JP5449774B2 - αvβ6ペプチドリガンド及びその活用 - Google Patents
αvβ6ペプチドリガンド及びその活用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5449774B2 JP5449774B2 JP2008534069A JP2008534069A JP5449774B2 JP 5449774 B2 JP5449774 B2 JP 5449774B2 JP 2008534069 A JP2008534069 A JP 2008534069A JP 2008534069 A JP2008534069 A JP 2008534069A JP 5449774 B2 JP5449774 B2 JP 5449774B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- peptide
- αvβ6
- helix
- a20fmdv2
- peptides
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims description 365
- 239000003446 ligand Substances 0.000 title description 31
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 claims description 38
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 claims description 38
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 30
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 29
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 28
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 27
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 27
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 18
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 18
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 18
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 12
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims description 10
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 claims description 9
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 8
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 6
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 claims description 6
- 206010014989 Epidermolysis bullosa Diseases 0.000 claims description 5
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 claims description 5
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims description 5
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 claims description 5
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 claims description 4
- 206010014561 Emphysema Diseases 0.000 claims description 4
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims description 4
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 claims description 3
- 230000009693 chronic damage Effects 0.000 claims description 3
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 claims description 3
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 claims description 3
- 238000002600 positron emission tomography Methods 0.000 claims description 2
- 238000002603 single-photon emission computed tomography Methods 0.000 claims description 2
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 claims 1
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 claims 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 104
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 89
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 47
- 238000000034 method Methods 0.000 description 46
- IYMAXBFPHPZYIK-BQBZGAKWSA-N Arg-Gly-Asp Chemical group NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O IYMAXBFPHPZYIK-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 39
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 38
- JTRSTHVMWOUYEU-FUDHJZNOSA-N (1,1,2-trideuterio-2,2-difluoroethyl) hypofluorite Chemical compound FOC(C([2H])(F)F)([2H])[2H] JTRSTHVMWOUYEU-FUDHJZNOSA-N 0.000 description 26
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 26
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 17
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 16
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 16
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 16
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 16
- 241000710198 Foot-and-mouth disease virus Species 0.000 description 14
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 14
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 14
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 14
- 102100037362 Fibronectin Human genes 0.000 description 13
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 13
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 13
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 13
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 13
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 12
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 12
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 12
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 12
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 12
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 12
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 11
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 11
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 10
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 10
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 10
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 10
- -1 pyrylalanine Chemical compound 0.000 description 10
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 9
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 9
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 9
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 9
- 238000003352 cell adhesion assay Methods 0.000 description 9
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 9
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 8
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 8
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 7
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 description 7
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 description 7
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 7
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 7
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 7
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 7
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 7
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 7
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 7
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical group N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 6
- 101710197658 Capsid protein VP1 Proteins 0.000 description 6
- 101710118046 RNA-directed RNA polymerase Proteins 0.000 description 6
- 101710108545 Viral protein 1 Proteins 0.000 description 6
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 6
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 6
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 6
- 230000006870 function Effects 0.000 description 6
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 6
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 6
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 6
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 6
- 230000009021 linear effect Effects 0.000 description 6
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 102100024465 Cyclin-dependent kinase 4 inhibitor C Human genes 0.000 description 5
- 101710167773 Cyclin-dependent kinase 4 inhibitor C Proteins 0.000 description 5
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 5
- 229930182831 D-valine Natural products 0.000 description 5
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 5
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 5
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 5
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 5
- 238000013461 design Methods 0.000 description 5
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 5
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 5
- 235000005772 leucine Nutrition 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 5
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 5
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 5
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 5
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- 239000012103 Alexa Fluor 488 Substances 0.000 description 4
- 108090000565 Capsid Proteins Proteins 0.000 description 4
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 4
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 4
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N actinomycin D Natural products CC1OC(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)C2CCCN2C(=O)C(C(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)NC4C(=O)NC(C(N5CCCC5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)C(C(C)C)C(=O)OC4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- 230000001745 anti-biotin effect Effects 0.000 description 4
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 4
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 4
- 230000007881 chronic fibrosis Effects 0.000 description 4
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 4
- 238000012581 double quantum filtered COSY Methods 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 4
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 4
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 4
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 4
- RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N puromycin Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C[C@H](N)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)[C@H](N2C3=NC=NC(=C3N=C2)N(C)C)O[C@@H]1CO RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N 0.000 description 4
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 4
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 238000003118 sandwich ELISA Methods 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N tioguanine Chemical compound N1C(N)=NC(=S)C2=C1N=CN2 WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000001551 total correlation spectroscopy Methods 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N (E)-dacarbazine Chemical compound CN(C)\N=N\c1[nH]cnc1C(N)=O FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 3
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 description 3
- KZSNJWFQEVHDMF-SCSAIBSYSA-N D-valine Chemical compound CC(C)[C@@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 3
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 3
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 3
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 3
- UAIXRPCCYXNJMQ-RZIPZOSSSA-N buprenorphine hydrochlorie Chemical compound [Cl-].C([C@]12[C@H]3OC=4C(O)=CC=C(C2=4)C[C@@H]2[C@]11CC[C@]3([C@H](C1)[C@](C)(O)C(C)(C)C)OC)C[NH+]2CC1CC1 UAIXRPCCYXNJMQ-RZIPZOSSSA-N 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000002983 circular dichroism Methods 0.000 description 3
- 238000001142 circular dichroism spectrum Methods 0.000 description 3
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 3
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 150000002148 esters Chemical group 0.000 description 3
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 3
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 3
- 238000000126 in silico method Methods 0.000 description 3
- APFVFJFRJDLVQX-AHCXROLUSA-N indium-111 Chemical compound [111In] APFVFJFRJDLVQX-AHCXROLUSA-N 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 3
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 3
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 3
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Substances [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002096 quantum dot Substances 0.000 description 3
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 3
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 3
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 3
- PNDPGZBMCMUPRI-HVTJNCQCSA-N 10043-66-0 Chemical compound [131I][131I] PNDPGZBMCMUPRI-HVTJNCQCSA-N 0.000 description 2
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010066676 Abrin Proteins 0.000 description 2
- 101100505161 Caenorhabditis elegans mel-32 gene Proteins 0.000 description 2
- DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N Carmustine Chemical compound ClCCNC(=O)N(N=O)CCCl DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JWBOIMRXGHLCPP-UHFFFAOYSA-N Chloditan Chemical compound C=1C=CC=C(Cl)C=1C(C(Cl)Cl)C1=CC=C(Cl)C=C1 JWBOIMRXGHLCPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 2
- 108010092160 Dactinomycin Proteins 0.000 description 2
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZCYVEMRRCGMTRW-AHCXROLUSA-N Iodine-123 Chemical compound [123I] ZCYVEMRRCGMTRW-AHCXROLUSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-Valine Natural products CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 2
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 229930192392 Mitomycin Natural products 0.000 description 2
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 2
- 101100205180 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) leu-6 gene Proteins 0.000 description 2
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 229940083963 Peptide antagonist Drugs 0.000 description 2
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 2
- 102000003728 Peroxisome Proliferator-Activated Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108090000029 Peroxisome Proliferator-Activated Receptors Proteins 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 101000762949 Pseudomonas aeruginosa (strain ATCC 15692 / DSM 22644 / CIP 104116 / JCM 14847 / LMG 12228 / 1C / PRS 101 / PAO1) Exotoxin A Proteins 0.000 description 2
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 description 2
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000251131 Sphyrna Species 0.000 description 2
- 208000000102 Squamous Cell Carcinoma of Head and Neck Diseases 0.000 description 2
- NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N Tamoxifen Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN(C)C)=CC=1)/C1=CC=CC=C1 NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 2
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 2
- 102100030859 Tissue factor Human genes 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 239000003875 Wang resin Substances 0.000 description 2
- NERFNHBZJXXFGY-UHFFFAOYSA-N [4-[(4-methylphenyl)methoxy]phenyl]methanol Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1COC1=CC=C(CO)C=C1 NERFNHBZJXXFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000370 acceptor Substances 0.000 description 2
- RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N actinomycin D Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)N[C@@H]4C(=O)N[C@@H](C(N5CCC[C@H]5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 2
- 108010072041 arginyl-glycyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 2
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- 238000004422 calculation algorithm Methods 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 description 2
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 2
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 2
- 229960000640 dactinomycin Drugs 0.000 description 2
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- MWRBNPKJOOWZPW-CLFAGFIQSA-N dioleoyl phosphatidylethanolamine Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCCN)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC MWRBNPKJOOWZPW-CLFAGFIQSA-N 0.000 description 2
- 125000002228 disulfide group Chemical group 0.000 description 2
- 238000009510 drug design Methods 0.000 description 2
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- ODKNJVUHOIMIIZ-RRKCRQDMSA-N floxuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(F)=C1 ODKNJVUHOIMIIZ-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- 229940055742 indium-111 Drugs 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 125000000741 isoleucyl group Chemical group [H]N([H])C(C(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[H])C(=O)O* 0.000 description 2
- 239000002655 kraft paper Substances 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N mechlorethamine Chemical class ClCCN(C)CCCl HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 2
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 2
- 239000002159 nanocrystal Substances 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 238000012585 nuclear overhauser effect spectroscopy experiment Methods 0.000 description 2
- 201000002740 oral squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 2
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 2
- 230000010287 polarization Effects 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 2
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 2
- 238000002731 protein assay Methods 0.000 description 2
- 229950010131 puromycin Drugs 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 2
- 238000001896 rotating frame Overhauser effect spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 239000004065 semiconductor Substances 0.000 description 2
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 2
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 2
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 229960001052 streptozocin Drugs 0.000 description 2
- ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N streptozocin Chemical compound O=NN(C)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 229960003087 tioguanine Drugs 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000002096 two-dimensional nuclear Overhauser enhancement spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 229960004295 valine Drugs 0.000 description 2
- 235000014393 valine Nutrition 0.000 description 2
- JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N vincaleukoblastine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 2
- CWJVOJLSSAJVAZ-QMMMGPOBSA-N (2s)-2-(fluoroamino)-3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](NF)CC1=CC=C(O)C=C1 CWJVOJLSSAJVAZ-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- IYKLZBIWFXPUCS-VIFPVBQESA-N (2s)-2-(naphthalen-1-ylamino)propanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(N[C@@H](C)C(O)=O)=CC=CC2=C1 IYKLZBIWFXPUCS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- WNNNWFKQCKFSDK-BYPYZUCNSA-N (2s)-2-aminopent-4-enoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC=C WNNNWFKQCKFSDK-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- GTVVZTAFGPQSPC-QMMMGPOBSA-N (2s)-2-azaniumyl-3-(4-nitrophenyl)propanoate Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 GTVVZTAFGPQSPC-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- BWKMGYQJPOAASG-VIFPVBQESA-N (3s)-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-3-carboxylic acid Chemical compound C1=CC=C2CN[C@H](C(=O)O)CC2=C1 BWKMGYQJPOAASG-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- FPVKHBSQESCIEP-UHFFFAOYSA-N (8S)-3-(2-deoxy-beta-D-erythro-pentofuranosyl)-3,6,7,8-tetrahydroimidazo[4,5-d][1,3]diazepin-8-ol Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NCC2O)=C2N=C1 FPVKHBSQESCIEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DHBXNPKRAUYBTH-UHFFFAOYSA-N 1,1-ethanedithiol Chemical compound CC(S)S DHBXNPKRAUYBTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BWKMGYQJPOAASG-UHFFFAOYSA-N 1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-3-carboxylic acid Chemical compound C1=CC=C2CNC(C(=O)O)CC2=C1 BWKMGYQJPOAASG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100025573 1-alkyl-2-acetylglycerophosphocholine esterase Human genes 0.000 description 1
- WUAPFZMCVAUBPE-NJFSPNSNSA-N 188Re Chemical compound [188Re] WUAPFZMCVAUBPE-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- LKSDEJBJXXZASB-WCCKRBBISA-N 2,2-diaminobutanoic acid;(2s)-2,5-diaminopentanoic acid Chemical compound CCC(N)(N)C(O)=O.NCCC[C@H](N)C(O)=O LKSDEJBJXXZASB-WCCKRBBISA-N 0.000 description 1
- WTOFYLAWDLQMBZ-UHFFFAOYSA-N 2-azaniumyl-3-thiophen-2-ylpropanoate Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=CS1 WTOFYLAWDLQMBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CTRPRMNBTVRDFH-UHFFFAOYSA-N 2-n-methyl-1,3,5-triazine-2,4,6-triamine Chemical compound CNC1=NC(N)=NC(N)=N1 CTRPRMNBTVRDFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004466 2D NOESY spectrum Methods 0.000 description 1
- KWYLVDGOCQSPDM-UHFFFAOYSA-N 3,7-dihydropurine-6-thione Chemical class SC1=NC=NC2=C1NC=N2.S=C1N=CNC2=C1NC=N2 KWYLVDGOCQSPDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BBYDXOIZLAWGSL-COJKEBBMSA-N 4-fluoranylbenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C([18F])C=C1 BBYDXOIZLAWGSL-COJKEBBMSA-N 0.000 description 1
- XDOLZJYETYVRKV-UHFFFAOYSA-N 7-Aminoheptanoic acid Chemical compound NCCCCCCC(O)=O XDOLZJYETYVRKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-OUBTZVSYSA-N Ammonia-15N Chemical compound [15NH3] QGZKDVFQNNGYKY-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 108010024976 Asparaginase Proteins 0.000 description 1
- 238000012935 Averaging Methods 0.000 description 1
- NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N Aziridine Chemical compound C1CN1 NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 1
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-OUBTZVSYSA-N Carbon-13 Chemical compound [13C] OKTJSMMVPCPJKN-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- 101710094648 Coat protein Proteins 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 102100021906 Cyclin-O Human genes 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 150000008573 D-valines Chemical class 0.000 description 1
- 125000003625 D-valyl group Chemical group N[C@@H](C(=O)*)C(C)C 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- WEAHRLBPCANXCN-UHFFFAOYSA-N Daunomycin Natural products CCC1(O)CC(OC2CC(N)C(O)C(C)O2)c3cc4C(=O)c5c(OC)cccc5C(=O)c4c(O)c3C1 WEAHRLBPCANXCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 1
- 241000275449 Diplectrum formosum Species 0.000 description 1
- 241000274553 Eggplant mottled dwarf nucleorhabdovirus Species 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108050001049 Extracellular proteins Proteins 0.000 description 1
- 229910052688 Gadolinium Inorganic materials 0.000 description 1
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 102100021181 Golgi phosphoprotein 3 Human genes 0.000 description 1
- 101000897441 Homo sapiens Cyclin-O Proteins 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- 206010061216 Infarction Diseases 0.000 description 1
- 108010047852 Integrin alphaVbeta3 Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N L-2-aminopentanoic acid Chemical compound CCC[C@H](N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ZGUNAGUHMKGQNY-ZETCQYMHSA-N L-alpha-phenylglycine zwitterion Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)C1=CC=CC=C1 ZGUNAGUHMKGQNY-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- UCUNFLYVYCGDHP-BYPYZUCNSA-N L-methionine sulfone Chemical compound CS(=O)(=O)CC[C@H](N)C(O)=O UCUNFLYVYCGDHP-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- UCUNFLYVYCGDHP-UHFFFAOYSA-N L-methionine sulfone Natural products CS(=O)(=O)CCC(N)C(O)=O UCUNFLYVYCGDHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N L-norVal-OH Natural products CCCC(N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DZLNHFMRPBPULJ-VKHMYHEASA-N L-thioproline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CSCN1 DZLNHFMRPBPULJ-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 125000003580 L-valyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])[H] 0.000 description 1
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 description 1
- GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N Lomustine Chemical compound ClCCN(N=O)C(=O)NC1CCCCC1 GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 1
- 101710125418 Major capsid protein Proteins 0.000 description 1
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000005741 Metalloproteases Human genes 0.000 description 1
- 108010006035 Metalloproteases Proteins 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 101710081079 Minor spike protein H Proteins 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012565 NMR experiment Methods 0.000 description 1
- 101710141454 Nucleoprotein Proteins 0.000 description 1
- PEMUHKUIQHFMTH-UHFFFAOYSA-N P-Bromo-DL-phenylalanine Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=C(Br)C=C1 PEMUHKUIQHFMTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-OUBTZVSYSA-N Phosphorus-32 Chemical compound [32P] OAICVXFJPJFONN-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 101710083689 Probable capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 101800004937 Protein C Proteins 0.000 description 1
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 1
- 206010038997 Retroviral infections Diseases 0.000 description 1
- 108090000829 Ribosome Inactivating Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000220317 Rosa Species 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 101800001700 Saposin-D Proteins 0.000 description 1
- 102400000827 Saposin-D Human genes 0.000 description 1
- ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N Streptozotocin Natural products O=NN(C)C(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GKLVYJBZJHMRIY-OUBTZVSYSA-N Technetium-99 Chemical compound [99Tc] GKLVYJBZJHMRIY-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- FOCVUCIESVLUNU-UHFFFAOYSA-N Thiotepa Chemical compound C1CN1P(N1CC1)(=S)N1CC1 FOCVUCIESVLUNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 229940122803 Vinca alkaloid Drugs 0.000 description 1
- 108010031318 Vitronectin Proteins 0.000 description 1
- 102100035140 Vitronectin Human genes 0.000 description 1
- VWQVUPCCIRVNHF-OUBTZVSYSA-N Yttrium-90 Chemical compound [90Y] VWQVUPCCIRVNHF-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- KRHYYFGTRYWZRS-BJUDXGSMSA-N ac1l2y5h Chemical compound [18FH] KRHYYFGTRYWZRS-BJUDXGSMSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 210000004404 adrenal cortex Anatomy 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940045714 alkyl sulfonate alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 150000008052 alkyl sulfonates Chemical class 0.000 description 1
- 229960000473 altretamine Drugs 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940124277 aminobutyric acid Drugs 0.000 description 1
- ROBVIMPUHSLWNV-UHFFFAOYSA-N aminoglutethimide Chemical compound C=1C=C(N)C=CC=1C1(CC)CCC(=O)NC1=O ROBVIMPUHSLWNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003437 aminoglutethimide Drugs 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- RGHILYZRVFRRNK-UHFFFAOYSA-N anthracene-1,2-dione Chemical class C1=CC=C2C=C(C(C(=O)C=C3)=O)C3=CC2=C1 RGHILYZRVFRRNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940045799 anthracyclines and related substance Drugs 0.000 description 1
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 description 1
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 description 1
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-L aspartate group Chemical group N[C@@H](CC(=O)[O-])C(=O)[O-] CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-L 0.000 description 1
- 239000005441 aurora Substances 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000013357 binding ELISA Methods 0.000 description 1
- 230000004791 biological behavior Effects 0.000 description 1
- 230000008512 biological response Effects 0.000 description 1
- 238000007413 biotinylation Methods 0.000 description 1
- 230000006287 biotinylation Effects 0.000 description 1
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 description 1
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 229960002092 busulfan Drugs 0.000 description 1
- 235000013877 carbamide Nutrition 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960004562 carboplatin Drugs 0.000 description 1
- 190000008236 carboplatin Chemical compound 0.000 description 1
- 229960005243 carmustine Drugs 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 235000015218 chewing gum Nutrition 0.000 description 1
- 229960004630 chlorambucil Drugs 0.000 description 1
- JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N chlorambucil Chemical compound OC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 238000005100 correlation spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 229960000684 cytarabine Drugs 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 210000004292 cytoskeleton Anatomy 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 229960003901 dacarbazine Drugs 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 229940124447 delivery agent Drugs 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000368 destabilizing effect Effects 0.000 description 1
- AQEFLFZSWDEAIP-UHFFFAOYSA-N di-tert-butyl ether Chemical compound CC(C)(C)OC(C)(C)C AQEFLFZSWDEAIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002050 diffraction method Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- BIPRZBFRCFOBDQ-KAGUSELOSA-N dnc008567 Chemical compound NC(=N)NCCC[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C BIPRZBFRCFOBDQ-KAGUSELOSA-N 0.000 description 1
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 210000001339 epidermal cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008508 epithelial proliferation Effects 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 1
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 229960002074 flutamide Drugs 0.000 description 1
- MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N flutamide Chemical compound CC(C)C(=O)NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C(C(F)(F)F)=C1 MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N gadolinium atom Chemical compound [Gd] UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005251 gamma ray Effects 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 1
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 1
- UUVWYPNAQBNQJQ-UHFFFAOYSA-N hexamethylmelamine Chemical compound CN(C)C1=NC(N(C)C)=NC(N(C)C)=N1 UUVWYPNAQBNQJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 description 1
- 229960001101 ifosfamide Drugs 0.000 description 1
- HOMGKSMUEGBAAB-UHFFFAOYSA-N ifosfamide Chemical compound ClCCNP1(=O)OCCCN1CCCl HOMGKSMUEGBAAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 229940124452 immunizing agent Drugs 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000007574 infarction Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229940030980 inova Drugs 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-YPZZEJLDSA-N iodane Chemical compound [125IH] XMBWDFGMSWQBCA-YPZZEJLDSA-N 0.000 description 1
- 229940044173 iodine-125 Drugs 0.000 description 1
- 238000005040 ion trap Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000002614 leucines Chemical class 0.000 description 1
- 108020001756 ligand binding domains Proteins 0.000 description 1
- 229960002247 lomustine Drugs 0.000 description 1
- 229940066294 lung surfactant Drugs 0.000 description 1
- 239000003580 lung surfactant Substances 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000000816 matrix-assisted laser desorption--ionisation Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229960004961 mechlorethamine Drugs 0.000 description 1
- 229960001924 melphalan Drugs 0.000 description 1
- SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N melphalan Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N mithramycin Chemical compound O([C@@H]1C[C@@H](O[C@H](C)[C@H]1O)OC=1C=C2C=C3C[C@H]([C@@H](C(=O)C3=C(O)C2=C(O)C=1C)O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2O[C@H](C)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]3O[C@H](C)[C@@H](O)[C@@](C)(O)C3)C2)C1)[C@H](OC)C(=O)[C@@H](O)[C@@H](C)O)[C@H]1C[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O1 CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N 0.000 description 1
- 229960000350 mitotane Drugs 0.000 description 1
- 229960001156 mitoxantrone Drugs 0.000 description 1
- KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N mitoxantrone Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCCNCCO)=CC=C2NCCNCCO KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 239000002324 mouth wash Substances 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- OSTGTTZJOCZWJG-UHFFFAOYSA-N nitrosourea Chemical compound NC(=O)N=NO OSTGTTZJOCZWJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091027963 non-coding RNA Proteins 0.000 description 1
- 102000042567 non-coding RNA Human genes 0.000 description 1
- 230000036963 noncompetitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N octane Chemical compound CCCCCCCC TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 1
- 229960002340 pentostatin Drugs 0.000 description 1
- FPVKHBSQESCIEP-JQCXWYLXSA-N pentostatin Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(N=CNC[C@H]2O)=C2N=C1 FPVKHBSQESCIEP-JQCXWYLXSA-N 0.000 description 1
- 239000000816 peptidomimetic Substances 0.000 description 1
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 1
- 150000002993 phenylalanine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940097886 phosphorus 32 Drugs 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 230000010399 physical interaction Effects 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960003171 plicamycin Drugs 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 229960000624 procarbazine Drugs 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000000358 protein NMR Methods 0.000 description 1
- 229960000856 protein c Drugs 0.000 description 1
- 208000005069 pulmonary fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000010453 quartz Substances 0.000 description 1
- 238000000163 radioactive labelling Methods 0.000 description 1
- 238000001525 receptor binding assay Methods 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- WUAPFZMCVAUBPE-IGMARMGPSA-N rhenium-186 Chemical compound [186Re] WUAPFZMCVAUBPE-IGMARMGPSA-N 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicon dioxide Inorganic materials O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005476 size effect Effects 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 229960001603 tamoxifen Drugs 0.000 description 1
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 1
- 229940056501 technetium 99m Drugs 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N teniposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@@H](OC[C@H]4O3)C=3SC=CC=3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N 0.000 description 1
- 229960001278 teniposide Drugs 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 150000003568 thioethers Chemical class 0.000 description 1
- 229960001196 thiotepa Drugs 0.000 description 1
- FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N trans-L-hydroxy-proline Natural products ON1CCCC1C(O)=O FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005026 transcription initiation Effects 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N tri(propan-2-yl)silicon Chemical compound CC(C)[Si](C(C)C)C(C)C ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003918 triazines Chemical class 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 1
- 150000003672 ureas Chemical class 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 150000003680 valines Chemical class 0.000 description 1
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 description 1
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-OUBTZVSYSA-N water-17o Chemical compound [17OH2] XLYOFNOQVPJJNP-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/08—Linear peptides containing only normal peptide links having 12 to 20 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Brunger et al, (1998) Acta Crystallogr. D Biol. Crystallogr., 54 (Pt 5), 905-921. Cavanagh, J., Fairbrother, W. J., Palmer, A. G.r and Skelton, N. J. (1996) Protein NMR Spectroscopy: Principles and Practice, Academic Press, London. Delaglio et al, (1995) J. Biorαol. NMR 6, 277-293. Forood et al, (1993) "Stabilization of α-helical structures in short peptides via end capping." Proc. Natl Acad. Sci. 90: 838- 842. Guex & Peitsch, (1997) Electrophoresis 18, 2714-2723. Johnson & Blevins, (1994) Journal of Biomolecular NMR 4, 603- 614. Klein et al, (2005). J. Biol. Chem. 280, 5682-5692. Koradi et al, (1996) J. MoI. Graph. 14, 51-55. Khandelwal et al, Eur. J. Biochem. 264, 468-478. Laskowski et al, (1996) J Biomol NMR 8, 477-486. van Gunsteren et al, (1994) in Methods in Bnzymology: Nuclear Magnetic Resonance (James, T. L., and Oppenheimer, N. J., eds) Vol. 239, pp. 619-654, Academic Press, New York. Yan et al, (2003) . J. Magn. Reson. 163, 270-276.
本発明は、配列モチーフRGDLX5X6LまたはRGDLX5X6Iを含むペプチドリガンドの使用に関係し、ここでLX5X6LまたはLX5X6Iはαヘリックス構造内に含まれる。他に特に規定がなければ、本明細書のアミノ酸の位置は、ペプチドのN末端からC末端にかけて番号がつけられる。
レトロウィルス感染は、本研究で用いるαvβ6ポジティブ及びネガティブ細胞株を作製するために利用された。マウス3T3繊維芽細胞並びにヒト黒色腫細胞株A375P及びDX3は、3T3β6puro、A375Pβ6puro及びDX3β6puroを作製するために、ヒトb6及びピューロマイシン耐性遺伝子をコードするレトロウィルスによって感染された(Thomas et al; J Invest Dermatol.116(6) :898-904, 2001)。コントロール細胞はピューロマイシンのみを発現した(A375Ppuro細胞並びに、しばしば3T3β6.19またはNIH3T3β6.19と呼ばれる、3T3β6puroのコントロールとして供されるDX3puro親細胞3T3細胞)。
VB6は、αvβ6を高発現している口腔扁平上皮癌(Thomas et al, 2001)であり、V(+)B2は、αvβ1を高発現しているヒト黒色腫である(Marshall et al 1995)。さまざまなマウスモノクローナル抗体を用いた。αvβ3(LM609)、αvβ6(10D5)及びa5(P1D6)に対しての抗体をChemicon International(emecula CA.,USA)から購入した。63G9(抗αvβ6)及び37E1(抗αvβ8)、P2W7(抗αv;所内作製)、L230(抗αv;ATCCより)、P1F6(抗αvβ5;Dr Dean Sheppardより譲受)及びA2B2(抗β1;Developmental hybridomaより購入)は、それぞれハイブリドーマから所内で作製した。フィブロネクチン(F2006;Sigma Aldrich)を、メーカーの使用説明書に従って、キット(Amersham International,UK)を用いてビオチニル化した。他の全ての試薬は、特に明記しない限り、Sigma Aldrichより購入した。
CHOβ細胞を10%ウシ胎仔血清(FCS)が添加されたRPMI培地で80−90%の密集度で培養し、低血清培地(LowSM;RPMI(0.5%(v/v)FCS)で一度洗浄し、LowSMで48時間インキュベーションした。細胞残屑は982gで遠心分離によって馴化培地から除去し、0.1%(w/v)アジ化ナトリウムを腐剤として添加した。馴化培地を(300倍まで)濃縮し、同時にカットオフが100kDa(ミリポア)のCentricon Plus−80遠心フィルター器具を用いて、PBSでダイアフィルターした。メーカーの使用説明書に従ってCarbolinkキット(Perbio Science UK Ltd)を用いるグラビティーフローアガロースビーズカラムで7mlに、マウスモノクローナル抗αv抗体L230(カップリングバッファー0.1Mリン酸ナトリウムバッファー、PH7.0において)を共役させることによって作製したイムノアフィニティーカラムに、この濃縮物を加えた。組換可溶αvβ6(rsαvβ6)を、100mM、pH2.5−3.0のグリシンで溶出し、2mlのフラクションごとに1M、pH7.5のTrisを300μl添加することにより、即座に中和した。ピークフラクションを、280nmの吸光度にしたがって選択し、カットオフが50kDa(ミリポア)の公称分子重量を持つAmicon Ultra−15遠心フィルター器具(NMWCO)を用いて、PBSで透析した。溶出したタンパク質の純度をSDS−PAGEにより決定し、その濃度を、BSAスタンダードを用いて、BioRadのDCプロテイン濃縮アッセイによって決定した。rsαvβ6の機能保全(functional integrity)を、96ウェルプレートに固定化したフィブロネクチン及び潜在型結合ペプチド(LAP)(αvβ6リガンド)に結合するインテグリンを示すことにより、確認した。
ECMリガンドでコーティングされた96ウェルフレキシブルプレートへの、[51Cr]でラベルされた細胞の接着は、以前より記載されている(Thomas et al, 2001)。手短に言えば、プレートをLAP(NIH3T3β6.19に対して0.25μg/ml、VB6に対して0.5μg/ml)またはビトロネクチン(10μg/ml;BD Bioscience,Oxford,UK)でコーティングした。細胞を40分間(VB6、NIH3T3β6.19)または60分間(V+B2)接着を可能にさせた後に、プレートを陽イオン(0.5mM Mg2+、1mM Ca2+)を添加したPBSで2度洗浄した。プレートをハサミで切り、各ウェルの放射能を、Wizard1470自動ガンマ線測定器(PerkinElmer,Boston,MA,USA)で定量化した。接着率は、次式のとおり、各ウェルと相関する残留放射能を、細胞に最初にインプットした細胞の放射能と比較することにより計算した。
接着率(%)=ウェルの残留放射能(cpm)X100/インプットした放射能(cpm)
96ウェルプレート(Immulon IB,Thermo LifeSciences)を、PBSに10μg/mlのP2W7を添加して、4℃で一晩、コーティング後、PBSで洗浄する前に、PBSに2%(w/v)のカゼインを添加して、インキュベーションによりブロッキングした。その後のすべての洗浄には洗浄バッファー(20mM Tris、150mM NaCl、1mM MnCl2)を用い、その後のすべてのインキュベーションは、コンジュゲートバッファー(1%カゼイン、20mM Tris、150mM NaCl、1mM MnCl2)で行った。ウェルをrsαvβ6で1時間インキュベーションし、洗浄後、ペプチド及び2μg/mlのビオチニル化したフィブロネクチンのプレミックス溶液にエクスポーズした。結合したビオチニル化したフィブロネクチンを、エクストラアビジンHRP(SIGMA)で、1:1000の希釈で検出し、TMB+システム(DAKO)を用いて現像した。アッセイを、Tecan GENiosプレートリーダーで、A450nmの吸光度を測定することにより定量化した。全てのデータは、各プレートにおいてビオチニル化したフィブロネクチンの標準曲線によって確認され、線形範囲(linear range)内にあった。
細胞株におけるインテグリンの発現を、以前記載されたように(Marshall et al . , 1995)、フローサイトメトリーによって評価した。手短に言えば、細胞懸濁液を、10μg/mlの抗インテグリン抗体またはさまざまな濃度のビオチニル化したペプチドで、インキュベーションした。4℃で45分後、細胞を洗浄し、結合した抗体/ペプチドを、マウス抗ビオチン(1:100、Stratech,UK)で30分のインキュベーションを行った後、Alexafluor488標識抗マウスIgG(終濃度1:500、Molecular Probes)またはストレプトアビジン−FITC(終濃度1:200)でそれぞれさらに30分間インキュベーションした後に検出した。サンプルあたり10,000事象を検出するCellQuestソフトウェアが適合されたFACScan(Becton−Dickinson)で細胞を解析した。
ペプチドは、標準的な固相ペプチド合成法を用いて、Cancer Research UK Peptide Synthesis laboratoryで合成された。手短に言えば、保護アミノ酸及びプレロードするワング樹脂を、Calbiochem−Novabiochem(Nottingham,UK)より手に入れた。溶媒及びHBTU[3−テトラメチルウロニウム3,1,−1,2−(1H−ベンゾトリアゾール−1−イル)ヘキサフルオロリン酸塩]は、アプライドバイオシステムズ社(Warrington,UK)より手に入れた。ベーシックフィードバックモニターサイクル及びカップリング試薬としてのHBTUを用いて、プレロードしたワング樹脂上で、アップデートしたモデル431A及び433Aアプライドバイオシステムズ社の固相ペプチド合成機により、このペプチドを合成した。9−フルオレニルメチルオキシカルボニルは、一時的なa−アミノ基の保護に用いられ、ピペリジンを用いて除去した。側鎖の保護基は、Lysに対してはtert−ブチルオキシカルボニルであり、His、Asn及びGlnに対してはトリチルであり、Argに対しては2,2,5,7,8−ペンタメチルクロマン−6−スルホニルであり、Glu及びAspに対してはtert−ブチルエステルであり、Thr、Ser及びTyrに対してはtert−ブチルエーテルである。
濃度25mMリン酸及び濃度100mM生理食塩水を加えた、2mM、PH6.4のリン酸緩衝生理食塩水(PBS)に、精製し凍結乾燥させたペプチドを、Shigemi社BMS005V NMRチューブで使用できるよう溶解することにより、全てのNMR用サンプルを、最終容量300μlに調整した。構造研究用に、トリフルオロエタノール−d3(TFE)を、30%(v/v)の終濃度を提供できるように、ヘリックス安定剤として加えた。飽和移動差NMR(STD NMR)のサンプルを、追加成分(28μMのインテグリンαvβ6、0.5mM、Mg2+(MgCl2として添加)及び1.0mM Ca2+(CaCl2として添加))を加えて同様に調整した。STD NMRサンプルはTFEを含まなかった。
全ての実験を、標準的な手順を用いるz−shielded gradient triple共鳴プローブを用いて、Varian Unity社製INOVA600MHzのNMRスペクトロメータで記録した。型構造物実験は各ペプチドサンプルに対して10℃で行い、それにはtwo−dimensional(2D)nuclear Overhauser effect spectroscopy(NOESY)、total correlation spectroscopy(TOCSY)及びrotating frame Overhauser effect spectroscopy(ROESY)実験(それぞれミキシング時間を250、70.0及び100msで記録した)が含まれた。これらの実験は、1H次元で間接的及び直接的にそれぞれ収集される64及び128msの収集時間における、512及び1024ポイント(complex point)において収集された。さらに、二量子フィルターによる相関分光法(DQFCOSY)実験では、各ペプチドについて10℃で、1H次元で間接的及び直接的にそれぞれ収集される、128及び256msの収集時間における1024及び2048ポイント(complex point)において収集された。アミドプロトンの遅い置換が、50msのミキシング時間でのNOESY実験(1H次元で間接的及び直接的にそれぞれ収集される、16及び128msの収集時間における、128及び1024ポイント(complex point)において、それぞれ収集された)でのフィンガープリント領域より検出された。データの処理及び解析は、処理用にはNMRPipe(Delaglio et al, 1995)上で、並びに計算された構造を見るためにはNMRView (Johnson and Blevins, 1994)を用いる、Sun Blade100、Silicon Graphic Octane2及びTranstec X2100 Linux workstationsで行った。飽和移動差NMR(STD NMR)実験は、標準的な飽和移動実験装置を用いて、Mayer及びMeyer(それぞれ1999年、2001年)によって記載されたように、ただしYanなどによって2003年に記載されたようにハーンエコーフィルターを組み入れて、行った。STD差異データは、30msのハーンエコーフィルター長並びに、全てのデータポイント並びに、8192及び16384での一時的なデータポイントをそれぞれ用いて、6000Hzの分光幅で25℃において得られた。オンレゾナンス照射は−2.5ppmでありオフレゾナンス照射は−70.0ppmであった。照射は、連続した9.4msのガウスパルスを用いて作動され、各パルスは、1.7ms遅れることによって分離される各パルスと、100Hzの帯域幅を持っていた。全パルス列は2.0s間作動された。STD NMRの転送データのアサインメントを可能にするため、ペプチド配置(peptide assignment)を、25℃で得られた、(2D)nuclear Overhauser effect spectroscopy(NOESY)、total correlation spectroscopy(TOCSY)及びrotating frame Overhauser effect spectroscopy(ROESY)実験より作成した。レゾナンスの体積積分(resonance volume integral)は、SUN UNIX(登録商標)ワークステーションを動作させるVNMRソフトウェア、並びに71.4を超えるリガンドを用いるSTD増幅係数を得るためにMayer及びMeyer(2001年)によって概説された方法に従って解析されたデータ、を用いて得られた。個別の拡散係数は、各残基に対しての各1Hレゾナンスからの拡散係数の和により、各アミノ酸残基について得られた。残基増幅係数を、最も高い残基係数(つまり100%)と比較可能とするために、残基のSTD増幅係数の百分率に変換した。
CDスペクトルは、NMRでの研究で用いたものと同一でTFE(0−50%(v/v))を含んでいるバッファーにおいて、0.4mM濃度のペプチドを用いて、室温で、Jasco社J−600分光偏光計上で記録した。各溶液を5mmの長さ(path length)の石英キュベットにロードし、各スペクトルは、190から260nm間の範囲で4回スキャンしたときの平均値から算出したが、それらを、20nm/分の速さ、1nmの帯域幅、2sの応答、0.2nmの分解能で記録した。このスペクトルは、ベースライン補正なしで示す。分光偏光計により得られたOD値を、楕円率に変換し、並びにJ−700ウインドウ標準解析(v.1.50.01)ソフトウェアによって相対的なペプチド濃度に合致させた。3つの波長、222、208及び192nmでの楕円率の値を、Foroodなど(1993年)により記載された手法を用いて、TFE濃度(0−50%(v/v))間での各ペプチドに対して得られる平均楕円率(平均値q)に変換した。
全ての構造計算は、シリコングラフィックス社Octane2及びTranstec社X2100リナックスワークステーション(Brunger et al, 1998)上で作動する結晶学及びNMRシステム(CNS)バージョン1.1を用いて取得した。伸長され、及び折畳まれた、前駆体の両方からの拘束を伴う動的アニーリングを行うための、平均化する和を、標準的なCNS NMRアニールプロトコルを用いることにより、伸長された座標から計算された、最終構造が2.5−5.0Åの間の幅広い分類の中に、全てのNOE及びROEの接触(contact)を、分類した。各ペプチドに対しての40個の構造の最終的な構造アンサンブルは、構造的な情報の統計的エネルギー及び標準偏差(r.m.s)を算出するのに用いられる全ての構造とともに算出された。骨格及び重原子のr.m.sの偏差値は、MOLMOLバージョン2k.2(Koradi et al, 1996)を、PC、Microsoft Windows(登録商標)2000を動作させることにより得られた。各アンサンブルの構造的なインテグリティ(integrity)は、Transtec社X2100リナックスワークステーション上で動作する、PROCHECK−NMR(Laskowski et al, 1996)を用いて評価した。CNSで作製される構造アンサンブル間のエネルギー比較を、DEEPVIEWバージョン3.7(Guex and Peitsch, 1997)内でのGROMOS96 43Blパラメーターセット(van Gunsteren, 1994)を用いることにより行った。
αvβ6リガンド由来ペプチドがDLXXLに必要なことを確認
インテグリンαvβ6は、ある程度、このペプチドのモチーフであるRGD(Arg−Gly−Asp)の認識を介して、このリガンドに結合する。インテグリンαvβ6のリガンドには、本発明者たちが高い選択性を持つαvβ6接着リガンドであることを発見したTGFβ潜在型結合ペプチド(LAP)、並びにフィブロネクチン並びに口蹄疫ウィルス(FMDV)を含むある種のウィルスが含まれる。それ故に、本発明者たちは、必要なRGDモチーフが含まれた、既知のαvβ6リガンド由来の、並びにLAP及びFMDV(DD1−DD19)の2つの血清型由来の、重複した7−12merの直鎖ペプチドを調べることを選択した。初期研究では、このペプチドを、腫瘍細胞3T3β6.19及びVB6のLAPに対してのαvβ6依存的な接着の阻害能力を調べるために、500μMの濃度で試験した。最も有効なペプチドは、以前に重要性が発見されていた、配列DLXXL(あるいは類似のDLXXI)を持つペプチドであることが示された(Kraft et al, J Biol Chem. Jan 22; 274 (4) : 1979-85. 1999)。
より長いペプチドまたは、少なくともRGDモチーフのC末により多くの残基を持つペプチドは、N末に配列を付加したペプチドに比べて、αvβ6依存的な接着に対して、より効果的な阻害剤となることが示唆された。この可能性を調査するために、本発明者たちは、LAPβ1(A20LAP)及び口蹄疫ウィルスの血清型C−S8c1(A20FMDV1−Mateu et al.,1996)及びO1BFS(A20FMDV2−Logan et al., 1993)由来の、伸長したC末領域を持つ20merのペプチドを作り出し、実験を繰返した。
伸長させたC末配列が、抗αvβ6ペプチドの有効性を増加させるという仮説を調査するために、A20LAPのαvβ6特異的な活性を、同じペプチドの短いバージョンである、DD1,2,3と比較した。A20LAPは、LAPでコーティングしたプレートでの3T3β6.19のαvβ6依存的な細胞接着阻害について、有意により有効であった。それ故に、A20LAP、DD1及びDD3のRGDのアミノ酸C末の数は、それぞれ11、5及び4であり、これはペプチドの効力順を再現する。上述したのを受けて、20μMのA20LAP、DD1及びDD3の存在時には、LAPとの3T3β6.19の接着は、それぞれ、コントロールの細胞接着の32±7%、57±4%及び79±22%だけであった。さらに、この実験は、別の細胞株、VB6を用いて繰返した。VB6は、αvβ6を高発現しているヒト口腔扁平上皮癌である(Thomas et al, 2001b)。したがって、ヒトαvβ6がもっぱら天然の上皮環境で発現されているので、より適したモデルである。3T3β6.19と同様に、LAPとのVB6の接着は、αvβ6阻害抗体63G9により無効になり、それ故にもっぱらαvβ6依存的と考えられる。アッセイ中のバラツキによる定量の困難さの一方で、3T3β6.19で見られたのと同じ傾向が、VB6を用いたアッセイでも広く観察できる。上述したように、100μMのDD1、DD2及びDD3では、LAPとのVB6の接着に関する効果はほとんどないが、しかし一方で、より長いペプチドA20LAPは、この濃度での細胞接着を完全に阻害する。
この傾向が、別のプロテインアッセイでも再現できるか確認するために、競合的なサンドイッチELISAを行った。手短に言えば、96ウェルプレートは、4℃で一晩インキュベーションすることにより、抗αv抗体P2W7でコーティングした。残存した非特異的な結合部位は、2%(w/v)カゼイン入りのPBS溶液でインキュベーションすることにより阻害した。ウェルは、その後rsαvβ6でインキュベーションした後、洗浄し、ビオチニル化したフィブロネクチン及びペプチドのプレミックス溶液にエクスポーズした。結合した、ビオチニル化したフィブロネクチンは、ペルオキシダーゼ共役エクストラアビジンで検出した。9点の用量反応曲線を、7つの濃度のぺプチド及びポジティブコントロール及びネガティブコントロールを用いて作成し、GraphPad Prismソフトウェアでのシグモイドカーブフィットモデルを用いてIC50の濃度を決定した。
3つの20merのペプチドA20LAP、A20FMDV1及びA20FMDV2は、αvβ6依存的な細胞接着の阻害のために評価された。多種多様なペプチド濃度を、阻害カーブを作成するために用い、その阻害カーブより、下表で示すように、Prismソフトウェアを用いてIC50値を計算した。3T3β6.19とVB6の両アッセイにおいて、A20FMDV2が最も有効なαvβ6依存的な細胞接着の阻害剤であり、A20LAPがそれに続いた。A20FMDV1は両アッセイにおいて最も効果の弱い阻害剤であった。それ故に、予測されたヘリックス構造は、αvβ6依存的な細胞接着アッセイの阻害におけるペプチドの有効性と相関性がある。興味深いことに、全てのペプチドのIC50は、競合的ELISAでの細胞接着アッセイよりも、細胞接着アッセイでは約1000倍以上高かった。なお、この効果は、抗αvβ3ペプチドにおいて以前に報告されている(Goodman et al, 2002)。
αvβ6に対しての各ペプチドの結合能を比較するために、96ウェルプレートにrsαvβ6を固定化した。さまざまな濃度のビオチニル化したA20FMDV1、A20LAPまたはA20FMDV2が、1mMのCa2+及び0.5mMのMg2+イオン存在下で、45分間プレートに加えられた。結合したペプチドは、ストレプトアビジン−HRPで検出した。さらに、ビオチニル化した、各ペプチドのスクランブル仕様(scrambled version)でも試験した。図3は、αvβ6への結合能を、A20FMDV2、A20LAP及びA20FMDV1の順に示す。上述したように、A20FMDV2は全ての濃度において、固定化したrsαvβ6に対してより強く結合した。10nMの濃度では、各ペプチドは、ほとんど最大の結合能を依然として示したが、それと対照的に、スクランブルコントロール(scrambled control)は、結合を示さなかった。1nMでさえ、A20FMDV2は最大の50%の結合能を示した。興味深いことに、スクランブルA20LAPは10μM及び1μMで結合を示したが、それと対照的に、FMDVペプチドは、試験したどの濃度でも、ほとんど結合を示さなかった。
LAPベースとFMDVベースの両ペプチドにおいては、より長いペプチドが、より短いペプチドよりも、αvβ6をより有効に阻害したが、それは用いた全てのペプチドが、決定的なRGDLXXL/Iモチーフを含んでいた場合であった。しかしながら、このモチーフを除けば、A20LAP及びA20FMDV2の配列間には明白な類似性はない。それ故に、このモチーフが単に、より長いペプチド内で伸長されただけというのはありそうにない。他に考えられる説明は、増加された長さが、RGDLXXL/Iモチーフの提示を変化させることによって、αvβ6に対してのペプチドの親和性の変化を引き起こしたというものであった。それ故に、RGDLXXL/Iの活性立体配座を潜在的に安定化できる、二次構造の存在が考えられた。
円偏光二色性は、紫外線がキラルな環境を通過した時に発生する、偏光の変化に基づく光学的な技術である。左円及び右円の偏光の差吸光度により、円偏光が楕円偏光化することが引き起こされる。二次構造の異なる形態(βシート、ヘリクスターンヘリックス、さらには構造を持たない「ランダムコイル」の状態)の異なるキラルな環境が、それぞれに対して、それ自身の特徴ある遠紫外線CDスペクトルを生じさせる。それ故に、CDは、特定のタンパク質またはペプチドにおける、二次構造の各タイプの量を研究するために用いられ得る。
スピン系を、共鳴アサインメント(帰属)(resonance assignment)とともに、二次元DQF−COSY及びTOCSY NMRスペクトルの解析によって同定し、並びに観察された1H化学シフトは全て表3にリスト化した。全ての1Hスピン系での核の大部分のアサインメントが、A20FMDVのThr2及びA20LAPのGly1を除いては、A20FMDV1、A20FMDV2及びA20LAPペプチドで可能であった。
NMRは、三つの20merのペプチドの溶液構造を決定するために、並びにCD及びin silico(AGADIR)データを確認するために用いられた。NMRデータは、例えば核オーバーハウザー効果(NOE)の形で、一連の制約(constraint)を生み出す。NOEは、2つの原子が、NMRの光学的な緩和がそれらの間で生じるのに、十分近い空間に存在する時に、観察される。2つの原子が、一次構造で近接していないと同定された場合には、各NOEは、近接近してこれらの領域を維持している二次構造が存在することを指し示すための、証拠を提供する。さらにNOEは、一覧にされ、構造モデルを作り出すのに一緒になって用いられる距離拘束(distance constraint)を提供する。物理的に可能なペプチドの立体配座の数を制限する制約が存在するので、コンピューターアルゴリズムは、これらの制約に適合する、たくさんの(アンサンブルとして知られる)立体配座を作製するために用いられる。
3つの20merのペプチド内のRGDモチーフへの、αヘリックスのC末端の長さは、ペプチドの有効性を増加させると、増加することが明らかになっている(図3参照)。これらのデータにより、ヘリックスの長さまたは安定性が、αvβ6アンタゴニストとして機能するペプチドの有効性に、貢献する可能性が示唆される。しかし、本発明者たちのペプチド内の、RGDに対するαヘリックスのC末端における、NMRによる同定は、ヘリックス安定化剤であるTFEの存在下で行われた。生理的緩衝液内でαvβ6と結合する際に、このペプチドがヘリックスの形をとるかどうかを決定するために、本発明者たちは飽和移動差NMRを利用した。最も有効的なαvβ6アンタゴニストペプチドである、A20FMDV2が、インテグリンαvβ6と相互作用することを同定した、STD NMRスペクトルを、図6に示す。STD差スペクトルの解析は、TFE不存在下において、このペプチド内の適当なNMR共鳴分散によって可能となった。縮退した化学シフトによりオーバーラップが生成された所では、いずれのSTD差値も両方の核に同じように起因するので、このデータより、いずれの潜在的なバイアスをも除去することができる。
コントロール1H STD NMRスペクトル図6(a)及び図6(c)により、このペプチドの全ての1H NMR共鳴が明らかにされ、図6(b)及び図6(d)で示されたSTD差スペクトルにより、結合事象間のインテグリンに近接しているそれらの1H共鳴が明らかにされる。図6(c)及び図6(d)は重要な接触ポイントの同定を可能にし、それにはArg7 Hb/Hd、Thr20 Hg及びLysl6、Hb/HdのみならずLeu3及びLeu10のHd及びHbが含まれる。STD差スペクトルが減少したかあるいは存在しないことが明らかにされている重要な共鳴には、Leu6 Hd及びGln11、Val12及びGln15及びVal17のHgが含まれた。個々の核のSTD増幅係数(amplification factor)は、A20FMDV2の全残基で観察された残基の合計増幅係数が0.0から8.81までのこれらのデータより算出した。A20FMDV2の全残基に対する相対的STD増幅係数を図7に示し、これにより、Arg7、Asp9、Leu10、Val12、Leu13、Lys16、Val17及びThr20で観察される、主な相互作用を伴ったこのペプチドの全体を通して、接触が明らかになることが、同定される。これらのデータにより、DLXXL/Iヘリックスモチーフを超えた接触が、αvβ6に結合することを改善するのに、重要である可能性を示唆する。
このヘリックスの存在は、DLXXL/Iモチーフの非連続なロイシン及びロイシン/イソロイシン残基を並列にすることを引き起こし、それにより小さな疎水性パッチを形成する。疎水性パッチ間の相互作用は、タンパク質−タンパク質結合の古典的なメカニズムの一つであるので、ヘリックスによって引起されるロイシン−ロイシンまたはロイシン−イソロイシンのパッチが、αvβ6とのペプチド結合に直接的に関わるという仮説を立てることが可能である。このことは、「XX」残基の同定が、DLXXL/Iモチーフのロイシン及びロイシン/イソロイシン残基よりも、なぜ重要でないかを説明するだろう(Kraft et al 1999)。この仮説を検証するために、本発明者たちは、飽和移動差(STD)NMRを採用したが、この技術により、大きなタンパク質(本件ではrsαvβ6)からずっと小さな分子(本件ではペプチドA20FMDV2)へのエネルギー遷移を測定する。この技術は、原子特異的な原理によって作用し、大きな受容体タンパク質(rsαvβ6)に対しての、小さなリガンドA20FMDV2内の個々の残基の、近接性を測定することを可能にする。このようにして、受容体とのペプチド結合に関わる、正確な残基の同定をすることが可能になる。Arg7(RGDモチーフの一部としてのArgは、αvβ6と強力な接触を示すことが予期される)を除いて、エネルギー遷移が最も高い残基は、Leu10、Leu13、Lys16及びVaI17である。したがって、αvβ6との主な接触は、おおよそ3つの残基の規則的な周期性を持つ。このことは、結合に関しての、ヘリックス構造の存在を強く示唆する。溶液NMR実験と異なり、STD NMRは、生理学的なバッファー(PBS)及び、ヘリックス安定化アルコールであるTFEの不存在下で実施したことを記述しておくことは重要である。それ故に、このことは、A20FMDV2がヘリックス及びランダムコイルの状態間で、溶液内で平衡的に存在するにも関わらず、αvβ6結合ペプチドは主にヘリックスの状態で存在することの強い証拠となる。実際、αvβ6と最も密接な接触をする残基が、30%TFEにおけるA20FMDV2の平均三次元構造上にマッピングされた時には、これらの残基はこのペプチドの片面上に一列になる。このことは、ヘリックス構造の存在が、これら他の近接しない残基を並列にすることを強く示唆し、それによりαvβ6との直接相互作用のための一つの結合面を形成する。
前記データは、A20FMDV2がαvβ6と結合する時に、αヘリックスのC末端がRGDに存在することを明らかに示す。さらに、これにより、L10及びL13での2つの非接触ロイシンを並列にさせることにより、リガンド(A20FMDV2)−インテグリン間での密接な接触が可能になる。αヘリックスが、αvβ6とのリガンド結合に必要とされることを証明するために、本発明者たちは、位置D12及びD17で、L−バリンをD−バリンで置換した、3つのA20FMDV2変異体ペプチドを合成した。図4は、これらのバリンのそれぞれが、A20FMDV2によって形成されるαヘリックス内に存在することが予測されていることを示し、それはNMRによって確認された。D−バリンを挿入することにより、本発明者たちは、重要な接触残基(Arg7、Asp9、Leu10及びLeu13)の相互作用の可能性を除外することなく、ペプチドのヘリックス習性を崩壊させ、その一方でこのペプチドの他の態様(例えば電化分布及びpH)が保たれることを予期した。
A20FMDV1、A20FMDV2及びA20LAPは、インテグリンαvβ6に結合することで知られるタンパク質配列由来であるのだが、本発明者たちは、RGDLXXL/I配列モチーフを含む他の配列において、LXXL/Iモチーフが、αヘリックス構造内に含まれるかを調査した。本発明者たちは、下記で示す配列とともに、(サイクリン依存性キナーゼ4インヒビターCまたはP18−INK4cとしても知られる)P18−INK6遺伝子内に含まれるモチーフを選択した。
さらに、ペプチドのヘリックス構造を増強させ、それによって潜在的に抗αvβ6の有効性を増大させるための、(AGADIRアルゴリズムによる)in silicoデザインを用いる可能性を調査するため、このシステムを使うことを決めた。A20FMDV2とp18−INK配列の異なった方法での組み合わせを調査し、LXXLXX領域(INK−FMDV)内でのヘリックス構造が最も高く予想されたものを、さらなる研究のために選んだ。その結果、1アミノ酸が置換された、さらに2つのペプチドを作製した。1つ目は、ペプチドの予測されたヘリックス構造を全体的に増加させる、INK−FMDV−X。2つ目は、RGDの予測されるヘリックス構造を減少させる一方で、LXXLXX領域の予測されるヘリックス構造を増加させる、pINK−FMDV2−XX。
ビオチニル化したペプチドは、A375Ppuro及びA375Pβ6puroに結合することができ、その結合は、マウス抗ビオチン抗体とそれに続くAlexaFluor488標識羊抗マウス抗体によって検出される。ビオチンに結合した二次抗体の使用は、重要な増幅段階を提供するが、それは、ストレプトアビジン−FITCの直接検出を試みた予備的実験では、ほとんど若しくはまったくシグナル検出ができなかったためである。ペプチドは、複数の異なる濃度で試験され、A375Pβ6puro細胞株への濃度特異的な異なる結合性を示した。DV1217はA375Pβ6puroに高い特異性を持っていたが、それは、調査したどの濃度(100μMまで)でも、A375Ppuroに対しては顕著には結合しなかったが、A375Pβ6に対しては10μMおよび1μMで結合したためである。A20FMDV2はA375Ppuroに10μMのみで結合し、その一方でA375Pβ6puroに10μM、1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μMの、4段階での濃度における異なる結合性によって、結合するのが観察された。A20FMDV1も比較的特異性があり、A375Pβ6puroに1μMで結合を示したが、その濃度ではA375Ppuroには結合しなかった。A20LAPは、A375Pβ6puroに相対的にほとんど特異性を示さず、両方の細胞株において10μMと1μMで結合したが、A375Pβ6puroへの結合は両濃度でわずかに大きくなった。
本発明者たちは、直鎖ペプチドはin vivoでは、血清プロテアーゼによる攻撃にしばしばさらされる可能性があるので、環化(反応)及びD−アミノ酸の使用により、生物活性を、維持し、または改良する間における、このペプチドの安定化について調査が可能であると考えた(Okarvi, 2004)。それ故に、合理的な構造によって導き出されるデザインを用いて、リードペプチドA20FMDV2である、2つのジスルフィド環化した変異体を導き出した。目標は、以下のことに対して、3倍にすることである。親和性を向上させることによって、活性構造を安定化させること。血清プロテアーゼに対する抵抗性を改善させること。そして、適切に配置されたリシン及びチロシン残基を、それぞれ4−[18F]−フルオロ安息香酸または125Iで直接放射性ラベルすること。
αvβ6への環状ペプチドの親和性を、非競合的に結合させるELISAで最初に調査した。ペプチドのビオチニル化により、ELISAプレート上の固定化したrsαvβ6に結合することが可能となり、結合したペプチドは、ペルオキシダーゼ共役エクストラアビジンで検出した。スクランブルペプチドB−Ranはまったく結合を示さなかったが、B−DBD1とB−DBD2の両方とも、rsαvβ6に対する濃度依存的な結合を示した。結合の濃度は、B−A20FMDV2の場合と似ていた。用量反応曲線への適合によるデータの定量化と、50%の結合性に必要なペプチド濃度(EC50)の計算により、B−A20FMDV2、B−DBD1及びB−DBD2が、本アッセイにおいて同程度の有効性を示すことを実証し、低ナノモル濃度で結合が検出できることが示されたことに矛盾しなかった(下表参照)。
リードペプチドB−A20FMDV2及びB−DBD2は、in vitroにおけるαvβ6に対して、高い親和性及び高い特異性を示す。A20FMDV2及びDBD2は、18F−A20FMDV2及び18F−DBD2を作り出すために、ペプチドのN末端を放射性同位体でラベルすることができる。画像化及び標的目標とするための、インテグリンαvβ6の潜在的な用途を、(18Fまたは別の放射性同位体部分を持つ)ラベル化したペプチドを、対となったαvβ6ポジティブ(DX3β6)異種移植片(xenograft)及びαvβ6ネガティブ(DX3puro)異種移植片を持つマウスにインジェクションすることによって評価し、それによりαvβ6陽性腫瘍の特異的な視覚化が可能となる。
インテグリンαvβ6は、癌の画像化及び治療のための、新しい主要な標的である。抗αvβ6薬剤を創出するための方法として、本発明者たちは、αvβ6のペプチドアンタゴニストを創出するために、αvβ6の既知リガンドに基づく、合理的な設計アプローチを利用した。これらの研究により、αvβ6の生物学的挙動に重要である、新規インテグリン−リガンド相互作用の構造的基礎が明らかになった。本発明者たちは、これらの直鎖ペプチド内で二次構造が示唆されているペプチドの長さの増加に伴って、αvβ6のペプチドアンタゴニストの有効性が増加されることを、初めて指摘した。本発明者たちのペプチドが、ヘリックスモチーフを持つ可能性は、FMDVの結晶構造に基づいた(Logan et al 1993)。これらの著者たちは、FMDVのVP1カプシド・タンパク質のG−Hループが、ヘアピンカーブの先端で、RGDモチーフから構成され、その後に310ヘリックスが続くことを示した。この構造は、VP1及びVP2タンパク質間のジスルフィドシステイン架橋結合が存在した場合に限り、現れた。本発明者たちは、AGADIRソフトウェアを用いて、3つのリードペプチドA20FMDV1、A20FMDV2及びA20LAPのヘリックス傾向を調べた。ヘリックス傾向が、A20FMDV<A20LAP<A20FMDV2の順で増大され、配列が生物学的効果と相関することが予測された。遠紫外線/CD解析により、全ての20merが、TFEを0−50%(v/v)添加させることにより、ヘリックスの性質の増大が示されることを確かめた。A20FMDVでヘリックス形成へ遷移するための、より広範な分析結果により、より高い割合のTFEが、このペプチドが安定的なヘリックスを形成することに必要とされ、並びにこのペプチドのヘリックス傾向は、AGADIR予測が確忍されたA20FMDV2またはA20LAPのデータにおけるものよりも低いことが示唆される。遠紫外線−CDデータは、NMRによる3つ全てのペプチドの相対的な構造を得るために、TFEの濃度がどれほど必要かを予測するためにも、利用された。平均楕円率のプロットにより、40−50%TFEでは、ヘリックスの安定化は、3つ全てのペプチドで完全になると示唆された。それ故に、30%(v/v)の濃度は、A20FMDV2とA20LAPの両方で、遷移のギリギリの濃度となり、これらのペプチドのヘリックス傾向の違いを明らかにするのが可能になる。(直接比較を可能とするため、30%TFEは、続く全てのNMR解析用に選択された。)
Claims (21)
- LX5X6LまたはLX5X6Iをαヘリックス構造内に含み、20アミノ酸長以下である、配列モチーフXXXXXXRGDLX5X6LまたはXXXXXXRGDLX5X6Iを含んでなるペプチドであって、αvβ6インテグリンに結合するペプチド。
- 前記ペプチドが配列XXXXXXRGDLX5X6LX8X9X10を含んでなり、かつX8−X10がGlu、Ala、Leu、Met、Gln、Lys、Arg、Val、Ile、Trp、Phe及びAspから独立して選択される、請求項1に記載のペプチド。
- 各ZはGlu、Ala、Leu、Met、Gln、Lys、Arg、Val、Ile、Trp、Phe及びAspから独立して選択され、nは1から4の間の任意の数である、配列XXXXXXRGDLX5X6LX8X9X10Znを含んでなる、請求項1または2に記載のペプチド。
- X5−X6が、Glu、Ala、Leu、Met、Gln、Lys、Arg、Val、Ile、Trp、Phe及びAspの群から独立して選択される、請求項1から3のいずれか一項に記載のペプチド。
- 前記αヘリックス構造が1から5回転を有する、請求項1から4のいずれか一項に記載のペプチド。
- 20アミノ酸長である、請求項1から5のいずれか一項に記載のペプチド。
- A20FMDV2(配列番号8)に対して少なくとも95%の配列同一性を有する、A20FMDV2の変異体である、請求項1に記載のペプチド。
- 前記ペプチドが環化されている、請求項1から7のいずれか一項に記載のペプチド。
- 前記ペプチドが、システイン残基を介してジスルフィド結合によって環化されている、請求項8に記載のペプチド。
- A20FMDV2 (配列番号8), A20LAP (配列番号6), A20FMDV1 (配列番号7), P_18INK (配列番号34), P_FMDV2-INK (配列番号35), P_INK-FMDV2 (配列番号36), P_INK-FMDV2-X (配列番号37), P_INK-FMDV2-XX (配列番号38), DBD2 (配列番号16), 及びB-DBD2 (配列番号16)からなる群から選択され、αvβ6に結合し、拮抗作用する、ペプチド。
- ペプチドが検出可能な部分に連結されている、請求項1から10のいずれか一項に記載のペプチド。
- 前記検出可能な部分が磁気共鳴影像法(MRI)、磁気共鳴スペクトロスコピー(MRS)、単光子放出コンピュータ断層撮影(SPECT)、ポジトロン放出断層撮影法(PET)または光学的画像によって検出可能なものである、請求項11に記載のペプチド。
- 前記検出可能な部分が放射能を持った部分である、請求項11又は12に記載のペプチド。
- ペプチドが治療上の活性部分に連結されている、請求項1から13のいずれか一項に記載のペプチド。
- 前記治療上の活性部分が抗がん剤である、請求項14に記載のペプチド。
- 請求項1から15のいずれか一項に記載のペプチドをコードする、単離された核酸分子。
- 請求項16に記載の核酸分子を含む発現ベクター。
- 治療または診断の使用のための、請求項1から17のいずれか一項に記載の、ペプチド、核酸分子または発現ベクター。
- 請求項1から15のいずれか一項に記載のペプチド、請求項16に記載の核酸分子または請求項17に記載の発現ベクター、並びに医薬として許容される担体を含む医薬組成物。
- 線維症、慢性閉塞性肺疾患(COPD)、肺気腫、慢性損傷皮膚病または癌から選択される、αvβ6を介した疾病の治療用薬剤の調製のための、請求項1から15のいずれか一項に記載のペプチド、請求項16に記載の核酸分子または請求項17に記載の発現ベクターの使用。
- 前記慢性損傷皮膚病が表皮水疱症である、請求項20に記載の使用。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GB0520068A GB0520068D0 (en) | 2005-10-03 | 2005-10-03 | av peptide ligand |
GB0520068.8 | 2005-10-03 | ||
PCT/GB2006/003673 WO2007039728A2 (en) | 2005-10-03 | 2006-10-03 | AVß6 PEPTIDE LIGANDS AND THEIR USES |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2009509562A JP2009509562A (ja) | 2009-03-12 |
JP2009509562A5 JP2009509562A5 (ja) | 2009-11-12 |
JP5449774B2 true JP5449774B2 (ja) | 2014-03-19 |
Family
ID=35395162
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2008534069A Active JP5449774B2 (ja) | 2005-10-03 | 2006-10-03 | αvβ6ペプチドリガンド及びその活用 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US8383593B2 (ja) |
EP (1) | EP1957522B1 (ja) |
JP (1) | JP5449774B2 (ja) |
CA (2) | CA2624618C (ja) |
ES (1) | ES2638439T3 (ja) |
GB (1) | GB0520068D0 (ja) |
WO (1) | WO2007039728A2 (ja) |
Families Citing this family (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB0520068D0 (en) | 2005-10-03 | 2005-11-09 | Cancer Res Technology | av peptide ligand |
RU2009107277A (ru) | 2006-08-03 | 2010-09-10 | Астразенека Аб (Se) | АНТИТЕЛА, НАЦЕЛЕННЫЕ НА αVβ6, И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ |
GB0718843D0 (en) | 2007-09-26 | 2007-11-07 | Cancer Rec Tech Ltd | Materials and methods relating to modifying the binding of antibodies |
EP4219560A3 (en) * | 2010-02-18 | 2023-08-23 | The Regents of The University of California | Integrin alpha v beta 8 neutralizing antibody |
US20140328762A1 (en) * | 2011-04-06 | 2014-11-06 | Yiyi Zhang | Fluorogenic Peptide Probes and Assays |
WO2013078250A2 (en) * | 2011-11-22 | 2013-05-30 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Cystine knot peptides that bind alpha-v-beta-6 integrin |
WO2013110120A1 (en) | 2012-01-24 | 2013-08-01 | Inter-K Pty Limited | Peptide agents for cancer therapy |
US9027086B2 (en) * | 2013-02-01 | 2015-05-05 | Vidder, Inc. | Securing organizational computing assets over a network using virtual domains |
GB201311031D0 (en) * | 2013-06-20 | 2013-08-07 | Queen Mary & Westfield College | Method |
ES2930029T3 (es) | 2014-04-15 | 2022-12-05 | Univ California | Péptidos de unión a integrina pegilados biterminales y métodos para su uso |
GB201513540D0 (en) | 2015-07-31 | 2015-09-16 | King S College London | Therapeutic agents |
CN109563135B (zh) | 2016-06-13 | 2024-01-23 | 加利福尼亚大学董事会 | α(V)β(6)整合素结合肽及其使用方法 |
EP3471697B1 (en) * | 2016-06-16 | 2024-09-04 | The University of Liverpool | Chemical composition |
CA3223687A1 (en) * | 2016-09-29 | 2018-04-05 | The Regents Of The University Of California | Neutralizing antibodies to the .alpha.v.beta.8 integrin complex for immunotherapy |
EP3981780A1 (en) * | 2016-11-01 | 2022-04-13 | Arrowhead Pharmaceuticals, Inc. | Alpha-v beta-6 integrin ligands and uses thereof |
GB201706472D0 (en) * | 2017-04-24 | 2017-06-07 | Cancer Res Tech Ltd | Tumour-targeting peptide variants |
IL274300B1 (en) | 2017-11-01 | 2024-05-01 | Arrowhead Pharmaceuticals Inc | Ligands for alpha V beta 6 integrins, preparations containing them and their uses |
GB201802539D0 (en) * | 2018-02-16 | 2018-04-04 | Univ College Cardiff Consultants Ltd | Modified adenoviruses |
CA3112000A1 (en) * | 2018-09-07 | 2020-03-12 | The Regents Of The University Of California | Alpha(v)beta(6) integrin-binding peptides and methods of use thereof |
US20220402980A1 (en) * | 2019-11-15 | 2022-12-22 | Ospedale San Raffaele S.R.L. | Chromogranin a-derived peptides and uses thereof |
WO2022221144A1 (en) * | 2021-04-12 | 2022-10-20 | University Of Washington | Engineered peptides for αvβ6 integrin binding and related methods of use and synthesis |
CN115010949B (zh) * | 2022-07-12 | 2024-02-13 | 华熙生物科技股份有限公司 | 促渗物、护肤品组合物以及化妆品 |
Family Cites Families (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB8301928D0 (en) | 1983-01-24 | 1983-02-23 | Nicholson B H | Process for producing polypeptides |
JPS60103596A (ja) * | 1983-11-11 | 1985-06-07 | Toshiba Corp | サンプル・ホ−ルド回路 |
AUPM411994A0 (en) * | 1994-02-25 | 1994-03-24 | Deakin Research Limited | Epitopes |
WO2000037487A1 (de) * | 1998-12-19 | 2000-06-29 | Merck Patent Gmbh | INHIBITOREN DES INTEGRINS αvβ¿6? |
DE19929410A1 (de) | 1999-06-26 | 2000-12-28 | Merck Patent Gmbh | Inhibitoren des Integrins avß6 |
DE19933173A1 (de) * | 1999-07-15 | 2001-01-18 | Merck Patent Gmbh | Cyclische Peptidderivate als Inhibitoren des Integrins alpha¶v¶beta¶6¶ |
WO2001090186A1 (en) * | 2000-05-26 | 2001-11-29 | Glaxo Group Limited | Methods for identifying modulators of the interaction between lap (latency associated peptide) and intergrin alpha.v.beta.3 and medical use thereof |
US20030031648A1 (en) * | 2000-11-28 | 2003-02-13 | Virogene Ltd. | Vectors for expressing heterologous peptides at the amino-terminus of potyvirus coat protein, methods for use thereof, plants infected with same and methods of vaccination using same |
GB0520068D0 (en) | 2005-10-03 | 2005-11-09 | Cancer Res Technology | av peptide ligand |
-
2005
- 2005-10-03 GB GB0520068A patent/GB0520068D0/en not_active Ceased
-
2006
- 2006-10-03 CA CA2624618A patent/CA2624618C/en active Active
- 2006-10-03 WO PCT/GB2006/003673 patent/WO2007039728A2/en active Application Filing
- 2006-10-03 EP EP06794625.1A patent/EP1957522B1/en active Active
- 2006-10-03 CA CA2854550A patent/CA2854550C/en active Active
- 2006-10-03 US US12/088,998 patent/US8383593B2/en active Active
- 2006-10-03 JP JP2008534069A patent/JP5449774B2/ja active Active
- 2006-10-03 ES ES06794625.1T patent/ES2638439T3/es active Active
-
2013
- 2013-01-17 US US13/743,714 patent/US8927501B2/en active Active
-
2014
- 2014-12-11 US US14/567,274 patent/US9650416B2/en active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA2624618A1 (en) | 2007-04-12 |
US20150125392A1 (en) | 2015-05-07 |
CA2624618C (en) | 2016-03-29 |
GB0520068D0 (en) | 2005-11-09 |
US8383593B2 (en) | 2013-02-26 |
CA2854550C (en) | 2020-04-14 |
US20090123370A1 (en) | 2009-05-14 |
EP1957522B1 (en) | 2017-07-12 |
WO2007039728A2 (en) | 2007-04-12 |
CA2854550A1 (en) | 2007-04-12 |
US9650416B2 (en) | 2017-05-16 |
EP1957522A2 (en) | 2008-08-20 |
US20130149248A1 (en) | 2013-06-13 |
ES2638439T3 (es) | 2017-10-20 |
US8927501B2 (en) | 2015-01-06 |
JP2009509562A (ja) | 2009-03-12 |
WO2007039728A3 (en) | 2007-09-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5449774B2 (ja) | αvβ6ペプチドリガンド及びその活用 | |
Jin et al. | The peptide PROTAC modality: a novel strategy for targeted protein ubiquitination | |
CA2650113C (en) | Compositions for treatment of cancer | |
RU2766711C2 (ru) | СТРУКТУРНЫЕ ПЕПТИДНЫЕ ИНГИБИТОРЫ АГРЕГАЦИИ α-СИНУКЛЕИНА | |
EP2361097A2 (en) | Na/k-atpase-derived peptide src inhibitors and ouabain antagonists and uses thereof | |
US10400010B2 (en) | Structure-based peptide inhibitors of P53 aggregation as a new approach to cancer therapeutics | |
Li et al. | Improving selectivity, proteolytic stability, and antitumor activity of Hymenochirin-1B: A novel glycosylated staple strategy | |
Goda et al. | Intracellular protein delivery activity of peptides derived from insulin-like growth factor binding proteins 3 and 5 | |
JP2005510460A (ja) | 分子 | |
Maszota et al. | Structural studies of the C‐terminal 19‐peptide of serum amyloid A and its Pro→ Ala variants interacting with human cystatin C | |
US20220153792A1 (en) | Peptide Inhibitors Targeting The CXCL12/HMGB1 Interaction And Uses Thereof | |
US20190030126A1 (en) | Inhibitors of the Interaction BCL-2 L10 / IP3 Receptors | |
Su et al. | A high hydrophobic moment arginine‐rich peptide screened by a machine learning algorithm enhanced ADC antitumor activity | |
US20140005119A1 (en) | COMPOSITIONS AND METHODS FOR INHIBITING THE ACTIVITY OF P110a MUTANT PROTEINS | |
Class et al. | Patent application title: STRUCTURE-BASED PEPTIDE INHIBITORS OF P53 AGGREGATION AS A NEW APPROACH TO CANCER THERAPEUTICS Inventors: David S. Eisenberg (Los Angeles, CA, US) Alice Soragni (Los Angeles, CA, US) Lin Jiang (Los Angeles, CA, US) Assignees: THE REGENTS OF THE UNIVERSITY OF CALIFORNIA | |
Herrera | Evaluation of NMR structural studies on a family of membrane active channel forming peptides | |
Lazic | Receptor associated protein (RAP): Its structural organization and interaction with LRP |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20090917 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20090917 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20120214 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20120514 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20120521 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20120814 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20130326 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20130626 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20130806 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20131106 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20131106 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20131203 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20131225 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5449774 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |