JP5024594B2 - ポリペプチド化合物に銀微細粒子を担持して成る抗菌性組成物 - Google Patents
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Description
殊に当該発明においては、銀微粒子が量子サイズ効果により著しく励起されるため銀の抗菌性が更に著しく増大することを発見した。銀の超微細粒子を担体表面に生成担持させることにより、従来の銀系抗菌剤に比べて著しく強力且迅速な殺菌的抗菌性を発現する事実を発見し、銀の安全性をも具備した新規の固体抗菌性銀担持体の提案を行った。
細菌培養液としては、モルモットの盲腸に寄生する原虫(Balantidium caviae)の培養液を用いた。培養液には多数の原虫が活発に泳動している状況が光学顕微鏡(倍率400倍)下で明瞭に確認できた。
また、上記の繊毛運動停止後、菌体の細胞膜が物理的に破壊され、内部の原形質が流出する様子が明瞭に観察されており、その殺菌作用は正に劇的と表現されるに相応しい状況であった。
尚、当該実験の映像記録は、必要に応じて開示する用意がある。
まず、単細胞微生物の態様及び代謝活動の機構から検討し、従来の思想に対処する。
微生物の細胞を保護するものは細胞膜のみで、ほとんど無防備である。細胞膜は半透膜であるが、単なる半透膜ではなく、選択的透過性を持ち、細胞内の物質代謝で得られるエネルギーを使って、特定のイオンを濃度勾配に逆らって能動輸送(active tr−ansport)していることが知られている。これによって、生命の基本である恒常性(Homeostasis)を維持することができる。
これらの点においても、従来の抗菌技術思想には誤謬が多々存在していることが理解される。
生体の細胞はそれぞれ細胞膜に包まれている。細胞膜には、膜の内側と外側とで電位に差がある(分極している)という性質がある。細胞の非活動時における膜内外の電位差は静止電位(resting potential)と呼ばれ、細胞膜表面の電位を0とした時の内面の電位で表し、常に負の値をとる。外部環境の僅かな変化に対応して膜のイオン透過を調節して静止電位を維持しているが、ある閾値を超えた刺激が細胞に加えられると、膜のイオン透過性が一気に変化し、活動電位(action potential)が発生する。
以上、従来の抗菌性機構に関する提案では、微生物の細胞膜の膜電位に関する秩序破壊を対象にした発明は皆無である。
細菌など微生物の細胞膜にも同様の性質があり、外部環境の変化に順応し、栄養活動、危険回避など様々な生命活動に重要な役割を果たしていることが示唆される。
また、一部の細菌や原虫の持つ鞭毛や繊毛の構成蛋白も、高等動物の筋繊維と同種の蛋白であることから、高等動物と同様の機構により運動していることが示唆される。
そこで、当該銀微粒子担持体の銀微粒子の物性について、該抗菌効果に直接貢献をなすと思料される銀の物性を特定し、当該特性の量子サイズ効果について考察する。
固体試料の大きさ(サイズ)が、その物質の中の伝導電子や正孔のド・ブロイ波長程度に小さくなったとき、その物質の熱力学的諸量及び輸送係数に影響を及ぼす変化が現れることを量子サイズ効果という。
量子サイズ効果で励起された銀微粒子が、その表面近傍を作用領域とする酸化還元サイクルのパルス電界を、単細胞微生物の細胞膜に印加することによる細胞膜の破壊効果と見做される。この際の電気的パルスの伝達は、電解質水溶液中では、イオン伝導によると考えられるので、当該抗菌性銀微粒子に直接接触しなくても、細胞膜の破壊閾値電圧以上の電界領域に存在する微生物はすべて殺菌作用を被る。
銀の抗菌作用は、銀本来の物性に起因する特性と考えられるが、その根拠は本発明の成果から帰納的に推理されるもので、銀の物性から演繹されるものではない。
通常の銀の金属物性(バルクの物性)の中で、本発明による銀の抗菌性機構に関する知見を通じて、感得された銀の電子物性に関わる項目について本発明者の所見を述べ、従来の銀の抗菌性に対する一部の誤謬を排し、同時に該技術の開発と発展のため参考に供する。
銀の酸化還元反応の際の電子の出入りに費やされるエネルギーの指標として、イオン化エネルギー及び電子親和力がある。銀の数値について見ると、銀は電子の授受におけるエネルギーの格差が、銅、亜鉛などの金属に比べて小さく、酸化還元反応が一種の共鳴状態にあってマクロ的平衡が成り立っていると思料される。
(1)本発明の担体として、ニッピ株式会社製ゼラチン タイプRを使用した。ゼラチン100グラムを500ml丸底フラスコに入れ、水200mlを加えて50℃に加熱撹拌しながらゼラチンを完全に溶解した。
(2)次いで、0.5%硝酸銀水溶液70mlを上記ゼラチン溶液に添加し、温度60±2.0℃に保持して30分間撹拌反応させた。
(3)これに、5.0%水酸化カリウム水溶液100mlをくわえて上記温度を保持したまま2.5時間継続して撹拌した。
(4)次に加熱を止め反応液を室温迄冷却した。この間撹拌は継続した。本工程を終了した時点で、反応液の一部約5mlを比色計用ガラス製比色管(A)に予め採取した。
(5)反応液を平型のステンレス製バット(30×21×5cm)に移し、水平に保持し、反応液面の中心より垂直距離30cm上方から直下に紫外線を10分間照射して光還元を行った。反応液の一部約5mlを採取して比色管(B)に保管した。光還元に使用された紫外線光源装置は、浜松ホトニックス株式会社製、安定化キセノンランプ75W及び専用定電流電源C2576である。
(6)光還元工程を確認するため、上記工程(4)及び工程(5)で予め採取保管された比色用試料を、波長430nmの光透過率を比較して還元反応を確認した。その際の比色管(A)/比色管(B)の透過比は25%で還元が十分行われたことが確認できた。使用された比色計はATAGO株式会社製Photo Unic5である。
(1)本発明による微細銀粒子をコラーゲンに担持した抗菌性組成物を最も腐敗しやすい化粧水用基材に対して0.002重量%を添加した試料(A)を調製し、メチルパラベン0.1重量%添加物(B)との比較を行った。
(2)使用細菌液としてモルモット糞便から分離培養した腸内細菌(菌種の同定は行っていない)を蒸留水中に分散させて使用した。(菌数:約3.5×105/μl)
(3)上記(A)及び(B)の2試料を滅菌試験管にそれぞれ5gずつとり、上記細菌液を10μlずつ滴下し、キャップをして十分に混和させた。
(4)(3)の試験管に綿栓をして37℃のインキュベータ内に24時間静置した。
(5)(4)の各検体50μlをピペットで普通寒天培地に滴下し、滅菌水7〜10滴を加え平板上に均一に流した後35℃〜37℃で培養した。
(6)24〜48時間後のコロニーの発育状態を観察し、判定を行った。
(7)その結果、コロニー数は(A)(B)共に20以下となり、本発明による抗菌性組成物はメチルパラベン添加量の僅か1/50の添加量で、メチルパラベンと同等の防腐効果を発揮することが確認された。
Claims (5)
- コラーゲン及びその加水分解により得られるポリペプチド化合物の水溶液に銀塩溶液及び触媒を添加して反応させたのち、これに波長400nm以下の紫外線を照射して還元を行うことにより、当該ポリペプチド化合物のαアミノ基の近傍に微細銀粒子を析出させると同時に、当該微細銀粒子をαアミノ基の窒素原子に静電吸着により担持させて成ることを特徴とする抗菌性組成物。
- 前記コラーゲン及びその加水分解により得られるポリペプチド化合物が、分子量13万乃至2千の範囲内にあり且つ水溶性であることを特徴とする請求項1に記載の抗菌性組成物。
- 前記銀塩溶液が、アンモニア性硝酸銀水溶液、硝酸銀水溶液、硫酸銀水溶液より成る群から選択される少なくとも一種の銀塩溶液であることを特徴とする請求項1に記載の抗菌性組成物。
- 前記触媒が、水酸化リチウム、水酸化カルシウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムの、それぞれの水溶液より成る群から選択される少なくとも一種の水溶液であることを特徴とする請求項1に記載の抗菌性組成物。
- 前記紫外線照射による還元に使用される光源に、自然太陽光、高圧或いは低圧キセノンガス放電管、高圧或いは低圧水銀灯或いはそれらと同等の紫外線放射能を有する光源群から選択される一種若しくは2種以上を用いることを特徴とする請求項1に記載の抗菌性組成物。
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