JP4884416B2

JP4884416B2 - 微小物質サンプリング装置、及びその使用方法

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Publication number: JP4884416B2
Application number: JP2008093462A
Authority: JP
Inventors: 豊喜川端; 正至小畠; 敏治柳川; 直幸熊谷; 享子神谷; 高明山崎; 桂司山下
Original assignee: Chugoku Electric Power Co Inc; Sessile Research Corp
Current assignee: Chugoku Electric Power Co Inc; Sessile Research Corp
Priority date: 2008-03-31
Filing date: 2008-03-31
Publication date: 2012-02-29
Anticipated expiration: 2028-03-31
Also published as: JP2009244200A

Description

本発明は、水中の微小物質を採取するための装置に関する。

冷却水として海水を利用する火力・原子力発電所においては、海から海水を取り入れて復水器に供給する取水路や、復水器を通った海水を海へ放出するための放水路の内部に、フジツボ類、イガイ類、カキ類等の海洋生物が付着しやすい。このような海洋生物の付着量が多くなると、冷却水の流路が塞がれて、冷却能が低下するなどの不具合を招く恐れがある。そのため、塩素や過酸化水素製剤等を連続注入して付着を抑制したり、定期的に取水路や放水路を点検し、取水路や放水路に海洋生物が大量付着した場合には、機械を用いたりして、取水路や放水路に付着した海洋生物を除去している。

取水路や放水路への海洋生物の付着を未然に防ぐためには、幼生が流入する時期において集中的に塩素を注入するなどの対策を実施することが有効である。しかしながら、取水路内や放水路内は流速が速く、管路、暗渠である場合が多いため、現在存在する手段（例えば、市販のプランクトンネット等）を用いて、取水路内や放水路内に存在する海洋生物の幼生を採取し、流入時期を調べることは困難であった。

また、現在までに、海水に含まれる植物性プランクトンを観察するシステムが存在するが、このシステムは、特定の大きさのプランクトンを採取することができなかった（例えば、特許文献１参照）。
特開平５−１７２７２８号公報

そこで、本発明は、特定の大きさの水中の微小物質を、効率よく採取するための装置を提供することを目的とする。

本発明者らは、姫路市妻鹿港内海域（兵庫県）、若狭湾伊根港内海域（京都府）、並びに、大崎発電所取水路及び桟橋前面海域（広島県）の海水を用いて、これらの海水に含まれる、特定の大きさの微小水生生物を採取することができるような様々な装置を作製し、その機能を検討した結果、本装置を完成するに至った。

すなわち、本発明に係る微小物質サンプリング装置は、水中の微小物質を採取するための装置であって、第１の開口部と、前記第１の開口部より狭い第２の開口部を有し、前記第１の開口部から前記第２の開口部に向けて次第に断面寸法が小さくなるように構成された第１のフィルターと、前記第１の開口部に装着され、前記第１のフィルターよりも目の粗い第２のフィルターと、前記第２の開口部に装着され、開閉可能なコックが設けられた第１の筒状部材とを備えることを特徴とする。この微小物質サンプリング装置の使用方法は、前記第１の筒状部材に設けられたコックを閉じる工程と、前記第１のフィルターに前記第１の開口部から微小物質を含む液体を供給する工程と、前記第１のフィルターを液体中に浸して、前記第１のフィルターに捕捉された微小物質を前記第２の開口部付近に溜める工程と、前記微小物質サンプリング装置を液体中から取り出す工程と、前記コックを開いて、前記第２の開口部付近に溜めた微小物質を前記第２の開口部から排出する工程とを包含する。ここで、前記微小物質が、微小水生生物の幼生である場合、前記第１のフィルターが、２０〜２０００μｍのメッシュからなり、前記第２のフィルターが、３００〜２０００μｍのメッシュからなることが好ましい。例えば、前記微小物質が、フジツボ類のキプリス幼生である場合、前記第１のフィルターが、１４０〜２８０μｍのメッシュからなり、前記第２のフィルターが、４００〜６００μｍのメッシュからなることが好ましく、前記微小物質が、イガイ類のペディベリジャー幼生である場合、前記第１のフィルターが、１２０〜２２０μｍのメッシュからなり、前記第２のフィルターが、３５０〜５５０μｍのメッシュからなることが好ましく、前記微小物質が、クダウミヒドラ類のアクチヌラ幼生である場合、前記第１のフィルターが、２００〜２０００μｍのメッシュからなり、前記第２のフィルターが、１０００〜２０００μｍのメッシュからなることが好ましい。

また、前記微小物質サンプリング装置は、第３の開口部と、前記第３の開口部より広い第４の開口部を有し、前記第３の開口部から前記第４の開口部に向けて次第に断面寸法が大きくなるように構成された漏斗状部材と、第５の開口部と第６の開口部を有する第２の筒状部材と、前記第２の筒状部材の開口部又は内部に設けられた第３のフィルターとをさらに備えていてもよく、前記第３の開口部は、前記第１の筒状部材を通じて前記第２の開口部に着脱可能であり、前記第５の開口部は、前記漏斗状部材を通じて前記第４の開口部に着脱可能であることを特徴とする。この微小物質サンプリング装置の使用方法は、前記第１の筒状部材に設けられたコックを閉じる工程と、前記第１のフィルターに前記第１の開口部から微小物質を含む液体を供給する工程と、前記第１のフィルターを液体中に浸して、前記第１のフィルターに捕捉された微小物質を前記第２の開口部付近に溜める工程と、前記微小物質サンプリング装置を液体中から取り出す工程と、前記コックを開いて、前記第２の開口部付近に溜めた微小物質を前記第２の開口部から排出する工程と、前記第１のフィルターの目合いと同じ目合いの第３のフィルター、又は、前記第１のフィルターの目合いよりも細かい第３のフィルターに、前記第２の開口部から排出した前記微小物質を含む液体を供給する工程と、前記第３のフィルターに捕捉された微小物質を回収する工程とを包含する。ここで、前記使用方法は、前記第３のフィルターの目合いよりも細かい目合いの第４のフィルターに、前記第３のフィルターを通過した液体を供給する工程と、前記第４のフィルターに捕捉された微小物質を回収する工程とを包含してもよい。

さらに、前記微小物質サンプリング装置は、前記第２の筒状部材の開口部又は内部に複数のフィルターを備えていてもよいし、前記第５の開口部に第３のフィルターを備え、前記第６の開口部に第４のフィルターを備えていてもよい。ここで、前記微小物質が、微小水生生物の幼生である場合、前記第３のフィルターが、２０〜３００μｍのメッシュからなることが好ましい。例えば、前記微小物質が、フジツボ類のキプリス幼生である場合、前記第３のフィルターが、１４０〜２４０μｍのメッシュからなることが好ましく、前記微小物質が、イガイ類のペディベリジャー幼生である場合、前記第３のフィルターが、１２０〜２２０μｍのメッシュからなることが好ましく、前記微小物質が、クダウミヒドラ類のアクチヌラ幼生である場合、前記第３のフィルターが、２００〜３００μｍのメッシュからなることが好ましい。さらに、前記微小物質が、フジツボ類のキプリス幼生又はフジツボ類のノープリウス幼生である場合、前記第３のフィルターが、１４０〜２４０μｍのメッシュからなり、前記第４のフィルターが、１００〜１４０μｍのメッシュからなることが好ましく、前記微小物質が、イガイ類のＤ型幼生、イガイ類のべリコンカ幼生、又はイガイ類のペディベリジャー幼生である場合、前記第３のフィルターが、１２０〜２２０μｍのメッシュからなり、前記第４のフィルターが、２０〜１２０μｍのメッシュからなることが好ましい。

また、前記微小物質サンプリング装置は、第７の開口部を有し、前記第７の開口部の辺縁と前記第１の開口部が着脱可能であって、前記第７の開口部の辺縁と前記第１の開口部が密着した場合に前記第１のフィルター、前記第１の筒状部材、及び前記漏斗状部材を内部に収容可能な容器と、前記容器に設けられ、前記容器内の液体を外部に流出させるための第１の流出口とをさらに備えていてもよく、前記第１の流出口は、前記第７の開口部の辺縁と前記第１の開口部が密着し、前記第１のフィルター、前記第１の筒状部材、前記漏斗状部材、並びに、前記第３のフィルター又は前記第３のフィルター及び前記第４のフィルターを備えた第２の筒状部材を前記容器内部に収容したとき、前記第１のフィルターの半分以上の高さになるように前記容器に設けられていることを特徴とする。この微小物質サンプリング装置の使用方法は、前記第１の筒状部材に設けられたコックを開く工程と、前記第１のフィルターに前記第１の開口部から微小物質を含む液体を供給する工程と、前記第１のフィルターを前記容器から取り出す工程と、前記第１のフィルターから前記第３のフィルターを取り外す工程と、前記第３のフィルターに捕捉された微小物質を回収する工程とを包含する。ここで、前記微小物質サンプリング装置は、前記第１の流出口に設けられ、前記容器内の液体を、前記容器の外部に排出する流量を調節する第１の手段を備えていてもよい。

さらに、前記微小物質サンプリング装置は、前記容器に設けられ、前記容器内の液体を外部に流出させるための第２の流出口と、前記第２の流出口に設けられ、前記容器内の液体を、前記容器の外部に排出する流量を調節する第２の手段とを備えていてもよい。この微小物質サンプリング装置の使用方法は、前記第１の筒状部材に設けられたコックを開く工程と、前記第１のフィルターに前記第１の開口部から微小物質を含む液体を供給する工程と、前記第２の手段を用いて前記第２の流出口からの液体の流出量を調整することにより、前記容器に前記液体を所定量維持する工程と、前記第１のフィルターを前記容器から取り出す工程と、前記第１のフィルターから前記第３のフィルターを取り外す工程と、前記第３のフィルターに捕捉された微小物質を回収する工程とを包含する。なお、前記使用方法は、第４のフィルターに、前記第３のフィルターを通過した液体を供給する工程を包含し、前記筒状部材から前記第４のフィルターを取り外す工程と、前記第４のフィルターに捕捉された微小物質を回収する工程とを包含してもよい。

また、前記微小物質サンプリング装置は、前記第２のフィルターに微小物質を含む液体を供給する供給手段と、前記供給手段に設けられ、前記第２のフィルターに供給する液体の流量を調節する第３の手段とを備えていてもよい。

さらに、前記微小物質サンプリング装置は、前記第１の流出口、前記第２の流出口、又は前記第１の流出口及び前記第２の流出口の両方に装着され、前記第１のフィルターよりも目の細かい第５のフィルターを備えていてもよい。この微小物質サンプリング装置の使用方法は、第５のフィルターに、前記第１のフィルターを通過した液体、前記第３のフィルターを通過した液体、又は前記第４のフィルターを通過した液体を供給する工程と、前記第５のフィルターに捕捉された微小物質を回収する工程とを包含する。

なお、前記使用方法において、ポンプを用いて、前記第１の開口部に微小物質を含む前記液体を供給してもよい。また、前記微小物質としては、例えば、フジツボ類のキプリス幼生、イガイ類のペディベリジャー幼生、クダウミヒドラ類のアクチヌラ幼生等が挙げられる。

また、前記微小物質サンプリング装置において、前記漏斗状部材と前記第２の筒状部材とが、一体形成されていてもよい。

さらに、本発明にかかる微小物質検出システムは、水中の微小物質を採取する微小物質サンプリング装置と、前記微小物質サンプリング装置により得られた微小物質を検出する微小物質検出装置とを備えることを特徴とする。ここで、前記微小物質検出システムにおいて、前記微小物質が水生生物である場合、前記微小物質検出装置は、前記水生生物に特異的に反応する抗体を用いて、前記水生生物を検出する手段を備えていてもよい。

なお、前記水生生物としては、例えば、フジツボ類のキプリス幼生、イガイ類のペディベリジャー幼生、クダウミヒドラ類のアクチヌラ幼生等が挙げられる。また、前記微小物質検出システムは、前記微小物質サンプリング装置により得られた微小物質を破砕する微小物質破砕装置を備えていてもよい。

本発明によって、水中の微小物質を効率よく採取するための装置を提供することが可能になる。

本発明の目的、特徴、利点、及びそのアイデアは、本明細書の記載により、当業者には明らかであり、本明細書の記載から、当業者であれば、容易に本発明を再現できる。以下に記載された発明の実施の形態等は、本発明の好ましい実施態様を示すものであり、例示又は説明のために示されているのであって、本発明をそれらに限定するものではない。本明細書で開示されている本発明の意図並びに範囲内で、本明細書の記載に基づき、様々な改変並びに修飾ができることは、当業者にとって明らかである。

＝＝微小物質サンプリング装置＝＝
本発明の微小物質サンプリング装置を用いて採取し得る物質は、水中に含まれる微小物質ならば何でもよく、例えば、水生生物、砂、化合物の結晶や繊維等である。ここで、水生生物としては、例えば、付着生物の幼生やその他の動植物プランクトン、魚類や無脊椎（むせきつい）動物の卵等の配偶子、稚魚等が挙げられる。具体的に、対象となる生物としては、魚類以外にも、フジツボ等の節足動物（昆虫、甲殻類）、ムラサキイガイ等の軟体動物（貝類）、ゴカイ等の環形動物、ヒドロ虫やクラゲ等の刺胞動物、などが挙げられ、幼生としては、例えば、フジツボ類（節足動物甲殻類）のノープリウス幼生・キプリス幼生、エビ類（節足動物甲殻類）のノープリウス幼生・ゾエア幼生・ミシス幼生、イガイ類やカキ類（軟体動物二枚貝類）のＤ型幼生・ベリコンカ幼生・ペディベリジャー幼生、カンザシゴカイ類（環形動物多毛類）のトロコフォア幼生・ネクトキータ幼生、ウニ類（棘皮動物ウニ類）のプリズム幼生・プルテウス幼生、クラゲ類（刺胞動物）のプラヌラ幼生・エフィラ幼生、その他の動物プランクトンとしては、コペポーダ（カイアシ）類やミジンコ・ケンミジンコ類、鞭毛虫・アメーバ・太陽虫・繊毛虫等の原生動物、植物プランクトンとしては、珪藻、クロレラ等の微細藻類などが挙げられる。

また、本発明の装置に供給する液体は、微小物質を含む液体であればよく、例えば、海水、河川水、湖水、沼水、地下水等である。

以下、本発明にかかる微小物質をサンプリングするための装置（以下、「微小物質サンプリング装置」と称する）に関し、構成例を挙げて、添付図面を参照して詳細に説明する。

（１）構成例１
図１は、本発明の一実施形態として説明する微小物質サンプリング装置の概略図である。
本実施形態の微小物質サンプリング装置１００は、微小物質を採取するための微小物質採取装置１０等を備える。微小物質採取装置１０は、図１に示すように、微小物質を採取するための第１のフィルター１１、第１のフィルターに装着された第２のフィルター１２、第１のフィルター１１の内部を開閉可能なコック１４を設けた第１の筒状部材１３等を備える。

第１のフィルター１１は、微小物質を含む液体を供給するための第１の開口部１５と、第１のフィルターの内部の液体等を排出するための、第１の開口部１５より狭い第２の開口部１６とを有し、第１の開口部１５から第２の開口部１６に向けて次第に断面寸法が小さくなるように構成されている。第１のフィルター１１の材質は、所望の微小物質を採取することができる材質で作製されていればよく、そのような材質としては、例えば、ナイロン、ポリエチレン、テトロン、ポリエステル、カーボン、テフロン、ポリプロピレン等の材質が挙げられる。また、第１のフィルター１１の目合いは、所望の微小物質を採取することができる目合いであれば特に限定されない。

第１のフィルター１１の第１の開口部１５には、第１のフィルター１１よりも目の粗い第２のフィルター１２を備えている。第２のフィルター１２の形状は、第１のフィルター１１の内部に収まる形状であれば、特に限定されない。第２のフィルター１２の材質は、所望の微小物質を採取することができる材質で作製されていればよく、そのような材質としては、例えば、ナイロン、ポリエチレン、テトロン、ポリエステル、カーボン、テフロン、ポリプロピレン等が挙げられる。また、第２のフィルター１２の目合いは、第１のフィルター１１よりも粗く設計されている。例えば、微小物質がフジツボ類のキプリス幼生である場合、第１のフィルター１１の目合いは１４０〜２８０μｍ、第２のフィルター１２の目合いは４００〜６００μｍであることが好ましく、イガイ類のペディベリジャー幼生である場合、第１のフィルター１１の目合いは１２０〜２２０μｍ、第２のフィルター１２の目合いは３５０〜５５０μｍであることが好ましく、微小物質がクダウミヒドラ類（刺胞動物ヒドロ虫類）のアクチヌラ幼生である場合、第１のフィルター１１の目合いは２００〜３００μｍ、第２のフィルター１２の目合いは１０００〜２０００μｍであることが好ましい。

また、第１の開口部１５から供給した微小物質を含む液体が、第１のフィルター１１の第２の開口部１６局部だけでなく、第１のフィルター１１の内部全体に行き渡るように、第２の開口部１６には、第１のフィルターの内部を開閉することができるコック１４を設けた第１の筒状部材１３を備える（例えば、図１６を参照のこと）。ここで、第１の筒状部材１３の形状は、第２の開口部１６と連結することができる形状であれば、特に限定されない。第１の筒状部材１３の材質は、第１の開口部１５から供給した微小物質を含む液体が漏れなければよく、そのような材質としては、例えば、プラスチック、ガラス、ステンレス等が挙げられる。

一般に、フジツボ類の場合、ノープリウス1〜３期幼生は前側角を含めた全幅約１４０〜３４０μｍ、フジツボ類キプリス幼生は体高約２００〜４００μｍ、イガイ類Ｄ型幼生は殻高約６０〜１１０μｍ、イガイ類べリコンカ（ウンボ期）幼生は殻高約１２０〜１７０μｍ、イガイ類ペディベリジャー幼生は殻高約１７０〜３４０μｍ、カキ類Ｄ型幼生は殻高約６０〜１１０μｍ、カキ類べリコンカ（ウンボ期）幼生は殻高約１１０〜２４０μｍ、カキ類ペディベリジャー幼生は殻高約２４０〜３８０μｍ、クダウミヒドラ類（刺胞動物ヒドロ虫類）アクチヌラ幼生は直径約１．５ｍｍ〜２．５ｍｍ、ミズクラゲ（刺胞動物鉢クラゲ類）プラヌラ幼生は短径約１２０〜３６０μｍ、ミズクラゲーエフィラ幼生は、触手を含めた直径約２〜３ｍｍ（体部径約1〜１．５ｍｍ）、フサコケムシ（コケムシ類）幼生は直径約３００μｍ、ホヤ類（原索動物）タドポール型幼生は体部短径約１５０〜３００μｍ、クルマエビ（節足動物甲殻類）ノープリウス幼生は体幅約２００〜３００μｍ、クルマエビーゾエア幼生は体幅３４０〜４００μm、クルマエビーミシス幼生は体幅４８０〜５００μm、イセエビ（節足動物甲殻類）孵化直後フィロゾーマ１期は体部短径約０．７ｍｍ、イセエビ（節足動物甲殻類）フィロゾーマ１１期（最終期）は体部短径約１２ｍｍ、イセエビ（節足動物甲殻類）プエルルス期幼生は体部短径約２０ｍｍであるといわれている。このように、微小水生生物は発生段階によってその大きさが異なる。本発明の微小物質サンプリング装置は、上記のような異なるサイズを有する第１のフィルター又は第２のフィルターを組み合わせることによって、同一生物間の中でも発生段階の異なる生物を区別して採取することができる。

（２）構成例２
図２は、本発明の一実施形態として説明する微小物質サンプリング装置の概略図である。
本実施形態の微小物質サンプリング装置２００は、微小物質を採取するための微小物質採取装置１０、この微小物質採取装置から得られた微小物質を分離するための分離装置２０等を備える。微小物質採取装置１０は、微小物質を採取するための第１のフィルター１１、第１のフィルターに装着された第２のフィルター１２、第１のフィルター１１の内部を開閉可能なコック１４を設けた第１の筒状部材１３等を備える。また、分離装置２０は、漏斗状部材２１、第２の筒状部材２４、第３のフィルター２５等を備える。

微小物質採取装置１０は、上記「（１）構成例１」に記載の通りである。
分離装置２０は、第１の筒状部材１３の下部から排出された液体に含まれる微小物質を採取する装置である。

漏斗状部材２１は、第１の筒状部材１３の下部から排出された微小物質を含む液体を供給するための第３の開口部２２と、この液体を排出するための第４の開口部２３とを有し、第３の開口部２２から第４の開口部２３に向けて次第に断面寸法が大きくなるように構成されている。ここで、第３の開口部２２は、第１の筒状部材１３を通じて第２の開口部１６に着脱できるように構成されている。漏斗状部材２１の材質は特に限定されず、例えば、プラスチック、ガラス、ステンレス等である。

第２の筒状部材２４は、第５の開口部２７と第６の開口部２８とを有し、フィルターを固定するのに用いられる（例えば、図１６を参照のこと）。例えば、第２の筒状部材２４の開口部２７，２８又は内部には、第１のフィルターの目合いと同じ、又は、第１のフィルターの目合いよりも細かい第３のフィルター２５を設けてもよい。あるいは、第２の筒状部材２４には複数のフィルターを設けてもよく、例えば、第５の開口部２７に、第２のフィルター１２の目合いと同じ、又は、第２のフィルター１２の目合いよりも細かい第３のフィルター２５を設け、第２の筒状部材２４の第６の開口部２８に、第１のフィルターの目合いと同じ、又は、第１のフィルターの目合いよりも細かい第４のフィルター２６を設けてもよい。第３のフィルター２５及び第４のフィルター２６の材質は、所望の微小物質を採取することができる材質で作製されていればよく、そのような材質としては、例えば、ナイロン、ポリエチレン、テトロン、ポリエステル、カーボン、テフロン、ポリプロピレン等が挙げられる。ここで、第２の筒状部材２４の第５の開口部２７に第３のフィルター２５を装着する際、第３のフィルター２５辺縁にゴムパッキン等を設けて、第５の開口部２７と第３のフィルター２５とを密着させることが好ましい。同様に、第２の筒状部材２４の内部にフィルターを装着する際、そのフィルター辺縁にゴムパッキン等を設けて、第２の筒状部材２４の内部とフィルターとを密着させることが好ましい。また、第２の筒状部材２４の第６の開口部２８に第４のフィルターを装着する際は、押さえリング２９等を用いて第６の開口部２８に第４のフィルター２６を固定すればよい。この際、第４のフィルター２６辺縁にゴムパッキン等を設けてもよい。

第３のフィルター２５のみを分離装置２０に装着して微小物質を採取する際、フィルターの目合いは、例えば、微小物質がアカフジツボ、アメリカフジツボ、ヨーロッパフジツボ等のフジツボ類のキプリス幼生である場合、第１のフィルター１１の目合いは１４０〜２８０μｍ、第２のフィルター１２の目合いは４００〜６００μｍ、第３のフィルター２５の目合いは１４０〜２４０μｍであることが好ましく、ムラサキイガイ、ミドリイガイのペディベリジャー幼生である場合、第１のフィルター１１の目合いは１２０〜２２０μｍ、第２のフィルター１２の目合いは３５０〜５５０μｍ、第３のフィルター２５の目合いは１２０〜２２０μｍであることが好ましく、微小物質がベニクダウミヒドラ（刺胞動物ヒドロ虫類）のアクチヌラ幼生である場合、第１のフィルター１１の目合いは２００〜３００μｍ、第２のフィルター１２の目合いは１０００〜２０００μｍ、第３のフィルター２５の目合いは２００〜３００μｍであることが好ましい。特に、微小物質がアカフジツボのキプリス幼生である場合、第１のフィルター１１の目合いは２２４μｍ、第２のフィルター１２の目合いは４００μｍ、第３のフィルター２５の目合いは２２４μｍであることが最も好ましい。

また、第３のフィルター２５及び第４のフィルター２６を分離装置２０に装着して微小物質を採取する際、フィルターの目合いは、例えば、第１のフィルター１１の目合いを２００μｍに、第２のフィルター１２の目合いを６００μｍに、第３のフィルター２５の目合いを３００μｍに、第４のフィルター２６の目合いを２００μｍにすれば、第３のフィルター２５上には、３００〜６００μｍの微小物質が、第４のフィルター２６上には２００〜３００μｍの微小物質を採取することが可能になる。

例えば、アカフジツボのキプリス幼生とノープリウス１・２期幼生とを区別して採取する場合、第１のフィルター１１の目合いを１００μｍに、第２のフィルター１２の目合いを５００μｍに、第３のフィルター２５の目合いを２１２μｍに、第４のフィルター２６の目合いを１００μｍにすれば、第３のフィルター２５上には、アカフジツボのキプリス幼生が、第４のフィルター２６上にはアカフジツボのノープリウス１・２期幼生を採取することができる。同様に、ムラサキイガイのＤ型幼生と、ムラサキイガイのべリコンカ幼生と、ムラサキイガイのペディベリジャー幼生とを区別して採取する場合、第１のフィルター１１の目合いを２０〜４０μｍに、第２のフィルター１２の目合いを３５０μｍに、第３のフィルター２５の目合いを１２０μｍに、第４のフィルター２６の目合いを２０〜４０μｍにすれば、第３のフィルター２５上には、ムラサキイガイのペディベリジャー幼生が、第４のフィルター２６上にはムラサキイガイのＤ型幼生とムラサキイガイのべリコンカ幼生を採取することができる。

このように、第３のフィルター２５及び第４のフィルター２６を分離装置２０に装着した、本発明の微小物質サンプリング装置を用いれば、サンプリング装置に導入した海水中に含まれる微小物質をさらに細かく分離することが可能となる。

なお、さらに細かく分離したい場合には、第２の筒状部材２４の第３のフィルター２５と第４のフィルター２６との間に、第３のフィルター２５の目合いよりも細かく、かつ、第４のフィルター２６の目合いよりも大きいフィルターを設ければよい（図１２及び図１３を参照のこと）。

また、前記漏斗状部材と前記第２の筒状部材とが一体形成されていてもよい。ここで、一体形成された部材は、最初から１つのものとして形成されてもよく、別個に製造され、あとから一体になるように形成されてもよい。

上記「（１）構成例１」に記載の通り、微小水生生物は発生段階によってその大きさが異なる。本発明の微小物質サンプリング装置は、上記のような異なるサイズを有する第１のフィルター、第２のフィルター、第３のフィルター、又は第４のフィルターを組み合わせることによって、同一生物間の中でも発生段階の異なる生物を区別して採取することができる。

（３）構成例３
図３ａは、本発明の一実施形態として説明する微小物質サンプリング装置の概略図である。
本実施形態の微小物質サンプリング装置３００は、微小物質を採取するための微小物質採取装置１０、この微小物質採取装置から得られた微小物質を分離するための分離装置２０、容器３０等を備える。微小物質採取装置１０は、微小物質を採取するための第１のフィルター１１、第１のフィルターに装着された第２のフィルター１２、第１のフィルター１１の内部を開閉可能なコック１４を設けた第１の筒状部材１３等を備える。分離装置２０は、漏斗状部材２１、第２の筒状部材２４、第３のフィルター２５等を備える。また、容器３０は、容器３０内の液体を外部に流出可能な第１の流出口３１、第１の流出口３１から流出する液体の流量を調節する第１の手段３２等を備える。

微小物質採取装置１０は、上記「（１）構成例１」に記載の通りである。また、分離装置２０は、上記「（２）構成例２」に記載の通りである。

容器３０は、第１のフィルター１１を通過した液体等を貯留する器である。
容器３０は、微小物質採取装置１０及び分離装置２０を収容することができる大きさを有する。また、容器３０は、容器３０の上部から微小物質採取装置１０及び分離装置２０を着脱することができる大きさの第７の開口部３５を有し、容器３０内の液体を外部に流出可能な第１の流出口３１、第１の流出口３１から流出する液体の流量を調節するための第１の手段３２等を備える。ここで、第７の開口部３５の辺縁と第１の開口部１５とを密着させるようにして、微小物質採取装置１０及び分離装置２０を容器３０に収容したときに、第１のフィルター１１の半分以上の高さになるように、容器３０に、第１の流出口３１を設けることが好ましい。第１の手段３２としては、弁等が挙げられ、容器３０の外部に流出する液体の流量は、弁３２の開閉によって調節することができる。

第１のフィルター１１は、第７の開口部３５の辺縁と第１の開口部１５とを密着させるようにして、容器３０に固定される。ここで、第７の開口部３５辺縁と第１の開口部１５は、第７の開口部３５辺縁に第１の開口部１５を吊るす等して直接的に密着させてもよいし、第７の開口部３５辺縁に器具を設け、その器具に第１の開口部１５を吊るす等、間接的に密着させてもよい。

また、容器３０に、第２の流出口３３を設けてもよい。さらに、第２の流出口３３から流出する液体の流量を調節するための第２の手段３４を設けてもよい。ここで、第２の手段３４としては、弁等が挙げられ、容器３０の外部に流出する液体の流量は、弁３４の開閉によって調節することができる。さらに、容器３０の外部に流出させる液体の量が多い場合は、容器３０に複数の流出口や弁を設け、容器３０の外部に流出する液体の流量を調節してもよい。

ポンプ３６は、供給口３８から第２のフィルター１２に微小物質を含む液体を供給するための供給手段の一例である。なお、海水利用プラントの場合は、プラント内の管路に水質検査用の採水弁から供給することもできる。第２のフィルター１２に供給する微小物質を含む液体の流量を調節するための第３の手段３７を設けてもよい。ここで、第３の手段３７としては、弁等が挙げられ、容器３０の内部に流入する液体の流量は、弁の開閉によって調節することができる。

なお、上記弁３２、３４、３７は、２方電磁弁が好ましいが、液体の流量を調節できるものであれば電磁弁でなくてもよい。また、弁にタイマーを設けてもよいし、コンピューター制御により弁を開閉させてもよい。

さらに、第１の流出口３１から流出する液体に含まれる微小物質をさらに採取するために、第１の流出口３１、に第１のフィルターの目合いよりも細かい第５のフィルター３９を備えてもよい。例えば、アカフジツボ、アメリカフジツボ、ヨーロッパフジツボのノープリウス１〜３期幼生を第５のフィルター３９で採取する場合は、第１のフィルター１１の目合いを２５０μｍに、第２のフィルター１２の目合いを４００〜６００μｍに、第５のフィルター３９の目合いを１００μｍにすればよく、ムラサキイガイのペディベリジャー幼生を第５のフィルター３９で採取する場合は、第１のフィルター１１の目合いを２８０μｍに、第２のフィルター１２の目合いを３５０〜５５０μｍに、第５のフィルター３９の目合いを１２０μｍにすればよいし、クダウミヒドラ（刺胞動物ヒドロ虫類）のアクチヌラ幼生を第５のフィルター３９で採取する場合は、第１のフィルター１１の目合いを１０００〜２０００μｍに、第２のフィルター１２の目合いを１０００〜２０００μｍに、第５のフィルター３９の目合いを２００〜３００μｍにすればよい。

なお、第５のフィルター３９の形状は、特に限定されない。また、第５のフィルター３９の材質は、所望の微小物質を採取することができる材質で作製されていればよく、そのような材質としては、例えば、ナイロン、ナイロン、ポリエチレン、テトロン、ポリエステル、カーボン、テフロン、ポリプロピレン等が挙げられる。必要であれば、第２の流出口３３や、第１の流出口３１と第２の流出口３３とを合流させた出口にも、同様の第５のフィルター３９を備えてもよい（図３ａ、ｂ）。

以上のように、本発明の微小物質サンプリング装置は、異なる目合いのフィルター１１、１２、２５、２６、又は３９を備えているため、各フィルターにおいて所望のサイズの微小物質を採取することができる。

例えば、第３のフィルター２５のみを分離装置２０に装着した、本発明の微小物質サンプリング装置に海水を供給する場合、第１のフィルター１１の目合いを４００〜６００μｍに、第２のフィルター１２の目合いを４００〜６００μｍに、第３のフィルター２５の目合いを２１２μｍに、第５のフィルター３９の目合いを１００μｍにすれば、第１及び第２のフィルターでは砂、大型藻類の断片、大型付着生物の脱皮殻、糞等を、第３のフィルターではアカフジツボのキプリス幼生及びノープリウス３〜6期幼生を、また、第５のフィルターではアカフジツボのノープリウス１・２期幼生を採取することができる。同様に、第１のフィルター１１の目合いを１２０μｍに、第２のフィルター１２の目合いを３５０〜５５０μｍに、第３のフィルター２５の目合いを８０μｍに、第５のフィルター３９の目合いを２０〜４０μｍにすれば、第２のフィルターでは砂、大型藻類の断片、大型付着生物の脱皮殻、糞等を、第１のフィルターではムラサキイガイ・ミドリイガイのペディベリジャー幼生を、第３のフィルターではムラサキイガイ・ミドリイガイのベリコンカ幼生を、また、第５のフィルターではムラサキイガイ・ミドリイガイのＤ型幼生を、それぞれ分別して採取することができる。また、第１のフィルター１１の目合いを２００μｍに、第２のフィルター１２の目合いを１０００〜２０００μｍに、第３のフィルター２５の目合いを１００μｍに、第５のフィルター３９の目合いを２０〜４０μｍにすれば、第２のフィルターでは、ヒドロクラゲ類、大型藻類の断片、大型付着生物の脱皮殻等を、第１のフィルターではクダウミヒドラ（刺胞動物ヒドロ虫類）のアクチヌラ幼生を、第３のフィルターではアメリカフジツボ・ヨーロッパフジツボのノープリウス１〜３期幼生を、また、第５のフィルターでは二枚貝類Ｄ型幼生をほぼ分別して採取することができる。

また、第３のフィルター２５及び第４のフィルター２６を分離装置２０に装着した、本発明の微小物質サンプリング装置に海水を供給する場合、例えば、第１のフィルター１１の目合いを１４０μｍに、第２のフィルター１２の目合いを４２０μｍに、第３のフィルター２５の目合いを２１０μｍに、第４のフィルター２６の目合いを１４０μｍに、第５のフィルター３９の目合いを７０μｍにすれば、第３のフィルター２５上では、径３００〜６００μｍの微小物質を採取することができ、第４のフィルター２６上では径２００〜３００μｍの微小物質を採取することができ、第５のフィルター３９上では径１００〜２００μｍの微小物質を採取することができる。

例えば、マガキの幼生を発生段階ごと（Ｄ型幼生と、ベリコンカ幼生と、ペディベリジャー幼生）に選別して採取する場合、第１のフィルター１１の目合いを８０μｍに、第２のフィルター１２の目合いを４００μｍに、第３のフィルター２５の目合いを１７０μｍに、第４のフィルター２６の目合いを８０μｍに、第５のフィルター３９の目合いを３０〜４０μｍにすれば、第３のフィルター２５上には、ペディベリジャー幼生が、第４のフィルター２６上にはベリコンカ幼生が、第５のフィルター３９上ではＤ型幼生を採取することができる。

このように、第３のフィルター２５及び第４のフィルター２６を分離装置２０に装着した、本発明の微小物質サンプリング装置を用いれば、サンプリング装置に導入した海水中に含まれる微小物質をさらに細かく分離することができる。

なお、上記以外の大きさの微小物質を採取したい場合には、第２の筒状部材２４の第３のフィルター２５と第４のフィルター２６との間に、第３のフィルター２５の目合いよりも細かく、かつ、第４のフィルター２６の目合いよりも大きいフィルターを設ければよい（図１２及び図１３を参照のこと）。

上記「（１）構成例１」に記載の通り、微小水生生物は発生段階によってその大きさが異なる。本発明の微小物質サンプリング装置は、上記のような異なるサイズを有する第１のフィルター、第２のフィルター、第３のフィルター、第４のフィルター、第５のフィルターを組み合わせることによって、同一生物間の中でも発生段階の異なる生物を区別して採取することができる。

＝＝微小物質サンプリング装置の使用方法＝＝
以下、本発明の微小物質サンプリング装置を用いて微小物質をサンプリングする方法の一例として、微小水生生物をサンプリングする方法について説明する。なお、構成例１は図１、構成例２は図２、構成例３（構成例３−１及び構成例３−２）は図３ａに基づいて説明する。

（１）構成例１
まず、第１のフィルター１１の第１の開口部１５に、第２のフィルター１２を装着し、コック１４を閉栓する。
次に、第２のフィルター１２に微小物質（水生生物）を含む液体を供給する。この際、ポンプ等の手段を用いて、第２のフィルター１２に水生生物を含む液体を供給してもよい。あるいは、本発明の微小物質サンプリング装置自体を、水生生物を含む液体の中（例えば、海、河川、湖、水、地下水の中等）に浸水させ、図１の上方向に引くことによって第２のフィルター１２に水生生物を含む液体を供給してもよい。
次に、第２のフィルター１２を取り外し、第１のフィルター１１を水生生物が生活する環境の液体に沈めたり、第１のフィルター１１内部を水で洗い流したりすることによって、第１のフィルター１１の内部に存在する水生生物等を第２の開口部１６付近に溜める。
最後に、コック１４を開栓し、第２の開口部１６付近に溜めた水生生物を第１の筒状部材１３の下部から排出する。第２の開口部１６から排出された水生生物を回収するために、第１の筒状部材１３の下部に水生生物を回収するための容器等を設けてもよい。容器には、適当な目合いのフィルター等を備えていてもよい（図１７を参照のこと）。

（２）構成例２
まず、第１のフィルター１１の第１の開口部１５に、第２のフィルター１２を装着し、コック１４を閉栓する。次に、第１の筒状部材１３の下部に分離装置２０を装着する。なお、分離装置２０は、漏斗状部材２１と第２の筒状部材２４とが一体形成されていてもよいが、これらの部材が一体でない場合、漏斗状部材２１に、第３のフィルター２５のみを、又は、第３のフィルター２５及び第４のフィルター２６を備えた第２の筒状部材２４を装着することによって予め組み立てておくことが好ましい。

次に、第２のフィルター１２に水生生物を含む液体を供給する。この際、ポンプ等の手段を用いて、第２のフィルター１２に水生生物を含む液体を供給してもよい。あるいは、本発明の微小物質サンプリング装置自体を、水生生物を含む液体の中（例えば、海、河川、湖、水、地下水の中等）に浸水させ、図２の上方向に引くことによって第２のフィルター１２に水生生物を含む液体を供給してもよい。
次に、第２のフィルター１２を取り外し、コック１４を開栓し、第１のフィルター１１を水生生物が生活する環境の液体に沈めたり、第１のフィルター１１内部を水で洗い流したりすることによって、第１のフィルター１１の内部に存在する水生生物等を第１の筒状部材１３の下部から排出し、第１の筒状部材１３の下部から排出した水生生物を含む液体を、分離装置２０に備えられた第３のフィルター２５に供給する。

あるいは、第２のフィルター１２を取り外し、第１のフィルター１１を水生生物が生活する環境の液体に沈めたり、第１のフィルター１１内部を水で洗い流したりすることによって、第１のフィルター１１の内部に存在する水生生物等を第２の開口部１６付近に溜め、最後に、コック１４を開栓し、第２の開口部１６付近に溜めた水生生物を第１の筒状部材１３の下部から排出し、第１の筒状部材１３の下部から排出した水生生物を含む液体を、分離装置２０に備えられた第３のフィルター２５に供給してもよい。
分離装置２０に第３のフィルター２５のみが備えられている場合、第３のフィルター２５上に捕捉された水生生物を回収するためには、以下の手法（図５操作３を参照のこと）を用いればよい。

まず、微小物質採取装置１０と分離装置２０とを分離し、第３のフィルター２５が装着された漏斗状部材２１を上下にひっくり返す。次に、漏斗状部材２１の下端に遠心管（例えば、市販の１５ｍｌ遠心管等）等を装着し、第３のフィルター上部から水生生物を含まない液体（例えば、ろ過海水（目合い０．４μｍのフィルターでろ過した海水））を注いで第３のフィルターを洗浄する。このようにして、第３のフィルター２５上に捕捉された水生生物を回収すればよい。
一方、分離装置２０に第３のフィルター２５及び第４のフィルター２６が備えられている場合、第４のフィルター２６上に捕捉された水生生物を回収するためには、以下の手法（図１０及び図１１を参照のこと）を用いればよい。

まず、微小物質採取装置１０と分離装置２０とを分離し、第３のフィルター２５を取り外して、第４のフィルター２６が装着された漏斗状部材２１を上下にひっくり返す。次に、漏斗状部材２１の下端に遠心管（例えば、市販の１５ｍｌ遠心管等）等を装着し、第４のフィルター上部から水生生物を含まない液体（例えば、ろ過海水（目合い０．４μｍのフィルターでろ過した海水））を注いで第４のフィルターを洗浄する。このようにして、第４のフィルター２６上に捕捉された水生生物を回収すればよい。

また、第２の筒状部材２４の第３のフィルター２５と第４のフィルター２６との間に、目合いの異なるフィルターを設けた場合は、各フィルターをそれぞれ取り外して上下にひっくり返し、各フィルターの上部から、水生生物が生存できる液体（例えば、ろ過海水（目合い０．４μｍのフィルターでろ過した海水））を注いで各フィルターを洗浄すればよい。洗浄液は、漏斗等を使用して遠心管等に洗浄液を集めてもよい。このようにして、各フィルター上に捕捉された水生生物を回収することができる。

（３）構成例３
水生生物が脆弱である場合、物理的衝撃によって水生生物の形態が破壊されることがある。水生生物の形態が破壊されると、本発明の微小物質サンプリング装置によって採取した水生生物を検出（例えば、所望の水生生物の存在の有無を確認したり、所望の水生生物を同定したり、所望の水生生物の量を測定したりすること等）することができなくなってしまう。また、水生生物を生きたまま採取したい場合もある。このように脆弱な水生生物を採取する際、以下に述べる方法は、特に有効である。

（ｉ）構成例３−１
まず始めに、微小物質サンプリング装置３００を準備する。容器３０に設けられている第１の流出口３１を閉栓し、容器３０の容積全体の２／３になるくらいまで、容器３０に供給口３８から海水を入れる。
その一方で、微小物質採取装置１０及び分離装置２０を準備する。第１のフィルター１１の第１の開口部１５に、第２のフィルター１２を装着し、コック１４を開栓する。次に、第１の筒状部材１３の下部に分離装置２０を装着する。なお、分離装置２０は、漏斗状部材２１に、第３のフィルター２５のみを、又は、第３のフィルター２５及び第４のフィルター２６を備えた第２の筒状部材２４を装着することによって予め組み立てておくことが好ましい。最後に、容器３０の内部に微小物質採取装置１０及び分離装置２０を収容し、これらの装置を容器３０に固定する。
このようにして準備した微小物質サンプリング装置３００を用いて、水生生物のサンプリングを開始する。

まず、第２のフィルター１２に水生生物を含む液体を供給する。この際、ポンプ３６等（供給手段）を用いて、供給口３８から第２のフィルター１２に水生生物を含む液体を供給してもよい。また、第２のフィルター１２に供給する水生生物を含む液体の流量を、弁３７等（第３の手段）の開閉によって調節してもよい。

容器３０の内部の液体が、第１のフィルター１１の半分以上が浸かる高さになるまで貯留されたら、弁３２（第１の手段）を開き、第１の流出口３１から液体を排出する。この場合、第１の流出口３１からの液体の排出量を調整しなくても、液体の高さが第１の流出口３１の高さに保たれる。この際、第１の流出口３１に第５のフィルター３９を設け、第１の流出口３１から排出された水生生物を含む液体を第５のフィルター３９に供給してもよい。また、容器３０の内部の液体が、第１のフィルター１１の半分以上が浸かる高さになるまで貯留されたら、弁３４（第２の手段）を開き、第２の流出口３３からも液体を排出してもよい。例えば、容器３０の内部の液体の高さが第１のフィルター１１の半分以上が浸かる高さになるように、第２の流出口３３からの液体の排出量を調整する。この際、第２の流出口３３に第５のフィルター３９を設け、第２の流出口３３から排出された水生生物を含む液体を第５のフィルター３９に供給してもよい。弁３２（第１の手段）及び弁３４（第２の手段）を適宜調節することによって、容器３０の内部の液体を第１の流出口３１と第２の流出口３３と両方から排出してもよい（図３ａ、ｂ）。

あるいは、容器３０の内部の液体が、第１のフィルター１１の半分以上が浸かる高さになるまで、貯留されたら、弁３２（第１の手段）を閉じたまま、弁３４（第２の手段）を開き、第２の流出口３３から液体を排出する。この場合、容器３０の内部の液体の高さが第１のフィルター１１の半分以上が浸かる高さになるように、供給口３８からの第２のフィルター１２に水生生物を含む液体の供給量と、第２の流出口３３からの液体の排出量とを、弁３４、３７を用いて調整する。この際、第２の流出口３３に第５のフィルター３９を設け、第２の流出口３３から排出された水生生物を含む液体を第５のフィルター３９に供給してもよい。また、容器３０に第１の流出口３１がない場合も同様に、供給口３８からの第２のフィルター１２に水生生物を含む液体の供給量と、第２の流出口３３からの液体の排出量とを、弁３４、３７を用いて調整すれば、容器３０の内部の液体の高さが第１のフィルター１１の半分以上が浸かる高さに保つことができる。
なお、浮力によって分離装置２０が浮き上がる場合は、分離装置２０に適量のおもりをつければよい（図１６を参照のこと）。

次に、弁３２（第１の手段）を閉じ、弁３４（第２の手段）が設けられている場合は弁３４も閉じて、第１のフィルター１１の３分の２の高さくらいまで、容器３０に液体を貯留する。また、弁３２がない場合は、弁３４を閉じて、第１のフィルター１１の３分の２の高さくらいまで、容器３０に液体を貯留する。その後、弁３７（第３の手段）を閉じ、第２のフィルター１２に水生生物を含む液体の供給を中止する。

第２のフィルター１２を取り外し、第１のフィルター１１を上に持ち上げ、上下左右に揺すったり、第１のフィルター１１の外側から水を掛けたりするなどして、第１のフィルター１１の内部に存在する水生生物等を第１の筒状部材１３の下部から排出し、第１の筒状部材１３の下部から排出した水生生物を含む液体を、分離装置２０に備えられた第３のフィルター２５に供給する。

なお、コック１４を閉栓して上記操作を行っていた場合は、第２のフィルター１２を取り外し、第１のフィルター１１を上に持ち上げ、上下左右に揺すったり、第１のフィルター１１の外側から水を掛けたりするなどして、第１のフィルター１１の内部に存在する水生生物等を第２の開口部１６付近に溜め、最後に、コック１４を開栓し、第２の開口部１６付近に溜めた水生生物を第１の筒状部材１３の下部から排出し、第１の筒状部材１３の下部から排出した水生生物を含む液体を、分離装置２０に備えられた第３のフィルター２５に供給すればよい。

第３のフィルター２５又は第４のフィルター２６上に存在する水生生物を回収するためには、上記「（２）構成例２」手法を用いればよい。また、第２の筒状部材２４の第３のフィルター２５と第４のフィルター２６との間に、目合いの異なるフィルターを設けた場合、各フィルター上に存在する水生生物を回収するためには、上記「（２）構成例２」手法を用いればよい。

一般に、水生生物が脆弱である場合、物理的衝撃によって水生生物の形態が破壊されたり、水生生物が死んだりすることがある。例えば、第１のフィルター１１の一部分に集中的に打ち付けられたりすると、その液体に含まれる水生生物が衝撃を受ける。なお、第２のフィルター１２は目合いが大きいため、微小な水生生物には大きな衝撃はかからない。しかしながら、上記の方法のように、容器３０に液体を貯留させれば、供給口３８から導入された液体はフィルターを通過する前に一旦貯留した液体中に落ちるため、圧力が分散される。従って、第１のフィルター１１の中に存在する水生生物や、容器３０の中に存在する水生生物に衝撃を与えることを防ぎ、第３のフィルター２５、又は第４のフィルター２６で形態を維持した水生生物を採取することが可能になる。

（ｉｉ）構成例３−２
以下の方法は、第３のフィルター、第４のフィルター、又は第５のフィルターで脆弱な水生生物を採取する際に有効である。
微小物質サンプリング装置３００を準備する方法は、上記「（ｉ）構成例３−１」に記載の通りである。
微小物質サンプリング装置３００を準備した後、微小物質サンプリング装置３００を用いて、水生生物のサンプリングを開始する。

まず、第２のフィルター１２に水生生物を含む液体を供給する。この際、第１のフィルター１１の内部に水生生物を含む液体が常に満たされているように、ポンプ３６等（供給手段）を用いて液体の供給量を調節することが望ましい。
容器３０の内部の液体が、第１のフィルター１１の半分以上が浸かる高さになるまで貯留されたら、弁３２（第１の手段）を開き、第１の流出口３１から液体を排出する。この場合、第１の流出口３１からの液体の排出量を調整しなくても、液体の高さが第１の流出口３１の高さに保たれる。この際、第１の流出口３１に第５のフィルター３９を設け、第１の流出口３１から排出された水生生物を含む液体を第５のフィルター３９に供給してもよい。また、容器３０の内部の液体が、第１のフィルター１１の半分以上が浸かる高さになるまで貯留されたら、弁３４（第２の手段）を開き、第２の流出口３３からも液体を排出してもよい。例えば、容器３０の内部の液体の高さが第１のフィルター１１の半分以上が浸かる高さになるように、第２の流出口３３からの液体の排出量を調整する。この際、第２の流出口３３に第５のフィルター３９を設け、第２の流出口３３から排出された水生生物を含む液体を第５のフィルター３９に供給してもよい。弁３２（第１の手段）及び弁３４（第２の手段）を適宜調節することによって、容器３０の内部の液体を第１の流出口３１と第２の流出口３３と両方から排出してもよい（図３ａ、ｂ）。

次に、上記「（ｉ）構成例３−１」に記載のように、コック１４が閉栓されている場合は、微小物質採取装置１０及び分離装置２０を軽く持ち上げ、手動でコック１４を開栓する。コック１４は、タイマーやコンピューター制御によって開栓してもよい。

上述の通り、一般に、水生生物が脆弱である場合、物理的衝撃によって水生生物の形態が破壊されたり、水生生物が死んだりすることがある。例えば、第１のフィルター１１の一部分に集中的に打ち付けられたりすると、その液体に含まれる水生生物が衝撃を受ける。なお、第２のフィルター１２は目合いが大きいため、微小な水生生物には大きな衝撃はかからない。しかしながら、上記の方法のように、容器３０に液体を貯留させれば、供給口３８から導入された液体はフィルターを通過する前に一旦貯留した液体中に落ちるため、圧力が分散される。従って、第１のフィルター１１の中に存在する水生生物や、容器３０の中に存在する水生生物に衝撃を与えることを防ぎ、第３のフィルター２５、第４のフィルター２６、又は第５のフィルター３９で形態を維持した水生生物を採取することが可能になる。

＝＝微小物質検出システムの構成＝＝
本発明の微小物質検出システムは、上記微小物質サンプリング装置を用いて採取した微小物質を検出するためのシステムである。
以下に、本発明にかかる微小物質の検出システム（以下、微小物質検出システムと称する）の好適な実施形態を、添付図面を参照して詳細に説明する。

図４は本発明の一実施形態として説明する微小物質検出システム６００の概略的な構成図である。
本実施形態の微小物質検出システム６００は、微小物質サンプリング装置１００、２００、又は３００、微小物質破砕装置４００、微小物質検出装置５００から構成されている。

微小物質サンプリング装置１００、２００、及び３００は、上記「微小物質サンプリング装置」に示す、水中の微小物質を採取する装置である。
微小物質破砕装置４００は、微小物質サンプリング装置１００、２００、３００によって採取された微小物質を、細かく破砕する装置である。ここで使用できる微小物質破砕装置４００は、微小物質を細かく破砕することができれば何でもよく、例えば、ホモジナイザー及び電動ミキサー等を備えていてもよい。
微小物質検出装置５００は、微小物質破砕装置４００によって破砕した微小物質を、試薬等を用いて検出するための装置である。ここで使用できる微小物質検出装置５００は特に限定されず、微小物質の種類に従い、適切に選択される。

＝＝微小物質の検出方法＝＝
以下、上記微小物質検出システム６００を用いて、微小物質サンプリング装置１００、２００、又は３００において採取された微小物質を検出する方法について説明する。ここでは、一例として、水生生物を検出する方法について詳細に述べる。

まず、微小物質サンプリング装置１００、２００、又は３００において採取された水生生物を、微小物質破砕装置４００に供給し、水生生物を破砕する（図５及び図６を参照のこと）。ここで、水生生物の破砕は、生理食塩水やリン酸バッファー中で、ホモジナイザーを用いて破砕することが好ましい。また、水生生物を破砕した後、さらに超音波処理を加えてもよい。

次に、破砕した水生生物を、微小物質検出装置５００に供給し、水生生物を検出する。水生生物は、所望の水生生物と反応するモノクローナル抗体もしくはそのフラグメント、又は、ポリクローナル抗体等を用いた免疫学的手法により検出することができる。免疫学的手法としては、ＥＩＡ法、ＥＬＩＳＡ法、ラッテクス凝集法、イムノクロマト法、ウエスタンブロット法、免疫沈降法、イムノクロマト法、免疫センサー法等が挙げられる。このような免疫学的手法は、当業者に公知の手法を用いればよい。なお、免疫学的手法に用いられる抗体としては、水生生物がムラサキイガイ付着期幼生（ペディベリジャー幼生）である場合は寄託番号ＦＥＲＭＰ−２０２２０等が、水生生物がアカフジツボ付着期幼生である場合は寄託番号ＦＥＲＭＰ−２０２７８、寄託番号ＦＥＲＭＰ−２０２７９、又は寄託番号ＦＥＲＭＰ−２０２８１が、フジツボ類の付着期幼生である場合は寄託番号ＦＥＲＭＰ−２０２８２等が挙げられる。また、マガキ付着期幼生とムラサキイガイ付着期幼生が混在する場合にも、寄託番号ＦＥＲＭＰ−２０２１７と寄託番号ＦＥＲＭＰ−２０２２０等を組み合わせることによって、両種を識別・検出することが可能である。

なお、微小物質サンプリング装置１００、２００、又は３００において採取された水生生物を、微小物質破砕装置４００に供給しないで、微小物質検出装置５００に直接供給してもよい。この場合、微小物質検出装置５００において、所望の水生生物の細胞表面抗原に反応するモノクローナル抗体もしくはそのフラグメント、又はポリクローナル抗体を用いた免疫学的手法により検出することができる。免疫学的手法としては、免疫染色法、フローサイトメトリー等が挙げられる。このような免疫学的手法は、当業者に公知の手法を用いればよい。なお、免疫学的手法に用いられる抗体としては、水生生物がムラサキイガイ付着期幼生である場合は寄託番号ＦＥＲＭＰ−２０２２０等が、水生生物がアカフジツボ付着期幼生である場合は寄託番号ＦＥＲＭＰ−２０２７８、寄託番号ＦＥＲＭＰ−２０２７９、又は寄託番号ＦＥＲＭＰ−２０２８１が、フジツボ類の付着期幼生である場合は寄託番号ＦＥＲＭＰ−２０２８２等が挙げられる。

また、各種フジツボ類付着期幼生が混在する場合にも、各種付着期幼生に特有の自家蛍光発光パターンを利用した方法（特許第０３９７２０２８号）により、種類の即時判別・検出が可能である。

＝＝本発明の検出システムを用いた応用例＝＝
本発明の微小物質検出システム６００を用いれば、所望の水生生物（例えば、ムラサキイガイ付着期幼生、アカフジツボ付着期幼生、フジツボ類の付着期幼生、マガキ付着期幼生、コペポーダ類等）を分離し、特異的に検出すること（例えば、所望の水生生物の存在の有無を確認したり、所望の水生生物を同定したり、所望の水生生物の量を測定したりすること等）が可能になる。具体的には、以下のような応用例が考えられる。

例えば、ムラサキイガイ等の二枚貝類の場合、体外受精後、Ｄ型幼生からベリコンカ幼生を経て、さらにペディベリジャー幼生へと発生が進行し、発生とともに殻も徐々に大きくなっていくが、野外での繁殖時期には、Ｄ型幼生・ベリコンカ幼生・ペディベリジャー幼生が混在することが知られている。これまで、各発生段階の幼生の出現状況を発生段階ごとに調べるためには、Ｄ型幼生用の最も目合いの細かいネットで採集した後、顕微鏡で観察し、種と発生段階を形態で分類しながら計数するか、あるいは、目合いの異なるプランクトンネットで一々別々に採取することが必要であったため、観察作業又は採取作業が非常に猥雑であった。

本装置の場合、前述のような目合いのネットを組み合わせることによって、特定種の幼生について、１回の採取作業で、発生段階ごとの選別・濃縮を同時に行うことが可能となる。したがって、目合いネットごとに濃縮・採取された幼生を観察・検出することによって、付着被害の原因となる生物が、繁殖し始めた状態か、繁殖盛期であるのか、繁殖が終わりつつあるのかを容易に把握し、早期に対策を実施することができる。同様にマガキ等の有用種の場合にも、海域における幼生の発生進行状況を把握することによって、最適な採苗時期を予測することが容易になる。

さらに、水生生物の幼生を用いた室内試験を行う場合、発生段階の揃った生理状態の良好な試験個体を多数入手する必要がある。水生生物の場合、例えばイガイ類やエビ類（クルマエビ以外）・カニ類など、重要な有害種又は有用種でありながら幼生の室内飼育に長期間を要し飼育が困難な生物種も多いのが現状である。このような生物種を用いて化学物質や水質に関する生物試験を行う場合、野外で採集した多数の試料の中から、活発に遊泳している幼生を他種プランクトンと選別しながら、発生段階ごとに顕微鏡下で丹念にピックアップし集めるという非常に煩雑で困難な作業が必要であった。
そこで、本装置を用いることによって、発生段階の揃った生理状態の良好な幼生個体を、発生段階ごとに多数選別・採集し、生物試験に供することが容易となる。

また、遺伝子解析を用いて二枚貝類やフジツボ類の幼生を検出する方法も多数研究されている（二枚貝類幼生；ＭａｒｉｎｅＢｉｏｌｏｇｙ(２０００）１３７：９５３−９６１等、フジツボ類幼生；ＭａｒｉｎｅＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ (２００６)８：１４９−１６０、特開２００７-１８９９０８等）。しかしながら、これらの方法では、付着期・付着前駆期幼生を選別していないため、発生初期幼生や卵も検出してしまい、付着予測は困難である。また、糞や組織片・脱皮殻等も検出され、生きた幼生のみを検出できないので、ＤＮＡ抽出前にある程度選別しておくことが必要となる。

そこで、検出前の試料の前処理過程として本装置を利用することによって、糞や脱皮殻及び初期幼生を排除し、付着期・付着前駆期幼生を選別採集することによって、精度の高い付着時期予測が可能となる。

これら以外にも、本装置を用いることによって、イガイ類・フジツボ類等の付着被害の主な原因種について、野外海域における幼生の発生進行状況の詳細を把握し、早期の被害予防や効率的な対策を行うことが容易になる。また、クルマエビ以外のエビ類・カニ類、イワガキなど重要な有用生物種でありながら人工飼育に長期間を要し大量種苗生産が容易でない種類についても、発生段階が揃った生理状態の良好な幼生個体を、発生段階ごとに多数採集し、中間種苗として利用することができる。

以下に、本発明を実施例によって具体的に説明する。なお、これらの実施例は、本発明を説明するためのものであって、本発明の技術的範囲を限定するものではない。

＜実施例１：簡易式微小物質サンプリング装置を用いた幼生の選別試験（野外にて実施）＞
図７に示す簡易式微小物質サンプリング装置を用いて、所望のプランクトンを採取するために、最も適切なプランクトンネットの目合いを検討した。

１．試験日及び試験場所
試験日：平成１８年１２月１１日
試験場所：姫路市妻鹿港内（兵庫県）
２．試験方法
図７に示すように、プラスチック容器（高さ３４ｃｍ、直径２３ｃｍ）の上部にプランクトンネットＮＧＧ４５（目合い４００μｍ）（図３ａの１２に相当）を装着したプランクトンネットＮＸＸ７（目合い２００μｍ）（図３ａの１１に相当）を、プラスチック容器の下部にプランクトンネットＮＸＸ１３（目合い１００μｍ）（図３ａの３９に相当）を固定した。
次に、プランクトンネットＮＧＧ４５の上部から、採水用水中ポンプを用いて妻鹿港内の海水を約６００Ｌ流してろ過した。プランクトンネットＮＧＧ４５、プランクトンネットＮＸＸ７、及びプランクトンネットＮＸＸ１３に残った幼生をそれぞれ採取し、２００ＭＭｇ^２＋溶液に入れて（麻酔して）、幼生の発生段階を調べ、その幼生の数を計測した。

３．結果
結果を表１に示す。

プランクトンネットＮＧＧ４５（目合い４００μｍ）には、紅藻類、緑藻類（切れ端）、及び貝殻片が残ったが、プランクトン類は認められなかった。一方、プランクトンネットＮＸＸ７（目合い２００μｍ）には、アメリカ・ヨーロッパフジツボのキプリス幼生１個体、ノープリウス２〜３期４個体、ノープリウス４〜５期４個体が残った。また、プランクトンネットＮＸＸ１３（目合い１００μｍ）には、ノープリウス１期１３個体、ノープリウス２〜３期１８０個体が残った。
これより、プランクトンネットＮＸＸ７（目合い２００μｍ）において、ノープリウス１〜３期は９０％以上ろ過されていることが示された。以上より、フジツボ類のキプリス幼生を採取するには、目合い２００μｍ前後のプランクトンネットが適していることが明らかになった。

＜実施例２：試作した微小物質サンプリング装置を用いた、幼生の選別試験（野外にて実施）＞
目合い２８０〜２００μｍのプランクトンネットを用いて、微小物質サンプリング装置を試作し、試作した微小物質サンプリング装置の性能及び有効性を検討した。なお、以下の実験では、姫路市妻鹿港内海域の海水だけでなく、若狭湾伊根港内海域及び大崎発電所桟橋前面海域の海水も用いた。

１．試験日及び試験場所
試験日：平成１９年２月１９日、試験場所：姫路市妻鹿港内海域（兵庫県）
試験日：平成１９年２月２０日、試験場所：若狭湾伊根港内海域（京都府）
試験日：平成１９年３月９日、試験場所：大崎発電所桟橋前面海域（広島県）
２．微小物質サンプリング装置（試作機）
図８に示すように、試作した微小物質サンプリング装置は、ハウジング（図３ａにおいて容器３０に相当）、幼生採取ネット（図３ａにおいて第１のフィルター１１に相当）、幼生分離装置（図３ａにおいて微小物質分離装置２０に相当）、分離ネット（図３ａにおいて第３のフィルター２５に相当）等を備えている。なお、具体的な設計図は、図９に示す通りである。

ここで、ハウジング（写真１）、幼生採取ネット（写真２）、幼生分離装置（写真３及び４）、及び分離ネット（写真３及び４）の仕様及び材質は、以下の通りである。
ハウジング；
材質：ポリ塩化ビニル（ＰＶＣ）六角（透明及び白色）（（有）日本プラ加）、高さ×幅：７０×３４ｃｍ
幼生採取ネット；
材質（幼生採取用）：目合い２１２μｍのナイロンネット（（株）田中三次郎商店）、直径３０ｃｍ、高さ５９ｃｍ（バルブ部を含む）
材質（ゴミ採取用）：目合い４００μｍのナイロンネット（（株）田中三次郎商店）、直径３０ｃｍ、高さ２６ｃｍ
幼生分離装置及び分離ネット；
材質（分離装置）：ポリプロピレン（ＰＰ）プラスチック（（有）日本プラ加）、高さ×幅：１０×９ｃｍ
材質（分離ネット）：目合い２８０、２２４、２１２、２００μｍのナイロンネット（（株）田中三次郎商店）４種類
３．試験方法
操作手順は以下の通りである（図３ａ及び図５を参照のこと）。
操作１；まず、ロート（図３ａにおいて漏斗状部材２１に相当）と分離ネット（図３ａにおいて第３のフィルター２５に相当）（目合い２８０、２２４、２１２、２００μｍのナイロンネット）を結合して分離装置２０を作製し、目合い２１２μｍのナイロンネット（プランクトンネットＮＧＧ７４）で作製した幼生採取ネット１１の下部に、分離装置２０を結合した。幼生採取ネット１１の上部には、目合い４００μｍのナイロンネット（プランクトンネットＮＧＧ４５）で作製したゴミ採取用ネット１２をセットし、これをハウジング３０に固定した。流出口３１に、目合い１００μｍのナイロンネット（プランクトンネットＮＸＸ１３）で作製したノープリウス採取ネット３９をセットした。

操作２；次に、ゴミ採取用ネット１２の上部から、採水用水中ポンプ３６を用いて、妻鹿港内海域、伊根港内海域、大崎発電所桟橋前面海域の海水をそれぞれ約６００Ｌ流して、幼生採取ネット１１に海水を満たした。この際、ハウジングに溜まった水の水位を、分離装置２０の上部になるように、ハウジング３０に設けられている排水バルブ３４を開いて調節した。この状態で、海水を約５００Ｌ（約２０分）ろ過した。
ろ過終了後、ゴミ採取用ネット１２を取り外し、排水バルブ３４を閉じて海水をハウジング上部まで溜めて、幼生採取ネット１１を海水に沈めて洗浄し、幼生採取ネット１１を引き上げて、幼生採取ネット１１内に存在する幼生を分離装置２０に採取した。

操作３；幼生採取ネット１１と分離装置２０を取り外した。
ゴミ採取用ネット１２、幼生採取ネット１１、及び分離ネット２５に残った幼生をそれぞれ採取し、２００ＭＭｇ^２＋溶液に入れて（麻酔して）、幼生の発生段階を調べ、その幼生の数を計測した。
なお、分離ネット２５に残った幼生は、分離装置２０をひっくり返して１５ｍｌ遠心管（Ｌａｂｃｏｎ社製）に装着し、遠心管を試験管ホルダーに固定し、ろ過海水（目合い０．５μｍ）で採取物を洗い落とすことによって、遠心管に集めた。
なお、実験を行った際の写真を図１４に示す。

４．結果
結果を表２〜４に示す。

＜姫路市妻鹿港内海域（兵庫県）＞

妻鹿港内海域において上記試験を行なったところ、プランクトンネットＮＧＧ７２（目合い２２４μｍ）、ＮＧＧ７４（目合い２１２μｍ）、ＮＸＸ７（目合い２００μｍ）にはアメリカ・ヨーロッパフジツボのキプリス幼生が、プランクトンネットＮＸＸ１３（目合い１００μｍ）にはノープリウス１〜３期が残った。この結果は、実施例１に示した簡易式微小物質サンプリング装置を使用して、アメリカ・ヨーロッパフジツボのキプリス幼生及びノープリウスを採取した結果と一致した。

＜大崎発電所桟橋前面海域（広島県）＞

また、大崎発電所桟橋前面海域において上記試験を行なったところ、プランクトンネットＮＧＧ７２（目合い２２４μｍ）、ＮＧＧ７４（目合い２１２μｍ）にはイワフジツボのキプリス幼生２個体が、プランクトンネットＮＸＸ１３（目合い１００μｍ）にはノープリウス１〜３期約４０個体が残った。なお、イワフジツボのキプリス幼生は、ＢＶ励起光照射による特異的蛍光発光分析によって確認した。

＜若狭湾伊根港内海域（京都府）＞

一方、伊根港内海域において上記試験を行なったところ、プランクトンネットＮＧＧ４５（目合い４００μｍ）及びプランクトンネットＮＧＧ６０（目合い２８０μｍ）、ＮＧＧ７２（目合い２２４μｍ）、ＮＧＧ７４（目合い２１２μｍ）、ＮＸＸ７（目合い２００μｍ）にはヒラフジツボ類のキプリス幼生はほとんど見られなかった。また、プランクトンネットＮＸＸ１３（目合い１００μｍ）にはヒラフジツボ類のキプリス幼生が平均１０個体残った。この結果は、ヒラフジツボ類のキプリス幼生のサイズが２００μｍ以下であることを示す。なお、ヒラフジツボ類のキプリス幼生は、ＢＶ励起光照射による特異的蛍光発光分析によって確認した。

以上の結果より、試作した微小物質サンプリング装置を用いれば、フジツボ類のキプリス幼生を選択的に採取できることが明らかになった。

なお、珪藻類及び檮脚類（コペポーダ類）は、様々な大きさの個体からなる種類群であるが、その中でも１５０〜３００μｍの個体が非常に多いことが知られている。上記試験において、主にプランクトンネットＮＧＧ７２（目合い２２４μｍ）、ＮＧＧ７４（目合い２１２μｍ）、ＮＸＸ７（目合い２００μｍ）に、多数の珪藻類（主にＣｏｓｃｉｎｏｄｉｓｃｕｓ）及び檮脚類が残った。ここで、珪藻類（主にＣｏｓｃｉｎｏｄｉｓｃｕｓ）はフジツボ類のキプリス幼生とサイズが類似していることが知られている。また、珪藻類の発生時期は、アカフジツボのキプリス幼生の発生時期よりも早いことが知られている。従って、珪藻類又はアカフジツボのキプリス幼生の発生時期のピークと、プランクトンネットの目合いと、を組み合わせることによって、所望の珪藻類及び檮脚類を採取することが可能になることが示唆された。

＜実施例３：微小物質サンプリング装置を用いた、８０％エタノール固定後のアカフジツボのキプリス幼生の選別試験（室内にて実施）＞
微小物質サンプリング装置を用いて、８０％エタノール固定後のアカフジツボのキプリス幼生を選別するために、以下の実験を行なった。

１．試験日及び試験場所
試験日：平成１９年２月２７日、試験場所：株式会社セシルリサーチ生物飼育室（兵庫県）
２．微小物質サンプリング装置
実施例２に示す微小物質サンプリング装置を用いた。

３．試験方法（図５及び図１５を参照のこと）
操作１：まず、ロート２１と分離ネット２５（目合い２２４μｍのナイロンネット）を結合して分離装置２０を作製し、目合い２２４μｍのナイロンネット（プランクトンネットＮＧＧ７２）で作製した幼生採取ネット１１の下部に、分離装置２０を結合した。幼生採取ネット１１の上部には、目合い４００μｍのナイロンネット（プランクトンネットＮＧＧ４５）で作製したゴミ採取用ネット１２をセットし、これをハウジング３０に固定した。流出口３１に、目合い１００μｍのナイロンネット（プランクトンネットＮＸＸ１３）で作製したノープリウス採取ネット３９をセットした。

操作２；次に、ゴミ採取用ネット１２の上部から、採水用水中ポンプ３６を用いて、アカフジツボの幼生（ノープリウス２〜３期２２２個体、ノープリウス４〜５期１３４個体、ノープリウス６期１５２個体、キプリス幼生１４６個体）を含むろ過海水（目合い０．４μｍ）を約６００Ｌ流して、幼生採取ネット１１に海水を満たした。この際、ハウジングに溜まった水の水位を、分離装置２０の上部になるように、ハウジング３０に設けられている排水バルブ３４を開いて調節した。
ろ過終了後、ゴミ採取用ネット１２を取り外し、排水バルブ３４を閉じて海水をハウジング上部まで溜めて、幼生採取ネット１１を海水に沈めて洗浄し、幼生採取ネット１１を引き上げて、幼生採取ネット１１内に存在する幼生を分離装置２０に供給した。

操作３；幼生採取ネット１１と分離装置２０を取り外した。
ゴミ採取用ネット１２、幼生採取ネット１１、及び分離ネット２５に残った幼生をそれぞれ採取し、２００ＭＭｇ^２＋溶液に入れて（麻酔して）、幼生の発生段階を調べ、その幼生の数を計測した。

なお、分離ネット２５に残った幼生は、分離装置２０をひっくり返して１５ｍｌ遠心管（Ｌａｂｃｏｎ社製）に装着し、遠心管を試験管ホルダーに固定し、ろ過海水（目合い０．５μｍ）で採取物を洗い落とすことによって、遠心管に集めた。

４．結果
結果を表５に示す。

上記試験を行なったところ、プランクトンネットＮＧＧ７２（目合い２２４μｍ）にはアカフジツボのキプリス幼生１４６個体中１２０個体が、プランクトンネットＮＸＸ１３（目合い１００μｍ）にはノープリウス２〜３期２２２個体中２０３個体が残った。一方、プランクトンネットＮＸＸ１３（目合い１００μｍ）にはキプリス幼生、及びノープリウス後期は全く残らなかった。

また、プランクトンネットＮＧＧ４５（目合い４００μｍ）にはノープリウス４〜５期１３４個体中１２０個体が、ノープリウス６期１５２個体中１２８個体が、さらにキプリス幼生１４６個体中１９個体が残った。これより、ノープリウス後期は、４００μｍを越える個体が多く、ほとんどの個体がプランクトンネットＮＸＸ７（目合い２２４μｍ）、又はプランクトンネットＮＸＸ１３（目合い１００μｍ）に届かないことが示された（表１を参照のこと）。

さらに、ノープリウス後期２０個体の体長、体幅、及び体高を測定したところ、これらの個体の体長は約７５０μｍ、体幅は約５２０μｍ、また、体高は約３６０μｍであった。これより、ノープリウス後期を採取する場合には、プランクトンネットの目合いを５００〜６００μｍ前後に設定すればよいことが分かった。

＜実施例４：微小物質サンプリング装置を用いて採取した幼生の検出＞
微小物質サンプリング装置を用いて採取した幼生を検出するために、以下の実験を行った。なお、採取した幼生の検出には、イムノクロマト法を用いた。

１．テストプレートの作製
まず、イムノクロマト法に用いる、テストプレートを作製した。なお、テストプレートは、ａ．試料滴下部、ｂ．試料含有部、ｃ．展開部、ｄ．吸収パッド、ｅ．測定項目記載位置、ｆ．テストライン出現位置（試薬滴下部より約３０ｍｍ）、ｇ．コントロールライン出現位置（試薬滴下部より約３８ｍｍ）からなる。
テストプレートのｂ．試料含有部に金コロイド標識抗アカフジツボモノクローナル抗体（寄託番号：ＦＥＲＭＰ−２０２８１）を吸収させ、ｆ．テストライン出現位置に抗アカフジツボモノクローナル抗体（寄託番号：ＦＥＲＭＰ−２０２８１）を塗布した。また、テストプレートのｇ．コントロールライン出現位置に市販の抗マウスＩｇＧモノクローナル抗体（（株）フナコシ）を塗布した。

２．微小物質サンプリング装置を用いて採取した幼生の検出
実施例２に記載の方法を用いて、微小物質サンプリング装置を用いて幼生を採取し、遠心管に集めた（図５を参照のこと）。
次に、簡易型ホモジナイザー（（有）アイ・エス・オー及びアズワン（株））を用いて、遠心管内に存在する幼生を氷上にて破砕し、約５分間、その遠心管を静置した。作製したテストプレートのａ．試料滴下部に、上清１００μｌを滴下し、約１０分間テストプレートを静置した（図６を参照のこと）。
ここで、イムノクロマト法の原理としては、以下の通りである。テストプレートの試料滴下部に試料溶液（上清）を滴下すると、試薬含有部に含まれる金コロイド標識抗アカフジツボ抗体が溶解し、試料溶液中のアカフジツボキプリス幼生由来の抽出物と複合体を形成する。これらの複合体は展開部を毛細管現象により移動し、テストライン出現位置に固定化された抗アカフジツボ抗体に捕捉され、金コロイドによる赤紫色のラインが出現する。一方、試料溶液中のアカフジツボ幼生の有無に関わらず、余剰の金コロイド標識抗体が展開部をさらに移動し、コントロールライン出現位置に固定化された抗マウスＩｇＧ抗体に捕捉され、赤紫色のラインを形成する。このラインの有無により、試料溶液が展開部を正常に移動したことを確認できる。

３．結果
図６の左側に示すように、アカフジツボのキプリス幼生が存在する場合は、ｆ．テストライン出現位置に、赤紫色のラインが認められた。一方、図６の右側に示すように、アカフジツボのキプリス幼生が存在しない場合は、ｆ．テストライン出現位置に、ラインは認められなかった。

以上より、微小物質サンプリング装置を用いて採取したアカフジツボキプリス幼生は、本発明の検出方法を用いることによって同定できることが明らかになった。

本発明の一実施形態における微小物質サンプリング装置の構成を示す模式図である。本発明の一実施形態における微小物質サンプリング装置の構成を示す模式図である。本発明の一実施形態における微小物質サンプリング装置の構成を示す模式図である。本発明の一実施形態における微小物質サンプリング装置の構成を示す模式図である。本発明の一実施形態における微小物質検出システムの構成を示す図である。本発明の一実施形態において、微小物質サンプリング装置の操作手順を示す図である。本発明の一実施形態において、試作した微小物質サンプリング装置を用いて採取した幼生の、検出操作手順及び検出結果を示す図である。本発明の一実施形態における、簡易式微小物質サンプリング装置の構成を示す模式図である。本発明の一実施形態において、試作した微小物質サンプリング装置の写真である。本発明の一実施形態において、試作した微小物質サンプリング装置の設計図である。本発明の一実施形態において、試作した微小物質サンプリング装置の設計図である。本発明の一実施形態において、試作した微小物質サンプリング装置の設計図である。本発明の一実施形態において、試作した微小物質サンプリング装置の設計図である。本発明の一実施形態において、試作した微小物質サンプリング装置の設計図である。本発明の一実施形態において、試作した微小物質サンプリング装置を用いて実験した時の、現場の写真である。本発明の一実施形態において、試作した微小物質サンプリング装置を用いて実験した時の、現場の写真である。本発明の一実施形態において、試作した微小物質サンプリング装置の詳細を示す写真である。本発明の一実施形態において、試作した微小物質サンプリング装置の詳細を示す写真である。

符号の説明

１０微小物質採取装置１１第１のフィルター
１２第２のフィルター１３第１の筒状部材
１４コック１５第１の開口部
１６第２の開口部
２０分離装置２１漏斗状部材
２２第３の開口部２３第４の開口部
２４第２の筒状部材２５第３のフィルター
２６第４のフィルター２７第５の開口部
２８第６の開口部２９押さえリング
３０容器３１第１の流出口
３２弁（第１の手段）３３第２の流出口
３４弁（第２の手段）３５第７の開口部
３６ポンプ（供給手段）３７弁（第３の手段）
３８供給口３９第５のフィルター
１００微小物質サンプリング装置
２００微小物質サンプリング装置
３００微小物質サンプリング装置
４００微小物質破砕装置
５００微小物質検出装置
６００微小物質検出システム

Claims

水中の微小物質を採取するための装置であって、
第１の開口部と、前記第１の開口部より狭い第２の開口部を有し、前記第１の開口部から前記第２の開口部に向けて次第に断面寸法が小さくなるように構成された第１のフィルターと、
前記第１の開口部に装着され、前記第１のフィルターよりも目の粗い第２のフィルターと、
前記第２の開口部に装着され、開閉可能なコックが設けられた第１の筒状部材と、
第３の開口部と、前記第３の開口部より広い第４の開口部を有し、前記第３の開口部から前記第４の開口部に向けて次第に断面寸法が大きくなるように構成された漏斗状部材と、
第５の開口部と第６の開口部を有する第２の筒状部材と、
前記第２の筒状部材の開口部又は内部に設けられた第３のフィルターと、
を備え、
前記第３の開口部は、前記第１の筒状部材を通じて前記第２の開口部に着脱可能であり、
前記第５の開口部は、前記漏斗状部材を通じて前記第４の開口部に着脱可能であること、
を特徴とする微小物質サンプリング装置。
前記第２の筒状部材の開口部又は内部に複数のフィルターを備えることを特徴とする請求項１に記載の微小物質サンプリング装置。
前記第５の開口部に第３のフィルターを備え、前記第６の開口部に第４のフィルターを備えることを特徴とする請求項１又は２に記載の微小物質サンプリング装置。
前記微小物質が、微小水生生物の幼生であって、
前記第３のフィルターが、２０〜３００μｍのメッシュからなること、
を特徴とする請求項１〜３のいずれか１項に記載の微小物質サンプリング装置。
前記微小物質が、フジツボ類のキプリス幼生であって、
前記第３のフィルターが、１４０〜２４０μｍのメッシュからなること、
を特徴とする請求項４に記載の微小物質サンプリング装置。
前記微小物質が、イガイ類のペディベリジャー幼生であって、
前記第３のフィルターが、１２０〜２２０μｍのメッシュからなること、
を特徴とする請求項４に記載の微小物質サンプリング装置。
前記微小物質が、クダウミヒドラ類のアクチヌラ幼生であって、
前記第３のフィルターが、２００〜３００μｍのメッシュからなること、
を特徴とする請求項４に記載の微小物質サンプリング装置。
前記微小物質が、フジツボ類のキプリス幼生又はフジツボ類のノープリウス幼生であって、
前記第３のフィルターが、１４０〜２４０μｍのメッシュからなり、
前記第４のフィルターが、１００〜１４０μｍのメッシュからなること、
を特徴とする請求項３に記載の微小物質サンプリング装置。
前記微小物質が、イガイ類のＤ型幼生、イガイ類のべリコンカ幼生、又はイガイ類のペディベリジャー幼生であって、
前記第３のフィルターが、１２０〜２２０μｍのメッシュからなり、
前記第４のフィルターが、２０〜１２０μｍのメッシュからなること、
を特徴とする請求項３に記載の微小物質サンプリング装置。
第７の開口部を有し、前記第７の開口部の辺縁と前記第１の開口部が着脱可能であって、前記第７の開口部の辺縁と前記第１の開口部が密着した場合に前記第１のフィルター、前記第１の筒状部材、及び前記漏斗状部材を内部に収容可能な容器と、
前記容器に設けられ、前記容器内の液体を外部に流出させるための第１の流出口と、
を備え、
前記第１の流出口は、前記第７の開口部の辺縁と前記第１の開口部が密着し、前記第１のフィルター、前記第１の筒状部材、前記漏斗状部材、並びに、前記第３のフィルター又は前記第３のフィルター及び前記第４のフィルターを備えた第２の筒状部材を前記容器内部に収容したとき、前記第１のフィルターの半分以上の高さになるように前記容器に設けられていること、
を特徴とする請求項１〜９のいずれか１項に記載の微小物質サンプリング装置。
前記第１の流出口に設けられ、前記容器内の液体を、前記容器の外部に排出する流量を調節する第１の手段を備えることを特徴とする請求項１０に記載の微小物質サンプリング装置。
前記容器に設けられ、前記容器内の液体を外部に流出させるための第２の流出口と、
前記第２の流出口に設けられ、前記容器内の液体を、前記容器の外部に排出する流量を調節する第２の手段と、
を備えることを特徴とする請求項１０又は１１に記載の微小物質サンプリング装置。
前記第２のフィルターに微小物質を含む液体を供給する供給手段と、
前記供給手段に設けられ、前記第２のフィルターに供給する液体の流量を調節する第３の手段と、
を備えることを特徴とする請求項１０〜１２のいずれか１項に記載の微小物質サンプリング装置。
前記第１の流出口、前記第２の流出口、又は前記第１の流出口及び前記第２の流出口の両方に装着され、前記第１のフィルターよりも目の細かい第５のフィルターを備えることを特徴とする請求項１０〜１３のいずれか１項に記載の微小物質サンプリング装置。
前記漏斗状部材と前記第２の筒状部材とが、一体形成されていることを特徴とする請求項１〜１４のいずれか１項に記載の微小物質サンプリング装置。
請求項１に記載の微小物質サンプリング装置を使用する方法であって、
前記第１の筒状部材に設けられたコックを閉じる工程と、
前記第１のフィルターに前記第１の開口部から微小物質を含む液体を供給する工程と、
前記第１のフィルターを液体中に浸して、前記第１のフィルターに捕捉された微小物質を前記第２の開口部付近に溜める工程と、
前記微小物質サンプリング装置を液体中から取り出す工程と、
前記コックを開いて、前記第２の開口部付近に溜めた微小物質を前記第２の開口部から排出する工程と、
前記第１のフィルターの目合いと同じ目合いの第３のフィルター、又は、前記第１のフィルターの目合いよりも細かい第３のフィルターに、前記第２の開口部から排出した前記微小物質を含む液体を供給する工程と、
前記第３のフィルターに捕捉された微小物質を回収する工程と、
を包含することを特徴とする使用方法。
前記第３のフィルターの目合いよりも細かい目合いの第４のフィルターに、前記第３のフィルターを通過した液体を供給する工程と、
前記第４のフィルターに捕捉された微小物質を回収する工程と、
を包含することを特徴とする請求項１６に記載の使用方法。
請求項１０に記載の微小物質サンプリング装置を使用する方法であって、
前記第１の筒状部材に設けられたコックを開く工程と、
前記第１のフィルターに前記第１の開口部から微小物質を含む液体を供給する工程と、
前記第１のフィルターを前記容器から取り出す工程と、
前記第１の筒状部材と前記漏斗状部材とを分離する、又は、前記漏斗状部材と前記第２の筒状部材とを分離する工程と、
前記第３のフィルターに捕捉された微小物質を回収する工程と、
を包含することを特徴とする使用方法。
請求項１２に記載の微小物質サンプリング装置を使用する方法であって、
前記第１の筒状部材に設けられたコックを開く工程と、
前記第１のフィルターに前記第１の開口部から微小物質を含む液体を供給する工程と、
前記第２の手段を用いて前記第２の流出口からの液体の流出量を調整することにより、前記容器に前記液体を所定量維持する工程と、
前記第１のフィルターを前記容器から取り出す工程と、
前記第１の筒状部材と前記漏斗状部材とを分離する、又は、前記漏斗状部材と前記第２の筒状部材とを分離する工程と、
前記第３のフィルターに捕捉された微小物質を回収する工程と、
を包含することを特徴とする使用方法。
第４のフィルターに、前記第３のフィルターを通過した液体を供給する工程を包含し、
前記第１の筒状部材から前記第４のフィルターを取り外す工程と、
前記第４のフィルターに捕捉された微小物質を回収する工程と、
を包含することを特徴とする請求項１８又は１９に記載の使用方法。
第５のフィルターに、前記第１のフィルターを通過した液体、前記第３のフィルターを通過した液体、又は前記第４のフィルターを通過した液体を供給する工程と、
前記第５のフィルターに捕捉された微小物質を回収する工程と、
を包含することを特徴とする請求項２０に記載の使用方法。
ポンプを用いて、前記第１の開口部に微小物質を含む前記液体を供給することを特徴とする請求項１６〜２１のいずれか１項に記載の使用方法。
前記微小物質が、フジツボ類のキプリス幼生、イガイ類のペディベリジャー幼生、又はクダウミヒドラ類のアクチヌラ幼生であることを特徴とする請求項１６〜２２のいずれか１項に記載の使用方法。
請求項１〜１５のいずれか１項に記載の水中の微小物質を採取する微小物質サンプリング装置と、
前記微小物質サンプリング装置により得られた微小物質を検出する微小物質検出装置と、
を備えることを特徴とする微小物質検出システム。
前記微小物質が水生生物であって、
前記微小物質検出装置は、前記水生生物に特異的に反応する抗体を用いて、前記水生生物を検出する手段を備えること、
を特徴とする請求項２４に記載の微小物質検出システム。
前記水生生物が、フジツボ類のキプリス幼生、イガイ類のペディベリジャー幼生、又はクダウミヒドラ類のアクチヌラ幼生であることを特徴とする請求項２５に記載の微小物質検出システム。
さらに、前記微小物質サンプリング装置により得られた微小物質を破砕する微小物質破砕装置を備えることを特徴とする請求項２４〜２６のいずれか１項に記載の微小物質検出システム。