；
２．工程１の混合物中のメタノールを、５０〜５５℃の水浴でローターボトルを（１１〜２１ｃｍＨｇ圧）を用いて、少なくとも３０分間真空蒸発によって除去した；
３．工程２の混合物を１：１の体積比で、マンニトールと酒石酸とを含有する緩衝液と混合した；
４．工程３の混合物は、０．２２μｍの膜を使用して滅菌濾過し、次いでその後の分析用に凍結乾燥した。
１．３共沈法
前記医薬組成物は、以下に示すように、共沈法により調製した。
１Ａ．種々のモル比でＴＬＣ３８８ベースとｍＰＥＧ２０００−ＤＳＰＥとを、メタノールなどの適切な有機溶媒に溶解した；
２Ａ．工程１Ａの混合物を、貧溶媒中に注入して，沈殿を形成した；
３Ａ．工程２Ａの混合物は、濾過および真空乾燥し、溶媒を除去し、中間体粉末を形成した；
４Ａ．工程３Ａの中間体粉末は、マンニトールおよびクエン酸を含む緩衝液に溶解した；
５Ａ．工程４Ａの混合物を無菌ろ過し、次いで凍結乾燥した。

前記医薬組成物の溶解度
本発明の医薬組成物の溶解度は、前記ミセルの粒径とその分布の点で評価した。

リン脂質対ＣＰＴ誘導体の種々のモル比の前記医薬組成物の評価を行った。試験の結果を表１に要約する。

前記医薬組成物のミセル粒径（流体力学的直径）は、ＺｅｔａｓｉｚｅｒＮＡＮＯ−ＺＳ９０（Ｍａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社）を、Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ Ｓｏｆｔｗａｒｅ６．２０と共に使用して、動的光散乱（ｄｉｎａｍｉｃ ｌｉｇｈｔ ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ，ＤＬＳ）により測定した。前記医薬組成物は、通常の生理食塩水で，室温において５０〜２００ｋｃｐｓの計数率を提供する濃度に希釈された。Ｚ−平均直径は、３回の測定から得た。

表１の結果は、ミセル粒径４０ｎｍ未満を得るには、リン脂質対ＣＰＴ誘導体の最低モル比は、約０．４５より大きいことを示す。

また、ＴＬＣ１９８８ ＨＣｌの水溶解度は，ｍＰＥＧ２０００−ＤＳＰＥ製剤で１０ｍｇ／ｍＬに増加した。

種々のリン脂質対ＣＰＴ誘導体モル比の前記医薬組成物の粒径分布の評価を行った。その結果を図１及び図２に示す。

図１は、前記ＣＭ３１５組成物の粒径分布グラフである。前記ＣＭ３１５組成物のミセル粒径は、４０ｎｍ未満であり、前記粒径分布グラフは、ＣＭ３１５組成物が、約１５ｎｍに一つの主要なピークを持つ、狭い粒径分布を有することを示す。

図２は、前記ＣＭ３１６組成物の粒径分布グラフである。前記ＣＭ３１６組成物のミセルの粒径は４０ｎｍを超えており、前記粒径分布グラフは、複数のピークを有する広い粒径分布を示す。主要ピークは、２００ｎｍより大きい所にある。

これらの結果は、リン脂質対ＣＰＴ誘導体のモル比が約０．４５より大きい、医薬組成物は、ミセル粒径４０ｎｍ未満及び狭い粒径分布を有することを示す。

安定性に対するｐＨ調整剤及びｐＨの影響
ＴＬＣ３８８ ＨＣｌおよびＴＬＣ１９８８ ＨＣｌはアルカリ条件で不安定であることが知られている。種々のｐＨ調節剤及びｐＨの評価を行い、前記医薬組成物にとって適切なｐＨ範囲およびｐＨ調整剤を決定した。

酒石酸またはクエン酸を前記医薬組成物に添加し、該混合物を２週間、４０℃でインキュベートした。インキュベーション２週間後の医薬組成物の安定性を、表２〜４に要約する。

この結果は、本発明の医薬組成物に適したｐＨ範囲は、ｐＨ約４．０未満であることを示す。また、クエン酸および酒石酸は、本発明の医薬組成物に適したｐＨ調整剤である。

細胞毒性アッセイ
４．１ 細胞株および培養条件
ヒト肝癌細胞株Ｈｅｐ３Ｂ、ＨｅｐＧ２、ＨｅｐＧ２／２．２．１５、Ｈｕｈ−７およびＳＫ−ＨＥＰ−１、ヒト神経膠芽腫細胞株ＲＧ−２、およびヒト前立腺癌細胞株ＤＵ１４５は、ＤＭＥＭ（米国ユタ州Ｌｏｇａｎ，ＨｙＣｌｏｎｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）中に維持した。ヒト前立腺癌細胞株ＬＮＣａＰは、ＲＰＭＩ−１６４０培地（米国ミズーリ州Ｓｔ，Ｌｏｕｉｓ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社）中に維持した。培養培地は、１０％熱不活性ウシ胎児血清（米国ユタ州Ｌｏｇａｎ，ＨｙＣｌｏｎｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、１％ペニシリン／ストレプトマイシン（米国カリフォルニア州、Ｃａｒｌｓｂａｄ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）、１ｍＭピルビン酸ナトリウム（米国ユタ州Ｌｏｇａｎ，ＨｙＣｌｏｎｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）及び１ｍＭＬ−グルタミン（米国ユタ州Ｌｏｇａｎ，ＨｙＣｌｏｎｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）で補充した。ヒト前立腺癌細胞株ＰＣ−３は、ＨａｍのＦ−１２Ｋ培地（米国カリフォルニア州Ｃａｒｌｓｂａｄ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）中に、前記培養培地中に記載したのと同じ培地サプリメントを用いて維持したが、但し前記ウシ胎児血清濃度は、７容量％に減少した。癌細胞は、５％ＣＯ_２含有加湿インキュベーター（米国、Ｎｕａｉｒｅ社）中、３７℃に維持した。

４．２ スルホローダミンＢアッセイ（Ｓｕｌｆｏｒｈｏｄａｍｉｎｅ Ｂ，ＳＲＢ）アッセイ
該ＳＲＢアッセイは、癌細胞の生存率を測定するために使用された。プレート・ウェル中の癌細胞は、１×ＰＢＳ（リン酸緩衝食塩水）でリンスし、１×トリプシン−ＥＤＴＡ（米国カリフォルニア州、Ｃａｒｌｓｂａｄ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）で処理した。前記培地を添加して前記トリプシン−ＥＤＴＡを希釈した。該剥離癌細胞を遠心分離により採集し、１ｍｌの培養培地に懸濁した。細胞懸濁液１０μｌを計数室に分注し、該細胞密度を、顕微鏡で決定した。懸濁液１９８μｌ中の細胞を、ウェル当たり適切な細胞密度で、９６ウェル細胞プレート（ニューヨーク州Ｒｏｃｈｓｔｅｒ，Ｎｕｎｃ社）上に播種し、一昼夜、細胞培養インキュベーター中でインキュベートした。

４．３テスト組成
我々は、以下のＣＰＴ誘導体医薬組成物の抗癌活性を評価した。
１．非水溶性ＣＰＴ誘導体である、ＴＬＣ３８８ ＨＣｌ（台湾、Ｓｃｉｎｏ−Ｐｈａｒｍ Ｔａｉｗａｎ Ｌｔｄから入手した）；
２．水溶性ＣＰＴ誘導体である、トポテカンは、陽性対照として使用される（中国 Ｗｕｈａｎ Ｙｕａｎｃｈｅｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｃｏ．，Ｌｔｄ，から市販）；及び、
３．リポテカン（登録商標）（表１のＣＭ３８２組成物は、ＰＥＧ抱合型リン脂質およびＣＰＴ誘導体をモル比０．７で含む）。

ＴＬＣ３８８ ＨＣｌおよびトポテカンは、ＤＭＳＯ（米国ミズーリ州Ｓｔ，Ｌｏｕｉｓ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社）に溶解し、クエン酸５ｍＭ（米国ニュージャージー州、Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ社）で所望の濃度に希釈した。リポテカン（登録商標）は、無菌のｄｄＨ_２Ｏに溶解し、クエン酸５ｍＭで所望の濃度に希釈した。

中間プレートは、薬剤の希釈用に設定した。クエン酸５ｍＭを遊離ＴＬＣ３８８ＨＣｌおよびトポテカン希釈用に使用し、ｄｄＨ_２Ｏをリポテカン（登録商標）希釈用に使用した。次いで前記細胞に、遊離ＴＬＣ３８８ ＨＣｌまたはリポテカン（登録商標）２μｌを、以下の濃度：０、０．０００８、０．００３、０．０１２、０．０４９、０．１９５、０．７８１、３．１２５、１２．５および５０μモル／ｍｌで加えた。各濃度は、３重反復で試験し、癌細胞と共に、２４時間、４８時間および７２時間３７℃でインキュベートした。ＤＭＳＯの最高濃度は、この試験では０．０５％であった。

インキュベーション期間の終わりに、冷５０％ＴＣＡ（ｗ／ｖ）（米国ミズーリ州Ｓｔ，Ｌｏｕｉｓ、Ｓｉｇｍａ社）を５０μｌ添加し、１０％ＴＣＡの最終濃度にすることにより細胞は固定され、さらに、４℃で６０分間インキュベートした。上清を廃棄し、前記プレートを滅菌水で５回洗浄し、空気乾燥した。スルホローダミンＢの１％酢酸（ドイツＳｅｅｌｚｅ、Ｆｌｕｋａ社）中０．４％（ｗ／ｖ）溶液（ＳＲＢ、米国ミズーリ州Ｓｔ，Ｌｏｕｉｓ、Ｓｉｇｍａ社）１００μｌを、続いて各ウェルに添加し、室温で３０分間、インキュベートした。染色後、未結合の色素を、１％酢酸で除去し、前記プレートを再度風乾した。各ウェルの結合ステインを１０ｍＭトリズマ塩基（カナダオンタリオ州Ｂｕｒｌｉｎｇｔｏｎ、Ｂｉｏｓｈｏｐ社）１００μｌで可溶化し、該吸光度を５４０ｎｍで自動化プレートリーダー（Ａｎｔｈｏｓ２００１、Ａｎｔｈｏｓ Ｌａｂｔｅｃ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ）を用いて測定した。

４．３ データ解析
前記グラフとデータは、ＳｉｇｍａＰｌｏｔ１０．０ソフトウェアおよびＭｉｃｒｏｓｏｆｔ（登録商標） Ｅｘｃｅｌ ２００２により分析した。

４．４ 結果
表５、表６は、リポテカン（登録商標）、ＴＬＣ３８８ ＨＣｌ及びトポテカンの５０％阻害濃度（ＩＣ_５０）値及び増強係数（ＩＣ_{５０ＴＬＣ３８８ ＨＣｌ}／ＩＣ５０_{リポテカン（登録商標）}）を示す。

表５、表６に示すように、リポテカン（登録商標）は、ＴＬＣ３８８塩酸よりも肝細胞癌、前立腺癌および神経膠腫の癌細胞を阻害するのに効果的である。更に、リポテカン（登録商標）は大腸癌細胞を阻害するのに有効である。

骨髄抑制の評価
ヒト骨髄細胞に対する前記医薬組成物の効果のインビトロ評価を行った。

プロトコル：赤血球系（ＣＦＵ−Ｅ、ＢＦＵ−Ｅ）と、顆粒球−単球（ＣＦＵ−ＧＭ）と、多分化能系列（ＣＦＵ−ＧＥＭＭ）のクローン原性前駆体は、組換えｒｈＳＣＦ（５０ｎｇ／ｍＬ）、ｒｈＩＬ−３（１０ｎｇ／ｍＬ、ｒｈＧＭ−ＣＳＦ（１０ｎｇ／ｍＬ）、及びｒｈＥｐｏ（３Ｕ／ｍＬ）を含むメチルセルロース系培地（Ｒ&Ｄ Ｓｙｓｔｅｍ社）に設定された。

ＴＬＣ３８８ＨＣｌおよびトポテカンをＤＭＳＯで希釈し、リポテカン（登録商標）を、滅菌水で希釈して、適切な作業ストック濃度を提供した。これらの作業ストック溶液は、次いで、上述のメチルセルロース系コロニー・アッセイ培地に添加した。コロニー・アッセイ培地は、培養培地あたり２×１０^４個の細胞で３重反復に設置された。

同型培養培地は、５％ＣＯ^２中３７℃で１４〜１６日間、インキュベートした。この後で、培養培地中で得られたコロニーは、粒径および形態に関して研究主幹による評価を受けた。

図３はＴＬＣ３８８ＨＣｌ、トポテカンおよびリポテカン（登録商標）（ＴＬＣ３８８ＨＣｌ組成物）のヒト赤血球前駆細胞および骨髄前駆細胞に対する毒性を示す。遊離ＴＬＣ３８８ＨＣｌのＩＣ_５０値は、赤芽球コロニー形成細胞（ＣＦＣ類）では、９．３ｎＭであり、骨髄ＣＦＣ類では９．８ｎｍであった。トポテカンのＩＣ_５０値は、赤血球ＣＦＣ類では１１．８ｎＭであり、骨髄ＣＦＣ類では８．７ｎｍであった。リポテカン（登録商標）のＩＣ_５０値は、赤血球ＣＦＣ類で１２．５ｎＭであり、骨髄ＣＦＣ類で１１．５ｎｍであった。この結果は、ヒト赤血球前駆細胞および骨髄前駆細胞に対するリポテカン（登録商標）の毒性作用が遊離ＴＬＣ３８８ＨＣｌおよびトポテカンよりも低かったことを示す。

このデータは、本発明の組成物である、リポテカン（登録商標）が、肝癌、前立腺癌および神経膠腫細胞株などの種々の癌細胞株に対する抗がん効果が増加し、赤血球および骨髄ＣＦＣ類などの骨髄細胞に対する毒性が低いことを示す。

本明細書において、範囲が分子量などの物理的特性、又は化学式などの化学的特性のために使用される場合、その中の特定の実施形態のすべての組み合わせ及び副組合せが含まれることを意図する。

当業者は、多くの変更および修正が、本発明の好ましい実施形態に対してなされ得、そのような変更および修正が本発明の精神から逸脱することなくなされ得ることを理解するであろう。したがって、添付の特許請求の範囲は、本発明の真の精神および範囲内に入るような全ての等価な変更を包含することが意図される。

Claims (17)

1. 複数のミセルであって、前記ミセルの各々は医薬組成物を有し、前記医薬組成物は、
   少なくとも１つの疎水性カンプトテシン誘導体または前記誘導体の薬学的に許容される塩と、
   少なくとも１つのポリエチレングリコール（ＰＥＧ）抱合型リン脂質とを有し、
   前記疎水性カンプトテシン誘導体または前記疎水性カンプトテシン誘導体の薬学的に許容される塩に対する前記ＰＥＧ抱合型リン脂質のモル比が、０．４５：１〜１．５：１であり、
   前記疎水性カンプトテシン誘導体は、ＴＬＣ３８８ＨＣｌ、ＴＬＣ１９８８ＨＣｌ、及びそれらの混合物からなる群から選択される、ミセル。
2. 請求項１記載の複数のミセルであって、さらに、少なくとも１つのｐＨ調整剤を有する、ミセル。
3. 請求項２記載の複数のミセルにおいて、前記ｐＨ調整剤は酒石酸である、ミセル。
4. 請求項２記載の複数のミセルにおいて、前記ｐＨ調整剤はクエン酸である、ミセル。
5. 請求項１記載の複数のミセルであって、さらに、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤または担体を有する、ミセル。
6. 請求項１〜５のいずれか記載の複数のミセルにおいて、前記疎水性カンプトテシン誘導体または前記疎水性カンプトテシン誘導体の前記薬学的に許容される塩に対する前記ＰＥＧ抱合型リン脂質のモル比は約０．６０：１〜約１．００：１である、ミセル。
7. 請求項１〜５のいずれか記載の複数のミセルにおいて、前記疎水性カンプトテシン誘導体または前記疎水性カンプトテシン誘導体の前記薬学的に許容される塩に対する前記ＰＥＧ抱合型リン脂質のモル比は約０．７０：１〜約０．９０：１である、ミセル。
8. 請求項１〜５のいずれか記載の複数のミセルにおいて、前記医薬組成物は、約４未満のｐＨを有するものである、ミセル。
9. 請求項１〜５のいずれか記載の複数のミセルにおいて、前記ＰＥＧ抱合型リン脂質は、リン脂質部分に抱合した約１，０００〜約２０，０００ダルトンの分子量を有するＰＥＧ部分を有するものである、ミセル。
10. 請求項１〜９のいずれか記載の複数のミセルにおいて、前記ＰＥＧ抱合型リン脂質はＰＥＧ−ＤＳＰＥ抱合体である、ミセル。
11. 請求項１０記載の複数のミセルにおいて、前記ＰＥＧ−ＤＳＰＥ抱合体はメトキシルＰＥＧ−ＤＳＰＥ抱合体である、ミセル。
12. 請求項１〜１０のいずれか記載の複数のミセルにおいて、前記ミセルは約４０ｎｍ未満の粒径を有するものである、ミセル。
13. 請求項１記載の複数のミセルにおいて、前記医薬組成物は、
    ＴＬＣ３８８ＨＣｌ、またはＴＬＣ３８８ＨＣｌの薬学的に許容される塩から成る群から選択される少なくとも１つの化合物と、
    メトキシルＰＥＧ−ＤＳＰＥ抱合体と、
    クエン酸とを有し、
    前記ＴＬＣ３８８ＨＣｌ、またはＴＬＣ３８８ＨＣｌの薬学的に許容される塩に対する前記メトキシルＰＥＧ抱合型リン脂質のモル比は、約０．４５：１〜約０．９：１である、ミセル。
14. 請求項１〜１３のいずれか記載の複数のミセルであって、さらに、１またはそれ以上の抗癌剤を有する、ミセル。
15. 請求項１４記載の複数のミセルにおいて、前記抗癌剤は電離放射線源である、ミセル。
16. 請求項１４記載の複数のミセルにおいて、前記抗癌剤はアントラサイクリン抗生物質、ＤＮＡ合成阻害剤、アルキル化剤、抗葉酸剤、または代謝阻害剤である、ミセル。
17. 請求項１４記載の複数のミセルにおいて、前記抗癌剤は標的癌療法に用いる抗癌剤である、ミセル。

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