JP5149548B2 - Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物からの抽出物を有効成分とするメラニン産生抑制剤、及びこれを含有する美白用の医薬品組成物、並びに化粧料組成物 - Google Patents
Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物からの抽出物を有効成分とするメラニン産生抑制剤、及びこれを含有する美白用の医薬品組成物、並びに化粧料組成物 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5149548B2 JP5149548B2 JP2007151861A JP2007151861A JP5149548B2 JP 5149548 B2 JP5149548 B2 JP 5149548B2 JP 2007151861 A JP2007151861 A JP 2007151861A JP 2007151861 A JP2007151861 A JP 2007151861A JP 5149548 B2 JP5149548 B2 JP 5149548B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- melanin production
- production inhibitor
- melanin
- genus
- extract
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 230000008099 melanin synthesis Effects 0.000 title claims description 71
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title claims description 42
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 24
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 title claims description 23
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 title claims description 17
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 12
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims description 10
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 title claims description 6
- QKMXESBAFIKRAD-LPHDITAFSA-N genkwadaphnin Chemical compound O([C@@H]1[C@H]([C@@]23[C@H]4[C@](C(C(C)=C4)=O)(O)[C@H](O)[C@@]4(CO)O[C@H]4[C@H]3[C@H]3O[C@](O2)(O[C@]31C(C)=C)C=1C=CC=CC=1)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 QKMXESBAFIKRAD-LPHDITAFSA-N 0.000 claims description 14
- QKMXESBAFIKRAD-UHFFFAOYSA-N genkwadaphnin Natural products CC(=C)C12OC(O3)(C=4C=CC=CC=4)OC1C1C4OC4(CO)C(O)C(C(C(C)=C4)=O)(O)C4C31C(C)C2OC(=O)C1=CC=CC=C1 QKMXESBAFIKRAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- BRYKYSQCLNCYQW-UHFFFAOYSA-N Gnidicin Natural products COC(=O)C(CC(O)=O)=CC(O)=O BRYKYSQCLNCYQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- OTTFLYUONKAFGT-UHFFFAOYSA-N UNPD66298 Natural products CC(=C)C12OC(O3)(C=4C=CC=CC=4)OC1C1C4OC4(CO)C(O)C(C(C(C)=C4)=O)(O)C4C31C(C)C2OC(=O)C=CC1=CC=CC=C1 OTTFLYUONKAFGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- OTTFLYUONKAFGT-FAHDJYCPSA-N gnidicin Natural products C[C@@H]1[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccccc2)[C@@]3(O[C@]4(O[C@@H]3[C@@H]5[C@@H]6O[C@]6(CO)[C@@H](O)[C@@]7(O)[C@@H](C=C(C)C7=O)[C@@]15O4)c8ccccc8)C(=C)C OTTFLYUONKAFGT-FAHDJYCPSA-N 0.000 claims description 13
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 10
- 241000986020 Thymelaea Species 0.000 claims description 8
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 7
- 241000986025 Thymelaea hirsuta Species 0.000 claims description 4
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 4
- OTTFLYUONKAFGT-NXHJWBCESA-N gnidicin Chemical compound O([C@@H]1[C@H]([C@]23[C@H]4[C@](C(C(C)=C4)=O)(O)[C@H](O)[C@@]4(CO)O[C@H]4[C@H]3[C@H]3O[C@@](O2)(O[C@]31C(C)=C)C=1C=CC=CC=1)C)C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 OTTFLYUONKAFGT-NXHJWBCESA-N 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 49
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Chemical compound O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 15
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 13
- OTTFLYUONKAFGT-LUUDNWDQSA-N gnidicin Chemical compound O([C@@H]1[C@H]([C@@]23[C@H]4[C@](C(C(C)=C4)=O)(O)[C@H](O)[C@@]4(CO)O[C@H]4[C@H]3[C@H]3O[C@@](O2)(O[C@]31C(C)=C)C=1C=CC=CC=1)C)C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 OTTFLYUONKAFGT-LUUDNWDQSA-N 0.000 description 12
- FNRYFCMDOFJSOR-HIFSTXKISA-N gnidilatidin Natural products CCCCCC=CC=C[C@]12O[C@@H]3[C@@H]4[C@@H]5O[C@]5(CO)[C@@H](O)[C@@]6(O)[C@@H](C=C(C)C6=O)[C@@]4(O1)[C@H](C)[C@@H](OCc7ccccc7)[C@@]3(O2)C(=C)C FNRYFCMDOFJSOR-HIFSTXKISA-N 0.000 description 11
- CGSGRJNIABXQJQ-CAAOHEDASA-N yuanhuacin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)[C@]23[C@H]4[C@](C(C(C)=C4)=O)(O)[C@H](O)[C@@]4(CO)O[C@H]4[C@H]2[C@H]2OC(O3)(O[C@]21C(C)=C)/C=C/C=C/CCCCC)C(=O)C1=CC=CC=C1 CGSGRJNIABXQJQ-CAAOHEDASA-N 0.000 description 11
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 10
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000009471 action Effects 0.000 description 8
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 8
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 7
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 7
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 6
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 5
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 4
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 4
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-Butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000019149 MAP kinase activity proteins Human genes 0.000 description 3
- 108040008097 MAP kinase activity proteins Proteins 0.000 description 3
- 244000111261 Mucuna pruriens Species 0.000 description 3
- 235000006161 Mucuna pruriens Nutrition 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 description 3
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000002451 electron ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 3
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 description 3
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 3
- BEJNERDRQOWKJM-UHFFFAOYSA-N kojic acid Chemical compound OCC1=CC(=O)C(O)=CO1 BEJNERDRQOWKJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WZNJWVWKTVETCG-UHFFFAOYSA-N kojic acid Natural products OC(=O)C(N)CN1C=CC(=O)C(O)=C1 WZNJWVWKTVETCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960004705 kojic acid Drugs 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 230000036564 melanin content Effects 0.000 description 3
- 210000002752 melanocyte Anatomy 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 3
- 210000004694 pigment cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 3
- 230000000475 sunscreen effect Effects 0.000 description 3
- 239000000516 sunscreening agent Substances 0.000 description 3
- PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N (+/-)-1,3-Butanediol Chemical compound CC(O)CCO PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- 240000008620 Fagopyrum esculentum Species 0.000 description 2
- 235000009419 Fagopyrum esculentum Nutrition 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QIGBRXMKCJKVMJ-UHFFFAOYSA-N Hydroquinone Chemical compound OC1=CC=C(O)C=C1 QIGBRXMKCJKVMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000012641 Pigmentation disease Diseases 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 206010042496 Sunburn Diseases 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- BJRNKVDFDLYUGJ-RMPHRYRLSA-N hydroquinone O-beta-D-glucopyranoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=C(O)C=C1 BJRNKVDFDLYUGJ-RMPHRYRLSA-N 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 2
- 231100001083 no cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 2
- 229940058015 1,3-butylene glycol Drugs 0.000 description 1
- 241000512259 Ascophyllum nodosum Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 241000229824 Calicina Species 0.000 description 1
- 206010007269 Carcinogenicity Diseases 0.000 description 1
- 201000006082 Chickenpox Diseases 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- 241001310717 Daphne genkwa Species 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- AHMIDUVKSGCHAU-UHFFFAOYSA-N Dopaquinone Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC(=O)C(=O)C=C1 AHMIDUVKSGCHAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 241001263571 Gnidia kraussiana Species 0.000 description 1
- 244000017020 Ipomoea batatas Species 0.000 description 1
- 235000002678 Ipomoea batatas Nutrition 0.000 description 1
- WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N L-DOPA Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- AHMIDUVKSGCHAU-LURJTMIESA-N L-dopaquinone Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CC1=CC(=O)C(=O)C=C1 AHMIDUVKSGCHAU-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 108091093105 Nuclear DNA Proteins 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010040880 Skin irritation Diseases 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 241000278381 Thymelaea antiatlantica Species 0.000 description 1
- 241001534930 Thymelaeaceae Species 0.000 description 1
- 244000079568 Tragia hirsuta Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 241001261506 Undaria pinnatifida Species 0.000 description 1
- 206010046980 Varicella Diseases 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 230000000719 anti-leukaemic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000118 anti-neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229960000271 arbutin Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 235000019437 butane-1,3-diol Nutrition 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 231100000260 carcinogenicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000007670 carcinogenicity Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000013329 compounding Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 235000014510 cooky Nutrition 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- CGPFADLKIPZYRE-OWLUANBVSA-N daphnane Chemical group C([C@]12CCC[C@H]1[C@]13CCC)C[C@H]4[C@]3(C)CC[C@H](C(C)C)[C@@H]1N2C4 CGPFADLKIPZYRE-OWLUANBVSA-N 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 229930004069 diterpene Natural products 0.000 description 1
- 150000004141 diterpene derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000008157 edible vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 210000001339 epidermal cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 235000020510 functional beverage Nutrition 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 231100000025 genetic toxicology Toxicity 0.000 description 1
- 230000001738 genotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 239000008269 hand cream Substances 0.000 description 1
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000003906 humectant Substances 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000007721 medicinal effect Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 description 1
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 1
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- BJRNKVDFDLYUGJ-UHFFFAOYSA-N p-hydroxyphenyl beta-D-alloside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=C(O)C=C1 BJRNKVDFDLYUGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013772 propylene glycol Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000036556 skin irritation Effects 0.000 description 1
- 231100000475 skin irritation Toxicity 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 235000014214 soft drink Nutrition 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 235000013599 spices Nutrition 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Description
本発明は、メラニン産生抑制剤に関する。より詳しくは、Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物から抽出したメラニン産生抑制剤とこれを含有する美白用の医薬品組成物、化粧料組成物、並びに食品などに関する。
日焼けやシミ、ソバカス等の皮膚の色素沈着は、表皮細胞に存在する細胞メラノサイトが増殖し、増殖したメラノサイトにおいて生成された色素メラニンが隣接細胞に拡散することで生じる。このメラノサイトでのメラニン産生に中心的役割を果たしている酵素チロシナーゼの発現を抑制することにより、あるいは酵素チロシナーゼの活性を阻害することにより、メラニン産生を抑制し美白作用を発揮する薬剤が種々知られている。このような薬剤として代表的なものに、コウジ酸やアルブチンがある。
また、酵素チロシナーゼの作用により生じたドーパやドーパキノンから酵素的または非酵素的酸化作用でメラニンが生成するが、その過程を阻害することでメラニン産生を抑制し美白作用を発揮する薬剤も種々知られている。このような薬剤として代表的なものには、アスコルビン酸、ハイドロキノン等がある。
このうち特に、コウジ酸及びその誘導体はメラニン産生抑制剤として、美白用化粧料組成物や皮膚外用剤に使用されてきた（特許文献１−３参照）。しかし近年になって、コウジ酸が発がん性及び遺伝毒性を有する可能性が指摘され、これに替わる安全なメラニン産生抑制剤が求められている。
さらに、美白用化粧料組成物においては、皮膚に対する低刺激性の要求や天然指向を反映して、植物の抽出物中にメラニン産生抑制作用を有するものを見いだそうとする試みがなされている（特許文献４−６参照）。
特公昭５６−１８５６９号公報
特公昭６０−９７２２号公報
特公昭６０−１０００５号公報
特公昭６１−１０４４２号公報
特公平５−２７６０５号公報
特公平５−８７４８２号公報
本発明は、上述のような現状に鑑み、安全性及び皮膚官能性に優れ、高いメラニン産生抑制活性を有する新規メラニン産生抑制剤を提供することを主な目的とする。
本発明者は、上記課題の解決のため、種々の天然物を探索し、Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物抽出物にメラニン産生抑制作用があることを初めて見出し、本願発明を完成するに至った。
そこで、本発明は、Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物抽出物を有効成分とするメラニン産生抑制剤を提供する。この抽出物は、Ｇｅｎｋｗａｄａｐｈｎｉｎ，Ｇｎｉｄｉｃｉｎ，Ｇｎｉｄｉｌａｔｉｄｉｎのいずれかから選択される１以上を含有する。
Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物のうち、特にＴｈｙｍｅｌａｅａ ｈｉｒｓuｔａからの抽出物は、顕著なメラニン産生抑制活性を有する。
また、これらのメラニン産生抑制剤は、メラノーマ細胞に対する脱癌化作用をも発揮するものである。
Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物抽出物を有効成分とするメラニン産生抑制剤は、薬理学的に許容され得る添加剤と混成して美白用医薬品組成物及び美白用化粧料組成物を得ることができる。また、食品原料と混成して美白用食品とすることも可能である。
これら医薬品組成物、化粧料組成物及び食品には、次のような有利性がある。
本発明に係るメラニン産生抑制剤は植物由来成分であるため、その医薬品組成物は長期にわたって連続的に適用できる可能性が高く、副作用も少ない可能性が高い。また、例えば、本発明に係るメラニン産生抑制剤を化粧料、健康補助食品などとして長期間、連続的に適用することにより、優れた美白効果を得ることが可能と考えられる。
本発明により、高いメラニン産生抑制活性を有する新規メラニン産生抑制剤が提供される。また、該メラニン産生抑制剤は高い安全性及び優れた皮膚官能性を発揮し得るものである。
Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物は、地中海沿岸一帯に生育する植物である。
Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属に属する植物としては、Ｔｈｙｍｅｌａｅａ ａｎｔｉａｔｌａｎｔｉｃａ，Ｔ． ｈｙｍｅｌａｅａ ａｕｃｈｅｒｉ，Ｔ． ｂｒｏｔｅｒｉａｎａ， Ｔ． ｃａｌｙｃｉｎａ， Ｔ． ｃｉｌｉｃｉｃａ，Ｔ． ｃｏｒｉｄｉｆｏｌｉａ， Ｔ． ｄｉｏｉｃａ， Ｔ． ｇｒａｎａｔｅｎｓｉｓ， Ｔ． ｇｕｓｓｏｎｅｉ， Ｔ．ｈｉｒｓuｔａなどの３０種程度がある。
本発明者は、上記のＴｈｙｍｅｌａｅａ属植物からの抽出物がメラニン産生抑制活性を有すること、なかでもＴｈｙｍｅｌａｅａ ｈｉｒｓｕｔａからの抽出物は特にメラニン産生抑制活性が顕著であることを新規に見出した。Ｔｈｙｍｅｌａｅａ ｈｉｒｓｕｔａは北アフリカの半乾燥地地域に生息し、当該地域では民間伝承薬として抗炎症薬に用いられている。しかし、これまでＴｈｙｍｅｌａｅａ ｈｉｒｓｕｔａからの抽出物についてメラニン産生抑制作用や脱癌化作用の検討はなされていない。
以下、本発明を実施するための好適な形態について説明する。なお、以下に説明する実施形態は、本発明の代表的な実施形態の一例を示したものであり、これにより本発明の範囲が狭く解釈されることはない。
本発明に係るメラニン産生抑制剤は、各種溶媒を用いてＴｈｙｍｅｌａｅａ属植物の全草を抽出して得ることができる。ここで、Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物の全草とは、葉、花、茎、根のいずれの部分も用いることができることを意味する。また、これらは生の状態で用いてもよく、あるいは乾燥物を用いてもよい。抽出溶媒としては、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、グリセリン、アセトン、メチルエチルケトン、酢酸エチル、エーテル類、クロロホルム、及びジクロロメタンのような有機溶媒ならびに水を用いることができる。このうち、本発明においては、メタノール、エタノール、酢酸エチルまたはこれら溶媒と水との組合せが好ましく、毒性が低いという生体内における安全性を考慮すれば、エタノール、または水とエタノールとの混合溶媒がさらに好ましい。好適な抽出方法としては、乾燥したＴｈｙｍｅｌａｅａ属植物の全草を、７０％エタノール中に１週間浸漬した後、孔径０．４５μｍのマイクロフィルターを用いて不溶物を除去することにより得ることができる。
本発明に係るメラニン産生抑制剤は、美白用医薬品組成物や美白用化粧料組成物、美白用食品などの適切な形態に加工され得る。
医薬品組成物や化粧料組成物に加工される場合、メラニン産生抑制剤と薬理学的に許容され得る添加剤とが混合される。添加剤の例としては、界面活性剤、賦形剤、着色料、保存料、コーティング助剤ならびにこれらの組合せが挙げられる。これら添加剤は、通常の医薬品製造における添加剤であれば特に限定されず、より具体的な例としては、ラクトース、デキストリン、スクロース、マンニトール、コーンスターチ、ソルビトール、結晶性セルロース、ポリビニルピロリドン、香味料、甘味料及びこれらの組合せが挙げられる。また、油類、アルコール類、保湿剤、紫外線吸収、香料、抗酸化剤、顔料等、一般的な化粧料用原料をも含有させることができる。さらに、必要に応じて他の薬剤との合剤としてもよい。
医薬品組成物は、経口投与または非経口投与のいずれに使用されてもよい。投与剤形も特に限定されず、日本薬局方に従って適切な剤形に製造される。具体的には、経口投与を目的とする場合は、カプセル剤、錠剤、粉剤、除放剤などの剤形に製造される。非経口投与を目的とする場合は、注射剤、輸液剤、外用剤などの剤形に製造される。また、化粧料組成物は、ローション剤、乳剤、ゲル剤、クリーム、軟膏として、より詳細には、メイクアップベースローション、メイクアップベースクリーム、液状又はクリーム状又は軟膏型のファンデーション等の美白用メイクアップ化粧料、日焼け止めローション，日焼け止めクリーム等の日焼け止め化粧料、ハンドクリーム、レッグクリーム、ボディローション等の美白用身体用化粧料としても提供し得る。
食品に加工される場合、メラニン産生抑制剤と適切な食品原料とが混合される。この適切な食品原料は、一般に食品用材料として使用され得るものである。例としては、米、小麦、トウモロコシ、ジャガイモ、スイートポテト、大豆、昆布、ワカメ、テングサなどの粉類；水飴；乳糖；グルコース；果糖；スクロース；マンニトール；ならびにこれらの組合せが挙げられる。さらに、香辛料、着色料、甘味料、食用油、ビタミンなどを添加してもよい。これら適切な食品原料は単独または組合せて使用される。さらに、必要に応じて水を添加して所望の形状に加工してもよい。このようにして、保健機能食品（特定保健機能食品、栄養機能食品、飲料を含む）や、いわゆる健康食品（飲料を含む）、又は飼料を得ることができる。またこれらの食品は飼料として動物に給餌することも可能である。
＜Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物からのメラニン産生抑制剤の抽出＞
乾燥させたＴｈｙｍｅｌａｅａ ｈｉｒｓuｔａの全草１００ｇを、７０％エタノール１０００ｍｌ中に１週間浸漬した後、孔径０．４５μｍのマイクロフィルターを用いて不溶物を除去することにより、以下の実施例で用いるメラニン産生抑制剤（以下、「Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物抽出物」とも表記する）を得た。このＴｈｙｍｅｌａｅａ属植物抽出物をロータリーエバポレーターにより５０℃で減圧乾燥を行い、やや緑色がかった薄い褐色の粉末（以下、Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物抽出乾燥物とも表記する）を得た。その収量は０．８％であった。
乾燥させたＴｈｙｍｅｌａｅａ ｈｉｒｓuｔａの全草１００ｇを、７０％エタノール１０００ｍｌ中に１週間浸漬した後、孔径０．４５μｍのマイクロフィルターを用いて不溶物を除去することにより、以下の実施例で用いるメラニン産生抑制剤（以下、「Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物抽出物」とも表記する）を得た。このＴｈｙｍｅｌａｅａ属植物抽出物をロータリーエバポレーターにより５０℃で減圧乾燥を行い、やや緑色がかった薄い褐色の粉末（以下、Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物抽出乾燥物とも表記する）を得た。その収量は０．８％であった。
＜メラノーマ細胞を用いたメラニン合成阻害作用の検討＞
実施例１で調製したメラニン産生抑制剤について、Ｂ１６細胞株を用いたメラニン合成阻害試験を行った。Ｂ１６細胞は、マウスのメラノーマ（黒色腫）から樹立された細胞株である。メラニン色素を産生する色素細胞であるため、メラニン合成に関する薬効試験に広く用いられている。
実施例１で調製したメラニン産生抑制剤について、Ｂ１６細胞株を用いたメラニン合成阻害試験を行った。Ｂ１６細胞は、マウスのメラノーマ（黒色腫）から樹立された細胞株である。メラニン色素を産生する色素細胞であるため、メラニン合成に関する薬効試験に広く用いられている。
１０％ウシ胎児血清含有のＤＭＥＭ培地１５ｍｌを含む細胞培養用１０ｃｍシャーレに、その細胞密度が１×１０６細胞/シャーレになるように接種し、５％ＣＯ2 下、３７℃にて一昼夜培養後、実施例１で調製したメラニン産生抑制剤を１／１０００濃度になるようにシャーレに添加し（投与群）、さらに同条件下で３日間培養を行った。対照群には、メラニン産生抑制剤を溶解した溶媒のみを添加した。
培養終了後、ＰＢＳ（−）緩衝液１０ｍｌで２回洗浄し、０．２５％トリプシン処理にて細胞を収集し、その後０．１％トライトンＸ１００含有ＰＢＳ（−）にて膜を溶解後、トリクロロ酢酸にてメラニンを抽出・精製、水酸化ナトリウムにメラニンを溶解した溶解液を図１に示す。また、既存の方法により、メラニン含有量（μｇ）を測定した結果を図２に示す。
図１及び図２中、符号Ｓで示される投与群では、符号Ｃで示される対照群に比して細胞懸濁液の顕著な白化が認められた（図１参照）。また、細胞内におけるメラニン合成量は、対照群では９２．８１μｇであったのに対して、投与群では５１．８９μｇと、有意な低下が確認された（図２参照）。この結果は、本発明に係るメラニン産生抑制剤が、Ｂ１６細胞に対する白色化作用を有し、色素細胞中のメラニン色素産生を抑制することを示している。
次に、これらの細胞において、ＭＡＰキナーゼカスケードに属するＥＲＫ1／２のリン酸化状態を検討した。従来、ＭＡＰキナーゼカスケードの活性化により、ＥＲＫ1／２がリン酸化するとメラニン合成が抑制されることが知られている。
投与群、対照群の細胞から、定法によりタンパクを抽出し、ＳＤＳ−ＰＡＧＥにより分離後、メンブレンにブロットし、ＥＲＫ1／２及びリン酸化（ｐ−ＥＲＫ1／２）を認識する抗体（SIGMA社）を用いてウェスタンブロットを行なった。結果を図３に示す。符号Ｓは投与群、符号Ｃは対照群を表す。
投与群において、ｐ−ＥＲＫ1／２の顕著な増加が認められ、ＭＡＰキナーゼカスケードの活性化に伴うメラニン合成抑制が起きていることが確認された。
次に、同様にメラニン産生抑制剤を処置した投与群と対照群において、処置後４８時間の細胞生存率をフローサイトメトリー法により測定した。
フローサイトメトリー法は、死細胞を染色する蛍光色素（ＰＭ２）と核内DNAを染色する蛍光色素（ＰＭ１）を用いて細胞を染色し、さらに前方散乱光の大きさにより凝集性細胞、アポトーシス細胞、ネクローシス細胞を区別して、生細胞と死細胞を判別する方法である。したがって、ＰＭ２染色が低く、かつＰＭ１染色が強いものから、凝集細胞を除いたものをカウントすることにより、細胞生存率を測定することが可能である。
結果を図４に示す。符号Ｓは投与群、符号Ｃは対照群を表す。
投与群における細胞生存率は９４．６％であり、対照群における細胞生存率９８．３％と同等であった。このことは、本発明に係るメラニン産生抑制剤が、細胞毒性を有しないことを示している。
＜メラノーマ細胞を用いた脱癌化作用の検討＞
次に、同様にメラニン産生抑制剤を処置した投与群と対照群において、処置後４８時間〜７２時間の細胞形態を観察した。
次に、同様にメラニン産生抑制剤を処置した投与群と対照群において、処置後４８時間〜７２時間の細胞形態を観察した。
結果を図５に示す。符号Ｓは投与群、符号Ｃは対照群を表す。
対照群のB１６細胞は、繊維芽細胞様の錐体形を呈し、豊富なメラニン色素顆粒を有する細胞が散見される。これに対して、投与群では、細胞は上皮細胞様の形態へ変化し、細胞内にメラニン色素顆粒は認められない。すなわち、本発明に係るメラニン産生抑制剤は、B１６細胞の形質転換を誘導し、メラノーマ細胞に対する脱癌化作用を発揮することが分かる。
以上は、本発明に係るメラニン産生抑制剤が、メラノーマ細胞の脱癌化を促進させる作用により、メラノーマ（黒色腫）治療薬としても適用できる可能性があることを強く示唆するものである。
＜Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物抽出物中の有効成分の同定＞
実施例１と同様の方法により、Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物抽出物を調製した。ただし、本実施例においては、抽出にはメタノールを用いた。この抽出物を、酢酸エチルと水で分配した。次に、酢酸エチル可溶部及び水可溶部のそれぞれについて、実施例２と同様の方法によりＢ１６細胞株を用いたメラニン合成阻害試験を行なった。その結果、酢酸エチル可溶部に、投与量に依存したメラニン合成阻害作用が認められた。
実施例１と同様の方法により、Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物抽出物を調製した。ただし、本実施例においては、抽出にはメタノールを用いた。この抽出物を、酢酸エチルと水で分配した。次に、酢酸エチル可溶部及び水可溶部のそれぞれについて、実施例２と同様の方法によりＢ１６細胞株を用いたメラニン合成阻害試験を行なった。その結果、酢酸エチル可溶部に、投与量に依存したメラニン合成阻害作用が認められた。
酢酸エチル可溶部を順相カラムクロマトグラフィー（シリカゲルカラム：φ2.2×33cm、溶媒：ヘキサン／酢酸エチル5：1，2：1，クロロホルム／メタノール8：1，0：100）を用いてフラクション化し、１７分画（Th-EtOAc-1〜17）を得た。各分画について、実施例２と同様の方法によりＢ１６細胞株を用いたメラニン合成阻害試験を行なった結果、Th-EtOAc-11分画に最も強いメラニン合成阻害作用が認められた。
Th-EtOAc-11分画をC18 Sep-Pakカートリッジ（溶媒：メタノール／水50：50，100：0，クロロホルム／メタノール1：6，100：0，水）を用いてフラクション化し、６分画（Th-EtOAc-11-1〜6）を得た。各分画について、実施例２と同様の方法によりＢ１６細胞株を用いたメラニン合成阻害試験を行なった結果、Th-EtOAc-11-3分画に最も強いメラニン合成阻害作用が認められた。
Th-EtOAc-11-3分画をさらにC18逆相カラム（Intersil ODS3：φ1.0×25cm、溶媒：アセトニトリル／水65：35、流速：2.0ml/mis）を用い、高速液体クロマトグラフ（HPLC）により精製し、３化合物（Th-EtOAc-11-3-6，Th-EtOAc-11-3-8，Th-EtOAc-11-3-14）を得た。
Th-EtOAc-11-3-6，Th-EtOAc-11-3-8，Th-EtOAc-11-3-14の３化合物について、1H NMRスペクトル及びEIMSスペクトルの測定を行った。測定には、それぞれBrucker AVANCE 500 spectrometer及びMS-6890を用いた。
1H NMRスペクトルでは、5.12ppm及び4.92ppmのオキシメチンシグナル、5.02ppmのメチレンシグナルが観測された。３化合物についての詳細な測定データは以下の通りである。
（１）Th-EtOAc-11-3-6
EIMS m/z 602 (M+), 1H NMR (CDCl3, 500MHz): δ7.60-7.75 (m, aromatic-H), 7.50 (s, 1H), 5.28 (s, 1H), 5.05 (s, 2H), 4.95 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 4.25 (s,1H), 3.90 (m, 1H), 3.85 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 3.63 (br s, 1H), 2.63 (q, J = 7.3 Hz, 1H), 1.88 (s, 3H), 1.75 (d, J = 2.6 Hz, 3H), 1 and 0.88 (m, 3H).
（２）Th-EtOAc-11-3-8
EIMS m/z 628 (M+), 1HNMR (CDCl3, 500MHz): δ7.60-7.75 (m, aromatic-H), 7.50 (s, 1-H), 6.37 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 5.18 (s, 1H), 5.05 (s, 2H), 4.95 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 4.25 (s, 1H), 3.90 (m, 1H), 3.85 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 3.63 (br s, 1H), 2.52 (q, J = 7.3 Hz, 1H), 1.88 (s, 3H), 1.75 (d, J = 2.6 Hz, 3H), and 0.88(m, 3H).
（３）Th-EtOAc-11-3-14
ESIMS m/z 671(M + Na+); 1H NMR(CDCl3, 500MHz, TMS): δ7.90-7.40 (5H, m, aromatic-H), 7.50 (1H, s, ), 6.76-5.53(4H, m, olefinic-H), 5.21 (1H, s), 5.01 (2H, s), 4.90(1H, d, J = 2.50), 4.16(1H, s), 3.90(1H, s), 3.85(2H, br s), 3.63(1H, s), 3.60(1H, d, J = 2.46), 2.55(1H, q, J = 7.34 Hz), 1.88(3H, s), 1.75(3H,br s), 1.36 (3H, d, J = 7.26Hz), 1.33 (3H,m), 0.88(3H, m) ppm.
（１）Th-EtOAc-11-3-6
EIMS m/z 602 (M+), 1H NMR (CDCl3, 500MHz): δ7.60-7.75 (m, aromatic-H), 7.50 (s, 1H), 5.28 (s, 1H), 5.05 (s, 2H), 4.95 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 4.25 (s,1H), 3.90 (m, 1H), 3.85 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 3.63 (br s, 1H), 2.63 (q, J = 7.3 Hz, 1H), 1.88 (s, 3H), 1.75 (d, J = 2.6 Hz, 3H), 1 and 0.88 (m, 3H).
（２）Th-EtOAc-11-3-8
EIMS m/z 628 (M+), 1HNMR (CDCl3, 500MHz): δ7.60-7.75 (m, aromatic-H), 7.50 (s, 1-H), 6.37 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 5.18 (s, 1H), 5.05 (s, 2H), 4.95 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 4.25 (s, 1H), 3.90 (m, 1H), 3.85 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 3.63 (br s, 1H), 2.52 (q, J = 7.3 Hz, 1H), 1.88 (s, 3H), 1.75 (d, J = 2.6 Hz, 3H), and 0.88(m, 3H).
（３）Th-EtOAc-11-3-14
ESIMS m/z 671(M + Na+); 1H NMR(CDCl3, 500MHz, TMS): δ7.90-7.40 (5H, m, aromatic-H), 7.50 (1H, s, ), 6.76-5.53(4H, m, olefinic-H), 5.21 (1H, s), 5.01 (2H, s), 4.90(1H, d, J = 2.50), 4.16(1H, s), 3.90(1H, s), 3.85(2H, br s), 3.63(1H, s), 3.60(1H, d, J = 2.46), 2.55(1H, q, J = 7.34 Hz), 1.88(3H, s), 1.75(3H,br s), 1.36 (3H, d, J = 7.26Hz), 1.33 (3H,m), 0.88(3H, m) ppm.
以上の測定データより、Th-EtOAc-11-3-6はGenkwadaphnin（Kasai R, et al. Genkwadaphnin, a potent antileukemicditerpene from Daphne genkwa. Phytochemistry 1981: 20: 2592-2593.参照）と同定された。また、Th-EtOAc-11-3-8は、Gnidicin（Brooks G, et al. Daphnanediterpenes of T. hirsuta. Phytochemistry1990: 29: 2235-2237.参照）、Th-EtOAc-11-3-14はGnidilatidin（Borris RP, et al. Studies of the ThymelaeaceaeII. Antineoplastic principles of Gnidiakraussiana. Journal of Natural Products. 1984: 47: 270-278）と同定された。Genkwadaphnin，Gnidicin，Gnidilatidinはdaphnane骨格を有する化合物である。それぞれの構造式を、図６（Ａ）〜（Ｃ）に示す。
＜メラノーマ細胞を用いたメラニン合成阻害作用の検討２＞
Genkwadaphnin，Gnidicin，Gnidilatidinについて、Ｂ１６細胞株を用いたメラニン合成阻害試験を行なった。
Genkwadaphnin，Gnidicin，Gnidilatidinについて、Ｂ１６細胞株を用いたメラニン合成阻害試験を行なった。
上述の方法により、Ｂ１６細胞株をシャーレに接種し、５％ＣＯ2 下、３７℃にて一昼夜培養後、実施例４で精製したGenkwadaphnin，Gnidicin，Gnidilatidinを、それぞれ0.1μM, 0.3μM, 1μMの濃度でシャーレに添加し（投与群）、さらに２日間培養を行った。対照群には、エタノールのみを添加した。
培養終了後、実施例２と同様の方法により、メラニン含有量及び細胞生存率を測定した結果を図７に示す。図７（Ａ）〜（Ｃ）は、それぞれGenkwadaphnin，Gnidicin，Gnidilatidinの結果を示す。なお、メラニン含有量及び細胞生存率は対照群を１００として示した。
Genkwadaphnin，Gnidicin，Gnidilatidinのいずれにおいても、各投与濃度で細胞内におけるメラニン合成量の顕著な低下が確認された。Genkwadaphnin，Gnidicinでは対照群の６０％前後、Gnidilatidinでは４０％前後にまでメラニン合成が抑制された。また、Genkwadaphnin，Gnidicin，Gnidilatidinのいずれにおいても、細胞生存率の低下は認めらなかった。これらの結果は、Genkwadaphnin，Gnidicin，Gnidilatidinが、Ｂ１６細胞に対する白色化作用を有し、色素細胞中のメラニン色素産生を抑制すること、なおかつ細胞毒性は有しないことを示している。
以上の実験により、本発明に係るメラニン産生抑制剤が、顕著なメラニン合成阻害活性を有し、優れた美白作用を発揮するものであることが証明された。また、細胞毒性が認められなかったことから、安全性の高いメラニン産生抑制剤であると考えられた。
次に本発明のメラニン産生抑制剤を含む医薬品組成物の処方実施例を詳細に説明する。表１に示す配合組成にしたがって、Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物抽出物を含有する医薬品組成物の一例として、軟膏（処方実施例）を調製した。
次に本発明のメラニン産生抑制剤を含む化粧料の処方実施例を詳細に説明する。表２に示す配合組成にしたがって、Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物抽出物を含有する化粧水（処方実施例）を調製した。
次に本発明のメラニン産生抑制剤を含む食品の処方実施例を詳細に説明する。表４に示す配合組成にしたがって、Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物抽出乾燥物を含有するチューンガム（処方実施例）を調製した。
本発明に係るＴｈｙｍｅｌａｅａ属植物抽出物を有効成分とするメラニン産生抑制剤は、日焼けやシミ、ソバカス等の皮膚の色素沈着を防止するための美白用の医薬品組成物、化粧料組成物、並びに食品などとして好適に利用することが可能である。
Claims (4)
- Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物Ｔｈｙｍｅｌａｅａ ｈｉｒｓｕｔａからの抽出物を有効成分とするメラニン産生抑制剤。
- 前記抽出物は、Ｇｅｎｋｗａｄａｐｈｎｉｎ，Ｇｎｉｄｉｃｉｎ，Ｇｎｉｄｉｌａｔｉｄｉｎのいずれかから選択される１以上を含有することを特徴とする請求項１記載のメラニン産生抑制剤。
- 請求項１から２のいずれか一項に記載のメラニン産生抑制剤と薬理学的に許容され得る添加剤とを含有する美白用医薬品組成物。
- 請求項１から２のいずれか一項に記載のメラニン産生抑制剤と薬理学的に許容され得る添加剤とを含有する美白用化粧料組成物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2007151861A JP5149548B2 (ja) | 2006-12-27 | 2007-06-07 | Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物からの抽出物を有効成分とするメラニン産生抑制剤、及びこれを含有する美白用の医薬品組成物、並びに化粧料組成物 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2006353129 | 2006-12-27 | ||
| JP2006353129 | 2006-12-27 | ||
| JP2007151861A JP5149548B2 (ja) | 2006-12-27 | 2007-06-07 | Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物からの抽出物を有効成分とするメラニン産生抑制剤、及びこれを含有する美白用の医薬品組成物、並びに化粧料組成物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2008179598A JP2008179598A (ja) | 2008-08-07 |
| JP5149548B2 true JP5149548B2 (ja) | 2013-02-20 |
Family
ID=39723789
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2007151861A Active JP5149548B2 (ja) | 2006-12-27 | 2007-06-07 | Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物からの抽出物を有効成分とするメラニン産生抑制剤、及びこれを含有する美白用の医薬品組成物、並びに化粧料組成物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP5149548B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2016041668A (ja) * | 2014-08-19 | 2016-03-31 | 株式会社山田養蜂場本社 | 美白用組成物 |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP6378968B2 (ja) * | 2014-08-19 | 2018-08-22 | 株式会社山田養蜂場本社 | 美白用組成物 |
| JP6392026B2 (ja) * | 2014-08-19 | 2018-09-19 | 株式会社山田養蜂場本社 | 美白用組成物 |
| KR102236023B1 (ko) * | 2019-06-24 | 2021-04-05 | 계명대학교 산학협력단 | 백서향 추출물을 유효성분으로 포함하는 주름 개선 또는 피부 미백용 조성물 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH05124950A (ja) * | 1991-10-29 | 1993-05-21 | Suntory Ltd | 美白用化粧料組成物 |
| JPH05213716A (ja) * | 1992-02-03 | 1993-08-24 | Nippon Shinyaku Co Ltd | 美白化粧料組成物 |
| JPH11335225A (ja) * | 1998-05-19 | 1999-12-07 | Noevir Co Ltd | 皮膚外用剤 |
-
2007
- 2007-06-07 JP JP2007151861A patent/JP5149548B2/ja active Active
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2016041668A (ja) * | 2014-08-19 | 2016-03-31 | 株式会社山田養蜂場本社 | 美白用組成物 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2008179598A (ja) | 2008-08-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5427894B2 (ja) | 新規化合物ラマリン及びその用途 | |
| WO2012099247A1 (ja) | 美白剤 | |
| JP5149548B2 (ja) | Ｔｈｙｍｅｌａｅａ属植物からの抽出物を有効成分とするメラニン産生抑制剤、及びこれを含有する美白用の医薬品組成物、並びに化粧料組成物 | |
| JP6005900B2 (ja) | メラニン産生抑制剤及びメラニン産生抑制作用を有する医薬品、食品又は化粧料 | |
| KR101591499B1 (ko) | 아마란스 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 피부 미백용 조성물 | |
| KR20160010884A (ko) | 항염증 활성이 우수한 섬쑥부쟁이 분획물 및 이로부터 분리된 활성화합물 | |
| JP6778026B2 (ja) | ４’−デメチルノビレチンを有効成分として含有する美白剤および美白用飲食物 | |
| JP5933748B2 (ja) | ジテルペン化合物、美白剤およびジテルペン化合物の製造方法 | |
| KR101050484B1 (ko) | 락톤계 화합물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 조성물 | |
| KR101592373B1 (ko) | 고장초 추출물을 포함하는 미백 조성물 및 그 제조 방법 | |
| JP2013053159A (ja) | （２ｚ，８ｚ）―メトリカリア酸メチルエステルを有効成分として含む皮膚美白用組成物 | |
| KR101069906B1 (ko) | 비짜루국화 추출물을 함유하는 피부 상태개선용 조성물 | |
| KR101869639B1 (ko) | 개병풍 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 조성물 및 이의 용도 | |
| JP5946510B2 (ja) | メラニン生成抑制剤、化粧料、及びメラニン生成抑制剤の製造方法 | |
| JP2011032177A (ja) | Ｋｉｔ切断抑制剤 | |
| KR101526435B1 (ko) | 머루근 추출물을 포함하는 미백용 조성물 | |
| KR20200069616A (ko) | 올벚나무를 포함하는 항염증용 조성물 | |
| JP5933420B2 (ja) | 新規化合物、美白剤および前記化合物の製造方法 | |
| JP6013180B2 (ja) | 美白剤 | |
| JP5933419B2 (ja) | ジテルペン化合物、美白剤およびジテルペン化合物の製造方法 | |
| KR20180004076A (ko) | 비수리의 초음파 추출물 및 이의 추출방법 | |
| KR20190033871A (ko) | 피부 노화 개선 복합 화장료 조성물 | |
| KR101038022B1 (ko) | 신규 당 화합물 | |
| KR101068808B1 (ko) | 봉황목 추출물을 유효성분으로 함유하는 미백용 조성물 | |
| KR101945859B1 (ko) | 신규한 진세노사이드를 유효성분으로 포함하는 미백용 조성물 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20090902 |
|
| A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20090903 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20090902 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20090903 |
|
| A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20100315 |
|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20100326 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20100315 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20120814 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20120925 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20121016 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20121102 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20121127 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20121130 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5149548 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20151207 Year of fee payment: 3 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |