JP5710224B2 - 皮膚外用剤又は化粧料 - Google Patents
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Description
一方、クマツヅラ科の化粧料への応用に関しては、クマツヅラ科植物の抽出物を含有する頭部化粧料(特許文献3参照)や、クマツヅラ科クマツヅラ属植物の抽出物からなる毛乳頭活性化剤(特許文献4参照)等の頭部や毛乳頭に働きかけるものや、クマツヅラ科イワダレソウ属(Lippia)の植物の抽出物を含有するメラニン生成抑制素材や、クマツヅラ科カリカルパ アルボレア(Callicarpa arborea)の植物の抽出物を配合するメラニン生成抑制作用を有する美白剤(特許文献5、6参照)が提案されている。しかしながら、これらは頭部や毛乳頭に働きかけるものや、同じ科や属であってもブルーバーベイン(Verbena hastata L.)とは異なる植物のクマツヅラ(Verbena officinalis L.)や、マンイシ(Vitex rotundifoa)、イワダレソウ属(Lippia)、カリカルパ アルボレア(Callicarpa arborea)に関するもので、クマツヅラ科クマツヅラ属ブルーバーベイン(Verbena hastata L.)の抽出物の表皮保水能作用や抗老化作用、抗酸化作用や美白作用、皮膚外用剤等への配合に関してはこれまで開示されていなかった。
本発明に用いるブルーバーベインは、クマツヅラ科クマツヅラ属のブルーバーベイン(学名:Verbena hastata L.)である。同じ科や同じ属であっても種の異なるものは含まれない。
本発明に用いるブルーバーベインは学名:Verbena hastata L.であれば、その産地や採取時期等は特に限定されない。また、使用部位も特に限定されないが、葉部や茎部などの地上部を用いるのが好ましい。
抽出方法についても、その設定温度や時間等特に制限はないが、例えば、ブルーバーベインを5℃程度から抽出溶媒の沸点以下の温度の溶媒に1〜48時間程度浸漬することが好ましく、抽出中は系内を攪拌するのが好ましい。また、抽出操作の前にブルーバーベインに対して乾燥、粉砕、細切、圧搾または発酵等の前処理を行うこともできる。
好ましい調製方法の例としては、ブルーバーベインをそのままあるいは乾燥して、細切、粉砕したもの等を水、低級一価アルコール、液状多価アルコール等の親水性極性溶媒中またはこれらの2種類以上の混合溶媒中に浸漬して、室温または加温して抽出し、得ることができる。
さらに、これらの抽出溶媒の中でも、本発明の効果や抽出物の化粧料中での使用性の観点から、水およびエタノールを任意の割合で混合して抽出溶媒として用いるのがより好ましい。ただし、抽出法はこれに限定されるものではない。
また、表皮保水能改善剤としては、0〜40%エタノール溶液を用いるのが好ましく、0〜20%エタノール溶液を用いるのがより好ましい。
さらに、美白剤としては、0〜90%エタノール溶液を用いるのが好ましく、30〜50%エタノール溶液を用いるのがより好ましい。
さらに、本発明の効果を妨げない質的、量的範囲で、ブルーバーベインの抽出物以外に、一般的に化粧料や外用医薬品の製剤に用いられる、水(精製水、温泉水、深層水等)、アルコール類、油剤、界面活性剤、金属セッケン、ゲル化剤、粉体、水溶性高分子、皮膜形成剤、樹脂、紫外線防御剤、包接化合物、抗菌剤、香料、消臭剤、塩類、pH調整剤、清涼剤、動物・微生物由来抽出物、植物抽出物、血行促進剤、収斂剤、抗脂漏剤、美白剤、抗炎症剤、細胞賦活剤、保湿剤、キレート剤、角質溶解剤、酵素、ホルモン類、ビタミン類等が挙げられる。
乾燥させた10gのブルーバーベイン(Verbena hastata L.)を粉砕し、10%(v/v)エタノール水溶液を100g加えて攪拌しながら室温で12時間抽出した。得られた抽出液は濾過して不溶物を取り除いた後に、活性炭を加えて30分攪拌してから再度濾過した。これを減圧濃縮し凍結乾燥を行い、抽出物1を得た。収量は0.61gであった。
[製造例2]ブルーバーベインの抽出物2の製造
乾燥させた10gのブルーバーベイン(Verbena hastata L.)を粉砕し、80%(v/v)エタノール水溶液100gを加えて攪拌しながら室温で12時間抽出した。得られた抽出液は濾過して不溶物を取り除いた後に、活性炭を加えて30分攪拌してから再度濾過した。これを減圧濃縮し凍結乾燥を行い、抽出物2を得た。収量は0.51gであった。
[製造例3]ブルーバーベインの抽出物3の製造
乾燥させた10gのブルーバーベイン(Verbena hastata L.)を粉砕し、40%(v/v)エタノール水溶液100gを加えて攪拌しながら室温で12時間抽出した。得られた抽出液は濾過して不溶物を取り除いた後に、活性炭を加えて30分攪拌してから再度濾過した。これを減圧濃縮し凍結乾燥を行い、抽出物3を得た。収量は0.60gであった。
<(イ)DPPHラジカル消去能の評価>
紫外線等の外的ストレスにより皮膚で発生するスーパーオキサイドやヒドロキシラジカル、過酸化水素等の活性酸素種や、それらから誘導されるフリーラジカルは、細胞機能を低下させ、脂質の過酸化やDNA損傷、タンパク変性などの細胞障害を引き起こす。例えば、ヒドロキシラジカルは真皮細胞外マトリクスの構成成分であるコラーゲンの合成を低下させ、コラーゲン分解酵素の産生を亢進することが知られており、スーパーオキサイドは脂質を過酸化し継続的な皮膚微弱炎症の一因となり、炎症の継続と慢性的な皮膚乾燥症状との関連も知られている。これら活性酸素やフリーラジカルなどの酸化障害によって細胞機能が低下し、真皮細胞外マトリクスの構成タンパクが損傷、変性することがシワやたるみ、ハリの消失といった皮膚老化症状の発生につながると考えられている。したがってフリーラジカルを消去することは、皮膚における脂質過酸化やコラーゲンの分解を抑制し、弾力やハリの低下、シワといった皮膚老化症状を改善防止するための抗老化剤や皮膚化粧料の開発において重要である。
DPPHラジカル消去率〔D〕(%)=(C―S)/C×100
S:試験溶液の517nmにおける吸光度
C:対照溶液の517nmにおける吸光度
また、本発明の効果を検証するための比較対象として、汎用の抗酸化剤であるアスコルビン酸グルコシドを用いた。
結果を表1に示す。
したがって、本発明のブルーバーベインの抽出物はラジカル消去剤として利用することができる。また、皮膚外用剤や化粧料に配合することでフリーラジカルを効果的に消去し、フリーラジカルや活性酸素が引き起こす細胞の酸化障害や脂質過酸化、真皮細胞外マトリクスの分解を抑制することで、弾力やハリの低下、シワといった皮膚老化症状を改善防止する皮膚外用剤や化粧料を作成することができる。
<(ロ)一重項酸素消去能の評価>
一重項酸素は酸素の励起種であるが、基底状態のいわゆる三重項酸素と比較してエネルギーが高く非常に強い求電子性を持つために、基底状態の有機分子に対する反応性が非常に高い。皮膚においては、表皮脂質の過酸化反応に深く関与することが知られており、過酸化された脂質は肌荒れや乾燥の原因となる。さらに一重項酸素は、真皮細胞外マトリクス成分であるコラーゲンに架橋を形成し重合させるが、これはスーパーオキサイドアニオンやヒドロキシラジカル、過酸化水素などの他の活性酸素種には見られない特異的な反応である。コラーゲンは皮膚のハリ、弾力を保つ上で非常に重要な分子であるために、加齢に伴うコラーゲン架橋の進行は皮膚老化のひとつの指標とされている。したがって一重項酸素を消去することは、皮膚における脂質過酸化やコラーゲンの架橋を抑制し、弾力やハリの低下、シワといった皮膚老化症状を改善防止するために重要である。一重項酸素の測定には、酸素が励起状態の一重項から基底状態の三重項に遷移するときに発する波長1268nmに極大を持つ近赤外光を検出する物理化学的検出方法を用いた。以下に詳細な試験方法を記す。
一重項酸素消去率〔E〕(%)=(I0−I)/I0×100
また、本発明の効果を検証するための比較対象として、汎用の抗酸化剤であるジブチルヒドロキシトルエン(以下、BHTと記載する)を用いた。
結果を表2に示す。
したがって、本発明のブルーバーベインの抽出物は一重項酸素消去剤として利用することができる。また、皮膚外用剤や化粧料に配合することで一重項酸素を効果的に消去し、一重項酸素が引き起こす脂質の過酸化やコラーゲン繊維間の架橋形成を抑制して、弾力やハリの低下、シワといった皮膚老化症状を改善防止する皮膚外用剤や化粧料を作成することができる。
<(ハ)エラスターゼ活性阻害効果の評価>
エラスチン線維は、ほぼ全身の臓器、組織に分布する細胞外マトリックス成分の一種で、伸縮可能なαへリックス構造が架橋することによって形成され、組織の柔軟性維持に重要な役割を担っていることが知られている。エラスチン線維は皮膚においては真皮層に存在しコラーゲンと並んで皮膚組織の弾力や柔軟性維持に重要な役割を果たしている。加齢により皮膚の弾力性、ハリの低下やシワ、たるみの表出といった様々な皮膚老化症状がみられるが、これは、線維芽細胞の増殖能の低下によるエラスチン線維等の産生能の低下だけではなく、皮膚の紫外線への暴露、空気の著しい乾燥、過度の皮膚洗浄等の外部刺激などにより、エラスチン線維の分解が促進されることが原因とされている。
エラスチン線維が分解する一因として、エラスターゼによる分解があると考えられている。エラスターゼは、セリンプロテアーゼファミリーに属する酵素であり、皮膚においては、例えば、紫外線Aが照射された場合にエラスターゼ活性が増加することが確認されている。
従って、真皮におけるエラスターゼの作用を抑制し、エラスチン線維の分解を防止することが、シワやたるみ等の肌の老化防止に有効であると考えられる。以下に詳細な試験方法を記す。
A:基質液と試料溶液とを混合した後、酵素液を添加した時の混合液の
波長405nmの吸光度
B:基質液と試料溶液とを混合した時の混合液の波長405nmの吸光度
C:試料溶液の代わりに、該溶液の溶媒を基質液と上記割合で混合した後、
酵素液を添加した時の混合液の波長405nmの吸光度
D:試料溶液も酵素液も添加していない、基質液の405nmの吸光度
結果を表3示す。
したがって、本発明のブルーバーベインの抽出物はエラスターゼ活性阻害剤として利用することができる。また、皮膚外用剤や化粧料に配合することでエラスチン線維の分解を抑制し、皮膚のシワやたるみ、弾力低下といった皮膚老化症状を改善防止する皮膚外用剤や化粧料を作成することができる。
<(ニ)表皮保水能改善効果の評価>
製造例1の方法で調製したブルーバーベインの抽出物1を1%の濃度になるように精製水に溶解して試験製剤とし、試験製剤を前腕内側部に1日2回、1週間連続で塗布した。また、本発明の効果を検証するための比較対象として反対側の腕の同じ部位に精製水を1日2回、1週間連続で塗布した。1週間後の肌における本発明品連続塗布による表皮保水能改善効果を検証するため、角層水負荷試験を行った。角層水負荷試験は角層の保水能を評価する手法として一般に用いられており、その試験方法を以下に記す。
1.5cm2の紙片に精製水100μlを含浸し、試験製剤塗布部位および対照塗布部位に1分間貼付した。1分後に紙片を除去し、肌上に残った水分を良く拭いた後、紙片除去60秒後から270秒後まで30秒毎の角層水分量変化をSKICON−200EX(I.B.S社製)を用いて測定した。対照塗布部位と比較して角層水分量の値が高いほど、水分を保持する能力が高く角層状態が良好であることを示している。
測定値から初期値を減じた結果を表4に示す。
したがって、本発明のブルーバーベインの抽出物は、肌の保水能を改善し角層水分量を上昇させる表皮保水能改善剤として利用することができる。また、皮膚外用剤や化粧料に配合することで皮膚の乾燥を防止改善し、乾燥による肌荒れや皮膚表面の小ジワを改善する皮膚外用剤や化粧料を作成することができる。
<(ホ)メラニン産生抑制効果の評価>
製造例1〜3の方法で調製したブルーバーベインの抽出物1〜3を、試料の溶解性を考慮して、抽出物1は精製水に溶解、抽出物2は80%含水エタノールに溶解、抽出物3は40%含水エタノールに溶解し、これらを以下の試験に用いた。
マウス由来のB16メラノーマ培養細胞を使用して、上記抽出物1〜3について、メラニン産生抑制効果及び細胞生存率を調べた。
具体的には、2枚の6穴プレートに10%FBS含有MEN培地を適量取り、B16メラノーマ細胞を播種し、37℃、二酸化炭素濃度5%中にて静置した。翌日、各試料溶液の最終濃度が抽出物1は0(対照)、10、30、100、300及び1000μg/ml、抽出物2および抽出物3は0(対照)、2、6、20、60、200μg/mlとなるように、各試料溶液を培地に添加し混和した。培養5日目に培地を交換し、再度、各試料溶液を添加した。翌日、培地を除き、1枚のプレートについて、細胞をリン酸緩衝液にて洗浄した後回収し、B16メラノーマ培養細胞の白色化度を以下の基準にて評価した。
また、本発明の効果を検証するための比較対象として、メラニン産生抑制作用のあることが知られているコウジ酸についても同様の試験を、最終濃度0(対照)、12.5、25、50、100及び200μg/mlになるようにし行った。
(判定基準)
+++:コウジ酸200μg/mlと同等またはそれ以上の白色である。
++:コウジ酸100μg/mlと同等の白色である。
+:コウジ酸50μg/mlと同等の白色である。
−:コウジ酸50μg/ml以下の白色である。
また残りの1枚のプレートについて、細胞をホルマリン固定後、1%クリスタルバイオレット溶液に添加し染色した。各試料溶液濃度に対する生存細胞率をモノセレーター(オリンパス社製)で測定し、生存率70%未満の濃度については評価対象外とした。
結果を表5に示す。
したがって、本発明のブルーバーベインの抽出物は美白剤として利用することができる。また、皮膚外用剤や化粧料に配合することでメラニン産生を抑制し、皮膚のシミ、ソバカスを防ぐ皮膚外用剤や化粧料を作成することができる。
(成分) (%)
1.グリセリン 5
2.1,3−ブチレングリコール 5
3.乳酸 0.05
4.乳酸ナトリウム 0.1
5.製造例1のブルーバーベインの抽出物1 0.0001
6.モノオレイン酸ポリオキシエチレン(20E.O.)ソルビタン 1.2
7.エチルアルコール 8
8.パラオキシ安息香酸メチル 0.1
9.香料 0.05
10.精製水 残量
A:成分6〜9を混合溶解する。
B:成分1〜5及び10を混合溶解する。
C:BにAを添加混合し、化粧水を得た。
(成分) (%)
1.モノステアリン酸ポリオキシエチレン(20E.O.)ソルビタン 1
2.トリオレイン酸ポリオキシエチレン(20E.O.)ソルビタン 0.5
3.グリセリルモノステアレート 1
4.ステアリン酸 0.5
5.ベヘニルアルコール 0.5
6.スクワラン 8
7.カルボキシビニルポリマー 0.1
8.パラオキシ安息香酸メチル 0.1
9.水酸化ナトリウム 0.05
10.製造例1のブルーバーベインの抽出物1 0.1
11.エチルアルコール 5
12.精製水 残量
13.香料 0.05
A:成分12に成分7〜10を加えて70℃で均一に混合する
B:成分1〜6を70℃で均一に混合する。
C:AにBを加えて乳化し、室温まで冷却する。
D:成分11、13を加えて均一に混合し、乳液を得た。
(成分) (%)
1.アクリル酸・メタクリル酸アルキル共重合体(注1) 0.5
2.トリエタノールアミン 1.5
3.精製水 残量
4.グリセリン 5
5.パラオキシ安息香酸エチル 0.1
6.1,3―ブチレングリコール 5
7.水素添加大豆リン脂質 0.5
8.酸化チタン 5
9.ベンガラ 0.1
10.黄酸化鉄 1
11.黒酸化鉄 0.05
12.ステアリン酸 0.9
13.モノステアリン酸グリセリン 0.3
14.セトステアリルアルコール 0.4
15.モノオレイン酸ポリオキシエチレン(20E.O.)ソルビタン 0.2
16.トリオレイン酸ポリオキシエチレン(20E.O.)ソルビタン 0.2
17.パラメトキシケイ皮酸2―エチルヘキシル 5
18.製造例2のブルーバーベインの抽出物2 0.05
19.香料 0.02
(注1)ペミュレンTR−2(NOVEON社製)
A:成分6〜11を分散する。
B:Aに成分12〜17を加え70℃で均一に混合する。
C:成分1〜5を70℃で均一に混合する。
D:CにBを加え乳化し、室温まで冷却する。
E:Dに成分18、19を添加し均一に混合して水中油型クリーム状リキッドファンデーションを得た。
(成分) (%)
1.モノラウリン酸ポリオキシエチレン(20E.O.)ソルビタン 0.2
2.ポリオキシエチレン(60E.O.)硬化ヒマシ油 0.1
3.精製水 残量
4.ジプロピレングリコール 10
5.硫酸マグネシウム 0.5
6.アスコルビルリン酸マグネシウム 3
7.シリコーン化合物(注2) 3
8.デカメチルシクロペンタシロキサン 20
9.イソノナン酸イソトリデシル 5
10.パラメトキシケイ皮酸2−エチルヘキシル 8
11.製造例2のブルーバーベインの抽出物2 0.01
12.ジメチルステアリルアンモニウムヘクトライト 1.2
(注2)KF−6028(信越化学工業社製)
A:成分1〜6を均一に分散する。
B:成分7〜12を均一に分散する。
C:Bを攪拌しながら徐々にAを加えて乳化し、油中水型クリーム状日焼け止め化粧料を得た。
(成分) (%)
1.ステアリン酸 18
2.セタノール 4
3.トリエタノールアミン 2
4.グリセリン 5
5.グリチルリチン酸ジカリウム(注3) 0.5
6.製造例1のブルーバーベインの抽出物1 0.5
7.酢酸dl−α―トコフェロール(注4) 0.2
8.パラオキシ安息香酸メチル 0.1
9.精製水 残量
(注3)和光純薬工業社製
(注4)エーザイ社製
A.成分3、4および9の一部を加熱混合し、75℃に保つ。
B.成分1、2、7、8を加熱混合し、75℃に保つ。
C.AにBを徐々に加え、これを冷却しながら成分9の残部で溶解した成分5、6を加えて攪拌し、軟膏剤を得た。
(成分) (%)
1.グリセリン 5
2.1,3−ブチレングリコール 6.5
3.モノラウリン酸ポリオキシエチレン(20E.O.)ソルビタン 1.2
4.エチルアルコール 8
5.パラオキシ安息香酸メチル 0.2
6.製造例1のブルーバーベインの抽出物1 0.0001
7.精製水 残量
A.成分3〜5を混合溶解する。
B.成分1、2、6、7を混合溶解する。
C.AとBを混合して均一にし、ローション剤を得た。
(処方) (%)
1.ポリビニルアルコール 20
2.エチルアルコール 20
3.グリセリン 5
4.カオリン 6
5.製造例3のブルーバーベインの抽出物3 0.1
6.防腐剤 0.2
7.香料 0.1
8.精製水 残量
B.成分2、6を混合する。
C.BをAに加え、混合した後、冷却して成分7を加えて均一に分散してパックを得た。
Claims (10)
- クマツヅラ科クマツヅラ属ブルーバーベイン(Verbena hastata L.)の抽出物を有効成分とすることを特徴とする表皮保水能改善用化粧料。
- クマツヅラ科クマツヅラ属ブルーバーベイン(Verbena hastata L.)の抽出物を有効成分とすることを特徴とする抗老化用化粧料。
- クマツヅラ科クマツヅラ属ブルーバーベイン(Verbena hastata L.)の抽出物を有効成分とすることを特徴とする美白用化粧料。
- クマツヅラ科クマツヅラ属ブルーバーベイン(Verbena hastata L.)の抽出物を有効成分とすることを特徴とするラジカル消去剤。
- クマツヅラ科クマツヅラ属ブルーバーベイン(Verbena hastata L.)の抽出物を有効成分とすることを特徴とする一重項酸素消去剤。
- クマツヅラ科クマツヅラ属ブルーバーベイン(Verbena hastata L.)の抽出物を有効成分とすることを特徴とする抗酸化剤。
- クマツヅラ科クマツヅラ属ブルーバーベイン(Verbena hastata L.)の抽出物を有効成分とすることを特徴とするエラスターゼ阻害剤。
- クマツヅラ科クマツヅラ属ブルーバーベイン(Verbena hastata L.)の抽出物を有効成分とすることを特徴とする表皮保水能改善剤。
- クマツヅラ科クマツヅラ属ブルーバーベイン(Verbena hastata L.)の抽出物を有効成分とすることを特徴とする抗老化剤。
- クマツヅラ科クマツヅラ属ブルーバーベイン(Verbena hastata L.)の抽出物を有効成分とすることを特徴とする美白剤。
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