JP5297040B2 - アッセイシステム - Google Patents
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Description
本発明は、サンプル中の分析物の検出のための凝集に基づくアッセイシステムに関する。また、アッセイシステムの試験デバイスおよび読取装置、ならびにこのシステムを用いるアッセイ方法、ならびに本発明の構成要素を含むキットも提供される。
i)複数の別々のキャピラリー経路を有する試験デバイスであって、キャピラリー経路に沿って血液がその上流末端から下流末端へ流れ、この経路は血液の存在または非存在が検出され得る検出領域を有し、この試験経路はさらに、血液の血液型特徴に依存した組み合わせで、この経路の全てではないが少なくとも1つにおいて血液の凝集を生じる試薬を含む試験デバイスと、
ii)前記検出領域に血流のパターンを提供するように、前記キャピラリー経路の各々における検出領域で血液の存在を検出するための検出手段と、
iii)工程ii)において決定されるパターンから血液型特徴を識別するための電気的手段とを含む。
i) 本明細書において前述のシステムを提供する工程と;
ii) 各々のキャピラリー経路の上流末端へ試薬を導入する工程であって、これにより血液の血液型特徴に依存した組み合わせで、この経路の全てではないが少なくとも1つにおいて血液の凝集を生じる工程と;
iii)キャピラリー経路の上流末端に血液を導入する工程と;
iv) キャピラリー経路内の血流のパターンを決定するために、キャピラリーの検出領域で血液の存在を検出する工程と;
v) iii)において決定されたパターンから血液型特徴を識別するために電気的手段を用いる工程。
(a)試験用に提供された血液の、以前に決定された血液型特徴を記憶し;
(b)本発明のシステムからこの提供された血液の血液型特徴の結果を電気的に受け取り;
(c)提供される血液が、以前に記録されたのと同じ血液型特徴のものであるかまたはそうでないかを確認するために、(a)および(b)の情報を比較し;
(d)血液が提供される患者の血液型特徴について情報を記憶し;そして
(e)患者に対する投与についてこの血液が誤った型のものである場合、警告出力を提供する。
50%エタノールでの洗浄、続いて0.25%のTween20での洗浄によって試薬の沈着のためにキャピラリー試験ベッドを準備した。赤血球凝集試薬(AGEN SimpliRED(商標)D−ダイマー「試験試薬」)(5μl)を、キャピラリー「試験」トラックに、その長さのほぼ中間にピペッティングした。キャピラリーの「参照」トラックは、空のままにしておいた。試薬の沈着後、試験手順を行う前に、試験ベッドを乾燥させて接着テープを用いて密閉した
D−ダイマー試験における使用のためのサンプルを以下のとおり調製した。
ヒトドナーの全血を、細胞/血漿画分に分離して、総容積(血漿画分)のうち25%をD−ダイマー分析物(AGEN SimpliRED(商標)D−ダイマー「ポジティブコントロール」)および/または10mMのリン酸緩衝化生理食塩水pH7.4、0.5%ウシ血清アルブミンで置き換えて、それによって、0%〜25%の(ポジティブコントロール試薬濃度の)D−ダイマー濃度を含有する一連の「シミュレートされた(simulated)」D−ダイマー陽性血液サンプルを生成した。
キャピラリー凝集試験手順は、以下の方法で行った。
(i)20μlのサンプル血液を準備した試験デバイスの出発領域に導入した。(液体を毛管現象によってトラックの最初の10cmに入れた(各々のトラックにほぼ10μl))。
(ii)2分後、10mMのリン酸緩衝化生理食塩水pH7.4の180μlをデバイスの液体リザーバに導入した。(これによって、キャピラリーの流動を再開させた)。
(iii)液体が試験および参照キャピラリートラックの末端に達するのに要する時間を記録した。
試験デバイスを、AGEN SimpliRED(商標)D−ダイマー試験赤血球凝集試薬を用いて、前述の「試験デバイスの準備」に従って調製した。0%〜25%(AGEN SimpliRED(商標)D−ダイマー試験陽性のコントロールに関して)の間のある範囲のD−ダイマー濃度を含有するヒトの全血サンプルを、前述の「サンプル調製」に従って調製した。試験手順は、前述の「試験手順」に従って行い、そして試験および参照レーンの泳動時間を記録した(n=10)。試験と参照のキャピラリーの泳動時間の間の相違を、「シミュレートされた」サンプルのD−ダイマー濃度に対してプロットした(図4)。
Claims (32)
- サンプル中の分析物の量を決定するための凝集に基づくアッセイにおいて用いるための試験デバイスであって、前記試験デバイスは、少なくとも2つのキャピラリー経路を含み、少なくとも一方がアッセイ経路であって、他方が前記アッセイ経路との比較のためのコントロールの経路であり、各経路が、前記サンプルを受け取る上流末端から下流末端へ伸展し、前記キャピラリー経路の各々が、検出領域への液体流のパターンが前記経路に沿った流速の指標であるような方法で液体の存在または不存在を決定するための、キャピラリー経路中の事前に決定された位置に1より多い検出領域を含み、前記試験デバイスが、読取装置に取り外し可能に取り付けることができ、前記読取装置が、前記キャピラリー経路の各々における検出領域での液体の非視覚的検出のための検出手段と、前記コントロール経路とアッセイ経路におけるパターンの比較に基づいて分析物の存在および/または量を示すための電気的手段とを含む試験デバイス。
- 前記サンプルおよび/または試薬を受け取るために前記上流末端に区域を含む請求項1に記載の試験デバイス。
- 前記キャピラリー経路の入口に一方向弁を含み、該弁を開く際に、前記区域に適用された前記サンプル/試薬が前記経路に入ることはできるが、前記経路を出ることができない請求項2に記載の試験デバイス。
- 読取装置に前記試験デバイスを取り外し可能に取り付けるための手段を含む請求項1〜3のいずれかに記載の試験デバイス。
- 前記キャピラリー経路の1つ以上に、事前に適用された凝集試薬を含む請求項1〜4のいずれかに記載の試験デバイス。
- 前記事前に決定された位置が、事前に適用された凝集試薬の下流である請求項5に記載の試験デバイス。
- 比較の目的のために、各経路が、上流末端から検出領域まで、同じ長さである、請求項1〜6のいずれかに記載の試験デバイス。
- サンプル中の分析物の量を決定するための凝集に基づくアッセイにおいて用いるための読取装置であって、請求項1〜7のいずれかに記載の試験デバイスが、前記読取装置に取り外し可能に取り付けられ、前記読取装置が、各経路における液体の流速の指標である検出領域への液体流のパターンを検出するための、前記試験デバイスの各々のキャピラリー経路における1より多い検出領域での液体の非視覚的検出のための検出手段と、前記コントロール経路とアッセイ経路との間でのパターンの比較に基づいて分析物の存在および/または量を示すための電気的手段とを含む読取装置。
- 前記検出手段が、反射率計、光散乱の測定のような光学的手段;流体検出;濁度測定;電気的手段、および比濁分析を含む請求項8に記載の読取装置。
- 前記検出手段が、電気光学的検出手段である、請求項9に記載の読取装置。
- 前記検出手段が、光依存性ダイオード(LDD)または感光性レジスタのアレイを含む、電気光学的検出手段である請求項10に記載の読取装置。
- 前記電気光学的検出器が、光透過率によってバーコードを読み取るために用いられるタイプである請求項11に記載の読取装置。
- 前記デバイスが機能していることを確認することを経て検出領域に達するサンプルの存在を検出するように前記検出手段がプログラミングされている請求項8〜11のいずれかに記載の読取装置。
- 前記試験デバイスが機能していることを確認することを経てコントロールのキャピラリー経路の上流領域でサンプルの存在を検出するように前記検出手段がプログラミングされている請求項8〜13のいずれかに記載の読取装置。
- 前記電気的手段が、シグナル処理手段と、ディスプレイ手段とを含む請求項8〜13のいずれかに記載の読取装置。
- 前記シグナル処理手段がまた、前記アッセイにおいて作動するタイマーを含む請求項15に記載の読取装置。
- サンプル中の分析物の量を決定するための凝集に基づくアッセイシステムであって、請求項8〜16のいずれか一項に記載の読取装置と、前記読取装置に取り外し可能に取り付けることができる請求項1〜7のいずれか一項に記載の試験デバイスとを含むシステム。
- 提供された試験デバイスの数と同数のアッセイを行うために1つ以上の請求項1〜7のいずれか一項に記載の試験デバイスと、試薬とを含むキット。
- 読取装置、緩衝液、説明書、チャート、乾燥剤、コントロールのサンプル、色素、バッテリーおよび/またはシグナル処理/ディスプレイ手段をさらに含む請求項18に記載のキット。
- 請求項17に記載のシステムを用いて、サンプル中の分析物の量を決定するための方法であって、
請求項1〜7のいずれか一項に記載の試験デバイスにサンプルを適用するステップと、
アッセイを実施し、読取装置の検出装置を用いて、複数の検出領域で、液体の存在または非存在を検出するために、請求項8〜15のいずれか一項に記載の読取装置に、前記デバイスを取り外し可能に取り付けるステップであって、各経路における液体の流速の指標となる前記検出領域への液体流のパターンを提供し、検出する、ステップと、
前記デバイスの前記コントロール経路とアッセイ経路との間で、存在する分析物の量の表示としての流速を比較するステップと
を含む方法。 - 前記凝集試薬が、凝集粒子に結合され、検出されるべき分析物について優先的な親和性を有する結合パートナーを含む請求項5または6に記載の試験デバイス、または該試験デバイスを含むシステム、もしくはキット。
- 前記結合パートナーが、モノクローナル抗体またはポリクローナル抗体、抗原、タンパク質、酵素、結合タンパク質、アプタマー、オリゴヌクレオチド、糖、およびそれらのフラグメントである請求項21に記載の試験デバイス、システム、またはキット。
- 前記結合パートナーに結合される前記粒子が、微生物、細胞、巨大分子、金粒子、ビーズ、ラテックスビーズ、チャコール、カオリナイトまたはベントナイトを含む請求項22に記載の試験デバイス、システム、またはキット。
- 凝集粒子が細胞である請求項23に記載の試験デバイス、システム、またはキット。
- 凝集粒子が赤血球である請求項24に記載の試験デバイス。
- 前記凝集試薬システムが、ヘム(heam)に基づくシステムである請求項24に記載の試験デバイス、システム、またはキット。
- 前記システムが、AGEN SimliRed(商標)システムである請求項25に記載の試験デバイス、システム、またはキット。
- 前記サンプルが、尿、全血、血液画分、精液、汗、唾液、羊水、脳脊髄液、胸水、歯肉滲出液、嚢胞抽出物および組織抽出物である請求項1〜19、及び21〜27のいずれかに記載の試験デバイス、システム、キット、または読取装置。
- 前記分析物が、抗原、抗体、オリゴヌクレオチド、ホルモン、アプタマー、糖またはそれらの組み合わせおよびフラグメント、生物体またはそのフラグメント、または治療および非治療的な薬物である請求項1〜19、及び21〜28のいずれかに記載の試験デバイス、システム、キット、または読取装置。
- 血液サンプルの血液型特徴を決定するためのシステムであって、
i)複数の別々のキャピラリー経路を有する請求項1〜7のいずれかに記載の試験デバイスであって、経路に沿って血液がその上流末端から下流末端へ流れ、前記各経路は血液の存在、不存在が検出され得る検出領域を有し、前記経路は、血液の血液型特徴に依存した組み合わせで、前記経路の全てではないが少なくとも1つにおいて血液の凝集を生じる試薬をさらに含む試験デバイスと、
ii)前記検出領域への血流のパターンを検出するように、前記キャピラリー経路の各々において各検出領域で血液の存在を検出するための検出手段と、
iii)工程ii)において決定されるパターンから血液型特徴を識別するための電気的手段と
を含む、システム。 - 血液サンプルの血液型を決定する方法であって、
i)請求項30に記載のシステムを提供する工程と;
ii)各々のキャピラリー経路の上流末端へ試薬を導入する工程であって、試薬が血液の血液型特徴に依存した組み合わせで、前記経路の全てではないが少なくとも1つにおいて血液の凝集を生じる工程と;
iii)前記キャピラリー経路の上流末端に血液を導入する工程と;
iv)前記キャピラリー経路内の血流のパターンを決定するために、前記キャピラリーの検出領域で血液の存在を検出する工程と;
v)iii)において決定されたパターンから血液型特徴を識別するために電気的手段を用いる工程と
を含む方法。 - 前記工程iv)が患者管理システムに電気的シグナルを提供し、前記患者管理システムが電気的処理手段および記憶手段を組み込み、前記システムが、
(a)試験用に提供された、以前に決定され、記録された血液型特徴を記憶し;
(b)請求項30に記載のシステムから前記提供された血液の血液型特徴の結果を電気的に受け取り;
(c)提供される血液が、以前に記録されたのと同じ血液型特徴のものであるかまたはそうでないかを確認するために、(a)および(b)の情報を比較し;
(d)血液が提供される患者の血液型特徴について情報を記憶し;そして
(e)患者への投与について前記血液が誤った型のものである場合、警告出力を提供する、請求項31に記載の方法。
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