JP5764860B2 - タンパク質の同定装置、同定方法並びに同定プログラム及びこれを記録したコンピュータ読み取り可能な記録媒体 - Google Patents
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Description
流速:200nL/min
トラップカラム:0.15mmφ×50mm(KYA Technologies社製 HiQ sil C18W−3)
分離カラム:0.2×50mm(AMR社製 HaloC18 CP3/91−160−00)
溶離液A:0.1%ギ酸,1%アセトニトリル
溶離液B:0.1%ギ酸,99%アセトニトリル
グラジエント[%B(Time)]:2(0)→50(60min)→100(60.1min)→100(70min)→2(70.1min)→2(80min)
イオン化タイプ:Nano−ESI(positive)
機器設定:Trap−Standard
スプレー電位:1700V
カウンターガス流量:0.6L/min
配列ESSSHHP*GIAEFPSR
修飾部位 P*
修飾部の分子量 16Da
配列TFP*GFFSPMLGEFVSETESR
修飾部位 P*
修飾部の分子量 16Da
Claims (13)
- 被検タンパク質に対してタンデム質量分析を行う第1の質量分析手段と、
前記第1の質量分析手段により得られた親イオン(MS1)のタンデムマス(MS2)のフラグメントのうち修飾部位を含まない非修飾ペプチドイオンに対して更に質量分析を行う第2の質量分析手段と、
前記第2の質量分析手段により得られたタンデムマス(MS3)のフラグメント情報に基づいて前記親イオン(MS1)のペプチド配列を決定する親ペプチド配列決定手段と、
前記親ペプチド配列決定手段により得られた親ペプチド配列に基づいて前記親イオン(MS1)及びタンデムマス(MS2)の情報から前記親イオン(MS1)の修飾部位及び修飾部分の分子量を決定する修飾情報決定手段と、
を有することを特徴とする、タンパク質の同定装置。 - 前記第2の質量分析手段により得られたタンデムマス(MS3)のフラグメントのペプチドイオンの質量がタンパク配列データベースに記憶された既知のタンパク配列の部分配列質量の何れと一致するかを判別することにより前記タンデムマス(MS3)のフラグメントのペプチドイオンを同定するペプチド同定手段と、
前記ペプチド同定手段に基づいて前記非修飾ペプチドイオンのペプチド配列を決定する非修飾ペプチド配列決定手段と、
を更に有し、
前記親ペプチド配列決定手段は、前記非修飾ペプチド配列決定手段により決定した前記非修飾ペプチドイオンのペプチド配列に基づいて前記親イオン(MS1)のペプチド配列を決定するものである、請求項1に記載のタンパク質の同定装置。 - 前記ペプチド同定手段による前記ペプチドイオンの同定結果に基づいて前記親イオン(MS1)及びタンデムマス(MS2及びMS3)の全てのデータを用いてスコアリングを行うスコアリング手段を更に有することを特徴とする、請求項2に記載のタンパク質の同定装置。
- 前記第2の質量分析手段により得られたフラグメントに対して更に1回又は複数回の質量分析を行う第3の質量分析手段を更に有する、請求項1〜3の何れか1項に記載のタンパク質の同定装置。
- 被検タンパク質に対してタンデム質量分析を行う第1の質量分析ステップと、
前記第1の質量分析ステップにより得られた親イオン(MS1)のタンデムマス(MS2)のフラグメントのうち修飾部位を含まない非修飾ペプチドイオンに対して更に質量分析を行う第2の質量分析ステップと、
前記第2の質量分析ステップにより得られたタンデムマス(MS3)のフラグメント情報に基づいて前記親イオン(MS1)のペプチド配列を決定する親ペプチド配列決定ステップと、
前記親ペプチド配列決定ステップにより得られた親ペプチド配列に基づいて前記親イオン(MS1)及びタンデムマス(MS2)の情報から前記親イオン(MS1)の修飾部位及び修飾部分の分子量を決定する修飾情報決定ステップと、
を有することを特徴とする、タンパク質の同定方法。 - 前記第2の質量分析ステップにより得られたタンデムマス(MS3)のフラグメントのペプチドイオンの質量がタンパク配列データベースに記憶された既知のタンパク配列の部分配列質量の何れと一致するかを判別することにより前記タンデムマス(MS3)のフラグメントのペプチドイオンを同定するペプチド同定ステップと、
前記ペプチド同定ステップに基づいて前記非修飾ペプチドイオンのペプチド配列を決定する非修飾ペプチド配列決定ステップと、
を更に有し、
前記親ペプチド配列決定ステップは、前記非修飾ペプチド配列決定ステップにより決定した前記非修飾ペプチドイオンのペプチド配列に基づいて前記親イオン(MS1)のペプチド配列を決定するものである、請求項5に記載のタンパク質の同定方法。 - 前記ペプチド同定ステップによる前記ペプチドイオンの同定結果に基づいて前記親イオン(MS1)及びタンデムマス(MS2及びMS3)の全てのデータを用いてスコアリングを行うスコアリングステップを更に有することを特徴とする、請求項6に記載のタンパク質の同定方法。
- 前記第2の質量分析ステップにより得られたフラグメントに対して更に1回又は複数回の質量分析を行う第3の質量分析ステップを更に有する、請求項5〜7の何れか1項に記載のタンパク質の同定方法。
- 被検タンパク質に対してタンデム質量分析を行う第1の質量分析ステップと、
前記第1の質量分析ステップにより得られた親イオン(MS1)のタンデムマス(MS2)のフラグメントのうち修飾部位を含まない非修飾ペプチドイオンに対して更に質量分析を行う第2の質量分析ステップと、
前記第2の質量分析ステップにより得られたタンデムマス(MS3)のフラグメント情報に基づいて前記親イオン(MS1)のペプチド配列を決定する親ペプチド配列決定ステップと、
前記親ペプチド配列決定ステップにより得られた親ペプチド配列に基づいて前記親イオン(MS1)及びタンデムマス(MS2)の情報から前記親イオン(MS1)の修飾部位及び修飾部分の分子量を決定する修飾情報決定ステップと、
をコンピュータに実行させることを特徴とするタンパク質の同定プログラム。 - 前記第2の質量分析ステップにより得られたタンデムマス(MS3)のフラグメントのペプチドイオンの質量がタンパク配列データベースに記憶された既知のタンパク配列の部分配列質量の何れと一致するかを判別することにより前記タンデムマス(MS3)のフラグメントのペプチドイオンを同定するペプチド同定ステップと、
前記ペプチド同定ステップに基づいて前記非修飾ペプチドイオンのペプチド配列を決定する非修飾ペプチド配列決定ステップと、
を更に有し、
前記親ペプチド配列決定ステップは、前記非修飾ペプチド配列決定ステップにより決定した前記非修飾ペプチドイオンのペプチド配列に基づいて前記親イオン(MS1)のペプチド配列を決定するものである、請求項9に記載のタンパク質の同定プログラム。 - 前記ペプチド同定ステップによる前記ペプチドイオンの同定結果に基づいて前記親イオン(MS1)及びタンデムマス(MS2及びMS3)の全てのデータを用いてスコアリングを行うスコアリングステップを更に有することを特徴とする、請求項10に記載のタンパク質の同定プログラム。
- 前記第2の質量分析ステップにより得られたフラグメントに対して更に1回又は複数回の質量分析を行う第3の質量分析ステップを更に有する、請求項9〜11の何れか1項に記載のタンパク質の同定プログラム。
- 請求項9〜12のいずれか1項に記載のタンパク質の同定プログラムを記録したコンピュータ読み取り可能な記録媒体。
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