JP5707137B2

JP5707137B2 - レバミピドの骨粗鬆症治療用途

Info

Publication number: JP5707137B2
Application number: JP2011001375A
Authority: JP
Inventors: 茂小竹; 由紀南家; 徹八子; 学川本; 寿山中
Original assignee: Otsuka Pharmaceutical Co Ltd; Tokyo Womens Medical University
Current assignee: Otsuka Pharmaceutical Co Ltd; Tokyo Womens Medical University
Priority date: 2011-01-06
Filing date: 2011-01-06
Publication date: 2015-04-22
Anticipated expiration: 2031-01-06
Also published as: JP2012144437A

Description

本発明は、骨吸収性疾患の予防及び／又は治療剤、さらに詳しくは、一般式（１）：

で示される化合物またはその塩を有効成分とする骨吸収性疾患の予防及び／又は治療剤に関する。

骨粗鬆症は骨を形成する骨芽細胞と骨を吸収、破壊する破骨細胞の代謝バランスが崩れ、骨形成の抑制や骨破壊、吸収の進行により骨密度が減少することで起こる。その原因としては加齢や閉経などに伴うホルモン（エストロゲン）の変化や、寝たきりなどの運動不足状態、また、ダイエットなどによるカルシウム不足などが挙げられる。

現在、日本における骨粗鬆症の患者は、８００万人〜１，１００万人と推定され、大腿骨頸部骨折は年間約９万人と急速に増加しており、様々な治療方法や予防剤が開発されている。
骨粗鬆症の予防または治療剤としては、血液中のカルシウム量を維持し、骨吸収作用を抑制するカルシウム製剤やカルシウムの吸収を促進し、血液中のカルシウム量を保つビタミンＤ製剤、骨吸収を抑制し、カルシウムを骨に運ぶカルシトニンの分泌とカルシウムの吸収、ビタミンＤの活性化を促進するエストロゲン製剤、骨吸収を直接抑制し、カルシトニンの分泌を促進して骨吸収を抑制し、また破骨細胞の形成を阻害するイソフラボン誘導体、骨芽細胞に直接作用して、骨量を増加させ、また骨吸収抑制作用も有するビタミンＫ_２、破骨細胞を減少させて骨吸収を抑制し、骨芽細胞の骨形成を促進するカルシトニン製剤、破骨細胞の分化と活性化を抑制するビスホスホネ−ト系骨代謝改善剤等がある。

これらの予防または治療剤を用いた薬物療法は骨粗鬆症の治療の中心的な治療方法として用いられている。一方で服用の仕方によっては、カルシウムとキレートをつくり、却って吸収を抑制してしまう場合や、高カルシウム血症を起こす場合もある。また、長期の服用で尿路結石が生じたり、悪心、嘔吐、食欲不振、嚥下困難、嚥下痛、下痢、軟便、皮膚の発疹などの様々な副作用が生じたりするなど、服用には注意が必要とされ、管理が難しい場合もある。従って、副作用等の心配がなく、安全で効果的な予防または治療剤が求められる。

上記一般式（１）で示されるレバミピドに代表されるカルボスチリル化合物及びその製法は特許文献１に記載されており、それらが抗潰瘍剤として有用であることが記載されている。さらに、レバミピドが種々の疾患の治療に有用であること、例えば特許文献２にはレバミピドが胃炎治療剤として有用であること、特許文献３には抗糖尿病薬として有用であることが記載されている。さらに、特許文献４にはソマトスタチン増加作用又は低下抑制作用を有することが記載されている。また、特許文献５には腸粘膜障害保護剤として有用であること、特許文献６にはウレアーゼ阻害剤として有用であること、特許文献７にはインターロイキン−８阻害剤として有用であること、特許文献８には発癌抑制剤として有用であること、特許文献９には眼疾患治療剤として有用であることが記載されている。さらに、特許文献１０にはＡＤＰ−リボシル化阻害剤として有用であること、特許文献１１には生体内毒素型細菌性感染症治療剤として有用であること、特許文献１２にはＮＡＤアーゼ阻害剤として有用であることが記載されている。

特公昭６３−３５６２３号公報特開平３−７４３２９号公報特開平５−１４８１４３号公報特開平６−５０９５８７号公報特開平６−２１１６６２号公報特開平７−１０１８６２号公報特開平８−１２５７８号公報特開平９−７１５３２号公報特開平９−３０１８６６号公報特開平１０−２３１２４６号公報特開平１０−２３１２４７号公報特開平１１−２２８４１３号公報

上述のとおり、骨粗鬆症の予防／治療剤についてはいくつかの予防／治療剤が臨床の場で用いられているものの、副作用の問題もあり、安全で効果的な新規な骨粗鬆症の予防／治療剤の開発が切望されていた。

本発明者等は、上記課題を解決すべく鋭意検討を行ったところ、前記胃炎・胃潰瘍治療剤として一般的に知られているレバミピドが、意外にも破骨細胞分化抑制作用を有することを見出した。本発明は、これらの知見に基づいて完成したものである。

本発明は下記の態様を含む。
項１．レバミピドまたはその医薬的に許容される塩を有効成分とする破骨細胞分化抑制剤。
項２．レバミピドまたはその医薬的に許容される塩を有効成分とする骨吸収抑制剤。
項３．レバミピドまたはその医薬的に許容される塩を有効成分とする骨吸収性疾患の予防および／または治療剤。
項４．骨吸収性疾患が骨粗鬆症、骨量減少または骨折である項３に記載の予防および／または治療剤。
項５．骨吸収性疾患の予防および／または治療剤を製造するためのレバミピドまたはその医薬的に許容される塩の使用。
項６．骨吸収性疾患の予防および／または治療に使用するためのレバミピドまたはその医薬的に許容される塩。
項７．骨吸収性疾患の患者に、治療上の有効量のレバミピドまたはその医薬的に許容される塩を投与することを特徴とする骨吸収性疾患の予防および／または治療方法。

本発明のレバミピドまたはその医薬的に許容される塩を含む薬剤は、破骨細胞分化の抑制に有効であり、ヒトの骨吸収抑制剤、骨吸収性疾患の予防および／または治療剤として使用され得る。

実施例１において観察された顕微鏡写真を示す。「positive control」、「１ｍＭ」および「３ｍＭ」はレバミピドの添加量がそれぞれ０、１および３ｍＭであることを示し、「negative control」はＭ−ＣＳＦ、ＲＡＮＫＬおよびレバミピドが無添加であるコントロールを示す。実施例２において観察された顕微鏡写真を示す。「０ｍＭ」および「３ｍＭ」はレバミピドの添加量がそれぞれ０および３ｍＭであることを示し、「５５ｈ」および「１２７ｈ」はタイムラプス撮影開始から５５時間目および１２７時間目であることを示す。実施例３において観察された顕微鏡写真を示す。「positive control」、「１ｍＭ」および「３ｍＭ」はレバミピドの添加量がそれぞれ０、１および３ｍＭであることを示す。実施例４において観察された顕微鏡写真を示す。「positive control」、「１ｍＭ」および「３ｍＭ」はレバミピドの添加量がそれぞれ０、１および３ｍＭであることを示す。図５Ａは実施例５においてレバミピドの添加量が０ｍＭである破骨細胞の、低真空圧ＳＥＭにより観察された３Ｄ計測による解析結果を示す。図５Ｂは実施例５において各条件における吸収窩の３Ｄ形状を示す。

本発明のレバミピドおよびその塩、並びにその製造方法については、特許文献１に開示されている。

本発明のレバミピドまたはその医薬的に許容される塩は、バルクで、または好ましくは通常の医薬担体もしくは希釈剤で医薬製剤の形態で用いられ得る。投与形態は特定の形態に制限されないが、いずれの通常の投与形態、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤のような経口投与の製剤、経口投与に適した様々な液体製剤、または注射剤、坐剤のような非経口投与用製剤であってもよい。活性化合物はその製剤の組成物に対して０．１〜７０重量％含まれ、好ましくは、投与単位あたり１〜１０００ｍｇ、好ましくは１００〜３００ｍｇの量で製剤中含まれる。
本発明の薬物の投与量は、投与方法、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度により適宜選択されるが、通常レバミピドまたはその医薬的に許容される塩の量は１日当り体重１ｋｇ当り０．０１〜５０ｍｇ、好ましくは３〜５ｍｇとするのがよく、１回または２〜数回に分けて投与してもよい。

錠剤、カプセル剤、経口投与用液剤のような製剤は、通常の方法で調製され得る。錠剤は、ゼラチン、デンプン、乳糖、ステアリン酸マグネシウム、タルク、アラビアガムなどのような通常の医薬担体と混合して調製され得る。カプセル剤は、不活性な医薬充填剤または希釈剤と共に混合して調製し、硬ゼラチンカプセルまたは軟カプセルに詰められ得る。シロップ剤またはエリキシル剤のような経口液体製剤は、活性化合物と、甘味料（例えば、ショ糖）、保存剤（例えば、メチルパラベン、プロピルパラベン）、着色料、香料などとを混合して調製する。

注射用製剤は通常、液剤、乳濁液、または懸濁液の形態で調製され、無菌化し、更に好ましくは血液に対して等張にされる。液体、乳濁液または懸濁液の形態の製剤は一般的に、通常の医薬希釈剤、例えば、水、エチルアルコール、プロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルを用いて調製される。これらの製剤には、塩化ナトリウム、ブドウ糖、グリセリンのような等張剤と、等張にするのに十分な量で混合してもよく、更に通常の可溶化剤、緩衝剤、麻酔剤、および適宜、着色剤、保存剤、芳香物質、香料、甘味料、および他の薬剤で混合してもよい。

非経口投与用製剤はまた、通常の方法、例えば本発明のレバミピドまたはその医薬的に許容される塩を無菌の水性担体、好ましくは水または生理食塩水溶液に溶解しても調製され得る。

本発明で用いる「破骨細胞分化抑制」とは、Ｍ−ＣＳＦ（Macrophage Colony Stimulating Factor）およびＲＡＮＫＬ（Receptor Activator of NF kappa B Ligand）の刺激による単球からの破骨細胞への分化を、特異的に制御することをいい、破骨細胞分化を抑制することで骨吸収性疾患の治療、予防、改善等に用いることができる。
本発明で用いる「骨吸収抑制」とは、骨吸収速度を減少または停止させることをいう。
本発明で用いる「骨吸収性疾患」とは、骨吸収が骨形成を上回ることに起因する疾患または状態を意味する。このような疾患または状態の例としては、骨量減少または骨粗鬆症、およびそれらに伴う腰痛や背部痛等の痛み、骨変形、骨強度低下、骨折等が挙げられる。

以下、実施例を挙げて、本発明を説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
実施例１．ヒト破骨細胞分化（４８ウェルプレート）
健常人末梢血由来の単球を、４８ウェルプレートにおいてＭ−ＣＳＦ（Macrophage Colony Stimulating Factor，１００ｎｇ／ｍｌ）の存在下で３日間培養後、ＲＡＮＫＬ（Receptor Activator of NF kappa B Ligand，３０ｎｇ／ｍｌ）を添加し、Ｍ−ＣＳＦ（１００ｎｇ／ｍｌ）およびＲＡＮＫＬ（３０ｎｇ／ｍｌ）の存在下で、０、１、３ｍＭのレバミピドを添加し、培養を開始してから１３日間、３７℃において培養することにより破骨細胞へ分化させた。培養後、抗ＣＤ５１／６１（ビトロネクチン受容体）抗体による免疫染色を行った。顕微鏡による観察結果を図１に示す。破骨細胞の分化はレバミピド０、１、３ｍＭの順に濃度依存的に抑制された。

実施例２．ヒト破骨細胞分化（タイムラプス）
健常人末梢血由来の単球を、４８ウェルプレートにおいてＭ−ＣＳＦ（１００ｎｇ／ｍｌ）の存在下で３日間培養後、ＲＡＮＫＬ（３０ｎｇ／ｍｌ）を添加し、Ｍ−ＣＳＦ（１００ｎｇ／ｍｌ）およびＲＡＮＫＬ（３０ｎｇ／ｍｌ）の存在下で、０、１、３ｍＭのレバミピドを添加し、培養を開始してから１３日間、３７℃において破骨細胞へ分化させた。破骨細胞への分化をタイムラプス（time lapse）機能にて１時間毎に、ＲＡＮＫＬ添加後の４日目〜１０日目（すなわち、培養開始７日目〜１３日目）までの７日間観察した。顕微鏡による観察結果を図２に示す。
３ｍＭのレバミピド添加においては、単核の破骨細胞前駆細胞の段階からプレートへの付着能を低下させた（図２の上段タイムラプス撮影開始から５５時間目＝ＲＡＮＫＬ添加後６日目）。タイムラプス撮影１２７時間目（ＲＡＮＫＬ添加後９日目）では、付着細胞は小型で細胞数は少なかった（図２の下段）。

実施例３．ヒト破骨細胞活性化（オステオロジック）
オステオロジック（Osteologic，登録商標）プレートを用い、健常人末梢血由来の単球を、４８ウェルプレートにおいてＭ−ＣＳＦ（１００ｎｇ／ｍｌ）の存在下で３日間培養後、ＲＡＮＫＬ（３０ｎｇ／ｍｌ）を添加し、Ｍ−ＣＳＦ（１００ｎｇ／ｍｌ）およびＲＡＮＫＬ（３０ｎｇ／ｍｌ）の存在下で、０、１、３ｍＭのレバミピドを添加し、培養を開始してから１３日間、３７℃で培養することにより、破骨細胞へ分化させた。破骨細胞の吸収活性はレバミピド０、１、３ｍＭの順に濃度依存的に抑制された（図３）。

実施例４．ヒト破骨細胞活性化
健常人末梢血由来の単球を、４８ウェルプレートにおいてＭ−ＣＳＦ（Macrophage Colony Stimulating Factor，１００ｎｇ／ｍｌ）の存在下で３日間培養後、ＲＡＮＫＬ（３０ｎｇ／ｍｌ）を添加し、Ｍ−ＣＳＦ（１００ｎｇ／ｍｌ）およびＲＡＮＫＬ（３０ｎｇ／ｍｌ）の存在下で、培養を開始してから１３日間、３７℃において培養することにより破骨細胞へ分化させた。形成した破骨細胞を剥離し、成熟破骨細胞を撒き直し、０、１、３ｍＭのレバミピドを添加し、再培養を行いアクチンリングの形状を観察した。アクチンリングの形成はレバミピド０、１、３ｍＭの順に濃度依存的に抑制された（図４）。

実施例５．ヒト破骨細胞活性化（象牙質切片，低真空圧ＳＥＭ）
象牙質切片（dentin slice）上で、健常人末梢血由来の単球を、Ｍ−ＣＳＦ（１００ｎｇ／ｍｌ）の存在下で３日間培養後、ＲＡＮＫＬ（５０ｎｇ／ｍｌ）を添加し、Ｍ−ＣＳＦ（１００ｎｇ／ｍｌ）およびＲＡＮＫＬ（５０ｎｇ／ｍｌ）の存在下で、０、１、３ｍＭのレバミピドを添加し、培養を開始してから１３日間、３７℃において破骨細胞へ分化させた。この象牙質切片（dentin slice）上の細胞を残したまま固定し、低真空圧走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）により、吸収窩の形状を３０、１００、５００倍で観察した。３Ｄ計測を行い吸収窩の形状を定量化した。Positive controlにて深度４０μｍの吸収窩が観察された（図５Ａ）。レバミピド３ｍＭ添加により吸収窩は観察されなかった（図５Ｂ）。

Claims

レバミピドまたはその医薬的に許容される塩を有効成分とする破骨細胞分化抑制剤（ただし、関節リウマチに伴う関節周囲骨における破骨細胞分化が対象の場合のみを除く）。
レバミピドまたはその医薬的に許容される塩を有効成分とする骨吸収抑制剤（ただし、関節リウマチに伴う関節周囲骨における骨吸収が対象の場合のみを除く）。
レバミピドまたはその医薬的に許容される塩を有効成分とする骨吸収性疾患の予防および／または治療剤（ただし、関節リウマチに伴う関節周囲骨における疾患が対象の場合のみを除く）。
骨吸収性疾患が骨粗鬆症、骨量減少または骨折である請求項３に記載の予防および／または治療剤。
骨吸収性疾患の予防および／または治療剤を製造するためのレバミピドまたはその医薬的に許容される塩の使用（ただし、関節リウマチに伴う関節周囲骨における疾患が対象の場合のみを除く）。