JP4907345B2 - 生体内移植のための熱変性微生物由来セルロース - Google Patents
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Description
本実施例は、生物負荷(微生物汚染)を最小限にするために制御環境内でA.xylinumにより生成される標準熱変性微生物由来セルロースフィルムの作製に関する。培養容器から滅菌培地にA.xylinumを接種し、生物反応器トレーに約110gの量を充填して、薄膜の最適増殖が見られるまで培養した。薄膜をトレーから出し、次に約1時間加熱した腐食性溶液をタンクで化学処理(発熱物質除去)した。次に薄膜を濾過水で連続的にすすいだ。フィルムを空気圧縮機で圧縮して、所望の重量及びセルロース含有率の薄膜を得た。
A.xylinumから生成された様々な厚さの熱変性微生物由来セルロースフィルムを、一般に、実施例1の手順に従って作製した。
A.微生物由来セルロースの機械特性試験
埋込型医用材料に利用しうる引張強度、伸長、及び縫合保持力(引き出し)を判定するために、熱変性微生物由来セルロースの機械試験を行った。本発明の試料を外科用ハサミ及び鋳型を用いて試験用に1cm x 4cm細片又は1cm x 8cm細片に切断した。例えばフィルム端に平行な区域では各細片を切断せず、各フィルム内の区域全体を示すためにフィルム内の各方向の細片を切断した。厚さは、電子カリパスを用いてミリメートル単位で±0.03mmまで精密に測定した。
熱変性微生物セルロース試料の平均引張強度及び伸長%を図2及び3に示す。
市販の埋込型製品を縫合するための説明書は通常、製品端部から2〜4mm以上を手術部位の軟組織に縫合することを要する;従って、試料は全て縫合糸を下端から2〜4mmに挿入して試験した(図4)。基本性能を測定するために他の材料及び市販製品と比較する場合、縫合糸引出しデータを調査しなければならない。
各種微生物由来セルロース材料の一般機械強度解析を、各程度の引張強度、伸長%、及び縫合保持力を実証するために実施した。表2ならびに図2、3及び5は、熱変性微生物由来セルロース(TMMC)の、溶媒脱水微生物セルロース(SDMC)に対する、そして空気乾燥伸長微生物由来セルロースBIOFILL(商標)(BioFill Productos Biotechnologicos, Curritiba, Parana, Brazil.)に対する比較を示す。BIOFILL(商標)を1 x 4cm細片に切断して、実施例3のように試験をした。BIOFILL(商標)はA.xylinumから合成され、フィルム処理されて伸長の間に空気乾燥される。
あるインプラント材料(すなわち硬膜代用品)の所望の特徴は、最大に達し、その形状を維持する周囲流体の吸収により多少の厚さの増加が可能になることである。等張性塩水に浸漬した場合の時間経過による各材料の厚さの変化を示すために、試験を実施した。
埋込型材料は生体適合性でなければならない。これを証明する試験は、国際標準化機構(ISO)10993文書に従う。用途に応じて、特定の試験が必要である。微生物セルロースは表3の試験を用いて検討した。
Claims (26)
- 医療又は外科用途の埋込型材料又は局所材料を作製する方法であって:
a)微生物由来セルロースを提供するステップと;
b)前記セルロースを非発熱性にするために、前記微生物由来セルロースを処理するステップと;
c)前記微生物由来セルロースを、
i) 0℃未満の温度にさらし、水を結晶化させ、
ii) 次に前記微生物セルロースを、0℃を超える温度にさらし、
iii) 次に除去された液体を廃棄する
ことにより、前記微生物由来セルロースを部分脱水するステップ
を含む方法。 - 微生物由来セルロースが細菌のアセトバクター・キシリナム(Acetobacter xylinum)により作製される、請求項1に記載の方法。
- 前記微生物由来セルロースを処理するステップが、化学洗浄を用いることを含む、請求項1に記載の方法。
- 化学洗浄が水酸化ナトリウムを用いる、請求項3に記載の方法。
- 水酸化ナトリウム濃度が0.1M〜4Mである、請求項4に記載の方法。
- 温度が1時間〜60日間、0℃又はそれ以下であり続ける、請求項1に記載の方法。
- 次の温度が1時間〜60日間、0℃より高くあり続ける、請求項6に記載の方法。
- どちらの温度も1〜21日間、不変である、請求項7に記載の方法。
- a)埋込型材料として用いるために、請求項1に記載の方法で作製された微生物由来セルロースと;
b)請求項1に記載の方法で作製された前記微生物由来セルロースを含有する防湿包装と;
を含むキット。 - 前記微生物由来セルロースがガンマ照射により滅菌される、請求項1に記載の埋込型材料。
- 材料が一般外科、形成外科、又は神経外科に適する組織代用品を構成する、請求項1に記載の方法。
- 材料が一般外科、形成外科、又は神経外科に適する埋込型充填剤を構成する、請求項1に記載の方法。
- 材料が一般外科、形成外科、又は神経外科に適する埋込型外科用メッシュを構成する、請求項1に記載の方法。
- 材料が一般外科、形成外科、又は神経外科に適する組織修復剤を構成する、請求項1に記載の方法。
- a)パッド内に残存する液体を有機溶媒と交換するステップと;
b)有機溶媒を超臨界流体と交換するステップと;
c)超臨界流体をガスとして除去するステップと;
を含む、微生物由来セルロースをさらに乾燥型に処理する、請求項1に記載の方法。 - 有機溶媒がメタノール、エタノール、イソプロパノール、アセトン、及びその混合物である、請求項15に記載の方法。
- 交換を10分〜60日間の期間行う、請求項15に記載の方法。
- 前記期間が30分〜7日間である、請求項17に記載の方法。
- 超臨界流体が二酸化炭素である、請求項15に記載の方法。
- 圧力が1000psi〜4000psiである、請求項15に記載の方法。
- 前記圧力が1500psi〜2500psiである、請求項20に記載の方法。
- 所望の圧力時間が30分〜7日間である、請求項20に記載の方法。
- 当該時間長が1時間〜6時間である、請求項21に記載の方法。
- a)埋込型材料として用いるために、請求項15に記載の方法で作製された微生物由来セルロースと;
b)請求項15に記載の方法で作製された前記微生物由来セルロースを含有する防湿包装と;
を含むキット。 - 請求項15に記載の方法で作製された微生物由来セルロースを含み、前記微生物由来セルロースが非発熱性である、生体内埋込型材料。
- 前記微生物由来セルロースがガンマ照射又はエチレンオキシドにより滅菌される、請求項15に記載の生体内埋込型材料。
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