JP4855413B2 - 核酸を増幅するための組成物 - Google Patents
核酸を増幅するための組成物 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4855413B2 JP4855413B2 JP2007542160A JP2007542160A JP4855413B2 JP 4855413 B2 JP4855413 B2 JP 4855413B2 JP 2007542160 A JP2007542160 A JP 2007542160A JP 2007542160 A JP2007542160 A JP 2007542160A JP 4855413 B2 JP4855413 B2 JP 4855413B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- composition
- nucleic acid
- pvp
- amplification
- pcr
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
Description
用語「緩衝化された組成物」は、組成物のpHが緩衝液の存在によって制御されることを意味することが意図される。緩衝化された組成物は、標準的な緩衝化生理食塩水(例えば、トリス−(ヒドロキシメチル)アミノメタン(TRIS(登録商標))塩、好ましくは塩酸塩または酢酸塩)を水中に、5mM〜500mM、好ましくは7mM〜400mMのTRIS(登録商標)の濃度を達成するように含む)であり得る。
組成物は、少なくとも1つの増幅に必要とされる酵素を含む。それはDNAポリメラーゼ(例えば、Taq DNAポリメラーゼ、VENT(登録商標)、DEEPVENT(登録商標)、Pfu、PwoまたはTth)であり得る。それはまた、「ホットスタート」Taq ポリメラーゼであり得る。その酵素部位は低温において免疫反応(EP 592 035)、化学反応(US 5,677,152;US 5,773,258)またはイオン性相互作用によってブロックされ得る。これら酵素の全ては市販されている。適切な場合、逆転写酵素(例えば、RNaseH活性を有する逆転写酵素)が使用され得る。他の酵素が(例えば、UDG(ウラシルDNAグリコシラーゼ))が添加され得る。特に易熱性UDG酵素が使用され得る。
デオキシヌクレオチド3リン酸(dNTP)が、好ましくは作業濃度より少なくとも5倍高い濃度で提供される。これは各dNTPが、好ましくは0.3mM〜75mMの間で使用されることを意味する。dNTPはデオキシアデノシン3リン酸(dATP)、デオキシグアノシン3リン酸(dGTP)、デオキシシチジン3リン酸(dCTP)およびデオキシチミジン3リン酸(dTTP)を含む。好ましくは、これら4つのdNTP(dATP、dCTP、dGTP、dTTP)は、本発明の組成物において使用される。他のdNTP(例えば、デオキシウリジン3リン酸(dUTP)およびdNTPアナログならびにdNTPコンジュゲート)もまた使用され得、そして本明細書において使用される用語「dNTP」に含まれる。
代表的には、オリゴヌクレオチドプライマーは一般に、12〜25ヌクレオチドの間の長さである。しかし、12ヌクレオチド未満または25ヌクレオチド超の長さのプライマーも使用され得る。プライマーの長さは、本発明の実行にとって重要ではない。一般に、オリゴヌクレオチドプライマーは化学的に合成される。オリゴヌクレオチドプライマーは、塩基A、T、G、CもしくはU、または塩基アナログ(例えば、イノシンもしくはPNA(ペプチド核酸))から構成され得る。
ヌクレオチドプローブは、8〜40ヌクレオチドの長さを含み得る。プローブの長さは本発明の使用にとって重要ではない。代表的には、プローブは、プローブがハイブリダイズする標的配列を捕獲または検出するために使用される。
本発明において使用され得るポリオールは、直鎖状、分枝状または環状構造を有する。最も適切なポリオールは、グリセロール、ソルビトールまたはペンタエリトリトールを含む。他のポリオール(例えば、イノシトール、ズルシトール、マンニトール、プロピレングリコールまたはエチレングリコール)およびその誘導体もまた使用され得る。ポリオールの組み合わせもまた使用され得る。
組成物は、濃縮された形態で、核酸増幅に必要とされる試薬を含む。増幅を開始するのに必要とされる唯一のさらなる工程は、それを増幅されるべき核酸サンプルと接触させる前または後のこの組成物の希釈である。
(i)上記で規定する濃縮された組成物を、核酸の増幅に適切な緩衝化生理食塩水中で希釈する工程;
(ii)増幅されるべき核酸のサンプルを、工程(i)において希釈された組成物の所望の容量と接触させる工程。
(i1)濃縮された組成物を容器中に分注し、そしてこの形態で貯蔵する工程;
(i2)使用時に緩衝化生理食塩水を添加する工程;
(ii)増幅されるべき核酸のサンプルを、工程(i2)において希釈された組成物と接触させる工程。
(i)増幅されるべき核酸のサンプルを、核酸の増幅に適切な緩衝化生理食塩水中に混合する工程;
(ii)工程(i)において得られた混合物を、上記で規定する濃縮された組成物の所望の容量に添加する工程。
本発明はまた、上記で規定する濃縮された組成物を含む少なくとも1つの容器、および所望によりキットの使用のための説明書を含む、核酸を増幅および/または検出するためのキットを提供する。他のキットは、上記で規定する濃縮された組成物を含む第1の容器、および上記で規定する緩衝化生理食塩水を含む第2の容器を含み得る。
実施例1:
この実施例は、リアルタイムPCR用の混合物に対するグリセロール、ソルビトール、ペンタエリトリトールおよびイノシトールの安定化効果を示す。
ポリオールなし:混合物1、
6.8Mのグリセロール(Prolabo):混合物2、
750mMのイノシトール(Fluka):混合物3、
530mMのペンタエリトリトール(Merck):混合物4、
1.5Mのソルビトール(Sigma):混合物5。
この実施例は、リアルタイムPCR用の混合物に対するグリセロールおよびPVP−10の安定化効果を実証する。
−PVPもpolyolもなし:混合物6、
−0.3MのPVP−10(sigma):混合物7、
−6.5Mのグリセロール(Prolabo):混合物8、
−6.5Mのグリセロールおよび0.3MのPVP−10:混合物9
−5Mのグリセロールおよび0.3MのPVP−10:混合物10。
配列1をFamプローブによって検出し、配列2をTamraプローブによって検出し、そして配列3をAtto−590プローブによって検出する。
この実施例は、3つの異なる温度(37℃、20℃および4℃)において保存される同一の組成物の安定性を比較する。
Cayouette M, Sucharzuk A, Moores J, Tyagi S, and Kramer FR (1999) Using molecular beacons to monitor PCR product formation. Strategies Newsl. 12:85−88。
−Fahy et al. (1991) PCR Meth. Appl., 1, 25−33
−Kwoh et al. (1989) PNAS, 86, 1173−1177
−Saiki et al. (1988), Science, 239:487
−Tyagi S and Kramer FR (1996) Nature Biotechnol., 16, 303−308
−Walker et al. (1992) P.N.A.S, 89, 392−396
Claims (25)
- 少なくとも1つのポリオールおよび/またはポリビニルピロリドン(PVP)の存在下で、少なくとも1つのdNTP、少なくとも1つの増幅に必要とされる酵素、少なくとも1つのオリゴヌクレオチドプライマー、および少なくとも1つの蛍光ヌクレオチドプローブを含む、核酸を増幅するための濃縮および緩衝化された液体組成物であって、核酸増幅前に、希釈剤および増幅されるべき核酸サンプルの添加のみを必要とする、濃縮された使用準備済みの反応混合物である組成物。
- ポリオールおよびPVPを含む、請求項1記載の組成物。
- マグネシウム塩またはマンガン塩も含む、請求項1または2記載の組成物。
- ポリオールがグリセロール、ソルビトール、イノシトールおよびペンタエリトリトールから選択される、請求項1〜3のいずれか1項記載の組成物。
- ポリオールおよび/またはPVPの存在下で、dATP、dCTP、dGTP、およびdTTPまたはdUTPの内1つ、少なくとも1つのPCRに必要とされる酵素、少なくとも2つのオリゴヌクレオチドプライマー、ならびに少なくとも1つの蛍光ヌクレオチドプローブを含む、PCRによって核酸を増幅するための、請求項1〜4のいずれか1項記載の組成物。
- ポリオールおよび/またはPVPの存在下で、dATP、dCTP、dGTP、およびdTTPまたはdUTPの内1つ、少なくとも1つのRT−PCRに必要とされる酵素、少なくとも2つのオリゴヌクレオチドプライマー、ならびに少なくとも1つの蛍光ヌクレオチドプローブを含む、RT−PCRによって核酸を増幅するための、請求項1〜4のいずれか1項記載の組成物。
- 少なくとも5Mのグリセロールを含む、請求項4記載の組成物。
- 少なくとも1Mのソルビトールを含む、請求項4記載の組成物。
- 少なくとも500mMのイノシトールを含む、請求項4記載の組成物。
- 少なくとも250mMのペンタエリトリトールを含む、請求項4記載の組成物。
- PVPがPVP−10である、請求項1〜10のいずれか1項記載の組成物。
- 少なくとも30mMのPVP−10を含む、請求項11記載の組成物。
- 以下の工程を包含する、核酸を増幅するための完全反応混合物を調製する方法:
(i)請求項1〜12のいずれか1項記載の濃縮された組成物を、核酸の増幅に適切な緩衝化生理食塩水中で希釈する工程;
(ii)増幅されるべき核酸のサンプルを、工程(i)において希釈された組成物の所望の容量と接触させる工程。 - 以下の工程を包含する、核酸を増幅するための完全反応混合物を調製する方法:
(i) 増幅されるべき核酸のサンプルを、核酸の増幅に適切な緩衝化生理食塩水中に混合する工程;
(ii)工程(i)において得られた混合物を、請求項1〜12のいずれか1項記載の濃縮された組成物の所望の容量に添加する工程。 - 請求項13または14記載の工程(i)および(ii)、ならびに(iii)サンプル中に存在する核酸を増幅するための反応を開始する工程であって、ここで増幅はプローブによって保有される蛍光標識によって検出可能である、工程、を包含する核酸の増幅方法。
- リアルタイムRT−PCRである、請求項15記載の増幅方法。
- リアルタイムPCRである、請求項15記載の増幅方法。
- 請求項1〜12のいずれか1項記載の濃縮された組成物を含む少なくとも1つの容器を含む、核酸を増幅および/または検出するためのキット。
- 請求項1〜12のいずれか1項記載の濃縮された組成物を含む第1の容器、および核酸の増幅に適切な緩衝化生理食塩水を含む第2の容器を含む、核酸を増幅および/または検出するためのキット。
- 緩衝化生理食塩水が、少なくとも8mMの濃度のTRIS、少なくとも8mMの濃度のカリウム塩またはナトリウム塩、少なくとも5mMの濃度のアンモニウム塩、および少なくとも0.8mMの濃度のマグネシウム塩またはマンガン塩から選択される少なくとも1つの成分を含み、ここで成分は単独でまたは混合物として使用される、請求項19記載のキット。
- 液体組成物中の酵素および蛍光ヌクレオチドプローブの両方を安定化するための、ポリオールおよび/またはポリビニルピロリドン(PVP)の使用であって、該液体組成物が核酸を増幅するための濃縮された使用準備済みの反応混合物であるところの、使用。
- ポリオールおよび/またはPVPがdNTPも安定化する、請求項21記載の使用。
- 液体組成物が、少なくとも1つのdNTP、少なくとも1つの増幅に必要とされる酵素、少なくとも1つのオリゴヌクレオチドプライマー、および少なくとも1つの蛍光ヌクレオチドプローブを含む核酸を増幅するための濃縮および緩衝化された組成物である、請求項21または22記載の使用。
- ポリオールがグリセロール、ソルビトール、イノシトールおよびペンタエリトリトールから選択される、請求項21〜23のいずれか1項記載の使用。
- PVPがPVP−10である、請求項21〜23のいずれか1項記載の使用。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
FR0412395A FR2878254B1 (fr) | 2004-11-22 | 2004-11-22 | Composition pour l'amplification d'acides nucleiques |
FR0412395 | 2004-11-22 | ||
PCT/IB2005/003503 WO2006054172A1 (en) | 2004-11-22 | 2005-11-22 | Composition for amplifying nucleic acids |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2008520232A JP2008520232A (ja) | 2008-06-19 |
JP4855413B2 true JP4855413B2 (ja) | 2012-01-18 |
Family
ID=34982232
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2007542160A Expired - Fee Related JP4855413B2 (ja) | 2004-11-22 | 2005-11-22 | 核酸を増幅するための組成物 |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20080020396A1 (ja) |
EP (1) | EP1815013B1 (ja) |
JP (1) | JP4855413B2 (ja) |
AT (1) | ATE493512T1 (ja) |
AU (1) | AU2005305599B2 (ja) |
CA (1) | CA2584847C (ja) |
DE (1) | DE602005025680D1 (ja) |
DK (1) | DK1815013T3 (ja) |
ES (1) | ES2355191T3 (ja) |
FR (1) | FR2878254B1 (ja) |
PT (1) | PT1815013E (ja) |
WO (1) | WO2006054172A1 (ja) |
Families Citing this family (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007081841A2 (en) * | 2006-01-06 | 2007-07-19 | Stratagene California | Reaction buffer composition for nucleic acid replication with packed dna polymerases |
US20130266942A1 (en) * | 2012-04-06 | 2013-10-10 | Geneohm Sciences Cananda, Inc. | Sequences for detection and identification of methicillin-resistant staphylococcus aureus (mrsa) of mrej type xxi |
JP6225623B2 (ja) * | 2013-10-08 | 2017-11-08 | 東洋紡株式会社 | メチシリン耐性遺伝子の検出方法 |
WO2015053061A1 (ja) * | 2013-10-08 | 2015-04-16 | 東洋紡株式会社 | メチシリン耐性遺伝子の検出方法および黄色ブドウ球菌の検出方法 |
JP6852267B2 (ja) * | 2016-03-16 | 2021-03-31 | 東洋紡株式会社 | 核酸検出反応液中のプローブの安定化方法 |
GB201611469D0 (en) * | 2016-06-30 | 2016-08-17 | Lumiradx Tech Ltd | Improvements in or relating to nucleic acid amplification processes |
CN106713485B (zh) * | 2017-01-11 | 2020-08-04 | 杨立群 | 云计算移动终端 |
TWI754652B (zh) * | 2017-07-10 | 2022-02-11 | 英商盧米瑞德克斯英國有限公司 | 核酸擴增方法中或相關之改良 |
GB2569965A (en) | 2018-01-04 | 2019-07-10 | Lumiradx Uk Ltd | Improvements in or relating to amplification of nucleic acids |
KR102106040B1 (ko) * | 2018-12-05 | 2020-05-04 | 한국과학기술원 | 자가혈당측정기를 활용한 표적핵산 검출방법 |
CN109536587A (zh) * | 2018-12-31 | 2019-03-29 | 吴江近岸蛋白质科技有限公司 | 一种高效的多重荧光定量pcr试剂盒及其制备方法 |
JP2020115777A (ja) * | 2019-01-23 | 2020-08-06 | 東洋紡株式会社 | 改良された核酸検出方法 |
CN112111563A (zh) * | 2020-10-29 | 2020-12-22 | 上海思路迪生物医学科技有限公司 | 一种冷藏保存预混试剂盒及使用方法 |
CN116179656B (zh) * | 2022-12-09 | 2024-04-09 | 南京诺唯赞生物科技股份有限公司 | 一种qPCR扩增反应液及用途 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0838199A (ja) * | 1994-04-18 | 1996-02-13 | Becton Dickinson & Co | 核酸増幅の蛍光偏光検出方法 |
JPH11225799A (ja) * | 1997-11-04 | 1999-08-24 | Becton Dickinson & Co | 蛍光を利用した検出アッセイとそのためのキット |
US20020009738A1 (en) * | 2000-04-03 | 2002-01-24 | Houghton Raymond L. | Methods, compositions and kits for the detection and monitoring of breast cancer |
US20040121338A1 (en) * | 2002-12-19 | 2004-06-24 | Alsmadi Osama A. | Real-time detection of rolling circle amplification products |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
IL104470A0 (en) * | 1992-01-21 | 1993-05-13 | Cryopharm Corp | Process for freezing cells and cell like materials and compositions prepared thereby |
US5565339A (en) * | 1992-10-08 | 1996-10-15 | Hoffmann-La Roche Inc. | Compositions and methods for inhibiting dimerization of primers during storage of polymerase chain reaction reagents |
JP3062250B2 (ja) * | 1994-03-10 | 2000-07-10 | ジェン−プローブ・インコーポレイテッド | イオン性界面活性剤による、酵素により媒介される反応に対する阻害の抑制方法 |
US5556771A (en) * | 1995-02-10 | 1996-09-17 | Gen-Probe Incorporated | Stabilized compositions of reverse transcriptase and RNA polymerase for nucleic acid amplification |
AU702896B2 (en) * | 1995-09-21 | 1999-03-11 | Becton Dickinson & Company | Detection of nucleic acids in cells by thermophilic strand displacement amplification |
DE60022541T2 (de) * | 1999-07-23 | 2006-06-14 | Gen Probe Inc | Polynukleotid- amplifikationsverfahren |
US6300073B1 (en) * | 1999-10-01 | 2001-10-09 | Clontech Laboratories, Inc. | One step RT-PCR methods, enzyme mixes and kits for use in practicing the same |
-
2004
- 2004-11-22 FR FR0412395A patent/FR2878254B1/fr not_active Expired - Fee Related
-
2005
- 2005-11-22 EP EP05810094A patent/EP1815013B1/en not_active Not-in-force
- 2005-11-22 JP JP2007542160A patent/JP4855413B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2005-11-22 US US11/791,163 patent/US20080020396A1/en not_active Abandoned
- 2005-11-22 WO PCT/IB2005/003503 patent/WO2006054172A1/en active Application Filing
- 2005-11-22 AU AU2005305599A patent/AU2005305599B2/en not_active Ceased
- 2005-11-22 PT PT05810094T patent/PT1815013E/pt unknown
- 2005-11-22 ES ES05810094T patent/ES2355191T3/es active Active
- 2005-11-22 AT AT05810094T patent/ATE493512T1/de not_active IP Right Cessation
- 2005-11-22 DK DK05810094.2T patent/DK1815013T3/da active
- 2005-11-22 DE DE602005025680T patent/DE602005025680D1/de active Active
- 2005-11-22 CA CA2584847A patent/CA2584847C/en not_active Expired - Fee Related
-
2014
- 2014-03-13 US US14/207,914 patent/US20140287418A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0838199A (ja) * | 1994-04-18 | 1996-02-13 | Becton Dickinson & Co | 核酸増幅の蛍光偏光検出方法 |
JPH11225799A (ja) * | 1997-11-04 | 1999-08-24 | Becton Dickinson & Co | 蛍光を利用した検出アッセイとそのためのキット |
US20020009738A1 (en) * | 2000-04-03 | 2002-01-24 | Houghton Raymond L. | Methods, compositions and kits for the detection and monitoring of breast cancer |
US20040121338A1 (en) * | 2002-12-19 | 2004-06-24 | Alsmadi Osama A. | Real-time detection of rolling circle amplification products |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU2005305599B2 (en) | 2011-02-17 |
JP2008520232A (ja) | 2008-06-19 |
WO2006054172A1 (en) | 2006-05-26 |
FR2878254A1 (fr) | 2006-05-26 |
EP1815013B1 (en) | 2010-12-29 |
EP1815013A1 (en) | 2007-08-08 |
US20140287418A1 (en) | 2014-09-25 |
AU2005305599A1 (en) | 2006-05-26 |
US20080020396A1 (en) | 2008-01-24 |
PT1815013E (pt) | 2011-02-22 |
DE602005025680D1 (de) | 2011-02-10 |
CA2584847C (en) | 2013-09-03 |
CA2584847A1 (en) | 2006-05-26 |
ATE493512T1 (de) | 2011-01-15 |
DK1815013T3 (da) | 2011-03-14 |
ES2355191T3 (es) | 2011-03-23 |
FR2878254B1 (fr) | 2010-08-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4855413B2 (ja) | 核酸を増幅するための組成物 | |
US11447821B2 (en) | Nucleic acid amplification and testing | |
JP5680078B2 (ja) | ライゲーションに基づく核酸の正規化した定量化方法 | |
EP2722403B1 (en) | Method for preventing high molecular weight products during amplification | |
NZ543940A (en) | Determining the ratio of genomic DNA and mtDNA or their related gene products with regards to determining the stage of an asymptomatic disease | |
JP2024036617A (ja) | 病原体検出方法およびキット | |
JP6778374B2 (ja) | 新規な陽性コントロール核酸を利用した、被検試料中の標的核酸の検出・定量法 | |
WO2018096496A1 (en) | A method, a kit and application thereof | |
JP2006075167A (ja) | ピロホスファターゼの添加を伴うリアルタイムpcr | |
TW202202628A (zh) | 新型冠狀病毒的檢測方法和檢測試劑 | |
WO2023176026A1 (ja) | 検査方法および検査キット | |
CN117448447B (zh) | Itpkc基因检测引物探针组合、试剂盒及其应用 | |
US20240124947A1 (en) | Compositions for coronavirus detection and methods of making and using therof | |
CN110042152B (zh) | Pcr反应增强剂组合物、微滴式数字pcr反应液及其应用 | |
JP2019129798A (ja) | 加熱サンプルを用いたより迅速で効率的な等温増幅反応 | |
JP2006523455A (ja) | ポリメラーゼ反応および放出されたピロリン酸の酵素的検出による標的核酸の検出 | |
US20050100889A1 (en) | Oligonucleotides and methods for detecting hepatitis C viral nucleic acids | |
WO2024047160A1 (en) | Freeze dried nucleic acid amplification mixture | |
AU2022304654A1 (en) | Enzyme formulations and reaction mixtures for nucleic acid amplification | |
JP2022531348A (ja) | 鎖分離温度に基づくDNAに対してRNA標的の優先的/選択的増幅のためのdITPの利用 | |
CN117448446A (zh) | Fcgr2a基因检测引物探针组合、试剂盒及其应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20081015 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20110517 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20110809 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20110816 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110908 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20111011 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20111026 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20141104 Year of fee payment: 3 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |