JP5478915B2 - 新規fki−4905物質およびその製造方法 - Google Patents
新規fki−4905物質およびその製造方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5478915B2 JP5478915B2 JP2009049154A JP2009049154A JP5478915B2 JP 5478915 B2 JP5478915 B2 JP 5478915B2 JP 2009049154 A JP2009049154 A JP 2009049154A JP 2009049154 A JP2009049154 A JP 2009049154A JP 5478915 B2 JP5478915 B2 JP 5478915B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- fki
- substance
- culture
- mortierella alpina
- present
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000000126 substance Substances 0.000 title claims description 92
- GPDRWULXOJRYOR-XHGFRBTRSA-N (4r)-4-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-5-[[(2r,3s)-3-methyl-1-oxo-1-[[(3s)-2-oxoazepan-3-yl]amino]pentan-2-yl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]1C(NCCCC1)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CN=CN1 GPDRWULXOJRYOR-XHGFRBTRSA-N 0.000 title claims description 70
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 14
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 18
- 241000907999 Mortierella alpina Species 0.000 claims description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 15
- 229940072185 drug for treatment of tuberculosis Drugs 0.000 claims description 8
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 5
- 239000000814 tuberculostatic agent Substances 0.000 claims description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 19
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 16
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 14
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 11
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 11
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 230000002365 anti-tubercular Effects 0.000 description 7
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000235575 Mortierella Species 0.000 description 6
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 6
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 6
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 4
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M potassium bromide Chemical compound [K+].[Br-] IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- QRXWMOHMRWLFEY-UHFFFAOYSA-N isoniazide Chemical compound NNC(=O)C1=CC=NC=C1 QRXWMOHMRWLFEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 2
- 229910001873 dinitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- AEUTYOVWOVBAKS-UWVGGRQHSA-N ethambutol Chemical compound CC[C@@H](CO)NCCN[C@@H](CC)CO AEUTYOVWOVBAKS-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 229960003350 isoniazid Drugs 0.000 description 2
- -1 liquid paraffin Substances 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- QKFJKGMPGYROCL-UHFFFAOYSA-N phenyl isothiocyanate Chemical compound S=C=NC1=CC=CC=C1 QKFJKGMPGYROCL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 239000013076 target substance Substances 0.000 description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-CRCLSJGQSA-N D-allo-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-CRCLSJGQSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-GSVOUGTGSA-N D-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 208000012766 Growth delay Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241000187480 Mycobacterium smegmatis Species 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 208000001388 Opportunistic Infections Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000010775 animal oil Substances 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 150000001555 benzenes Chemical class 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 150000001868 cobalt Chemical class 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000012050 conventional carrier Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 150000001879 copper Chemical class 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 238000003113 dilution method Methods 0.000 description 1
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 229960000285 ethambutol Drugs 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000010304 firing Methods 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 238000001917 fluorescence detection Methods 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002505 iron Chemical class 0.000 description 1
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 1
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 1
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 1
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 150000002696 manganese Chemical class 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 239000006877 oatmeal agar Substances 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940117953 phenylisothiocyanate Drugs 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 1
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 1
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N rifampicin Chemical compound O([C@](C1=O)(C)O/C=C/[C@@H]([C@H]([C@@H](OC(C)=O)[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)\C=C\C=C(C)/C(=O)NC=2C(O)=C3C([O-])=C4C)C)OC)C4=C1C3=C(O)C=2\C=N\N1CC[NH+](C)CC1 JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N 0.000 description 1
- 229960001225 rifampicin Drugs 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 1
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
このFKI-4905物質は、微生物の培養により、あるいは化学合成により製造することができる。微生物を用いて製造するには、モルティエレラ属に属し、FKI-4905物質を生産する能力を有する微生物を培地で培養し、培養液中にFKI-4905物質を蓄積せしめ、該培養液からFKI-4905物質を採取する。使用される菌株としては、一例として、本発明者等によって土壌より分離されたMortierella alpina FKI-4905 株が挙げられる。本菌株の培養性状を示すと以下の通りである。
1.形態的特徴
本菌株は、オートミール寒天培地、麦芽汁寒天培地、改変三浦寒天培地などで良好に生育し、各種寒天培地での胞子の着生は改変三浦寒天培地でのみ良好であった。
2 .培養性状
各種寒天培地上で、25℃、7 日間培養した場合の肉眼的観察結果を次表に示す。
1)最適生育条件
本菌株の最適生育条件は、pH 6〜7 、温度12.0〜26.0℃である。
本菌株の生育範囲は、pH 5〜8 、温度5.0 〜31.0℃である。
3)好気性、嫌気性の区別
好気性
上記FKI-4095株の形態的特徴、培養性状および生理的性状に基づき、既知菌種との比較を試みた結果、本菌株はモルティエレラ・アルピナ (Mortierella alpina) に属する一菌株と同定し、モルティエレラ・アルピナFKI-4905と命名した。なお本菌株はモルティエレラ・アルピナ FKI-4905 (Mortierella alpina FKI-4905) として、独立行政法人製品評価技術基盤機構特許微生物寄託センターに寄託されている(受託番号:NITE P-705) 。
(1)性状:白色粉末
(2)分子式:C38H57O8N9
HRFAB-MS (m/z) [M+H]+ 計算値768.441,実測値768.438
(3)分子量:767
(4)紫外部吸収スペクトル:メタノール溶液中で測定した紫外部吸収スペクトルは図1に示すとおりであり、λmax (MeOH,ε): 201 (11698) nm の吸収を示す。
(5)赤外部吸収スペクトル:臭化カリウム錠剤法で測定した赤外吸収スペクトルは図2に示すとおりであり、νmax 3432, 3288, 1673, 1633, 1540, 1446cm-1等に特徴的な吸収極大を示す。
(6)比旋光度: [α] D 22 −3.12°(c=0.05、メタノール)
(7)溶剤に対する溶解性:DMSOに易溶。メタノール、水に可溶。
(8)プロトン及びカーボン核磁気共鳴スペクトル:重DMSO中で、バリアン社製400MHz核磁気共鳴スペクトロメータで測定した水素の化学シフト(ppm )及び炭素の化学シフト(ppm )は下記に示すとおりである。
δH : 0.72 (3H), 0.75 (3H), 0.77 (3H), 0.80 (3H), 1.05 (1H), 1.16 (1H), 1.17 (1H), 1.26 (1H), 1.27 (1H), 1.34 (1H), 1.66 (1H), 1.70 (2H), 1.71 (1H), 1.80 (1H), 1.84 (1H), 1.85 (1H), 2.07 (1H), 2.82 (1H), 2.96 (1H), 3.00 (1H), 3.01 (1H), 3.02 (1H), 3.14 (1H), 4.06 (1H), 4.26 (1H), 4.31 (1H), 4.36 (2H), 4.55 (1H), 7.24 (2H), 7.26 (1H), 7.30 (2H), 7.34 (1H), 7.79 (1H), 7.83 (1H), 7.92 (1H), 7.97 (1H), 8.42 (1H), 8.57 (1H), 8.79 (1H) ppm
δC : 11.6, 14.5, 21.4, 23.1, 23.8, 25.7, 27.6 (2C), 27.7, 28.8, 30.1, 31.2, 36.6, 37.3, 40.7, 40.8, 51.2, 51.4, 51.6, 52.2, 53.5, 56.2, 117.2, 127.2, 128.6 (2C), 129.5 (2C), 130.5, 134.2, 134.9, 167.9, 169.8, 170.0, 171.1, 171.5, 173.9, 174.1 ppm
(9)ニンヒドリン試薬:陽性
以上のように、FKI-4905物質の各種理化学性状やスペクトルデータを詳細に検討した結果 FKI-4905 物質は下記の式[I]で表される化学構造であることが決定された。
寒天斜面培地 (Glycerol 0.1 % (関東化学) 、KH2PO4 0.08 % ( 関東化学) 、K2HPO4 0.02 % (関東化学) 、MgSO4 ・ 7H2O 0.02 % ( 和光純薬) 、KCl 0.02 % (関東化学) 、NaNO3 0.2 % (和光純薬) 、Yeast extract 0.02% (オリエンタル酵母)、agar 1.5 %(清水食品)、pH 6.0に調製) で培養したFKI-4905株を、種培地 (グルコース 2 % (関東化学) 、ポリペプトン 0.5 % (和光純薬) 、MgSO4 ・7H2O 0.05 % ( 和光純薬) 、Yeast extract 0.2 % ( 日水製薬) 、KH2PO4 0.1 % (関東化学) 、Agar 0.1% (清水食品)pH 6.0に調整) 10 mL を分注した大試験管に一白金耳ずつ接種し、27°C で 3日間ロータリーシェイカー (210 rpm)で培養した後、生産培地 (Soluble starch 3.0 % (関東化学) 、Glycerol 1.0 % (関東化学) 、Soy Bean Meal 2.0 % (清水食品) 、Dry yeast 0.3 % ( 極東製薬) 、KCl 0.3 % (関東化学) 、CaCO3 0.2 % (関東化学) 、MgSO4 ・7H2O 0.05 % (和光純薬) 、KH2PO4 0.05 % (関東化学) pH 6.0に調整) 1 L を分注した 500 mL 容三角フラスコに 1% 植菌し、27°C で 4日間振とう培養を行った。
FKI-4905物質からのペンタペプチド誘導体の調製
FKI-4905物質 63 μg を反応容器に入れ、乾固させた後、50 %ピリジン 100μL を加え、FKI-4905物質を溶解した。次に、フェニルイソチオシアネート 5μL を加え、反応容器内を十分に窒素置換した後、ミキサーで20〜30秒間振盪し、55℃のヒーターで20分間反応させた。この反応液より過剰の試薬を200 μL のベンゼンで 3回抽出して取り除き、さらに水層をドライヤーで加熱しながら窒素ガスにより乾燥させサンプルを回収した。これを TFA 50 μL に溶解させ、反応容器内を窒素置換した後、55℃のヒーターで 5分間反応させた。窒素ガスで TFAを除去した後、蒸留水 20 μL とベンゼン 200μL に溶解させ、遠心分離し、ベンゼン層を別容器に移した。このベンゼン抽出を 2回繰り返しサンプルを回収した。これを少量のメタノールに溶解し、分取 HPLC (カラム:TSKGEL SUPER-ODS、4.6 φ× 100 mm 、東ソー)により精製を行った。移動相に10〜30 %アセトニトリル水溶液(0.05% TFA )を用いて 40 min のグラジエント条件下、0.7 mL/minの流速において、UV 210 nm の吸収をモニターした。保持時間 22 min に溶出されるピークを分取して分取液を減圧下濃縮し、ペンタペプチド誘導体を収量 13.0 μg で単離した。この際の収量は、得られたペンタペプチド誘導体の一部を加水分解し、上記で述べた絶対立体の解析と同じ方法を用いて OPA誘導体化した後 HPLC 分析することにより、含有されるアミノ酸量を標品との比較から定量することにより算出した。また、得られたペンタペプチド誘導体は、アミノ酸の組成解析により、FKI-4905物質のアミノ末端のフェニルアラニンが欠失した構造であることが判明した。
本発明のFKI-4905物質の抗結核菌活性を以下の2種類の方法で測定した。
(1)ペーパーディスク法による抗結核菌活性の測定
Middlebrook 7H9 broth (Middlebrook 7H9 broth (DIFCO) 、Polyoxyethylene(20) Sorbitan Monooleate 0.5% (和光純薬) )5 mLを入れた細胞培養用フラスコT25 (Corning)にMycobacterium smegmatis (北里大学北里生命研究所の保管株)を一白金耳植菌し、37℃、30時間静置培養した。この培養液をMiddlebrook 7H9 broth で10倍希釈(1.5 ×108 CFU/ml相当)した接種用の菌液を滅菌綿棒(川本産業社)を用いてMiddlebrook 7H9 寒天培地(Middlebrook 7H9 broth (DIFCO) 、agar 1.5% ( 清水食品) 、Polyoxyethylene(20) Sorbitan Monooleate 0.5% (和光純薬) 、ADC Enrichment 10 % (DIFCO ))に塗抹した。活性はペーパーディスク法(薄手6 mm、ADVAVTECH 社製)により評価し、37℃、30時間培養後に阻止円を測定した。
(2)液体培養法による抗結核菌活性
MIC 測定は、微量液体希釈法により行った。96穴マイクロプレートに Middlebrook 7H9 broth 90 μL /wellを分注し、あらかじめ調整しておいたサンプルの 2段階希釈系列(終濃度 0.001〜50μg /mL)を各 5μL /wellずつ分注し、さらに(1)と同じ方法により調整した接種用の菌液を5 μL /wellずつ加えて混合し、37℃、30時間培養後、菌の生育の見られない濃度を測定し MIC値を判定した。
Claims (7)
- 請求項1記載のFKI-4905物質を生産する能力を有する、モルティエレラ・アルピナ(Mortierella alpina) FKI-4905 (受託番号:NITE P-705)またはその変異株である微生物を培地に培養し、培養物中にFKI-4905物質を蓄積せしめ、該培養物からFKI-4905物質を採取することを特徴とする、FKI-4905物質の製造法。
- 前記微生物が、モルティエレラ・アルピナ(Mortierella alpina) FKI-4905 (受託番号:NITE P-705) である請求項2記載の製造法。
- 請求項1記載のFKI-4905物質を生産する能力を有する、モルティエレラ・アルピナ(Mortierella alpina) FKI-4905 (受託番号:NITE P-705)またはその変異株である微生物。
- モルティエレラ・アルピナ(Mortierella alpina) FKI-4905 (受託番号:NITE P-705) である、請求項4記載の微生物。
- 請求項1記載のFKI-4905物質を有効成分として含有する医薬。
- 請求項1記載のFKI-4905物質を有効成分として含有する抗結核薬。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2009049154A JP5478915B2 (ja) | 2009-03-03 | 2009-03-03 | 新規fki−4905物質およびその製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2009049154A JP5478915B2 (ja) | 2009-03-03 | 2009-03-03 | 新規fki−4905物質およびその製造方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2010202571A JP2010202571A (ja) | 2010-09-16 |
JP5478915B2 true JP5478915B2 (ja) | 2014-04-23 |
Family
ID=42964426
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2009049154A Active JP5478915B2 (ja) | 2009-03-03 | 2009-03-03 | 新規fki−4905物質およびその製造方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP5478915B2 (ja) |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP4022360B2 (ja) * | 2000-06-12 | 2007-12-19 | メルシャン株式会社 | 新規生理活性物質 |
AU2003203250B2 (en) * | 2003-01-17 | 2006-05-11 | The Kitasato Institute | Novel substances K01-B0171 and process for producing the same |
-
2009
- 2009-03-03 JP JP2009049154A patent/JP5478915B2/ja active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2010202571A (ja) | 2010-09-16 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5863648B2 (ja) | 新規環状ペプチド化合物とその製造方法及び感染症治療薬、抗生物質含有画分、その抗生物質及びその抗生物質の製造方法並びに抗生物質産生微生物及びそれが産生した抗生物質 | |
JP5275337B2 (ja) | 環状化合物を生産する微生物 | |
JPH06234693A (ja) | 新規イソテトラセノン系物質及びその製造法 | |
RU2482130C2 (ru) | Циклическое соединение и его соль | |
Wang et al. | Bioactive hydroxyphenylpyrrole-dicarboxylic acids from a new marine Halomonas sp.: Production and structure elucidation | |
JP5478915B2 (ja) | 新規fki−4905物質およびその製造方法 | |
CN109762046B (zh) | 环肽类抗生素及其制备方法和在制备抗结核分枝杆菌药物中的应用 | |
US7439225B2 (en) | Substances K01-B0171 and process for producing the same | |
JP5878303B2 (ja) | 抗生物質含有画分、その抗生物質及びその抗生物質の製造方法 | |
JP5823733B2 (ja) | 抗生物質産生微生物及びそれが産生した抗生物質 | |
JP4380913B2 (ja) | 新規ft−0554物質及びその製造法 | |
JP4836783B2 (ja) | 抗腫瘍剤、抗腫瘍剤の製造方法、抗腫瘍剤を含む医薬組成物、及び抗腫瘍剤産生菌 | |
CN114525224B (zh) | 一株高产抗菌活性物质macrolactinA的解淀粉芽孢杆菌及其应用 | |
WO2006101073A1 (ja) | 抗がん剤、並びに新規化合物プラナスタチンの生産菌 | |
JP5163168B2 (ja) | 新規fki−3864物質およびその製造方法 | |
JP4224404B2 (ja) | 破骨細胞分化抑制物質 | |
CN114350524A (zh) | Mycoleptodiscin型吲哚倍半萜化合物、其生物合成方法及其用途 | |
JPH03240495A (ja) | 新規生理活性物質サイクロオクタチン、その製造法およびその用途 | |
JPH04243894A (ja) | 新規q−6402化合物およびその製造法 | |
JP2004161745A (ja) | 新規発酵生産物及びその製造法 | |
JPWO2007108108A1 (ja) | 新規ステンフォン(stemphone)類の化合物及びその製造法 | |
JP2007008960A5 (ja) | ||
KR19990031527A (ko) | 신균주 곰팡이 슈달레세리아 속 mt60109(kctc 8804p)와 포스포리파제 c 활성저해용 조성물 | |
JP2005035948A (ja) | 新規生理活性物質 | |
JPS62275687A (ja) | Yp−02259l−aおよびc物質並びにその製法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20111110 |
|
RD03 | Notification of appointment of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7423 Effective date: 20130809 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20130813 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20130820 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20131003 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20140204 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20140212 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5478915 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |