JP5317031B2 - ヘッド−テイル型共重合体の中空ナノ微粒子 - Google Patents
ヘッド−テイル型共重合体の中空ナノ微粒子 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5317031B2 JP5317031B2 JP2008121543A JP2008121543A JP5317031B2 JP 5317031 B2 JP5317031 B2 JP 5317031B2 JP 2008121543 A JP2008121543 A JP 2008121543A JP 2008121543 A JP2008121543 A JP 2008121543A JP 5317031 B2 JP5317031 B2 JP 5317031B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- hollow
- lysine
- poly
- water
- dendron
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Description
本発明は、水中で安定な中空ナノ微粒子に関し、より詳細にはポリアミドアミンデンドロンのヘッド部とポリ-Ｌ-リシンのテイル部とを有するヘッド-テイル型ブロック共重合体の水中で安定な中空ナノ微粒子に関する。
ブロック共重合体が選択溶媒中での自己組織化により形成する多分子集合体は、高分子ミセルやロッド、ラメラ、ベシクルなど様々な形態をとることが報告されている(非特許文献１〜４)。
樹木状高分子であるポリアミドアミン(ＰＡＭＡＭ)デンドロンとポリペプチドであるポリ-Ｌ-リシン(ＰＬＬ)からなるヘッド-テイル型ブロック共重合体は、水/高濃度メタノール混合溶媒中で、自己組織化によりベシクルを形成することが知られている(非特許文献５〜７)。
樹木状高分子であるポリアミドアミン(ＰＡＭＡＭ)デンドロンとポリペプチドであるポリ-Ｌ-リシン(ＰＬＬ)からなるヘッド-テイル型ブロック共重合体は、水/高濃度メタノール混合溶媒中で、自己組織化によりベシクルを形成することが知られている(非特許文献５〜７)。
van Hest, J. C. M.; Delnoye, D. A. P.; Baars, M. W. P. L.; van Genderen, M. H. P.; Meijer, E. W. Science 1995, 268, 1592-1595
Vandermeulen, G. W. M.; Klok, H. A. Macromol. Biosci. 2004, 4, 383-398
Klok, H. A.; Lecommandoux, S. Adv. Mater. 2001, 13, 1217-1229
Kim, K. T. K.; Winnik, M. A.; Manners, I. Soft Matter 2006, 2, 957-965
高分子学会予稿集55巻１号1276頁 平成18年５月10日発行
第53回高分子研究発表会(神戸)予稿集138頁 平成19年７月20日発行
高分子学会予稿集56巻２号5058頁 平成19年９月４日発行
しかしながら、上記ヘッド-テイル型ブロック共重合体が高濃度メタノール/水混合溶媒中で形成するベシクルは、水中に移行すると崩壊してしまう。ベシクル構造を維持するために分散媒としてメタノール含有溶媒を必要とする限り、該ベシクルからなる中空ナノ微粒子を、例えば遺伝子ベクターやドラッグデリバリーシステム(ＤＤＳ)として応用・発展させることはできない。
本発明は、かかる事情に鑑みてなされたものであり、ヘッド-テイル型共重合体ＰＡＭＡＭデンドロン−ポリ-Ｌ-リシンの水中で安定な中空ナノ微粒子及びその製造方法を提供するものである。
したがって、本発明は、ポリアミドアミンデンドロンのヘッド部とポリ-Ｌ-リシンのテイル部とを有するヘッド-テイル型ブロック共重合体のベシクルからなり、ポリ-Ｌ-リシン間が架橋されている水中で安定な中空ナノ微粒子を提供する。
また、本発明は、上記ヘッド-テイル型ブロック共重合体を１００/０〜５０/５０の水/水と混和性のアルコール混合溶媒に溶解させ；得られる溶液に、水/アルコール比が３０/７０〜０/１００となるまでアルコールを滴下して、該ブロック共重合体を中空ナノ微粒子に自己組織化させ；得られた自己組織体を架橋処理することを含んでなる、水中で安定な中空ナノ微粒子の製造方法を提供する。
本発明の中空ナノ微粒子によれば、ポリアミドアミンデンドロン及び/又はベシクル内部空間に物質を保持し、例えば運搬体/送達剤(ベクター、キャリア又はＤＤＳ製剤)として利用可能な水中で安定な中空ナノ微粒子が提供される。
本発明の中空ナノ微粒子の製造方法によれば、単分散の中空ナノ微粒子が容易に製造できる。
本発明の中空ナノ微粒子の製造方法によれば、単分散の中空ナノ微粒子が容易に製造できる。
＜中空ナノ微粒子＞
本発明の中空ナノ微粒子は、ポリアミドアミンデンドロンのヘッド部とポリ-Ｌ-リシンのテイル部とを有するヘッド-テイル型ブロック共重合体のベシクルからなり、ポリ-Ｌ-リシン間が架橋されていることを特徴とする。この構成により、本発明の中空ナノ微粒子は水中で安定である。すなわち、水中でもベシクル構造を維持できる。本発明の中空ナノ微粒子はまた、凍結乾燥することができ、よって長期保存が可能である。
本発明の中空ナノ微粒子は、ポリアミドアミンデンドロンのヘッド部とポリ-Ｌ-リシンのテイル部とを有するヘッド-テイル型ブロック共重合体のベシクルからなり、ポリ-Ｌ-リシン間が架橋されていることを特徴とする。この構成により、本発明の中空ナノ微粒子は水中で安定である。すなわち、水中でもベシクル構造を維持できる。本発明の中空ナノ微粒子はまた、凍結乾燥することができ、よって長期保存が可能である。
本発明において、ポリアミドアミンデンドロンは、世代数が３.０〜４.０であることが好ましい。ポリアミドアミンデンドロンにおいて、好ましい繰り返し単位は、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ2ＣＨ2Ｎ＜である。
末端基(又は表面基)は親水性基であり、例えばヒドロキシ基、アミノ基、(Ｃ1〜Ｃ4)アシル基、カルボキシル基、カルボキシル(Ｃ1〜Ｃ4)アルキル基、スルホ基、スルホ(Ｃ1〜Ｃ4)アルキル基であり、好ましくはヒドロキシ基である。
末端基(又は表面基)は親水性基であり、例えばヒドロキシ基、アミノ基、(Ｃ1〜Ｃ4)アシル基、カルボキシル基、カルボキシル(Ｃ1〜Ｃ4)アルキル基、スルホ基、スルホ(Ｃ1〜Ｃ4)アルキル基であり、好ましくはヒドロキシ基である。
繰り返し単位をＸ(好ましくは、Ｘ＝−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ2ＣＨ2Ｎ＜)、末端基をＹとすると３.０世代のポリアミドアミンデンドロンは式：
−ＣＨ2ＣＨ2−Ｎ(Ｘ(Ｘ(ＸＹ2)2)2
で表され、４.０世代のポリアミドアミンデンドロンは式：
−ＣＨ2ＣＨ2−Ｎ((Ｘ(Ｘ(Ｘ(ＸＹ2)2)2)2
で表される。
−ＣＨ2ＣＨ2−Ｎ(Ｘ(Ｘ(ＸＹ2)2)2
で表され、４.０世代のポリアミドアミンデンドロンは式：
−ＣＨ2ＣＨ2−Ｎ((Ｘ(Ｘ(Ｘ(ＸＹ2)2)2)2
で表される。
１つの実施形態において、ポリアミドアミンデンドロンは３.５世代である。繰り返し単位が−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ2ＣＨ2Ｎ＜であり、末端基がカルボキシ基である３.５世代のポリアミドアミンデンドロンは、次式で表される。
ポリ-Ｌ-リシン：
(式中、ｎは重合度)
は、重合度が例えば６０〜１００、好ましくは６０〜９０、より好ましくは７０〜９０、より好ましくは７０〜８５である。ポリ-Ｌ-リシンはα-ヘリックス構造を形成し得る。
ポリ-Ｌ-リシン間は架橋されているが、水中で安定なベシクル構造を維持できる限り、ポリ-Ｌ-リシンの全ての側鎖アミノ基が架橋に関与している必要はない。
は、重合度が例えば６０〜１００、好ましくは６０〜９０、より好ましくは７０〜９０、より好ましくは７０〜８５である。ポリ-Ｌ-リシンはα-ヘリックス構造を形成し得る。
ポリ-Ｌ-リシン間は架橋されているが、水中で安定なベシクル構造を維持できる限り、ポリ-Ｌ-リシンの全ての側鎖アミノ基が架橋に関与している必要はない。
架橋剤は、一級アミノ基と反応性であるが二級アミノ基と非反応性の架橋基を分子内に複数有するものである。
そのような架橋基としては、例えば、エポキシ基、アルデヒド基、マレイミド基、活性エステル基、スルホ活性エステル基、ニトロフェニルアジド基、フェニルアジド基、フェニルグリオキサル基、ハライド基、イミドエステル基、ピリジルジチオ基、ビニルスルホン基、ヒドロキシフェニルアジド基、イソシアネート基が挙げられ、好ましくはエポキシ基、アルデヒド基である。架橋剤中の架橋基は一種であってもよいし、二種以上の組合せであってもよい。
具体的には、以下の架橋剤が挙げられる。
分子内に複数個のエポキシ基を有する架橋剤としては、１,２-ビス(２,３-エポキシプロポキシ)エタンなどが挙げられる。
分子内に複数個のアルデヒド基を有する架橋剤としては、グルタルアルデヒド、スクシンアルデヒド、パラホルムアルデヒド、フタリックジカルボキシアルデヒド(フタルアルデヒド)などが挙げられる。
分子内に複数個のエポキシ基を有する架橋剤としては、１,２-ビス(２,３-エポキシプロポキシ)エタンなどが挙げられる。
分子内に複数個のアルデヒド基を有する架橋剤としては、グルタルアルデヒド、スクシンアルデヒド、パラホルムアルデヒド、フタリックジカルボキシアルデヒド(フタルアルデヒド)などが挙げられる。
分子内にマレイミド基と活性エステル基を有する架橋剤としては、Ｎ-[α-マレイミドアセトキシ]スクシンイミドエステル、Ｎ-[β-マレイミドプロピルオキシ]スクシンイミドエステル、Ｎ-[ε-マレイミドカプロイルオキシ]スクシンイミドエステル、Ｎ-[γ-マレイミドブチリルオキシ]スクシンイミドエステル、スクシニミジル-４-[Ｎ-マレイミドメチル]シクロヘキサン-１-カルボキシ-[６-アミドカプロエート]、ｍ-マレイミドベンゾイル-Ｎ-ヒドロキシスクシンイミドエステル、スクシニミジル-４-[Ｎ-マレイミドメチル]シクロヘキサン-１-カルボキシレート、スクシニミジル-４-[ｐ-メレイミドフェニル]ブチレート、スクシニミジル-６-[(β-マレイミドプロピオンアミド)ヘキサノエート]などが挙げられる。
分子内に活性エステルとニトロフェニルアジド基を有する架橋剤としては、Ｎ-５-アジド-２-ニトロベンゾイルオキシスクシンイミド、Ｎ-スクシニミジル-６-[４'-アジド-２'-ニトロフェニルアミノ]ヘキサノエートなどが挙げられる。
分子内にフェニルアジド基とフェニルグリオキサル基を有する架橋剤としては、ｐ-アジドフェニルグリオキサルなどが挙げられる。
分子内にフェニルアジド基とフェニルグリオキサル基を有する架橋剤としては、ｐ-アジドフェニルグリオキサルなどが挙げられる。
分子内に複数個のマレイミド基を有する架橋剤としては、１,４-ビス-マレイミドブタン、ビス-マレイミドエタン、ビス-マレイミドヘキサン、１,４-ビス-マレイミジル-２,３-ジハイドロブタン、１,８-ビス-マレイミドトリエチレングリコール、１,１１-ビス-マレイミドテトラエチレングリコール、ビス[２-(スクシンイミジルオキシカルボニルオキシ)エチル]スルホン、トリス-[２-マレイミドエチル]アミンなどが挙げられる。
分子内に複数個のスルホ活性エステル基を有する架橋剤としては、ビス[スルホスクシンイミジル]スベレート、ビス[２-(スルフォスクシニミドキシカルボニルオキシ)エチル]スルホン、ジスルホスクシニミジルタートレート、エチレングリコールビス[スルホスクシニミジルスクシネート]、トリス-スルホスクシニジルアミノトリアセテートなどが挙げられる。
分子内に複数個のハライド基を有する架橋剤としては、１,５-ジフルオロ-２,４-ジニトロベンゼンなどが挙げられる。
分子内に複数個のイミドエステル基を有する架橋剤としては、ジメチルアジピミデート、ジメチルピメリミデート、ジメチルスベリミデートなどが挙げられる。
分子内に複数個のピリジルジチオ基を有する架橋剤としては、１,４-ジ-[３'-(２'-ピリジルジチオ)プロピオンアミド]ブタンなどが挙げられる。
分子内に複数個のイミドエステル基を有する架橋剤としては、ジメチルアジピミデート、ジメチルピメリミデート、ジメチルスベリミデートなどが挙げられる。
分子内に複数個のピリジルジチオ基を有する架橋剤としては、１,４-ジ-[３'-(２'-ピリジルジチオ)プロピオンアミド]ブタンなどが挙げられる。
分子内に複数個の活性エステル基を有する架橋剤としては、ジスクシニミジルグルタレート、ジスクシニミジルスベレート、ジスクシニミジルタートレート、エチレングリコールビス[スクシミジルスクシネート]などが挙げられる。
分子内に複数個のビニルスルホン基を有する架橋剤としては、１,６-ヘキサン-ビス-ビニルスルホンなどが挙げられる。
分子内に複数個のビニルスルホン基を有する架橋剤としては、１,６-ヘキサン-ビス-ビニルスルホンなどが挙げられる。
分子内にピリジルジチオ基と活性エステル基を有する架橋剤としては、スクシニミジル-６-[３-(２-ピリジルジチオ)プロピオンアミド]ヘキサノエート、４-スクシニミジルオキシカルボニル-メチル-α-[２-ピリジルジチオ]トルエン、Ｎ-スクシニミジル-３-[２-ピリジルジチオ]プロピオネートなどが挙げられる。
分子内にヒドロキシフェニルアジド基と活性エステル基を有する架橋剤としては、Ｎ-ヒドロキシスクシニミジル-４-アジドサリサイリック酸などが挙げられる。
分子内にマレイミド基とイソシアネート基を有する架橋剤としては、Ｎ-[ｐ-マレイミドフェニル]イソシアネートなどが挙げられる。
分子内にマレイミド基とイソシアネート基を有する架橋剤としては、Ｎ-[ｐ-マレイミドフェニル]イソシアネートなどが挙げられる。
分子内にマレイミド基とスルホ活性エステル基を有する架橋剤としては、Ｎ-[ε-マレイミドカプロイルオキシ]スルホスクシンイミドエステル、Ｎ-[γ-マレイミドブチリルオキシ]スルホスクシンイミドエステル、Ｎ-ヒドロキシスルホスクシニミジル-４-アジドベンゾエート、Ｎ-[κ-マレイミドウンデカノイルオキシ]スルホスクシンイミドエステル、ｍ-マレイミドベンゾイル-Ｎ-ヒドロキシスルホスクシンイミドエステル、スルホスクシニミジル-４-[Ｎ-マレイミドメチル]シクロヘキサン-１-カルボキシレート、スルホスクシニミジル-４-[p-マレイミドフェニル]ブチレートなどが挙げられる。
分子内にピリジルジチオ基とスルホ活性エステル基を有する架橋剤としては、スルホスクシニミジル-６-[３'-(２-ピリジルジチオ)プロピオンアミド]ヘキサノエート、スルホスクシニミジル-６-[α-メチル-α-(２-ピリジルジチオ)トルアミド]ヘキサノエートなどが挙げられる。
分子内にヒドロキシフェニルアジド基とスルホ活性エステル基を有する架橋剤としては、スルホスクシニミジル[４-アジドサリサイルアミド]ヘキサノエートなどが挙げられる。
分子内にニトロフェニルアジド基とスルホ活性エステル基を有する架橋剤としては、スルホスクニミジル-６-[４'-アジド-２'-ニトロフェニルアミノ]ヘキサノエートなどが挙げられる。
分子内にニトロフェニルアジド基とスルホ活性エステル基を有する架橋剤としては、スルホスクニミジル-６-[４'-アジド-２'-ニトロフェニルアミノ]ヘキサノエートなどが挙げられる。
分子内にビニルスルホン基と活性エステル基を有する架橋剤としては、Ｎ-スクシニミジル-[４-ビニルスルホニル]ベンゾエートなどが挙げられる。
好ましい架橋剤は、１,２-ビス(２,３-エポキシプロポキシ)エタン、グルタルアルデヒドである。
好ましい架橋剤は、１,２-ビス(２,３-エポキシプロポキシ)エタン、グルタルアルデヒドである。
ポリ-Ｌ-リシン中に架橋に関与していない側鎖アミノ基(すなわち、架橋剤と未反応の側鎖アミノ基)が存在する場合、本発明の中空ナノ微粒子は、ベシクル膜中のイオン浸透圧が高いため、中性〜酸性条件下又は側鎖アミノ基の荷電条件下で、対イオンの存在によりベシクル膜が膨潤した状態となり(ポリ-Ｌ-リシン鎖の間隔が広がり)物質の出入りが可能となり、内部空間に物質を取り込み及び/又は予め内部空間に取り込まれた物質を放出することができる。このような本発明の中空ナノ微粒子は、ベシクル内部空間に、種々の物質、例えば、低分子量又は高分子量の薬物(例えば、制癌剤、インスリン)や核酸(ＤＮＡ又はＲＮＡ、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド(例えば、アンチセンスオリゴヌクレオチド))を保持することができ、送達剤(例えば、キャリア又はＤＤＳ製剤)/運搬体(ベクター)として好適である。
ポリ-Ｌ-リシン中に物質又は周囲環境に応答して荷電状態が変化し得る官能基を導入することにより、内部空間からの物質の放出を制御することも本発明の中空ナノ微粒子において可能である。例えば、フェニルボロン酸基(糖と結合して負に荷電)を導入することにより、糖(例えば血糖)に応答して内部空間の物質(例えばインスリン)を放出させる中空ナノ微粒子を提供することができる。ポリ-Ｌ-リシン中へのフェニルボロン酸基の導入は、公知の技術(例えば、特開２００１−１３９５９６を参照)により行い得る。
ポリ-Ｌ-リシン中に架橋に関与していない側鎖アミノ基が存在する場合、本発明の中空ナノ微粒子はまた、側鎖アミノ基のイオン化状態により粒径が変化し得る。酸性条件下(すなわち、側鎖アミノ基が−ＮＨ3 +となる条件下)では粒径が大きくなり、逆にアルカリ性条件下では粒径が小さくなる。例えば、粒径は、約１５０ｎｍ〜約３００ｎｍの範囲で変化し得る。本発明の中空ナノ微粒子のこの性質は、センシングに利用し得る。
好ましくは、ポリ-Ｌ-リシンの側鎖アミノ基の１〜６０％、より好ましくは５〜６０％、より好ましくは１０〜６０％(蛍光試薬フルオレスカミンを用いた一級アミノ基定量による；測定方法の詳細については実施例を参照)がポリ-Ｌ-リシンの架橋に関与し、残りの側鎖アミノ基は架橋剤と未反応のままである(すなわち、−ＮＨ2又は−ＮＨ3 +)。
本発明の中空ナノ微粒子において、ポリアミドアミンデンドロンには種々の物質を担持させることができる。ポリアミドアミンデンドロンに担持させ得る物質としては、低分子治療薬、高分子治療薬(例えば、酵素、トキシン)、抗体、リガンド、金、白金、標識物質(例えば、蛍光物質、放射性物質)が挙げられる。物質は、ポリアミドアミンデンドロンの樹状構造(又は網目構造)に保持(間隙に収容)されていてもよいし、或いはポリアミドアミンデンドロン(例えば、末端基)に直接又はリンカーを介して共有結合されていてもよい。
１つの好ましい実施形態において、ポリアミドアミンデンドロンは金又は白金のナノ微粒子を担持している。金をポリアミドアミンデンドロンに担持させるには、従来方法のように、還元剤の存在下で、塩化金酸(例えばテトラクロロ金酸)又は塩化白金酸(例えばヘキサクロロ白金酸)を添加してもよいし、還元剤の非存在下で塩化金酸又は塩化白金酸を添加してもよい。
本発明においては、ポリアミドアミンデンドロンのアミノ基は、ポリ-Ｌ-リシンの存在やデンドロンの世代数とは無関係に(すなわち、ＰＡＭＡＭデンドリマーや、ＰＡＭＡＭデンドロン−脂質のような他のＰＡＭＡＭデンドロン複合体のデンドロン部においても)、還元剤として働き得るので、上記のＰＡＭＡＭデンドロン−ポリ-Ｌ-リシンに限らず任意のＰＡＭＡＭデンドロン複合体(又はＰＡＭＡＭデンドリマー)において、還元剤の非存在下で塩化金酸又は塩化白金酸と接触させることによりＰＡＭＡＭデンドロンに金又は白金のナノ微粒子を担持させることができる。
ここで、還元剤の非存在下でも金又は白金のナノ微粒子を担持させ得るＰＡＭＡＭデンドリマー又はデンドロンは、例えば、繰り返し単位Ｘ＝−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ2ＣＨ2Ｎ＜で、世代数２から８(好ましくは３から６)のものであり得、ＰＡＭＡＭデンドロンと複合体を形成し得る物質は、例えば、ポリエチレングリコール(ＰＥＧ)、ポリペプチド、アミノ酸、ポリエステル(例えばポリラクチド)などの水溶性合成高分子(例えば、分子量１００〜２００００、好ましくは２００〜１５０００、より好ましくは５００〜１００００)であり得る。
ＰＥＧ修飾ＰＡＭＡＭデンドロンは、例えば、次式(１)で表される。
（式中、(−ＣＨ2ＣＨ2Ｏ−)mはＰＥＧを示し、Ｒは水素、又は種々の官能基若しくはポリマーを示す。ここで、Ｒの官能基若しくはポリマーとしては、例えば、(例えばＣ1〜Ｃ8)アルコキシカルボニル基、サクシニル基、アルキルチオール基、ポリエステル(例えばポリラクチド)、核酸(ＤＮＡ又はＲＮＡ、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド(例えば、アンチセンスオリゴヌクレオチド))、ポリペプチド(例えばポリ-Ｌ-リシン)が挙げられる。）
ＰＡＭＡＭデンドロン−ＰＥＧのようなＰＡＭＡＭデンドロン複合体は、公知の方法(例えば、Bioconjugate Chem. 2007, 18, 1163-1169や高分子学会予稿集５６巻２号5088頁(平成19年９月４日発行)に記載の方法)に基づいて製造できる。
還元剤を使用せずにポリアミドアミンデンドロンに金又は白金のナノ微粒子を担持させるには、例えば、本発明の中空ナノ微粒子(又は他のＰＡＭＡデンドリマー若しくはデンドロン)を含む溶媒に弱酸性条件下(ｐＨが４から７、好ましくは５〜６)で塩化金酸を添加すればよい。塩化金酸の添加量は、例えば、ＰＡＭＡＭ分子中の三級アミン数に対して０.０５から１.０等量(好ましくは０.１から０.５等量)である。
還元剤を使用しない場合、金又は白金のナノ微粒子はポリアミドアミンデンドロンの内部に担持され得る。ポリアミドアミンデンドロンが金のナノ微粒子を担持している本発明の中空ナノ微粒子(又は他のＰＡＭＡデンドリマー若しくはデンドロン)は、例えば、センシングに利用でき、検出試薬として提供され得る。
還元剤を使用しない場合、金又は白金のナノ微粒子はポリアミドアミンデンドロンの内部に担持され得る。ポリアミドアミンデンドロンが金のナノ微粒子を担持している本発明の中空ナノ微粒子(又は他のＰＡＭＡデンドリマー若しくはデンドロン)は、例えば、センシングに利用でき、検出試薬として提供され得る。
本発明の中空ナノ微粒子の粒径は、ナノメートルオーダーである。例えば、平均粒径は１００〜３００ｎｍであり得る。１つの好ましい実施形態において、粒径分布は単分散(例えば、多分散指数０.０４〜０.０５)である。
本発明の中空ナノ微粒子は、水性媒体、特に医薬的に許容され得る水性媒体(例えば、水、生理食塩水、緩衝化生理食塩水)に分散させた水性分散液として提供され得る。１つの好ましい実施形態において、水性分散液中の本発明の中空ナノ微粒子の粒径分布は単分散である。
本発明の中空ナノ微粒子は、好適には、繰り返し単位が−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ2ＣＨ2Ｎ＜であり、末端基が親水性基である３.０〜４.０世代(好ましくは３.５世代)のポリアミドアミンデンドロンのヘッド部とポリ-Ｌ-リシン(重合度は６０〜１００、より好ましくは６０〜９０、より好ましくは７０〜９０、より好ましくは７０〜８５である)のテイル部とを有するヘッド-テイル型ブロック共重合体の１００/０〜５０/５０の水/メタノール混合溶媒の溶液に、該溶液の水/メタノールが３０/７０〜０/１００(より好ましくは２０/８０〜０/１００、より好ましくは２０/８０〜１０/９０)となるようにメタノールを滴下して形成される自己組織体を架橋処理して得られた中空ナノ微粒子である。
＜中空ナノ微粒子の製造方法＞
本発明の中空ナノ微粒子の製造方法は、
ポリアミドアミンデンドロンのヘッド部とポリ-Ｌ-リシンのテイル部とを有するヘッド-テイル型ブロック共重合体を、１００/０〜５０/５０の水/水と混和性のアルコール混合溶媒に溶解させ、
得られる溶液に、水/アルコール比が３０/７０〜０/１００となるまでアルコールを滴下して、該ブロック共重合体を中空ナノ微粒子に自己組織化させ、
得られた自己組織体を架橋処理することを含んでなることを特徴とする。
本発明の中空ナノ微粒子の製造方法は、
ポリアミドアミンデンドロンのヘッド部とポリ-Ｌ-リシンのテイル部とを有するヘッド-テイル型ブロック共重合体を、１００/０〜５０/５０の水/水と混和性のアルコール混合溶媒に溶解させ、
得られる溶液に、水/アルコール比が３０/７０〜０/１００となるまでアルコールを滴下して、該ブロック共重合体を中空ナノ微粒子に自己組織化させ、
得られた自己組織体を架橋処理することを含んでなることを特徴とする。
ヘッド-テイル型ブロック共重合体は、公知の方法(例えば、Bioconjugate Chem., 17, 3(2006)に記載の方法)に基づいて製造できる。
簡潔には、ヘッド部のポリアミドアミンデンドロンは、例えば、一方のアミノ基を保護したエチレンジアミンに、マイケル付加反応と続くエステルアミド交換反応とからなる１サイクルの反応を所望の世代数と同じ数のサイクル繰り返し、任意に(上記のような)末端基を付加することにより製造することができる。例えば、世代数３.５のポリアミドアミンデンドロンは、マイケル付加反応とエステルアミド交換反応とからなる反応サイクルを３.５サイクル繰り返す。ここで、「３.５サイクル」とは、３サイクルの反応後、マイケル付加反応を行い、エステルアミド交換反応を行わないことを意味する。
繰り返し単位が−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ2ＣＨ2Ｎ＜であるポリアミドアミンデンドロンを作製する場合、アクリル酸メチルを用いるマイケル付加反応とエチレンジアミンを用いるエステルアミド交換反応との反応サイクルを用いことができる。
繰り返し単位が−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ2ＣＨ2Ｎ＜であるポリアミドアミンデンドロンを作製する場合、アクリル酸メチルを用いるマイケル付加反応とエチレンジアミンを用いるエステルアミド交換反応との反応サイクルを用いことができる。
一方、テイル部(ポリ-Ｌ-リシン)は、例えば、ε-ベンジルオキシカルボニル-Ｌ-リシン無水物の重合反応により製造できる。
ヘッド部とテイル部は、別々に製造した後に結合してもよいし、予め製造したヘッド部に対してテイル部を、又は予め製造したテイル部に対してヘッド部を形成してもよい。
ヘッド部とテイル部は、別々に製造した後に結合してもよいし、予め製造したヘッド部に対してテイル部を、又は予め製造したテイル部に対してヘッド部を形成してもよい。
このブロック共重合体は１００/０〜５０/５０の水/水と混和性のアルコール混合溶媒に容易に溶解する。水と混和性のアルコールとしては、好ましくは低級アルコール、より好ましくはＣ1〜Ｃ4アルコール、最も好ましくはメタノールである。
得られる溶液に、該溶液中の水/水と混和性のアルコール比３０/７０〜０/１００(好ましくは２０/８０〜０/１００、より好ましくは２０/８０〜１０/９０)までアルコールを滴下すると、ブロック共重合体が単分散の自己組織体(中空ナノ微粒子)を形成する。
この時点(架橋処理前)の自己組織体は、水中又は高水/低アルコール混合溶媒中に移すとベシクル構造が崩壊し、ブロック共重合体は溶解する。
得られる自己組織体を架橋処理すると、自己組織体は、水中でもベシクル構造が維持されるようになる。
得られる自己組織体を架橋処理すると、自己組織体は、水中でもベシクル構造が維持されるようになる。
架橋剤としては、上記のいずれも使用できるが、好ましくは１,２-ビス(２,３-エポキシプロポキシ)エタン、グルタルアルデヒドである。架橋剤は、自己組織体の分散媒体と同じ水/水と混和性のアルコール混合溶媒に溶解させて添加する。
架橋剤の添加量は、ヘッド-テイル型共重合体のポリ-Ｌ-リシン中のアミノ基に対して例えば０.１〜５０当量、好ましくは０.２〜２５当量、より好ましくは０.２５〜１０等量である。
架橋剤の添加後、例えば２時間程度又はそれ以上静置すれば架橋が完了する。
架橋剤の添加量は、ヘッド-テイル型共重合体のポリ-Ｌ-リシン中のアミノ基に対して例えば０.１〜５０当量、好ましくは０.２〜２５当量、より好ましくは０.２５〜１０等量である。
架橋剤の添加後、例えば２時間程度又はそれ以上静置すれば架橋が完了する。
本発明の方法によれば、従来の分粒処理を要さずに、狭い単分散のナノ微粒子が得られる。しかし、適切な場合には、公知の方法(例えばフィルタリングや超音波処理)により更に分粒してもよい。
実施例１：ポリアミドアミンデンドロンのヘッド部とポリ-Ｌ-リシンのテイル部とを有するヘッド-テイル型ブロック共重合体から形成されるベシクルへの架橋構造導入による中空ナノ微粒子の調製
Haradaら(Bioconjugate Chem., 17, 3(2006))に記載される方法に従って、次式(２)で示されるヘッド-テイル型共重合体(ポリアミドアミンデンドロン世代数が３.５、ポリ-Ｌ-リシン数平均重合度が８２) ４.０ｍｇに蒸留水４００μｌを加えて溶解させた後、更にメタノール４００μｌを加えた。
Haradaら(Bioconjugate Chem., 17, 3(2006))に記載される方法に従って、次式(２)で示されるヘッド-テイル型共重合体(ポリアミドアミンデンドロン世代数が３.５、ポリ-Ｌ-リシン数平均重合度が８２) ４.０ｍｇに蒸留水４００μｌを加えて溶解させた後、更にメタノール４００μｌを加えた。
その後、攪拌しながら、メタノール１２００μｌを１５分かけて滴下し、溶媒組成を体積分率にして水：メタノール＝２：８にまで変化させ、該溶媒中で該ヘッド-テイル型共重合体のベシクルを形成させた。形成されたベシクルの形態を透過型電子顕微鏡観察(JEM-2000FEXII、日本電子株式会社製)、粒径を動的光散乱測定(ＥＬＳ−８０００、大塚電子株式会社製)により確認した。電子顕微鏡写真を図１、動的光散乱測定によって得られた粒径分布を図２に示す。Ｚ−平均粒径が約１９０ｎｍの単分散なベシクルが形成されていることが確認された。
その後、この溶液に、１,２-ビス(２,２-エポキシプロポキシ)エタン３０μｌ(２.０５×１０-4 ｍｏｌ：ポリ-Ｌ-リシンのアミノ基数に対して１０等量)を滴下し撹拌した。２時間の架橋反応後の動的光散乱測定によって得られた粒径分布を図３に示す。単分散な粒径分布を維持していることが確認された。
その後、蒸留水に対して透析を行うことにより溶媒を水へと置換した。この溶媒置換は、架橋反応を行っていないものについても同様に行った。溶媒置換後の粒径分布を図４に示す。架橋反応を行っていないものではナノ微粒子は検出されなかったが、架橋を施したものではＺ−平均粒径が約２５０ｎｍの単分散な中空ナノ微粒子が確認された。これは架橋によりベシクル構造が安定化され、水系溶媒中で安定に存在していることを意味する。また、この溶液１ｍＬを凍結乾燥した後、水１ｍＬにより再構成させたところ、水中での中空ナノ微粒子の再分散が確認され、本発明の中空ナノ微粒子は凍結乾燥が可能であることが確認された。
ここで、第一級アミノ基と反応して蛍光を発する試薬であるフルオレスカミンを用いて未反応アミノ基数の定量実験を行った。励起波長３９０ｎｍ、蛍光波長４７９ｎｍでの蛍光測定(FP-6500、日本分光株式会社製)により４４％のアミノ基が未反応で存在し、５６％のアミノ基に対して架橋反応が生じたことが確認された。また、架橋反応後の溶液について円二色性測定(J-820、日本分光株式会社製)からポリ-L-リシン部がα-ヘリックス構造を維持していることが確認された。
実施例２：中空ナノ微粒子の平均粒径へのｐＨの影響
実施例１に示した手順で調製された中空ナノ微粒子溶液において、０.０５Ｍ水酸化ナトリウム水溶液及び０.０５Ｍ塩酸を用いてｐＨを変化させることにより、種々ｐＨ条件下での中空ナノカプセルのＺ−平均粒径を動的光散乱測定により評価した。図５に中空ナノ微粒子の平均粒径のｐＨ依存性を示す。ｐＨ８.５付近を境としてポリ-Ｌ-リシンの架橋反応に関与しなかったアミノ基がイオン化状態の変化によって粒径の変化が生じていることが確認された。低ｐＨ条件下(アミノ基がプロトン化している状態)ではベシクル膜内のイオン浸透圧が高いため膨潤して粒径が２８０ｎｍ程度となり、高ｐＨ条件下(脱プロトン化している状態)では収縮して粒径が１８０ｎｍ程度となり、ｐＨ変化によってベシクル膜の網目の密度が変化する。
実施例１に示した手順で調製された中空ナノ微粒子溶液において、０.０５Ｍ水酸化ナトリウム水溶液及び０.０５Ｍ塩酸を用いてｐＨを変化させることにより、種々ｐＨ条件下での中空ナノカプセルのＺ−平均粒径を動的光散乱測定により評価した。図５に中空ナノ微粒子の平均粒径のｐＨ依存性を示す。ｐＨ８.５付近を境としてポリ-Ｌ-リシンの架橋反応に関与しなかったアミノ基がイオン化状態の変化によって粒径の変化が生じていることが確認された。低ｐＨ条件下(アミノ基がプロトン化している状態)ではベシクル膜内のイオン浸透圧が高いため膨潤して粒径が２８０ｎｍ程度となり、高ｐＨ条件下(脱プロトン化している状態)では収縮して粒径が１８０ｎｍ程度となり、ｐＨ変化によってベシクル膜の網目の密度が変化する。
実施例３：中空ナノ微粒子への物質の包含と放出
実施例１で示した手順で調製された中空ナノ微粒子溶液を０.１Ｍ塩酸を用いてｐＨ４.０とした。この溶液１ｍＬに、同じくｐＨ４.０のローズベンガル水溶液(０.０３ｍｇ/ｍＬ)１ｍＬを加えた。一晩静置した後、カラムに通し、中空ナノ微粒子のフラクションを回収し、紫外可視分光光度計(V-550、日本分光株式会社製)により、内部空間におけるローズベンガルの存在を確認した。５５０ｎｍの吸光度が０.０５６であった。
実施例１で示した手順で調製された中空ナノ微粒子溶液を０.１Ｍ塩酸を用いてｐＨ４.０とした。この溶液１ｍＬに、同じくｐＨ４.０のローズベンガル水溶液(０.０３ｍｇ/ｍＬ)１ｍＬを加えた。一晩静置した後、カラムに通し、中空ナノ微粒子のフラクションを回収し、紫外可視分光光度計(V-550、日本分光株式会社製)により、内部空間におけるローズベンガルの存在を確認した。５５０ｎｍの吸光度が０.０５６であった。
その後、０.１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液を用いてｐＨ９.０とし、そのまま中空ナノ微粒子を２日間保存し、再度紫外可視分光光度を測定した。５５０ｎｍの吸光度は０.０５５であり、中空ナノ微粒子の内部空間におけるローズベンガル量に変化はなかった。しかし、続いて０.１Ｍ塩酸を用いてｐＨ４.０とすると、５５０ｎｍの吸光度は０.０１９となり内部空間中のローズベンガル量の減少が確認された。これは、本発明の中空ナノ微粒子が低ｐＨ条件下では膨潤しており拡散によって物質を包含することができ、高ｐＨへ変化させ収縮させることによって物質が安定に保持されることを意味する。さらに、ｐＨを再び低下させると、中空ナノ微粒子から放出させることも可能であることが確認された。
実施例４ａ：中空ナノ微粒子のポリアミドアミンデンドロン部での金ナノ微粒子の担持
実施例１で示した手順で調製された中空ナノ微粒子溶液１.７３９ｍｌにテトラクロロ金(III)酸四水和物０.１８ｍｇ(４.３７×１０-7 ｍｏｌ)を含むリン酸緩衝液(ｐＨ７.４)を、還元剤の非存在下で、激しく撹拌しつつ加え、その後静置し、紫外可視吸収スペクトルの経時変化を観測した。紫外可視吸収スペクトルの変化を図６に示す。時間変化にともに５３０ｎｍ付近の吸収が増大し、金ナノ微粒子の生成が確認された。また、金ナノ微粒子の生成は透過型電子顕微鏡観察により確認した(図７)。金ナノ微粒子が中空ナノ微粒子内で生成され担持されていることが確認された。よって、本発明の中空ナノ微粒子においては、還元剤を用いることなく、ポリアミドアミンデンドロンに金ナノ微粒子を担持できることが確認された。
実施例１で示した手順で調製された中空ナノ微粒子溶液１.７３９ｍｌにテトラクロロ金(III)酸四水和物０.１８ｍｇ(４.３７×１０-7 ｍｏｌ)を含むリン酸緩衝液(ｐＨ７.４)を、還元剤の非存在下で、激しく撹拌しつつ加え、その後静置し、紫外可視吸収スペクトルの経時変化を観測した。紫外可視吸収スペクトルの変化を図６に示す。時間変化にともに５３０ｎｍ付近の吸収が増大し、金ナノ微粒子の生成が確認された。また、金ナノ微粒子の生成は透過型電子顕微鏡観察により確認した(図７)。金ナノ微粒子が中空ナノ微粒子内で生成され担持されていることが確認された。よって、本発明の中空ナノ微粒子においては、還元剤を用いることなく、ポリアミドアミンデンドロンに金ナノ微粒子を担持できることが確認された。
得られた溶液１.０ｍＬに対して光量６４０Ｗ/ｍ2の可視光を照射し、その間の溶液の温度変化を、熱伝対を用いて測定した。塩化金酸濃度を等しくした市販の金ナノ微粒子溶液(５nm Colloidal Gold、SIGMA製)についても同様の測定を行った。光照射時間と温度変化の関係を図８に示す。市販の金ナノ微粒子と同様に、中空ナノ微粒子に担持された金ナノ微粒子も発熱挙動を示すことが確認された。
実施例４ｂ：ポリアミドアミンデンドリマーを利用した還元剤非存在下での金ナノ微粒子の調製
第４世代のポリアミドアミンデンドリマー３６.６ｍｇを５０ｍＭリン酸緩衝液(ｐＨ＝７.４)１８.３ｍＬに溶解させた。この溶液１ｍＬに０.７３１ｍｇ/ｍＬの塩化金酸溶液１ｍＬ加え、その後の紫外可視分光スペクトルの変化を観測した。紫外可視分光スペクトルの経時変化を図９に示す。時間変化に伴い、５３０ｎｍ付近の吸収が増大し、金ナノ微粒子の生成が確認された。
このことから、還元剤非存在下でのＰＡＭＡＭデンドロンへの金ナノ微粒子の担持にはポリ-Ｌ-リシンは関与していないことが確認できた。
第４世代のポリアミドアミンデンドリマー３６.６ｍｇを５０ｍＭリン酸緩衝液(ｐＨ＝７.４)１８.３ｍＬに溶解させた。この溶液１ｍＬに０.７３１ｍｇ/ｍＬの塩化金酸溶液１ｍＬ加え、その後の紫外可視分光スペクトルの変化を観測した。紫外可視分光スペクトルの経時変化を図９に示す。時間変化に伴い、５３０ｎｍ付近の吸収が増大し、金ナノ微粒子の生成が確認された。
このことから、還元剤非存在下でのＰＡＭＡＭデンドロンへの金ナノ微粒子の担持にはポリ-Ｌ-リシンは関与していないことが確認できた。
実施例４ｃ：先端(末端基)へポリエチレングリコールが導入された種々の世代数のポリアミドアミンデンドロンを利用した還元剤非存在下での金ナノ微粒子の調製
世代数２.０、３.０、４.０のポリアミドアミンデンドロンの先端に分子量２０００のポリエチレングリコール鎖がそれぞれ４本、８本、１６本導入されたポリエチレングリコール修飾ポリアミドアミンデンドロン(ＰＥＧ修飾ＰＡＭＡＭデンドロン)を用いた。例えば、世代数３.０のＰＥＧ修飾ＰＡＭＡＭデンドロンは次式(３)で表される。
世代数２.０、３.０、４.０のポリアミドアミンデンドロンの先端に分子量２０００のポリエチレングリコール鎖がそれぞれ４本、８本、１６本導入されたポリエチレングリコール修飾ポリアミドアミンデンドロン(ＰＥＧ修飾ＰＡＭＡＭデンドロン)を用いた。例えば、世代数３.０のＰＥＧ修飾ＰＡＭＡＭデンドロンは次式(３)で表される。
上記のポリエチレングリコール修飾ポリアミドアミンデンドロンを５０ｍＭリン酸緩衝液(ｐＨ＝７.４)に溶解して、それぞれ２１.１ｍｇ/ｍＬ、１８.１ｍｇ/ｍＬ、１７.０ｍｇ/ｍＬの溶液を調製した。種々ｐＨ(２、３、４、５、６、７及び８)の０.７３１ｍｇ/ｍＬの塩化金酸水溶液を調製した。上記ポリエチレングリコール修飾ポリアミドアミンデンドロン１ｍＬと上記塩化金酸水溶液１ｍＬを混合し、得られた混合溶液の紫外可視分光スペクトルの変化を観測した。
世代数２.０のポリエチレングリコール修飾ポリアミドアミンデンドロンとｐＨ５、６及び７の塩化金酸水溶液を混合して２４時間後の紫外可視分光スペクトルを図１０に示す。
世代数３.０のポリエチレングリコール修飾ポリアミドアミンデンドロンとｐＨ５、６及び７の塩化金酸水溶液を混合して２４時間後の紫外可視分光スペクトルを図１１に示す。
世代数４.０のポリエチレングリコール修飾ポリアミドアミンデンドロンを用いｐＨ２〜８の塩化金酸水溶液を混合して２４時間後の紫外可視分光スペクトルを図１２に示す。
世代数３.０のポリエチレングリコール修飾ポリアミドアミンデンドロンとｐＨ５、６及び７の塩化金酸水溶液を混合して２４時間後の紫外可視分光スペクトルを図１１に示す。
世代数４.０のポリエチレングリコール修飾ポリアミドアミンデンドロンを用いｐＨ２〜８の塩化金酸水溶液を混合して２４時間後の紫外可視分光スペクトルを図１２に示す。
いずれの世代数のポリエチレングリコール修飾ポリアミドアミンデンドロンにおいても金ナノ微粒子の生成による吸収が確認された。
このことから、先端(末端基)にＰＥＧのような水溶性高分子が結合したＰＡＭＡＭデンドロンであっても、還元剤非存在下で、ＰＡＭＡＭデンドロンに金ナノ微粒子を担持させることが可能であることが確認できた。
このことから、先端(末端基)にＰＥＧのような水溶性高分子が結合したＰＡＭＡＭデンドロンであっても、還元剤非存在下で、ＰＡＭＡＭデンドロンに金ナノ微粒子を担持させることが可能であることが確認できた。
吸収スペクトルの極大波長はｐＨに依存して変化している。
また、世代数４.０のＰＥＧ修飾ＰＡＭＡＭデンドロンとｐＨ６及び７の塩化金酸水溶液とを混合して調製されたものを透過型電子顕微鏡で観察したところ、ｐＨに依存してサイズの明らかな違いが確認された(図１３)。ｐＨ６（左図）では数ｎｍの金ナノ微粒子であるのに対し、ｐＨ７（右図）では約４０〜５０ｎｍの金ナノ微粒子となっている。
また、世代数４.０のＰＥＧ修飾ＰＡＭＡＭデンドロンとｐＨ６及び７の塩化金酸水溶液とを混合して調製されたものを透過型電子顕微鏡で観察したところ、ｐＨに依存してサイズの明らかな違いが確認された(図１３)。ｐＨ６（左図）では数ｎｍの金ナノ微粒子であるのに対し、ｐＨ７（右図）では約４０〜５０ｎｍの金ナノ微粒子となっている。
このことから、デンドロン(デンドリマー)に担持される金ナノ微粒子の粒径は、塩化金酸水溶液のｐＨにより制御することが可能であることがわかる。
Claims (11)
- ポリアミドアミンデンドロンのヘッド部とポリ-Ｌ-リシンのテイル部とを有するヘッド-テイル型ブロック共重合体のベシクルからなり、ポリ-Ｌ-リシン間が架橋されている水中で安定な中空ナノ微粒子。
- ポリ-Ｌ-リシンがα-ヘリックス構造を有する、請求項１に記載の中空ナノ微粒子。
- ポリ-Ｌ-リシンの側鎖アミノ基の１〜６０％がポリ-Ｌ-リシン間の架橋に関与している、請求項１又は２に記載の中空ナノ微粒子。
- ポリアミドアミンデンドロンの繰り返し単位が−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＮＨＣＨ2ＣＨ2Ｎ＜であり、世代数が３.０〜４.０である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の中空ナノ微粒子。
- ポリアミドアミンデンドロンが３.５世代である請求項４に記載の中空ナノ微粒子。
- 内部空間に薬物を含んでなる請求項１〜５のいずれか１項に記載の中空ナノ微粒子。
- 内部空間に核酸を含んでなる請求項１〜５のいずれか１項に記載の中空ナノ微粒子。
- ポリアミドアミンデンドロンが金又は白金のナノ微粒子を担持している、請求項１〜７のいずれか１項に記載の中空ナノ微粒子。
- 請求項１〜８のいずれか１項に記載の中空ナノ微粒子を含んでなる水性分散液。
- ポリアミドアミンデンドロンのヘッド部とポリ-Ｌ-リシンのテイル部とを有するヘッド-テイル型ブロック共重合体を、１００/０〜５０/５０の水/水と混和性のアルコール混合溶媒に溶解させ、
得られる溶液に、水/アルコール比が３０/７０〜０/１００となるまでアルコールを滴下して、該ブロック共重合体を中空ナノ微粒子に自己組織化させ、
得られた自己組織体を架橋処理することを含んでなる、水中で安定な中空ナノ微粒子の製造方法。 - 水と混和性のアルコールがメタノールである、請求項１０に記載の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2008121543A JP5317031B2 (ja) | 2008-05-07 | 2008-05-07 | ヘッド−テイル型共重合体の中空ナノ微粒子 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2008121543A JP5317031B2 (ja) | 2008-05-07 | 2008-05-07 | ヘッド−テイル型共重合体の中空ナノ微粒子 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2009269998A JP2009269998A (ja) | 2009-11-19 |
| JP5317031B2 true JP5317031B2 (ja) | 2013-10-16 |
Family
ID=41436853
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2008121543A Expired - Fee Related JP5317031B2 (ja) | 2008-05-07 | 2008-05-07 | ヘッド−テイル型共重合体の中空ナノ微粒子 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP5317031B2 (ja) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101999421B1 (ko) * | 2013-02-19 | 2019-07-11 | 내셔날 헬스 리서치 인스티튜트 | 항암 화학치료제를 위한 케이지된 백금 나노클러스터 |
| WO2016002742A1 (ja) * | 2014-07-01 | 2016-01-07 | 新日鉄住金化学株式会社 | 樹脂－金属複合体、標識物質、免疫学的測定法、免疫学的測定用試薬、アナライトの測定方法、アナライト測定用キット、及び、ラテラルフロー型クロマト用テストストリップ |
| EP3460472A1 (en) * | 2017-09-22 | 2019-03-27 | Nokia Technologies Oy | Functionalised particles |
| CN110842213B (zh) * | 2019-11-12 | 2022-05-27 | 广东羚光新材料股份有限公司 | 一种高活性银粉及其制备方法和应用 |
| CN112625252B (zh) * | 2020-12-23 | 2022-05-24 | 华南理工大学 | 一种pH响应增强渗透性的改性树枝状PAMAM聚合物及其制备与应用 |
| CN117180181A (zh) * | 2023-09-01 | 2023-12-08 | 常州市智态生创科技有限公司 | 一种葡萄糖mmp-9基质酶双响应层层释药糖尿病创面愈合凝胶及其制备方法和应用 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU3649697A (en) * | 1996-06-27 | 1998-01-14 | G.D. Searle & Co. | Particles comprising amphiphilic copolymers, having a cross-linked shell domain and an interior core domain, useful for pharmaceutical and other applications |
| JP4763459B2 (ja) * | 2003-05-29 | 2011-08-31 | 株式会社東京大学Ｔｌｏ | 安定化高分子ミセル |
| CA2603853C (en) * | 2005-04-01 | 2013-11-19 | Intezyne Technologies, Incorporated | Polymeric micelles for drug delivery |
| JP4870941B2 (ja) * | 2005-05-09 | 2012-02-08 | 公立大学法人大阪府立大学 | 高分子化合物 |
| JP5131652B2 (ja) * | 2006-10-18 | 2013-01-30 | 富山県 | ポリグリセロールデンドリマーの３次元架橋物及び３次元架橋方法、並びにこれを用いたヒドロゲル、薬物送達システム |
-
2008
- 2008-05-07 JP JP2008121543A patent/JP5317031B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2009269998A (ja) | 2009-11-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Zhao et al. | Versatile types of organic/inorganic nanohybrids: from strategic design to biomedical applications | |
| Deirram et al. | pH‐responsive polymer nanoparticles for drug delivery | |
| Neamtu et al. | Basic concepts and recent advances in nanogels as carriers for medical applications | |
| Lallana et al. | Click chemistry for drug delivery nanosystems | |
| Müllner | Molecular polymer brushes in nanomedicine | |
| JP5317031B2 (ja) | ヘッド−テイル型共重合体の中空ナノ微粒子 | |
| Stoffelen et al. | Soft supramolecular nanoparticles by noncovalent and host–guest interactions | |
| Abbasi et al. | Dendrimers: synthesis, applications, and properties | |
| Kono | Dendrimer-based bionanomaterials produced by surface modification, assembly and hybrid formation | |
| Golshan et al. | Poly (propylene imine) dendrimer-grafted nanocrystalline cellulose: Doxorubicin loading and release behavior | |
| Gao | Development of star polymers as unimolecular containers for nanomaterials | |
| Thambi et al. | Bioreducible carboxymethyl dextran nanoparticles for tumor‐targeted drug delivery | |
| Li et al. | Click-chemistry for nanoparticle-modification | |
| JP5912186B2 (ja) | 金属微粒子を含む静電結合型ベシクル | |
| Muddineti et al. | Xanthan gum stabilized PEGylated gold nanoparticles for improved delivery of curcumin in cancer | |
| Zhuang et al. | Laponite-polyethylenimine based theranostic nanoplatform for tumor-targeting CT imaging and chemotherapy | |
| Yang et al. | Biocompatible cellulose-based supramolecular nanoparticles driven by host–guest interactions for drug delivery | |
| Gupta et al. | Non‐ionic Dendronized Multiamphiphilic Polymers as Nanocarriers for Biomedical Applications | |
| JP6049854B2 (ja) | 物質内包ベシクル及びその製造方法 | |
| Tambe et al. | Smart triblock dendritic unimolecular micelles as pioneering nanomaterials: Advancement pertaining to architecture and biomedical applications | |
| US8445588B2 (en) | Hydrophilic copolymers and assemblies containing the same | |
| Rabiee et al. | Synthesis, characterization and mechanistic study of nano chitosan tetrazole as a novel and promising platform for CRISPR delivery | |
| Pinelli et al. | A perspective on the applications of functionalized nanogels: promises and challenges | |
| Singh et al. | Block copolymer nanostructures and their applications: A review | |
| Chen et al. | Recent progress in fluorescent vesicles with aggregation-induced emission |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20110502 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20121030 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20130625 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20130701 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |