JP5542674B2 - タマリンド種子多糖およびヒアルロン酸に基づく点眼組成物 - Google Patents
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Description
-結膜上皮に存在する特殊化した細胞(すなわち、結膜の杯細胞)により産生される糖タンパク質(ムチン)の混合物からなる粘液の内層-前記層は、角膜に吸着され、したがって角膜上皮を親水性表面に変換する。ムチンが不足している場合、上皮細胞は疎水性であり、涙液により水和され得ない。
-本質的に水、電解質、タンパク質、酵素およびムチンからなる厚い中間水層(主涙腺および副涙腺から分泌される)。この層は、前記親水性表面上に広がり、大気中の酸素を角膜上皮に提供する機能、抗菌作用を発揮する機能および残屑を洗い流す機能を有する。
-下記の機能、すなわち、下部の水層の蒸発を抑制する機能、表面張力を増加させ、涙液層を安定化させて皮膚上に漏れることを回避する機能および瞼を円滑化する機能を有する薄い外部脂質層(脂腺瞼板腺すなわちマイボーム腺から分泌される)。
1. 涙液層それ自体のオスモル濃度の上昇を伴う涙液層からの水の喪失;
2. 杯細胞の密度の減少および角膜のグリコーゲン(病変の可能性がある角膜を治すエネルギー供給源)の減少;
3. 角膜落屑の増加(涙液層と眼表面との間の浸透圧格差の増加および結膜の上皮細胞から水を回収する杯細胞の減少のため);
4. 角膜-涙液層の界面の不安定化
を介して発症することが現在知られている。
(例1)
-TSPおよびHAを適切なガラス容器に秤量する;
-利用可能な水の90%を、生成物が完全に溶解するまで軽く撹拌しながら加える;
-全量のマンニトールを加え、撹拌を続け、生成物が完全に溶解するまで混合物を撹拌したままにする;
-脱イオン水を最終重量(100%)まで加える;
-リン酸二水素ナトリウムおよびリン酸水素二ナトリウムを、所望のpHまで加える;
-このようにして得た溶液を、オートクレーブにおいて滅菌する、または代替として、0.22ミクロンのフィルターで滅菌する。
【図1】ドライアイ症候群の治療における、本発明に従った組成物の有効性についての
パイロットスタディの結果を、ヒストグラムの形態で、結膜微絨毛に関して絶対値で示す図である。
【図2】同じパイロットスタディにおける結膜微絨毛の評価の結果を、基底値からの変
動で示す図である。
【図3】同じパイロットスタディにおけるTSP+HA群に属す女性患者の左目結膜上皮の、
治療前のSEM 7500倍画像を示す図である。
【図4】図3と同じ女性患者の左目結膜上皮の、TSP+HAを用いた治療60日後のSEM7500倍
画像を示す図である。
【図5】図1と同じパイロットスタディの結果を、自覚症状についての効果の評価に関
して絶対値で、ヒストグラムの形態で示す図である。
【図6】上記パイロットスタディにおける、基底値から見た、自覚症状に関する効果の
評価の結果を示す図である。
【図7】図1と同じパイロットスタディの結果を、他覚症状についての効果の評価に関
して絶対値で、ヒストグラムの形態で示す図である。
【図8】同じパイロットスタディにおける、基底値から見た、他覚症状の効果の評価の
結果を示す図である。
【図9】図1と同じパイロットスタディの結果を、細胞学についての効果の評価に関し
て絶対値で、ヒストグラムの形態で示す図である。
【図10】同じパイロットスタディにおける細胞学についての効果の評価の結果を、基
底値から変動で示す図である。
【図11】図1と同じパイロットスタディの結果を、先の評価の全スコア(総スコア)に
関して、絶対値で、ヒストグラムの形態で示す図である。
【図12】同じパイロットスタディにおける先の評価の複合スコアの結果を、基底値か
ら変動で示す図である。
【発明を実施するための形態】
【実施例】
内部に水を包含できる、非常に複雑な3次元構造の多糖ヒドロゲルを提供する。水分含有量、水およびポリマー材料の間に起こる相互作用の型、ならびにポリマーそれ自体の内部水分布が、機械的特性および粘膜接着力についての重要な影響を有し、高度の生体適合性の根本にある。通常、3つの型の水:結合水、中間水および遊離水が、多糖ゲルにおいて区別される。
a) 0.1%(w/w)から1%の可変濃度を有するTSP溶液;
b) 0.1%(w/w)から1%の可変濃度を有するHA溶液;
c) 0.5%に等しい一定の総濃度を有し、総濃度0.5%の、適切な体積の母溶液を混合することによって得られる可変濃度のHAおよびTSPを含む混合物;
d) 1%に等しい一定の総濃度を有し、総濃度1%の、適切な体積の母溶液を混合することによって得られる可変濃度のHAおよびTSPを含む混合物。
1. HAの23Naの化学シフト;
2. TSPのアノマープロトンおよびHAのアセチルプロトンについての選択的スピン-格子の緩和測定値;
3. HAおよびTSPのプロトンについてのスピン-スピン緩和測定値;
4. H2Oの拡散を決定(ポリマー中に組み込まれた水の決定)するためのDOSY(拡散規則化分光法(Diffusion Ordered SpectroscopY))の測定値。
固体ポリマーをD2Oに所望の濃度で溶解し、母溶液を調製した。2組の溶液を調製し、第1の溶液は、周囲温度で12時間撹拌後に得られ、第2の溶液は、周囲温度で12時間撹拌し、80℃に加熱し60分間撹拌後に得られた。2組の溶液から得られた結果は、完全に一致し、したがって以下の考察においてそれらを区別はしない。
上で総合的に扱ったNMR研究の結果は、TSPおよびHAの相互作用が、2種のポリマーの間の重量比に依存して協力することを明らかに示す。このような相互作用は、主にTSPのグルコースおよびガラクトースの内部単位およびHAのアセチル基に関する構造変化をもたらす。対照的に、HAそれ自体のカルボキシル基は、影響を受けないように思われる。おそらく、イオン形態で存在する後者は、常に、HAが相互作用するTSPよりむしろ直面する相にそれら自体を配置する傾向があると思われる。後者の結論は、総濃度および2種のポリマー間の比の変化によるナトリウムの化学シフトについての効果がほとんどないことによって支持される。
人工涙液の適用に関する仮定の1つは、涙液層の正常な状態である。眼は、流涙の質および量に影響するビデオ端末の使用、大気汚染、栄養および環境アレルギーならびにその結果コンタクトレンズの適用の可能性のために、ますます頻繁に流涙の問題を提示する。このことを考慮して、涙液層の変化は、人工涙液による療法の明確な拒否を必然的にもたらすことに留意すべきである。
Schirmer I試験は、下の結膜の円蓋に外眼角に向かって、標準的な材料およびサイズのbibula紙片の導入を含む。紙片を、粘膜内に所定の期間(3分)放置し、前記期間の後、折りこみ部分を除く浸漬部分を測定する。涙液が上昇するために用いた時間および涙により浸漬された紙部分のmmの長さにより、涙の分泌量が提供される。
実験は、以下の実験群の設置を含み、各実験群は3匹のアルビノラット(=6個の眼)で構成された。
1. 対照群
2. 本発明に従った組成物(0.4%のヒアルロン酸+0.2%のTSP):(TSP+HA)
3. グリコールおよびヒドロキシプロピル-グアの混合物(Systaneの複数回投与用ボトル、Alcon):(Guar Gum)
4. 0.15%のヒアルロン酸(Blu Yal単回投与、Sooft):(HA 0.15%)
5. 0.4%のヒアルロン酸(Dropstar単回投与、Farmigea):(HA 0.4%)
6. ガラクトキシログルカン(TSP 0.2%単回投与、Farmigea):(TSP 0.2%)
7. 0.5%のカルボキシメチルセルロースナトリウム(Celluvisc単回投与、Allergan):
(CMC 0.5%)
8. 0.2%のヒアルロン酸(Hyalistil 0.2%、Sifi):(HA 0.2%)
第1相試験において、健康な動物のモデルにおいて製品の品質を評価した。動物を1日3回、5日間それぞれの溶液を用いて処理した。試験を、以下のモダリティを用いて実施した。
この検査相において、さまざまな動物モデル候補を評価し、アルビノラットのドライアイモデルを設定し、下記のように構成された2.5時間の3周期の使用を含む:
T0(0分):4mg/kgのアトロピンを腹腔内投与し、1%のアトロピンを局所適用する
T1(40分):8.5%の抱水クロラールを用いて麻酔し、連続かつ一定の乾燥空気流に1時間曝す。
T2(100分):空気流終了
T3(130分):1%の局所アトロピン
T4(150分):周期の終了
ドライアイ症候群の治療において、TSPおよびHAの組み合わせの有効性を評価するために、予備臨床試験を、両方の性別の二十一(21)例の対象(42の眼)について実施した。実験に含めることの基準は、眼の感染症がないこと、ドライアイと異なる任意の眼病がないこと(屈折率の変化は除外する)およびコンタクトレンズの使用がないことであった。
-研究群:TSP点眼液(TSP 0.2%)およびHA点眼液(HA 0.4%)の等重量比の混合物、以下「TSP+HA」と称される、
-第1対照群:点眼液0.2%のTSP(TSP、Farmigea)、以下「TSP」と称される、
-第2対照群:点眼液0.4%のHA(Dropstar、Farmigea)、以下「HA」と称される。
微絨毛の評価-微絨毛についての治療の効果を、走査型電子顕微鏡(SEM)を用いて評価した。検査した個々の眼に関して、同じ領域における基礎離脱および最終離脱を得るために、血管格子を使用する基準点を特定した。個々の眼に関して別々に、上皮の試料を上側頭眼球結膜から「インプレッションサイトロジー」技術を使用して得た。
述べたように、走査型顕微鏡で撮影した微絨毛の治療の効果を、4ポイントの基準を用いた評価により決定した。ランダム化の前に3つの群を完全に同質にし、「TSP」群は平均スコア3.0を有し、「TSP+HA」および「HA」群は平均スコア3.3を有した。さらに、データの分散は適度と思われ、変動係数はTSP、TSP+HA、HAに関してそれぞれ26%対22%対22%であった。
自覚症状の強さを上記のように、眼の不快感の強度の形態で、4ポイントの類推基準を用いて決定した。基底値においてスコアの絶対値(平均の最大のギャップは0.3ポイント)および,変動係数の形態で測定された分散値(TSP、TSP+HAおよびHAに関してそれぞれ33%対12%対29%)の両方の観点からすれば、3つの群は比較的同質に提示された。
他覚症状を、4つの角膜-結膜領域の疾患の度合いを、上記のように細隙灯を使用して評価することで、4ポイントの基準を用いて測定した。基底値において、3つの群はわずかな非同質性を提示し、統計的に関連はなく、TSP+HA群は平均スコアが2.8であり、TSP群のスコアより0.3ポイント高く、HA群のスコアより0.1ポイント高かった。データの分散結果は、3群すべてに関して比較的高く、変動係数は、TSP、TSP+HA、HAに関してそれぞれ41%対29%対34%であった。(表が続く)
炎症細胞の存在を、上記の基準に従って4ポイントの基準を用いて評価した。基底値において、ランダム化の前に3つの群は、たとえ統計的に関連のある方法でなくても非常に非同質であった。実際に、最も軽度であったHA群において平均スコアの1.9を検出し、TSP群においてスコアは2.1であり、最も重度のTSP+HA群において平均スコアの2.7を検出し、極端の間のギャップは0.8であった。さらに、データ分散は理にかなっており、変動係数は、TSP、TSP+HA、HAに関してそれぞれ44%対37%対55%であった。(表が続く)
述べたように、複合スコアは、上記の4つのパラメーター(微絨毛、自覚症状、他覚症状、細胞学)の和を表し、全体的な有効性の代わりの指標である。その最大理論値は16である。群の間のバランスが崩れる可能性の供給源にもかかわらず、主に細胞学によるランダム化の後で、以下の表からもたらされるように基底値において3つの群は十分同質であった。
記載したパイロットスタディに使用した治療において、通常数分続く製品の滴下に伴う一時的霧視に関する稀なフィードバックを除いて、忍容性ならびに局所または全身の安全性につながる問題は少しも報告されなかった。他の代用涙液に関しても周知であるこのような効果は、3つの群において差は示さなかった。
研究結果に基づいて、同じ点眼薬中でTSPおよびヒアルロン酸の組み合わせが相乗効果を生み出し、2種の製品を個々に投与した場合には得られない結果を示すことの十分な臨床的証拠が存在し、さらに走査型電子顕微鏡を用いて実施した評価により支持されると結論付けることができる。
Claims (16)
- 0.05から2質量%のタマリンド種子多糖および0.05から1質量%のヒアルロン酸を水溶液中に組み合せて含有する、代用涙液としての使用のための点眼薬。
- 0.1から1質量%のタマリンド種子多糖および0.1から0.5質量%のヒアルロン酸を含む、請求項1に記載の点眼薬。
- 前記タマリンド種子多糖が、450,000Daから750,000Daの範囲に含まれる分子量を有する、請求項1または2に記載の点眼薬。
- 前記ヒアルロン酸が、600,000Daから1,000,000Daの範囲に含まれる分子量を有する、請求項1から3のいずれか一項に記載の点眼薬。
- 0.2質量%のタマリンド種子多糖および0.4質量%のヒアルロン酸を水溶液中に含む、請求項1に記載の点眼薬。
- 1種または複数種の浸透圧調節剤をさらに含む、請求項1から5のいずれか一項に記載の点眼薬。
- pH調整剤として、眼科的に許容可能な1種または複数種の酸または塩基をさらに含む、請求項1から6のいずれか一項に記載の点眼薬。
- 1種または複数種の緩衝液をさらに含む、請求項1から7のいずれか一項に記載の点眼薬。
- 1種または複数種の保存料をさらに含む、請求項1から8のいずれか一項に記載の点眼薬。
- 1種または複数種のキレート剤をさらに含む、請求項1から9のいずれか一項に記載の点眼薬。
- タマリンド種子多糖およびヒアルロン酸の組み合わせを有効成分として有する水溶液からなる、代用涙液としての使用のための医薬組成物。
- タマリンド種子多糖およびヒアルロン酸の組み合わせを有効成分として有する水溶液からなる、ドライアイ症候群の治療のための医薬組成物。
- 0.05から2質量%のタマリンド種子多糖および0.05から1質量%のヒアルロン酸を含む、請求項11または12に記載の医薬組成物。
- 0.1から1質量%のタマリンド種子多糖および0.1から0.5質量%のヒアルロン酸を含む、請求項13に記載の医薬組成物。
- 前記タマリンド種子多糖が、450,000Daから750,000Daの範囲に含まれる分子量を有する、請求項11から14のいずれか一項に記載の医薬組成物。
- 前記ヒアルロン酸が、600,000Daから1,000,000Daの範囲に含まれる分子量を有する、請求項11から15のいずれか一項に記載の医薬組成物。
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